肠杆菌科及检验
肠杆菌科及检验
本章考点：
1.概述
（1）概念
（2）命名与分类原则
（3）共同特点
（4）自然与人体内的分布
（5）微生物学检查方法
（6）临床意义
2.埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、变形杆菌属、耶尔森菌属
（1）生物学性状
（2）微生物学检查法
（3）临床意义
一、概述和通性
（一）概念
肠杆菌科是由多个菌属组成，其生物学性状相似，均为革兰阴性杆菌。大多数肠道杆菌属于正常菌群，作为条件致病菌而引起疾病。其中包括常引起腹泻和肠道感染的细菌（埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属）和常导致院内感染的细菌（枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、多源菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属和摩根菌属），以及一些在一定条件下偶可引起临床感染的细菌。
（二）分类
根据《伯杰系统细菌学手册》（1984年）将肠杆菌科的细菌分为20个属即埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属、爱德华菌属、普罗威登斯菌属、变形杆菌属、摩根菌屑、耶尔森菌属等。
（三）生物学特性
1.形态与染色
培养：需氧或兼性厌氧，营养要求不高，在普通琼脂培养基和麦康凯培养基上均能生长并形成中等大小的S型菌落，液体培养基中呈混浊生长。
3.生化反应：发酵葡萄糖产酸、产气，乳糖发酵试验: 肠道非致病菌（＋），肠道致病菌（－）（除
4.抗原构造：包括菌体（O）抗原，鞭毛（H）抗原和表面抗原（如Vi抗原、K抗原）3种。
5.变异：包括菌落S～R变异，鞭毛H～O变异和耐药性或生化反应性质的改变。
6。抵抗力：不强。加热60℃，30分钟即被杀死。不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。对低温有耐受力，能耐胆盐。
（四）致病性
肠杆菌科细菌种类多，可引起多种疾病：
1.致病性肠道杆菌：以肠内感染为主，腹泻为共显症状，引起急慢性肠道感染、食物中毒、旅游者腹泻及肠热症等。
2.条件致病菌：为医院感染主要病原菌，出现移位感染。
（五）微生物学检验
1.分离培养：将粪便或肛拭标本立即接种在肠道菌选择培养基上或先增菌后再分离；血、尿或脓汁等其他标本原则上不使用选择培养基。分离纯菌后，根据菌落特点，结合革兰染色及氧化酶反应结果作进一步鉴定。
2.鉴定
（1）初步鉴定：原则是：①确定肠杆菌科的细菌，应采用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌加以鉴别；②肠杆菌科细菌的分群，多采用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科的细菌分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐利用试验阳性和两者均为阴性反应三个类群；③选择生化反应进行属种鉴别。
表5-19-1 肠杆菌科的初步分类
*有例外
将选择培养基或鉴别培养基上的可疑菌落分别接种克氏双糖铁琼脂（KIA）和尿素-靛基质-动力（MIU）复合培养基管中，并根据其六项反应结果，将细菌初步定属。
（2）最后鉴定：肠杆菌科各属细菌的最后鉴定是根据生化反应的结果定属、种，或再用诊断血清做凝集反应才能作出最后判断。
二、埃希菌属
（一）概念
埃希菌属包括5个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。临床最常见的是大肠埃希菌。
大肠埃希菌俗称大肠杆菌，大多数菌株是人类和动物肠道正常菌群。
（二）生物学特性（性状）
1.形态与染色：为革兰阴性短杆菌，（1.0～3.0）μm×（0.4～0.7）μm。多数有周鞭毛，能运动。有菌毛、荚膜及微荚膜。
2.培养特性：兼性厌氧菌，营养要求不高，在普通营养肉汤中呈浑浊生长。普通营养琼脂上呈灰白色的光滑型菌落。血琼脂平板上，少数菌株产生溶血环。在伊红美蓝琼脂上，由于发酵乳糖，菌落呈蓝紫色并有金属光泽。麦康凯和SS琼脂中的胆盐对其有抑制作用，耐受菌株能生长并形成粉红色菌落。
3.生化反应：吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（IMViC试验）为++--（肠杆菌属多为--++）。克氏双糖铁琼脂（KIA）上斜面和底层均产酸产气，H2S阴性。动力、吲哚、尿素（MIU）培养基的生化反应为++-。
4.抗原结构：大肠埃希菌的抗原由菌体抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。现已知有171种O抗原，100种K抗原和56种H抗原。一个菌株的抗原类型由特殊的0、K和H抗原的代码表示，其血清型别的方式是按0：K：H排列，例如0111：K58（B4）：H2。
（二）致病性
主要是侵袭力、内毒素、肠毒素等致病因素引起各种炎症（如胆囊炎、泌尿系感染、肺炎、新生儿脑膜炎、伤口感染、菌血症及腹泻等）。内毒素还可引起发热、休克、DIC等。
1.肠道外感染：主要由正常菌群条件致病，以泌尿系统感染常见，高位严重尿道感染与特殊血清型大肠埃希菌有关。如菌血症、胆囊炎、腹腔内脓肿。
2.肠道感染：致病性大肠埃希菌有下列五个病原群。
（1）肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）：引起霍乱样肠毒素腹泻（水样泻）。
（2）肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：主要引起婴儿腹泻。
（3）肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：可侵入结肠黏膜上皮，引起志贺样腹泻（能产生粘液脓血便）。
（4）肠出血型大肠埃希菌（EHEC）：又称产志贺样毒素（VT）大肠埃希菌（SLTEC或UTEC），其中O157：H7可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（HUS）。临床特征为严重的腹痛、痉挛，反复出血性腹泻，伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。
（5）肠粘附（集聚）型大肠埃希菌（EAggEC）：也是新近报道的一种能引起腹泻的大肠埃希菌。
3.CDC将大肠埃希氏菌O157：H7列为常规检测项目
EHEC的血清型>50种，最具代表性的是O157：H7。在北美许多地区，O157：H7占肠道分离病原菌的第二或第三位，是从血便中分离到的最常见的病原菌，分离率占血便的40%，6、7、8三个月O157：H7感染的发生率最高。且0157是4岁以下儿童急性肾功衰的主要病原菌，所以CDC提出应将大肠埃希氏菌0157：H7列为常规检测项目。
（三）微生物学检验
1.标本采集：肠道感染可采集粪便；肠道外感染可根据临床感染情况采集中段尿液、血液、脓汁、胆汁、脑脊液、痰、分泌液等。
2.检验方法及鉴定
（1）涂片与镜检：脓汁及增菌培养物发现单一革兰阴性杆菌，可初步报告染色、形态、性状供临床用药参考。
（2）分离培养：粪便标本可用弱选择鉴别培养基进行分离，脓汁等可用血平板分离，取可疑菌落进行
形态观察及生化反应。
（3）鉴定
1）初步鉴定：根据菌落特征，涂片染色的菌形及染色反应，取纯培养物作生化反应。凡符合KIA：A ／A或K／A、产气或不产气、H2S-；MIU：动力+或-、吲哚+、脲酶-；氧化酶-，IMViC:++--，可鉴定为大
2）致病性大肠埃希菌:
EPEC的鉴定：
EIEC的鉴定：应与志贺菌相鉴别，两者的主要鉴别试验可用醋酸钠和葡萄糖铵利用试验及粘质酸盐产酸三种试验。大肠埃希菌均为阳性，而志贺菌均为阴性。
ETEC毒素的检测：采用改良Elek法测定LT并采用乳鼠胃内灌注法检测ST。
EHEC的血清学鉴定：
EAEC的鉴定：检测细菌对HEP-2细胞或Hela细胞的粘附性。
肠道外感染，经涂片染色，分离培养后，生化鉴定到种；由于大肠埃希菌是超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的主要产酶株，该酶由质粒介导。对ESBLs产酶株所致感染需要采用碳青酶烯类或内酰胺类抗生素／酶抑制剂或头霉菌素类进行治疗。肠道内感染还需做血清分型、毒素测定或毒力试验。食物、饮料、水等卫生细菌学检查，主要进行大肠菌群指数检测。
三、志贺菌属
志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。CDC分类系统（1989）将生化性状相近的A、B、C群归为一群，统称为A、B、C血清群，将鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢-最为常见。
（一）生物学特性
1.形态与染色：革兰阴性短小杆菌，（2～3）μm×（0.5～0.7）μm，无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。
