实验 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的速测
实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
（GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测）
方法一快速卡法
一、目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。
二、实验原理：
胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。
三、实验试剂：
1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片；
2、pH 7.5 磷酸盐缓冲液：分别称取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4?12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4]，用500 mL蒸馏水溶解。
四、实验步骤：
1、整体测定法
（1）选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中，加入10 mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上.
(2) 取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。
（3）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
2、表面测定法（粗筛法）
（1）擦去蔬菜表面泥土，滴2~3滴缓冲液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。（2）取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
（3）放置10 min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10 min。预反应10 min，预反应后的药片表面必须保持湿润。
（4）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
五、检测结果判断：
1、结果判断
结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。
与空白对照卡比较，白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。
对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。
2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。
六、实验注意事项及说明：
1、速测卡灵敏度指标如下表所示。
部分农药检出限参考表
2、速测卡法符合率：在检出的30份以上阳性样品中，经气相色谱法验证，阳性结果的符合率应在80%以上。
3、葱、蒜、萝卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性，处理样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提或采用表面测定法。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提法，减少色素的干扰。
4、当温度条件低于37℃，酶反应速度随之放慢，药片加液后放置反应的时间也应相对延长，延长时间的确定，应以空白对照卡用手指（体温）捏3min时可以变蓝，即可往下操作。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。空白对照卡不变色的原因：一是药片表面缓冲溶液加得少、预反应后的药片表面不够湿润；二是温度太低。
5、红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准，3 min后的蓝色会逐渐加深，24h后颜色回逐渐退去。
实验二酶抑制率法（分光光度法）
一、目的要求：学习酶抑制率法测定果蔬有机磷和氨基甲酸脂类农药残留的原理和方法，注意实验过程的操作要点。
二、实验原理：
根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性原理，向蔬菜的提取液中加入生化反应底物碘化乙酰硫代胆碱和乙酰胆碱酯酶，如果蔬菜不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低，酶的活性就不被抑制，实验中加入的底物就能被酶水解，水解产物与加入的显色剂反应产生黄色物质。如果蔬菜的提取液含有农药并残留量较高时，酶的活性被抑制，底物就不被水解，当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小。用分光光度计在412nm 处或农药残毒快速检测仪测定吸光值，根据计算出的抑制率，就可以判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。
三、实验试剂和仪器：
（一）试剂
1.pH8.0缓冲液分别称取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾，溶解于1000 mL蒸馏水中。
2.乙酰胆碱酯酶（实验专用酶）根据酶活力用缓冲溶液溶解，3 min的吸光值变化ΔA0值应控制在0.3以上。摇匀后在0~5℃冰箱中保存，保存期不超过4天。
3.底物碘化乙酰硫代胆碱称取25.0 mg碘化乙酰硫代胆碱，用3.0 mL缓冲溶液溶解，在0~5℃下保存。保存期不超过2周。
4.显色剂分别称取160 mg二硫代二硝基苯甲酸和1
5.6 mg碳酸氢钠，用20 mL缓冲溶液溶解，4℃冰箱保存。
5.可选用由以上试剂配置的试剂盒。乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在0.3以上。
（二）仪器
1.分光光度计或相应的农残快速检测仪；
2.天平（0.01g）；
3.恒温水浴或恒温培养箱。
四、实验步骤：
1、样品处理
选取有代表性的蔬菜样品，去掉不可食部分后称取蔬菜试样，冲洗掉表面泥土，剪成1 cm 左右碎片。取样品1 g ，放入烧杯或提取瓶中，加入5 mL 缓冲液，振荡1~2 min ，倒出提取液，静置3~5 min ，待用。 2、对照溶液测试
先于试管中加入2.5 mL 缓冲液，再加入0.1 mL 酶液、0.1 mL 显色剂。摇匀后于37 ℃放置15 min 以上（每批样品的控制时间应一致）。加入0.1 mL 低物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入比色皿中，记录反应3 min 的吸光度的变化值ΔA 0。 3、 样品溶液测定
先于试管中加入2.5 mL 样品提取液，其他操作与对照测定相同，记录反应3 min 的吸光度的变化值ΔA t 。 五、结果计算：
