霍乱弧菌采样及快速检测操作注意事项

霍乱弧菌采样注意事项

一．尽早采样，最好在用药前。

二．采样量要足够，固体粪便1-2g，液体粪便1-2ml放入10ml 碱性胨水中。

三．采样时要填写送检单，内容包括患者姓名、性别、年龄、采样日期、送样单位、送样人。

四．采样后专人及时送检，防治污染。

霍乱弧菌快速检测操作及注意事项

一、操作步骤：

1、待检试纸条置于洁净干燥的工作台上

2、用干净的吸管或加样器吸取样品或增菌样品2-3滴，滴加到检测条样品加入端（白色端），开始计时。

3、2-15分钟内观查结果。15分钟后结果不计。

二、结果判断：

阴性：一条红线出现，即质控线

阳性：两条红线出现，即检测线（中间）和质控线

无效：无红线出现

三、样品处理

1、直接检测：水样便

2、增菌检测：1-2ml接种至10ml碱性胨水中。37℃6-8

小时或过夜。

3、水样、食品标本略。

四、注意事项

1、检测试纸条4-30℃阴凉避光干燥处保存，注意防潮，有效期一年。

2、用新鲜标本，不得使用陈旧标本。

3、加样时用干净吸管或干净加样器加样，若将检测条直接浸入样品中不得超过0.5cm。

4、实验后彻底消毒污染区及具有传染可能的污染物。

环境监测采样方案

渭河水质采样方案一、采样目的为了加强分析人员的的实验操作能力，提高人员综合素质。根据《水质采样技术指导》（HJ 494-2009）的要求，在渭河草滩八路湿地公园段采样进行检测。二、适用范围适用于渭河草潭段。三、检测内容和方法（1）检测点位确定根据及《地表水和污水检测技术规范》的要求，在渭河进入草滩段设置一个控制断面，一个点位进行取样详细见表1、表2。表1采样垂线数的设置表2采样垂线上的采样点数的设置

（2）采样方法根据《水质湖泊和水库采样技术指导》（GB/14581-93）的要求进行采样。（3）测定项目检测项目为：水温、流量、PH、电导率、溶解氧、透明度、BOD5、COD、细菌总数、粪大肠菌群、总大肠杆菌、高锰酸盐指数、磷酸盐、硫化物、氨氮、悬浮物、碱度、钙、钙和镁、酸度、亚硝酸盐、硝酸盐、动植物和石油类、硫酸盐、水质苯系物、挥发酚、苯胺类化合物、六价铬、总磷、氯化物、总氮、水质甲醛、总残渣、矿化度、全盐量、氟化物、总铬、游离氯和总氯、阴离子表面活性剂、臭氧、氰化物、钴、镍、汞、砷、硒、铋、锑、铁、锰、铜、铅、锌、镉。四水样采集（1）采样工具采样器材主要是采样器和水样容器。关于水样保存及容器洗涤方法见表3。表3水样保存和容器的洗涤(部分)

注：(1) *表示应尽量作现场测定； **低温(0～4℃)避光保存。 (2)G为硬质玻璃瓶；P为聚乙烯瓶(桶)。 (3)①为单项样品的最少采样量； ②如用溶出伏安法测定，可改用1L水样中加19ml浓HCl04。 (4)I，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ表示四种洗涤方法，如下： I：洗涤剂洗一次，自来水三次，蒸馏水一次； Ⅱ：洗涤剂洗一次，自来水洗二次，1+3 HN03荡洗一次，

霍乱弧菌检测方法

霍乱弧菌检测的快速方法霍乱是由霍乱弧菌引起的烈性肠道传染病, 发病急、来势凶猛、传播快是该病的特点, 因而及早培养鉴定出霍乱弧菌对控制该病的流行和治疗有极其重要的意义。本文作者在1995年9 月～ 2000 年9 月期间, 对我科1 256 例急性腹泻患者粪便和呕吐物培养霍乱弧菌的方法进行改进, 大大缩短了阳性结果的报出时间, 现总结如下。 1 材料与方法 1.1材料 1.1.1 标本来源1995 年9 月～ 2000 年9 月本院门诊及住院急性腹泻患者新鲜粪便样本1 042 份, 呕吐物214 份。 1.1.2 试剂所用培养基均购自杭州天和微生物制品厂, 霍乱弧菌单克隆抗体购自卫生部兰州生物制品研究所。 1.2 方法用灭菌毛细吸管吸取1m l 患者米汤样粪便或直接将采便管棉拭子接种于10m l 1% 硷性蛋白胨水中, 置37℃培养箱作增菌培养。快速方法为增菌2 小时后取表面生长物或菌膜转种普通琼脂平板, 6 小时后即可挑取可疑菌落进行鉴定。另一方法为按常规方法增菌6～ 9 小时后转种于庆大霉素琼脂平板,均按《全国临床检验操作规程》进行鉴定。 2 结果应用快速方法在10 小时内可报出阳性结果, 常规方法则20 小时报出阳性结果。1 256 份标本中, 共检出15 例霍乱弧菌,均为小川型, 两种方法的阳性率均为1119% (15?1 256) , 符合率100%。 3 讨论霍乱是我国法定的甲类传染病, 国家要求在接诊24 小时内报出检验结果。本文在急性腹泻患者粪便霍乱弧菌培养方面采用缩短增菌时间和转种普通琼脂平板的方法, 从传统的增菌6～ 9 小时再转种选择性培养基改为增菌2 小时后开始转种普通琼脂平板, 能使阳性结果在10 小时内发出报告, 比常规方法快10 小时, 对霍乱的诊断治疗均有重要的意义。增菌2 小时即可转种是由于: (1) 霍乱患者急性期粪便和呕吐物中含有大量的堆乱弧菌, 增菌 2 小时后霍乱弧菌已被增殖数十倍, 此菌数已足以转种。(2)

