注射剂的灭菌与无菌技术.
注射剂的灭菌与无菌技术
一、概述
1.灭菌法：是指用热力或其他适宜方法将物质中的微生物杀灭或除去的方法。灭菌是生产灭菌制剂的重要过程之一。
2.灭菌标准：微生物包括细菌（致病与非致病菌）、真菌、病毒，这些微生物无所不在，且繁殖速度惊人。其中细菌的芽胞具有较强的抗热性，不易杀死，因此灭菌效果以杀死芽胞为灭菌标准。
3.注意区分灭菌、防腐、消毒、概念的区别。
（1）灭菌：是制用物理或化学方法将所有致病或非致病的微生物以及细菌的芽孢全部杀灭。
（2）防腐：是指用低温或化学药品防止和抑制微生物生长和繁殖。
（3）消毒：是指用物理和化学的方法将病原微生物杀死。
4.灭菌方法可分为：
（1）物理法
a.干热灭菌法
c.射线灭菌法
d.滤过灭菌法
（2）化学灭菌法（环境灭菌）
a.化学气体灭菌法
b.化学药剂灭菌法
（3）无菌操作法
灭菌方法的选择：根据灭菌的要求及制剂的稳定性两个方面来选择。
二、物理灭菌法
（一）湿热灭菌法
本方法特点：由于蒸气潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，灭菌效率高。
1.热压灭菌法：是用大于常压的饱和水蒸汽加热杀灭微生物的方法，是最可靠的灭菌方法。
（1）常用的几个压力与温度及时间的对应关系
115℃～67 kpa～30min
121℃～97 kpa～20min
126℃～139 kpa～15min
（2）灭菌设备-灭菌柜操作注意事项
A.必须使用饱和蒸气
B.必须将柜内空气排净
C.压力回零后再开启柜门，防止带压操作
D.防止过早全部开启柜门造成骤然降温，瓶子破裂
（3）影响灭菌效果因素
A.细菌的种类与数量
B.药物性质与灭菌时间
C.蒸气的性质
D.介质的性质
2.流通蒸气灭菌法：指在常压下100℃流通蒸汽加热杀灭微生物的方法。杀灭时间为：30～60min。
特点：
1）适用于对热不稳定的药品
2）不能杀灭所有细菌
3）需加入抑菌剂或避菌操作、无菌操作
3.煮沸灭菌法：把灭菌物品放入沸水中加热灭菌的方法。灭菌时间为：30～60min。灭菌效果差。
4.低温间歇灭菌法：
作法：
a.温度60～80℃1hr灭菌
b.室温或37℃下放置24hr，再进行上述条件下的灭菌
c.反复操作3～5次
（二）干热灭菌法
干热灭菌法分为：火焰灭菌法、干热空气灭菌法※
1.细菌对热敏感性：杀灭繁殖型细菌需100℃、干热1hr杀死；芽胞菌：按药典规定：160℃～170℃需2hr以上、170℃～180℃需1hr以上、250℃需45 min。
2.热原：需经250℃，30 min 、200℃以上45 min才能破坏、破坏大肠杆菌内毒素，250℃时F值为750分。
方法适用性：适用于耐高温的玻璃、金属器皿以及不允许湿气穿透的油脂类、耐高温的固体粉末药物。
存在问题：穿透力差，温度不均匀，橡胶及塑料不适用。
（三）射线灭菌法
包括辐射灭菌法、紫外线灭菌法和微波灭菌法
1.辐射灭菌法如Co60或Cs137γ射线杀菌
特点：不升高灭菌产品的温度，穿透性强。
适用范围：
1）不耐热但对光稳定的药品如：维生素、抗生素、激素、重要制剂、医疗器械、高分子材料等。
2）包装材料、器具、机械等
2.紫外线灭菌法
灭菌最强的波长：254nm
适用范围：空气、表面-即环境灭菌或器具灭菌
3.微波灭菌法
作用原理：利用微波产生的热杀灭微生物
（四）过滤除菌法
是一种机械除菌方法。适用于对热不稳定的药物。
三、F与F0值
灭菌过程中存在的问题：
1）灭菌温度测量的不是被灭菌物体内部的温度
2）现行的菌检方法难以检出极微量微生物
因此对现行的灭菌方法进行可靠性验证，F与F0可作为法可靠性参数。
（一）D值与Z值
1.微生物致死时间曲线与D值
D定义：在一定温度下杀死被灭菌体系中90%的微生物所需的时间：D=t=2.303/k
D = f（x）（T、介质、菌的类别等）
2.Z值
Z值为灭菌温度系数，系指某一微生物的D值，下降一个对数单位，所需升高温度的度数。也就是灭菌时间减到原来的1/10，所需升高温度的度数，通常为10℃。
Z值在一定的温度范围内（100℃～138℃）lgD与T之间呈线性关系，即
Z =（T2-T1）/（lgD1-lgD2 ）或D1/D2 = 10（T2-T1）/Z
设：Z = 10℃，T1 = 110℃，T2 = 121℃，则：D1/D2 = 1011/10
即D1/D2 = 12.59所以D2= 0.079 D1
上式物理意义为：110℃灭菌10分钟与121℃灭菌0.79分钟的效果相同。
也即，当Z=10℃时，温度每升高1℃，灭菌效率提高21%
（二）F值与F0
1.F
F = Δt ∑10（T－T0）/ Z
Δt：测量温度的间隔时间（一般为0.5～1分钟）
T：每个时间间隔灭菌温度（用热电偶插入灭菌溶液中测定）
T0：参比温度（热压灭菌时为121℃，干热灭菌时为170℃）
F值定义：为干热灭菌过程的可靠性参数。即F为一定温度（T）、Z值为10℃所产生的灭菌效果与170℃灭菌效果相同时，所相当的时间。
2.F0值
F0 = Δt ∑10（T-T0）/Z
F0：为热压灭菌过程的可靠性参数。F0为一定温度（T）、Z值为10℃所产生的灭菌效果与121℃灭菌效果相同时所相当的时间。
即把所有温度下的灭菌效果都转化成121℃下灭菌的等效值。因此F0为标准灭菌时间（分钟），F0仅限于热压灭菌。
F0具有时间物理量的量纲，并不是真正意义上的时间。
3.影响F0因素
（1）容器大小、形状、热穿透系数
（2）灭菌产品溶液的黏度、容器填充量
（3）药品的染菌程度与产品排列方式
4.生物F0
生物F0值等于D121值与微生物数量的对数降低值的乘积。说明微生物的F0 由D121和微生物的初始数及残留数所决定。
由F0= D121（lg N0-lgNt）可知：①N0↑，F0↑，即灭菌t↑，所以应尽量避菌操作；②应考虑安全因素，一般增加50%。
例：F0 = 2.4（lg 200－lg10 -6）= 19.92分
四、化学灭菌法
化学灭菌法是指用化学药品直接作用于微生物而将其杀死的方法。化学杀菌剂不能杀死细菌芽胞，仅对繁殖体有效。因此化学杀菌的目的在于减少微生物数目，以控制无菌状态至一定水平。
1.气体杀菌法：环氧乙烷、甲醛、丙二醇、甘油与过氧乙酸的蒸气。
2.药液法：苯扎溴铵、酚或煤酚皂溶液、75%的乙醇等。
五、无菌操作法和无菌检查方法