抑制率（%）=1000
0???-?A A A t
式中 ΔA 0——对照液反应3 min 吸光度的变化值； ΔA t ——样品溶液反应3 min 吸光度的变化值。
六、实验结果判断：
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率大于50% 时，表示样品中有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药残留，可判定样品为阳性结果，对检验结果阳性的样品需重复检验两次以上。 检验结果记录：
七、实验注意事项及说明
1、对检验结果阳性的样品，需用其他方法进一步确定残留农药的种类和进行定量测定。
2、酶抑制率法对部分农药的检出限为：
3、葱、蒜、萝卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性，处理样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提或采用表面测定法。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提法，减少色素的干扰。
4、当温度条件低于37℃，酶反应速度随之放慢，药片加液后放置反应的时间也应相对延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶空白对照测试的吸光度变化
ΔA0在0.3以上为准。注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。酶的活性不够和温度太低都可能造成胆碱酯酶空白对照液3 min的吸光度ΔA0变化值＜0.3。5、该法适用于大量蔬菜样本的筛检，不适用于最后的仲裁检测。
八、思考题
1、使用速测卡的注意事项有哪些？
2、影响胆碱酯酶抑制检测法的因素有哪些？如何解决？
3、可用何种检测方法对检验结果为阳性样品，进行进一步的定性和定量？
蔬菜中9种有机磷农药残留量的测定
蔬菜中9种有机磷农药残留量的测定
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天马行空官方博客：https://www.360docs.net/doc/c82692071.html,/tmxk_docin；QQ:1318241189；QQ群：175569632 蔬菜中9种有机磷农药残留量的测定 天马行空官方博客：https://www.360docs.net/doc/c82692071.html,/tmxk_docin；QQ:1318241189；QQ群：175569632 摘要：采用北分SP3420型气相色谱仪，石英毛细管色谱柱对蔬菜中9种常用有机磷农药残留进行检测，获得良好的分离，仪器的最小检测量满足国标要求。关键词：有机磷农药 SP3420 1 引言 农药残留是人们非常关心的问题，它不仅关系人们的身体健康，而且已经成为影响农产品进出口贸易的重要障碍，严重影响了农民的经济利益，给农民造成了巨大损失。在我国农药中，70%为有机磷农药，而在我国生产使用的有机磷农药中70％为剧毒、高毒类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。据农业植保部门调查：四个蔬菜品种——番茄、黄瓜、青椒、豆角中主要使用的农药有氧化乐果、对硫磷、甲拌磷、甲胺磷等。其中甲胺磷是最常用的高毒、广谱的农药，在叶菜上的使用频率高达50～60%；对硫磷在番茄、豆角、菜椒上的使用频率也在60%左右。 采用气相色谱法检测挥发性农药，具有高选择性、高分离效能、高灵敏度、快速等特点，是农药残留量检测最常用的方法之一。本实验采用北分SP3420型气相色谱仪对蔬菜中9种常用有机磷农药残留进行测定，获得满意的分析结果，仪器最小检测浓度符合国标要求。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 SP3420气相色谱仪（北分瑞利色谱仪器中心），配有FPD检测器，BF-2002色谱工作站；9种有机磷农药标准样品（中国标准物质中心）；3种绿色蔬菜购自河北省石家庄市；其余试剂均为分析纯。 2.2 样品前处理 参照国标GB/T 5009.20-2003《食品中有机磷农药残留量的测定》对菠菜、
气相色谱法测定蔬菜和水果中的有机磷残留农药
第３２卷第５期２００４年１０月 浙江工业大学学报 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＺＨＥＪＩＡＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ Ｖ０１．３２Ｎｏ．５ ０Ｃｔ．２００４ 气相色谱法测定蔬菜和水果中的有机磷残留农药 Ｏ 陈皑１，周瑛２，王萍亚１，陈易晖２ （１．浙江舟山市质量技术监督检测中心，浙江舟山３１６００３；２．浙江工业大学化学工程与材料学院，浙江杭州３１００３２） 摘要：采用ＣＰ３８００美国瓦里安气相色谱仪，氮磷检测器（ＴＳＤ），毛细管气相色谱法测定蔬菜、 水果等农产品中１１种有机磷农药的残留量，１１种有机磷农药都能够得到较好的分离，分离效果好。采用外标法定量。测定的分析方法变异系数（ＲＳＤ）在０．８％～６．４％之间，１１种有机磷农药 标样在不同蔬菜中的添加回收率在７７．４％～１０７．２％之间，满足农药残留分析要求。本方法可用 于测定蔬菜、水果等农产品中１１种有机磷农药的残留量，检测过程简便、快速。 关键词：农药残留；毛细管气相色谱；有机磷农药；蔬菜水果 中图分类号：ＴＱ４５０．７文献标识码：Ａ文章编号：１００６—４３０３（２００４）０５—０５８５—０４ ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｒａｃｅＯｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓｉｎｆｒｕｉｔｓａｎｄｖｅｇｅｔａｂｌｅｓｂｙｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｉｎｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ ＣＨＥＮＡｉｌ，ＺＨＯＵＹｉｎ９２，ＷＡＮＧＰｉｎｇ—ｙａｌ，ＣＨＥＮＹｉ—ｈｕｉ２（１．ＺｈｏｕｓｈａｎＣｅｎｔｅｒｏｆＣａｌｉｂｒａｔｉｏｎａｎｄＴｅｓｔｉｎｇｆｏｒＱｕａｌｉｔａｔｉｖｅＴｅｃｈｎｉｃａｌＳｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ，Ｚｈｏｕｓｈａｎ３１６００３，Ｃｈｉｎａ； ２．ＴｈｅＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇａｎｄＭａｔｅｒｉａｌｓＳｃｉｅｎｃｅ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００３２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｅｌｅｖｅｎｔｒａｃｅｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓｉｎｆｒｕｉｔｓ ａｎｄｖｅｇｅｔａｂｌｅｓｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙＧａｓＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｔｈｅｓｅｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ ａｒｅｍｅｔｈｉｄｏｐｈｏｓ， ｄｉｃｈｌｏｒｖｏｓ，ａｃｅｐｈａｔｅ，ｏｍｅｔｈａｔｅ，ｐｈｏｒａｔｅ，ｄｉｍｅｔｈｏａｔｅ，ｅａｒｂｏｆａｒａｎ，ｐａｒａｔｈｉｏｎ—ｍｅｔｈｙｌ，ｆｅｎ— ｉｔｒｏｔｈｉｏｎ，ｍａｌａｔｈｉｏｎａｎｄｐａｒａｔｈｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｏｆｔｈｅｓｅｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ ａｒｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ７７．４％～１０７．２％，ａｎｄｔｈｅＲＳＤａｒｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０．８％ ～６．４％．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄｈｅｒｅｉｓｓｉｍｐｌｅ，ｆｅａｓｉｂｌｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅ．Ｔｈｅｏｂｔａｉｎｅｄｒｅ— ｓｕｌｔｓａｒｅｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｐｅｓｔｉｃｉｄａｌｒｅｓｉｄｕｅｓ；ｆｒｕｉｔｓａｎｄｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ；ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓ—ｐｈｏｒｕｓｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ 引 有机磷农药作为一种高效的杀虫剂，在蔬菜、水果中使用广泛，由于各种原因，农药残留问题一 直困扰着食品的食用安全，威胁着人民的健康，对农产品的安全检测就显得越发重要，因此有必要找到一个样品前处理简便、快速且准确的测定方法。目前，有关蔬菜、水果中有机磷农药的测定方法有快速法‘¨、气相色谱法‘２４３和气相色谱质谱连用Ⅲ等方法，前者虽然简便，但不易准确定性且不能定量，气质连用法是目前测定农药残留最为先进和可靠的仪器之一，但价格昂贵，难以普及；气相色收稿日期：２００３—１２—１２；修订日期：２００４—０５—０４ 作者简介：陈皑（１９７０一），男，浙江舟山人，工程师，主要从事产品质量检测工作。 盲冉 万方数据
蔬菜中有机磷农药残留量的检测与分析
黑龙江东方学院 本科生毕业论文 蔬菜中有机磷农药残留量的检测与分析 姓名唐文杰 学号054131303 专业食品科学与工程 班级2005—B 指导教师付红岩 学部食品与环境工程学部 答辩日期2009年5月24日
蔬菜中有机磷农药残留量的检测与分析 摘要 有机磷农药作为一类高效、广谱的杀虫剂正被广泛地用于农业防害以及家庭、仓储等的杀虫，但大量使用后产生的环境危害也日益严重。农药的急性中毒，特别是果蔬食品污染后引发的群体中毒事件屡有发生。因此建立果蔬有机磷残留检测技术是很有必要的。 本课题采用乙腈浸提，同时对茄果类、瓜类、甘蓝类、白菜类、绿叶类、豆类6类蔬菜共24个品种，采用气相色谱法检测有机磷中高毒农药甲胺磷、氧化乐果、甲拌磷、对硫磷、甲基对硫磷、毒死蜱、敌敌畏、乙酰甲胺磷、三唑磷、杀螟硫磷、水胺硫磷等13种农药残留情况。本次检测蔬菜样品24个，其中检出含有被测农药样品8个，检出率33.3%；被测农药不合格的样品3个，总合格率87.5%。有5种高毒农药被检出，其中毒死蜱的检出率最高，达到25%，氧化乐果的检出率为16.7%，甲胺磷、水胺硫磷、乙酰甲胺磷均为8.3%。 关键词：气相色谱；有机磷农药；蔬菜
in the detection and analysis Abstract The ganophosphorus agricultural chemicals take one kind highly effective, Guang Pu the pesticide widely to use in agricultural against evil as well as the family, the warehousing and so on insect disinfestation, but uses after massively, produces the environment harm day by day is also serious. Agricultural chemicals acute poisoning, after specially fruits and vegetables food contamination, initiates the community poison event sometimes occurs. Therefore the establishment fruits and vegetables ganophosphorus remains the examination technology to have the necessity very much. this topic uses the methyl cyanide to soak raises, simultaneously to the eggplant fruit class, the melon class, the sea cabbage class, the cabbage class, the green leaf class, the legumes 6 kind of vegetables altogether 24 varieties, uses in the gas phase chromatography examination ganophosphorus the high poisonous agricultural chemicals methylamine phosphorus, the oxidized rogor, the thimet, the parathion, the methyl parathion, to kill by poison the tick, the phosphate insecticide, the acetyl methylamine phosphorus, the triazole phosphorus, to kill the snout moth sulfur phosphorus, Shui Anliu the phosphorus and so on 13 kind of pesticide residue