采样注意事项

城市区域环境振动测量方法（GB1007—88）仪器：AWA6256B+型环境振动分析仪（测量范围：48～138dB）。采样前准备：采样前后仪器校准。测量量：铅锤向Z振级。测量类型：稳态振动：每个测点测量一次，去5 S内的平均示数作为评价值；冲击振动：取每次冲击过程中的最大示数为评价值，对于重复出现的冲击振动，以10次读数的算术平均值为评价值。无规振动：每个测点等间隔地读取瞬时示数，采样间隔不大于5 S，连续测量时间不少于1000 S，以测量数据的VLZ10值为评价值。测量位置：测点置于各类区域建筑物室外0.5m以内振动敏感处。必要时，测点置于建筑物室内地面中央。拾振器平稳的安放在平坦、坚实的地面上。避免置于如地毯、草地、沙地或者雪地等松软的地面上。

空气中氡浓度闪的烁瓶测量方法（GB/T 16147—1995）仪器：环境氡测量仪FD216（范围3～10000Bq/m3）采样仪器直接测量现场读数，（方法闪烁瓶法原理）布点要求：采样点必须有代表性，室内、室外、地下场所，空气中氡的浓度分布是不均匀的。采样点要代表待测空间的最佳取样点。采样条件：必须考虑地面、地域、气象、居住环境、人群特征等，条件的规范化取决于采样的目的。仪器操作：首先清洗仪器20min，之后直接测量出结果（采样时间20min）采样高度：0.5～1.5m之间。记录内容：采样器编号；采样时间；采样点的地点、时间、气压、温度、湿度等；其他：如风向、风力、雨前、雨后、周围环境等。

工作场所空气有毒物质测定无机含碳化合物（GBZ/T 160.28—2004）仪器：便携式红外线气体分析器(一氧化碳和二氧化碳)GXH-3010 仪器量程：0～50ppm（mg/m3=ppm×（分子量/22.4））采样前注意：采样前先调零，再用标气校准。标定完成后就可以测量。

食品中霉菌和酵母菌测定的标准操作规程

食品中霉菌和酵母菌测定的标准操作规程公司内部编号：（GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-

规范食品中霉菌和酵母菌测定的标准操作规程。 2范围本标准规定了食品中霉菌和酵母菌（moulds and yeasts）的计数方法。本标准适用于各类食品中霉菌和酵母菌的计数。 3责任质量部组织制订、化验室负责实施。 4内容 4.1 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 4.1.1 冰箱：2 ℃～5 ℃。 4.1.2 恒温培养箱： 28 ℃±1 ℃。 4.1.3 均质器。 4.1.4 恒温振荡器。 4.1.5 显微镜：10×～100×。 4.1.6 电子天平：感量0.1 g。 4.1.7 无菌锥形瓶:容量500 mL、250 mL。 4.1.8 无菌广口瓶：500 mL。

4.1.9 无菌吸管：1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)。4.1.10 无菌平皿：直径90 mm。 4.1.11 无菌试管: 10 mm×75 mm。 4.1.12 无菌牛皮纸袋、塑料袋。 4.2 培养基和试剂 4.2.1 马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基：见附录A 中A.1。 4.2.2 孟加拉红培养基：见附录A 中A.2。 4.3检验程序霉菌和酵母计数的检验程序见图1。图 1 霉菌和酵母计数的检验程序 4.4操作步骤 4.4.1 样品的稀释 4.4.1.1 固体和半固体样品：称取25 g 样品至盛有225 mL 灭菌蒸馏水的锥形瓶中，充分振摇，即为1:10稀释液。或放入盛有225 mL 无菌蒸馏水的均质袋中，用拍击式均质器拍打2min，制成1:10 的样品匀液。 4.4.1.2 液体样品：以无菌吸管吸取25 mL 样品至盛有225 mL 无菌蒸馏水的锥形瓶（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。 4.4.1.3 取1 mL 1:10 稀释液注入含有9 mL 无菌水的试管中, 另换一支1 mL 无菌吸管反复吹吸,此液为1:100 稀释液。 4.4.1.4 按 5.1.3 操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管。

霍乱弧菌检验程序

霍乱弧菌检验程序一、检查对象一天内腹泻三次或三次以上的病人。二、标本采集及处理 1、采集时间：在未服用抗生素前采样。 2、采集方式：用棉拭子或采便管从肛门插入直肠3—5厘米取样，必须看到有粪便黏附才可：对于自然排出的水样便、呕吐物及保存液保存的标本可直接接种分离或吸取 0.5ML、成形大便取黄豆左右大小。 3、标本送检：标本采集后应立即送检。若不能立即送检，可保存于碱性蛋白胨水中尽快送检验。24小时以上才能送检的标本，应使用文一腊二氏保存液保存。 4、标本处理：将标本直接分离接种于4号琼脂及放入 8—10ML碱性蛋白胨水中增菌。 “两管三板”：送检标本马上接种一个4号琼脂平板、同时碱性蛋白胨水培养管增菌；—8小时后接种增菌管内标本于第二块4号琼脂平板，同时转种第二管碱性蛋白胨水；6—8小时后继续接种第二管碱性蛋白胨水的标本于第三块4号琼脂平板上。

三、检验程序： 1、弧菌形态：弧菌生长快、菌落大、培养4—5小时，原划线处有菌苔生长，8—10小时可长出小菌落，16小时菌落直径可达2毫米。菌落略带灰色、半透明、扁平、稍隆起、光滑湿润，培养时间延长或室温放置后，菌落略带黄色，中心厚而周围透明，培养基含亚碲酸钾使得菌落成灰色，中心形成黑色金属碲沉淀。在平皿上挑取典型菌落做玻片凝集试验。 2、玻片凝集试验：首先要注意抗原抗体比例和保证抗原（菌株）的纯洁性，使用O1群和O139群两种诊断血清。如未获单个菌落，可挑取可疑菌苔边缘透明部分做玻片凝集。注意，凝集的菌落应以生理盐水作对照，检查有无自然凝集；然后用此玻片显微镜下看动力（动力活泼如流星样）；再将此玻片革兰氏染色看弧菌形态。 3、弧菌分型：稻叶型和小川型诊断血清做玻片凝集试验进一步分型。四、报疫程序：一旦发现阳性可疑标本立即用铁罐保存，通知送检科室，确认病人资料；上报医院总值班2460或2560，派车送海珠区防疫站确证。五、标本处理：

