各种食源性致病菌的致病机理
各种食源性致病菌的致病机理，产毒条件，治理措施能够通过食物传播疾病的常见细菌主要有，革兰阳性菌，如：芽孢杆菌，链球菌属，李斯特菌属，丹毒丝菌属和分枝杆菌属；格兰阴性菌，如：沙门菌属，志贺菌属，大肠杆菌等
沙门氏菌引起的中毒及防治措施：沙门氏菌多数存在于动物的排泄物中，可通过水和食物传播，中毒食品主要是肉类、奶类、蛋类食品，常由于食物存放不当，使用前未烧煮熟透所致，肉类、食物较易受到污染。
危害：①肠热型(伤寒、副伤寒)：开始出现发热不适、全身疼痛，此后患者出现持续高热、相对脉缓、肝脾肿大，外周白细胞下降、皮肤出现玫瑰疹。严重肠局部坏死和溃疡，有出血、穿孔等并发症。
②急性胃肠炎型(食物中毒)：潜伏期12～24小时，突然恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热，如果细菌已产生毒素，可引起中枢神经系统症状，出现体温升高、痉挛等；重者有寒战，惊厥，抽搐与昏迷，病程3～7天，预后良好。③其他类型：类霍乱型，类伤寒型，类感冒型，败血症型。
防止措施:1.控制细菌污染源，防治动物生前感染、宰后污染和食品孰后重复污染，加强食品卫生检验，在肉类检疫、加运输、销售等各个环节严格把关；2.防止食品污染沙门菌。控制好各类食品储存的适宜条件，防护食品中沙门菌的生长繁殖。高热杀菌，对污染沙门菌的食品加热灭菌，彻底杀死沙门菌。
大肠杆菌常见于人、动物肠道内；许多类型不致病，在肠道内
有有益功能；致病性大肠杆菌是通过环境污染进入食品中的；症状为：腹部痉挛、水性或血性腹泻、发烧、恶心和呕吐。染病剂量：几个至上百万个肠道致病性大肠埃希氏菌(EPEC)：具有特定O、K 抗原血清型，可引起婴幼儿腹泻产肠毒素性大肠埃希氏菌( ETEC)：在小肠定位繁殖，产生肠毒素，引起霍乱样腹泻。毒素包括：不耐热肠毒素LT—，10min灭活；耐热肠毒素ST—，10min 不灭活。肠侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)：为志贺痢疾样大肠埃希氏菌，症状象痢疾，带有血便，痢疾菌试验呈阳性，具有与痢疾杆菌同样的毒力，可侵入大肠上皮细胞，形成局部炎症及溃疡。
葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病，可引发不同程度的急性胃肠炎症状，恶心、呕吐最为突出而且普遍，腹痛、腹泻次之。?当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经8-10小时即可相当数量的肠毒素。?作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50% 以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。?传播媒介为被该菌污染的食品，主要为淀粉类(如剩饭、米面、粥等)、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋类等。被污染的食物在室温20℃-22℃放置5 小时以上时，病菌能够通过食物传播疾病的常见细菌。
预防措施：开展卫生宣传教育工作，把好口岸检疫与食品检验关，做好餐饮业的卫生管理工作，让工作人员养成良好的卫生习惯。加强粪便消毒管理，注意防蝇灭虫工作。不食腐败变质和不清洁的食物，
避免饮用生水、少吃生菜等，肉类、奶类和蛋类食品食用前煮透，水果要洗净去皮。对已经污染的水源和环境，技术采取有效消毒措施。及时发现、隔离并治疗患病病人，协同防疫部门尽早查清传染来源，予以根治并进行卫生监督。
牛奶中三种常见食源性致病菌快速检测方法的建立
牛奶中三种常见食源性致病菌快速检测方法的建立食源性疾病是全球最重要的公共卫生问题之一,导致食源性疾病的有病原微生物、寄生虫及其代谢产物、天然毒素以及化学性有毒有害物质等等。微生物引起的食源性疾病是全球食品安全面临的最重要挑战之一。 在发达国家70%～80%的细菌性食物中毒是由沙门氏菌引起的,在我国甚至 达到90%;引起沙门氏菌中毒的食品中,蛋类、奶类等动物性产品约占90%,沙门氏菌生存能力较强,可在乳制品中生存几个月。单增李斯特菌广泛存在于自然界中,且在冷藏温度4℃下依然能够生长,引起单增李斯特菌食物中毒的食品主要有: 奶及奶制品、肉制品、水产品、蔬菜及水果,其中以乳制品最为常见,单增李斯特菌能够给高风险人群带来严重的感染性疾病。 志贺氏菌又称痢疾杆菌,是引起人类细菌性痢疾中最为常见的食源性致病菌,该菌也是食品卫生相关法规及标准中要求必须检测的项目之一。本文以牛奶中常见的食源性致病菌单增李斯特菌、沙门氏菌和志贺氏菌为目标菌种,利用环介导等温扩增技术和高分辨率熔解曲线技术建立了多重LAMP检测体系和多重 HAND-HRM检测体系,结果如下:1.针对单增李斯特菌溶血素蛋白(hly)基因、沙门氏菌侵袭蛋白A(invA)基因和志贺氏菌侵袭性质粒抗原H(ipaH)序列的高度保守序列设计引物,通过引物筛选分别建立了三种食源性致病菌的LAMP反应体系。 进一步经过引物筛选,及对影响反应效率和特异性的镁离子浓度、甜菜碱浓度、引物浓度进行优化,建立了多重LAMP反应体系。对多重LAMP反应体系进行特异性和灵敏度检测。 在特异性检测中含有目标菌的模板出现扩增,空白对照和非目标菌均未发生特异性扩增,提示该多重LAMP反应体系特异性强。在灵敏度检测中单增李斯特菌
生活中有哪些常见的致病菌