situation. This examination vegetables sample 24, picks out includes is measured agricultural chemicals sample 8, detection rate 33.3%; Is measured agricultural chemicals unqualified sample 3, total qualified rate 87.5%. Some 5 kind of high poisonous agricultural chemicals are picked out, kills by poison the tick the detection rate to be highest, achieves 25%, the oxidized rogor detection rate is 16.7%, the methylamine phosphorus, Shui Anliu the phosphorus, the acetyl methylamine phosphorus is 8.3% Key word：Gas chromatography; Organic phosphorus agricultural chemicals; Vegetables
食品中总酸的测定(滴定法)
学号姓名 实验三食品中总酸的测定（滴定法） 一、实验原理 果汁具有酸性反应，这些反应取决于游离态的酸以及酸式盐存在的数量。总酸度包括未解离酸的浓度和已解离酸的浓度。酸的浓度以摩尔浓度表示时，称为总酸度。含量用滴定法测定。果蔬中含有各种有机酸，主要有苹果酸、柠檬酸、酒石酸、草酸……。果蔬种类不同，含有机酸的种类和数量也不同，食品中酸的测定是根据酸碱中和的原理，即用标定的氢氧化钠溶液进行滴定。 二、材料、仪器与试剂 （一）材料：西红柿、苹果、果汁等 （二）仪器：碱式滴定管（20mL）、容量瓶（100mL）、移液管（10mL）、烧杯（100mL）、研钵或组织捣碎机、100ml量筒(量酒精)、1%酚酞指示剂、胶头滴管/滴瓶、容量瓶（1000mL）、布氏漏斗+滤纸、天平、三角烧瓶、洗瓶、活性炭（脱色）、和板、蒸馏水。 （三）试剂 1）．0.1mol/L氢氧化钠：称4.0g氢氧化钠定容至1000mL，然后用0.1mol/L邻苯二甲酸氢钾标定，若浓度太高可酌情稀释。 2）．1%酚酞指示剂：称1.0g酚酞，加入100mL50%的乙醇溶解。 三、操作步骤 1）0.1mol/L NaOH标准溶液的标定：将基准邻苯二甲酸氢钾加入干燥的称量瓶内，于105-110℃烘至恒重，用减量法准确称取邻苯二甲酸氢钾约0.6000克，置于250 mL锥形瓶中，加50 mL无CO2蒸馏水，温热使之溶解，冷却，加酚酞指示剂2-3滴，用欲标定的0.1mol/L NaOH溶液滴定，直到溶液呈粉红色，半分钟不褪色。同时做空白试验。 2）样品的处理与测定：准确称取混合均匀磨碎的样品10.0g（或吸10.0mL样品液），转移到100mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度、摇匀。用滤纸过滤，准确吸取滤液20mL放入100mL 三角瓶中，加入1%酚酞2滴，用标定的氢氧化钠滴定至初显粉色在0.5min内不褪色为终点，记下氢氧化钠用量，重复三次，取平均值。 四、实验结果 式中：V——样品稀释总体积（mL）V1——滴定时取样液体积V2——消耗氢氧化
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准 1. 范围本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。 本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。 测试方法酶抑制率法 2. 原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在410 nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。 3. 试剂 3.1 pH8.0 缓冲溶液：分别取43.5g 无水磷酸氢二钾与2.2g 磷酸二氢钾，用510mL蒸馏水溶解。 3.2显色剂：分别取160m匸硫代二硝基苯甲酸（DTNB和15.6mg 碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4°C冰箱中保存。 3.3底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.1mL蒸馏水溶解，摇匀后置4C冰箱中保存备用。保存期不超过十天。 3.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3 min 的吸光度变化D A0值应控制在0. 3以上。摇匀后置4C冰箱中保存备用，保存期不超十天。 3.5可选用由以上试剂制备的试剂盒。乙酰胆碱酯酶的△A0值 应控制在0.3 以上。 4 仪器
4.1 分光光度计或相应测定仪。 4.2 常量天平。 4.3 恒温水浴或恒温箱 5 分析步骤 5.1 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成 1cm左右见方碎片，取样品1g,放入烧杯或提取瓶中，加入5mL 缓冲溶液，静制十五分钟，之间需振荡几次，待用。 5.2对照溶液测试：先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，依次加入 O.ImL酶液、0.1mL显色剂、O.ImL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3 min的吸光度变化值厶A0。 5.3样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，但在加底物之前必须放置15 分钟，记录反应3min的吸光度变化值厶At。 6 结果的表述计算 6.1 结果计算 检测结果按公式计算：抑制率（％）=[ （△ A o- △ A）/ △ A] x 100 式中：△ A —对照溶液反应3min吸光度的变化值； △ A t －样品溶液反应3min 吸光度的变化值； 6.2 结果判定结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。当蔬菜样品提取液对酶的抑制率》50%寸，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2 次以上。 对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。 7附则 7.1酶抑制率法技术指标 7.1.1灵敏度指标：酶抑制率法对部分农药的检出限见表2酶抑制率法对部分农药的检出限 表2酶抑制率法对部分农药的检出限
蔬菜中有机磷农药的快速测定