是把整个过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法。无菌操作所用的一切用具、材料及环境均按前述的灭菌法灭菌,操作须在无菌操作室或无菌柜内进行。
1.灭菌操作室的灭菌：
2.无菌操作：安瓿150℃～180℃，2～3小时干热灭菌；橡皮塞121℃，1小时热压
灭菌等。
六、无菌检查法
灭菌与无菌制剂
内容摘要 第一节概述 第二节注射剂 第三节注射剂的制备 第四节输液 第五节注射用无菌粉末 第六节眼用制剂 第七节其他灭菌与无菌制剂 第一节概述 ?灭菌与无菌制剂主要是指直接注入体内或直接接触创伤面、粘膜等的一类制剂。由于这类制剂直接作用于人体血液系统，在使用前必须保证处于无菌状态，因此，生产和贮存该类制剂时，对设备、人员及环境有特殊要求。 1．灭菌和灭菌法 ●灭菌(sterilization)：用物理或化学等方法杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖 体和芽胞的手段(过程)。 ●灭菌法(the technique of sterilization)：杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体 和芽胞的方法或技术。 2．无菌和无菌操作法 ●无菌(sterility)：在任一指定物体、介质或环境中，不得存在任何活的微生物。 ●无菌操作法(aseptic technique)：在整个操作过程中利用或控制一定条件，使产品 避免被微生物污染的一种操作方法或技术。 3．防腐和消毒 ●防腐(antisepsis)：用物理或化学方法抑制微生物的生长与繁殖的手段，亦称抑菌。 对微生物的生长与繁殖具有抑制作用的物质称抑菌剂或防腐剂。 ●消毒(disinfection)：用物理或化学方法杀灭或除去病原微生物的手段。对病原微生 物具有杀灭或除去作用的物质称消毒剂。 一、灭菌制剂与无菌制剂的定义与分类 ●《中国药典》对不同给药途径的药物制剂大体分为：规定无菌制剂和非规定无菌制 剂(即限菌制剂)。 ●限菌制剂：允许一定限量的微生物存在，但不得有规定控制菌存在的药物制剂；如 口服制剂不得含大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等有害菌。 1．定义 ●根据药物制剂除去活微生物的制备工艺，将无菌制剂分为灭菌制剂与无菌制剂。 ?灭菌制剂：采用某一物理、化学方法杀灭或除去所有活的微生物繁殖体和芽胞的一类药物制剂。 ?无菌制剂：采用某一无菌操作方法或技术制备的不含任何活的微生物繁殖体和芽胞的一类药物制剂。 2．种类 ●药物制剂中规定灭菌或无菌制剂包括： ?注射用制剂：注射剂、输液、注射粉针等； ?眼用制剂：滴眼剂、眼用膜剂、眼用软膏剂和凝胶剂等； ?植入型制剂：植入片等； ?创面用制剂：溃疡、烧伤及外伤用溶液、软膏剂和气雾剂等； ?手术用制剂：止血海绵剂和骨蜡等。
无菌技术的概念和原则
无菌技术 无菌技术的概念与原则 无菌技术就是医疗护理操作中防止发生感染与交又感染的一项重要的基本操作,广泛应用于医疗护理实践中。如注射、导尿、穿刺、手术时,必须严格执行无菌技术,以防微生物侵入机体,引起交叉感染。无菌技术的操作规程就是根据科学原则制定的,每个医务人员必须速守,以保证患者的安全。 一、无菌技术的概念 1、无菌技术就是指在执行医疗护理操作的过程中,使已灭菌的物品不被污染,保持无菌,以防微生物侵入机体的操作技术。 2、无菌物品就是指经过灭菌处理后未被污染的物品。 3、无菌区域就是指在进行无菌操作时,为放置无菌物品而准备的区域。 二、无菌技术操作原则 1、在进行无菌操作前,操作者要戴好帽子、口罩并洗手。 2、在进行无菌操作时,环境要保持清洁。 3、无菌物品与非无菌物品应分开放置;无菌物品不可暴露在空气中,必须存放于无菌容器或无菌包内;无菌物品使用后,必须重新灭菌后方可再用;无菌物品一旦从无菌容器或包内取出,即使未使用,也不可再放回。 4、无菌包外应注明物品的名称、灭菌日期,并按灭菌日期先后顺序存放与使用。无菌包应放置在清洁、干燥、固定的地方,在未被污染的情况下可保存7-14天,过期或包布受潮应重新灭菌。 5、夹取无菌物品,必须使用无菌持物钳(镊)。未经消毒的手臂及用物
不可跨过无菌区。 6、无菌操作中,无菌物品被污染或疑有污染,不可再用,应予更换或重新灭菌。 7、一份无菌物品,只能供一位患者使用一次,以防止交叉感染。 无菌技术操作流程: 1、选择清洁、干燥、宽阔的场所进行操作。 2、解开无菌包系带卷放在包布下边。 3、用拇指与食指先揭左右两角,最后揭开内角,注意手不可触及包布的内面。用无菌钳(镊)取出一块无菌巾放于治疗盘内,剩余部分按原折痕包起扎好,并注明开包时间。 4、铺无菌盘: 单巾铺盘:双手拇、食指捏住治疗巾两上角外面,轻轻抖开,双折铺于治疗盘上,内面为无菌区,盖的半幅成扇形折到对面无菌盘上,开口边向外,放入无菌物品后,边缘对齐盖好。将开口处向上翻折两次,两侧边缘向下翻一次,以保持无菌。 双巾铺盘:双手捏住无菌巾的左右两上角的外面,轻轻抖开,由远向近铺于治疗盘上,无菌面向上,放入无菌物品。依上法夹取另一块无菌巾,由近侧向对侧覆盖于治疗盘内上,边缘多余部分反折,不应暴露无菌区。 5、打开无菌容器盖,必须把盖的无菌面(内面)向上,放在稳妥处,夹取所需物品放入无菌盘内后立即盖严。
可灭菌与非最终灭菌分类指导原则
的，且抽检样品的数量有限，故抽检的结果不能真实代表整批产品的无菌状态。国际上更为注重无菌保证工艺的设计是否合理、所用的设备与工艺是否经过充分的验证，在此基础上，切实按照验证后的工艺进行生产，这样才能保证灭菌（无菌）工艺的可靠性。 在业界，常用“无菌保证水平”（Sterility Assurance Level,SAL）概念来评价灭菌（无菌）工艺的效果，SAL的定义为产品经灭菌/除菌后微生物残存的概率。该值越小，表明产品中微生物存在的概率越小。为了保证注射剂的无菌安全性，国际上一致规定，采用湿热灭菌法的SAL不得大于10-6，即灭菌后微生物存活的概率不得大于百万分之一；而采用无菌生产工艺的产品，其SAL一般只能达到10-3，故仅限于临床必需注射给药而确实无法耐受终端灭菌的产品。无菌生产工艺只适用于粉针剂或部分小容量注射剂。 一、注射剂剂型选择的原则 注射剂包括大容量注射剂（50ml以上）、小容量注射剂（20ml以下）以及粉针剂三种剂型。不同的剂型所采用的灭菌工艺可能不同，进而会影响产品的SAL，因此在评价无菌保证工艺时，需首先评价剂型选择的合理性。 在遵循剂型选择一般原则的基础上，从无菌保证水平的角度考虑，注射剂剂型选择的一般原则如下：