生活中有哪些常见的致病菌 一、人体中的常见的致病菌: 1、葡萄球菌: 属革兰氏阳性球菌。就是人体皮肤上寄居最多的致病菌,也见于鼻咽等处。金黄色葡萄球菌致病力最强,主要产生溶血素、杀白细胞素与血浆凝固酶等,造成许多种感染,如疖、痈、脓肿与伤口感染等。金黄色葡萄球菌感染的特点就是局限性组织坏死,脓液稠厚、黄色、不臭。也能引起全身性感染。 2、链球菌: 属革兰氏染色阳性球菌。存在于口、鼻、咽与肠腔内。链球菌的种类很多,溶血性链球菌、绿色链球菌与粪链球菌就是常见的致病菌。溶血性链球菌能产生溶血素与透明质酸酶、链激酶等,溶解破坏细胞间质中的透明质酸、纤维蛋白与其她蛋白质,使炎症易扩散而缺乏局限化的倾向。脓液特点就是比较稀薄,淡红色,量较多。典型的感染就是急性蜂窝织炎、淋巴管炎等。绿色链球菌就是一些胆道感染与亚急性心内膜炎的致病菌。粪链球菌属厌氧菌,常与大肠杆菌一同引起混合感染。 3、大肠杆菌: 革兰氏染色阴性。寄居于肠道内。对维生素K的合成有重要作用。它的单独致病力不大,若与其她致病菌在一起时,可造成严重的混合感染,如大面积烧伤感染、阑尾脓肿、急性胆囊炎等,产生的脓液稠厚,有粪臭。 4、绿脓杆菌: 革兰氏染色阴性。常寄居于肠道与皮肤上,它对大多数抗菌药物不敏感,故成为继发感染中的重要致病菌,特别就是大面积烧伤感染时,可引起难以控制的绿脓杆菌败血症。绿脓杆菌感染的伤口常不易愈合,其脓液呈淡绿色,有腥臭味。 5、变形杆菌: 革兰氏染色阴性。存在于肠道与前尿道,为尿路感染、急性腹膜炎与大面积烧伤感染的致病菌之一。变形杆菌对大多数抗菌药物有耐药性。脓液具有特殊的恶臭。 6、无芽胞厌氧菌: 革兰氏染色阴性的专性厌氧菌。在一般外科感染中,此类细菌为重要的病原体之一。具有临床意义的有脆弱类杆菌、核梭形菌、消化球菌与消化链球菌等多种。这些无芽胞厌氧菌寄生在人体内的腔道,特别就是胃肠道(结肠内的数量最多)、口腔、阴道等处。它们与需氧菌共同构成机体的正常菌群。正常情况下保持菌群相对平衡,对人体无害。其致病条件就是:当某些原因(如血液供应障碍、组织坏死、需氧菌共生等)造成局部组织的氧化还原电势降低,便有利于无芽胞厌氧菌的繁殖。在机体许多封闭部位,单纯厌氧菌可造成感染,但多数厌氧菌就是与其她需氧菌共生而引起感染的。厌氧菌感染脓液有恶臭。目前有效的治疗药就是甲硝哒哇(灭滴灵)。 二、食品中常见的致病菌: 1、肉毒杆菌: 偏爱高蛋白食物。肉毒杆菌就是自然界广泛存在的一种细菌,在土壤、动物粪便等地方经常可以见到它。它尤其喜欢肉肠、火腿等富含蛋白质的食品,同时在豆制品与煮熟的黄豆、豆酱类食品中也可能含有。在我国的新疆、青海等少数民族地区,几乎每年都会出现因自制发酵肉制品而导致中毒甚至死亡的事件。 2、沙门氏菌: 多在动物性食品中出现。它就是导致我国食物中毒的主要元凶之一,通常寄居在人或动物肠道内。它主要污染动物性食品,包括禽畜类、蛋类、奶类及其制品,如果没有彻底加热,则可能感染。美国曾多次出现大规模沙门氏菌污染事件,包括鸡蛋等。 3、金黄色葡萄球菌:
食源性致病菌快速检测方法研究报告
食源性致病菌快速检测方法研究报告 发表时间：2011-05-13T14:13:40.207Z 来源：《中外健康文摘》2011年第5期作者：高友中 [导读] 目的应用酶联免疫吸附实验（ELISA）快速检测奶类及肉类制品中沙门菌。 高友中（湖南省岳阳县疾病预防控制中心 414100） 【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2011)5-0106-02 【摘要】目的应用酶联免疫吸附实验（ELISA）快速检测奶类及肉类制品中沙门菌。方法样品经增菌后，用ELISA法及国标法对样品中的沙门菌进行初步检测，并比较ELISA法检测结果与国标法灵敏性、特异性、符合率。结果检测200份奶类制品和肉制品，经ELISA法检测阳性率为8.3%，国标法阳性率为6.7%。ELISA法敏感性、特异性分别为100%、97%，与国标法符合率达99.3%。结论 ELISA法可快速、方便的对食品中沙门菌的污染情况进行初步检测，灵敏度高、特异性好，与国标法符合率高。适用于食品中沙门菌的初步检测。 【关键词】奶制品肉制品沙门菌 ELISA 沙门菌为常见的引起食源性疾病爆发的病原菌，在我国微生物性食物中毒中一直位居首位，而受沙门菌污染的奶、肉制品为造成人类感染的主要来源，因此沙门菌一直为医疗卫生、食品卫生及商检部门重点检验对象之一[1]。本研究采用ELISA法检测奶、肉制品中沙门菌，并与国标法进行比较研究，现报道如下： 1 材料与方法 1.1实验材料 奶、肉制品分别来自本市8家不同超市，包括70份奶及奶制品样本，60份肉及肉制品样本。取样均采取随机抽样的方法进行。每份样品250ml或250g，经无菌包装后置冷链保存送实验室检测。 缓冲蛋白胨水，氯化镁孔雀绿增菌液，四硫酸钠煌绿增菌液，亚硒酸盐胱氨酸增菌液，亚硫酸铋琼脂，DHL琼脂，HE琼脂，WS琼脂，SS琼脂，三糖铁琼脂，蛋白陈水、靛基质试剂，尿素琼脂（pH7.2)，氰化钾（KCN）培养基，氨基酸脱梭酶试验培养基，糖发酵管，ONPG培养基，半固体琼脂，丙二酸钠培养基，沙门氏菌因子血清。均按国标相关规定进行。 ELISA相关试剂均购自试剂公司。 1.2实验方法 样品按国标法相关规定预先增菌。样品处理后于36°C培养4h，转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液中，42°C18-24h，另取10ml转种于亚硒酸盐胱氨酸增菌液中，36°C18-24h。 ELISA法简要步骤如下：特异性抗沙门菌单克隆抗体包被，加入待见样品检测。显色于酶标仪上读取OD值。 国标法简要步骤如下：经增菌后，划线接种于亚硫酸铋琼脂平板和EHL琼脂平板。36°C培养18-24h，观察菌落生长情况。挑选可疑菌落接种于三糖铁琼脂，鉴别反应结果。如出现异常结果，按国标相关规定选择补做甘露醇和山梨醇试验，ONPG等。 1.3数据分析 参考田素娟[1]等的方法进行。即利用检验通用的计算方法，并国标法比较实验的敏感性、特异性、符合率。 2 结果 2.1ELISA及国标法检测结果 用ELISA法同步检测份奶、肉制品的沙门菌污染情况，采用国标法进一步验证，结果见表1。 表1沙门菌污染情况检测 2.2ELISA法与国标法敏感性、特异性、符合率计算结果 表2ELISA法与国标法比较 3 讨论 3.1常规检测沙门菌方法 目前，沙门菌常用检测方法有：（1）酶快速反应检测技术。包括快速酶促反应显色培养基及自动化微生物分析仪两种方法。VITEK AMS自动微生物检测系统对细菌鉴定是基于细菌的微量生化反应，可鉴定405种细菌。（2）以免疫学为基础的检测技术。包括酶联免疫吸附实验（ELISA）；免疫磁分离技术，如王海明[2]等报道的使用抗沙门氏菌免疫磁珠经增菌后于VITEK全自动生化鉴定仪和荧光PCR分子检测确认；免疫胶体金技术等。（3）以核酸为基础的检测技术，如杨俊超[3]等报道的使用实时荧光定量PCR与常规PCR比较研究，其敏感性、特异性均较好；依赖PCR的DNA指纹图谱技术；随机引物扩增DNA多态性（RAPD）；基因内重复性一致序列（ERIC）的扩增；多重PCR检测技术；NASBA；基因芯片技术等。 3.2本研究采用检测方法 本研究采用ELISA法快速检测奶及奶制品、肉及肉制品中沙门菌的污染情况。其敏感性、特异性较高，且与国标法符合率较高。一般24h 之内可以出检测结果。其不足之处在于：（1）不能定量检测沙门菌的含量，只能做定性分析，即是否存在沙门菌污染，但不能测得污染量的大小。后续研究考虑通过设置标准沙门菌对照（蛋白含量已知）的情况下，设立不同稀释度，然后比较样品各组OD值，用统计软件作出标准曲线，进而推算出沙门菌含量。（2）检测结果不太稳定，有可能出现假阳性结果。ELISA实验普遍存在抗体效价下降很快的通病，如