2.培养特性：需氧或兼性厌氧，液体培养基中呈浑浊生长，在普通琼脂平板和SS培养基上形成中等大小、半透明的光滑型菌落，宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落。
3.生化反应：志贺菌属的细菌KIA：K／A、产气-／+、H2S-，MIU：动力-、吲哚+／-、尿酶-，氧化酶-，不产生赖氨酸脱羧酶，氧化酶试验阴性。
4.抗原结构：志贺菌属只有O抗原而无鞭毛抗原，个别菌型及新分离菌株有K抗原。
（二）致病性
致病物质：
侵袭力：菌毛粘附于肠粘膜上皮细胞，诱导细胞内吞。
内毒素：破坏肠粘膜；肠壁通透性；肠壁植物神经——腹痛，腹泻，里急后重，粘液脓血便。
外毒素（志贺毒素，ST）：肠毒素活性；细胞毒活性；神经毒活性
所致疾病：细菌性痢疾，简称菌痢。
1.急性菌痢。
2.中毒性菌痢。
3.慢性菌痢。
传染源为病人和带菌者，经粪口传播。
（三）微生物学检验
1.标本采集
尽可能在发病早期及治疗前采集新鲜粪便，选择脓血便或粘液便，必要时可用肛拭子采集。
2.检验方法及鉴定
（1）分离培养：取粪便（粘液或脓血部分）或肛拭标本接种GN肉汤增菌及再进行分离培养。一般同时接种强弱选择性不同的两个平板。强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基（SS）；弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。培养18～24h后选取可疑菌落进行下列鉴定。
（2）鉴定
1）初步鉴定：挑选可疑菌落3～4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2～3支KIA和MIU，经35 ℃培养18～24h，凡符合KIA：K／A、产气-／+、H2S-，MIU：动力-、吲哚+／-、尿酶-，并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为志贺菌属。
2）最后鉴定
3.与类志贺邻单胞菌和伤寒沙门菌的鉴别：可用动力和氧化酶试验加以鉴别，志贺菌均为阴性，而类志贺邻单胞菌为阳性。伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性，能与沙门菌属因子血清（0多价A-F群或Vi）凝集而不与志贺菌属因子血清凝集。
（四）防治原则
人工主动免疫用于预防目前尚不理想，治疗细菌性痢疾一般首选氟喹诺酮类抗生素。
四、沙门菌属
（一）生物学特性
1.形态与染色：本属菌为（0.7～1.5）μm×（
2.0～5.0）μm，无芽胞，无荚膜的革兰阴性直杆菌。除鸡沙门菌外都有周身鞭毛，能运动，多数有菌毛。
2.培养特性：营养要求不高，在普通琼脂培养上即能生长，在液体培养基中呈均匀混浊。在SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上35℃～37℃24h可形成直径约2～4mm的透明或半透明菌落，对胆盐耐受。产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心。
3.生化反应：除亚利桑那菌外均不能发酵乳糖，大多数IMViC试验为-+-+，KIA：K／A、产气+／-、H2S+／-，MIU：动力+、吲哚-、脲酶+。
主要由0抗原和H抗原组成，部分菌株有类似大肠杆菌K抗原的表面抗原，与细菌的毒力有关，故称Vi抗原。
（1）0抗原：即菌体抗原。沙门菌属的菌体抗原有58种，以阿拉伯数字依次标记：根据沙门菌有共同的O抗原这一特点，分类学者将有共同抗原的细菌归为一组，这就使沙门菌分成42个群（或组）。即A、B、C……Z和O16～O67群。每群都有群特异性抗原，如A群O2、B群04、D群O9等。
（2）H抗原：即鞭毛抗原。H抗原是定型的依据。
沙门菌H抗原有两相，第一相为特异性抗原，用a、b、c……表示；第二相为共同抗原，用1、2、3……表示。
（3）表面抗原：已证实沙门菌属有Vi、M和5抗原三种。Vi抗原加热60℃30min或经石炭酸处理被破坏，其存在时可阻止0抗原与相应抗体发生凝集。
5.变异性
（1）S～R变异，菌落光滑型经人工培养传代后逐渐变成粗糙型。此时菌体表面的特异多糖抗原丧失，在生理盐水中可出现自凝。
（2）H～O变异，指有鞭毛的沙门菌失去鞭毛的变异。
（3）相位变异，具有双相H抗原（第Ｉ相为特异相，第Ⅱ相为非特异相）的沙门菌变成只有其中某一相H抗原的单相菌，称相位变异。
（4）V～W变异，失去全部Vi抗原的变异。
（二）致病性
致病因素有侵袭力、内毒素和肠毒素3种。临床上可引起胃肠炎、肠热症、菌血症或败血症等。其中肠热症属法定传染病。
1.肠热症：即伤寒与副伤寒病。由伤寒与副伤寒沙门菌所引起的慢性发热症状。为法定传染病之一。
2.食物中毒：引起食物中毒的沙门菌以鼠伤寒、肠炎、汤卜逊、猪霍乱、乙型及丙型副伤寒沙门菌为常见。
3.慢性肠炎：沙门菌可引起老人和儿童的慢性肠炎。
4.败血症：多由猪霍乱沙门菌引起。
5.沙门菌的局部感染如颈部、腰部等。
有鼠伤寒沙门菌引起儿童的医院感染报道。
（三）微生物学检查
1.标本采集：根据不同疾病采取不同的标本进行分离与培养。肠热症的第一、二周采血液，第二、三周采粪便与尿液。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。食物中毒采集食物与粪便。
2.检查方法及鉴定
（1）分离培养
1）粪便：一般将粪便或肛拭直接接种于SS和麦康凯平板上，用两种培养基的目的是为提高标本的阳性检出率。
2）血液和骨髓：抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml，立即接种于含0.5%胆盐肉汤或葡萄糖肉汤5ml试管中进行增菌，48h将培养物移种到血平板和肠道鉴别培养基上，若有细菌生长取菌涂片革兰染色并报告结果。对增菌培养物连续培养7天，仍无细菌生长时，则报告阴性。
3）尿液：取尿液2～3ml经硫磺酸盐肉汤增菌后，再接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行分离培养，亦可将尿液离心沉淀物分离培养。
4）局部感染的脓液。
（2）鉴定：沙门菌属的鉴定与志贺菌属相同，须根据生化反应和血清学鉴定两方面进行。
1）初步鉴定：如为革兰阴性杆菌时作氧化酶试验，阴性时，挑取可疑菌落分别移种于KIA和MIU上。并作生化反应。以沙门菌多价诊断血清作玻片凝集试验。
2
原+，以沙门菌多价血清作玻片凝集试验阳性，鉴定为沙门菌属。
2）最后鉴定：沙门菌血清学鉴定主要借助于沙门菌O抗原多价血清与O、H、Vi抗原的单价因子血清。甲型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌和伤寒沙门菌分别属于A、B、D血清群。
（3）血清学诊断：肥达试验：用已知的伤寒沙门菌0、H抗原，甲乙丙副伤寒沙门菌H抗原稀释后与被检血清作定量凝集试验，以检测患者血清中抗体的含量，来判断机体是否受沙门菌感染而导致肠热症并判别沙门菌的种类。
（四）防治原则
加强饮食卫生，防止污染食品及水源经口感染，携带者的积极治疗，皮下注射死菌苗或口服减毒活菌苗是预防沙门菌属细菌传染的几个主要措施。临床治疗是根据体外药敏试验结果选用合适抗生素，保持水及电解质的平衡，对并发症积极处理，如肠出血、肠穿孔、胆囊炎、心肌炎等。对于伤寒沙门菌感染，可选择的抗生素有氯霉素、氟喹诺酮类、氨苄西林、复方新诺明、三代头孢等。
五、变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属
变形杆菌属包括四个种，即普通变形杆菌、奇异变形杆菌、产粘变形杆菌和潘氏变性杆菌。普罗威登斯菌属有四个种：即产碱普罗威登斯菌、斯氏普罗威登斯菌、雷极普罗威登斯菌和P.rustigianii。摩根菌属只有一个种，即摩根摩根菌。
这三个属的细菌为肠道寄居的正常菌群，在一定条件下能引起各种感染，也是医源性感染的重要条件致病菌。
（一）生物学特性
1.形态与染色：为革兰阴性杆菌。两端钝圆，有明显的多形性，呈球状或丝状，有周身鞭毛，运动活泼；摩根菌属的部分菌株在30℃以上培养条件下不形成鞭毛，无芽孢，无荚膜。
2.培养：需氧或兼性厌氧，对营养无特殊要求，生长温度10℃～43℃。在营养琼脂和血琼脂平板上普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙扩散生长现象，即迅速形成波纹状薄膜而布满整个平板培养基表面。普罗威登斯菌和摩根菌无迁徙生长现象。在含有胆盐的培养基表面菌落呈扁平、圆形、半透明。在含有铁或铅离子的培养基中产硫化氢菌株的菌落中心呈黑色。SS培养基上有与沙门菌、志贺菌相似的菌落特征。在液体培养基中迅速生长，早期培养物呈混浊，可有部分沉淀。
3.生化反应：三属菌共同特点是氧化酶阴性，苯丙氨酸脱氨酶阳性的革兰阴性杆菌。
三属菌的区别：见下表。
靛基质和麦芽糖均阴性，鸟氨酸脱羧酶阳性；产粘变形杆菌靛基质和鸟氨酸脱羧酶均阴性，麦芽糖阳性。
普罗威登斯菌属的种鉴别：产碱普罗威登斯菌尿素和蕈糖均阴性，侧金盏花醇阳性；斯氏普罗威登斯菌尿素可阴性可阳性，蕈糖阳性，侧金盏花醇阴性；雷氏普罗威登斯菌尿素和侧金盏花醇均阳性，蕈糖阴性。
（二）致病性