菌种抗生素的抗性检查标准操作规程

菌种抗生素的抗性检查标准操作规程依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。范围：适用于大肠杆菌表达的重组人基因工程产品。目的：验证该菌种的抗生素抗性是否与原始菌株相符。原理：该菌种所携带的重组质粒含有氨苄青霉素抗性基因，在含有氨苄青霉素的LB琼脂培养基上能够生长。责任：检定人员。内容： 1 材料 1．1 材料 1．1．1 菌种：PBV 888/DH 5α ，来源于主种子批或工作种子批。 1．1．2 注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版的要求。1．1．3 药品氯化钠 NaCl 分析纯琼脂粉分析纯酵母粉 OXOID 蛋白胨 OXOID 氨苄青霉素 C 16H 19 N 3 O 4 S 分析纯无水乙醇 CH 3CH 2 OH 分析纯 1．1．4 器皿三角烧瓶（1L）、量筒（500ml、1000ml）、烧杯（500ml）、平皿、盐水瓶（250ml、500ml、1000ml）。 1．1．5 其它材料线绳、牛皮纸、硫酸纸、剪刀、接种环、煤气灯、脱脂棉。 1．2 设备恒温培养箱 HG303-5B型湖北省黄石市医疗器械厂生物安全台Ⅱ级A型安徽蚌埠净化设备厂扭力天平TN-100B 上海第二天平厂

2 方法 2．1 准备工作 2．1．1 生产环境：在十万级洁净间中进行。场地摘下“清场合格”标志牌，挂上“使用中”标志牌。 2．1．2 器皿的洁净要求玻璃器皿经本室洗刷组处理后，用二层硫酸纸、一层牛皮纸包好，用线绳系紧，送高压灭菌（121.3℃，60分钟）。脱脂棉用硫酸纸、牛皮纸包好，121.3℃60分钟高压灭菌。 2．1．3．1 确认扭力天平运行状态良好，已挂有“备用”标志牌。 2．1．3．2 确认恒温培养箱运行状态良好，已挂有“运行”标志牌。 2．1．3．3确认生物安全台运行状态良好，已挂有“备用”标志牌。 2．1．4 配液 2．1．4．1 LB琼脂培养基的配制（500ml）摘下扭力天平“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌。用扭力天平准确称取酵母粉2.5克，蛋白胨5克，NaCl 5克，琼脂粉10克，倒入500ml烧杯中，加入400ml 注射用水，用玻棒搅匀溶解，定容至500ml，混匀，倒入1L三角瓶中，分别用二层硫酸纸和一层牛皮纸包瓶口，用线绳系紧，115.6℃，30分钟高压灭菌。贴上标签，标明液体名称、批号、配制日期，备用。 2．1．4．2 75%酒精1000ml 用量筒量取750ml无水乙醇，加入250ml无菌注射用水，置1000ml盐水瓶中，摇匀，标明液体名称、批号、浓度、日期，室温备用。 2．1．5 LB琼脂平板培养基的制作摘下生物安全台“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌，用75%酒精棉擦拭台内，接通电源。打开电机，无菌风吹30分钟，待已灭菌LB琼脂培养基500ml冷却到50℃左右，加入25mg氨苄青霉素，轻轻摇匀，倒平板，每皿20-30ml，待培养基冷却后，贴上标签，并注明名称、批号、配制日期，置37℃孵箱中孵育，判定合格后置于4℃冰箱中保存，待用。 2．3 操作步骤 2．3．1 在生物安全台中，将接种环用火焰灭菌并冷却后，用接种环取一环菌

生物等效性实验生物样品处理注意事项(严)知识讲解

生物等效性实验生物样品处理注意事项(严)

采满至相应刻度，残存负压造成红细胞破裂；不拔针头直接注入采血容器；样本离心时离心力过大等。为避免溶血，取血时应注意： ①、抽拉注射器时应尽量避免注射器内产生大量真空； ②、添加抗凝剂后的容器在除必要干燥流程后应及时密封； ③、混匀样本时避免用力过度，切勿产生泡沫； ④、避免重复使用注射器、针头、采血管、毛细玻璃管等一次性用品，手术刀片和剪刀等器材取材时尽量洗去残留血液； ⑤、采血时的室温应控制在22℃至25℃，采取的血液容器在需要放入冰盒时，切勿紧贴冰袋，冰水； ⑥、当注射器内因吸入空气产生血沫时，注意弃掉血沫，在将血液注入采血容器时勿将血沫一并注入； ⑦、使用真空采血管需抽取负压时切勿过量； ⑧、将血液注入采血容器时要除去针头，轻柔推入； ⑨、离心带有血细胞的血样时，按照规格设定离心参数； 1.1.4. 正确选择采集管。通常情况下多采用血清为样本(不抗凝)，部分检测项目需注意样本属性为血清或血浆，两者不可替代。一些特殊检验项目需要使用抗凝剂时，应注意选择合适的抗凝剂并注意抗凝剂与血液的比例，以防止样本凝血或红细胞形态的改变；抗凝血样本采集后立即轻轻摇匀至少上下颠倒8次，以防凝血发生。 1.1.5. 多项化验采血顺序：血培养瓶(厌氧瓶优先)→蓝帽管→黑帽管→红/黄帽管→绿帽管→紫帽管→灰帽管→其他。

介绍一种霍乱弧菌检测的快速方法(1)