蔬菜中有机磷农药的快速测定 前言 蔬菜与人们的日常生活密切相关，其中农药残留问题也早已成为人们关注的焦点 。由于有机磷农药对于防治蔬菜等的农作物病虫害具有经济、高效、方便等特点，所以有机磷农药长期在农药中占有重要地位，但不少有机磷农药在杀灭病虫害的同时对人体也具有高毒性。随着人们对有机磷农药及其残留的认识，对它进行检测的各种方法也就应运而生。目前常用的农残检测方法有气相色谱法和酶抑制法，其中气相色谱法是国家标准方法，它的准确度和精确度高，但色谱法运行费用高，而且需要专门的技术人员进行操作，分析所需时间长，仅适合于实验分析，很难在社会上普及，不能满足现场快速测定的需要。实际上，各种有机磷农药对人体的毒性具有累加作用，在蔬菜生产中农民也是经常将几种不同的有机磷农药混合使用，因此判断蔬菜中有机磷农药污染的程度不应该孤立地看每种有机磷农药，而应该看其综合作用。胆碱酯酶的抑制率检测方法则可以较好的反映有机磷农药的综合作用。因此采用酶抑制法，它对有机磷农药测定实用性广，同时对样品净化要求不高，检测时间短，无需精密仪器设备，与气相色谱法相比，技术更易于掌握，适合我国现行的农产品产销体系下对蔬菜有机磷农药残留的检测。但对于用此方法不能具体检测出是哪种有机磷农药的问题，可在用酶抑制法测出超标的基础上再用《GB-T 5009.20-2003 食品中有机磷农药残留量的测定》即气相色谱法方法检测超标样品中具体含有哪种有机磷农药。 一、实验目的 1、熟悉FITT-2001农药残留快速测试仪的使用方法。 2、掌握用酶抑制法测定蔬菜中有机磷农药的原理和方法。 二、实验原理 胆碱酯酶对底物分解反应的催化能力与其活性成正相关。而蔬菜中的农药对胆碱酯酶的活性起抑制作用，抑制程度的大小与农药的残留毒性成线性相关。因此通过测试蔬菜样品与胆碱酯酶作用前后催化反应的速率变化，即可测试胆碱酯酶的活性变化，从而测试出样品中的农药残留，用[I%]表示酶的抑制率。 酶抑制率的测量：酶催化底物分解，其分解产物与显色剂瞬时反应，定量的生成黄色化合物。催化反应速率越快，黄色化合物生成速度也越快。测量溶液吸光特性（A）随时间（t）变化的曲线即可测得催化反应速率（K），进而计算出酶试剂的活性（γ）。 由于I%=（γck-γs ）×100/γck
分析化学 实验二 有机酸含量的测定
实验二有机酸含量的测定 重点：①碱式滴定管的调零、体积读数，容量瓶、移液管的正确使用；②邻苯二甲酸氢钾及有机酸样品的正确称取（差减法）；③有效数字的取舍及确定。 难点：滴定终点的判断及掌握。 一、实验目的 1.学习强碱滴定弱酸的基本原理及指示剂的选择 2.掌握NaOH的配制和标定方法以及基准物质的选择 二、实验原理 1.大多数有机酸是弱酸，如果某有机酸易溶于水，解离常数Ka>>10-7，用标准碱溶液可直接测其含量，反应产物为强碱弱酸盐。滴定突跃范围在弱碱性内，可选用酚酞指示剂，滴定溶液由无色变为微红色即为终点。根据NaOH标准溶液的浓度c和消耗的体积V计算该有机酸的含量： 2. NaOH标准溶液是采用间接配制法配制的，因此必须用基准物质标定其准确浓度。邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4），它易制得纯品，在空气中不吸水，容易保存，摩尔质量较大，是一种较好的基准物质，标定反应如下： 反应产物为二元弱碱，在水溶液中显微碱性，可选用酚酞作指示剂。 邻苯二甲酸氢钾通常在105-110℃下干燥2h后备用，干燥温度过高，则脱水成为邻苯二甲酸酐。 三、仪器和试剂 邻苯二甲酸氢钾（KHP）分析纯；酚酞2g·L-1乙醇溶液；NaOH分析纯；有机酸试样。 电子天平；细口试剂瓶；容量瓶（100mL）；移液管（25mL）；碱式滴定管；锥形瓶（250mL）。 四、实验内容 1. 0.1mol/L NaOH溶液的配制 在台秤上取约2g固体NaOH(用小烧杯称取),另用大量筒量取500mL去离子水，倒少量水入装有NaOH固体的小烧杯中，搅拌使NaOH溶解后将其倒入试剂瓶中；再将大量筒中剩余的水倒入试剂瓶中，混匀。 2. 0.1mol/L NaOH溶液的标定： 准确称取三份0.5-0.6g邻苯二甲酸氢钾分别于250mL的锥形瓶中，加20-30mL水溶解，加2滴酚酞指示剂，用NaOH溶液滴定至淡粉色即为终点。平行滴定3次，计算NaOH溶液的浓度。 3.有机酸试样的测定： 准确称取有机酸样品3.0-4.0g，置于小烧杯中，加入适量水溶解。然后定量地转入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 用移液管取有机酸溶液25.00mL, 加酚酞指示剂1-2滴，用NaOH标准溶液滴定至溶液呈微红色，30秒不褪色，即为终点。记下NaOH用量，平行测定三份，计算有机酸试样的含量。 五、数据记录及处理
蔬菜中有机磷农药的测定(精)
《技能训练库》综合技能实训指导书 实训项目名称蔬菜中有机磷农药的测定学时6学时 实训目的1.熟练掌握气相色谱仪的使用方法。 2.学会NY/T 761-2008测定蔬菜中有机磷农药的方法。 一、原理 试样中有机磷类农药用乙腈提取，提取溶液经过滤、浓缩后，用丙酮定容，注入气相色谱仪，农药组分经毛细管柱分离，用火焰光度检测器（FPD磷滤光片）检测，保留时间定性、外标法定量。 二、仪器、物品 分析天平，气相色谱仪（带有火焰光度检测器，毛细管进样口），食品加工器，旋涡混合器，氮吹仪，移液管，漏斗，玻棒，具塞量筒。黄瓜。 试剂： 乙腈，丙酮，氯化钠，农药混合标准溶液。 三、操作步骤 （一）制样 黄瓜两根，切小块，放入搅拌机中，打浆。 （二）样品提取 准确称取10.00±0.1克黄瓜匀浆于50mL离心管中，准确移入20.0mL乙腈，于旋涡振荡器上混匀2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有2g～3g氯化钠的50mL具塞量筒中，收集滤液20mL 左右，盖上塞子，剧烈震荡1min，在室温下静置30 min，使乙腈相和水相分层。 （三）净化 用移液管从具塞量筒中移取4.0mL乙腈相溶液于10mL刻度试管中，将其置于氮吹仪中，温度设为75℃，缓缓通入氮气，蒸发近干，用移液管移入2.0mL丙酮，在旋涡混合器上混匀，用0.2um滤膜过滤后，分别移入至自动进样器进样瓶中，做好标记，供色谱测定。 （四）测定 1.色谱条件 ⑴色谱柱 预柱：1.0m（0.53mm内径、脱活石英毛细管柱）；
色谱柱：50%聚苯基甲基硅氧烷（DB-17或HP-50+）柱，30m×0.53mm×1.0um。 ⑵温度 进样口温度：220℃；检测器温度：250℃。 柱温：150℃（保持2min），8℃/min的速度升温至250℃（保持12min）。 ⑶气体及流量 载气：氮气，流速为10mL/min； 燃气：氢气，流速为75mL/min； 助燃气：空气，流速为100mL/min。 ⑷进样方式 不分流进样。 2.色谱分析 由自动进样器分别吸取1.0uL标准混合溶液和净化后的样品溶液注入色谱仪中，以保留时间定性，以样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。 （五）结果计算 式中X——试样中被测农药残留量，mg/kg； ——标准溶液中农药的质量浓度，mg/L； A——样品溶液中被测农药的峰面积； As——农药标准溶液中被测农药的峰面积； m——试样质量，g； V1——提取溶剂的总体积，mL； V2——吸取出用于检测的提取溶液的体积，mL； V3——样品溶液的定容体积，mL。 四、注意事项 1.计算结果保留两位有效数字，当结果大于1mg/kg时，保留三位有效数字。 2.实验室温度应保持在25℃以下，以免样品中溶剂挥发，影响定量。 3.氮吹时，流量不要太大，以免溶液飞溅，也不能完全吹干。
