基因工程作业复习提纲

一、名词解释

基因工程、基因克隆、显性质粒、质粒DNA、染色体DNA、Southern 印迹、Western印迹、PCR技术、限制性内切酶、相容性末端、部分酶切、标记基因、T克隆、表达载体、基因组文库、目的基因、RT-PCR、受体细胞、感受态细胞、外植体、基因工程药物、核酸疫苗、转基因动物、基因治疗、表达系统、包涵体蛋白、星活性、结构基因、cDNA 文库、启动子、酶单位、定量PCR、电穿孔转化法、基因枪法。

基因工程：在体外将目的基因片段插入载体上，构建重组DNA（基因的新组合),并使之进入到原先没有这类分子的受体细胞内，而能持续稳定的增殖和表达的过程。基因工程又名：

遗传工程(genetic engineering) 重组DNA技术(recombination DNA technique) 分子克隆(molecular cloning) 基因克隆(gene cloning)

基因克隆：基因工程的核心内容是基因克隆和基因表达

染色体DNA：分离目的基因和基因表达调控因子的主要材料，也可提供构建染色体和染色体基因整合平台系统之用

标记基因：当载体进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作。即带有筛选标记或抗药基因

T A克隆载体：用耐热DNA聚合酶经PCR法扩增基因片段时、将PCR产物的3’端加上了一个A。根据这一特点研制出一种线性质粒，其5’端突出的T，它们之间可以连接，即TA 克隆。

表达载体：原核表达载体表达载体中含有复制起始位点、抗性基因、克隆位点、启动子、核糖体结合位点和转录终止信号。

基因组文库: 某种生物的基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌中的群体之中，这个群体极为该生物的基因组文库。

目的基因: 优良性状相关的基因，即用于克隆的基因

受体细胞: 能够接受外源DNA并使其稳定维持的细胞，也指具有应用价值和理论研究的细胞.

电穿孔转化法: 将待转化的质粒或DNA重组连接液加在电穿孔转化仪的样品池中，两极施加高压电场。在强大电场的作用下，细菌细胞壁和细胞膜产生缝隙，质粒或DNA重组分子便可进入细胞内。

表达系统: 泛指目的基因与表达载体重组后，导入合适的受体细胞，并能在其中有效表达目的基因产物。

包涵体蛋白:在一定条件下，外源基因的表达产物在大肠杆菌中积累并致密的聚集在一起形成无膜的裸露结构。

二、简答及问答题

1、基因工程研究的技术路线是什么？

答: 基因工程研究的成败是与技术路线的严密设计直接相关。

2、重组DNA 的含义是什么？

答：在体外将目的基因片段插入载体上，构建重组DNA （基因的新组合),并使之进入到原先

没有这类分子的受体细胞内，而能持续稳定的增殖和表达的过程。

3、为什么反转录酶在聚合反应中会出错?（书上32页）

3、天然DNA 包括那些类型DNA ？

答: 染色体DNA 病毒和噬菌体DNA 质粒DNA 线粒体和叶绿体DNA

4、Northern 印迹和Southern 印迹的两个根本的区别是什么？答;Southern Blotting 的过程

1.碱变性的琼脂糖凝胶电泳分离的DNA

2.通过电泳液的移动转移胶中的DNA

确定研究目标

在国内外已发表研究成果

自己提出的技术路线

严密设计可行技术路线

3.固定胶中的DNA

4.预杂交和杂交（放射性和荧光检测）

5.结果检测

Northern blotting（RNA印迹技术）

是将RNA分子从电泳凝胶转移到硝酸纤维素滤膜或其他化学修饰的活性滤纸上，进行核酸杂交的一种实验方法

5、用于核酸杂交的硝酸纤维素膜和尼龙等膜固相支持物具有哪些优良特性?

6、严禁核酸杂交试验是如何控制的?

7、什么限制性内切酶的星号活性? 受哪些因素影响？

答:限制酶在非标准反应条件下，能切割一些与之特异型识别顺序类似的序列，降低酶切的特异性，这种现象称为星号活性。EcoRI*代表EcoRI的星号活力。

发生星反应的限制酶和条件

1)反应体系中甘油含量过高（>5%，V/V），应使用能完全酶切DNA的最小酶量避免这种情况的发生；

2)限制酶用量过大（>100U/ug DNA）；

3)低离子浓度（<25mmol/ml）；

4)高PH（PH8.0）

5)含有有机溶剂（如二甲基亚砜、乙醇、二甲基乙酰胺等）；

Mn2+、Cu2+、Co2+、Zn2+等非Mg2+的二价阳离子存在。

6)不同的限制酶出现的星号活力的阈值也不一样，常易发生星号活力的酶有：EcoR I、Hind III、Kpn I、Pst I、Sca I、Sal I、Hinf I等。

8、Klenow酶在基因工程中有什么作用？（书上31页）

9、克隆载体应具备特点？

答：1. 复制起点：因而至少可在一种生物体中自主复制。2. 克隆位点：以供外源DNA插入。3. 遗传标记基因：以指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞4.安全性：不含有害基因，不会任意传播其他宿主细胞，尤其是人细胞。

10、阐述减少质粒和噬菌体载体上某种酶的识别位点的方法和原理?