文章编号:1006-3110(2000)06-0474-01 介绍一种霍乱弧菌检测的快速方法李伟贤　李成欢　罗君　(广东省粤北人民医院,512026)中图分类号:R516.5 文献标识码:A 霍乱是由霍乱弧菌引起的烈性肠道传染病,发病急、来势凶猛、传播快是该病的特点,因而及早培养鉴定出霍乱弧菌对控制该病的流行和治疗有极其重要的意义。本文作者在1995年9月～2000年9月期间,对我科1256例急性腹泻患者粪便和呕吐物培养霍乱弧菌的方法进行改进,大大缩短了阳性结果的报出时间,现总结如下。 1　材料与方法 111　材料 11111　标本来源　1995年9月～2000年9月本院门诊及住院急性腹泻患者新鲜粪便样本1042份,呕吐物214份。 11112　试剂　所用培养基均购自杭州天和微生物制品厂,霍乱弧菌单克隆抗体购自卫生部兰州生物制品研究所。 112　方法用灭菌毛细吸管吸取1m l患者米汤样粪便或直接将采便管棉拭子接种于10m l1%硷性蛋白胨水中,置37℃培养箱作增菌培养。快速方法为增菌2小时后取表面生长物或菌膜转种普通琼脂平板,6小时后即可挑取可疑菌落进行鉴定。另一方法为按常规方法增菌6～9小时后转种于庆大霉素琼脂平板,均按《全国临床检验操作规程》进行鉴定[1]。 2　结果应用快速方法在10小时内可报出阳性结果,常规方法则20小时报出阳性结果。1256份标本中,共检出15例霍乱弧菌,均为小川型,两种方法的阳性率均为1119%(15 1256),符合率100%。 3　讨论霍乱是我国法定的甲类传染病,国家要求在接诊24小时内报出检验结果。本文在急性腹泻患者粪便霍乱弧菌培养方面采用缩短增菌时间和转种普通琼脂平板的方法,从传统的增菌6～9小时再转种选择性培养基改为增菌2小时后开始转种普通琼脂平板,能使阳性结果在10小时内发出报告,比常规方法快10小时,对霍乱的诊断治疗均有重要的意义。增菌2小时即可转种是由于:(1)霍乱患者急性期粪便和呕吐物中含有大量的堆乱弧菌,增菌2小时后霍乱弧菌已被增殖数十倍,此菌数已足以转种。(2)霍乱弧菌生长的最适PH为712～714,但它有耐硷性,在PH818～910的硷性蛋白胨水中生长良好[2],而大多数细菌在此环境中生长受到抑制,早期转种,即使用普通琼脂平板也能获得较纯的菌株。(3)随着霍乱弧菌的生长,细菌的代谢产物使增菌液的PH下降,此时其它细菌亦开始生长。增菌时间越长,杂菌的数目也越多,给下阶段的分离培养带来困难,甚至造成潜漏检的可能。霍乱弧菌对营养要求不高,在普通琼脂平板上生长良好,且生长速度快。从实验可知,该菌在普通琼脂平板上长征4小时后,开始长出无色透明水样的菌苔,6小时后可出现单菌落,而在选择性培养基上生长速度较慢,37℃培养10小时,菌落才达到1MM左右。本文介绍在急性腹泻患者粪便和呕吐物培养霍乱弧菌的方法中采用缩短增菌时间和先转种普通琼脂平板来缩短培养时间,阳性标本用此法处理全部获得成功,同时保留传统的培养方法,在方法学上既可加快阳性结果的报出时间,又保留传统的培养方法防止漏诊。参考文献　[1]叶应妩,王毓三,主编.全国临床检验操作规程.南京:东南大学出版社,1997,514～517. 　[2]刘恭植,主编.微生物学和微生物学检验.北京:人民卫生出版社, 1987,198. (收稿日期:2000-10-18) 3　小结食品中的亚硝酸盐含量过多,可使大量血红蛋白变成高铁血红蛋白,使其失去输氧能力,导致机体严重缺氧。本文将系数补偿和双波长技术融为一体,运用于香肠、火腿肠等样品的测定,取得了满意的结果。参考文献　[1]张有贤,冯彦琳,张生万,等.导数一三波长光度法同时测定肉制品中亚硝酸盐和硝酸盐的研究.分析化学,1990,18(11):1011～ 1012.　[2]高甲友,盛永章.催化荧光法测定痕量亚硝酸盐和硝酸盐.理化检验—化学分册,1994,30(1):31～32. 　[3]刘劭钢,贾平静,刘开学,等.卡尔曼滤波紫外分光光度法同时测定硝酸根和亚硝酸根.中国公共卫生学报,1997,16(1):53. 　[4]中华人民共和国卫生部.食品卫生检验方法理化部分.北京:中国标准出版社,1997,156. 　[5]李友芬,柳立新.5-B r-PADA P双波长系数补偿吸光光度法测定钯铑.理化检验-化学分册,1995,31(91) :34～35. (收稿日期:2000-06-06) 474实用预防医学2000年12月　第7卷　第6期　P ractical P reventive M edicine,D ec.2000,V ol7,N o.6

环境监测采样方案

渭河水质采样方案一、采样目得为了加强分析人员得得实验操作能力,提高人员综合素质。根据《水质采样技术指导》(HJ 494-2009)得要求,在渭河草滩八路湿地公园段采样进行检测。二、适用范围适用于渭河草潭段。三、检测内容与方法 (1)检测点位确定根据及《地表水与污水检测技术规范》得要求,在渭河进入草滩段设置一个控制断面,一个点位进行取样详细见表1、表2。 (2)采样方法根据《水质湖泊与水库采样技术指导》(GB/14581-93)得要求进

