常用试剂的配制.
常用试剂的配制
1 无 CaT 、M （g +Hanks 液
NaCl 4.5g KCl 0.2g
NaHCO 3 Na 2
HPO ? 12H0 KH
2
PO 4
葡萄糖
0.4% 酚红 将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中 调整pH 值至7.4 , 4C 冰箱保存备用。
2．甲基红试剂 （1）成份
甲基红 0.1g 蒸馏水 95 ％乙醇 300ml
（2）用途：测定甲基红反应。 3. Hanks 液 （原液）
原液甲： NaCl KCl 8g
MgSO 4 - 7H 2O MgCl 2
- 6H 2O
上述试剂加入800ml 双蒸水。溶解。
CaCl
2
2.8g 溶于100ml 双蒸水
上述二液混合，加双蒸水至1000ml ，再加2ml 氯仿防腐，4C 保存。
原液乙：Na 2NPO ? 12H 2O 3.04g KH
2
PO 4
1.2g 葡萄糖
20g
加入800ml 双蒸水，溶解。
0.4%
酚红溶液 100ml
上述二液混合，加双蒸水至1000ml,再加2ml 氯仿防腐，4C 保存。
使用时甲 , 乙原液按下列比例配成 Hanks 液 使用液：原液甲 1份、原液乙 1份、双 蒸水18份滤过，8磅20min 灭菌，放4C 冰箱保存，使用前用NaHC 调整PH 值。
4. 0.4%酚红溶液
称取0.4g 酚红置研钵中研碎，逐渐加入0.lmol/LNaOH 并不断研磨，直到所有的颗粒
0.175g
0.076g 0.03g 0.5g
2.5ml
,最后补加双蒸水至500ml,以5.6%NaHCO
200ml
160g
2g 2g
几乎完全解，加入0.lmol/LNaOHl0ml ，然后倒入容量瓶中，并加蒸馏水至l00ml, 棕色瓶保存备用。
5. pH7.2 Tris-NH 4CI溶液（红细胞崩解液）
Tris （三羟甲基氨基甲烷） 1.03g
NH 4CI （氯化氨） 3.735g
加双蒸水至500ml，用浓HC调pH=7.2, 10磅15min灭菌后放4C保存。
6. 0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液
巴比妥 1.84g
加蒸馏水200ml 加热溶解
巴比妥纳10.3g
叠氮纳0.2g
加蒸馏水溶解, 并补加到1000ml 。
7. 磷酸盐缓冲液（PB）
A液：为0.2moI/L 磷酸二氢钠水溶液，NaH2PQ HO 27.6g,溶于蒸馏水中，最后补加蒸馏水至1000ml 。
B 液：为0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液，Na2HPQ7H2O 3.6g （或Na z HPO, 12H2O
71.6g,或NaHPO?2比0 35.6g ）,加蒸馏水溶解，最后加水至1000ml。若再加蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。
8. 0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液（BBS）
硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）0.46g
硼酸（H2BO3）0.51g
加蒸馏水至100ml 溶解。
9. PH7.4 0.01mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS）
配制方法一：
0.2mol/L Na 2HPO （ Na2HPO? 12HO 71.6g 加蒸馏水至1000ml）
0.2mol/L NaH 2PQ （NaHPQ - 2HO 35.6g 加蒸馏水至1000ml）
取0.2mol/L Na 2HPO 81.0ml 加0.2mol/L NaH 2PQ 19ml,再加1900mlHO和17gNaC
即为PH7.4 0.01mol/L PBS。
PH7.4 0.01mol/L PBS 再加入0.05%Tween-2（即为ELISA试验的洗涤液。
配制方法二：
甲液（0.1mol/LKH2PO溶液）：KHPO13.608g，加蒸馏水至1000ml。
乙液（0.1mol/L Na 2HPO容液）：NQHPO35.814g，加蒸馏水至1000ml。
取甲液19ml，乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000m即可。
再加入0.05%Twee n-2C即为ELISA试验的洗涤液。
10．0.05mol/L pH9.6 碳酸缓冲液Na2CO3 1.59g
NaHCO 3 2.93g
加蒸馏水至1000ml。ELISA实验包被用。
11. 0.01mol/L pH7.4 PBS 内含2%BS（牛血清白蛋白）
取BSA2m加0.01mol/L pH7.4PBS 至100ml即可。ELISA实验封闭用。
12. PH5.0磷酸-柠檬酸缓冲液。
0.2mol/L Na 2PO4（28.4g/L） 25.7ml
0.1mol/L 柠檬酸（19.2g/L） 24.5ml
加蒸馏水至100ml即为pH 5.0磷酸-柠檬酸缓冲液。
13. 底物溶液
pH 5.0磷酸-柠檬酸缓冲液加入邻苯二胺1mg/ml，再加入30%勺HO2 （1卩l/ml）溶解后即为ELISA底物液，临用前配制，避光保存。
14. 2mol/L 硫酸
浓HSQ （36N）取1ml36N的HSQ缓缓加入18 ml蒸馏水内即为2mol/L，用于ELISA 实验终止反应。
15. 清洁液的配制清洁液分高、中、低液三种。
低浓度清洁液
重铬酸钾100g
水750ml
硫酸250ml
中浓度清洁液
重铬酸钾60g
水300ml
硫酸460ml
高浓度清洁液
重铬酸钾100g
水200ml
硫酸800ml
先将重铬酸钾倒入自来水中，然后加入浓硫酸，边加硫酸边用玻璃棒搅拌。由于加入浓硫酸后产生高热，故加酸时要慢，溶器应用耐酸耐高温塑料或陶器制品。
配制好的清洁液，应存于有盖的玻璃溶器内。需要浸泡的玻璃器皿一定要干燥，如
果清洁液经过长期使用已呈黑色，表明已经失效，不宜再用。由于清洁液有强腐蚀性，故操作时要十分注意。
16．PH6.4 l/l5mol/ml 磷酸盐缓冲盐水（PBS）：
1）l/l5mol/ml 磷酸二氢钾溶液
KH 2PO4 9.04g
蒸馏水加至1 000ml
2
）
l/l5mol/ml 磷酸氢二钠溶液
Na 2HPQ? 2" O 11.87g
（或Na2HPO?l2H2 O 23.86g
蒸馏水加至
1000ml
3
）
PH6.4 l/l5mol/ml 磷酸盐缓冲盐水（PBS）