1．首先要考虑被选剂型可采用的灭菌工艺的无菌保证水平的高低。原则上首选剂型应能采用终端灭菌工艺（F0≥8），以保证SAL≤10-6。 2．对于有充分的依据证明不适宜采用终端灭菌工艺（F0≥8）且临床必需注射给药的品种，可考虑选择采用无菌生产工艺的剂型。通常无菌生产工艺仅限于粉针剂或部分小容量注射剂。 3．注射剂中大容量注射剂、小容量注射剂和粉针剂之间的互改，如无充分的依据，所改剂型的无菌保证水平不得低于原剂型。 二、无菌保证工艺的技术要求 1．大容量注射剂 （1）应采取终端灭菌工艺，建议首选过度杀灭法（F0≥12），如产品不能耐受过度杀灭的条件，可考虑采用残存概率法(8≤F0<12)，但均应保证产品灭菌后的SAL不大于10-6。采用其它F0值小于8的终端灭菌条件的工艺，原则上不予认可。 （2）如产品不能耐受终端灭菌工艺条件，应尽量优化处方工艺，以改善制剂的耐热性。如确实无法耐受，则应考虑
最终灭菌小容量注射剂通常工艺处理制度
最终灭菌小容量注射剂通用 工 艺 规 程
###动物药业有限公司GMP管理文件 一、目的：建立最终灭菌小容量注射剂通用工艺规程，保证产品生产工艺符合《兽药生产质量管理规范》的要求，产品质量符合产品法定质量标准的规定。 二、适用范围：适用于最终灭菌小容量注射剂通用生产工艺管理。 三、责任者：技术部负责人、生产部负责人、质管部负责人、车间主任、QC检验员、QA检查员。 四、内容目录： 一、产品简介 (3) 二、工艺流程及环境区域划分 (3) 三、处方和依据 (4) 四、操作过程及工艺条件 (5) 五、设备一览表及主要设备生产能力 (11) 六、技术安全、劳动保护及卫生要求 (14) 七、包装要求、标签说明书管理与产品贮存方法 (16) 八、劳动组织与定岗定员 (18) 九、产品质量标准 (19) 十、各工序质量控制要点和检查方法 (19)
十一、消耗定额、技术经济指标、物料平衡以及各项指标的计算方法 (24) 十二、产品相关验证的具体要求 (25) 十三、主要标准操作规程（SOP）名称及要求 (28) 十四、附录（常见理化常数、曲线、图表、计算公式及换算表等） (36) 十五、附页（变更记录） (38)
一、产品简介 包括产品名称（通用名、商品名）、批准文号、剂型、规格和包装等，这些都必须以国家法定质量标准或国家兽药行政管理部门所批准的为准。 二、工艺流程及环境区域划分
100000级区10000级区 三、处方和依据 1 处方：根据具体产品处方而定，详见产品工艺规程。 2 依据：根据具体产品执行标准而定，详见产品工艺规程。
消毒隔离无菌技术操作知识考试题(1)-护士考试试题
消毒隔离无菌技术操作知识考试题(1)-护士考试试题 一、单选题：（选项上打钩）每题2分 1.在医疗诊治活动中高度危险性物品，必须选用什么处理方法？B A消毒法B灭菌法C一般消毒D清洗处置 2.进入组织或器官内部的器械，或与破损的组织、皮肤、黏膜密切接触的器材和用品的危险性分类是：A A高度危险性物品B中度危险性物品C低度危险性物品D无危险性物品 3.微生物对消毒因子的抗力从高到低的顺序是B A细菌芽孢、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌孢子、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒、B.细菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒 C细菌芽孢、分枝杆菌、真菌孢子、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒 D真菌孢子、细菌芽孢、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒 4.医疗器械用下排气式压力蒸汽灭菌，一般需要维持的温度和时间分别是C A.115℃，15—30min B.121℃，10—15min C.121℃，15—30min D.115℃，20—30min 5.用下排气式压力蒸汽灭菌器灭菌时，物品包体积不得超过厘米×厘米×厘米D A.25×30×25 B.30×30×20 C.30×30×30 D.30×30×25 6.压力蒸汽灭菌物品存放时间CA.7天B.16天C.10—14天D.10小时 7.紫外线消毒的目标微生物不详时，照射计量不应低于D A.10000μW*S/cm2 B.600000μW*S/cm2C60000μW*S/cm2D.100000μW*S/cm2 8.紫外线灯每立方米需要CA.10.5WB.15WC.1.5WD0.5W 9.2%戊二醛对医疗器械浸泡消毒和灭菌的时间分别是A A.20分钟达消毒要求，10小时达灭菌要求 B.15分钟达消毒要求，4小时达灭菌要求 C.45分钟达消毒要求，9小时达灭菌要求 D.15分钟达消毒要求，8小时达灭菌要求 10.用碘伏对细菌繁殖体污染物品的消毒的浓度和时间分别是C A.250mg/L，20min B.50mg/L，40min C.500mg/L，30min D.200mg/L，15min
灭菌、无菌操作技术
成绩：日期：2015年12月18日南京林业大学实验报告 专业学号姓名 实验二、灭菌、无菌操作技术 一．实验目的： 1、了解并掌握植物材料的准备、消毒。 2、培养基配制及器皿高温灭菌。 3、无菌操作及接种的原理和技术。 二、实验原理 植物组织培养必须在无菌环境中进行，因此外植体、器皿及作为外植体生长介质的培养基的灭菌操作非常重要，一旦污染，就会造成组织培养的失败。野外植物材料都有各种菌类，进行离体培养前需经过表面消毒灭菌；培养基封装封口后应立即灭菌，至少应在24小时内完成灭菌程序。 三、材料与仪器 1、材料：喜树带芽茎段 2、仪器设备：高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。 四、实验步骤 1）培养基的消毒将分装好的培养基放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右，灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷却凝固。 