细菌感染的原因与诊断标准
细菌感染的原因与诊断标准 人体全身各个器官，各系统都可发生细菌感染，引起多种疾病，常见的有细菌性感冒。那么，为什么会出现细菌感染呢？细菌感染有什么症状？一起来看看下面的回答吧。 一、出现细菌感染的原因： 细菌感染是致病菌或条件致病菌侵入血循环中生长繁殖，产生毒素和其他代谢产物所引起的急性全身性感染，细菌则容易侵入体内；人体的免疫反应可分为非特异性免疫反应及特异性免疫反应两种，后者又可分为细胞免疫与体液免疫两方面。 当机体免疫功能下降时，不能充分发挥其吞噬杀灭细菌的作用，即使入侵的细菌量较少，致病力不强也能引起感染；条件致病菌所引起的医源性感染也逐渐增多。细菌因素主要与病原菌的毒力和数量有关。毒力强或数量多的致病菌进入机体，引起败血症的可能性较大。细菌侵入人体后是否引起感染，与人的防御、免疫功能，细菌的毒力及数量有关。完整的皮肤和粘膜是防止细菌侵入人体的天然屏障。 细菌感染的原因与诊断标准 二、细菌感染如何诊断？ 临床上以寒战、高热、皮疹、关节痛及肝脾肿大为特征，部分可有感染性休克和迁徙性病灶。病原微生物自伤口或体内感染病灶侵入血液引起的急性全身性感染。临床上部分患者还可出现烦躁、四肢厥冷及紫绀、脉细速、呼吸增快、血压下降等。 病毒感染：能在人体寄生繁殖，并能致病的病毒引起的传染病。主要表现有发热、头痛、全身不适等全身中毒症状及病毒寄主和侵袭组织器官导致炎症损伤而引起的局部症状。 真菌感染：真菌感染引起的疾病称为真菌病，发病率最高的念珠菌病和皮肤癣菌病由人体正常菌群的真菌引起，感染可区分为：表面感染，皮肤感染，皮下组织感染，深部感染和条件性感染。 三、细菌感染的治疗和预防： 细菌感染最好预防，而且最容易治疗，一般都有特效药，只要治疗及时一般都能治愈。预防只要注意清洁卫生即可防止感染。经常保持皮肤和粘膜的清洁和完整，避免创伤，切忌挤压，应积极治疗、控制慢性病，合理使用免疫抑制剂和抗生素类药物，烧伤病房应严格消毒等措施，均可预防发生。 一切明显的或隐匿的化脓性病灶如能及早予以清除，感染的发生就可以减少。小儿时常见的等每易继发较重的呼吸道感染，从而发生细菌感染。对这类病儿，必须加强保护。对不论多么细小的皮肤创伤必须予以重视，早作适当处理。 四、细菌性感冒和病毒性感冒有什么区别？
各种食源性致病菌的致病机理
各种食源性致病菌的致病机理，产毒条件，治理措施能够通过食物传播疾病的常见细菌主要有，革兰阳性菌，如：芽孢杆菌，链球菌属，李斯特菌属，丹毒丝菌属和分枝杆菌属；格兰阴性菌，如：沙门菌属，志贺菌属，大肠杆菌等 沙门氏菌引起的中毒及防治措施：沙门氏菌多数存在于动物的排泄物中，可通过水和食物传播，中毒食品主要是肉类、奶类、蛋类食品，常由于食物存放不当，使用前未烧煮熟透所致，肉类、食物较易受到污染。 危害：①肠热型(伤寒、副伤寒)：开始出现发热不适、全身疼痛，此后患者出现持续高热、相对脉缓、肝脾肿大，外周白细胞下降、皮肤出现玫瑰疹。严重肠局部坏死和溃疡，有出血、穿孔等并发症。②急性胃肠炎型(食物中毒)：潜伏期12～24小时，突然恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热，如果细菌已产生毒素，可引起中枢神经系统症状，出现体温升高、痉挛等；重者有寒战，惊厥，抽搐与昏迷，病程3～7天，预后良好。③其他类型：类霍乱型，类伤寒型，类感冒型，败血症型。 防止措施:1.控制细菌污染源，防治动物生前感染、宰后污染和食品孰后重复污染，加强食品卫生检验，在肉类检疫、加运输、销售等各个环节严格把关；2.防止食品污染沙门菌。控制好各类食品储存的适宜条件，防护食品中沙门菌的生长繁殖。高热杀菌，对污染沙门菌的食品加热灭菌，彻底杀死沙门菌。
大肠杆菌常见于人、动物肠道内；许多类型不致病，在肠道内有有益功能；致病性大肠杆菌是通过环境污染进入食品中的；症状为：腹部痉挛、水性或血性腹泻、发烧、恶心和呕吐。染病剂量：几个至上百万个肠道致病性大肠埃希氏菌(EPEC)：具有特定O、K抗原血清型，可引起婴幼儿腹泻产肠毒素性大肠埃希氏菌( ETEC)：在小肠定位繁殖，产生肠毒素，引起霍乱样腹泻。毒素包括：不耐热肠毒素LT—60C，10min灭活；耐热肠毒素ST—100C，10min不灭活。肠侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)：为志贺痢疾样大肠埃希氏菌，症状象痢疾，带有血便，痢疾菌试验呈阳性，具有与痢疾杆菌同样的毒力，可侵入大肠上皮细胞，形成局部炎症及溃疡。 葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病，可引发不同程度的急性胃肠炎症状，恶心、呕吐最为突出而且普遍，腹痛、腹泻次之。?当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经8-10小时即可相当数量的肠毒素。?作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50% 以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。?传播媒介为被该菌污染的食品，主要为淀粉类(如剩饭、米面、粥等)、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋类等。被污染的食物在室温20℃-22℃放置5 小时以上时，病菌能够通过食物传播疾病的常见细菌。
细菌的感染与致病机制