l/l5mol/ml 磷酸二氢钾溶液73ml
l/l5mol/ml 磷酸氢二钠溶液27ml
NaCl 0.5g
混匀溶解即可。
17．柯氏试剂（靛基质试剂）
（1）成份
纯戊醇150ml
浓盐酸50ml
对二甲基氨基苯甲醛10g （2）制法：将对二甲基氨基苯甲醛加入纯戊醇内，使其溶解。将浓盐酸一滴滴慢慢加入，边加边摇，不能加得太快，以致温度升高溶液颜色变深。
（3）用途：测定细菌能否产生吲哚。
常用试剂的配制
1、2，4－二硝基苯肼溶液 I．在15mL浓硫酸中，溶解3克2，4－二硝基苯肼。另在70mL95％乙醇里加20mL 水，然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液（若有沉淀应过滤）。 Ⅱ．将1.2克2，4一二硝基苯肼溶于50mL30％高氯酸中，配好后储于棕色瓶中，不易变质。 I法配制的试剂，2，4－二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。Ⅱ法配制的试剂由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水中醛且较稳定，长期贮存不易变质。2、卢卡斯（Lucas）试剂 将34克无水氯化锌在蒸发皿中强热熔融，稍冷后放在干燥器中冷至室温。取出捣碎，溶于23mL浓盐酸中（比重1.187）。配制时须加以搅动，并把容器放在冰水浴中冷却，以防氯化氢逸出。此试剂—般是临用时配制。 3、托伦（Tollens）试剂 I．取0.5mL10％硝酸银溶液于试管里，滴加氨水，开始出现黑色沉淀，再继续滴加氨水，边滴边摇动试管，滴到沉淀刚好溶解为止，得澄清的硝酸银氨水溶液，即托伦试剂。 Ⅱ．取一支干净试管．加入1mL5％硝酸银，滴加5％氢氧化钠2滴，产生沉淀，然后滴加5％氨水，边摇边滴加，直到沉淀消失为止，此为托伦试剂。 无论I法或Ⅱ法，氨的量不宜多，否则合影响试剂的灵敏度。I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱，在进行糖类实验时，用I法配制的试剂较好。 4、谢里瓦诺夫（Seliwanoff）试剂 将0.05g间苯二酚溶于50mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀释至100mL。 5、希夫（Schiff）试剂 在100mL热水中溶解0.2g品红盐酸盐，放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释至200mL。 或先配制l0mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加入0.2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200mL。 此外，也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加入0.5g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500mL。 本试剂所用的品红是假洋红（Para-rosaniline或Para-Fuchsin），此物与洋红（Rosaniline或Fuchsin）不同。希夫试剂应密封贮存在暗冷处，倘若受热或见光，或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红包。遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。但应指出，试剂中过量的二氧化硫愈少，反应就愈灵敏。 6、0.1％茚三酮溶液 将0.1g茚三酮溶于124.9mL95％乙醇中，用时新配。 7、饱和亚硫酸氢钠 先配制40％亚硫酸氢钠水溶液，然后在每100mL的40％亚硫酸氢钠水溶溶液中，加不含醛的无水乙醇25mL，溶液呈透明清亮状。 由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3?10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜，然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解力止，配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。 8、饱和溴水 溶解15克溴化钾于100mL水中，加入10g溴，振荡即成。 9．莫利许（Molish）试剂
试剂配制方法
试剂的配制 1、酚酞指示剂：酚酞1g+无水乙醇100ml混合液0.5+50mL 2、淀粉指示剂：淀粉0.5g + 100ml水（加热100℃保持2-3分钟），冷却至室温备用。 随配随用，6天失效。 3、冰乙酸氯仿（三氯甲烷）混合液：冰乙酸60ml + 三氯甲烷40ml 4、树脂粉二硫化碳饱和溶液：纯净的树脂粉2-3g + 二硫化碳100ml，摇晃几分钟使 其成为饱和溶液，再用滤纸过滤后即可。 5、碘化钾KI饱和溶液：碘化钾10g + 蒸馏水5ml 6、乙醇乙醚混合液：无水乙醇100ml + 无水乙醚100ml + 5滴1%的酚酞指示剂 7、KOH-甲醇溶液配制：K（OH）11.2 g + 甲醇100ml 8、KOH配制：KOH称取14g + 2000ml蒸馏水，放置一个月标定 KOH标准溶液的标定及浓度： 清洗2个瓶子→称重（取平均值误差小于0.00005g）→邻苯二甲酸氢钾0.6g（烘105℃90分钟）→加蒸馏水80ml完全溶解→加2-3滴1%酚酞指示剂. 用上面配制好的邻苯二甲酸氢钾溶液来滴定待标定的KOH标准溶液， 滴加到变为微红色（30秒不变色）即可。记下滴定体积V。 邻苯二甲酸氢钾重量M KOH标准溶液的浓度= 滴定体积V ×邻苯二甲酸氢钾分子量（0.2042） 9、硫代硫酸钠溶液：硫代硫酸钠26g + 碳酸钠0.2g（或硼砂3.8g）+ 蒸馏水 至1000ml ，放置一周标定。 标定：称取0.15g在120℃干燥的重铬酸钾，置于500ml碘量的瓶中，加入50ml蒸馏水使之溶解，加入2g碘化钾使之溶解，再加入（1+8）比例的硫酸溶液20ml（10ml的浓硫酸+80ml 蒸馏水），密塞摇匀。放置阴暗处10分钟后加250ml蒸馏水。 用硫代硫酸钠的溶液滴至浅黄色， 再加入0.5%的淀粉指示剂3ml,继续滴定滴至蓝色消失而显亮绿色。 重铬酸钾M 硫代硫酸钠溶液的浓度= 滴定体积V ×重铬酸钾分子量（0.04903） 4. 硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）
常用试剂的配制.