2）高压蒸汽灭菌锅的使用方法 （1）高压锅放水至平把架；（2）把包扎好的培养基装入高压锅；（3）盖上热压锅盖,上紧螺帽(注意对角拧紧螺帽)关上气阀和安全阀；（4）然后接通电源；（5）压力计升至0.05MPa时，打开放气阀,排除冷空气(此步很重要)；（6）排除冷空气后,关闭放气阀，待压力升到0.11MPa位置时，开始计算灭菌时间，具体方法：当压力锅指针升至0.12MPa时，关闭电源，待指针下降至0.11MPa时接通电源，不断重复此操作过程，维持20分钟；（7）灭菌时间达到20分钟后，除去电源，打开放气阀(注意要逐渐放气)待高压锅内的空气完全排除后，打开热压灭菌锅盖(注意对角扭松螺帽)稍待冷后再把培养基取出；（8）经过灭菌的营养培养基不宜放置太长，应尽早使用，但为了在使用前能检查培养基有无微生物污染，可将培养基置于25℃下保存4天，如果培养基需要贮存较长时间，可在4℃低温下保存。 3）植物材料表面 清理材料→→流水冲洗→→加入吐温（或洗衣粉）清洗→→自来水冲洗 4）喜树外植体的接种 1、准备打开超净工作台，将镊子酒精灯放如超净工作台中，用紫外灯照20min 后关闭紫外灯，同时将豌豆种子用自来水冲20min关闭紫外灯后在台上点燃 2 个酒精灯，用棉球将镊子烧4次，超净作台少2次。将喜树、大烧杯等放入超净工作台。 2、接种将所要用的三角瓶用75％的酒精喷湿，接着把手喷湿并把三角瓶带入超净工作台。接着将灭菌处理好的喜树在超净工作台上用镊子靠近酒精灯的外焰放入向下倾斜的锥形瓶杯中，直到接种完毕盖上棉塞，贴上标签，放入培养室。
注射剂无菌保证工艺介绍
注射剂无菌保证工艺介绍 注射剂无菌保证工艺是指为实现规定的无菌保证水平所采取的经过充分验证后的灭菌（无菌）生产工艺。在工业上，无菌保证工艺可分为两类：最终灭菌工艺（terminal sterilization process）和无菌生产工艺（aseptic processing）。 最终灭菌工艺：在控制微生物污染量的基础上将完成最终密封的产品进行适当灭菌的工艺。一般来说，本方法成本低，无菌保证水平（SAL，Sterility Assurance Level）≤10-6。 无菌生产工艺：在无菌系统环境下通过无菌操作生产无菌产品的方法，以防止污染为目的，消除可能导致污染的各种可能性来保证无菌水平。目前WHO和欧盟执行的标准是95％可信限度下微生物残存概率不超过0.1％，大概相当于3000瓶产品中不得有1瓶染菌的水平。本方法对环境系统的要求高，产品存在微生物污染的概率远远高于终端灭菌无菌药品。 1基本原则 1.1注射剂剂型选择的原则 在遵循剂型选择一般原则的基础上，从无菌保证水平的角度考虑，注射剂剂型选择的一般原则如下： A．首先要考虑被选剂型可采用的灭菌工艺的无菌保证水平的高低。原则上首选剂型应能采用最终灭菌工艺（F0≥8），以保证SAL≤10-6。 B．对有充分的依据证明不适宜采用终端灭菌工艺（F0≥8）且临床必须注射给药的品种，可考虑选择采用无菌生产工艺的剂型。通常无菌生产工艺仅限于粉针剂或部分小容量注射剂。 C.注射剂中大容量注射剂、小容量注射剂和粉针剂之间的互改，如无充分的依据，所改剂型的无菌保证水平不得低于原剂型。 1.2无菌工艺的选择原则 无菌保证工艺选择原则是：应优先选择无菌保证水平高的最终灭菌工艺，只有在充分的工艺研究证明产品无法耐受各种最终灭菌工艺的前提下，才选择非最
消毒隔离原则
(1)医院消毒隔离基本原则 凡是受体内物质污染的物品，都应按有传染可能对待，不论是再使用还是放弃，都必须先消毒后处理，以防污染面扩大造成医院感染。 1、工作人员上班时衣帽整洁，操作前后洗手，无菌操作时戴口罩，并严格遵守无菌操作规程。 2、医护、医技和清洁卫生工作人员不得穿工作服进食堂、营养室或上街等公共场所。 3、保持室内环境清洁卫生，治疗室、换药室等空气消毒每日2次，采用通风或紫外线照射，地面、桌椅、门把、诊察床等，每日清擦或消毒，遇特殊污染应及时消毒。 4、进入人体组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品，必须达到无菌，各种注射、穿刺、采血等器具必须达到灭菌。 5、医院采购和使用的消毒药械，厂家必须具有卫生许可证和消毒灭菌合格证。 6、一次性使用的医疗卫生用品，根据其用途，应达到无菌或消毒，并有标记，进货时检查其包装，应是完整、无污染，明示厂名、产品批号、灭菌或消毒方法、灭菌或消毒日期和有效期。 7、手术室、产房、母婴同室、换药室、重症监护室、新生儿室、血库、供应室及各病区治疗室等必须设有紫外线灯消毒空气，每日消毒2次，并每月进行空气培养。 8、紫外线消毒灯辐射强度不得<70uw/cm2，每次照射时间为30~60分钟，保持灯管表面清洁，每周用 95%酒精纱布擦拭1次，平时发现表面有灰尘、油污时随时擦拭。 9、抽血使用一次性注射器，抽血、静脉点滴等严格执行一人一针一带一巾，用后集中无害化处理，病人使用后的止血棉球，应集中回收后焚烧，防止随意丢弃而污染环境。
10、输血、输液，除抢救或手术等特殊情况外，均用密闭式。 11、各种导管应一人一管一消毒，长期使用者应定期消毒。 12、各种引流管、引流瓶、气管插管、牙垫麻醉机螺旋管、呼气囊、舌钳、开口器、氧气鼻管及连接管、雾化吸入螺纹管及面罩等用后先经消毒液浸泡消毒后清洗、应采用高效消毒剂消毒或灭菌处理。 13、无菌镊子筒必须灭菌处理后才可使用，一般每周更换1~2次（消毒液同时更换），干燥使用的无菌持物钳筒每4小时更换一次（无菌状态下）。门诊换药室、注射室、口腔门诊等使用数较多，应每天或隔天更换。浸泡液面为容器的2/3，容器高度应为镊子的3 / 5左右，一筒一件。 14、无菌器械保存液必须保持无菌。 15、一次性静脉注射针头应穿刺一次换一次，不宜反复穿刺。 16、针灸针严格执行一人一针一穴，使用后先灭菌处理，后修整，再灭菌后备用。治疗过程中防止针具再污染。 17、血压机、听诊器、手电筒等诊疗器械应定期消毒。 18、压舌板使用后应先消毒后清洗，再灭菌备用。最好使用一次性压舌板。 19、体温表每次使用后必须经消毒液浸泡后取出擦干备用，消毒液每日更换（含氯消毒液），保持有效浓度。 20、凡用口杯的科室均使用一次性口杯。 21、无菌溶液或无菌包（容器）开启后应立即使用，特殊情况需继续使用时，应标明开启时间，保存时间应<24小时。 22、凡存放药品用的冰箱，应物品放置有序，每月清洁一次，保持清洁整齐。不可存放私人物品。
微生物实验操作基础——灭菌及无菌操作
