胶体金法各种方法法原理
双
抗体夹心法原理 以FABP 为例（检测抗原）
阳性反应 Y1=F14A （标记了胶体金） Y2=F104B （固定在NC 膜上即T 线）
Y3=羊抗鼠IgG （固定在NC 膜上即C 线） 此方法较常用，主要用于较大分子量的蛋白（抗原）的检测。要求两株抗体针对一个抗原的不同位点才可以。也有个别的检测项目是双抗原夹心检测抗体的，原理类似。 竞争法原理
以吗啡为例（检测抗原）
样
品（血金标记F14A 抗
金
金-F14A-FABP-F14A 金-F14A-羊抗鼠
金-F14A-FABP
显示红色
显示红色
金标记F14A 抗
不显色 显示红色
金-F14A-羊抗鼠
阴性反应 阳性反应
阳性反应 Y1=胶体金标记的吗啡单抗 Y2=吗啡-BSA 偶联物
Y3=羊抗鼠 此方法主要用于小分子抗原（毒品、农药、肽链等）的检测。由于抗原分子量小不能直接固定于NC 膜上，常常用化学方法把小分子偶联到BSA 等大分子物质上再固定于NC 膜上。此结果与双抗原夹心法相反，阴性CT 两条都是红线，阳性只有C 线一条红线。 间接法原理
以HIV 为例（检测抗体） 金-吗啡抗体-
吗啡金标记吗啡抗显示红色 不显色 金-吗啡抗体-吗
样品（尿显示红色
显示红色 金标记吗啡抗金-吗啡抗体-羊
阴性尿显示红色 显示红色
阴性反应
阳性反应
此方法主要用于血清中抗体检测，纯化或者重组的抗原固定于NC
膜上，标记多为蛋白A(ProteinA 或叫SPA ，抗体Fc 端结合而与其它蛋白质不结合)。此方法要求胶体金过量，一般来说样品再加入前需要稀释或者加极少量后再加缓冲液。
斑点免疫渗滤法使用就是间接法。 显示红色 不显色
胶体金法各种方法法原理
双抗体夹心法原理 以FABP 为例（检测抗原） 阳性反应 Y1=F14A （标记了胶体金） Y2=F104B （固定在NC 膜上即T 线） Y3=羊抗鼠IgG （固定在NC 膜上即C 线） 此方法较常用，主要用于较大分子量的蛋白（抗原）的检测。要求两株抗体针对一个抗原的不同位点才可以。也有个别的检测项目是双抗原夹心检测抗体的，原理类似。 样品（血清）含FABP 蛋白 金标记F14A 抗体 金-F14A-FABP 金-F14A-FABP-F14A 金-F14A-羊抗鼠IgG 金-F14A-FABP 羊抗鼠IgG 显示红色 显示红色 金标记F14A 抗体 不显色 显示红色 金-F14A-羊抗鼠IgG 阴性反应 阳性反应
竞争法原理 以吗啡为例（检测抗原） 阳性反应 Y1=胶体金标记的吗啡单抗 Y2=吗啡-BSA 偶联物 Y3=羊抗鼠 此方法主要用于小分子抗原（毒品、农药、肽链等）的检测。由于抗原分子量小不能直接固定于NC 膜上，常常用化学方法把小分子偶联到BSA 等大分子物质上再固定于NC 膜上。此结果与双抗原夹心法相反，阴性CT 两条都是红线，阳性只有C 线一条红线。 金-吗啡抗体-吗啡 吗啡-BSA 金标记吗啡抗体 显示红色 不显色 金-吗啡抗体-吗啡 羊抗鼠 样品（尿液）含吗啡 显示红色 显示红色 金标记吗啡抗体 金-吗啡抗体-羊抗鼠 阴性尿液抗体-吗 阴性反应 阳性反应
间接法原理 以HIV 为例（检测抗体） 显示红色显示红色 显示红色 不显色 此方法主要用于血清中抗体检测，纯化或者重组的抗原固定于NC膜上，标记多为蛋 白A(ProteinA或叫SPA，抗体Fc端结合而与其它蛋白质不结合)。此方法要求胶体金 过量，一般来说样品再加入前需要稀释或者加极少量后再加缓冲液。 斑点免疫渗滤法使用就是间接法。
(胶体金法)生产工艺处理制度标准规定模板
乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）生产工艺规程 1. 适用范围 适用于乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂盒（胶体金法）的生产和质量控制。 2. 职责 研发部：制定本规程。 生产管理部：执行本规程 质量管理部：按本规程执行，监督本规程的执行情况。 3. 内容 3.1.依据 《乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）》产品标准 3.2.产品名称、剂型、规格 3.2.1名称： (1) 商品名：乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法） （2）英文名：Diagnostic Kit for Antibody to Hepatitis B Surface Antigen(Colloidal Gold Immunochromatagraphic Assay) （3）汉语拼音名：Yixing Ganyan Bingdu Biaomian Kangti Jiance Shiji（jiaotijin Fa）3.2.2.类型：三类6840体外诊断试剂。 3.2.3.规格：100T/盒(25T/筒*4筒)（无卡）；25袋/盒（1支/袋）、50袋/盒（1支/袋）3.3.产品概述 乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析原理、双抗原夹心法，在玻璃纤维纸上预包埋金标记重组乙型肝炎病毒表面抗原，在硝酸纤维素膜上检测线（T）和质控线（C）分别包被重组的乙型肝炎病毒表面抗原和羊抗兔IgG。当检测样本为阳性时，样本中的乙肝病毒表面抗体与胶体金标记的重组乙肝病毒表面抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线（T）时与预包被的重组乙肝表面抗原反应，形成免疫复合物而显现红色条带，游离金标记的兔IgG则在质控线（C）与羊抗兔IgG结合显现红色条带。阴性样本则仅在质控线（C）显色。 3.4.试剂盒组成、储存、有效期
胶体金法生产工艺规程
1. 适用范围 适用于乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂盒（胶体金法）的生产和质量控制。 2. 职责 研发部：制定本规程。 生产管理部：执行本规程 质量管理部：按本规程执行，监督本规程的执行情况。 3. 内容 3.1.依据 《乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）》产品标准 3.2.产品名称、剂型、规格 3.2.1名称： (1) 商品名：乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法） （2）英文名：Diagnostic Kit for Antibody to Hepatitis B Surface Antigen(Colloidal Gold Immunochromatagraphic Assay) （3）汉语拼音名：Yixing Ganyan Bingdu Biaomian Kangti Jiance Shiji（jiaotijin Fa）3.2.2.类型：三类6840体外诊断试剂。 3.2.3.规格：100T/盒(25T/筒*4筒)（无卡）；25袋/盒（1支/袋）、50袋/盒（1支/袋）3.3.产品概述
乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析原理、双抗原夹心法，在玻璃纤维纸上预包埋金标记重组乙型肝炎病毒表面抗原，在硝酸纤维素膜上检测线（T）和质控线（C）分别包被重组的乙型肝炎病毒表面抗原和羊抗兔IgG。当检测样本为阳性时，样本中的乙肝病毒表面抗体与胶体金标记的重组乙肝病毒表面抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线（T）时与预包被的重组乙肝表面抗原反应，形成免疫复合物而显现红色条带，游离金标记的兔IgG则在质控线（C）与羊抗兔IgG结合显现红色条带。阴性样本则仅在质控线（C）显色。 3.4.试剂盒组成、储存、有效期 3.4.1.试剂盒组成：
胶体金法各种方法法原理