常用试剂的配制 1．无Ca2+、Mg2+Hanks液 NaCl 4.5g KCl 0.2g NaHCO 3 0.175g Na 2HPO 4 ·12H 2 O 0.076g KH 2PO 4 0.03g 葡萄糖 0.5g 0.4%酚红 2.5ml 将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO 3调整 pH 值至7.4，4℃冰箱保存备用。 2．甲基红试剂 （1）成份 甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml 95％乙醇 300ml （2）用途：测定甲基红反应。 3．Hanks液（原液） 原液甲： NaCl 160g KCl 8g MgSO 4·7H 2 O 2g MgCl 2·6H 2 O 2g 上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。 CaCl 2 2.8g溶于100ml双蒸水 上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。 原液乙： Na 2NPO 4 ·12H 2 O 3.04g KH 2PO 4 1.2g 葡萄糖 20g 加入800ml双蒸水，溶解。 0.4%酚红溶液100ml 上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。 使用时甲,乙原液按下列比例配成Hanks 液使用液：原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过，8磅20min灭菌，放4℃冰箱保存，使用前用NaHCO 3 调整PH值。 4．0.4%酚红溶液 称取0.4g酚红置研钵中研碎，逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨，直到所有的颗粒
几乎完全解，加入0.lmol/LNaOHl0ml，然后倒入容量瓶中，并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。 5．pH7.2 Tris-NH 4 CI溶液(红细胞崩解液） Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03g NH 4 Cl（氯化氨) 3.735g 加双蒸水至500ml，用浓HCl调pH=7.2，10磅15min灭菌后放4℃保存。 6．0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.84g 加蒸馏水 200ml 加热溶解 巴比妥纳 10.3g 叠氮纳 0.2g 加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。 7．磷酸盐缓冲液(PB) A 液：为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液 ,NaH 2PO 4 ·H 2 O 27.6g, 溶于蒸馏水中, 最 后补加蒸馏水至 1000ml 。 B 液：为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液 ,Na 2HPO 4 .7H 2 O 3.6g（或 Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g, 或Na 2HPO 4 · 2H 2 O 35.6g ）, 加蒸馏水溶解，最后加水至 1000ml。若再加 蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。 8．0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液（BBS） 硼酸钠（Na 2B 4 O 7 .10H 2 O） 0.46g 硼酸（H 2BO 3 ） 0.51g 加蒸馏水至100ml 溶解。9．PH7.4 0.01mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法一： 0.2mol/L Na 2HPO 4 （ Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g加蒸馏水至1000ml） 0.2mol/L NaH 2PO 4 （NaH 2 PO 4 ·2H 2 O 35.6g加蒸馏水至1000ml） 取0.2mol/L Na 2HPO 4 81.0ml 加0.2mol/L NaH 2 PO 4 19ml,再加1900mlH 2 O和 17gNaCl即为PH7.4 0.01mol/L PBS。 PH7.4 0.01mol/L PBS再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。 配制方法二： 甲液（0.1mol/LKH 2PO 4 溶液）：KH 2 PO 4 13.608g，加蒸馏水至1000ml。 乙液（0.1mol/L Na 2HPO 4 溶液）：Na 2 HPO 4 35.814g，加蒸馏水至1000ml。 取甲液19ml，乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。
日常溶液的配制
一.标准溶液配置 -------------------------------------------------------------------------------- 1. 0.0588mol/L高锰酸钾标准溶液 2. 0.1NＮa2S2O3·5H2O标准溶液的制备,24.82g/L 3. 6N醋酸(HAC) 4. １０％碘化钾溶液 二. 指示剂---------- ------------------------------------------------------------------ -------- 3 1. 甲基橙 2. 甲基红 3. 酚酞 4. １０％铬酸钾指示液 5. ０.５％淀粉指示液 6. 碘化钾淀粉试纸 7. 还原黄G试纸的制备 三、试剂的测定 ------------------------------------------------------------------------------- 4 1. 次氯酸钠质量浓度的测定 2. 漂白粉中有效氯的测定 3. 冰醋酸（HAC） 4. 硫化碱（Na2S） 5. 双氧水质量浓度及分解率的测定 6. 烧碱浓度测定 7. 双氧水浓度测定 四．测试方法--------------------------------------------------------------------------------- 6
1. 比移值测定法（滤纸／染液上升法） 2. 缩水率测定 3. pH值的测定 4. 生物整理用纤维素酶活力的测定方法 ４.１．滤纸崩溃法 ４.２．CMC粘度法 一. 标准溶液配置 1．0.0588mol/L高锰酸钾标准溶液 称取9.5g纯高锰酸钾(KMnO4)溶于1L蒸馏水中,再煮沸15min左右,待冷却后盖紧,避免与尘埃及有机物接触,同时不可与强光接触.静置数天后,用石棉过滤储存于棕色试剂瓶中,并放置暗处,然后用草酸钠标定. ２．０.１N Na2S2O3·5H2O标准溶液的制备24.82g/L 制备：称取２５g化学纯粹的硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O），溶解于１Ｌ新煮沸（煮沸以驱除水中溶解的二氧化碳和防止微生物的作用，如有二氧化碳的存在，并与水反应生成碳酸，会使硫代硫酸钠起分解作用．）而冷却的，加有0.1g无水碳酸钠的蒸馏水中，搅动使溶解，移入暗色大瓶中保存，瓶口用塞子盖紧，待校准． 制备或保存时应注意下列几点：日光能促进Ｎa2S2O3 溶液分解作用，所以Ｎa2S2O3溶液应该保存在清洁的有色瓶中,尽可能避免和空气接触．制成的Ｎa2S2O3溶液，它的浓度随放置时间稍有改变，在最初１０－１４天中，浓度常常有些增加，过此以后浓度就会慢慢减小．若在配置溶液时加入Na2CO3，使其在溶液中的浓度约为0.01－0.02%，就可以防止溶液的分解．