1.变形杆菌属：普通变形杆菌和奇异变形杆菌引起尿道、创伤、烧伤的感染，引起的尿路感染仅次于大肠埃希菌。普通变形杆菌还可引起多种感染及食物中毒；奇异变形杆菌还可引起婴幼儿肠炎。
本菌属细菌具O抗原及H抗原，普通变形杆菌OX19、OX2、OX k的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，这就是外-斐（Well-Felix）反应，是用以诊断某些立克次体病的依据。
2.普罗威登斯菌属：本属菌可引起烧伤、创伤与尿道感染。
3.摩根菌属：本属细菌为医源性感染的重要病原菌之一。可致泌尿道感染和伤口感染。
（三）微生物学检验
1.标本采集：根据病情采集尿液、脓汁、伤口分泌物及婴儿粪便等。
2.检验方法及鉴定
（1）直接涂片：尿液、脑脊液、胸腹水等离心沉淀后，取沉淀物涂片；脓液和分泌液可直接涂片，行革兰染色后，观察形态及染色性。
（2）分离培养：将各类标本分别接种于血琼脂平板和麦康凯或伊红美蓝（EMB）琼脂平板；或SS琼脂和麦康凯或EMB琼脂平板上，孵育35℃～37℃18～24h后挑选菌落。为了抑制变形杆菌属菌的迁徙生长，可于血琼脂中加入石碳酸或苯乙醇，使其最终浓度为1g／L和0.25%，这并不影响其他细菌的分离。变形杆菌属在血琼脂上呈迁徙生长，在肠道菌选择培养基上形成不发酵乳糖菌落，在SS琼脂上常为有黑色中心的菌落。
（3）鉴定：接种前述生化培养基，并作氧化酶试验，进行此三个属和属、种鉴定。
六、耶尔森菌属
耶尔森菌属包括11个种，其中鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌肯定与人类致病有关。
（一）鼠疫耶尔森菌
鼠疫耶尔森菌俗称鼠疫杆菌，是烈性传染病鼠疫的病原菌。鼠疫是自然疫源性传染病，通过直接接触染疫动物或节肢动物叮咬而感染。临床常见腺鼠疫、败血型鼠疫和肺鼠疫。
1.生物学特征
（1）形态与染色：鼠疫耶尔森菌为革兰阴性杆菌，形态短而粗，两端钝圆，两极浓染，大小为（1.0～2.0）μm×（0.5～0.7）μm。有荚膜，无鞭毛，无芽孢。陈旧培养物或3%氯化钠琼脂培养基上呈明显多形性。
（2）培养：需氧和兼性厌氧，在普通培养基上即可生长。最适生长温度是28℃～30℃。培养基最适pH 为6.9～7.1。培养16～18h，用显微镜观察可见一层形状不一，浅灰色小菌落，这是鼠疫耶尔森菌培养初期的菌落特征，这对本菌的鉴定有一定意义。在培养24～48h后可形成直径0.1～0.2mm，圆形。中心突出，透明的浅灰色小菌落。72h后菌落直径可达4mm。在液体培养基中生长良好，开始浑浊生长，24h后为沉淀生长，48h后形成菌膜，稍加震动菌膜呈钟乳石状下垂。
（3）生化反应：不活跃，在双糖铁培养基上可分解葡萄糖，少数菌株可分解乳糖，不产生硫化氢，MIU 培养基无动力，不产生靛基质，尿素酶试验阴性。
2.微生物学检验
（1）标本采集：主要采集血液、痰和淋巴结穿刺液。
（2）检验方法及鉴定：鼠疫耶尔森菌为甲类病原菌，传染性极强，故应严格遵守检验操作规程，要求实验室有隔离设施，防鼠、防蚤和严密的个人防护措施；用过的实验器材及物品随时消毒处理。
1）直接涂片检查：一般制片两张，分别用于革兰染色和美蓝染色，可见革兰阴性球杆菌，形似芝麻，两端浓染。
2）分离培养：鼠疫耶尔森菌学检验中分离培养步骤十分重要，分离培养时未污染标本可直接接种血平
板，污染标本则需接种选择性培养基，如龙胆紫亚硫酸钠琼脂。经28℃～30℃培养24～48h后，挑选菌落作鉴定。
3）鉴定：根据菌落特征，细菌形态和肉汤中呈“钟乳石”状发育，KIA结果利用葡萄糖，不利用乳糖，不产H2S，MIU均为阴性反应。为作最后鉴定应补充以下实验方法：①噬菌体裂解试验；②动物试验；③免疫学方法。
（二）小肠结肠炎耶尔森菌
1.生物学特性
（1）形态与染色：菌体大小为（1.0～2.0）μm×（0.5～1.0）μm，25℃培养时形成周鞭毛，呈翻滚旋转状运动，37℃培养无动力，无芽胞，无荚膜的革兰阴性球杆菌。
（2）培养：需氧或兼性厌氧，4℃～40℃均能生长，最适生长温度为20℃～28℃。普通营养琼脂上生长良好，在血琼脂平板上，形成直径为1～2mm，圆形光滑，凸起的菌落。能在选择培养基如麦康凯培养基上生长，形成不发酵乳糖的无色、透明或半透明、扁平、较小的菌落。在SS琼脂板上生长不良。液体培养基中呈浑浊生长，液体表面可形成白色菌膜或有沉淀生成。
（3）生化反应：分解葡萄糖和蔗糖产酸不产气，绝大多数菌株不发酵乳糖，硫化氢阴性，脲酶阳性，靛基质不定。VP试验25℃阳性，37℃阴性，鸟氨酸脱羧酶阳性。
2.致病性
（1）致病因素：侵袭力和肠毒素。
（2）本菌为人畜共患菌，动物感染后多无症状，通过消化道传播引起人类肠道感染性疾病。根据感染后定居部位不同，可分为小肠结肠炎、末端回肠炎、胃肠炎、阑尾炎和肠系膜淋巴结炎。除肠道感染外尚可发生败血症，结节性红斑及关节炎等。
3.微生物学检验
（1）标本采集：标本来自被检者粪便、血液、尿液、食物或脏器组织等。
（2）检验方法及鉴定。
1）分离培养：粪便标本可直接接种于麦康凯、NyE（耶尔森选择性琼脂）或SS琼脂，亦可将标本接种于5ml、pH7.4，15mmol／L磷酸缓冲液（PBS）中，如为食物标本在研碎后加10倍量的上述PBS，臵4℃冰箱，分别于7、14、21天取上述含菌PBS0.1ml接种于肠道菌选择琼脂平板，臵25℃培养24～48h后，挑选可疑小肠结肠炎耶尔森菌菌落进一步鉴定。
2）鉴定：根据菌落形态，革兰染色的典型形态特点，氧化酶试验阴性，30℃以下培养液暗视野观察，其动力呈翻滚状态，KIA只利用葡萄糖，MIU试验22℃动力阳性，37℃无动力，脲酶试验阳性，即可作出初步鉴定。
血清学鉴定：用小肠结肠炎耶尔森菌0因子血清与待检菌作玻片凝集试验。
（三）假结核耶尔森菌
假结核耶尔森菌是鼠疫耶尔森菌的近缘菌，可使啮齿动物家畜和禽类致病，并通过污染食物导致人类感染。人类感染少见，偶见肠道感染及肠系膜淋巴结炎。
菌体呈球形或短杆形，两端浓染。25℃培养有周鞭毛，有动力，37℃培养无动力。
兼性厌氧，最适生长温度30℃，pH6.0～8.0。普通营养琼脂上易生长，发育较快，37℃24h形成圆形，中心凸起，呈颗粒状，灰黄色，半透明的菌落，血琼脂平板上不溶血，SS琼脂上不生长，能在含胆盐培养基或麦康凯培养基上生长。在液体培养基中呈均匀浑浊生长者为光滑型菌株，沉淀生长为粗糙型菌株。
本章练习题：
不能用O:H血清分型的细菌为
A.肠产毒型大肠埃希菌
B.肠致病型大肠埃希菌
C.肠侵袭型大肠埃希菌
D.肠出血型大肠埃希菌
E.肠集聚型大肠埃希菌
[答疑编号500735190201]
『正确答案』E
ESBLs的主要产生菌株，同时也是人类泌尿系感染的主要病原菌是
A.大肠埃希菌
B.肺炎克雷伯菌
C.阴沟肠杆菌
D.铜绿假单胞菌
E.伤寒沙门菌
[答疑编号500735190202]
『正确答案』A
发酵葡萄糖，不发酵乳糖，感染途径为粪口传播，感染患者外周血白细胞往往减少的细菌是
A.大肠埃希菌
B.肺炎克雷伯菌
C.阴沟肠杆菌
D.铜绿假单胞菌
E.伤寒沙门菌
[答疑编号500735190203]
『正确答案』E
下列哪种细菌无动力
A.大肠埃希菌
B.伤寒沙门菌
C.变形杆菌
D.肺炎克雷伯
E.阴沟肠杆菌
[答疑编号500735190204]
『正确答案』D
Vi抗原是
A.肠杆菌科的细菌抗原
B.葡萄球菌细胞壁的蛋白成分
C.沙门菌的表面抗原
D.核蛋白抗原
E.链球菌属表面抗原
[答疑编号500735190205]
『正确答案』C
疑为伤寒患者但其血液培养阴性，原因不可能为
A.病程初期，没超过一周
B.已用过抗生素
C.培养条件不适宜
D.血液增菌培养基失效
E.患者不是伤寒沙门菌感染
[答疑编号500735190206]
『正确答案』A
大肠埃希菌和痢疾志贺菌的IMViC试验多数结果分别为
A.++--和-+--
B.++--和++--
C.--++和-+--
D.--++和--++
E.--++和-++-
[答疑编号500735190207]
『正确答案』A
鉴别肠道致病菌和非致病菌常选用
A.吲哚试验
B.菊糖分解试验
C.葡萄糖发酵试验
D.乳糖发酵试验
E.甘露醇发酵试验
[答疑编号500735190208]
『正确答案』D
疑为痢疾患者的粪便标本分离培养应选用
A.血平板
B.普通琼脂平板
C.中国兰培养基
D.肉汤培养基
E.SS琼脂培养基
[答疑编号500735190209]
『正确答案』E
有迁徙生长现象的细菌为
A.霍乱弧菌
B.伤寒沙门菌
C.大肠埃希菌
D.变形杆菌
E.痢疾志贺菌
[答疑编号500735190210]
『正确答案』D
关于肠杆菌细菌，下列哪些叙述是正确的
A.为一组革兰阴性杆菌，形态染色无诊断意义
B.均为人类肠道正常菌群，机体免疫力下降时可导致感染
C.无芽胞，多数有鞭毛，能运动
D.营养要求不高，兼性厌氧或需氧
E.可引起肠道外感染
[答疑编号500735190211]
『正确答案』ACDE
临床检验技师-微生物检验(2019)练习第十四章-肠杆菌科及检验.doc