实验三果蔬中可溶性固形物含量的测定及含酸量的测定
实验三（1）果蔬中可溶性固形物含量的测定 一、目的及原理 利用手持式折光仪测定果蔬中的总可溶性固形物（Total Soluble Solid，TSS）含量，可大致表示果蔬的含糖量。 光线从一种介质进入另一种介质时会产生折射现象，且入射角正弦之比恒为定值，此比值称为折光率。果蔬汁液中可溶性固形物含量与折光率在一定条件下（同一温度、压力）成正比例，故测定果蔬汁液的折光率，可求出果蔬汁液的浓度（含糖量的多少）。由于果蔬汁液中除糖以外，有机酸含量也很可观，并且含有果胶、单宁、无机盐等可溶性物质，故用手持糖度计测定的实是可溶性固形物的含量。通过测定果蔬可溶性固形物含量（含糖量），可了解果蔬的品质，大约估计果实的成熟度。 常用仪器是手持式折光仪，也称糖镜、手持式糖度计，该仪器的构造如下图所示。
二、材料与器具 果蔬、蒸馏水、烧杯、滴管、卷纸、手持式折光仪 三、操作步骤 打开手持式折光仪盖板，用干净的纱布或卷纸小心擦干棱镜玻璃面。在棱镜玻璃面上滴2滴蒸馏水，盖上盖板。 于水平状态，从接眼部处观察，检查视野中明暗交界线是否处在刻度的零线上。若与零线不重合，则旋动刻度调节螺旋，使分界线面刚好落在零线上。 打开盖板，用纱布或卷纸将水擦干，然后如上法在棱镜玻璃面上滴2滴果蔬汁，进行观测，读取视野中明暗交界线上的刻度，即为果蔬汁中可溶性固形物含量（%），重复三次。 四、结果与计算
实验三（2） 果蔬中含酸量的测定 一、目的与原理 果蔬中含有各种有机酸，主要的有苹果酸、柠檬酸、酒石酸、草酸等。果品品种种类不同，含有有机酸的种类和数量也不同。果蔬含酸量测定是根据酸碱中和原理，即用已知浓度的氢氧化钠溶液滴定，故测出来的酸量又称为总酸或可滴定酸。计算时以该果蔬所含主要的酸来表示，如苹果、梨、桃、杏、李、番茄、莴苣主要含苹果酸，以苹果酸计算，其毫克当量为0.067g ；柑橘类以柠檬酸计算，其毫克当量为0.064g ；葡萄以酒石酸计算，其毫克当量为0.075g 。 苹果酸 柠檬酸 补充说明：毫克当量数=摩尔质量/氢离子摩尔数 二、材料与用具 样品：常见果蔬，本实验用橘子； 试剂：0.1mol/L 氢氧化钠、1%酚酞指示剂； 仪器：打浆机、250ml 容量瓶、滤纸、20ml 移液管、锥形瓶、酚酞指示剂、0.1mol/LNaOH 、碱式滴定管、天平 三、操作步骤 1、称取均匀样品25g ，打浆机打浆，用纱布初滤，再用蒸馏水洗涤滤渣，后用滤纸过滤，定容至100ml 。 2、吸取滤液20ml 放入烧杯中，加酚酞指示剂2滴，用0.1mol/l NaOH 滴定，直至成淡红色为止（15秒不退色）。记下NaOH 液用量。重复滴定三次，取其平均值。 3、计算 果蔬含酸量= %100c ????A B W R V
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测 （GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测） 酶制剂岳阳家政排毒养颜胶囊减肚子她他女鞋痔疮偏方毛孔大 方法一快速卡法 一、目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。 二、实验原理： 胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。 三、实验试剂： 1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片； 2、pH 7.5 磷酸盐缓冲液：分别称取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4?12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4]，用500 mL蒸馏水溶解。 四、实验步骤： 1、整体测定法 （1）选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中，加入10 mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上. (2) 取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。 （3）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。 注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。 2、表面测定法（粗筛法） （1）擦去蔬菜表面泥土，滴2~3滴缓冲液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。（2）取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。 （3）放置10 min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10 min。预反应10 min，预反应后的药片表面必须保持湿润。 （4）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
蔬菜中有机磷农药的测定(精)(优.选)
综合技能实训指导书 1 / 3word. 《技能训练库》综合技能实训指导书 实训项目名称 蔬菜中有机磷农药的测定 学时 6学时 实训 目的 1.熟练掌握气相色谱仪的使用方法。 2.学会NY/T 761-2008测定蔬菜中有机磷农药的方法。 一、原理 试样中有机磷类农药用乙腈提取，提取溶液经过滤、浓缩后，用丙酮定容，注入气相色谱仪，农药组分经毛细管柱分离，用火焰光度检测器（FPD 磷滤光片）检测，保留时间定性、外标法定量。 二、仪器、物品 分析天平，气相色谱仪（带有火焰光度检测器，毛细管进样口），食品加工器，旋涡混合器，氮吹仪，移液管，漏斗，玻棒，具塞量筒。黄瓜。 试剂： 乙腈，丙酮，氯化钠，农药混合标准溶液。 三、操作步骤 （一）制样 黄瓜两根，切小块，放入搅拌机中，打浆。 （二）样品提取 准确称取10.00±0.1克黄瓜匀浆于50mL 离心管中，准确移入20.0mL 乙腈，于旋涡振荡器上混匀2min 后用滤纸过滤，滤液收集到装有2g ～3g 氯化钠的50mL 具塞量筒中，收集滤液20mL 左右，盖上塞子，剧烈震荡1min ，在室温下静置30 min ，使乙腈相和水相分层。 （三）净化 用移液管从具塞量筒中移取4.0mL 乙腈相溶液于10mL 刻度试管中，将其置于氮吹仪中，温度设为75℃，缓缓通入氮气，蒸发近干，用移液管移入2.0mL 丙酮，在旋涡混合器上混匀，用0.2um 滤膜过滤后，分别移入至自动进样器进样瓶中，做好标记，供色谱测定。 （四）测定 1.色谱条件 ⑴色谱柱 预柱：1.0m （0.53mm 内径、脱活石英毛细管柱）；
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果蔬中有机酸的测定