双 抗体夹心法原理 以FABP 为例（检测抗原） 阳性反应 Y1=F14A （标记了胶体金） Y2=F104B （固定在NC 膜上即T 线） Y3=羊抗鼠IgG （固定在NC 膜上即C 线） 此方法较常用，主要用于较大分子量的蛋白（抗原）的检测。要求两株抗体针对一个抗原的不同位点才可以。也有个别的检测项目是双抗原夹心检测抗体的，原理类似。 竞争法原理 以吗啡为例（检测抗原） 样 品（血金标记F14A 抗 金 金-F14A-FABP-F14A 金-F14A-羊抗鼠 金-F14A-FABP 显示红色 显示红色 金标记F14A 抗 不显色 显示红色 金-F14A-羊抗鼠 阴性反应 阳性反应
阳性反应 Y1=胶体金标记的吗啡单抗 Y2=吗啡-BSA 偶联物 Y3=羊抗鼠 此方法主要用于小分子抗原（毒品、农药、肽链等）的检测。由于抗原分子量小不能直接固定于NC 膜上，常常用化学方法把小分子偶联到BSA 等大分子物质上再固定于NC 膜上。此结果与双抗原夹心法相反，阴性CT 两条都是红线，阳性只有C 线一条红线。 间接法原理 以HIV 为例（检测抗体） 金-吗啡抗体- 吗啡金标记吗啡抗显示红色 不显色 金-吗啡抗体-吗 样品（尿显示红色 显示红色 金标记吗啡抗金-吗啡抗体-羊 阴性尿显示红色 显示红色 阴性反应 阳性反应
此方法主要用于血清中抗体检测，纯化或者重组的抗原固定于NC 膜上，标记多为蛋白A(ProteinA 或叫SPA ，抗体Fc 端结合而与其它蛋白质不结合)。此方法要求胶体金过量，一般来说样品再加入前需要稀释或者加极少量后再加缓冲液。 斑点免疫渗滤法使用就是间接法。 显示红色 不显色
HIV测定(胶体金法)标准操作规程
1、检验目的 用于快速定性检测人全血、血清或血浆样品中的HIV 1/2型抗体。 2、原理 采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定全血、血清或血浆样本中的HIV 1/2型抗体。检测陽性样本时，样本中的HIV抗体与胶体金标记抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组抗原结合形成夹心物而凝聚显色，游离的胶体金标记重组抗原则在对照线处与抗HIV单克隆抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色，30分钟内观察结果即可。 3、性能参数 ●用国家参考品测定，阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、精密性、最低检出量、稳定 性能均符合要求，测定类风湿因子阳性血清、乙型肝炎、甲型肝炎、梅毒及非肝炎传染病患者等各种类型的血清不得引起干扰。 ●本测试条/卡仅用于体外诊断试验，仅用于人全血、血清或血浆，其他体液和样本可能得不 到准确的结果。 ●对于下列物质在所给出的浓度下对测试结果不造成影响： 4、标本要求 ●标本类型：血清或血浆，血浆样本对临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸橼酸钠）无要求。 ●标本采集：见标本采集手册。 ●标本储存和运输：如果血清或血浆样品收集后7天内检测，样品须放在2～8℃保存，如果 大于7天则须冷冻保存；全血标本建议在3天内检测，样品放在2～8℃保存，不得冻存。 ●标本拒收状态：细菌污染，严重溶血或严重脂血标本不能作测定。 5、容器和添加剂类型 使用一般干燥管（不添加任何东西），或EDTA、柠檬酸钠、肝素抗凝管盛放血液。 6、贮存条件及有效期 储存条件：4--30℃密封干燥处保存，有效期为16个月。