2019第十四章肠杆菌科及 检验 一、A1 1、下列关于肠道感染大肠埃希菌的病原群，说法错误的是 A、ETEC引起霍乱样肠毒素腹泻 B、E PEC主要引起婴儿腹泻 C、E IEC引起黏液脓血便 D、E HEC可引起严重的腹痛、痉挛，严重者可发展为急性肾衰竭 E、E AggEC其中0157:117可引起出血性大肠炎 2、肠杆菌科细菌的鞭毛抗原是 A、0抗原 B、H抗原 C、V i抗原 D、K抗原 E、V i抗原和K抗原 3、肠杆菌科细菌的菌体抗原是 A、0抗原 B、H抗原 C、V i抗原 D、K抗原 E、V i抗原和K抗原 4、志贺菌属分群、分型的依据是 A、0抗原 B、H抗原 C、K抗原 D、V抗原 E、0抗原和K抗原 5、无鞭毛的细菌是 A、埃希菌属 B、沙门菌属 C、志贺菌属 D、变形杆菌属 E、枸椽酸杆菌属 6、宋内志贺菌 A、为A群志贺菌 B、为B群志贺菌 C、包括10个血清型
D、培养中常有扁平的粗糙型菌落 E、快速发酵乳糖 7、下列细菌中，引起细菌性痢疾症状最轻的是 A、痢疾志贺菌 B、福氏志贺菌 C、鲍氏志贺菌 D、宋内志贺菌 E、以上都不对 8、大肠埃希菌与沙门菌、志贺菌具有鉴别性的生化反应是 A、发酵乳糖 13、发酵山梨醇 C、发酵葡篇糖 D、硫化氢试验 E、明胶水解试验 9、根据0抗原，志贺菌属分为多个群，其中A群为 A^痢疾志贺菌 B、福氏志贺菌 C、鲍氏志贺菌 D、宋内志贺菌 E、痢疾杆菌 10、志贺菌属是主要的肠道病原菌之一，包括哪些血清群（型） A、痢疾志贺菌 福氏志贺菌 C、鲍氏志贺菌 D、宋内志贺菌 E、以上都是 11、下列为沙门菌分群依据的抗原是 A、菌体抗原 B、鞭毛抗原 C、Vi抗原 D、M抗原 E、5抗原 12、辅助诊断伤寒病的实验是 A、肥达试验 B、汹涌发酵试验 C、抗溶血素“0”试验 D、Weil-Felix 试验
微生物检验肠杆菌科及检验
第十九章肠杆菌科及检验 本章考点： 1.概述 （1）概念 （2）命名与分类原则 （3）共同特点 （4）自然与人体内的分布 （5）微生物学检查方法 （6）临床意义 2.埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、变形杆菌属、耶尔森菌属 （1）生物学性状 （2）微生物学检查法 （3）临床意义 一、概述和通性 （一）概念 肠杆菌科是由多个菌属组成，其生物学性状相似，均为革兰阴性杆菌。大多数肠道杆菌属于正常菌群，作为条件致病菌而引起疾病。其中包括常引起腹泻和肠道感染的细菌（埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属）和常导致院内感染的细菌（枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、多源菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属和摩根菌属），以及一些在一定条件下偶可引起临床感染的细菌。 （二）分类 根据《伯杰系统细菌学手册》（1984年）将肠杆菌科的细菌分为20个属即埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属、爱德华菌属、普罗威登斯菌属、变形杆菌属、摩根菌屑、耶尔森菌属等。 （三）生物学特性 1.形态与染色 革兰阴性杆菌，其菌体大小为（1.0～6.0）μm×（0.3～1.0）μm。多数有周鞭毛，除外志贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC无鞭毛。均不形成芽胞，少数菌属细菌可形成荚膜。 2.培养：需氧或兼性厌氧，营养要求不高，在普通琼脂培养基和麦康凯培养基上均能生长并形成中等大小的S型菌落，液体培养基中呈混浊生长。 3.生化反应：发酵葡萄糖产酸、产气，乳糖发酵试验: 肠道非致病菌（＋），肠道致病菌（－）（除外变形杆菌）。肠杆菌科定科试验主要项目是革兰阴性杆菌、触酶阳性，氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阳性。 4.抗原构造：包括菌体（O）抗原，鞭毛（H）抗原和表面抗原（如Vi抗原、K抗原）3种。 5.变异：包括菌落S～R变异，鞭毛H～O变异和耐药性或生化反应性质的改变。 6。抵抗力：不强。加热60℃，30分钟即被杀死。不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。对低温有耐受力，能耐胆盐。 （四）致病性 肠杆菌科细菌种类多，可引起多种疾病： 1.致病性肠道杆菌：以肠内感染为主，腹泻为共显症状，引起急慢性肠道感染、食物中毒、旅游者腹泻及肠热症等。
食品微生物之检验方法-阪崎肠杆菌之检验
附件 食品微生物之檢驗方法－阪崎腸桿菌之檢驗 1 適用範圍〆本方法適用於一般食品及奶粉中阪崎腸桿菌之檢驗。 2 檢驗方法〆 2.1 工作環境〆工作平台須寬敞、潔淨、光線良好，操作平台光度為100呎燭光以上，密閉室內換 氣良好，儘可能沒有灰塵及流動空氣。每15分鐘落菌數不得超過15 CFU／培養皿。 2.2 器具及材料〆 2.2.1 乾熱滅菌器。 2.2.2 高壓滅菌釜。 2.2.3 攪拌均質器（Blender）或鐵胃（Stomacher）〆適用於無菌操作者。 2.2.4 天平〆可稱量到2000 g者，靈敏度為0.1 g々可稱量到120 g者，靈敏度為1 mg。 2.2.5 冰箱〆能維持5 ±3℃者。 2.2.6 吸管或吸管尖〆已滅菌，1 mL吸管應有0.01 mL之刻度々5 mL及10 mL吸管應有0.1 mL 之刻度。 2.2.7 吸管輔助器（Pipette aid）或微量分注器。 2.2.8 稀釋瓶〆160 mL，玻璃、聚乙烯（polyethylene）、鐵弗龍（Teflon）或其他能耐121℃濕熱滅 菌20分鐘以上之塑膠材質，附螺旋蓋。 2.2.9 培養皿〆已滅菌，內徑約9 cm，深度約15 mm，底皿之內外面應平坦，無氣泡、刮傷或其 他缺點。 2.2.10 增菌用容器〆附螺旋蓋之125 mL、250 mL、2 L三角錐瓶或廣口瓶々玻璃、聚乙烯、鐵弗龍 或其他能耐121℃濕熱滅菌20分鐘以上之塑膠材質。 2.2.11 pH測定儀。 2.2.12 培養箱〆能維持內部溫度在±1℃以內者。 2.2.13 溫度計〆量測溫度範圍1～55℃，最小刻度0.1℃。 2.2.14 水浴〆加蓋，具水流循環系統，能維持水溫溫差在±0.2℃以內者。
食品中阪崎肠杆菌原始记录
PITC/JJ01-WJ-0005/1-1 食品中阪崎肠杆菌原始记录 样品编号：样品名称： 样品状态：□定型包装□散装□液态□固态 收样日期：检验日期： 检验项目/方法：阪崎杆菌GB 4789.40-2010 仪器设备：恒温箱（36℃）PITC-411WJ-148 恒温箱（44.5℃）PITC-403WJ-140 恒温箱（30℃）PITC-221WJ-104 恒温箱（26℃）PITC-221WJ-104 ATB微生物鉴定仪PITC-171 步骤过程结果 前增菌 阳对：□NG □G 取检g/mL加入 900mL以预热44℃的缓 冲蛋白胨水增菌液中混 匀℃培养h 空白：□NG □G 样品-1：□NG □G 样品-2：□NG □G 样品-3：□NG □G 样品-4：□NG □G 样品-5：□NG □G 增菌 阳对：□NG □G 移取1mL处理液转种于 10mL mLST-Vm肉汤 ℃培养h 空白：□NG □G 样品-1：□NG □G 样品-2：□NG □G 样品-3：□NG □G 样品-4：□NG □G 样品-5：□NG □G 分离分别划线接种2个阪崎 显色平板 ℃培养h 阳对：□NG □G 空白：□NG □G 样品-1：□NG □G典型菌落特征按照产品 说明进行判定。 样品-2：□NG □G 样品-3：□NG □G 样品-4：□NG □G 样品-5：□NG □G 挑取1~5个可疑菌落划线接种于TSA平板 ℃培养h 阳对：□NG □G 空白：□NG □G 样品-1：□NG □G典型菌落为黄色菌落。样品-2：□NG □G 样品-3：□NG □G 样品-4：□NG □G 样品-5：□NG □G 生化鉴定 结果报告（每100g或每100 mL）样品-1样品-2样品-3样品-4样品-5 □ND □D□ND □D□ND □D□ND □D□ND □D 注：G生长 NG不生长 D检出 ND 未检出 检验者：校核者：完成日期：
检验科预开展新项目一览表
检验科预开展新项目一览表 说明：不允许更改产品顺序号 序号 项目名称 规格 单价（元）按包装规格单位 计算选填 价格 元/盒（箱） 校准品/质控品价格（元/毫升） 样本类型 实验方法 适用机型 备注 元/人份 元/毫升 1 腹泻四病毒联合检测（轮状、腺、诺如、星状） 粪便 胶体金 1-1轮装 1-2腺 2 血栓新四项（TAT 、PIC 、TM 、t-PAI-C ） 血浆 比浊法、ELISA STA-R Evolution 3 糖化白蛋白 血清 酶法 贝克曼AU58系列全自动生化分析仪 4 脂蛋白磷脂酶A2 血清 酶法 贝克曼AU58系列全自动生化分析 5 髓过氧化物酶 血清 酶法 贝克曼AU58系列全自动生化分析 6 香草扁桃酸 24小时尿 酶法/免疫比浊法/比色法 贝克曼AU58系列全自动生化分析、日立7180 7 17-羟类固醇 24小时尿 酶法/免疫比浊法/比色法 8 17-酮类固醇 24小时尿 酶法/免疫比浊法/比色法 9 尿总蛋白 24小时尿 比色法 10 尿皮质醇 24小时尿 酶法 11 尿肌酐 24小时尿 酶法 12 小而密低密度脂蛋白胆固醇 血清 比浊法/比色法 贝克曼AU58系列全自动生化分析 13 FK506（他克莫司） 全血 比浊法 贝克曼AU58系列全自动生化分析 14 环胞霉素 全血 比浊法 贝克曼AU58系列全自动生化分析 15 免疫球蛋白A （C ）IgA(C) 血清 散射比浊法 BN II 16 异常凝血酶原（PIVKA-II ） 血清 化学发光法 雅培i4000 17 胃泌素(G17) 血清 化学发光法 雅培i4000