11、什么是质粒的相容性？什么是不相容型？

相容性在一个宿主细胞中同时存在的不同质粒

不相容型不能同时存在一个细胞中的不同质粒

12、阐述Ti质粒的4个功能区？T-DNA区:Ti 质粒进入植物细胞的只是约25kb

的片段，这个片段称为T-DNA（transfer DNA); T-DNA两端各有25bp长的正向重复序列(LTS 和RTS)。边界序列对T-DNA转移和整合是不可缺小的，如其发生突变和缺

失，导致T-DNA转移功能降低，甚至导致丧失。

Vir区:Vir区—定位在T-DNA区上游的一组基因，它们的表达产物激活T-DNA向细胞的转移，使植物引发肿瘤，与脓杆菌的致病性相关（virulence）。

Con区:Con区与脓杆菌之间的接合转移，即含有tra基因。

Ori区:该区的基因能控制Ti质粒的自我DNA复制

13、什么是cDNA文库？同基因组文库有何差？cDNA文库来自于某一物种

某种组织的mRNA，所以cDNA文库既有种属特异性，也有组织特异性。cDNA文库的特点：基因特异性器官特异性代谢或发育特异性不均匀性各cDNA均可获得表达（一般选用的载体都是表达型的）

14、建立一个基因组文库后，如何鉴定一个含有目的基因的克隆？

15、有哪些可能的原因使一个基因在DNA文库中丢失?

16、选择受体细胞的一般原则？(1)便于重组体分子的导入

(2)能使重组体分子稳定存在于细胞中

(3)便于重组体筛选，表达载体所含的选择性标记与受体细

胞的基因型必须相配。

(4)遗传稳定性高，易于培养。对于动物细胞而言，应对培

养的适应性强，可以进行贴壁培养或悬浮培养，最好能

在无血清的培养基中培养。

17、CaCl2诱导大肠杆菌转化法的可能机制？(1) 在0℃的CaCl2低渗溶液中，

细菌细胞发生膨胀，同时Ca2+使细胞膜磷脂层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离，形成感受态。

(2) Ca2+与DNA分子结合，形成抗DNase的羟基－磷酸钙复合物，并粘附在细菌表面。

(3) 当42℃热刺激短暂处理细菌细胞时，细胞膜的液晶结构发生剧烈扰动，并随之出现许多缝隙，为DNA分子提供了进入细胞的通道。

18、重组子筛选的营养缺陷型检测法？根据目的基因在受体细胞中表达产物的

性质，筛选出含目的基因的克隆子，如果目的基因产物能降解某些药物使菌株产生抗性标记，或基因产物与某些药物作用是显色反应，则可根据抗性或颜色直接筛选出含目的基因的克隆子。

前提：目的基因能在受体细胞中表达，不能表达则不能检测。

19、从细菌中提取基因组DNA，应采取哪些措施可获得高分子量的DNA?答：（一）保持核酸分子一级结构的完整性

1）温度不要过高；

2）控制一定的pH值范围(pH值5-9);

3）保持一定的离子强度;

4）减少物理因素对核酸降解的机械剪切力.

（二）防止核酸的生物降解

细胞内或外来的各种核酸酶能消化核酸链中的磷酸二酯键，破坏核酸一级结构。所用器械和一些试剂需高温灭菌，提取缓冲液中需加核酸酶抑制剂。

20、阐述提高外源蛋白表达量稳定性的措施？（1）构建融合蛋白表达系统

（2）构建分泌蛋白表达系统（3）构建包涵体表达系统（4）选择蛋白水解酶基因缺陷型的受体系统

21、用亲和层析纯化外源基因表达蛋白的原理？

22、用IFNα来治疗哪些疾病？白血病、肝炎、癌症、AIDS

23、为什么要研究和应用转基因动物？

?提高动物生长速度

?改善畜产品的品质

?用转基因动物生产药物

?用转基因动物作器官移植的供体

24、何理解基因工程两个特点？

25、简述复制子的结构和功能?

26、阐述SangerDNA测序法测定基因测序的原理？（书上157页）答：双脱氧（2'，3'）-核苷酸可以象2'-脱氧核苷酸那样直接掺入新合成的DNA 链中，但因其3’端不具OH基，DNA链合成至此中断。由于双脱氧核苷酸在每个DNA分子中掺入的位置不同，故可根据不同长度的DNA片段测定出核苷酸序列。

27、用于克隆的DNA在质量上有那些要求？

28、对于电泳分离DNA来说，琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶各有什么特点？

29、说出4种外源DNA转化植物细胞的方法？

30、用限制性内切核酸酶切割DNA后，经电泳检查，发现有拖尾现象，其可能的原因是什么？（可能的原因有：蛋白与DNA的结合、酶混杂、酶切条件不适合、有外切核酸酶污染等）。

31、如果已知某一基因的功能及其编码的蛋白质氨基酸序列，可以通

过何种方法克隆该基因？

32、用蓝白斑筛选法区分重组子和非重组子的原理？

33、放射性抗体检测法的基本原理是什么？

（答：这一方法的原理是根据抗体、抗原分子的三个基本特性而设计的一种筛选鉴定重组体的方法。这三个基本特性是：（1）抗体分子可以牢固地吸附在固体基质上而不被洗脱掉；（2）一个抗原可以同几种不同的抗体结合；（3）抗体分子可以通过碘化作用被标记）。