实验十二微生物实验操作基础——灭菌及无菌操作 一、目的要求 学习灭菌的方式方法，区别几种灭菌方式的相同点和不同点。掌握实验室无菌操作的操作方法和注意事项，体会无菌操作技术在微生物研究中的重要性。 二、知识介绍 灭菌技术sterilization 为什么要灭菌？（杂菌污染的后果） 1.营养基质或产物被消耗损失； 2.抑制生产菌的生长； 3.抑制产物的生物合成； 4.杂菌繁殖导致培养液性质（如pH）改变，造成生物反应异常。 灭菌原理与方法 灭菌(sterilization）是指利用物理或化学方法，杀灭或去除物料或设备中所有微生物的技术或工艺过程。灭菌方法有化学物质灭菌、辐射灭菌、过滤介质除菌和热灭菌等。 （一）、化学物质灭菌 通过改变微生物细胞膜的渗透性，或者损伤细胞膜，影响微生物细胞的正常代谢。不适合于培养基的灭菌，只适合于局部空间或某些器械的消毒。 1.无机酸、碱及盐类 酸碱的杀菌能力主要由其电离度而定，电离出得氢离子或氢氧根离子浓度越高，杀菌力越强。 盐溶液的杀菌力与其浓度成正比。 （腌咸菜可以保藏很长时间而不染菌） 2.重金属盐
杀菌原理是重金属盐使细胞中蛋白质失活。 比如升汞。 服食牛奶、 鸡蛋等高蛋白含量食物可解毒。 3.氧化剂 高锰酸钾 4.有机化合物 乙醇：脱水、使蛋白质变性和沉淀，70~75%最有效。 (二)、辐射灭菌 1.紫外线：诱导胸腺嘧啶二聚体的形成，从而抑制了DNA的复制；空气在紫外线照射下产生臭氧，臭氧也具有一定的杀菌作用。 2.X射线、γ射线：能量极高，被菌体吸收后，菌体内的水和有机物产生强烈的离子化反应，形成OH-、过氧化氢和有机过氧化物，这些过氧化物阻碍微生物的代谢活动而导致菌体迅速死亡。 （三）、过滤介质除菌 工业上利用过滤的方法制备大量的无菌空气，供好氧微生物的深层培养使用。 （四）、干热灭菌 1.火焰灼烧法 2.干热空气灭菌法：140~160℃维持2~3h。 （五）、湿热灭菌 湿热灭菌条件为121℃维持20~30min。 巴氏杀菌（Pasteurization）低温消毒法，主要应用于生产酸奶乳制品。目前国际上通用的巴氏高温消毒法主要有两种： 1.一种是将牛奶加热到62~65℃，保持30分钟。采用这一方法，可杀死牛奶中各种生长型致病菌，灭菌效率可达97.3%~99.9%，经消毒后残留的只是部分嗜热菌及耐热性菌以及芽孢等，但这些细菌多数是乳酸菌，乳酸菌不但对人无害反而有益健康。 第二种方法将牛奶加热到75~90℃，保温15~16秒，其杀菌时间更短，工作效率更高。但杀菌 的基本原则是，能将病原菌杀死即可，温度太高反而会有较多的营养损失。
消毒灭菌与无菌技术试题及答案
消毒隔离与无菌技术知识培训考试试卷 科别：姓名：日期：成绩：一、名词解释：（每题10分，共20分） 消毒： 灭菌： 二、填空题：（每空1分，共40分） 1．（）和（）是预防和控制医院感染两个基本的环节。医务人员必须遵守消毒灭菌原则，进入人体组织或无菌器官的医疗用品必须（），接触皮肤粘膜的医疗用品必须（）。 2. 手卫生指（）、（）、（）的总称。 3．抽出的注射药液须注明时间，超过（）不得使用 4．无菌包外须标明（）、（）、（）、（）、（）、（），（）按失效期先后顺序摆放。 5．中度危险性物品有（）、（）、（）、（）、（）等。 6．（）是预防和控制医院感染所有措施中最基本、最重要、最简单易行、最有效果的措施。也是医务人员个人防护的最基本措施。 7. 使用紫外线灯照射进行空气消毒，每天一次，每次（）分钟。紫外线灯每 周用（）擦拭一次，灯管表面有灰尘、油污时，应（）。记录 8.对病人床单位保洁实行（），病人出院、转科或死亡后，床单元必须按要 求进行（）。 9.无菌物品定点放置于清洁、干燥、离地面（）离墙（）离顶（） 以上的柜内，有合格标志及有效期，过期物品应重新灭菌。 10.无菌棉签开启需注明时间，使用时间不得超过（）。安尔碘开启需注明时间 用后拧紧瓶盖，时间不得超过（）。无菌盘须注明铺盘时间，超过（）不得使用。 11.抽出的注射药液须注明时间，超过（）不得使用；开启的各种溶媒（除静脉用药外）超过（）不得使用。 12. 医用物品对人体的危险性分类：（）（）（）、（） 13、.用含氯消毒剂对细菌繁殖体污染物品的消毒的浓度和时间分别（）（） 四、简答题（每题20分，共40分） 1.医疗废物的分类 2.发生锐器伤的处理流程： 消毒隔离与无菌技术知识培训考试试卷 科别：姓名：日期：成绩：三、名词解释：（每题10分，共20分） 消毒： 灭菌： 四、填空题：（每空1分，共40分） 1．消毒隔离和无菌操作是预防和控制医院感染两个基本的环节。医务人员必须遵守消毒灭菌原则，进入人体组织或无菌器官的医疗用品必须灭菌，接触皮肤粘膜的医疗 2. 手卫生指洗手、卫生手消毒、外科手消毒的总称。
最终灭菌注射剂GMP检查要点
最终灭菌注射剂GMP检查要点 一、无菌药品综述 无菌药品是指法定药品标准中列有无菌检查项目的制剂，包括大容量注射剂、小容量注射剂和其它无菌药品。 注射剂系指药物与适宜的溶剂或分散介质制成的供注入体内的溶液、乳状液或悬浮液及供临用前配制或稀释成溶液或悬浮液的粉末或浓溶液的无菌制剂。注射剂可分为注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。注射剂的给药途径可分为静脉注射、脊椎腔注射、肌肉注射、皮下注射和皮内注射等。 为了提高注射剂的有效性、安全性与稳定性，注射剂中除主药外还通常添加其他物质，这些物质统称为“附加剂”。常用的附加剂增溶剂、湿润剂或乳化剂、缓冲剂、混悬剂、稳定剂、抗氧剂、抑菌剂、止痛剂等。 为了确保用药安全，注射剂的质量必须符合要求，检查项目包括无菌试验、细菌内毒素或热原试验、不溶性颗粒、可见异物、装量、装量差异、理化指标等。 注射剂按灭菌方式可分为最终灭菌注射剂和非最终灭菌注射剂，最终灭菌注射剂通常具有一定耐热性，能通过热处理的方式去除制品中可能存在的微生物。保证最终灭菌注射剂的无菌性的主要措施是在生产过程中有效控制生物负荷，并对内包装完毕的制品进行最终灭菌。通常采用湿热灭菌。 最终灭菌的注射剂包括大容量注射剂、小容量注射剂等，其生产工艺流程通常包括配制（浓配、稀配）、过滤、灌封、灭菌、目检、贴签和外包装等工序。 我国注射剂GMP认证检查的法律法规主要有： 《中华人民共和国药品管理法》，自2001年12月1日起施行。 《中华人民共和国药品管理法实施条例》，自2002年9月15日起施行。 《药品注册管理办法》，2007年10月1日起施行。 《药品生产质量管理规范》，自1999年8月1日起施行。
消毒隔离无菌技术操作知识考试试题及答案一.