第五章细菌的感染与致病机制 1.什么是柯赫法则？如何从分子水平解释柯赫法则？ 答：柯赫法则是确定某种细菌是否具有致病性的主要依据，其要点是，第一，特殊的病原菌应在同一疾病中查见，在健康者不存在；第二，此病原菌能被分离培养而得到纯种；第三，此纯培养物接种易感动物，能导致同样病症；第四，自试验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。随着分子生物学的发展，“基因水平的柯赫法则”应运而生。取得共识的有一下几点：第一，应在致病菌株中检出某些基因或其产物，而无毒力菌株中无。第二，如有毒力菌株的某个基因被破坏，则菌株的毒力应减弱或消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内，后者成为有毒力菌株。第三，将细菌接种动物时，这个基因应在感染的过程中表达。第四，在接种动物检测到这个基因产物的抗体，或产生免疫保护。该法则也适用于细菌以外的微生物，如病毒。 2.如何确定某种细菌具有致病性？ 答：细菌是否具有致病性主要从细菌所具有的毒力来考虑。细菌毒力的表示方法很多，最具实用的是半数致死量和半数感染量。半数致死量是指能使解中的实验动物在感染后一定时限内死亡一半所需的微生物量或毒素量。半数感染量某些病原微生物只能感染实验动物、鸡胚或细胞，但不引致死亡，可用ID50来表示其毒力。 4.什么样的细菌能内化入胞？意义何在？ 答：内化作用指某些细菌粘附于细胞表面之后，能进入吞噬细胞或非吞噬细胞内部的过程。内化作用对细胞的意义在于，细胞通过这种移位作用进入深层组织，或进入血液循环，细菌借以从感染的原发病灶扩散至全身或较远的靶器官。宿主细胞为进入其内的细菌提供了一个增殖的小环境和庇护所，使细菌逃避宿主免疫机制的杀灭。 5.胞外蛋白酶有何致病作用？举例说明. 答：胞外蛋白酶本身无毒性，但在细菌感染的过程中有一定作用。例如： （1）血浆凝固酶：大多数致病性金黄色葡萄球菌能产生一种血浆凝固酶（游离血浆凝固酶），能加速人或兔血浆的凝固，保护病原菌不被吞噬或免受抗体等的作用。凝固酶是一种类似凝血酶原的物质，通过血浆中的激活因子变成凝血样物质后，才能使血浆中的纤维蛋白原变为纤维蛋白因而血浆凝固。金黄色葡萄球菌还产生第二种血浆凝固酶（凝聚因子），结合在菌细胞上，在血浆中将球菌凝集成堆，无需血浆激活因子，而是直接作用于敏感的纤维蛋白质。在抗吞噬作用方
2条件致病菌 - 湖南省高等学校精品课程网
…O …O … 试卷代号：3 怀化医专 年上学期期末考试试卷 课程名称： 微生物学检验 适用专业：医学检验 G 1．包涵体 2．垂直传播 3．干扰现象 4．Dane 颗粒 5．汹涌发酵现象 …O …O … 题号 一 二 三 四 五 六 合分 合分人 合分复查人 应得分 15 25 5 10 15 30 100 实得分 评卷 复查人 得分 评卷人 一、名词解释：（每小题3分，共15分） 考场 年级 专业班级 学号 姓名
1、病毒的基本结构由 和 组成，部分病毒的外面还有一层 。 2、厌氧的革兰阳性杆菌有 、 、 ；气性坏疽 是由 等细菌感染所致。 3、HIV 通过 与细胞表面的 受体结合而感染细胞，结果造 成 细胞数量和功能降低而导致免疫缺陷。 4、在革兰染色中绿脓杆菌为 菌，肺炎链球菌为 菌 霍乱弧菌为 菌，鼠疫杆菌为 菌，军团杆菌为 菌。 5、结核分枝杆菌对干燥、 和 抵抗力较强；对其常用 染色，结果染成红色。 6、病毒的传播方式主要有 和 ，后者主要指经 传播和 传播。 7、支原体是一类无细胞壁，呈 ，可以通过 ，能在无生命 的培养基上 的最小原核细胞型微生物。 （ ）1、粪便中的志贺菌受其他细菌酸性产物的影响，可以数小时内死亡，故采到的粪便标本应尽快送检。 （ ）2、串珠试验与炭疽芽孢杆菌有关。 （ ）3、流感病毒的NA 和HA 易发生变异，当其变异的幅度小时，是量变，可导致流感中小规模的流行，此称为抗原性转变。 得分 评卷人 得分 评卷人 二、填空题：（每题1分，共25分） 三、判断题：（每题1分，共5分）
（ ）4、感染HBV 后，最早出现的血清学标志物是HBsAg 、前S1、前S2 抗原，症状出现前就可以被检出。 （ ）5、一种病毒诱生的干扰素，对多种病毒有作用。 1．列举沙眼衣原体的种类以及所致疾病。 2．病毒的分离培养有哪些方法，为何与细菌的培养方法不同？ 1.酶联免疫吸附试验（ELISA ）检测乙敢五项共使用了哪些方法？请说出双抗体夹心法检测HBsAg 的原理？（8分） 得分 评卷人 得分 评卷人 四、简答题：（每小题5分，共10分） 五、综合题：（共15分）
细菌感染的来源与类型
1.感染的来源（1）外源性感染：病原菌来自体外。由外界致病菌侵入而致病的，如细菌性痢疾和病毒性肝炎等。（2）内源性感染：病原菌来自自身的体表或体内。由体内寄生的正常微生物群引起的，因为必须在一定条件下才能致病，故又称条件致病菌或机会致病菌，如肠道中的大肠埃希菌和某些真菌的感染。 2.感染的类型：病原体通过各种适宜的途径进入人体，开始了感染过程。侵入的病原体可以被肌体清除，也可定植并繁殖，引起组织损伤、炎症和其他病理变化。感染类型可出现不感染、隐性感染、显性感染、持续性感染和带菌状态等不同表现，这些表现并非一成不变，可以随感染双方力量的增减而移行，转化或交替出现。（1）不感染：病原体侵入人体后，由于毒力弱或数量不足，或侵入的部位不适宜，或机体具有完备的非特异性免疫和高度的特异性免疫力，病原体迅速被机体清除，不发生感染。（2）隐性感染：是指病原体侵入人体后，仅引起机体发生特异性免疫应答，不出现或只出现不明显的临床症状、体征，甚至生化改变，是为隐性感染，或称亚临床感染，只能通过免疫学检查才能发现有过感染。感染后对人体损害较轻，不引起明显的病变和症状。在大多数流行性传染病中，隐性感染者一般约占人群的90％或更多，其数量远远超过显性感染（10倍以上），脊髓灰质炎、流行性乙型脑炎、白喉、伤寒等常有隐性感染。（3）显性感染：即感染性疾病。指病原体侵入人体后，由于毒力强、入侵数量多，加之机体的免疫病理反应，导致组织损伤，生理功能发生改变，并出现一系列临床症状和体征。按其发病快慢和病程长短，可分为急性感染和慢性感染。急性感染发病急骤，病程短，一般数日至数周，如麻疹、流行性脑脊髓膜炎、流感及甲型肝炎等；慢性感染病程缓慢，常持续数日至数年，如结核、麻风等；介于急性和慢性之间者为亚急性感染，如牙龈炎、心内膜炎等。这些感染的不同病程和部位与临床采集不同标本有关。