行采样。 (3)测定项目检测项目为:水温、流量、PH、电导率、溶解氧、透明度、BOD5、COD、细菌总数、粪大肠菌群、总大肠杆菌、高锰酸盐指数、磷酸盐、硫化物、氨氮、悬浮物、碱度、钙、钙与镁、酸度、亚硝酸盐、硝酸盐、动植物与石油类、硫酸盐、水质苯系物、挥发酚、苯胺类化合物、六价铬、总磷、氯化物、总氮、水质甲醛、总残渣、矿化度、全盐量、氟化物、总铬、游离氯与总氯、阴离子表面活性剂、臭氧、氰化物、钴、镍、汞、砷、硒、铋、锑、铁、锰、铜、铅、锌、镉。四水样采集 (1)采样工具采样器材主要就是采样器与水样容器。关于水样保存及容器洗涤方法见表3。

注:(1) *表示应尽量作现场测定; **低温(0～4℃)避光保存。 (2)G为硬质玻璃瓶;P为聚乙烯瓶(桶)。 (3)①为单项样品得最少采样量; ②如用溶出伏安法测定,可改用1L水样中加19ml浓HCl04。 (4)I,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ表示四种洗涤方法,如下: I:洗涤剂洗一次,自来水三次,蒸馏水一次;

Ⅱ:洗涤剂洗一次,自来水洗二次,1+3 HN03荡洗一次,自来水洗三次,蒸馏水一次; Ⅲ:洗涤剂洗一次,自来水洗二次,1+3 HN03荡洗一次,自来水洗三次,去离子水一次; Ⅳ:铬酸洗液洗一次,自来水洗三次,蒸馏水洗一次。如果采集污水样品可省去用蒸馏水、去离子水清洗得步骤。经160℃干热灭菌2h得微生物、生物采样容器,必须在两周内使用,否则应重新灭菌;经121℃高压蒸汽灭菌15min得采样容器,如不立即使用,应于60℃将瓶内冷凝水烘干,两周内使用。细菌监测项目采样时不能用水样冲洗采样容器,不能采混合水样,应单独采样后2h内送实验室分析。 (2)采样方法 a、采样器直立式采水器 b、采样数量所需采水量按表3采集。 c、在水样采入或装入容器中,立即按表3要求加入保护剂。 d、注意事项 (1) 采样时不可搅动水底得沉积物。 (2) 采样时应保证采样点得位置准确。必须使用定位仪(GPS)定位。 (3) 认真填写“水质采样记录表”,用签字笔或硬质铅笔在现

013 霍乱弧菌检验标准操作规范

霍乱弧菌检验标准操作规范 1. 概述霍乱弧菌可分为古典生物型和El - Tor生物型；根据菌体抗原（即O抗原）又可分为155个血清群，其中O1血清群和O139血清群能引起霍乱的发病和流行，是霍乱的病原菌。 2. 标本类型粪便标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色：革兰阴性，菌体弯曲呈弧形或逗点状。 3.2 培养特性：在TCBS琼脂平板上呈黄色的菌落。在双氢链霉素洗衣粉琼脂平板上形成中心晕灰褐色的菌落。 3.3 生化反应：氧化酶试验阳性；发酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇，不发酵乳糖和L-阿拉伯糖；动力、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、霍乱红、硝酸盐还原和黏丝试验均阳性；精氨酸双水解酶试验阴性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌特征：革兰阴性弧菌或杆菌，动力试验阳性，()1群霍乱弧菌诊断血清凝集试验阳性。 3.4.2 与气单胞芮属、邻单胞菌属的鉴别见表9 - 29。 3.4.3 确诊O1群霍乱弧菌必须具备的条件：涂片为革兰阴性弧菌或杆菌；TCBS等选择培养基上典型的菌落特征；动力试验阳性，符合生化特性；()1群霍乱弧菌诊断血清凝集试验阳性。 3.5 操作步骡 3.5.1 在碱性蛋白胨水(pH 8.6)中，37℃培养6～8 h后转种于TCBS平板。 3.5.2 玻片凝集试验：从TCBS琼脂平板或双氢链霉素洗衣粉琼脂平板上挑取可疑菌落，与霍乱多价诊断血清做玻片凝集试验，以生理盐水为阴性对照，诊断血清凝集、生理盐水不凝者为阳性。做初步鉴定试验后，将此高度怀疑菌送疾病预防控制中心(CDC)做最后鉴定。 4.药敏参见《抗菌药物敏感试验标准操作规程》及CLSI MlOO - S24最新版本文件。 5．质量控制见《质量管理》。 6.结果解释初次分离时，采用pH为8.6的碱性蛋白胨水增菌6--8 h，液体呈均匀混浊，表面形成菌膜。

土壤环境质量监测方案的采样

土壤环境质量监测方案一、监测目的 1通过对该地特种玉米种植区的土壤质量现状监测，判断土壤是否被污染及污染状况，并预测发展变化趋势，根据土壤环境质量标准（GB15618-1995），土壤应用功能和保护目标，划分为三类：I类主要适用于国家规定的自然保护区（原有背景重金属含量高的除外）、集中式生活饮用水源地、茶园、牧场和其他保护地区的土壤，土壤质量基本保持自然背景水平。II类主要适用于一般农田、蔬菜地、茶园、果园、牧场等土壤，土壤质量基本上对植物和环境不造成危害和污染。: III类主要适用于林地士壤及污染物容量较大的高背景土壤和矿场附近等地的农田土壤(蔬菜地除外）。土壤质量基本上对植物和环境不造成危害和污染。I类II类III类土壤环境质量执行一二三级标准。 2对长期釆用未经处理过的生活污水和发酵废水灌溉对土地的影响进行监测，调查分析引起土壤污染的主要污染物，确定污染的来源、范围和程度，为行政主管部门釆取对策提供科学依据。 3在污水处理过程中，把许多无机和有机污染物质带入土壤，其中有的污染物质残留在土壤中，并不断地积累，它们的含量是否达到了危害的临界值，需要进行定点长期动态监测，以既能充分利用土地的净化能力，又能防止土壤污染，保护土壤生态环境。 4通过分析测定该地士壤中某些元素的含量，确定这些元素的背景值水平和变化。了解元素的丰缺和供应状况，为保护土壤生态环境合理施用微量元素及地方病因的探讨与防治提供依据。二、土壤的背景资料该地区为特种玉米种植区，自然社会环境方面的资料有：该地区长期采用未经处理过