传染病及消毒隔离知识试卷 科别__________ 姓名_____________ 得分__________ 一、单选题:( 每题2分 1.在医疗诊治活动中高度危险性物品,必须选用什么处理方法?( A.消毒法 B.灭菌法 C.一般消毒 D.清洗处置 2.紫外线消毒对细菌最敏感的时期是:(
A.孕育期 B.生长期 C.稳定期 D.成熟期 3.紫外线消毒对细菌作用最强的是: ( A. 球菌 B. 杆菌 C.真菌 D.芽胞 4.医疗器械用下排气式压力蒸汽灭菌,一般需要维持的温度和时间分别是(
A.115℃,15—30min B.121℃,10—15 min C. 121℃,15—30min D. 115℃,20—30 min 5.对菌痢病人的粪便消毒处理时漂白粉与粪便的比例为: ( A. 1:2 B. 1:3 C. 1:4 D. 1:5
6.隔离病室常规消毒时间应是: ( A.每日一次 B.每周一次 C.每周二次 D.每二周一次 7.对于隔离区域的设置下列哪项是错误的: ( A.门口设洗手装置 B.病区要有多个出口 C.门口放干燥擦鞋垫 D.门外挂隔离衣
8.用0.2%过氧乙酸溶液刷手的时间是: ( A.2min B. 4min C. 6min D. 8min 9.为乙型肝炎出院病人进行终末处理时,操作不正确的是:( A.嘱病人洗澡,换清洁衣裤 B. 换下的衣服装好,便于带回清洗 C.病室地面用漂白粉液喷洒
D.病室用2%过氧乙酸溶液喷雾 10.用碘伏对细菌繁殖体污染物品的消毒的浓度和时间分别是( A.250mg/L,20min B. 50mg/L,40min C. 500mg/L,30min D. 200mg/L,15min 11、艾滋病的医学全名为( A. 免疫缺陷综合征 B. 获得性免疫缺陷综合征 C. 先天性免疫缺陷综合征
消毒隔离制度 (3)
消毒隔离管理小组职责 1、负责制定消毒隔离制度，认真贯彻实施国家消毒隔离相关法律法规、标准及规范。 2、定期组织对各类医护人员进行消毒、灭菌、无菌操作和隔离技术的培训考核工作；定期开展消毒与灭菌效果检测工作。 3、监督指导医护人员严格执行消毒、灭菌、无菌操作及隔离等技术操作规程。 4、监督医疗用品、医疗器械、一次性医疗用品、消毒产品等应符合国家消毒隔离相关法律法规、标准及规范要求。 5、对传染病患者、疑似传染病患者消毒隔离措施落实情况进行督导。 6、一旦发生医院感染暴发应迅速到达现场进行调查，分析原因，采取相应对策，指导消毒灭菌及隔离。 医院消毒隔离制度 1、医务人员工作时间应衣帽整洁，不带首饰，指甲不能超过指尖，穿工作服不得进入食堂、宿舍、会议室和医院以外的环境。进入手术室、重症监护室、新生儿室、介入中心等重点部门应按重点科室管理要求做好个人防护及要求更衣。 2、医务人员诊疗操作时严格遵守无菌操作原则，诊疗工作中应遵循《医院隔离技术规范》，按照标准预防的原则做好个人防护工作，严格执行手卫生。
3、地面、物体表面无明显污染时，采用湿式清洁。当其受到患者的血液、体液等污染时，先去除污染物，再清洁与消毒。 4、感染高风险的部门如手术室、产房、导管室（介入中心）、重症监护病房、新生儿室、血液透析病房、烧伤病房、感染疾病科、口腔科、检验科、急诊科等区域的地面与物体表面，应保持清洁、干燥，每天采用500mg/L有效含氯消毒液至少消毒1次，遇明显污染随时去污、清洁与消毒。 5、进入人体无菌组织、器官、腔隙，或接触人体破损皮肤、破损黏膜、组织的诊疗器械、器具和物品必须灭菌。接触完整皮肤、完整粘膜的诊疗器械、器具和物品必须消毒。 6、各种用于注射、穿刺、采血等有创操作的医疗器具必须应一用一灭菌。使用的消毒药械、一次性医疗器械和器具应当符合国家有关规定。一次性使用的医疗器械、器具不得重复使用。 7、可重复使用的诊疗器械、器具和物品应由消毒供应中心统一回收，清洗、消毒或灭菌；耐热、耐湿的手术器械，应首选压力蒸汽灭菌；不耐热、耐湿的物品，宜采用低温灭菌。 8、医务人员应掌握消毒剂的使用浓度、配制方法、消毒对象、更换时间、影响因素等，确保消毒效果的可靠。 9、普通病房首选自然通风，自然通风不良，宜采取机械通风；重点部门和感染高风险的部门应每日至少1次对室内进行空气消毒并记录。 10感染患者与非感染患者分开，同类感染患者相对集中，特殊感染患者单独安置。传染病（疑似）患者及其用物按传染病管理的有关规定，采
注射剂灭菌工艺研究的几点思考
发布日期20071116 栏目化药药物评价>>综合评价 标题注射剂灭菌工艺研究的几点思考 作者赵慧玲 部门 正文内容 审评四部七室赵慧玲 【摘要】本文总结了在审评过程中发现的灭菌工艺研究中存在的几个主要问 题，如处方研究前未了解药物的稳定特性，忽视了附加剂和灭菌工艺的筛选， 忽视了无菌保证值和F0值考察，以及工艺验证研究等，以供研发参考。 【关键词】注射剂；无菌保证值；F0值；灭菌工艺；灭菌工艺验证 笔者在审评过程中发现，部分注射剂在研究中由于忽视了药物的结构和稳定性、无菌保证值、以及忽视了灭菌工艺的筛选和优化，从而可能影响最 终产品的质量。这里想就遇到的几个主要问题进行讨论，供研究者参考。 1、充分了解药物的结构特性，增加药物的稳定性 注射剂中药物的化学稳定性以氧化变质为常见。如含羟基药物（肾上腺素、维生素C等）、芳胺类药物（磺胺类钠盐、盐酸普鲁卡因胺等）、吡 唑酮类药物（安乃近、氨基比林等）及氨基酸类药物等，在氧、金属离子、 光线与温度的影响下均易氧化变质。充分了解药物的结构有助于工艺中选用 恰当附加剂，以增加药物的稳定性。因此药物的稳定特性是可以通过制备过 程中采取一些相应的措施改变。 2、应重视附加剂的筛选 附加剂是为确保注射剂的稳定，除主药外，添加的以增加主药的溶解性和稳 定性以及减少对机体的刺激性等的物质的总称。种类包含较多。如在氧、金 属离子、光线与温度的影响下易氧化变质的药物，制备过程中常加入抗氧剂、