在少数感染性疾病中（如麻风、天花），大多数感染者表现为显性感染，但在大多数感染中，显性感染只占全部感染者的一小部分。显性感染过程结束后，病原体可被清除，而感染者可获得牢固免疫力（如伤寒），但有些显性感染（如痢疾、流感等）患者在病后不能获得牢固免疫力，易再次感染发病。显性感染按感染部位及性质可分为局部感染和全身感染。全身感染可有下列不同类型：①菌血症：病原菌由原发部位一时性或间歇性侵入血流，但不在血中繁殖。②败血症：病原菌不断侵入血流，并在其中大量繁殖，引起机体严重损害并出现全身中毒症状。③毒血症：病原菌在局部组织生长繁殖，不侵入血流，但细菌产生的毒素进入血流，引起全身症状。④脓毒血症：由于化脓性细菌引起败血症时，细菌通过血流扩散到全身其他脏器或组织，引起新的化脓性病灶。（4）持续性感染：是指某些微生物感染机体后，可以持续存在于宿主体内很长时间，短则几个月，长可达数年甚至数十年，尤其有些病毒的感染可使病人长期带病毒，引起慢性进行性疾病，并可成为重要的传染源。持续性感染一般可分为以下三种类型：①慢性感染：显性或隐性感染后，微生物未完全清除，可持续存在于血液或细胞中并不断排出体外，可出现症状，也可无症状。在慢性感染的全过程均可检出微生物，如CMV、EB病毒、HBV、HIV等所致的慢性感染。②潜伏感染：显性或隐性感染后，病毒基因存在于一定的组织或细胞中，但不能产生有感染性的病毒体，如单纯疱疹病毒在三叉神经节中潜伏，此时机体既无临床症状又无病毒体排出，用常规方法多不能分离和检出病毒的存在。但在某些条件下，潜伏的病毒可被激活，完成病毒的复制后可沿感染神经到达皮肤、黏膜，发生单纯疱疹。在急性发作期可检出病毒的存在，发作期过后病毒又返回到潜伏的神经节中，形成长期存留体内的持续性感染。③慢发病毒感染：病毒感染后有很长的潜伏期，既不能分离出病毒也无症状，经数年或数十年后，可发生某些进行性疾病，逐渐恶化直至死亡，如麻疹病毒引起的亚急性硬化性全脑炎，朊粒引起的克雅病和库鲁病等。（5）病原携带状态：发生在隐性或显性感染后，病原体未被机体排除，仍在体内继续存在并不断向体外排菌，称为带菌状态。处于带菌状态的人称为带菌者。在显性感染临床症状出现之前称潜伏期携带者，隐性感染之后称健康携带者；显性感染之后称恢复期携带者，病原携带者的共同特征是没有临床症状但能不断排出病原体，因而
食源性致病菌
沙门氏菌 ? 加强卫生宣传教育，改变生食等不良卫生习惯 ? 切断传播途径 ? 加强对屠宰场、食品加工厂的卫生检疫，对其生产、加工、储存和制备等过程进行科学管理，降低因进食预包装的方便食品、即食食品及肉类、蛋类和禽类产品引起的食物中毒 ? 加强流动人口的卫生管理；科学使用抗生素，减少耐药菌株的出现 ? 发展快速可靠的病原菌溯源技术 金黄色葡萄球菌 ? 为条件致病菌，菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血素：外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A 、B 、 C 、 D 、 E 五种。 ? 葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病，可引发不同程度的急性胃肠炎症状，恶心、呕吐最为突出而且普遍，腹痛、腹泻次之。 ? 当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经8-10小时即可相当数量的肠毒素。 ? 作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。 ? 传播媒介为被该菌污染的食品，主要为淀粉类(如剩饭、米面、粥等)、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋类等。被污染的食物在室温20℃-22℃放置5 小时以上时，病菌能够通过食物传播疾病的常见细菌
细菌感染概念和疾病分类
细菌感染概念和疾病分类
流行性脑脊髓膜炎 概述： 流行性脑脊髓膜炎是由脑膜炎奈瑟菌引起的经呼吸道传播的一种化脓性脑膜炎。 启发：必有细菌入血 病原学 病原体为脑膜炎奈瑟菌，属奈瑟菌属，呈卵圆形或肾形，革兰染色阴性双球菌。 阴性球菌--特例 分群 分为 A、B、C、D、29E、W135、X、Y、Z等13个血清群，C群致病性最强，Y群最弱。流脑流行多数由 A、B、C群引起，我国以A群为主，但B群感染有逐年上升趋势。 目前我国流行的脑膜炎双球菌群以下列哪群为主 A.A群 B.B群 C.C群 D.D群 E.E群 『正确答案』A 细菌特点对比---乙脑是人畜共患病 该菌仅存在于人体，可从带菌者鼻咽部及患者的血液、脑脊液、皮肤瘀点中检出，专性需氧，对营养要求较高。 细菌裂解后可释放内毒素，具有强烈致病性，是重要的致病因子。 该菌在体外能形成自溶酶，易死亡，对寒冷、干燥、阳光、紫外线及一般消毒剂均敏
感。 娇气 下列关于脑膜炎球菌的叙述，错误的是（） A.又称为脑膜炎奈瑟菌 B.为革兰阳性双球菌 C.体外能形成自溶酶 D.为专性需氧菌 E.可在带菌者鼻咽部及患者的血液、脑脊液和皮肤瘀点中发现 『正确答案』B 流行病学 1.传染源 带菌者和患者，人是唯一宿主，患者易于被发现和隔离，而带菌者不易被发现，因此带菌者作为传染源的意义更重要。 对比：乙脑传染源---猪 流脑最重要的传染源是（） A.家畜 B.带菌者 C.现症病人 D.恢复期病人 E.病程极期病人 『正确答案』B 2.传播途径呼吸道：飞沫 病原菌主要借咳嗽、打喷嚏、说话等由飞沫直接从空气传播，进入呼吸道引起感染；对于婴幼儿，也可通过怀抱、喂乳、接吻、密切接触等途径传播。 对比：乙脑传播途径---蚊叮咬 流脑的主要传播途径是（） A.日常生活接触 B.蚊虫叮咬 C.呼吸道 D.粪-口 E.体液 『正确答案』C 3.人群易感性儿童发病率最高 人群普遍易感，发病以15岁以下少年儿童多见，尤以6个月至2岁的婴幼儿高发。 人群感染后60%～70%呈无症状带菌者，绝大多数不治而愈，发病者仅占1%。 感染后对同种菌群可获持久免疫力，非同种菌群间有一定交叉免疫，但不持久。
2.5细菌感染与致病