7、操作步骤 【血清、血浆样本】 （1）将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。 （2）将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。（3）用微量加样器取60ul血清或血浆样本，加到试剂卡的加样处。 （4）加样后阳性标本可在1—30分钟内检出。经过试验确证，反应时间超过30分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议30分钟内最终观察并记录实验结果。 【全血】 （1）将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。 （2）将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。（3）用微量加样器取60ul全血样本，加到试剂卡的加样处，随即加一滴金标全血样本稀释液。（4）加样后阳性标本可在1—30分钟内检出。经过试验确证，反应时间超过30分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议30分钟内最终观察并记录实验结果。 【结果判定】 阳性：测试条/卡在检测区（T）和对照区(C)位置各出现一条紫红色条带。如果检测区(T)的紫红色条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他方法确认。 阴性：测试条/卡只在对照区(C)位置出现一条紫红色条带。 失效：对照区(C)未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏或者是样本中抗体的含量过高。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并将待测样本稀释后用新的测试条/卡重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与试剂供应商联系。 【注意事项】 ●检测线颜色深浅的程度与样品中抗体的滴度没有一定的必然联系。测试区（T）内的紫红色 条带可呈现颜色深浅的现象，但是，在规定的观察时间内，无论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带，也应判定为阳性结果。 ●本品检测陽性者，需进一步确证。 ●实验环境应保持一定的湿度，避风。避免在高温下进行实验。测试条从包装中取出后，应 尽快进行实验，避免放置于空气中过长时间，导致受潮。
胶体金法各种方法法原理
双抗体夹心法原理 以FABP 为例(检测抗原) 阳性反应 Y1=F14A(标记了胶体金) Y2=F104B(固定在NC 膜上即T 线) Y3=羊抗鼠IgG(固定在NC 膜上即C 线) 此方法较常用,主要用于较大分子量的蛋白(抗原)的检测。要求两株抗体针对一个抗原的不同位点才可以。也有个别的检测项目就是双抗原夹心检测抗体的,原理类似。 竞争法原理 以不啡为例(检测抗原) 样品(血 清)含 FABP 蛋 白 金标记F14A 抗体 金-F14A-FABP 金-F14A-FABP-F14A 金-F14A-羊抗鼠IgG 金-F14A-FABP 羊抗鼠IgG 显示红色 显示红色 金标记F14A 抗体 不显色 显示红色 金-F14A-羊抗鼠IgG 阴性反应 阳性反应
阳性反应 Y1=胶体金标记的不啡单抗 Y2=不啡-BSA 偶联物 Y3=羊抗鼠 此方法主要用于小分子抗原(毒品、农药、肽链等)的检测。由于抗原分子量小不能直接固定于NC 膜上,常常用化学方法把小分子偶联到BSA 等大分子物质上再固定于NC 膜上。此结果与双抗原夹心法相反,阴性CT 两条都就是红线,阳性只有C 线一条红线。 间接法原理 以HIV 为例(检测抗体) 金-不啡抗体-不啡 不啡-BSA 金标记不啡抗体 显示红色 不显色 金-不啡抗体-不啡 羊抗鼠 样品(尿 液)含不啡 显示红色 显示红色 金标记不啡抗体 金-不啡抗体-羊抗鼠 阴性尿液 抗体-不显示红色 显示红色 阴性反应 阳性反应
此方法主要用于血清中抗体检测,纯化或者重组的抗原固定于NC 膜上,标记多为蛋白 A(ProteinA 或叫SPA,抗体Fc 端结合而与其它蛋白质不结合)。此方法要求胶体金过量,一般来说样品再加入前需要稀释或者加极少量后再加缓冲液。 斑点免疫渗滤法使用就就是间接法。 显示红色 不显色
衣原体检测试剂盒 (胶体金法)