络合剂等。 2.1 抗氧剂 抗氧剂本身是还原剂，其氧化电势比药物低，因此当它同易氧化的药物共存时，药液中的氧可先和抗氧剂发生作用，从而使药物保持稳定。 水溶性抗氧剂以焦亚硫酸盐（钠或钾）、亚硫酸盐应用较多。通常注射液pH值低时选用焦亚硫酸盐，中等pH值时选用亚硫酸氢盐，pH值高时选用亚硫酸盐较好。它们的抗氧作用是靠二氧化硫，所以用量以SO2计不超过0.2%。 脂溶性抗氧剂常用叔丁基对羟基茴香醚（BHA，0.02%）、二叔丁对甲酚（BHT，0.02%）、生育酚（0.01%-0.1%）、抗坏血酸等。 各国药典对注射剂的附加剂的类型和用量亦有差异。从安全性考虑，审评认为附加剂的用量越少越好。 2.2 金属络合剂 许多药物如维生素C、肾上腺素、普鲁卡因等的氧化降解，可被微量金属离子（如铜、铁、锌）催化加速。这些金属离子来源于原辅料、溶媒、容器以及制造过程中接触的金属设备等。因此在制备这些药物的注射剂时，必须严格控制金属离子的污染，可考虑采用金属络合剂络合，以降低其催化作用，从而提高药物的稳定性。常用的络合剂是EDTA钠盐，常用剂量为 0.01%-0.05%。 2.3 惰性气体 对氧敏感的药物，在与空气中的氧或溶解在药液中的氧接触时，容易发生氧化变质。生产中常用高纯度的惰性气体N2、CO2来取代药液和容器内的空气。如氨基酸注射液可以在配制过程中控制溶剂氧含量和灌装过程控制顶空氧含量可增加主成分的稳定性，使灭菌工艺可达到残存概率法（F0≥8－12）要求。 3、灭菌工艺的筛选 注射剂的灭菌要求是：既能杀灭微生物，以保证用药的安全性，又要避免药物降解，以免影响药效和安全性。温度高灭菌时间长，容易将微生物杀灭，但不利于药物的稳定。因此在选择灭菌方法时，必须兼顾产品的保证无菌、药物又保持稳定这两个方面。根据具体的品种的性质，来确定具体的灭菌方法和时间。通常热压灭菌可按灭菌效果F0值大于8的残存概率法进行，为保证无菌，实际操作F0值达到12时灭菌（过度杀灭）较可靠。而流通
消毒灭菌与无菌技术试题及答案
消毒隔离与无菌技术知识培训考试试卷 科别: 姓名: 日期: 成绩: 一、名词解释:( 每题10分,共20分) 消毒: 灭菌: 二、填空题:( 每空1分,共40分) １.( )与( )就是预防与控制医院感染两个基本得环节、医务人员必须遵守消毒灭菌原则,进入人体组织或无菌器官得医疗用品必须( ),接触皮肤粘膜得医疗用品必须( )。 2。手卫生指( )、( )、( )得总称。 ３、抽出得注射药液须注明时间,超过( ) 不得使用 4、无菌包外须标明( ) 、( )、( )、( )、 ( )、( ) ,( )按失效期先后顺序摆放。 5.中度危险性物品有( )、( )、( )、( )、( )等。 6。( )就是预防与控制医院感染所有措施中最基本、最重要、最简单易行、最有效果得措施。也就是医务人员个人防护得最基本措施、 7。使用紫外线灯照射进行空气消毒,每天一次,每次( )分钟。紫外线灯每周用( )擦拭一次,灯管表面有灰尘、油污时,应( )、记录 8。对病人床单位保洁实行( ),病人出院、转科或死亡后,床单元必须按要求进行( )。 9。无菌物品定点放置于清洁、干燥、离地面( )离墙( )离顶( )以上得柜内,有合格标志及有效期,过期物品应重新灭菌。 10. 无菌棉签开启需注明时间,使用时间不得超过( )。安尔碘开启需注明时间用 后拧紧瓶盖,时间不得超过( )。无菌盘须注明铺盘时间,超过( )不得使用。 １1。抽出得注射药液须注明时间,超过( )不得使用;开启得各种溶媒(除静脉用药外)超过( )不得使用。 12、医用物品对人体得危险性分类:( ) ( )( )、( ) 13、。用含氯消毒剂对细菌繁殖体污染物品得消毒得浓度与时间分别( )( ) 四、简答题( 每题2０分,共４０分) 1.医疗废物得分类 2、发生锐器伤得处理流程: 消毒隔离与无菌技术知识培训考试试卷 科别: 姓名: 日期: 成绩: 三、名词解释:( 每题10分,共２０分) 消毒: 灭菌: 四、填空题:( 每空1分,共40分) １消毒隔离与无菌操作就是预防与控制医院感染两个基本得环节、医务人员必须遵守消毒灭菌原则,进入人体组织或无菌器官得医疗用品必须灭菌,接触皮肤粘膜得医疗 2. 手卫生指洗手、卫生手消毒、外科手消毒得总称。 3.抽出得注射药液须注明时间,超过2小时不得使用
注射剂灭菌工艺及输液剂灭菌需关注的问题
注射剂灭菌工艺及输液剂灭菌需关注的问题 审评四部张玉琥高青 20050628 摘要灭菌是注射剂制备工艺的重要步骤。本文对注射剂灭菌工艺涉及的无菌保证水平、常用灭菌方法以及灭菌工艺验证等进行了简要介绍，并对输液剂灭菌需特殊关注的问题进行了讨论。 关键词注射剂；输液剂；灭菌 注射剂的灭菌是关乎药品质量、保证用药安全的重要工艺步骤之一。灭菌工艺研究中应根据药物和制剂的具体情况，选择适宜的灭菌方法，做到既杀死或除去微生物，达到灭菌目的，又保证药物的治疗作用和稳定性。审评工作中注意到申报的部分注射剂品种其灭菌工艺存在问题，如灭菌方法选择不当、采用的灭菌温度偏低或灭菌时间偏短等，不能达到灭菌要求。本文对注射剂灭菌工艺涉及的有关问题做简要介绍，供注册申请人选择研究制剂灭菌工艺时参考。 1 无菌保证水平和无菌检查 灭菌制剂的无菌保证水平（SAL, sterility assurance level）是指灭菌后制剂中微生物的残存概率。为保证用药安全，注射剂等要求无菌的制剂中微生物的存活概率（SAL）不得高于10－6（即每一百万注射剂终产品中存活微生物的不得多于1个）。灭菌制剂的无菌保证水平可通过验证确定。 无菌检查是灭菌制剂质量控制的一个重要指标。但无菌检查是抽样检查，而微生物污染属非均匀污染，由于抽样的概率问题，无菌保证水平不符合要求往往难以用无菌检查结果反映出来，除非是较严重污染的情况。因此，灭菌制剂的无菌保证不能依靠终产品的无菌检查结果，而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、严格的GMP管理和良好的无菌保证体系。 2 注射剂常用灭菌工艺 注射剂常用灭菌方法包括湿热灭菌和过滤除菌法。 2.1 湿热灭菌法系指将物品放在灭菌器内，利用高压饱和蒸汽等手段进行灭菌的方法。蒸汽潜热大，穿透力强，容易使微生物蛋白质变性凝固，灭菌能力强，因此湿热灭菌是最有效及用途最广的灭菌方法。注射剂制备中常用的湿热灭菌法包括热压灭菌和流通蒸汽灭菌。 2.1.1 热压灭菌法系在密闭的灭菌容器内，用压力大于常压的饱和水蒸气加热进行灭菌的方法。若压力和灭菌时间选择适当，该法就能杀死所有的细菌繁殖体和芽孢，灭菌效果可靠。 各种微生物对湿热的抵抗力不同。细菌孢子较细菌对湿热的耐受力更强。饱和蒸汽的温度愈高，则达到灭菌目的所需时间愈短。然而在一个大气压下煮水，其温度最高只可达100℃，除非用很长时间，否则很难将一切细菌孢子杀灭。如欲使湿热的温度提高到100℃以上，则需采用热压方法。热压灭菌的压力越高，所需时间越短。注射剂灭菌中通常采用的灭菌条件为121℃×15分钟或115℃×30分钟。注射剂灭菌也可采用其他温度和时间参数，但必须保证制剂灭菌后的SAL≤10－6。 2.1.2 流通蒸汽灭菌法系在不密闭的容器内，用流通蒸汽加热进行灭菌的方法。灭菌时间一般为30～60分钟。由于流通蒸汽的温度最高只能达到100℃，故不能保证杀灭所有的细菌孢子。当药液中加有适当抑菌剂时，经100℃加热30分钟，可杀死耐热性细菌孢子。注射剂中小容量注射液在严格监控灭菌前产品微生物污染的前提下，可采用流通蒸汽灭菌，一般1～5ml的注射液可用流通蒸汽100℃灭菌30分钟，10～20ml的注射液可以100℃灭菌45分钟。凡对热稳定的产品，建议采用热压灭菌。 2.2 过滤除菌法本法系用滤过方法除去活的或死的微生物的方法，是一种机械除菌的