感染：细菌侵入宿主后，进行生长繁殖，并与机体相互作用一起一系列病理过程 免疫：细菌侵入机体后，感染的同时，能激发宿主免疫系统产生一系列免疫应答。有些情况下还可产生免疫逃逸现象。 正常菌群与机会致病菌 一．正常菌群 正常存在于人体外表和同外界相通的肠道，呼吸道等腔道中。人体免疫功能正常时候，对宿主无害，有些还会有利的微生物。分长居菌群；过路菌群 正常菌群的生理学意义 1.生物拮抗作用 正常菌群在宿主消化道黏膜表面特定部位黏附，定植和繁殖，形成一层菌膜屏障，抑制排斥外籍菌的入侵和群集，调整人体微生态平衡。 其拮抗机制：屏障和占位保护；产生有害代谢物质；营养竞争 2.营养作用 正常菌群能合成多种人体生长必须的维生素，如双歧杆菌，乳杆菌 3.免疫作用 正常菌群能刺激机体产生免疫及清除功能 4.抗衰老作用 二．机会致病菌 正常菌群与宿主间的生态平衡被打破，原来不致病的正常菌群就成了致病菌
致病条件： 1）寄居部位的改变 2）免疫功能低下 3）菌群失调 三．微生态平衡与失调 微生态学是在细胞或分子水平研究微生物和环境，宿主三者之间相互作用的综合学科，侧重研究正常微生物群的微生态平衡，微生态失调和微生态调整。 细菌的致病作用 致病性：细菌对宿主感染致病的能力 毒力：细菌的致病性强弱程度 半数致死量（LD50）；半数感染量：在规定时间内，通过指定的感染途径能使一定体重或年龄的某种动物半数死亡或感染需要的最小细菌数或毒素量 1.细菌侵袭力 致病菌能突破宿主皮肤，黏膜生理屏障，进入机体并在体内定植，繁殖，扩散的能力。 黏附素：黏附上皮细胞，避免被清除 荚膜：抗吞噬，阻止杀菌物质 侵袭性酶：细菌侵入上皮细胞，组织扩散。协助病军抗吞噬，扩散。 侵袭素：侵袭基因（inv基因）编码倒置(inv)
食源性致病菌监测
食源性致病菌监测 [摘要] 目的了解达州市2010年市售食品的食源性致病菌污染状况，为控制和降低食源性疾病提供依据。方法多级分层抽样市售生畜肉、生禽肉、熟肉制品、速冻熟制米面制品、即食非发酵性豆制品、鲜冻水产品、生食水产品、生食类蔬菜、婴幼儿配方米（谷、豆奶）粉、冰激淋、中式凉拌菜、沙拉、鲜榨果汁、皮蛋和生鸭蛋，按照国标和相关方法进行沙门菌、单增李斯特菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌○157：H7、阪崎肠杆菌、空肠弯曲菌和创伤弧菌检测。结果共检测食品15类256件，检出食源性致病菌29株，其中副溶血性弧菌9株、单增李斯特菌8株、金黄色葡萄球菌6株、沙门菌4株、阪崎肠杆菌和EHEC ○157：H7各1株，总检出率11.33%，未检出空肠弯曲菌和创伤弧菌。鲜冻水产品、冰激淋、生食水产品、熟肉制品、生畜肉和即食非发酵性豆制品致病菌检出率较高，分别是42.86%、33.33%、20.00%、19.04%和13.33%。结论达州市居民主要消费食品存在食源性致病菌污染，鲜冻水产品、冰激淋、生食水产品和熟肉制品分别主要受副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌污染。 近年来，随着工农业的快速发展和食品贸易国际化，由微生物危害导致的食源性疾病不断增加，食源性疾病已经成为最突出的公共卫生问题之一，由此引发的食品安全问题也倍受世人关注。为科学评估微生物导致的食品安全风险，掌握达州市食源性致病菌污染状况，依照《2010年四川省食品安全风险监测实施方案》，于2010年夏秋季采集达州市区多家超市、农贸市场和专卖店的市售食品进行了食源性致病菌检测，现将结果分析报告如下。 1 材料与方法 1.1样品来源与种类本地产食品为主，由专业人员按照多级分层抽样原则采集市售生畜肉、生禽肉、熟肉制品、速冻熟制米面制品、即食非发酵性豆制品、鲜冻水产品、生食水产品、生食类蔬菜、婴幼儿配方米（谷、豆奶）粉、冰激淋、中式凉拌菜、沙拉、鲜榨果汁、皮蛋和生鸭蛋等15类食品，无菌采样、包装，4℃保存，8h内送达实验室。 1.2检测项目与方法不同食品分别检测沙门菌、单增李斯特菌、副溶血性弧菌、金葡菌、EHEC ○157：H7、阪崎肠杆菌、空肠弯曲菌和创伤弧菌等8种致病菌。按照《食品卫生微生物学检验方法》[1]和中国疾病预防控制中心营养与食品安全所下发的《2010年食源性致病菌监测工作手册》所述“微生物检验标准操作程序”进行增菌、分离和鉴定，阳性菌株及时送四川省疾病预防控制中心进一步确证。 1.3培养基和试剂培养基、API20E细菌生化鉴定试剂条和诊断血清分别由北京陆桥技术有限公司、法国生物梅里埃公司和宁波生物制品有限责任公司生产，效期内使用。 2 结果 2.1食源性致病菌检测结果15类256件食品共检出食源性致病菌29株，总检出率11.33%。检出率从高到低依次是副溶血性弧菌检出率25.00%、阪崎肠杆菌11.11%、单增李斯特菌7.55%、金葡菌6.06%、沙门菌1.63%，EHEC ○157：H7 1.28%，空肠弯曲菌和创伤弧菌未检出（见表1），4株沙门菌血清分型：鼠伤寒沙门菌3株、婴儿伤寒沙门菌1株。 2.2不同食品致病菌检测结果15类食品检出率从高到低依次是鲜冻水产品（42.86%）、冰激淋（3 3.33%）、生食水产品（20.00%）、熟肉制品（19.04%）、生畜肉和即食非发酵性豆制品（13.33%）、婴幼儿配方粉（11.11%）、速冻熟制米面制品和沙拉（8.33%）、皮蛋（6.06%），生禽肉、生食类蔬菜、中式凉拌菜、鲜榨果汁、生鸭蛋等未检出目标菌。29株病原菌分布在鲜冻水产品中9株副溶血弧菌，熟肉制品和生食水产品中各3株、生畜肉和即食非发酵性豆制品中各1株单增李斯特菌，皮蛋中2株、生畜肉和冰激淋中各1株沙门菌，冰激淋中3株、沙拉和即食非发酵性豆制品以及速冻熟制米面制品中各1株金黄色葡萄球菌，婴幼儿配方食品中1株阪崎肠杆菌，同一生羊肉中受到单增李斯特菌和EHEC ○157:H7双重污染（见
细菌感染和病毒感染