18 降钙素(CT) 血清 化学发光法 Immulite2000、西门子XP 、雅培i2000、罗氏e601 19 性激素结合蛋白(SHBG) 血清 化学发光法 20 雄烯二酮(ADD) 血清 化学发光法 21 非结合雌三醇（E3） 血清 化学发光法 22 胰岛素生长因子-1（IGF-1） 血清 化学发光法 23 促红细胞生成素（EPO ） 血清 化学发光法 24 ProGRP ，胃泌素释放肽前体 血清 电化学发光法 罗氏e601 25 维生素K 缺乏或拮抗剂-Ⅱ诱导蛋白（脱γ羟基凝血酶原） 血清 化学发光法 雅培i4000 26 尿β2微球蛋白检测 尿液 散射比浊法 BN II 27 免疫球蛋白IgG 分型检测 血清 散射比浊法 BN II 28 ST2蛋白（心衰分级与诊断） 血清 ELISA 手工 29 呼吸道病毒抗原 血清 ELISA 、免疫荧光 手工 30 尿AD7C-NTP 检测 尿 酶联免疫法 手工 31 血浆TAFI 含量检测 血浆 免疫比浊法、胶体金法 手工 32 EB 病毒DNA 血清 实时荧光PCR LC480/SLAN-96P 33 单纯疱疹病毒DNA 血清 实时荧光PCR LC480/SLAN-96P 34 结核分枝杆菌分型 血清 实时荧光PCR LC480/SLAN-96P 35 结核分枝杆菌耐药基因检测（注：利福平耐药突变检测、异烟肼耐药突变检测、乙胺丁醇耐药突变检测、链霉素耐药突变检测、氟喹诺酮类药物耐药突变检测） 血清 荧光PCR 熔解曲线法 LC480/SLAN-96P 36 丝状真菌耐药基因检测 纯培养菌落 实时荧光PCR LC480/SLAN-96P
微生物检验第十四章 肠杆菌科及检验讲义
第十四章肠杆菌科及检验 概述和通性——分类 根据细菌的形态、生化反应、抗原性质以及核酸相关性进行分类。大多数属于正常菌群（条件致病菌）。 引起腹泻和肠道感染：埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属等。 导致院内感染：枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、多源菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属和摩根菌属等。 概述和通性——生物学特性 形态与结构 形态：杆菌。 染色：G-。 特殊结构： 多数有周鞭毛，能运动。 志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛。 均不形成芽胞，少数菌属（埃希菌属和克雷伯菌属）可形成荚膜。 培养特性 营养要求：不高。
气体环境：需氧或兼性厌氧。 菌落特征：普通琼脂培养基和麦康凯培养基上均能生长，并形成中等大小的菌落，湿润光滑。 抗原 变异： 包括菌落S-R变异和鞭毛H-O变异。 表现为耐药性或生化反应性质的改变。 抵抗力： 不强。加热60℃，30分钟即被杀死。 不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。 对低温有耐受力，能耐胆盐。 概述和通性——微生物检验及鉴定 标本采集 形态学检查：革兰阴性杆菌。 分离培养： 将粪便或肛拭标本立即接种在肠道菌选择培养基上或先增菌后再分离。 克氏双糖铁琼脂（KIA）培养基：葡萄糖/乳糖发酵；产气；硫化氢试验。 动力-吲哚-尿素（MIU）培养基 生化反应： ①用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌鉴别； ②用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐利用试验阳性和两者均为阴性反应三个类群； ③选择生化反应进行属种鉴别； ④用诊断血清做凝集反应。 埃希菌属——分类 包括5个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。 临床最常见的是大肠埃希菌，俗称大肠杆菌，是人类和动物肠道正常菌群。 埃希菌属——生物学特性 形态与结构
14.肠杆菌科及检验
一、概述 1.多数有周鞭毛，志贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC无鞭毛。无芽孢，少数有荚膜 2.需氧或兼性厌氧，在普通培养基或麦康凯培养基上均能生长形成中等大小的菌落，表面光滑，液体培养基中呈浑浊生长。 3.发酵葡萄糖，产酸产气，H2S试验阳性（志贺菌、大肠埃希菌等为阴性） 4.定科试验：触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性、乳糖发酵试验（非致病菌+，致病菌-，变形杆菌除外） 5.抗原结构包括菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原和表面抗原（Vi、K等） 二、埃希菌属 1.革兰阴性杆菌，兼性厌氧，多数有周鞭毛、菌毛、荚膜及微荚膜 2.发酵葡萄糖、乳糖麦芽糖和甘露醇，产酸产气 3.氧化酶（-）、IMViC（++--）、MIU（++-） 4.主要引起疾病胆囊炎、泌尿系感染等。 5. ①肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）：霍乱样肠毒素腹泻 ②肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：主要引起婴儿腹泻（血清学鉴定试验为血清凝结试验） ③肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：志贺样腹泻（脓血便） ④肠出血型大肠埃希菌（EHEC）：其中O157：H7可引起出血性大肠炎和出血性尿毒综合征。临床特征为严重的腹痛、痉挛，反复血性腹泻，伴发热、呕吐 ⑤肠黏附型大肠埃希菌（EAggEC）：腹泻 三、志贺菌 1.志贺菌属分为痢疾、福氏、鲍氏、宋内四群。可引起人类细菌性痢疾 2.取粪便或肛拭标本接种GN肉汤增菌，再进行分离培养。可选择SS培养基、麦康凯培养基、中国蓝培养基。 3.KIA：K/A（宋内志贺菌可迟缓分解乳糖）、产气-/+、硫化氢（-）、MIU：-、+/-、-、氧化酶（-）、IMVIC（-+--） 4.在普通平板和SS培养基上形成中等大小、半透明的光滑性菌落 5.可引起人类细菌性痢疾，小儿易引起急性中毒性痢疾 四、沙门菌 1.革兰阴性直杆菌，周身鞭毛，多数有菌毛。为胞内寄生菌，寄生于肠道 2.可导致疾病 ①肠热病（伤寒、副伤寒）：为法定传染病②食物中毒③慢性肠炎④败血症 3.肥达试验：由已知的伤寒沙门菌O、H抗原和甲、乙型副伤寒菌的H抗原与不同稀释度的病人血清做定量凝集实验。属于直接凝集试验，来判断机体是否受沙门菌感染而导致肠热病并判断沙门菌种类 4.发酵葡萄糖，产酸产气（伤寒沙门菌产酸不产气） 5.在SS培养基中产H2S，菌落中心呈黑色 6.抗原结构包括菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原和表面抗原（Vi、M、5） 7.为提高检出率，血液1-2周采集，粪便与尿液（2-3周采集）。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高 8.沙门菌属最后鉴定是通过血清学鉴定
微生物检验第十四章 肠杆菌科及检验练习
第十四章肠杆菌科及检验 一、A1 1、吲哚试验阳性的组合 A、大肠埃希菌、普通变形杆菌、霍乱弧菌 B、大肠埃希菌、鼠伤寒沙门菌、产气肠杆菌 C、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、肺炎克雷伯菌 D、伤寒沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌 E、产气肠杆菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌 2、能利用含硫氨基酸生成硫化氢的细菌是 A、大肠埃希菌 B、奇异变形杆菌 C、产气肠杆菌 D、肺炎克雷伯菌 E、宋内志贺菌 3、从腹腔感染患者腹腔液中出分离一革兰阴性杆菌，氧化酶阴性，苯丙氨酸脱氨酶阳性，在血平板上有迁徙生长，H2S阳性，它可能是 A、变形杆菌 B、摩根菌 C、普罗威登斯菌 D、伤寒沙门菌 E、枸橼酸杆菌 4、用于粪便污染检测指标的是 A、霍乱弧菌 B、产气肠杆菌 C、阴沟肠杆菌 D、变形肠杆菌 E、大肠杆菌 5、主要流行的肠出血性大肠埃希菌的O血清型是 A、O6 B、O25 C、O157 D、O111 E、O158 6、致病性大肠埃希菌的致病特点是 A、只引起肠道感染 B、不引起泌尿生殖器感染 C、腹泻可由两种肠毒素引起 D、外毒素可引起严重的毒血症