灭菌与无菌操作技术
灭菌与无菌操作技术 一、物理灭菌法 二、F值与F0值 近年来对灭菌过程无菌检验中存在的问题引起人们的注意。一方面灭菌温度多系测量灭菌器内的温度不是灭菌物体内的温度，同时无菌检验方法也存在局限性，在检品存在微量的微生物时，往往难以用现行的无菌检验法检出。因此，对灭菌方法的可靠性进行验证是很必要的。F与F0值可作用验证灭菌可靠性的参数。 1．D值研究表明微生物受高温杀灭时，在一定温度范围内其死亡速度属一级过程，即： 式中N。为原始微生物数，N t为t时残存的微生物数，k 为死亡速度常数。lg N t对t作图，得一条直线，直线的斜率为 令斜率的负倒数为D值，即： 由式6-3可知，当lg N t- lg N0=1时D=t，即D的物理意义为一定温度下将微生物杀灭90％（即使之下降一个对数单位）所需时间。D值是微生物的耐热参数，不同微生物在不同条件下有不同的D值，如表6-4所示。 表6-4 不同灭菌方法不同微生物的D值
灭菌方法微生物种类温度/?C 介质或样品D值/min 蒸气灭菌嗜热脂肪芽孢杆 105 5％葡萄糖水溶液87.8 菌 121 5％葡萄糖水溶液 2.4 蒸气灭菌嗜热脂肪芽孢杆 菌 蒸气灭菌嗜热脂肪芽孢杆 121 注射用水 3.0 菌 105 5％葡萄糖水溶液 1.3 蒸气灭菌产芽胞梭状芽孢 杆菌 干热灭菌枯草芽胞杆菌135 纸16.6 枯草芽胞杆菌160 玻璃板18秒 红外线灭 菌 2．Z值 随温度升高，微生物死亡速度加速，即k增加，因而D值下降，在一定温度Array范围内（100~138?C）lg D与温度T呈直线关系，直线的斜率 由于此斜率为负值，为避免引入负数，令：
注射剂无菌保证工艺研究和验证常见技术70问题
注射剂无菌保证工艺研究与验证常见技术问题 [注：以下均为2008年度第一期讲习班（注射剂无菌保证工艺研究与验证技术要求）参会代表所提问题，本期讲习班讲习组根据目前的有关技术要求，经过认真梳理、分析、总结后，现予以发布，并就相关问题进行讨论与交流。] 1、按照欧盟决策树的要求，不能达到121℃，15分钟灭菌，可选择F0≥8的残存概率法。请问，若产品能达到121℃，12分钟灭菌，是否就不能选择121℃，10分钟，同样，能达到10分钟，就不能选择8分钟，都是F0≥8的情况。 答：从微生物杀灭的数学模型可知，在初始污染相同的情况下，灭菌F0值越大，无菌保证水平越高。因此，显然为降低产品残留微生物的风险，尽量选择高的F0值是顺理成章的。 2、在产品质量稳定的条件下，均能满足121℃，8分钟和115℃，30分钟，哪个条件应该优先选择呢？ 答：不考虑产品理化质量稳定性，理论上这两种条件达到的F0值几乎相等，无所谓优选哪个。但实际生产中，还要考虑灭菌器内产品中热穿透的情况，灭菌器内不同部位的产品实际获得的F0值的差异，不同灭菌批次间产品的F0的差异等。应该选择热分布差异小，产品F0值差异较小的灭菌工艺。 2℃，灭菌30分钟”，这种表示法是否规范？±3、申报资料中的灭菌条件为“101℃ 40min。?15min或116℃?2℃，灭菌30分钟”几乎不能计算F0值。灭菌条件的表示可以参照中国药典2005年版二部附录168灭菌法，121℃±2℃，灭菌30分钟”本身不能称为终端灭菌，因“101℃±2℃，灭菌30分钟”是否规范，“101℃±答：暂不说灭菌条件为“101℃ 4、同品种10ml、20ml注射剂，采取相同的灭菌方式是否合适？ 答：同品种10ml、20ml注射剂，可以采取相同的灭菌方式，但应进行热穿透试验，考察不同体积样品的热穿透是否有一致，同时考虑采用的灭菌方式应能保证大体积产品的无菌保证水平。 5、选择最高无菌保证水平的灭菌工艺，可能会与产品的质量，如有关物质、稳定性等方面有冲突，如何平衡这一矛盾？另外，国外上市的是粉针剂，国内申报时是否还需要进行灭菌工艺的选择研究？ 答：实际上，在进行灭菌工艺选择研究过程中就应该进行不同灭菌条件下样品质量变化的研究，选择灭菌工艺的过程也是平衡无菌保证水平和（样品质量）理化指标的过程，在产品有临床需求的情况下，灭菌工艺的选择应以其自身能达到的最高无菌保证水平为原则。对国外上市的粉针剂，国内申报时也应对其采用粉针剂型进行研究，如主药确系对热、对水分不稳定，则可以采用与国外相同的粉针剂；如果主药不是对热、对水分不稳定，则应根据主药的性质选择无菌保证水平高的剂型。 6、最终灭菌工艺的选择原则是首选F0≥12，而不是F0≥8；还是只要达到F0≥8即可？ 答：可参考欧盟灭菌工艺选择的决策树。 7、决策树中残存概率法是否亦优先选择121℃的温度条件？ 答：不一定，要根据产品的稳定性确定，如果采用更高温度和更短的时间能满足残存概率法时，可能比较低温度，更长时间的灭菌条件对产品更有利。如果产品不能耐受121℃的高温，则可以降低温度，并保证微生物的残存概率小于10-6。 8、对热不稳定药品（如蛋白质类、生物制品等），应该直接进行无菌生产工艺的验证。 答：对热不稳定药品（如蛋白质类、生物制品等），首先应对采用的无菌工艺进行研究，是采用除菌过滤+无菌生产工艺，还是采用无菌组装工艺；然后再对无菌工艺进行验证。 9、是否在产品注册申报时就已形成本产品的完整的工艺规程中规定的各项参数的验证？ 答：药品注册管理办法规定，申请人在申报“药品注册申请表”后，经药品审评中心审评符合规定的，通知申请人向药品认证管理中心申请生产现场检查，现场检查目的是确认核定生产工艺的可行性，同时抽取1批样品，并规定样品的生产应当符合GMP要求。由此可见，申报产品注册时，应对用于正式上市产品生产的工艺有了足够的认识。这种认识是建立在产品和工艺开发，扩产、设备和系统的验证以及验证批的生产整个过程上的。验证批的目的是要证明在规定的工艺参数的范围内，工艺过程能始终生产出合格的产品来。因此，在进行验证批生产前，应已充分了解并能控制工艺中各种关键的可变因素。 10、在进行灭菌工艺验证时，一般会放置一个校验的探头在灭菌柜控制探头旁边，这两者之间的温度差异有什么要求？是否应按校样标准，只允许±0.5℃的偏差？ 答：一般来说: a：灭菌器自带的独立的记录探头与监控探头就应完成足够的验证数据，然后对存在的偏差作修正； b：验证所用的测温探头的精度应优于灭菌器自带的记录探头和监控探头； c：验证本身的作用之一是对灭菌器自带的监控探头和记录探头进行修正，以便正常使用时达到较为准确的温度值。 目前没有找到“只允许±0.5℃的偏差”的说法。 11、在同一条大容量注射剂生产线上，如果有一台灭菌柜，需要进行多个规格产品（如250ml,100ml）以及不同灭菌