关于生物化学常用试剂配制
常规试剂配制和测定方法 一、溶液的配制 1. Mandels营养盐溶液（1000 mL） 名称重量（g） 硫酸铵（(NH4)2SO4）14 磷酸二氢钾（KH2PO4）20 尿素（H2NCONH2） 3 硫酸镁（MgSO4·7H2O） 3 氯化钙（CaCl2·2H2O） 4 注：用煮沸10 min后的蒸馏水配制。 2. Mandels微量元素溶液（1000 mL） 名称重量（g） 氯化钴（CoCl2·6H2O） 硫酸锌（ZnSO4·7H2O） 硫酸锰（MnSO4·H2O） 硫酸亚铁（FeSO4·7H2O） 注：用煮沸10 min后的蒸馏水配制。 3. DNS试剂的配制（1000 mL） （1）取：3,5-二硝基水杨酸（C7H4N2O7）7.5 g 氢氧化钠（NaOH ）14.0 g 充分溶解于1000 mL 水中（水预先煮沸10 min） （2）加入：酒石酸钾钠（C4H4O6KNa·4H2O）216.0 g 苯酚（在50 ℃水浴中融化）mL 偏重亚硫酸钠（Na2S2O5） 6.0 g
（3）充分溶解后盛于棕色瓶中，放置5天后便可使用，平时盛一小瓶(250 mL)使用，要放在冰箱中冷藏。此溶液每月配制一次。 注意：倒入瓶中时要尽量装满！！ 4. 考马斯亮蓝G-250的配制（1000 mL） 称考马斯亮蓝G-250 100 mg即0.1g溶于50mL 95%乙醇中，加入100 mL 85 %磷酸，用蒸馏水稀释至1000 mL ，滤纸过滤。最终试剂中含%（w/v）考马斯亮蓝 G-250，%（w/v）乙醇，%（w/v）磷酸。 5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制（1000 mL） 名称分子量Mn 重量(g) 柠檬酸（C6H8O7·H2O）210 210 NaOH 40 准确称取柠檬酸210 g，溶于约750 mL煮沸（10 min）蒸馏水中，待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g，完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中，冷却后将容量瓶定容到1000 mL（原始）。（检验方法：取1.0 M柠檬酸缓冲溶液稀释20倍，测定稀释液的pH值，pH值应为） 6. 标准糖溶液的配制和标准方程的测定 （1）标准糖溶液的配制 准确称取2.000 g葡萄糖/木糖（葡萄糖/木糖需105 ℃烘干3 h），蒸馏水溶解，全部转移至1 L容量瓶内，摇匀，配制成2 g/L葡萄糖/木糖溶液。 取9个100 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管，分别吸取2 g/L葡萄糖/木糖溶液10 mL、20 mL、30 mL、40 mL、50 mL、60 mL、70 mL、80 mL、90 mL依次加入容量瓶，蒸馏水定容，摇匀。即为0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/木糖标准溶液。 取6个30 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管，分别吸取2 g/L葡萄糖溶液10 mL、12 mL、14 mL、16 mL、18 mL、20 mL依次加入容量瓶，每瓶再加入mL柠檬酸缓冲液，蒸馏水定容，摇匀。即为1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖。（2）标准方程的测定： ①葡萄糖/木糖标准方程的测定
各实验试剂配制方法
NOx的测定试剂配制 1、1.00g/L盐酸萘乙二胺贮备液：称取0.50g(N-l-萘基)乙二胺盐酸盐(C10H7NH(CH2)NH2·2HCl)于500ml容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液贮于密闭的棕色试剂瓶中，在冰箱中冷藏可稳定三个月。 2、显色液：称取5.0g对氨基苯磺酸(NH2C6H4S03H)，溶解于约200ml热水中，将溶液冷却至室温，全部移入1000ml容量瓶中，加入50.0ml盐酸萘乙二胺贮备液和50ml冰乙酸，用水稀释至标线。此溶液于密闭的棕色瓶中，在25℃以下暗处存放，可稳定三个月。若呈现淡红色，应弃之重配。 3、吸收液：临用时将显色液和水按4+1(V/V)比例混合，即为吸收液。吸收液的吸光度不超过0.005(540nm，lcm比色皿，以水为参比)。否则，应检查水、试剂纯度或显色液的配制时间和贮存方法。 4、亚硝酸钠标准贮备液：准确称取0.3750g亚硝酸钠(NaN02，优级纯，预先在干燥器内放置24h)溶解于水，移入1000ml容量瓶中，用水稀释至标线。贮于密闭的棕色试剂瓶中，可稳定三个月。此溶液每毫升含0.250mg亚硝酸根。 5、亚硝酸钠标准使用液：吸取亚硝酸钠标准贮备液1.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至标线。临用前现配。此溶液每毫升含2.5μg亚硝酸根。 6、硫酸溶液C(1/2H2S04)＝lmol/L：取15ml硫酸(ρ＝1.84g/m1)徐徐加入500ml水中。 7、酸性高锰酸钾溶液：称取25g高锰酸钾，稍微加热使其全部溶解于500ml水中，然后加入lmol/L硫酸溶液500ml，混匀，贮于棕色试剂瓶中。
SO 2的测定试剂配制 1、环己二胺四乙酸二钠溶液C(CDTA-2Na)＝0.0050mol/L ：称取1.82g 反式-l ，2-环己二胺四乙酸((trans-1，2-Cyclohexylenedinitrilo)tetraacetic acid ，简称CDTA)，加入1.50mol/L 的氢氧化钠溶液6.5ml ，溶解后用水稀释至100ml 。 2、甲醛缓冲吸收液贮备液：吸取36%～38%的甲醛溶液5.5ml ，0.050mol/L 的CDTA-2Na 溶液20.0ml ；称取2.04g 邻苯二甲酸氢钾，溶解于少量水中；将三种溶液合并，用水稀释至100ml ，贮于冰箱，可保存10个月。 3、甲醛缓冲吸收液：用水将甲醛缓冲吸收液贮备液稀释100倍而成，此吸收液每毫升含0.2mg 甲醛，临用现配。 4、氢氧化钠溶液C(NaOH)＝1.50mol/L 。 5、0.60％(m/V)氨磺酸钠溶液：称取0.60g 氨磺酸(H 2NSO 3H)于烧杯中，加入1.50mol/L 氢氧化钠溶液4.0ml ，搅拌至完全溶解后稀释至100ml ，摇匀。此溶液密封保存可使用l0d 。 6、碘贮备液C(1/2I 2)＝0.10mol/L ：称取12.7g 碘(I 2)于烧杯中，加入40g 碘化钾和25ml 水，搅拌至完全溶解后，用水稀释至1000ml ，贮于棕色细口瓶中。 7、碘使用液C(1/2I 2)＝0.05mol/L ：量取碘贮备液250ml ，用水稀释至500ml ，贮于棕色细口瓶中。 8、0.5％(m/V)淀粉溶液：称取0.5g 可溶性淀粉，用少量水调成糊状，慢慢倒入100ml 沸水中，继续煮沸至溶液澄清，冷却后贮于试剂瓶中。临用现配。 9、碘酸钾标准溶液C(1/6KIO 3)＝0.1000mol/L ：称取3.5667g 碘酸钾(KIO 3，优级纯，经110℃干燥2h)溶解于水，移入1000ml 容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。 10、盐酸溶液(1+9)。 