E、不引起败血症 7、下列除哪项外，均为肠道菌的主要抗原 A、O抗原 B、H抗原 C、荚膜抗原 D、芽胞抗原 E、菌体抗原 8、典型的大肠埃希菌的生化反应结果是 A、乳糖（－），IMViC（＋、－、－、－） B、乳糖（＋），IMViC（＋、＋、－、－） C、乳糖（－），IMViC（＋、＋、－、－） D、乳糖（－），IMViC（＋、＋、＋、－） E、乳糖（－），IMViC（＋、－、－、－） 9、肠杆菌科中，表面抗原是 A、O抗原 B、H抗原 C、K抗原 D、以上都是 E、以上都不是 10、IMViC试验不包括 A、糖发酵试验 B、V-P试验 C、甲基红试验 D、枸橼酸盐利用试验 E、吲哚试验 11、H-O变异属于 A、毒力变异 B、菌落变异 C、鞭毛变异 D、形态变异 E、耐药性变异 12、目前筛选伤寒带菌者的方法是检测血清中的 A、O抗体 B、H抗体 C、K抗体 D、Vi抗体 E、M抗体 13、属于直接凝集反应的是 A、抗“O”试验
食品安全国家标准食品微生物学检验肠杆菌科检验编制说明
食品安全国家标准《食品微生物学检验肠杆菌科检验》 （征求意见稿） 编制说明 一、标准起草的基本情况: （一）任务来源 受国家卫生与计划生育委员会食品安全标准与监测评估司（原卫生部食品安全综合协调与卫生监督局）委托，根据《食品安全国家标准管理办法》、《食品安全国家标准制（修）订项目管理规定》，按照食品安全国家标准审评委员会的工作安排，对本标准进行制定。 （二）简要起草过程 2011年7月，卫生部食品安全综合协调与卫生监督局下达《食品安全国家标准食品微生物学检验肠杆菌科检验》标准制定任务，项目编号为spaq-2011-61。随即成立标准制定专家组，确立标准制定的基本原则，比较与研究我国及国际标准相关内容，并结合方法的研究工作，形成《食品安全国家标准食品微生物学检验肠杆菌科检验》标准的征求意见稿。 （三）起草单位、协作单位、主要起草人 参与本标准的起草单位有辽宁出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、山东出入境检验检疫局、浙江出入境检验检疫局及河南出入境检验检疫局。 （四）主要起草人 本标准主要起草人为：刘淑艳、卢行安、蒋丹、赵守成、王刚、姜英辉、程洁、苗丽、吕佳、柳媛、宋慧君、马惠蕊。起草人员负责标准制定工作的组织、协调，相关资料的查阅、收集，标准文本及编制说明的起草、撰写，通过电子邮件、传真等方式，征集、整理和归纳相关的意见和建议。 二、标准的重要内容及主要修改情况 本标准研究对比了国际标准ISO 21528-1：2004 食品和动物饲料微生物学肠杆菌科检测和计数方法第1部分：带前增菌的MPN法和ISO 21528-2：2004食品和动物饲料微生物学肠杆菌科检测和计数方法第2部分：菌落计数法；并依据伯杰细菌鉴定手册第八版，肠杆菌科的分类，选择肠杆菌科12个属及其它对照菌株，共25株进行了本标准方法的检验，确定了肠杆菌科检验的MPN法及菌落计数法。
肠杆菌科的检验 微生物实验
实验三：肠杆菌科的检验 一、接种细菌： MAC培养基接种大肠埃希菌和变形杆菌，SS培养基接种福氏志贺菌和乙型副伤寒沙门菌，采用分区划线法，放在35℃温箱中培养18—24h。 二、观察肠道杆菌在MAC和SS平板上的菌落形态。 1、SS平板： 1）福氏志贺菌形成无色、半透明、光滑、湿润、突起、直径为1—2mm大小的菌落；2）乙型副伤寒沙门菌为中心带黑褐色，其余部分为半透明、光滑、湿润、突起的小菌落2、MAC平板： 1）大肠埃希菌形成红色、圆形、凸起、边缘整齐、多数为光滑型的菌落。中等大小。2）变形杆菌为圆形、扁平、无色、半透明的菌落。 三、涂片、革兰染色 将玻片分为四个区域，并分别标记，将四种肠道杆菌分别在四个区域内的生理盐水中研磨，待其自然干燥后固定，采用“改良快速法”进行染色，结果如图所示： 福氏志贺菌乙型副伤寒沙门菌变形杆菌大肠埃希菌 G-杆菌G-直杆菌，较细长G- 杆菌G-直短杆状 显微镜检查特征为革兰阴性杆菌，肠杆菌科多数细菌的形态及染色性相似，根据形态及染色性难以相互鉴别。 四、生化试验： 1、氧化酶试验（纸片法）：在滤纸条上滴一滴氧化酶试剂，用无菌接种环挑取待测菌落在滤纸条上滴了试剂的部位研磨，；滤纸变为红色则为阳性，不变色为阴性，结果表明，以上四种肠道杆菌的氧化酶试验均为阴性。 2、接种KIA、MIU上。 五、 2、微量生化：
六、沙门菌、志贺菌的血清学鉴定： 1、在洁净载玻片上两端分别滴加一滴志贺菌四种多价血清和福氏四价血清，各取一环志贺菌在两种血清上研磨10S，观察两组结果均出现肉眼可见的凝集物，提示该菌为福氏志贺菌。 2、采用同上方法，在洁净玻片上分别在其两端滴加一滴沙门菌多价O（A—F）和Hd血清，各取一环待测菌与之混合，研磨10S，几分钟后观察两组结果，出现肉眼可见的颗粒状凝聚物表示该菌为乙型副伤寒沙门菌。 七、讨论： 1、做生化试验时，有些细菌为致病菌，故实验时要保护好自己，且实验废弃物要妥善处理，以免发生有害菌的感染。 2、接种细菌过程中，因为MAC培养基和SS 培养基成分不同。故应看清菌种后再接种，以免影响实验结果。 3、志贺菌属和大肠埃希菌的鉴别：志贺菌无动力，赖氨酸阴性、发酵糖产酸不产气。 4、志贺菌属和伤寒沙门菌鉴别：伤寒沙门菌在KIA培养基上的表现和志贺菌相似，鉴别点是伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性，能与沙门菌因子血清（OA-F）凝集而不与志贺菌属因子血清凝集。
饲料中阪崎肠杆菌活菌的检测EMA-PCR法-编制说明
《饲料中阪崎肠杆菌活菌的检测 EMA-PCR法》河南省地方标准编制说明 一、编制的目的和意义 阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazaii）是一种革兰氏阴性、周生鞭毛、能运动、无芽孢的兼性厌氧细菌，属条件性致病菌。自1961年，英国首次报道2例由阪崎肠杆菌引起的脑膜炎病例以来，相继在美国、加拿大、比利时等国家报道了新生儿阪崎肠杆菌感染事件。国际食品微生物标准委员会(ICMSF)在2002年将阪崎肠杆菌列为“严重危害特定人群生命、引起长期慢性实质性后遗症的一种致病菌”。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症，并且可能引起神经系统后遗症和死亡，在某些情况下，由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的死亡率可达40%～80%。因此，对阪崎肠杆菌活菌建立快速、特异、灵敏的检测标准对于该菌的早期发现及传播的有效控制至关重要。 目前阪崎肠杆菌的检测方法较多，主要有传统培养方法和分子生物学方法。我国目前采用传统的细菌学方法，检测时间需要一周左右，费时费力；分子生物学方法虽然快速，灵敏，但不能区分死菌与活菌，而死菌DNA的存在容易导致假阳性问题。本研究以阪崎肠杆菌16S rDNA保守序列为靶基因设计一对特异性引物，采用EMA与PCR结合的方法进行检测，能够有效地区分阪崎肠杆菌的死菌与活菌，避免了因死菌DNA存在造成的假阳性结
果，同时减去了传统培养方法中目标菌分离纯化的步骤，节约了大量检测时间。本次研究结果显示，PCR检测阪崎肠杆菌的灵敏度在1.0×102 cfu/mL左右，从样品处理、预增菌、PCR扩增、凝胶电泳只需要48h左右，与传统培养方法相比，稳定性好、灵敏度高、特异性强，可用于检测饲料中阪崎肠杆菌的污染状况，对饲料的安全监测具有重大意义。 二、任务来源及编制原则和依据 1、任务来源 根据河南省质量技术监督局文件《河南省质量技术监督局关于下达2017年第一批河南省地方标准制修订计划的通知》（豫质监标发…2017?104号）的要求，由河南省兽药饲料监察所负责对河南省地方标准《饲料中阪崎肠杆菌活菌的检测EMA-PCR法》（立项编号：20171210482）的起草、制定工作。 2、编制原则 符合国家法律、法规和政策，本着严格遵循科学依据，与国际水平接轨，并且准确、实用、快速的原则，开展了本次研究工作。 3、编制依据 主要依据以下标准：GB 4789.40-2016 食品微生物学检验克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）检验；GB 19489 实验室生物安全通
检验科管理和持续改进记录文本
四棉临床检验管理与持续改进 时间：地点：负责人： 质控人员： 一、检验质量与安全管理 （（★）（★）为核心条款，（★）为核心制度） （一）部门设置、布局、设备设施；服务项目；急诊检验 1、设置、布局、设备设施符合《医疗机构临床实验室管理办法》；合作单位服务协议； （1）以前存在的问题及改进情况 （2）目前存在的问题及对策 2、定期网络通报细菌耐药、临床标本菌种分布（1次/季度）；三年开展的检验新项目一览表4.15.1 （1）以前存在的问题及改进情况 （2）目前存在的问题及对策
3、临床合理性建议、新项目设置合理性及急诊检验满意度调查表（2次/年）； （1）以前存在的问题及改进情况 （2）目前存在的问题及对策 4、急诊项目报告时间对外公示（急性心肌标志物、凝血和感染）（1）以前存在的问题及改进情况 （2）目前存在的问题及对策 5、检验项目、设备、试剂管理：三证齐全；分子诊断项目（外送）；应急检测能力和技术储备；方法学验证及评价记录 （1）以前存在的问题及改进情况 （2）目前存在的问题及对策