细菌感染与病毒感染是临床上十分常见的两种感染类型。 一般说来，感染性疾病的确诊主要依靠病原学检测，其缺点是检测过程太长，可能会耽误疾病诊治。而对于一些危重感染性疾病，必须予以紧急处理。 因此，临床需要一些简便有效的感染类型鉴别方法。笔者将鉴别方法整理成以下五步： 看白细胞总数是高了还是低了？ 一般来说，细菌感染白细胞总数升高，病毒感染白细胞总数降低。 其原因是致病细菌侵入机体后，在其趋化因子及补体活化产物的作用下，使吞噬细胞入血并向着感染部位移行集中，以此来和细菌作战，这样一个过程导致了白细胞总体上的升高。而病毒感染机体后, 病毒释放或损伤细胞而释放出的毒性物质可引起炎性浸润。这种炎症浸润的细胞主要是单核细胞, 包括巨噬细胞、浆细胞与淋巴细胞。许多病毒如水痘、麻疹、脊髓灰质炎等, 虽被吞噬却不能被杀灭, 在细胞内生长复制, 引起白细胞的死亡。 故病毒感染与细菌感染不同, 多为白细胞下降。还有人认为: 病毒尚有对白细胞及骨髓有直接抑制作用, 这可能是病毒感染后白细胞减少的部分原因。 在这里强调几个特殊的例子： 一是伤寒杆菌感染机体后，白细胞总数是降低的。 究其原因是伤寒杆菌产生内毒素, 可麻痹吞噬细胞, 阴止其移行, 同时在吞噬细胞内生长繁殖, 在致敏的淋巴细咆及其释放淋巴因子的杀伤破坏下, 造成靶细胞溶解, 导致白细胞减少。 二是临床上有些重症感染患者，因为感染较重，白细胞可能发生附壁，也就是贴附在血管壁上，这时血常规检测中的白细胞计数可以低于正常，其并不能完全反映外周循环的白细胞总数。
这一类患者在经过治疗后，白细胞计数可以出现回升，即贴壁的白细胞又重新以游离形式出现在外周血中。所以针对这种情况，临床医生需要引起足够的警惕。 三是传染性淋巴细胞增多症以及传染性单核细胞增多症都是由病毒感染引起，白细胞总数都增多，分类是淋巴细胞或单核细胞增多。 看降钙素原和 C 反应蛋白高不高 降钙素原（Procalcitonin，PCT）是由甲状腺 C 细胞合成分泌的一种多肽，C 反应蛋白是由肝脏合成的一种急性时相反应炎性蛋白。 有研究表明，PCT 对细菌感染检测的敏感度为92.7% ，特异度为63.2%。CRP 对细菌感染敏感性93.7%，特异度为13.2%。PCT 对病毒感染检测的敏感度为78.7%，特异性为46.0%。CRP 对病毒检测的敏感度为95.5%，特异度为13.6% 。 另外，研究也发现细菌感染的PCT、CRP 血清浓度明显高于病毒感染。健康人群血清中PCT 水平通常处于很低的程度，约小于0.0025uｇ/Ｌ，但却能稳定存在。Delevax 等发现PCT 的血清水平大于 1.2 mg/mL 是细菌感染而且应开始抗生素的治疗的阈值。 关于CRP，严格来说，其不完全是感染的观察指标，目前并没有一个可以参考的「阈值」用以界定细菌感染还是病毒感染。另有研究显示，与健康对照相比，细菌感染组CRP 浓度升高明显，差异具有统计学意义，而病毒感染组患者CRP 浓度升高并不明显，差异没有统计学意义。 看痰色是脓性痰还是粘液痰？ 有研究表明，脓性痰与细菌阳性率呈显著相关性。倪力, 张锋英, 高稚婷等的研究则进一步表明，黄脓痰组与白粘痰组相比, 痰及血中性粒细胞比例显著增高,
第七章微生物的感染与致病
第七章微生物的感染与致病 [内容提要]细菌是否有致病性，经典的依据是柯赫法则，近年来提出的分子水平的柯赫法则对此标准作了补充和完善。就某种病原菌而言，其致病性一般通过测定LD50来定量。细菌的致病性在很大程度上取决于其毒力因子，包括侵袭力与毒素，以及毒力因子的分泌系统。侵袭力导致病原菌在机体内定殖、突破机体的防御屏障、内化作用、繁殖与扩散。毒素有外毒素与内毒素之分，外毒素是具有特异性毒性作用的蛋白质，典型结构为A-B亚单位的聚体。内毒素为LPS的类脂A，耐热，具致热作用等。细菌致病性的现代观点是将病原菌、宿主及二者的相互的作用综合考虑，纠正了只调节细菌本身的片面性，是认识的深化。细菌的毒力可用人工的方法增强或减弱，并受到温度、离子浓度等多种环境因子的调节。 感染（infection）是指病原微生物在宿主体内持续存在或增殖。发病（disease）表示病原微生物感染之后，对宿主造成明显的损害。病原菌（pathogenic bacteria）是指那些导致机体发病的细菌。是一群高度特化了的微生物，为了自身的生存，已适应而且必须在宿主生物体内持续存在或增殖，有时可造成宿主发病。 从进化关系来看，病原菌是由非病原菌演变而来，它们之间没有绝对的界限。就病原菌的生活方式而言，绝大多数病原菌是寄生性的，又可分为专性寄生和兼性寄生两大类。另有一些是寄居性的，在正常情况下对寄主不呈现致病作用，如动物肠道的大肠杆菌、皮肤上的化脓性链球菌等，当动物机体抵抗力降低时可致病，称为条件性病原菌或机会性病原菌。还有少数是腐生性的，是在死物上生长繁殖产生毒素，毒素以食物等为媒介进入人和动物体而致病，如肉毒中毒等毒素性食物中毒等，称其为腐生性病原菌。 微生物学研究侧重于感染。因为感染的范围更广，发病仅仅是感染可能出现的后果之一。感染不一定都导致发病，而发病则离不开感染。如将防治传染病的重点转移到预防感染，则可收到事半功倍之效。 第一节细菌的致病性和毒力 病原菌能否引起宿主疾病取决于它们的致病性和毒力。 一定种类的病原菌，在一定的条件下能在特殊的宿主体内引起特定疾病的能力称为致病性（pathogenicity）。细菌的致病性是针对宿主而言，有的仅对人致病，有的则仅对某些动物
常见致病菌
革兰阳性致病菌革兰阴性致病菌 葡萄球菌属（金黄色葡萄球菌）链球菌属（化脓性链 球菌） 支原体目(肺炎支 原体) 放线菌目(结核分 支杆菌) 埃希菌属（大肠杆 菌） 沙门菌属（伤寒杆 菌） 志贺菌属（痢疾杆 菌） 螺旋体目(苍白 螺旋体) 衣原体科 生物学特性形态 与结 构 球形，多呈葡萄串 状排列。无鞭毛， 无芽胞，有的有荚 膜。G+ 球形，链状排列。无 鞭毛，无芽胞，幼龄 菌多由荚膜。G+ 无细胞壁，呈高度 多形性，吉姆萨染 色呈淡紫色，胞外 繁殖最小微生物， 细胞膜，荚膜，环 状双链DNA 有菌丝和孢子，具 有原始核质，无核 膜核仁，肽聚糖和 磷壁酸组成细胞壁 细胞壁(分支菌酸) 杆状，多数有周身 鞭毛，有菌毛，无 芽胞。G- 具有周身鞭毛，无 芽胞，有菌毛，有 荚膜。G- 短小杆状，有菌毛， 无芽胞，无鞭毛。 G- 体纤细，螺旋致 密规则，两端尖 直，Fontana镀银 染色为棕褐色， 菌体弯曲成S或C 形 体积微小，呈圆 形或椭圆形体， 肽聚糖细胞壁， 有原体(胞外，高 度感染性)和网 状体 抗原 构造 有葡萄球菌蛋白A （SPA）、磷壁酸等。 A群链球菌细胞壁上 多有多糖抗原，再外 层有蛋白质表面抗 原。 1、蛋白质抗原： 血清学分型依据 2、糖脂抗原 细胞壁含有独特的 分枝酸 主要有菌体（O）、 鞭毛（H）和K抗原 三种。 O抗原产生IgM；H 抗原产生IgG；Vi 抗原有助于诊断。 