扬州大学基因工程期末试题复习要点整理

基因工程期末试题复习要点整理基因工程是70年代出现的一门科学，是生物学最具生命力和最引人注目的前沿科学之一，是现代生物技术的代表，是生命科学类专业中的一门重要的专业课。本课程主要介绍基因工程概述、重组DNA基本技术及原理、基因克隆、基因的分离及鉴定、基因工程的表达系统、基因工程的应用等。通过本课程的学习，使学生掌握基因工程技术的基本原理和了解该技术在动物、植物和微生物等方面的应用，为今后从事生物学教学、生物技术研究和产品开发，或进一步的研究生学习科研打下坚实的理论及专业基础。扬州大学试题纸一、名词解释：共10题，每题2分，共20分。 1. 基因: 是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。 2. 定位克隆: 获取基因在染色体上的位置信息，然后采用各种方法对该基因进行定位和克隆 3. 融合基因: 是指应用DNA体外重组技术构建的一类具有来自两个或两个以上的不同基因核苷酸序列的新型基因。 4. 转化子: 导入外源DNA后获得了新遗传标志的细菌细胞或其他受体细胞，又称重组体。 5. 人工接头：是人工合成的具有一个或数个特定限制性内切酶识别和切割序列的双股平端DNA短序列。 6. RT-PCR: 是指以mRNA在反转录酶作用下合成cDNA第一链为模板进行的PCR。 7. ORF : 起始于AUG、止于UAA、UGA、UAG的连续的密码子区域，是潜在的编码区。 8. MCS: 指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点的DNA片段。 9. gene targeting : 基因工程中利用活细胞染色体DNA可与外源DNA的同源性DNA序列发生重组的性质，来进行定点修饰改造染色体上某一目的基因的技术 10. 5’RACE: 是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以mRNA为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到5’端之间未知序列的方法。四、简答题：共4题，共20分。 1．简述获得目的基因常用的几种方法。（5分）

品种法作业及答案(供参考)

品种法大作业某工业企业,设有一个基本生产车间和供电锅炉两个辅助生产车间,基本生产车间大量大批生产甲乙两种产品,辅助生产车间提供电力蒸汽服务。根据生产特点和管理要求,该企业采用品种法计算产品成本。供电车间本月供电64000度,其中:锅炉车间用电4000度,产品生产用电40000度(甲产品用电24000度,乙产品用电16000度),基本生产车间一般用电8000度,厂部管理部门用电12000度.锅炉车间本月供汽12000立方米,其中:供电车间用2000立方米,基本生产车间用9000立方米,厂部管理部门用1000立方米。该企业生产两种产品所需原材料均于生产开始时一次投入,7月份甲产品月初在产品成本为87000元,其中直接材料59000元,直接人工21500元,制造费用6500元;乙产品无月初在产品。该企业工资费用,制造费用按甲乙两种产品耗用的生产工时比例分配,辅助生产费用采用直接分配法分配。本月有关部门生产费用的部分经济业务和有关部门成本计算资料如下: (1)本月发出材料汇总表如表2所示: 表5-2 发出材料汇总表 (2)根据本月职工工资结算凭证,各车间部门的工资及福利费汇总表如表5-3所示: 表5-3 工资及福利费汇总表

(3)本月应提折旧费43000,其中:基本生产车间30 000元,供电车间3000元,锅炉车间2000元,厂部管理部门8000元。 (4)本月应摊待摊费用(修理费)3500元,其中基本生产车间2000元,供电车间200元,锅炉车间300元,厂部管理部门1000元。 (5)本月以现金支付的费用为方便用4850元,其中基本生产车间办公费1090元,供电车间办公费560元,锅炉车间办公费200元,厂部管理部门办公费600元,差旅费2400元。 (6)本月以银行存款支付的费用为14000元,其中:基本生产车间水费500元,办公费1000元,供电车间外购电力和水费5000元,锅炉车间水费3500元,厂部管理部门办公费1800元,差旅费2000元,招待费200元。要求:(1)根据上述资料,开设辅助生产成本明细帐和甲乙产品生产成本明细帐。 (2)根据上述资料,编制分配表,分配各项要素费用。 (3)根据上述资料, 编制分配表,分配跨期费用, 辅助生产费用和制造费用。 (4)将生产费用采用约当产量法在完工产品和月末在产品之间进行分配,结转完工产品成本。 (5)编制成本核算中的相关会计分录。 ①根据甲乙两种产品直接耗用原材料比例分配共同用材料费用,根据发料汇总表和分配结果,编制会计分录并记入有关帐户。 ②根据甲乙两种产品的实际生产工时分配产品生产工人工资和福利费,根据应付工资和福利费汇总表及分配结果,编制会计分录并记入有关帐户。 ③编制计提本月折旧的会计分录并记入有关帐户。 ④编制本月分摊待摊费用的会计分录并记入有关帐户。 ⑤编制本月以现金支付费用会计分录并记入有关帐户。 ⑥编制本月以银行存款支付费用会计分录并记入有关帐户。 ⑦编制辅助生产费用分配表分配辅助生产费用,编制会计分录并记入有关帐户。 ⑧编制基本生产车间制造费用分配表(生产工时分配法)分配制造费用,编制会计分录并记入有关帐户。 ⑨采用约当产量法计算月末在产品成本,编制结转甲乙两种产品完工产品成本的会计分录。