6、新项目审批及实施流程：步骤；新项目实施后的跟踪，听取临床对新项目设置合理性的意见，改进项目管理 （1）以前存在的问题及改进情况 （2）目前存在的问题及对策 （二）实验室安全程序，制度及相应的标准操作程序，遵照实施并记录 1、《实验室安全管理制度和流程》、科主任负责、记录、培训；实验室生物安全分区、实验室生物安全等级标志、工作流程避免交叉污染； （1）以前存在的问题及改进情况 （2）目前存在的问题及对策 2、洗眼器、冲淋装置及其他急救设施及耗材、警示标识、《实验室工作人员健康档案》； （1）以前存在的问题及改进情况
医院检验科检验项目一览表
医院检验科检验项目一览表 检验项目（组合）名称项目内容（英文缩写）/备注报告时间血常规（三分类）WBC、RBC、PLT、HGB、HCT等18项+3个直方图30分钟 1小时血常规（五分类）WBC、RBC、PLT、HGB、HCT等26个项目+五分类+异常淋巴 细胞、幼稚细胞提示+5个散点图 三分类血常规+CRP WBC、RBC、PLT、HGB、HCT等18项+3个直方图+CRP 40分钟血型ABO血型鉴定+RH血型鉴定20分钟网织红细胞计数（Ret）1小时嗜酸性细胞直接计数1小时异常白细胞形态检查1小时异常红细胞形态检查1小时红斑狼疮细胞检查（LEC）5小时一氧化碳（CO）定性测定30分钟红细胞比积测定（HCT）30分钟红细胞沉降率测定（ESR激光法）1小时骨髓涂片细胞学检验根据需要进行特殊化学染色3天凝血四项PT、APTT、TT、Fib 1.5小时D-二聚体测定1小时尿液分析+镜检尿化学分析11项+镜检5项30分钟尿妊娠试验10分钟尿沉渣镜检WBC、RBC、管型、结晶等30分钟尿本-周氏蛋白定性检查30分钟尿隐血10分钟
检验项目（组合）名称项目内容（英文缩写）/备注报告时间尿寄生虫30分钟乳糜试验30分钟粪便常规颜色、性状、RBC、WBC、虫卵等20分钟粪便隐血试验（OB化学法）10分钟粪便轮状病毒检测20分钟胸、腹水常规检查颜色、透明度、李凡他试验、WBC等30分钟脑脊液常规检查CSF 颜色、透明度、潘氏试验、WBC等30分钟精液常规检查（手工法）颜色、性状、液化时间、活动率、活动力、精子数等 1.5小时前列腺液常规检查颜色、性状、卵磷脂小体、淀粉颗粒、精子等30分钟阴道分泌物检查WBC、上皮细胞、清洁度、霉菌、滴虫等30分钟 30分钟阴道五联检PH值、过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基 肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶测定 痰液常规检查颜色、性状、WBC、结晶等30分钟各种穿刺液常规检查颜色、透明度、WBC、RBC等30分钟血流变全血粘度、血浆粘度测定，红细胞流变特性、HCT、ESR等3小时离子6项K、NA、CL、Ca、TCO2、P 1-3小时急诊生化14项UREA、Cr、TBIL、ALB、CK、ALT、AMY、GLU+离子6项1-3小时肝功能5项ALT、AST、TBIL、DBIL、LBIl 3小时肝功能10项TP、ALB、GLB、GGT、LDH、ALP+肝功5项3小时肝功能15项TBA、CHE、HBDH、GLU、ADA+肝功10项3小时心肌酶谱5项CK、CK-MB、LDH、HBDH、AST 3小时血脂4项CHOL、TG、HDL、LDL 3小时血脂7项APoAⅠ、APoB、LP(a)+血脂4项3小时血糖1项GLU 3小时
食品微生物之检验方法-阪崎肠杆菌之检验
食品微生物之检验方法－阪崎肠杆菌之检验 1 适用范围：本方法适用于一般食品及奶粉中阪崎肠杆菌之检验。 2 检验方法： 2.1 工作环境：工作平台须宽敞、洁净、光线良好，操作平台光度为100呎烛光以上，密闭室内换气良好，尽可能没有灰尘及流动空气。每15分钟落菌数不得超过15 CFU／培养皿。 2.2 器具及材料： 2.2.1 干热灭菌器。 2.2.2 高压灭菌釜。 2.2.3 搅拌均质器（Blender）或铁胃（Stomacher）：适用于无菌操作者。 2.2.4 天平：可称量到2000 g者，灵敏度为0.1 g；可称量到120 g者，灵敏度为1 mg。 2.2.5 冰箱：能维持5 ± 3℃者。 2.2.6 吸管或吸管尖：已灭菌，1 mL吸管应有0.01 mL之刻度；5 mL及10 mL吸管应有0.1 mL 之刻度。 2.2.7 吸管辅助器（Pipette aid）或微量分注器。 2.2.8 稀释瓶：160 mL，玻璃、聚乙烯（polyethylene）、铁弗龙（Teflon）或其它能耐121℃湿热灭菌20分钟以上之塑料材质，附螺旋盖。 2.2.9 培养皿：已灭菌，内径约9 cm，深度约15 mm，底皿之内外面应平坦，无气泡、刮伤或其它缺点。 2.2.10 增菌用容器：附螺旋盖之125 mL、250 mL、2 L三角锥瓶或广口瓶；玻璃、聚乙烯、铁弗龙或其它能耐121℃湿热灭菌20分钟以上之塑料材质。 2.2.11 pH测定仪。 2.2.12 培养箱：能维持内部温度在± 1℃以内者。 2.2.13 温度计：量测温度范围1～55℃，最小刻度0.1℃。 2.2.14 水浴：加盖，具水流循环系统，能维持水温温差在± 0.2℃以内者。 2.2.15 接种针及接种环（直径约3 mm）：镍铬合金、铂铱或铬线材质，或可抛弃式者。 2.2.16 曲玻棒：可灭菌者，直径3～4 mm，涂抹区域45～55 mm。 2.2.17 试管：10 × 100 mm，13 × 100 mm，13 × 120 mm，15 × 150 mm，16 × 150 mm试管，或其它适用者。 2.2.18 旋涡混合器（Vortex mixer）。 2.2.19 显微镜：能放大至1000倍以上之一般光学显微镜。 2.2.20 载玻片及盖玻片：适用于染色及镜检用。 2.2.21 研钵、杵。 2.2.22 药勺、剪刀、小刀、镊子：可灭菌。 2.2.23 滤纸及褐色试药瓶。 2.2.24 无菌滤膜：孔径0.45 μm或以下之亲水性醋酸纤维膜。 2.2.25 杜兰发酵管（Durham fermentation tube）：外径9 × 22 mm或其它适用者。 2.2.26 试药：氯化钠、硫酸月桂酸钠（sodium lauryl sulfate）、胆盐No. 3（bile salts No. 3）、中性红（neutral red）、结晶紫（crystal violet）、柠檬酸铁铵（ferric ammonium citrate）、脱氧胆酸钠（sodium desoxycholate）、硫代硫酸钠（sodium thiosulfate）、草酸铵（ammonium
检验科急诊项目一览表
检验科急诊项目一览表-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
检验科急诊项目一览表 一、三大常规 血常规检验项目包括白细胞数目、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比、单核细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比、嗜碱性粒细胞百分比、中性粒细胞数目、淋巴细胞数目、单核细胞数目、嗜酸性粒细胞数目、嗜碱性粒细胞数目、红细胞数目、血红蛋白浓度、红细胞压积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、红细胞分布宽度变异系数、红细胞分布宽度标准差、血小板数目、平均血小板体积、血小板分布宽度、血小板压积 尿常规检验项目包括白细胞、酮体、亚硝酸盐、尿胆原、胆红素、蛋白质、葡萄糖、尿比重、隐血、pH 便常规检验项目包括颜色、性状、食物残渣、细胞、虫卵及原虫、结晶、细菌、真菌、粪便潜血试验 ★以上项目报告时间≤30分钟（镜检和复检标本除外） 二、生化全项 检验项目包括ALT（丙氨酸氨基转移酶）、AST（门冬氨酸氨基转移酶）、AST/ALT（谷草、谷丙）、ALP（碱性磷酸酶）、GGT （y-谷氨酰氨基转移酶）、TBIL（总胆红素）、DBIL（直接胆红素）、IBIL（间接胆红素）、TP（总蛋白）、ALB（白蛋白）、G（球蛋白）、A/G（白球比）、UREA（尿素氮）、CRE（肌酐）、B/C
（尿素肌酐比）、CO2（二氧化碳）、UA（尿酸）、CHOL（总胆固醇）、TG（甘油三酯）、HDLC（高密度脂蛋白胆固醇）、LDLC（低密度脂蛋白胆固醇）、GLU（血糖）、A（淀粉酶）、CK（磷酸肌酸激酶）、LDH（乳酸脱氢酶）、Ca（钙）、P（磷）、Mg（镁）、K （钾）、NA（钠）、CL（氯）、TBA（总胆汁酸盐）、CHE（胆碱酯酶） ★以上项目报告时间≤1小时（复查标本除外） 三、免疫 检验项目包括HAV-I（甲型肝炎病毒抗体）、HBsAg（乙型肝炎表面抗原）、HCV（丙型肝炎病毒抗体）、HIV（免疫缺陷病毒抗体） ★以上项目报告时间≤30分钟（复查标本除外） 四、血凝 检验项目包括PT（凝血酶原时间）、PT%（活动度）、INR（国际标准化比值）、FIB-C（纤维蛋白原）、APTT（部分凝血酶原时间）、TT（凝血酶时间） ★以上项目报告时间≤30分钟（复查标本除外） 五、血型 检验项目包括A、B、AB、O、RH血型鉴定， ★以上项目报告时间≤15分钟（复查标本除外）
实验六 肠杆菌科细菌的微生物学鉴定.