衣原体检测（胶体金法） 【使用目的】本品用于定性检测女性宫颈和男性尿道中衣原体的存在，临床辅助诊断衣原体感染，试验结果还需要临床 医生结合患者症状体征及其它检查结果进一步确定。【检测原理】衣原体检测试剂盒（胶体金法）系用抗衣原体脂多糖单克隆抗体和羊抗鼠多克隆抗体分别固定于固相硝 酸纤维素膜，并和胶体金标记的另一抗衣原体脂多糖 单克隆抗体及其他试剂和原料制成，应用胶体温金免疫层析技术，采用双抗体夹心的形式建立的衣原体检 测方法，用于女性宫颈和男性尿道中衣原体的检测。【样本的收集和储存】取样的质量对衣原体的检测极为重要。衣原体的检测质量有赖于准确的样品收集技术，应使样品中 含有大量的细胞成分而不只是体液。 宫颈样品： 1．使用试剂盒提供的配套拭子，或消毒的亚麻、涤纶拭子。在取样前用另外的拭子或棉球将宫颈口外区域 的黏液抹去，将取样拭子插入宫颈管内通过鳞柱状上
皮交界处，直到几乎拭子头看不到。旋转拭子15—20 秒种取出，不要碰到宫颈外及阴道壁。这样能保证得 到更多的柱状上皮细胞，而衣原体主要寄生在柱状上 皮细胞中。 2．宫颈样品也可用细胞刷（未提供）收集（注意：孕妇不可用此方法）。清洁宫颈口后，将细胞刷插入宫颈 管，通过鳞柱状上皮细胞交界处，停留2—3秒，旋转 细胞刷两圈后取出，注意不要碰到阴道壁。 3．如果检测可以即刻进行，将取样后的拭子放入样品处理管中。 男性尿道样品： 尿道用拭子或细胞刷（未提供）可用于尿道取样。病人在取样前至少1小时内不要小便。将拭子或细胞刷插 入尿道2—4厘米，旋转3—5秒钟后取出。如果检测可 以即刻进行，将取样后的拭子放入样品处理管中。 【试验步骤】A。处理样品和对照： 宫颈拭子尿道拭子的处理： 1．将样品处理管放在工作台上，加入6滴溶液A。 2．将采样拭子放入含有溶液A的样品处理管中，室温放置，在处理过程中不断旋转并在管壁挤压拭子，使 液体不断被挤出，重复多次，处理2分钟。
衣原体检测试剂盒-(胶体金法)
衣原体检测试剂盒-(胶体金法)
主题：瓦房店中医医院检验科SOP文件文件编号： wzy-jyk-xj-014 版本：第二次修订 发布日期：2005.01.08 修订日期：2007.01.08 题目:衣原体检测（胶体金法）生效日期：2005.03.01 批准人： 发布部门：质量办编写人： 审批人：页码：第1页，共5页 衣原体检测（胶体金法） 【使用目的】本品用于定性检测女性宫颈和男性尿道中衣原体的存在，临床辅助诊断衣原体感染，试验结果还需要临床 医生结合患者症状体征及其它检查结果进一步确定。【检测原理】衣原体检测试剂盒（胶体金法）系用抗衣原体脂多糖单克隆抗体和羊抗鼠多克隆抗体分别固定于固相硝 酸纤维素膜，并和胶体金标记的另一抗衣原体脂多糖 单克隆抗体及其他试剂和原料制成，应用胶体温金 免疫层析技术，采用双抗体夹心的形式建立的 衣原体检测方法，用于女性宫颈和男性尿道中 衣原体的检测。 【样本的收集和储存】取样的质量对衣原体的检测极为重要。衣原体的检测质量有赖于准确的样品收集技术，应使样品中 含有大量的细胞成分而不只是体液。 宫颈样品： 1．使用试剂盒提供的配套拭子，或消毒的亚麻、涤纶拭子。在取样前用另外的拭子或棉球将宫颈口外区域
的黏液抹去，将取样拭子插入宫颈管内通过鳞柱状上 皮交界处，直到几乎拭子头看不到。旋转拭子15—20 秒种取出，不要碰到宫颈外及阴道壁。这样能保证得 到更多的柱状上皮细胞，而衣原体主要寄生在柱状上 皮细胞中。 2．宫颈样品也可用细胞刷（未提供）收集（注意：孕妇不可用此方法）。清洁宫颈口后，将细胞刷插入宫 颈管，通过鳞柱状上皮细胞交界处，停留2—3秒， 旋转细胞刷两圈后取出，注意不要碰到阴道壁。 3．如果检测可以即刻进行，将取样后的拭子放入样品处理管中。 男性尿道样品： 尿道用拭子或细胞刷（未提供）可用于尿道取样。病人在取样前至少1小时内不要小便。将拭子或细胞刷插 入尿道2—4厘米，旋转3—5秒钟后取出。如果检测可 以即刻进行，将取样后的拭子放入样品处理管中。 【试验步骤】A。处理样品和对照： 宫颈拭子尿道拭子的处理： 1．将样品处理管放在工作台上，加入6滴溶液A。 2．将采样拭子放入含有溶液A的样品处理管中，室温放置，在处理过程中不断旋转并在管壁挤压拭子，使