实验水果、蔬菜中总酸的测定 （学号：030212011031，030212011026 李欣钰和郎琳） 【实验目的】 1、利用标准液滴定水果蔬菜，测定不同水果蔬菜中总酸度 2、练习利用滴定管滴定溶液 3、练习移液管的使用 4、练习pH计的使用 【实验原理】 1、水果和蔬菜中含有各种不同的有机酸，主要为苹果酸，柠檬酸，酒石酸，草酸等。果树的种类不同，含有机酸的种类和数量也不同。果汁或菜汁的酸性取决于游离态的酸或酸式盐的存在数量。这些算都是有机弱酸，所以在测定时，有氢氧化钠标准溶液滴定就能测出酸度。这样测得的数据是总酸度，包含了未离解酸和已离解酸的浓度。用下式计算： 总酸度（%）=（V 样/W 样 ）x（V NaOH xc NaOH x折算系数/V取样）x100 式子中V样为样品稀释总体积；V取样为滴定时取样体积；W样为样品的质量。折算系数为不同有机酸的毫摩尔质量 2、食品中的总算度往往根据算韩算的不同，而取其中某种主要有机酸计量。食品中常见的有机酸及其毫摩尔质量折算系数如下 苹果酸——0.067（苹果，梨，西红柿） 酒石酸——0.075(葡萄) 柠檬酸——0.090(柑橘类) 【仪器试剂】 烧杯（100ml）(3-5只)，洗耳球，移液管（25ml）,容量瓶（250ml）（3只），滤纸，铁架台，滴定管夹，碱式滴定管，玻璃棒，胶头滴管，电子天平，研钵，酚酞指示剂，NaOH标准溶液（约为0.2mol/l），西红柿，葡萄，橘子（自备），塑料袋若干（自备），小刀（自备） 【实验内容】 1．准确称取混合均匀磨碎的样品10g 2.转移到250ml容量瓶中，加纯水至刻度线，摇匀 3.吸取50ml溶液于锥形瓶中，加入两滴酚酞试剂 4.用NaOH标准溶液滴定溶液至淡红色，并且在30s内不退色，即到达终点。 5.记下所用的NaOH体积。重复测定三次取平均值。 6.利用同样的方法测定剩余的两种水果或蔬菜。并记录实验数据 7.用pH计测出样品稀释液的pH 8.处理实验数据，比较所测的西红柿，葡萄，橘子的总酸度的不同 实验数据处理表
实训项目十三气相色谱法测定蔬菜中有机磷农药的残留量
实训项目十三气相色谱法测定蔬菜中有机磷农药的残留量 一、实验目的 1．了解火焰光度检测器特点及应用。 2．学习蔬菜中有机磷农药残留量的气相色谱测定方法。 二、实验原理 有机磷农药是一种高效广谱型杀虫剂，能大大降低了病虫害对蔬菜的危害，但农药残留问题比较突出。有机磷农药导致的急性中毒事件也屡见不鲜，加强蔬菜中有机磷农药的残留监测，对于保障人民群众的食品安全意义重大。 含有机磷的样品在富氢焰上燃烧时，产生激发态的HPO*分子，当它回到基态时会发射出波长为526nm的特征光。这种特征光经滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号而被检出。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。 三、主要仪器与试剂 1．仪器 气相色谱仪（配有火焰光度检测器FPD）；电动振荡器；微量注射器（10μL）；具塞锥形瓶。 2．试剂 二氯甲烷（分析纯）；无水硫酸钠（分析纯）；活性炭（用3mol/L盐酸浸泡过夜，抽滤，洗至中性，在120℃下烘干备用）；甲胺磷、对硫磷和乐果标准储备液（纯度均≥99％，100μg/mL）。 四、操作步骤 1．农药标准系列溶液配制 临用前用微量移液器准确量取甲胺磷、对硫磷和乐果标准储备液20、40、60、80、100μL，分别于10mL容量瓶中，用二氯甲烷稀释定容至刻度，即成0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/L的混合标准系列溶液，4℃冰箱贮藏。 2．样品前处理 将蔬菜洗净、晾干，取可食部分剪碎混匀。称取样品10.00 g，置于具塞锥形瓶内，加入无水硫酸钠30～80g（根据蔬菜含水量而定）混匀脱水，直至水分完全脱除（剧烈振摇后应有固体硫酸钠存在）。加入0.2~1.0g活性炭脱色，加入
实验六果蔬中含酸量的测定.doc
实验六果蔬中含酸量的测定(中和法） 一、目的及原理 果蔬中含有各种有机酸，主要有苹果酸、柠檬酸、酒石酸等。由于果蔬种类不同，含有机酸的种类也不同；同一果蔬品种，其成熟度不同，有机酸 的含量也有很大差异。果蔬中含酸量的多少亦是衡量其品质优劣的一个重要指 标，它与新鲜果蔬及加工处理后成品的风味关系密切。因此，了解其含量对鉴 定果蔬品质及进行合理加工有重要作用。通过实验，使学生了解果蔬总酸量测 定的原理，学会并掌握果蔬含酸量测定的方法。 果蔬含酸量的测定是根据酸碱中和的原理，即用已知浓度的氢氧化钠溶液滴定，并根据碱溶液用量，计算出样品的含酸量。所测出的酸又称总酸度或可滴 定酸。还有少量的酸，由于受果蔬中缓冲物质的影响，不易测出。计算时以 该果实所含的主要酸来表示，如仁果类、核果类主要含苹果酸，以苹果酸计算， 其毫摩尔质量为；柑桔类以柠檬酸计算，其毫摩尔量为；葡萄以酒石酸计算，其毫摩 尔量为；蔬菜中主要含草酸，其毫摩尔量为。 二、药品与器材 桃、杏、葡萄、番茄、莴苣等； 氢氧化钠、 1%酚酞指示剂； 50ml 或 10ml 滴定管、 200ml 容量瓶、 20ml 移液管、 100ml 烧杯、研钵、分析天平、漏斗、棉花或滤纸、小刀、白瓷板、滴定管。 三、操作与步骤 称取均匀样品20g，置研钵中研碎，注入200mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度。混合均匀后，用棉花或滤纸过滤到干燥的250 ml 烧杯中。 吸取滤液 20ml 放入 100mL烧杯中，加酚酞指示剂 2 滴，用 NaOH 滴定，直至成淡红色为止。记下NaOH液用量。重复滴定三次，取其平均值。 某些果蔬容易榨汁，而其汁液含酸量能代表果蔬含酸量，可以榨汁，取定量汁液（10ml）稀释后（加蒸馏水至20ml），直接用 NaOH液滴定。
实验三 有机酸摩尔质量的测定
实验三有机酸摩尔质量的测定 一、实验目的与要求 1.掌握用基准物标定 NaOH 溶液浓度的方法。 2.了解有机酸摩尔质量测定的原理和方法。 二、实验原理 绝大多数有机酸为弱酸，它们和 NaOH 溶液的反应为： nNaOH + H n A = Na n A + nH2O 当有机酸的各级离解常数与浓度的乘积均大于 10-8时，有机酸中的氢均能被准确滴定。用酸碱滴定法，可以测得有机酸的摩尔质量。测定时，n值须已知。由于滴定产物是强碱弱酸盐，滴定突跃在碱性范围内，因此可选用酚酞作指示剂。 NaOH 不符合基准物的条件，必须用近似法配制，然后用基准物标定。本实验采用邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）为基准物，酚酞为指示剂标定 NaOH 溶液的浓度，其反应式为： OH- + HC8H4O4- = C8H4O42- + H2O 三、仪器与试剂 NaOH、邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）、有机酸试样乙酰水杨酸（C9H8O4）、酚酞指示剂（0.2％乙醇溶液）、量筒(10mL)、烧杯、试剂瓶、滴定管(50mL)、锥形瓶(250mL)、移液管、容量瓶。 四、实验步骤 1. 0.10mol/L NaOH的配制 用直接称量法在台秤上称取2g NaOH于小烧杯中，溶解后，置于500ml戴橡皮塞的试剂瓶中稀至500ml摇匀。（需要定量吗？） 2. 0.10mol/L NaOH的标定 在称量瓶中用差减法平行称量邻苯二甲酸氢钾7份，每份约 0.4～0.6 g ，（分子式约204）分别倒入250 mL 锥形瓶中，加入 40～50 mL 水使之溶解，加入 1～2 滴酚酞指示荆，