11、硫代硫酸钠贮备液C(Na 2S 2O 3)＝0.10mol/L ：称取25.0g 硫代硫酸钠(Na 2S 2O 3·5H 2O)，溶解于1000ml 新煮沸并已冷却的水中，加入0.20g 无水碳酸钠(Na 2CO 3)，贮于棕色细口瓶中，放置一周后备用。如溶液呈现混浊，必须过滤。 12、硫代硫酸钠标准溶液C(Na 2S 2O 3)＝0.05mol/L ：取250.0ml 硫代硫酸钠贮备液，置于500ml 容量瓶中，用新煮沸并已冷却的水稀释至标线，摇匀。 标定方法：吸取三份0.1000mol/L 碘酸钾标准溶液10.00m1分别置于250ml 碘量瓶中，加入70ml 新煮沸并已冷却的水，加入1g 碘化钾，摇匀至完全溶解后，加入(1+9)盐酸溶液10ml ，立即盖好瓶塞，摇匀。于暗处放置5min 后，用硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液至浅黄色，加入2ml 淀粉溶液，继续滴定溶液至蓝色刚好褪去为终点。硫代硫酸钠标准溶液的浓度按下式计算： V C 00 .101000.0?= （2-1-1） 式中：C ——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L ； V ——滴定所消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，ml 。 13、0.05％(m/V)乙二胺四乙酸二钠盐(Na 2EDTA)溶液：称取0.25gNa 2EDTA(C 10H 14N 2O 8Na 2·2H 2O)，溶解于500ml 新煮沸但已冷却的水中，临用现配。 14、二氧化硫标准溶液：称取0.200g 亚硫酸钠(Na 2SO 3)，溶解于200mlNa 2EDTA 溶液中，缓缓摇匀以防充氧，使其溶解。放置2～3h 后标定。此溶液每毫升相当于320～400μg 二氧化硫。 标定方法：吸取三份20.00ml 二氧化硫标准溶液，分别置于250ml 碘量瓶中，加入50ml 新煮沸但已冷却的水、20.00ml 碘使用液及lml 冰乙酸，盖塞，摇匀。于暗处放置5min 后，用硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液至浅黄色，加入2ml 淀粉溶液，继续滴定至溶液蓝色刚好
实验室常用生化试剂配方
实验室常用生化试剂配方 1.常用抗生素配制以及使用说明（参考链霉菌室操作手册2019版） 抗生素 英文名称及缩写 抗性基因 贮藏液浓度(mg/ml) 100 25(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 35 25(0.15M NaOH配) 50(DMSO配) 50 50 MM 使用终浓度（μg/ml）链霉菌 2CM YEME 大肠杆菌 LA或LB 氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMP Ampicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprim cat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph －* 10 10 2 5 10 5 100 10 －－ 25 25 20 25 10 － 50 －－－－－－ 2.5 － 5 50-100 25 － 25 50 25 25 20 10-30
注意事项： (1) –表示无记录或不能使用，贮存液除特别说明外均用无菌水配制，配制过程请 确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装； （2）Km 和Am有交叉抗性，同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量，并 设置阴性对照； （3）Hyg、Vio易见光分解，配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。有些抗生素需要在低盐的环境（如DNA培养基）下筛选效率较高，如Hyg, Km, Vio （4）用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并 分装；氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装，无需过滤除菌，但需确 保配制贮存液所用溶剂（无水乙醇、DMSO）未遭受污染，建议配制氯霉素时使用新的无水 乙醇，不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇，以防止污染；DMSO，即二甲亚砜，易 挥发，有剧毒； （5）长期不用的抗生素请置于-20℃保存，抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存，经常使用时可以暂置于4℃保存； （6）抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整； (7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末，配制过程中建议穿工作服，戴一次 性橡胶手套及口罩，及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具，以避免抗生素及溶剂 对自身的损伤及对工作环境的污染。 注意事项： (1)表中所列酶均可以用无菌水配制，也可以用相应的缓冲液配制，缓冲液配制方法 参考《分子克隆实验指南（第3版）》： 蛋白酶 K缓冲液：50 mM Tris（pH 8.0），1.5 mM 乙酸钙； RNase A缓冲液：TE （pH 7.6）：10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA；溶菌酶缓冲液：10 mM Tris-HCl（pH 8.0）； (2) RNase A配制好后沸水浴处理5 min，取出贮存RNase A后首次使用时也需沸水 浴处理5 min后再使用； （3）制备原生质体时使用的溶菌酶配制时需过滤除菌，其他情况一般无需过滤除菌； （4）所有酶均应在-20℃保存，使用过程中避免反复冻融，配制过程中尽量避免外界 污染。 （1）IPTG用无菌水配制，0.22μm一次性滤膜过滤除菌，分装保存于-20℃；
盐酸标准溶液的配制和标定
盐酸标准溶液的标定 一．仪器与试剂 仪器：全自动电光分析天平 1台 （1）称量瓶 1只 （2）试剂瓶 1000ml 1个 （3）锥形瓶 250ml 3个 （4）酸式滴定管 50ml 1支 （5）量筒 50mL 1只 试剂： （1）0.1mol/L 盐酸待标定溶液 （2）无水碳酸钠（固基准物） （3）溴甲酚绿-甲基红混合指示剂 二、步骤 0.1mol/L 盐酸标准溶液的标定 1．标定步骤 用称量瓶按递减称量法称取在270~300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠0.15~0.22g(称准至0.0002g)，放入250ml 锥形瓶中，以50ml 蒸馏水溶解，加溴甲酚绿-甲基红混合指示剂10滴（或以25ml 蒸馏水溶解，加甲基橙指示剂1~2滴），用0.1mol/L 盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色（或由黄色变为橙色），加热煮沸2分钟，冷却后继续滴定志溶液呈暗红色（或橙色）为 终点。平行测定3次，同时做空白实验。以上平行测定3次的 算术平均值为测定结果。 2．计算 ()99 .52100001?-?=V V m C HCl 式中： m —基准无水碳酸钠的质量，g; V 1—盐酸溶液的用量，ml; V 0—空白试验中盐酸溶液的用量，ml; 52.99—1/2 Na 2CO 3摩尔质量，g/mol C HCL —盐酸标准溶液的浓度，mol/L.