【精品】2021年高中高三生物二轮复习专题练习含答案解析4：基因工程

2021年高三生物二轮复习专题练习4含答案解析：基因工程一、选择题 1.下列关于基因工程应用的叙述，正确的是( ) A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因 B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒 D．利用基因工程生产乙肝疫苗时，目的基因存在于人体B淋巴细胞的DNA中 2.1970年，特明和巴尔德摩证实了RNA病毒能依赖RNA 合成DNA的过程，并发现了催化此过程的酶。下面为形成cDNA 的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解分析，下列说法不．正确的是( ) A．催化①过程的酶是逆转录酶 B．从图示可以看出要将碱基对之间的氢键断开可以用核酸酶H和高温处理 C．从图中信息分析可知，②⑤过程为DNA复制，催化⑤过程的酶能耐高温 D．如果RNA单链中有碱基100个，其中A占25%，U占15%，则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶30

个 3.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是( ) A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C．将重组DNA分子导入烟草原生质体 D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 4.如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是( ) A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法 B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌 C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌 D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长 5.在基因工程操作中限制性核酸内切酶是不可缺少的工具酶。下列有关限制性核酸内切酶的叙述错误的是( )

生物选修3专题1 基因工程知识点复习学案

专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过________________________，赋予生物以 _____________________，创造出______________________________________。基因工程是在____________上进行设计和施工的，又叫做__________________。 1. （1 （2 （3 2. (1)两种DNA ②区别：E· (2)与DNA 酸二酯键。 3. （1 （2 _____________________的双链___________DNA （3）其它载体： _________________________________ (二)基因工程的基本操作程序第一步：__________________________ 1.目的基因是指： ______________________________________________________ 。 2.目的基因可采取_______________-获得，也可以用_____________________。人工合成目的基因的常用方法有________________和_________________。 3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：_____________________ 将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是________________，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 _______________。此方法的受体细胞多是 ____________。将目的基因导入微生物细胞：★原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是 ____________，其转化方法是：先用 ________处理细

现代分子生物学-复习笔记

现代分子生物学复习提纲第一章绪论第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学：以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控等过程，也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术（基因工程） ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） ●基因组、功能基因组与生物信息学研究第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间：19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一：肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二：噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括： ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑，标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系思考

?证明DNA是遗传物质的实验有哪些？ ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。第二章染色体与DNA 第一节染色体 1.作为遗传物质的染色体特征: ?分子结构相对稳定 ?能够自我复制 ?能够指导蛋白质的合成，从而控制整个生命过程; ?能够产生遗传的变异。 2 真核细胞染色体组成 (1) DNA(2) 蛋白质（包括组蛋白和非组蛋白）(3) 少量的RNA 组蛋白：呈碱性，结构稳定；与DNA结合形成、维持染色质结构，与DNA含量呈一定的比例非组蛋白：呈酸性，种类和含量不稳定；作用还不完全清楚 3.染色质和核小体染色质是一种纤维状结构，由最基本的单位—核小体(nucleosome)成串排列而成的。 4.真核生物基因组DNA的C值和重复序列 C值(C Value)：指一种生物单倍体基因组的DNA总量。注意：生物体进化程度高低与C值不成明显线性相关；亲缘关系相近的生物C值却相差大。高等生物的C值不一定比低等生物的C值高。 C值变化范围宽意味着生物基因组中含有大量的无编码功能的重复序列。 ?DNA序列可分为3类: (1)不重复序列：是主要的结构基因 (2)中度重复序列 ?各种rRNA、tRNA、组蛋白基因以及某些结构基因属于这一类。 ?中度重复序列往往分散在不重复序列之间。 (3)高度重复序列――卫星DNA ：不转录序列。思考： ?DNA的C值和重复序列.？ 5.原核生物基因组特点 1）原核生物的基因组很小，大多只有一条染色体，且DNA含量少，没有重复序列。注意：染色体外遗传基因的概念：即细菌的质粒、真核生物的线粒体、高等植物的叶绿体等所含有的DNA和功能基因。 2）结构简练 3）存在转录单元： ?原核DNA序列中功能相关的基因丛集在基因组的特定部位，形成转录单元，它们可被一起转录为可翻译多个蛋白质的mRNA分子，这种mRNA叫多顺反子mRNA。注意：原核生物的mRNA是多顺反子mRNA；真核生物mRNA是单顺反子mRNA

成本会计作业1-4答案

《成本会计》形成性考核册及参考答案作业一（第1章至第5章）、单项选择题（每小题1分，共10 分）、多项选择题（每小题2分，共20 分）四、简答题 1、正确计算产品成本应该正确划清哪些方面的费用界限。答：（1）正确划分应否计入生产费用、期间费用的界限。（2）正确划分生产费用与期间费用的界限。（3）正确划分各个月份的生产费用和期间费用的界限。（4）正确划分各种产品的生产费用界限。（5）正确划分完工产品与在产品的生产费用界限。以上五个方面费用界限的划分过程，也是产品成本的计算过程。 2、请简要回答对辅助生产费用核算需要设置的账户以及辅助生产费用归集的程序。答：辅助生产费用的归集和分配是通过“辅助生产成本”账户进行的。该账户一般按辅助生产车间、车间下按产品或劳务种类设置明细账，账户按成本项目或费用项目设专栏进行明细核算。辅助生产费用的发生应记入该账户借方进行归集。辅助生产费用的归集程序有两种，相应地“辅助生产成本”明细账设置方式也有两种。两者的区别在于辅助生产制造费用归集程序不同。在一般情况下，辅助生产车间制造费用先通过“制造费用一辅助生产车间” 账户进行单独归集，然后将其转入相应的“辅助生产成本”明细账，从而计入辅助生产产品或劳务成本，在这种情况下应设置“辅助生产成本”明细账和“制造