的生活污水和发酵废水混合灌溉，并用污水灌溉3到5年。特种玉米种植区发生大面积死亡现象。三、监测项目的确定《农田土壤环境监测技术规范》将监测项目分为三类，即规定必测项目，选择必测项目和选择项目。必测项目有镉、汞、砷、铜、铅、铬、锌、镍、六六六、滴滴涕、pH。选择必测项目是根据监测地区环境污染状况，确认在土壤积累积累较多，对农业危害较大，影响范围广，毒物强的污染物。选择项目一般包括新纳入的在土壤中积累较少的污染物、由于环境污染导致土壤性状发生改变的土壤性状指标以及生态环境指标等。选择必测项目和选测项目包括贴、锰、总钾、有机质、总氮、有效磷、总磷、水份、总硒、有效硼、总硼、总钼，氟化物、矿化油、苯并（a）芘、全盐量等项目。四、采样点的布设以及样品的采集和制备 1、采样布点先将所监测的土地线划分为若干单元。考虑到所监测的土地属于污水灌溉的农田土壤，因此每个单元宜采用对角线布点法。对角线布点法适用于污水灌溉的农田土壤，由田块进水口向出水口引一条对角线，至少分五等分，以等分点为采样分点。土壤差异性大，可再等分，增加分点数。 2、样品釆集方法土壤样品的采集：本次监测目的是了解该地区的土壤污染状况，故采用采集混合样品。根据采样布点，将一个采样单元内各采样分点采集的土样混合均匀制成。因为该地区为一般农作物种植耕地，所以采集0? 20cm耕作层土壤。混合样量较大，需要采用四分法，最后留下lkg到2kg，装入样品袋。为了解污染物在土壤中垂直分布，按土壤发生层次釆土

微生物学检验题库及答案

《微生物学与检验》题库及答案一.名词解释 1.医院感染 2.肥达反应 3.内基小体 4. 噬菌体： 5.血浆凝固酶 6.败血症 7.灭菌 8.药物敏感试验 9.外 - 斐氏试验 10.L 型细菌 11.菌群失调： 12.微生物 13.细菌 14.最小抑菌浓度 15.菌落 16.汹涌发酵 17.无菌操作 18.流感杆菌“卫星现象” 19.培养基 20.包涵体 21.正常菌群 22. 内毒素 23. 干扰现象： 24.菌血症 25菌丝：二.填空题 1 L 型细菌是指（）。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为（）。 3 细菌 H-O 变异是指（）。 4 药敏试验所用标准培养基是，所用菌液相当于（）个细菌／ ml ，细菌接种采用（）划线接种法。 5 细菌致病因素包括（）、（）和（）。 6 细菌引起的全身感染包括（）、（）、（）和（）四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的（）。 8 影响革兰染色结果的关键步骤是（）。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象是穿刺接种线（），无动力细菌穿刺接种线（）。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖是否产（）和（）。 11 靛基质试验的原理为，细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成（），此代谢产物与加入的试剂反应，生成（）。 12 链球菌根据溶血现象分为（）、（）和（）三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为（）性，链球菌触酶试验结果为（）性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌是（）。 15 抗 O 试验是测定病人血清中（）抗体效价的试验，用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌是（）和（）。 17 IMViC 试验包括（）、（）、（）和（）四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现（）菌落，不分解乳糖则为（）菌落。 19 KIA 斜面红色表明，底层黄色、有气泡表明（）、（），有黑色沉淀表明（）试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括（）和（）。 21 AIDS 的传染源是（）和（），传播途径主要有（），（）和（）。 22 真菌菌落有（）、（）和（）三种。 23 病毒培养方法有（）、（）和（）。 24 病毒的基本结构由（）和（）组成，有些病毒还具有（）。 25 流感病毒根据抗原结构不同分（）、（）、（）三型，其中容易引起流感大流行的是其中的（）型。

生物等效性实验生物样品处理注意事项(严)

生物等效性实验生物样品处理注意事项一、样品采集后的的处理和贮存鉴于生物样本的特点，为了避免样品中被测药物发生分解或产生其他化学变化，取样后最好立即进行分析测定，但实际工作中几乎无法做到，常需将收集到的样品冷藏、冰冻，临用前再融化并放至室温后使用。在样本冷冻贮藏前，需及时进行处理。 1.1血液样本处理注意事项 1.1.1. 在肌肉注射或静脉输含有葡萄糖或电解质(含钾、钠、氯离子)的液体时，建议3小时以后采集静脉血样本进行这些项目的检验，以防止上述检验项目因输液引起的假性升高。 1.1.2非麻醉状态的动物时应尽量避免用力挤压动物头颈和胸腹，以免引起血液淤滞，局部组织缺氧，造成血液某些成分的改变，特别是测定乳酸，血液含氧量等指标时。 1.1.3血液中红细胞外成分有很大差异，溶血可造成红细胞的物质向细胞外转移，如K+、Mg2＋和某些酶类(LD、AST、ALT、ACP)；另外，溶血还可干扰某些化学项目(TBil、DBil、TC等)的测定，严重影响结果的准确性，血样本应防止溶血。引起溶血的原因有：注射器采血时抽吸力太大；血液与抗凝剂比例失调；混匀样本时过度振荡；注射器或采血容器带水或容器污染；全血放置时间长或突然受冷或受热；注射器中的血沫注入采血容器；真空采血时如未采满至相应刻度，残存负压造成红细胞破裂；不拔针头直接注入采血容器；样本离心时离心力过大等。为避免溶血，取血时应注意： ①、抽拉注射器时应尽量避免注射器产生大量真空； ②、添加抗凝剂后的容器在除必要干燥流程后应及时密封； ③、混匀样本时避免用力过度，切勿产生泡沫； ④、避免重复使用注射器、针头、采血管、毛细玻璃管等一次性用品，手术刀片和剪刀等器材取材时尽量洗去残留血液； ⑤、采血时的室温应控制在22℃至25℃，采取的血液容器在需要放入冰盒时，切勿紧贴冰袋，冰水； ⑥、当注射器因吸入空气产生血沫时，注意弃掉血沫，在将血液注入采血容器时勿将血沫一并注入； ⑦、使用真空采血管需抽取负压时切勿过量； ⑧、将血液注入采血容器时要除去针头，轻柔推入； ⑨、离心带有血细胞的血样时，按照规格设定离心参数； 1.1.4. 正确选择采集管。通常情况下多采用血清为样本(不抗凝)，部分检测项目需注意样本属性为血清或血浆，两者不可替代。一些特殊检验项目需要使用抗凝剂时，应注意选择合适的抗凝剂并注意抗凝剂与血液的比例，以防止样本凝血或红细胞形态的改变；抗凝血样本采集后立即轻轻摇匀至少上下颠倒8次，以防凝血发生。 1.1.5. 多项化验采血顺序：血培养瓶(厌氧瓶优先)→蓝帽管→黑帽管→红/黄帽管→绿帽管→紫帽管→灰帽管→其他。