氢氧化钠溶液的标定 1、试剂： （1）0.1000mol/L 氢氧化钠待标定溶液 （2）酚酞指示剂 2、仪器： （1）全自动电光分析天平 1台 （2）称量瓶 1只 （3）碱式滴定管 （50mL ） 1支 （4）锥形瓶 （250mL ） 3支 （5）烧杯 （250mL ） 2只 （6）洗瓶 1只 （7）量筒 （50mL ） 1只 3、测定步骤： 准确称取在110℃~120℃准确称取在110~120℃烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾0.5~0.6g(称准至0.0002g)，放入250ml 三角瓶中，加入250ml 的蒸馏水溶解，加酚酞指示剂2滴，用0.1mol/LNaOH 溶液滴定至由无色变为红色30秒不褪色为终点，平行测定3次，同时作空白试验。 4、计算：C (NaOH)=22 .204)(100001?-?V V m 式中：m —邻苯二甲酸氢钾的质量，g 1V —NaOH 溶液的用量，ml 0V —空白试验NaOH 溶液的用量，ml 204.22 —邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量，g/mol NaOH C —NaOH 标准溶液的浓度，mol/L
化验室化学试剂管理规定
化验室化学试剂管理规定 1.范围和目的 本规程适用于品检科所有化学试剂以及配制试剂。 制定本规程的目的是为了建立化验室化学试剂的购买、接受、储存、发放、使用、销毁使用管理规程，使化验员能正确地使用试剂，保证化验工作质量。 2.化学试剂的购买： 技术员根据库存量及化学试剂检验需要量提出购买计划，经化验室负责人审核，公司厂长批准，交供应科采购员购买。 3.化学试剂的入库 购买后由采购员直接交给仓库管理员并办理入库手续。 技术人员根据购买计划办理出库手续并通知化学试剂管理员到出库接受。 化学试剂管理员先检查包装的完好性，封口是否严密,试剂无泄漏，标签是否粘贴牢固无破损，内容清晰,贮存条件明确，瓶签已部分脱胶的，应及时用胶水粘贴。无标签的试剂不得入库。严格按采购计划单内容，逐一核对。 化学试剂保管员必须每天检查一次温湿度表并记录。超出规定范围的应及时调整。 无标签的试剂应予销毁。 4.化学试剂的领用 化验员根据检验需要量提出领用要求。 化学试剂管理员根据化验员的要求发放化学试剂，并填写化学试剂领用记录。 5.化学试剂贮存 原装化学试剂贮存环境 55 5 55℃,相对湿度以45-75%为宜。 5应有良好的通风设备。 化验室内化学试剂的贮存 5 配制好的化学试剂应存放于试剂架上。性质不稳定的配制试剂应根据不同的性质存放，如放在阴暗处、冰箱等地方。使用化学试剂的过程中应特别注意其外观的变化。 配制化学试剂一般贮存1~2个月为宜,过期不得使用,须重新配制。在使用过程中发现有沉淀的，亦不得使用。 55需要冷藏保存的化学试剂应放在冷藏箱内保存。 易潮解、易失水风化、易挥发易吸收、二氧化碳、易氧化、易吸水变质化学试剂，需密闭保存或蜡封保存,应存放试剂柜下部柜中,平时应关门上锁；。 易爆炸品、易燃品、腐蚀品应单独存放,平时应关门上锁,剧毒品用后归还专用库（柜）。某些高活性试剂应低温干燥贮放。 保持室内清洁,通风和温湿度应符合规定。 每日检查一次消防灭火器材的完好状况,保证随时可以使用。
药剂配制方法
化学需氧量的药剂配制方法 1.重铬酸钾标准溶液： 浓度为C=0.2500mol/L的重铬酸钾标准溶液：将13g（25g）的重铬酸钾在105℃干燥箱里烘干，时间为2小时放置干燥器内空气冷却（冷却时，要用定性滤纸把口盖住烧杯口，以防潮气），再用精细天平称重（称后的重量为12.258g[24.516g],当天烘干，当天称量），放置烧杯中用纯水稀释，随放随搅，保证完全溶解，然后放入容量瓶中，稀释至1000ml(2000ml)。 2.硫酸-硫酸银试剂：向2.5L硫酸中加入25g硫酸银，放置3-4 天使之溶解，并混匀，使用前小心摇动。 3.硫酸亚铁铵标准滴定溶液： a:称40g(80g)硫酸亚铁铵放入大烧杯中。 b:加入700ml(1400ml)纯水。 C:加入20ml(40ml)浓硫酸。 d:搅棒搅匀，放24小时。 e:最后稀释至1000ml(2000ml). 4.试亚铁林指示剂： 溶解0.7g七水合硫酸亚铁于50ml的水中，加入1.5g邻菲罗啉，搅动加热至完全溶解，冷却后加水稀释至100ml。
阴离子表面活性剂试剂配制方法 1.4%氢氧化钠溶液： 取4g氢氧化钠用水定容至100ml。 2.3%硫酸 取3ml硫酸用水定容至100ml. 2.亚甲蓝溶液：称取50g一水合磷酸二氢钠（56.5g二水合磷酸 二氢钠）置于烧杯中，溶于水，慢慢岩壁加入6.8ml浓硫酸，混匀，转移入1000ml容量瓶中。另称取30mg亚甲蓝（指示级），用50ml水溶解后也移入容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中。 3.酚酞指示剂溶液： 将1g酚酞溶于50ml乙醇，然后边搅拌边加入50ml水，滤去沉淀物。
生物学常用试剂配制完整版
生物学常用试剂配制 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
常用试剂 储存注意事项：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃，相对湿度不超过80％。包装必须密封，切勿受潮。应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。 操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装及容器损坏。 EDTA（PH ） 组分浓度: mol/L EDTA（MW：） 配制量: 500ml 配制方法: 1．称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。 2．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。 3．用NaOH调节调节pH值至（约需加入20g固体NaOH），当pH 接近时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。 4．高温高压灭菌后，室温保存半年。 5M NaCl 组份浓度： 5mol/L NaCl (MW： 配制量： 1L 配制方法： 1.准确称取氯化钠，置于1L的蓝盖瓶中。 2.用去离子水溶解并稀释至1L。 3.高温高压灭菌后，常温保存。 CaCl2 组份浓度：L CaCl2 (MW： 配制量： 50ml 配制方法: 1.准确称取氯化钙 g于50ml的conical tube中。 2.用去离子水溶解并稀释至500ml，用μm滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conical tube。 3.贮存于4℃。 50% 甘油 组分浓度： 50%(V/V) glycerol 配制量： 100ml 配制方法: 1. 量取下列试剂，置于250ml蓝盖瓶中： 100% glycerol 50ml 2.加入50ml去离子水，充分搅拌溶解。 3.高温高压灭菌，4℃保存。 4.使用时，到超净台分装。 Amp-氨苄青霉素（钠盐） 放置：置于4°C冰箱
常用试剂配制及显色方法