费用一辅助生产车间”明细账核算。在辅助生产车间规模小、制造费用少而且辅助生产又不对外提供商品情况下，为了简化核算工作辅助生产制造费用可以不通过“制造费用”单独归集，而直接记入“辅助生产成本”明细账。这时将产品成本项目和制造费用项目结合设置“辅助生产成本”明细账。五、计算及分析题 1、某企业2002年6月份应付工资为135650元，其中产品生产工人工资是123750 元，车间管理人员工资是3000元，厂部管理人员工资是8900元；本月生产的甲、乙、丙三种产品，实际生产工时分别为5000、9500和15500小时。本月职工福利费计提比例为14% 要求：（1）采用生产工人工时比例分配法分配生产工人工资及提取的职工福利费，并填入下列表中；（2）根据上述资料及分配结果编制工资和福利费分配的会计分录。直接人工费用分配表直接人工费用分配表

高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)

高中生物《基因工程》练习题题号一二总分得分一、单选题（本大题共20小题，共20.0分） 1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（） A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶 2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（） A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C. 选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快 D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达 3.如图为基因表达载体的模式图。下列有关基因工程的说法错误的是（） A. 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建 B. 任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别 C. 图中启动子和终止子不同与起始密码子和终止密码子 D. 抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体 4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限制酶的降解。下列在动物体内发生的过程中，与上述细菌行为相似的是（） A. 巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体 B. T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子

C. 组织液中抗体与抗原的特异性结合 D. 疫苗诱导机体产生对病原体的免疫 5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（） A. B. C. D. 6.下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。下列相关叙述正确的是（） A. 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键 B. Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞 C. 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测 D. 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术 7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（） A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列 B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合 C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因 D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制 8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）

基因工程技术笔记整理

基因工程技术：按照人们的愿望，进行严密的设计，通过体外DNA重组和转移等技术，有目的地改造生物种性，使现有物种在较短的时间内趋于完善，创造出新的生物类型。质粒是一种染色体外的稳定遗传因子，大小从1-200kb不等，为双链、共价闭合环状DNA分子cccDNA，并以超螺旋状态存在于宿主细胞中，它具有自主的复制和转录系统。质粒在细胞内的复制一般有二种：紧密控制型（stringent control）和松弛控制型（relaxed control）。前者只在细胞周期的一定阶段进行复制，通常每个细胞内只含有一个或几个质粒分子；后者在整个细胞周期中随时可以复制，在每个细胞中有许多拷贝。质粒的不相容性：利用共同复制系统的不同质粒不能在同一宿主细胞中共存。从细胞中分离质粒DNA 的方法都包括3个基本步骤：培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细胞；分离和纯化质粒DNA。溶菌酶：破坏菌体细胞壁；SDS和Triton X-100：使细胞膜裂解。染色体DNA通常用于构建基因组文库和Southern杂交等。基因组DNA的提取植物基因组DNA提取：提取缓冲液（Tris.Cl—保持pH,EDTA,NaCl,SDS），氯仿/戊醇/乙醇溶液—沉淀和抽提DNA，异丙醇—沉淀DNA（提染色体），TE（Tris.Cl,EDTA）--溶解DNA，RNase—保存液，降解RNA，NaAC—加盐，70%乙醇—漂洗。细菌基因组DNA提取：SDS，蛋白酶K，氯仿：异戊醇（24：1）-- 沉淀DNA，苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）-- 抽提，70%乙醇—漂洗，TE,NaCl—调节离子强度，RNase A，CTAB/NaCl 溶液—CTAB--一种阳离子去污剂，具有从低离子强度溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性，异丙醇/无水乙醇—沉淀上清液。总RNA制备 mRNA的分子结构容易受到RNA酶的攻击反应而降解，加上RNA 酶极为稳定而且广泛存在，因此，在提取过程中应严格防止RNA 酶的污染并设法抑制其活性，这是实验成败的关键。仪器—玻璃器皿：200℃烘2h，塑料器皿：DEPC水液处理—所有器皿最后硅烷化处理。 RNA酶抑制剂：DEPC--强烈但不彻底，与氨水溶液混合会产生致癌物；异硫氰酸胍--最有效，使RNA酶失活；其他--RNA酶蛋白抑制剂（RNasin）SDS, 尿素等。细胞内总RNA制备方法：异硫氰酸胍热苯酚法、酚/SDS法、Trizol法。（均先将组织在液氮中研磨成粉末）异硫氰酸胍热苯酚法：异硫氰酸胍(GIT)与β－巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性，GIT与十二烷基肌氨酸钠(Sarcosyl)作用使蛋白质变性。酚/SDS法：用酚和SDS破碎细胞和去除蛋白质，用LiCl选择沉淀RNA以去除DNA 和其它不纯物。 Trizol法：Trizol试剂（含酚、异硫氰酸胍和溶解剂等）。 mRNA提取制备mRNA原理：分离的总RNA 可利用mRNA3’端含有poly(A)的特点，用oligo(dT)纤维素柱分离，当RNA流经oligo(dT)纤维素柱时，在高盐缓冲液作用下，mRNA被特异的吸附在oligo(dT)纤维素上，然后逐渐降低盐浓度洗脱，在低盐溶液或蒸馏水中，mRNA被洗下。然后经过两次oligo（dT）纤维素柱，可得到较纯的mRNA。纯化的mRNA在70%乙醇中-70℃可保存一年以上。（上样buffer和洗脱buffer）。溶液中无盐时要沉淀RNA，必须加盐NaAC。琼脂糖凝胶电泳 DNA凝胶电泳：琼脂糖-- 分离DNA片段大小范围广；聚丙烯酰胺-- 小片段，分辨力高。