环境监测采样方案

环境监测采样方案文件编码（008-TTIG-UTITD-GKBTT-PUUTI-WYTUI-8256）

（2）采样方法根据《水质湖泊和水库采样技术指导》（GB/14581-93）的要求进行采样。（3）测定项目检测项目为：水温、流量、PH、电导率、溶解氧、透明度、BOD 、COD、细菌 5 总数、粪大肠菌群、总大肠杆菌、高锰酸盐指数、磷酸盐、硫化物、氨氮、悬浮物、碱度、钙、钙和镁、酸度、亚硝酸盐、硝酸盐、动植物和石油类、硫酸盐、水质苯系物、挥发酚、苯胺类化合物、六价铬、总磷、氯化物、总氮、水质甲醛、总残渣、矿化度、全盐量、氟化物、总铬、游离氯和总氯、阴离子表面活性剂、臭氧、氰化物、钴、镍、汞、砷、硒、铋、锑、铁、锰、铜、铅、锌、镉。四水样采集（1）采样工具采样器材主要是采样器和水样容器。关于水样保存及容器洗涤方法见表3。表3水样保存和容器的洗涤(部分)

注：(1) *表示应尽量作现场测定； **低温(0～4℃)避光保存。 (2)G为硬质玻璃瓶；P为聚乙烯瓶(桶)。

(3)①为单项样品的最少采样量； ②如用溶出伏安法测定，可改用1L水样中加19ml浓HCl04。 (4)I，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ表示四种洗涤方法，如下： I：洗涤剂洗一次，自来水三次，蒸馏水一次； Ⅱ：洗涤剂洗一次，自来水洗二次，1+3 HN03荡洗一次，自来水洗三次，蒸馏水一次； Ⅲ：洗涤剂洗一次，自来水洗二次，1+3 HN03荡洗一次，自来水洗三次，去离子水一次； Ⅳ：铬酸洗液洗一次，自来水洗三次，蒸馏水洗一次。如果采集污水样品可省去用蒸馏水、去离子水清洗的步骤。 (5)经160℃干热灭菌2h的微生物、生物采样容器，必须在两周内使用，否则应重新灭菌；经121℃高压蒸汽灭菌15min的采样容器，如不立即使用，应于60℃将瓶内冷凝水烘干，两周内使用。细菌监测项目采样时不能用水样冲洗采样容器，不能采混合水样，应单独采样后2h内送实验室分析。 (2)采样方法 a、采样器直立式采水器 b、采样数量所需采水量按表3采集。 c、在水样采入或装入容器中，立即按表3要求加入保护剂。 d、注意事项 (1) 采样时不可搅动水底的沉积物。

环境监测实施方案设计

XX县作为本项目监测点，鉴于本次监测任务顺利进行，特绘制XX 县环境监测总体方案图，如下图1所示：图1 XX县环境监测总体方案图 1监测内容 XX县地表水水质、县政府所在地空气质量、重点污染源（水、气）、城区及交通干线噪声质量等监测工作。具体内容如下： 1.1地表水水质监测严格执行《地表水环境质量标准》（GB3838-2002）、《地表水和污水监测技术规范》（HJ/T91—2002）、《环境水质监测质量保证手册（第二版）》及《水和废水监测分析方法》（第四版）等相关标准和规范。监测区域现场勘查及资料收集（包括地理位置、地形地貌、气象气候、土壤利用等）编制监测方案确定监测项目及类别确定确定监测点布置及采样时间和方法电话预约现场样品采集检测室样品分析检测数据处理及结果分析上报出具监测报告接受委托后期服务

1.1.1 监测断面哈尔腾河红崖子断面。 1.1.2 监测指标及方法依据（见表1-1）采用《地表水环境质量标准》（GB3838—2002）表1中除粪大肠菌群以外的23项指标。具体监测项目见下表：表1-1 地表水监测因子及检测方法依据监测指标技术要求方法依据水温，℃ pH 溶解氧高锰酸盐指数化学需氧量（COD）五日生化需氧量（BOD）氨氮（NH3-N）总磷（以P计）总氮（湖、库，以N计）铜锌氟化物（以F-计）硒砷汞镉铬（六价）铅

氰化物挥发酚石油类阴离子表面活性剂硫化物此外还可根据XX当地污染实际情况，适当增加区域污染物监测。 1.1.3 监测网点布置（见表1-2）表1-2 地表水监测网点布置组号监测点名称监测点位置设点依据 1.1.4 样品采集方法及设备（见表1-3）表1-3 样品采集方法及设备样品名称采样方法采集设备地表水 1.1.4监测时间及频次（见表1-4）每季度至少监测1次，全面至少监测4次，且需在各监测月份的上旬（1-10日）完成水质监测的采样及实验室分析。具体监测时段按下表执行（特殊情况除外）