用待标定的 NaOH 溶液滴定至呈现微红色，保持 30 秒内不褪色，即为终点。平行测定 3 次，计算 NaOH 溶液的浓度和相对平均偏差。
蔬菜中9种有机磷农药残留量的测定
蔬菜中9种有机磷农药残留量的测定 冯婷马丹斐刘华 (北京北分瑞利分析仪器集团有限责任公司色谱仪器中心，北京，100095) 摘要：采用北分SP3420型气相色谱仪，石英毛细管色谱柱对蔬菜中9种常用有机磷农药残留进行检测，获得良好的分离，仪器的最小检测量满足国标要求。关键词：有机磷农药 SP3420 1 引言 农药残留是人们非常关心的问题，它不仅关系人们的身体健康，而且已经成为影响农产品进出口贸易的重要障碍，严重影响了农民的经济利益，给农民造成了巨大损失。在我国农药中，70%为有机磷农药，而在我国生产使用的有机磷农药中70％为剧毒、高毒类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。据农业植保部门调查：四个蔬菜品种——番茄、黄瓜、青椒、豆角中主要使用的农药有氧化乐果、对硫磷、甲拌磷、甲胺磷等。其中甲胺磷是最常用的高毒、广谱的农药，在叶菜上的使用频率高达50～60%；对硫磷在番茄、豆角、菜椒上的使用频率也在60%左右。 采用气相色谱法检测挥发性农药，具有高选择性、高分离效能、高灵敏度、快速等特点，是农药残留量检测最常用的方法之一。本实验采用北分SP3420型气相色谱仪对蔬菜中9种常用有机磷农药残留进行测定，获得满意的分析结果，仪器最小检测浓度符合国标要求。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 SP3420气相色谱仪（北分瑞利色谱仪器中心），配有FPD检测器，BF-2002色谱工作站；9种有机磷农药标准样品（中国标准物质中心）；3种绿色蔬菜购自河北省石家庄市；其余试剂均为分析纯。 2.2 样品前处理 参照国标GB/T 5009.20-2003《食品中有机磷农药残留量的测定》对菠菜、青椒和番茄进行处理。 2.3 色谱条件
实验8果蔬中总酸度的测定
实验8果蔬中总酸度的测定 授课时间：）班级：11高应用化工1班 11高应用化工2班 教学目的：同“一.实验目的” 教学重点：预习方案的设计与书写、实验过程练习 教学难点：标准化实验流程与数据处理过程 教学方法：演示、讲授、实验操作 内容分析： 果蔬及其加工产品中所含的酸为有机酸（包括苹果酸、柠檬酸、酒石酸和草酸），可用碱标准溶液直接滴定。由于滴定产物为弱碱，滴定到等量点时溶液呈碱性，应选酚酞作指示剂。因为CO2的存在会多消耗碱标准溶液，产生正误差，故应将蒸馏水先煮沸，待冷却后立即应用，以消除CO2的影响。测定出的酸度为总酸度 教学内容： 一------七PPT
八．实验设计的重点内容：（讲解为什么） 1.需配制盐酸标准溶液的体积、浓度 2.标定盐酸标准溶液所需称量碳酸钠（或硼砂）的质量 3.滴定过程的取样量 4.样品是否需要稀释以及稀释的倍数。 5.滴定可行性判断 6.指示剂的选择 7.计算公式 九．课程设计 1．学生预习教材及化验员读本相关知识，并写出可行性报告； 2．教师对报告进行评估提问指导并允许学生做预习实验以对预习方案加以完善； 3．由教师作统一指导后进一步完善实验方案； 4．根据完善的方案进行实验测定过程，记录好数据，教师在实验过程中对学生的操作予以指导； 5．完成实验后整理实验室、打扫卫生、检查水电开关，离开实验室； 6．对记录数据进行处理，对数据给出评价，对实验中的问题进行探讨研究室并书写实验报告； 7. 根据实验预习报告、实验过程、实验操作、实验报告中存在的问题指导培养学生发现问题、分析问题、解决问题的能力，并培养学生良好的实验习惯。
实验过程意外情况及存在问题记录：仪器设备使用损耗情况记录：
果蔬有机酸含量测定
果蔬有机酸含量的测定 植物材料中含有丰富的有机酸，如苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、草酸等。利用酸碱滴定法测定果蔬中的可滴定酸含量，可以从风味及营养的角度衡量其品质。 重点：①碱式滴定管的调零、体积读数，容量瓶、移液管的正确使用；②邻苯二甲酸氢钾及有机酸样品的正确称取（差减法）；③有效数字的取舍及确定。 难点：滴定终点的判断及掌握。 一、实验目的 1.学习强碱滴定弱酸的基本原理及指示剂的选择。 2.掌握NaOH的配制和标定方法以及基准物质的选择。 二、实验原理 1.大多数有机酸是弱酸，如果某有机酸易溶于水，解离常数Ka>>10-7，用标准碱溶液可直接测其含量，反应产物为强碱弱酸盐。滴定突跃范围在弱碱性内，可选用酚酞指示剂，滴定溶液由无色变为微红色即为终点。 2. NaOH标准溶液是采用间接配制法配制的，因此必须用基准物质标定其准确浓度。邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4），它易制得纯品，在空气中不吸水，容易保存，摩尔质量较大，是一种较好的基准物质，标定反应如下： 反应产物为二元弱碱，在水溶液中显微碱性，可选用酚酞作指示剂。邻苯二甲酸氢钾通常在105-110℃下干燥2h后备用，干燥温度过高，则脱水成为邻苯二甲酸酐。 3. 在一定温度下，用蒸馏水或乙醇将植物材料中的有机酸浸提出来，用碱溶液滴定浸出液，即可计算出样品的可滴定酸含量。果实中的有机酸含量如柑橘类可换算成柠檬酸、葡萄可换算成酒石酸，苹果类可换算成苹果酸表示。 二、仪器设备 1. 天平 2. 250 mL三角瓶 3. 匀浆机（或研钵） 4. 恒温水浴锅 5. 低速离心机 （或漏斗） 6. 50mL离心管（或定性滤纸）7. 碱式滴定管8. 100 mL容量瓶9. 25mL移液管 三、试剂 1. 0.05 mol·L–1NaOH标准溶液：在天平上取约0.5g固体NaOH（可用干燥小烧杯称取），另用大量筒量取250mL去离子水（无CO2），倒少量水入装有NaOH固体的小烧杯中，搅拌使NaOH溶解后将其倒入试剂瓶中；再将大量筒中剩余的水倒入试剂瓶中，混匀。 以邻苯二甲酸氢钾（分析纯）标定其浓度：用万分之一的天平称取干燥过的邻苯二甲酸氢钾0.1250 g ~0.1500 g 3份，分别置250 mL 三角瓶中，用80 mL 无CO2水溶解，加酚酞指示剂2~3滴，用所配NaOH标准溶液滴定至微红色（大约15mL左右）。依下式计算NaOH 的准确浓度，求3份样品的平均值，结果保留至小数点后4位。 M = W V*0.2043 式中M ——NaOH标准溶液的浓度（mol·L–1）； W ——邻苯二甲酸氢钾的重量（g）； V ——滴定时所消耗NaOH溶液的体积（mL）； 0.2043 ——每毫摩尔邻苯二甲酸氢钾的重量（g）。 2. 1%酚酞指示剂：称取1 g 酚酞，溶解于100 m L 70%~90%乙醇中。 四、实验内容 1.将新鲜组织用匀浆机匀浆，称取匀浆5g于50mL离心管中，将35mL左右蒸馏水加入50mL离心管，于80℃恒温水浴中浸提30 min，其间不断摇匀。