https://www.360docs.net/doc/b25764491.html, 常用试剂配制及显色方法 （一）通用显色剂 1．重铬酸钾——硫酸 一般有机物均能显色，不同化合物显示不同颜色。 喷洒剂：5克重铬酸钾溶于100ml，40%硫酸中。喷洒后加热至150o C斑点出现。2．碘：检查一般有机物 （1）碘蒸汽：在一个密闭玻璃皿先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色，有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可提高 显色的灵敏度。 （2）0.5%碘的氯仿溶液，取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。3．碘——碘化钾溶液：很我有机物虽黄色（配法见后）。 4．5%——磷钼酸乙醇溶液：喷后120o C烤，还原性物质显兰色，再用氨气熏，则背景变为无色。 5．20%磷酸乙醇溶液：喷后120o C，还原性物质显兰色。 6．碱性高锰酸钾试剂：还原性物质在淡红背景上显黄色。溶液I:1%高锰酸钾溶液。 溶液II：5%碳酸钠溶液。 溶液I和溶液II等量混合使用。 7．中性0.05%高锰酸钾溶液：易还原性物质在淡红背景上显黄色。 8．硝酸银——氢氧化铵（Tollen’s--zoffaronl）试剂，喷后105o C烤5~10分钟，还原性物质显黑色。 溶液I：0.1N硝酸银溶液。溶液II：氢氧化铵溶液。 临用前溶液I和溶液II以1：5混合。注意：放久则形成爆炸性的叠氦化银。 9．硝酸银——高锰酸钾试剂：还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。 溶液I：0.1N硝酸银溶液：2N氢氧化铵溶液：2N氢氧化钠（1：1：2）。临用前配制。 溶液II：高锰酸钾0.5g，碳酸钠1g，加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。 10．四唑试剂：还原性物质，在室温或微加热时显紫色。 溶液I：0.5%四唑兰甲醇溶液。溶液II：6N氢氧化钠溶液。临用前溶液I和溶液II等量混合。 11．铁氰化钾：三氯化铁试剂：还原性物质显兰色，再喷射2N/L盐酸溶液，则兰色加深。 溶液I：1%铁氰化钾溶液。溶液II：2%三氯化铁溶液。临用前溶液I和溶液II
实验室常规试剂的配制方法
目 录 蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 30% (W/V) Acrylamide 1 40% (W/V)Acrylamide 1 10% (W/V) 过硫酸铵 1 5×Tris-Glycine Buffer (SDS-PAGE电泳缓冲液) 1 5×SDS-PAGE Loading Buffer 1 考马斯亮蓝R-250染色液 2 考马斯亮蓝染色脱色液 2 凝胶固定液（SDS-PAGE银氨染色用） 2 凝胶处理液（SDS-PAGE银氨染色用） 2 凝胶染色液（SDS-PAGE银氨染色用） 2 显影液（SDS-PAGE银氨染色用） 2 实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin (100 mg/ml) 4 IPTG (24 mg/ml) 4 X-Gal (20 mg/ml) 4 LB培养基 4 LB/Amp培养基 4 TB培养基 5 TB/Amp培养基 5 SOB培养基 5 SOC培养基 5 2×YT培养基 6Φb×broth 6 NZCYM培养基 6
NZYM培养基 6 NZM培养基 7 一般固体培养基的配制 7 LB/Amp/X-Gal/IPTG平板培养基 7 TB/Amp/X-Gal/IPTG平板培养基 7 实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)9 1.5 M Tris-HCl (pH8.8) 9 10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0) 9 3 M 醋酸钠 (pH5.2) 9 PBS Buffer 9 10 M 醋酸铵 10 Tris-HCl平衡苯酚 10 苯酚/氯仿/异戊醇(25 : 24 : 1) 10 10% (W/V) SDS 10 2 N NaOH 10 2.5 N HCl 10 5 M NaCl 11 20% (W/V) Glucose 11 Solution I (质粒提取用) 11 Solution II (质粒提取用)11 Solution III (质粒提取用) 11 0.5 M EDTA (pH8.0)11 1 M DTT1 2 10 mM ATP 12 核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 50×TAE Buffer (pH8.5)13 10×TBE Buffer (pH8.3)13 10×MOPS Buffer 13溴乙锭（10mg/ml） 13 Agarose 凝胶 13 6×Loading Buffer (DNA电泳用)14
分子实验常用试剂配制(精)
氨苄青霉素 ﹡组分浓度 100mg/ml 氨苄青霉素 ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 5g Ampicillin置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容至 50ml 。 3. 0.22μm 滤膜过滤除菌,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。卡那霉素 (可配 25mL ﹡组分浓度 50mg/ml卡那霉素 ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 2.5g 卡那霉素置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容 50ml 。 3. 0.22μm 滤膜过滤除菌,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。RNase A ﹡组分浓度 10mg/ml RNase A ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.取 0.5g RNase A置于 50ml 塑料离心管中。
2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容 50ml 。 3. 100℃煮沸 15min, 缓慢冷却至室温,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。IPTG ﹡组分浓度 24mg/ml IPTG ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 1.2g IPTG置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40ml 灭菌水,充分混合溶解之后定容 50ml 。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌,小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。 X-Gal ﹡组分浓度 20mg/ml X-Gal ﹡配制量 50ml ﹡配制方法 1.称取 1g X-Gal置于 50ml 塑料离心管中。 2.加入 40mlDMF (二甲基甲酰胺 ,充分混合溶解之后定容至 50ml 。 3.小份分装(1ml/管后,置于-20℃保存。 DTT ﹡组分浓度 1M DTT ﹡配制量 10ml