北邮《成本会计》阶段作业二

一、多项选择题（共5道小题，共50.0分） 1.按原材料定额消耗量比例分配原材料费用，其计算分配的程序是（ABCD）。 A.计算各种产品原材料定额消耗量；D.讲算出各种产品应分配的原材料实际费用。 B.计算原材料消耗量分配率； C.计算出各种产品应分配的原材料实际消耗量； 2.成本报表分析方法包括（ABCD）。 A.比较分析法 B.比率分析法 C.连环替代法 D.差额分析法 3.标准成本的制定包括（ABCD）。 A.直接材料标准成本的制定 B.直接人工标准成本的制定 C.变动制造费用标准成本的制定 D.固定制造费用标准成本的制定 4.平行结转分步法的特点包括（ABCD）。 A.各生产步骤不计算半成品成本，只计算本步骤所发生的生产费用。 B.各步骤之间不结转半成品成本，半成品成本不随实物转移而结转 C.将每一生产步骤发生的费用划分为耗用于产成品部分和尚未最后制成的在产品部分。这里的在产品是就整个企业而言的广义在产品 D.将各步骤费用中应计入产成品的份额平行结转、汇总，计算该种产成品的总成本和单位成本 5.下列属于品种法成本核算主要特点的是（ABC）。 A.成本核算对象是产品品种 B.一般每月月末定期计算产品成本 C.一般月末要将生产费用在完工产品和在产品之间进行分配 D.成本核算期与产品生产周期一致二、单项选择题（共5道小题，共50.0分） 1.月末在产品数量较大，各月末之间变化也较大，同时产品成本中直接材料费用和加工费用比重相差不多的产品，其在产品成本计算应采用（C ）。 A.定额成本法 B.定额比例法 C.约当产量法 D. 按固定成本计价法 2.采用辅助生产费用分配的交互分配法对外分配费用总额是（D ）。 A.交互分配前费用 D.交互分配前费用再加上交互分配转入费用减去交互分配转出费用 B.交互分配前费用加上交互分配转入费用 C.交互分配前费用减去交互分配转出费用 3.分步法的成本核算对象为（D ）。 A.产品品种 B.产品类别 C.批别或订单 D.生产步骤 4.分批法适用的生产组织方式是（B ）。 A.大量大批生产 B.小批单件生产 C.大量小批生产 D.单件成批生产 5.品种法适用于（D ）。 A.单件、小批生产的企业 B.新产品试制或试验生产 C.大量大批多步骤生产企业 D.单步骤、大量生产企业

基因工程练习题(附答案)

基因工程练习题 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括( ) A、繁殖速度快 B、遗传物质相对较少 C、多为单细胞，操作简便 D、DNA为单链，变异少 3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因可以用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有( ) A、抗虫基因 B、抗虫基因产物 C、新的细胞核 D、相应性状 5、转基因动物转基因时的受体细胞是( ) A、受精卵 B、精细胞 C、卵细胞 D、体细胞 6、基因工程中常见的载体是( ) A、质体 B、染色体 C、质粒 D、线粒体 7、水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是( ) A、促使目的基因导入宿主细胞中B、促使目的基因在宿主细胞中复制 C、使目的基因容易被检测出来 D、使目的基因容易成功表达 8、运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，据以上信息，下列叙述正确的是( ) A、Bt基因的化学成分是蛋白质 B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质 C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因 D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物 9、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成，通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A、大肠杆菌 B、酵母菌 C、T 噬菌体 D、质粒DNA 4 10、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（） A．能复制 B.有多个限制酶切点C．具有标记基因D．它是环状DNA

基因工程复习笔记

第一章一、电泳电泳(eletrophorosis) :带电荷的分子在电场中以一定的速率向与其电荷性质相反的电极移动.移动速度称为电泳迁移率。影响因素：1 电泳迁移率同电场的强度和分子本身所带的净电荷数目成正比。 2. 电泳迁移率同分子与介质的摩擦系数成反比。 3当电场强度一定,电泳介质相同,电荷相同的分子在电场中迁移的速度主要取决于分子本身的大小和形状(构型)。 4分子形状相似的分子的迁移速度主要与分子量相关: 分子量越大，移动越慢。指示剂：溴酚蓝（Bb）：常用指示剂。分子量670，分子筛效应小，近似于自由电泳，呈蓝紫色。二甲苯青(Xc)：分子量554.6，呈蓝色，迁移速度比Bb慢。染料：溴化乙锭（EB） 1、聚丙烯酰胺凝胶电泳优点：比琼脂糖凝胶的分辨率高的多；回收DNA样品纯度高，无色透明，韧性好，银染的凝胶干燥后可长期保存；能装载的DNA量大，达每孔10μgDNA。 2 、SDS-PAGE 原理：SDS是蛋白质的变性剂，使煮沸变性的蛋白质维持线性状态，并与蛋白质结合，使蛋白质带上相同密度负电荷。SDS与蛋白质结合使蛋白质构象改变，成为形状近似雪茄状的长椭圆棒，SDS-蛋白质复合物短轴相同，而长轴与蛋白质的分子量成正比。