标本采集方法及注意事项

临床常用检验标本的采集方法及注意事项医学检验又称临床检验，是指通过感官观察，试剂反应，仪器分析等，对离体标本如体液，分泌物，排泄物和脱落物进行的检验。它为临床诊断，病情判定，疗效观察，预后评估等提出实验数据。检验结果的准确与否，与病人采样前的状态，准备，取样方法和标本携带等因素有关。临床护士必须掌握各种检验标本采集的方法，时间，饮食的要求，药物的影响，标本的存放温度及采集标本时的体位等状况。为此，护士要有对病人负责的精神，科学的工作态度，严谨的工作作风，一丝不苟地做好临床标本的采集工作，并根据本地区或本医院所提供的正常参考值及临床表现进行结果判断，为治疗护理提供参考依据。各种标本采集的注意事项的重要意义护士承担着大多数标本的采集任务，由于标本的来源，性质，采集方式不同，将直接影响临床检验结果的准确性。因此，护士必须熟悉自己所在单位有关实验室的情况，明确采集标本的要求，以保证标本质量，为临床诊断提供可靠依据。 1 血标本采集方法及注意事项采血时机：提前向病人讲解抽血化验检查的目的，方法和采集标本的时机，解除病人的恐惧或焦虑，安慰病人，使之处于安定状态，避免因精神-体液变化影响检验的结果。根据检验的不同要求，采血的时间也不同：空腹抽血适宜作血糖，血脂，肝功能，肾功能，电解质等生化检验。禁食时间约12小时，时间过长易引起低血糖虚脱。餐后2小时，上午8-9时抽血，可做血液内激素测定及餐后血糖测定。急性心肌梗死发病后，16-24小时天门冬氨酸氨基转移酶(AST)，肌酸激酶（CK）达峰值；30-60小时乳酸脱氢酶(LDH)达峰值,维持3-6d。急性胰腺炎发作后2-12小时血清淀粉酶开始上升，12-72小时达高峰，4小时左右恢复正常。留取血细菌培养标本时，应在病人体温达38.5度以上时抽取血标本，阳性率较高。采血部位动脉采血：常用采血部位股动脉，桡动脉，足背动脉等。由于动脉压力高，危险性较大，故采血后按压穿刺点5-10分钟。静脉采血：是最常用的采血方法，可选择的表浅静脉多，要求护士必须严格无菌操作，避免感染，可选择较大的静脉穿刺，争取一次操作成功。毛细血管采血：只需很小量标本，多在手指，足趾或足跟等部位采血，如全血细胞计数，快速血糖，血脂等检验，或婴幼儿。采血器材：a,注射器，瓶塞，玻璃或塑料试管，防腐剂，抗凝剂，标签等。B，真空采血器：以不同彩色标记各种试管盖，用于不同实验。（我院常用的真空采血管规格及标志）添加剂：一般分防腐剂和抗凝剂二类。常用抗凝剂有乙二胺四乙酸（EDTA）二甲抗凝，枸橼酸盐，草酸钠（钾）均系与钙作用而抗凝；肝素则抑制凝血酶活性而有抗凝作用，用于血PH，血气，内分泌激素，氨基酸，药物浓度，6-磷酸葡萄糖，染色体等检查。用抗凝试管时，每管的抗凝剂与采血最大量有关，要求与血液充分混匀，不够可致血液凝固。标本的类型：血标本有三类：即全血，血浆，血清。全血：用抗凝剂。血清：不用抗凝剂。常用于多种生化分析，如蛋白质，脂类，无机盐，酶，肝功能，肾功能检查。血浆：有多种抗凝剂。用于红细胞积数，红细胞比容，血沉，血型鉴定，血红蛋白电泳，交

检验科生物安全制度(2016新)

实验室生物安全制度页码目录名称一、实验室内务管理制度??????????????????1 二、工作人员安全防护制度?????????????????3 三、实验室安全防护制度??????????????????5 四、标本采集运输制度???????????????????6 五、菌、毒株保管制度???????????????????8 六、尖锐器具安全使用制度?????????????????9 七、废弃物处理制度????????????????????10 八、安全应急处理制度???????????????????11 九、实验室准入制度????????????????????14 十、检验科医院感染管理制度??????????????? (18) 十一、检验科危险化学品安全管理办法,,,,,,,,,,,,,,19

实验室内务管理制度 1.目的根据卫生部《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》，为加强科室实验室管理，确保检验质量，防止实验室污染，制定本规定。 2.适用范围本科实验室按照二级生物安全防护实验室标准管理；本规定使用于本科所有实验室。 3.具体内容 3.1本科实验室是进行临床检验和教学科研实验的场所，不作它用。 3.2实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作。 3.3实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室主任的批准。 3.4非本室人员到实验室做实验，须经实验室主任批准，并办理有关手续。 3.5非实验有关人员和物品不得进入实验室；在实验室内不得进行与实验无关的活动。 3.6实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作； 3.7进入实验室时，应穿着工作服或罩衫等防护服。当知道防护服已被危险材料污染应立即更换。离开实验室区域之前应脱去防护服。 3.8禁止在工作区内使用化妆品和处理隐形眼镜。长发应束在脑后。在工作区内不应配带戒指、耳环、腕表、手镯、项链和其它佩饰物品。 3.9实验室内严禁吸烟、吃饭、饮水等。以上活动应在检验科专用休息室内进行。 3.10工作中工作人员必须戴手套，以防生物危险、化学品污染，冷和热，标本污染，刺伤、擦伤等。在工作完成或中止后应摘掉并放入垃圾袋中，教医院污物处理中心处理。摘除手套后、使用卫生间前后、离开实验室前、进食或吸烟前、接触每一患者前