常用有机试剂配制
常用试剂的配制 【2,4-二硝基苯肼试剂】 Ⅰ．取3g 2,4-二硝基苯肼溶于15mL浓硫酸中。将此酸性溶液慢慢加入70mL95%乙醇中，再加蒸馏水稀释到90mL，搅动混合均匀即成橙红色溶液（若有沉淀应过滤）。 Ⅱ．将1.2g 2,4-二硝基苯肼溶于50mL30%高氯酸中。配好后储于棕色瓶中，不易变质。 I 法配制的试剂2,4-二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。Ⅱ法配制的试剂，由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水溶液中的醛且较稳定，长期贮存不易变质。 【饱和亚硫酸氢钠溶液】 先配制40%亚硫酸氢钠水溶液。然后在每100mL的40 %亚硫酸氢钠水溶液中，加不含醛的无水乙醇25mL，溶液呈透明清亮状。如有少量的亚硫酸氢钠结晶析出，必须滤去或倾斜上层清液。 由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3·10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜。然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解为止。配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。 【Schiff（希弗）试剂】 配制方法有三种: 1．将0.2g对品红盐酸盐溶于100mL新制的冷却饱和二氧化硫溶液中，放置数小时，直至溶液无色或淡黄色，再用蒸馏水稀释至200mL，存在于玻璃瓶中，塞紧瓶口，以免二氧化硫逸散。 2．溶解0.5g对品红盐酸盐于100mL热水中，冷却后通入二氧化硫达饱和，至粉红色消失，加入0.5g活性炭，震荡过滤，再用蒸馏水稀释至500mL。 3．溶解0.2g对品红盐酸盐于100mL热水中，冷却后，加入2g亚硫酸钠和2mL浓盐酸，最后用蒸馏水稀释至200mL。 品红溶液原是粉红色，被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂。醛类与Schiff试剂作用后，反应液呈紫红色。 酮类通常不与Schiff试剂作用，但是某些酮类(如丙酮等)能与二氧化硫作用，故当它与Schiff 试剂接触后能使试剂脱去亚硫酸，此时反应液就出现品红的粉红色。 Schiff试剂应密封贮存于暗冷处，倘若受热见光或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红色，遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。但应指出，试剂中过量的二氧化硫愈少，反应就愈灵敏。 【Fehling（斐林）试剂】 Fehling试剂由Fehling A和Fehling B组成，使用时将两者等体积混合，其配法分别是：Fehling A：将3.5g含有五结晶水的硫酸铜溶于100mL水中即得淡蓝色的Fehling A试剂。 FehlingB：将17g五结晶水的酒石酸钾钠溶于20mL热水中，然后加入含有5g氢氧化钠的水溶液20mL，稀释至100mL即得无色清亮的Fehling B试剂。 由于氢氧化铜是沉淀，不易与样品作用，因此，用酒石酸钾钠存在时氢氧化铜沉淀溶解，形成深蓝色的溶液：
常用试剂配制方法
常用试剂配制方法 氨试液 取浓氨水200ml，置1000ml量杯中，加水稀释至500ml。 碱性酒石酸铜试液：配600ml。 （1）取硫酸铜结晶20.8g，置500ml量杯中，加水使溶解成300ml，转移至500ml试剂瓶中备用。（可长期保存） （2）取酒石酸钾钠结晶103.8g与氢氧化钠30g，置500ml量杯中，加水使溶解成300ml，转移至500ml 试剂瓶中备用。（需新鲜配制） 临用前将两液等量混合，即得。 0.2％酚酞指示液：配500ml。（可长期保存） 粗称酚酞1g，置500ml量杯中，加95％乙醇500ml，使溶解，即得。 0.02mol/l氢氧化钠滴定液：配500ml。（可长期保存） 取氢氧化钠0.4g，置500ml量杯中，加水使溶解成500ml。 稀硝酸：配4000ml。（可长期保存） 取硝酸（16mol/L）210ml，置3000ml烧杯中，加水稀释至2000ml。配2次。 标准氯化钠溶液（10ug/ml）：配1000ml。（可长期保存） 精称氯化钠16.5mg，置100ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。（100μg/ml）临用前，精密量取储备液100.0mL，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 8．硝酸银试液：配500ml。（需新鲜配制） 取硝酸银8.75g，置500ml量杯中，加水溶解至500ml。 9．稀盐酸：配3000ml。（可长期保存） 取盐酸（12.5mol/L）702ml，置5000ml烧杯中，加水稀释至3000ml。 10．标准硫酸钾溶液（100ug SO4-2/ml）：配500ml。（可长期保存） 精称硫酸钾90.5mg，置100ml烧杯中，加水溶解后，转移至500ml量瓶中。 11．25%氯化钡：配3000ml。（可长期保存，第二年如混浊，过滤） 粗称BaCl2750g，置5000ml烧杯中，加水超声溶解并稀释至3000ml（澄清）。 12．标准铅溶液（10ugPb/ml）：配600ml 。 精称硝酸铅16mg，置50ml烧杯中，加硝酸0.5ml与水5ml溶解后，转移至100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为储备液。（100ugPb/ml）（放冰箱长期保存） 临用前，精密量取储备液10.0ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 13．稀醋酸：配2000ml 。（可长期保存） 粗量冰醋酸（17.5mol/L）60ml，置1000ml量杯中，加水稀释至1000ml，调pH3.5。 14．醋酸盐缓冲液（PH3.5）：配2000ml。（包括阿司匹林的重金属检查，需新鲜配制） 粗称醋酸铵250g，置1000ml量杯中，加水250ml溶解后，加7mol/L 盐酸溶液380ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节PH值至3.5（电位法指示），用水稀释至1000ml，即得。 15．硫代乙酰胺试液：配1200ml。（需新鲜配制） （1）粗称硫代乙酰胺8g，置500ml烧杯中，加水200ml超声溶解，转移至试剂瓶中（硫代乙酰胺液），置冰箱中保存。（需新鲜配制） （2）配制1mol/L NaOH 1000ml：粗称NaOH 40g，置1000ml量杯中，加水溶解至1000ml。取600ml NaOH，200ml水，800ml丙三醇在3000ml烧杯中混匀（混合液）。转移至试剂瓶中，置冰箱中保存。（可长期保存）临用前取混合液1000ml，硫代乙酰胺液200ml，置80℃水浴上加热30秒，冷却，分装。