蛋白质-SDS复合物电泳的迁移率不受蛋白质原有电荷和形状的影响，只与椭圆棒的长度，即蛋白质分子量有关。二、PCR技术定义：聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术，以DNA为模板，在引物、dNTPs、Taq酶的作用下，经变性－退货－延伸反复循环，使某个基因在体外特异性地扩增。 PCR法的原理也是利用人工合成带突变位点的诱变引物，通过PCR 扩增而获得定点突变的基因或DNA片段。影响因素：（1）Taq DNA聚合酶（具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性，但没有3’→5’外切酶活性因此不能修复错误的碱基配对）。（2）引物（primer）一般引物设计为长15—30bp；位置与待扩增的模板DNA区段的两3’端序列互补（5‘端相同）的短DNA；引物的碱基组成：尽可能提高G+C含量，避免连续相同碱基排列或内部回文序列，避免形成引物二聚体。（3）引物的Tm值：实际复性温度选择低于Tm值5 oC。（4）dNTPs 含量适中（5）Mg 2+ 的浓度（6)对照实验三、PCR技术的扩展：反向PCR：不对称PCR：差异显示PCR。反向PCR 原理：扩增两个引物外侧的未知序列，使引物的外侧序列“转变” 成内侧序列。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA，

基因工程制药复习提纲

名词解释 1.基因工程基因工程是值在体外合成或重组特定的DNA，再与载体连接，最后导入到宿主细胞内表达、扩增出人们需要的蛋白质，而且使这种性状可遗传给后代的技术。包括上游技术和下游技术。 2.基因工程制药基因工程制药是通过基因工程的方法生产药物，具体包括获得目的基因、构建重组质粒、构建基因工程菌、培养工程菌、产物分离纯化、产品加工检验等步骤。 3.逆转录逆转录（reverse transcription）是某些RNA病毒由逆转录酶直接利用RNA为模板合成DNA的过程。 4.CDNA以生物细胞的mRNA为模板，在逆转录酶的作用下合成cDNA的第一条链，然后在合成双链DNA，并将合成的cDNA双链重组到质粒载体或噬菌体载体上，倒入宿主细胞进行增殖。在这个过程中合成的双链DNA叫做cDNA。 5.引物引物是人工合成的单链DNA小片段，碱基顺序分别与所要扩增的模板DNA双链的 5’端相同。是PCR的起始点。 6.表达载体所谓表达载体（expression vector）是指具有宿主细胞基因表达所需的调节控制序列，能使外源基因在宿主细胞内转录和翻译的载体。 7.克隆载体克隆载体（cloning vector)是把一个有用的制药DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中进行繁殖的工具。 8.载体载体（vector），指在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。 9.报告基因载体分子上有一种特殊意义的基因序列，它们表达的目的是为了证明载体已经进入宿主细胞，并将含有外源基因的宿主细胞从其他细胞中区分并挑选出来。这种基因就是报告基因。 10.启动子启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列，能被RNA聚合酶识别并结合，具有转录起始的特异性 11.PCR聚合酶链式反应是一种体外放大扩增特定DNA片段的分子生物学技术，它主要包括变性、退火、延伸三个过程，并且多次循环。 12.包涵体包涵体（inclusion body）是存在于细胞质中的一种不可溶的蛋白质聚集折叠而形成的晶体结构物。通常包涵体虽然具有正确的氨基酸序列，但是空间结构却是错误的。 13.蛋白表达系统蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系，通过这个体系实现外源基因在宿主细胞中表达的目的。 14.单克隆抗体由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。 15.基因工程抗体基因工程抗体就是按不同的目的和需求，对抗体基因进行加工、改造和重新装配，然后导入适当的受体细胞中表达得到的抗体分子。 16.改形抗体改性抗体（reshaped antibody,RAb）是指利用基因工程技术，将人抗体可变区（V）中互补决定簇序列改换成鼠源单抗互补决定簇。重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持抗体亲和力的人源化抗体。 17.嵌合抗体在基因水平上将鼠源单克隆抗体可变区和人抗体恒定区连接起来并在合适的宿主细胞中表达，这种抗体叫做嵌合抗体（chimeric antibody）。 18.镶面抗体将鼠源单抗可变区中氨基酸残基改造成人源的，消除了异源性且不影响可变区的整体空间构象。 19.单链抗体单链抗体(single chain antibody fragment，scFv)，是由抗体重链可变区和轻链可变区通过15～20个氨基酸的短肽(linker)连接而成。scFv能较好地保留其对抗原的亲