有O、K抗原，依据 O抗原将志贺菌属 分为4群 密螺旋体抗原 （属共同抗原） 1、脂多糖抗原： 属特异性 2、外膜蛋白抗 原：种特异性、 型特异性 代谢 与培 养 需氧或兼性厌氧， 在普通培养基上生 长良好，耐高温。 兼性厌氧，血平板或 含血清的培养基培 养。 1、兼性厌氧/厌 氧 2、营养要求高， 10-12%血清培养 基 3、高pH （7.8-8.0） 4、荷包蛋样典型 菌落 正常寄生菌，培养 困难，血平板，厌 氧/微需氧 代谢活跃能发酵乳 糖，产酸、产气； IMViC：+ + - - 对营养要求不高， 兼性厌氧/需氧，普 通培养基，无色半 透明S型菌落，可 根据生化反应的不 同区分种与亚种， IMViC为-+-+ 能分解葡萄糖，产 酸、不产气，不发 酵乳糖。普通平板 IMViC试验为-+-- 厌氧、毒力株： 家兔单层上皮细 胞 非毒力株：活细 胞人工培养基 专性细胞内生 长，6-8天鸡胚卵 黄囊或Hela299 细胞培养 抵抗 力 较强，80℃30min 可杀死，对青霉素、 红霉素、庆大霉素 等过敏。 不强，60℃30min即 被杀死，对消毒剂、 青霉素、红霉素、磺 胺敏感。 1、弱，对理化因 素较细菌敏感。2、 对醋酸铊、结晶紫 有抵抗3、化学消 毒剂敏感。4、对 干扰细胞壁的抗 菌素耐药。5、对 干扰蛋白质合成 的抗菌素敏感 抗理化因素,抗干 燥和酸碱,对结晶 紫和孔雀绿有抵抗 力,对乙醇、湿热、 紫外线、结核治疗 药物敏感,抗菌素 敏感 强，56℃60min、 60℃15min有些仍 可存活。对化学消 毒剂敏感,胆盐、煌 绿等对其有抑制作 用,对磺胺类、链霉 素、氯霉素敏感, 但易耐药 不强，60℃15min 可被杀死，对氯霉 素敏感水中存活 2-3周、粪便存活 1-2月，理化因素敏 感(60℃30min )， 氯霉素等敏感，消 毒剂敏感 较其他肠道杆菌 弱，60℃10min即 被杀死，对酸敏感 极弱，对热、冷、 干燥、消毒剂和 肥皂水敏感，对 青霉素、四环素 和庆大霉素敏 感。 对热和消毒剂敏 感，耐低温，在 室温下迅速丧失 传染性，60℃ 5-10分钟、75% 乙醇半分钟或2% 苏打水5分钟即 可被杀死
食源性致病菌检验规范标准操作技巧程序
食源性致病菌检验标准操作程序 福建省疾病预防控制中心 二〇一二年十一月
一、生物样本检验标准操作程序 （一）粪便样本的保存、运送和检测 表1 粪便样本的保存、运送和检测培养条件 培养基目标病原体温度 细菌标本保 存和运送 1. Cary－Blair 所有食源性致病菌室温 增菌液 1. 改良磷酸盐缓冲液小肠结肠炎耶尔森氏菌 4 ℃ 2. mEC增菌肉汤EHEC O157:H7/STEC 37 ℃ 3. Preston肉汤弯曲菌微需氧42 ℃ 4. SBG增菌液沙门氏菌37 ℃ 5. 3%氯化钠碱性蛋白胨水弧菌37 ℃ 选择性分离平板1. Mac平板EPEC、STEC、ETEC、EIEC、 EAEC、志贺氏菌 37 ℃ 2. XLD平板志贺氏菌37 ℃ 3. mCCD平板弯曲菌微需氧42 ℃ 4. 耶尔森氏菌选择性平板小肠结肠炎耶尔森氏菌25 ℃ 5. 科玛嘉O157:H7显色平板EHEC O157:H7 37 ℃ 6. 科玛嘉沙门氏菌显色平板沙门氏菌37 ℃ 7. 科玛嘉弧菌显色平板 TCBS平板 弧菌37 ℃ 病毒标本 1. 采便盒轮状病毒、诺如病毒、札如 病毒、星状病毒、腺病毒 -20 ℃以下
\\ （二）检验方法与流程
（三）沙门氏菌和志贺氏菌检测操作程序 1 范围 本程序规定了粪便标本中沙门氏菌（Salmonella）和志贺氏菌（Shigella）的检验方法。 2 检验程序 沙门氏菌和志贺氏菌检验程序见图1。
图1 沙门氏菌和志贺氏菌检验程序 3 操作步骤 3.1 标本收集 标本包括新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子。最优标本是转移至Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。肛拭子不是最佳标本，仅在病人无粪便标本时采用。肛拭子收集后应当目测，需要在拭子上明显见到粪便。 所采集的标本尽快检验，放入Cary-Blair运送培养基中的标本应在冷藏条件下24 h内送检。新鲜的粪便标本置于清洁、干燥、无肥皂或消毒液残留的容器中，冷藏条件下8 h 内送检。 3.2 分离培养 3.2.1 直接分离培养 新鲜粪便：无菌拭子采集少量粪便，尽量从可见血或黏液的部位收集；新鲜拭子在XLD 和MAC一区划线；以1 μL无菌接种环或接种针划线分离。在标本中再插入一个清洁的无菌拭子，将拭子放入SBG增菌液。轻拧管盖。注意：拭子表面有一层标本即可，不可将过量的标本放入SBG增菌液。 肛拭子：操作程序同新鲜粪便。 转移至Cary-Blair运送培养基的粪便拭子：轻搅混合标本；拭子在XLD和MAC一区划线；以1 μL无菌接种环或接种针划线分离；在标本中再插入一个清洁的无菌拭子，将拭子放入SBG增菌液。轻拧管盖。注意：拭子表面有一层标本即可，不可将过量的标本放入SBG增菌液。 平板36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。 3.2.2 增菌培养 增菌液于36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h，采用上述方法于科玛嘉沙门氏菌显色平板上划线分离，36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。 3.3 菌落特征 3.3.1 选择性平板上可疑菌落的特征见表1。 表1沙门氏菌属和志贺氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 选择性琼脂平板 沙门氏菌 （大多数） 伤寒沙门氏菌志贺氏菌属 MAC琼脂菌落光滑、无色，直 径2 mm～3 mm XLD琼脂菌落呈红色，直径2 mm～4 mm 科玛嘉显 色培养基 紫色或酒红色紫色或酒红色 3.4 纯培养 挑取3个或以上可疑菌落，划线接种5%羊血琼脂平板，36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。 3.5 初步鉴定 可疑菌落接种TSI琼脂，赖氨酸脱羧酶培养基、动力-靛基质-鸟氨酸琼脂（MIO）、西