品种法作业及答案

表5-3 工资及福利费汇总表 (3)本月应提折旧费43000,其中:基本生产车间30 000元,供电车间3000元,锅炉车间2000元,厂部管理部门8000元。 (4)本月应摊待摊费用(修理费)3500元,其中基本生产车间2000元,供电车间200元,锅炉车间300元,厂部管理部门1000元。 (5)本月以现金支付的费用为方便用4850元,其中基本生产车间办公费1090元,供电车间办公费560元,锅炉车间办公费200元,厂部管理部门办公费600元,差旅费2400元。 (6)本月以银行存款支付的费用为14000元,其中:基本生产车间水费500元,办公费1000元,供电车间外购电力和水费5000元,锅炉车间水费3500元,厂部管理部门办公费1800元,差旅费2000元,招待费200元。要求:(1)根据上述资料,开设辅助生产成本明细帐和甲乙产品生产成本明细帐。 (2)根据上述资料,编制分配表,分配各项要素费用。 (3)根据上述资料, 编制分配表,分配跨期费用, 辅助生产费用和制造费用。 (4)将生产费用采用约当产量法在完工产品和月末在产品之间进行分配,结转完工产品成本。 (5)编制成本核算中的相关会计分录。 ①根据甲乙两种产品直接耗用原材料比例分配共同用材料费用,根据发料汇总表和分配结果,编制会计分录并记入有关帐户。 ②根据甲乙两种产品的实际生产工时分配产品生产工人工资和福利费,根据应付工资和福利费汇总表及分配结果,编制会计分录并记入有关帐户。 ③编制计提本月折旧的会计分录并记入有关帐户。 ④编制本月分摊待摊费用的会计分录并记入有关帐户。 ⑤编制本月以现金支付费用会计分录并记入有关帐户。 ⑥编制本月以银行存款支付费用会计分录并记入有关帐户。 ⑦编制辅助生产费用分配表分配辅助生产费用,编制会计分录并记入有关帐户。 ⑧编制基本生产车间制造费用分配表(生产工时分配法)分配制造费用,编制会计分录并记入有关帐户。

2018年全国卷高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》专题演练(三)(含答案)

2019年全国卷高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》专题演练(三) 1．（2019年北京卷，5）为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是（） A．用限制性核酸内切酶EcoRI和连接酶构建重组质粒 B．用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞 C．在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞 D．用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上【答案】C 2．图9为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图。下列叙述正确的是（） A．过程①所用的人β-酪蛋白基因可从人cDNA文库中获得 B．过程①可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植 C．过程①可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体 D．过程①人β-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译【答案】AC 3．2019年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是（） A．该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B．捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿 C．三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核 D．三亲婴儿的培育还需要早期胚胎培养和胚胎移植等技术

【答案】C 4．在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（）A．用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞 B．用选择培养基筛法导入目的基因的细胞 C．用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生物质融合 D．用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽【答案】C 5．下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是（） A．表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原（起）点 C．借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D．启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用【答案】C 6．（2019年新课标①卷，38）真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）。回答下列问题：（1）某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是_____________________。（2）若用家蚕作为表达基因A的受体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用__________作为载体，其原因是_____________________。（3）若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比，大肠杆菌具有_________________（答出两点即可）等优点。（4）若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是___________________（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”）。（5）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以

基因工程知识点总结归纳(更新版)

基因工程绪论 1、克隆（clone）：作名词：含有目的基因的重组DNA分子或含有重组分子的无性繁殖。作动词：基因的分离和重组的过程。 2、基因工程（gene engineering）：体外将目的基因插入病毒、质粒、或其他载体分子中，构成遗传物质的新组合，并使之掺入到原先没有这些基因的宿主细胞内，且能稳定的遗传。供体、受体和载体是基因工程的三大要素。 3、基因工程诞生的基础三大理论基础：40年代发现了生物的遗传物质是DNA；50年代弄清楚DNA 的双螺旋结构和半保留复制机理；60年代确定遗传信息的遗传方式。以密码方式每三个核苷酸组成一个密码子代表一个氨基酸。三大技术基础：限制性内切酶的发现；DNA连接酶的发现；载体的发现 3、基因工程的技术路线：切：DNA片段的获得；接：DNA片段与载体的连接；转：外源DNA片段进出受体细胞；选：选择基因；表达：目的基因的表达；基因工程的工具酶 1、限制性内切酶（restriction enzymes）：主要是从原核生物中分离纯化出来的，是一类能识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链的核酸内切酶。 2、限制酶的命名：属名（斜体）+种名+株系+序数 3、II型限制性内切酶识别特定序列并在特定位点切割 4、同裂酶：来源不同，其识别位点与切割位点均相同的限制酶。 5、同尾酶：来源不同，识别的靶序列不同，但产生相同的黏性末端的酶形成的新位点不能被原来的酶识别。 6、限制性内切酶的活性：在适当反应条件下，1小时内完全酶解1ug特定的DNA 底物，所需要的限制性内切酶的量为1个酶活力单位。 7、星号活性：改变反应条件，导致限制酶的专一性和酶活力的改变。 8、DNA连接酶的特点：具有双链特异性，不能连接两条单链DNA分子或闭合单链DNA，连接反应是吸能反应，最适反应温度是4至15度，最常用的是T4连接酶。 9、S1核酸酶：特异性降解单链DNA或RNA。