实验六肠杆菌科细菌的微生物学鉴定 课程名称:兽医微生物学实验学时:6学时 一、目的要求 1.熟悉大肠杆菌和沙门氏菌形态与染色特性以及主要培养特性; 2.熟悉大肠杆菌和沙门氏菌常规微生物学诊断法; 3.掌握大肠杆菌和沙门氏菌生化试验的方法和原理; 4.熟悉大肠杆菌和沙门氏菌在选择性和鉴别培养基上的生长表现; 5.熟悉沙门氏菌血清分群、定型的方法和步骤。 二、知识背景 肠杆菌科的细菌为革兰氏阴性、中等大小的杆菌,运动者周身鞭毛;在普通培养基上生长好;发酵葡萄糖和碳水化合物者产酸或产酸产气;在麦康凯琼脂上生长;细胞色素氧化酶阴性;还原硝酸盐为亚硝酸盐等。碳水化合物的利用和其它生化试验是肠杆菌科细菌鉴定的重要试验。 大肠埃希氏菌(E.coli简称大肠杆菌,作为原发和继发病原可引起多种动物疾病:犊牛的肠道感染和水泻;幼猪的水泻和腹泻,二月龄以上猪的出血性肠炎和水肿病;狗的尿道感染;鸡的气囊炎和大肠杆菌肉芽肿(Coligranuloma。 沙门氏菌(Salmonella,虽然沙门氏菌血清型超过2200个,但承认的种为数不多,在O抗原的基础上,沙门氏菌血清组(群用字母A、B、C…表示,然后根据它的H抗原(鞭毛抗原再分,用阿拉伯数字1、2、3…等表示,沙门氏菌可引起多种动物和人的疾病,是肠杆菌科重要的致病菌,如鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium可引起动物流产,胃肠炎和败血症。
其它肠杆菌科成员:肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae可引起牛乳房炎、肺炎、母马的宫颈炎和子宫炎,这个菌常形成厚的荚膜。变形杆菌(proteus引起动物的尿道和胃肠道疾病。耶尔森氏菌(yersinia引起鼠疫、胃肠炎等。 生化试验和血清群的鉴定和定型在肠杆菌科细菌的鉴定中占很重要的位置。 三、实验材料 每6人一组,每组所需材料: 1.普通琼脂斜面培养物2管:分别为大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌(提供实验用菌种; 2.普通肉汤2管:分别用来接种大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌; 3.普通琼脂平板2个分别用来划线接种大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌; 4.生化试验用培养基2套,包括葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖发酵试验管、靛基质,M.R、V.P试验、 柠檬酸盐利用,硝酸盐还原试验等; 5.三糖铁琼脂斜面培养基2管; 6.选择性培养基2个,如:麦康凯琼脂平板或远滕氏琼脂平板或伊红美蓝琼脂平板; 7.各种生化试验试剂:靛基质试剂,M.R试剂,V.P试剂,硝酸盐还原试剂; 8.沙门氏菌因子血清。 四、操作程序 1.观察大肠杆菌和沙门氏菌在琼脂平板上的菌落特征并作描述;
检验科各专业组项目一览表
检验科各专业组项目一览表 生化室项目 生化组合具体项目介绍： 说明： 急诊生化室接收项目与三层生化室接收项目的区别在于： 血清铁、总铁结合力、载脂蛋白- 1、载脂蛋白-B、超敏C反应蛋白、糖化血红蛋白只在三层生化室检测 N端脑钠肽前体（BNP）只在急诊生化室检测 同时选择两个或两个以上组合项目时，请注意避免出现内涵重复项目； 总铁结合力为手工项目，每 一、三、五检测，血清铁请与总铁结合力联合申请检测，此两项因标本用量较多，请与其它申请分管采血，检验科在OCS系统中也进行了控制，请不要人为合管。 在OCS系统中设置了口服葡萄糖耐量试验标准处方，请医生选用此选项，并请护士在标本采集时，对应不同时间段，选择打印相应条码，以保证不同时间段标本正确标识。 内分泌室项目 内分泌项目组合介绍： 说明： 骨钙素仅在每周三检测一次，请与其它检测项目分管采血，检验科在OCS 系统中也进行了控制，请不要人为合管
在OCS系统中设置了胰岛素释放曲线、C-肽释放曲线标准处方，请医生选用此选项，并请护士在标本采集时，对应不同时间段，选择打印相应条码，以保证不同时间段标本正确标识。 申请xx药物浓度检测时，请同时提供服药剂量及时间。 免疫二室（肝炎病毒室）项目 免疫二室组合 免疫一室（免疫室）项目 免疫项目组合 说明： 原“M蛋白鉴定”现分为“M蛋白鉴定（血）”和“M蛋白鉴定（尿）”以便针对不同标本产生条码，请医生同时选择此两个组合申请，否则，检验科只针对收到的申请信息进行检测。另一种选择方式，在OCS系统中，设置了“M蛋白鉴定”标准处方，医生可以选用此选项，将自动产生两个组合申请单和两个条码，请护士在标本收集时，正确黏贴。 自身抗体为手工检测方法，每周做两次（周二及周四），风湿类风湿体液免疫为上机项目，每周做三次（ 一、三、五） 临检组项目及组合：（包括细胞室和临检急诊、临检血液体液室） 说明： 血气分析申请请同时提供患者体温及吸氧浓度和氧流量。
肠杆菌检验程序(详细版)
肠杆菌科 【器材】 一、SS平板培养基：选择性培养基，有促进目的菌生长的物质和鉴别用指示剂. 1、煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠等能抑制G+菌及大多数大肠生长，胆盐促进伤寒生长。 2、大肠分解乳糖产酸：中性红（6.8红－8.0黄）变红，与胆盐结合合成胆酸，因而形成中心混浊的深红色菌落，病原菌不分解乳糖，故菌落呈透明微黄色。 3、枸橼酸铁能指示硫化氢产生，硫化铁呈黑色 4、硫代硫酸钠有缓和胆盐对志贺、沙门菌的毒害作用，并中和煌绿、中性红染料的毒性，使大肠红色鲜明 二、KIA斜面培养基：用酚红作指示剂（6.8黄－8.4红）。上层为固体琼脂斜面，含乳糖。下层为半固体琼脂，含葡萄糖，含硫酸亚铁。 1、细菌如能发酵乳糖和葡萄糖产酸产气，则斜面及底层均呈黄色，且有气泡。非致病菌（如大肠埃希菌）一般既可利用乳糖也可利用葡萄糖，但肺克也是如此。 2、如细菌只发酵葡萄糖不发酵乳糖，因葡:乳为1:10，斜面所产生的少量的酸可因接触空气而氧化挥发，从而使斜面部分保持原来的红色；底层则是在相对缺氧的状态下，所生成的酸不被氧化挥发而保持黄色。致病菌一般不能利用乳糖，可用于区别致病/非致病菌。 3、如细菌分解蛋白质产生硫化氢，则与硫酸亚铁反应生成硫化亚铁（黑色沉淀物），使培养基变黑。 左：不发酵乳糖，强产硫化氢。中：不发酵乳糖，不产硫化氢。右：发酵乳糖，不产硫化氢 4、接种方法：先穿刺到底，再在斜面划线。 【实验内容】 一、氧化酶试验 原理：见奈瑟菌属部分 操作：取氧化酶纸片，刮去KIA或普通平板或普通平板上的较大菌落，观察纸片颜色的变化，呈蓝紫色为阳性，不变为阴性（如试剂为盐酸二甲基对苯二胺，阳性者则为红色）。肠杆菌科多为阳性（但变形杆菌为阴性）。 注意事项：因SS培养基中的化学成分和生化反应复杂，其菌落可使滤纸变为紫红色，故对肠道杆菌进行触酶和氧化酶试验时，宜从普通平板或KIA斜面上取菌，以保证试验结果正确。 二、动力试验： 原理：有动力的细菌在半固体培养基中沿穿刺线扩散生长。 培养基：半固体培养基 方法：分别穿刺接种大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，37 ℃孵育16-18h 结果：穿刺线扩散，培养基透明度减低为动力阳性；穿刺线清晰，培养基透明为动力阴性。本试验，大肠为（+），肺杆为（-） 三、吲哚试验：（靛基质试验）
医学检验所临床常用项目一览表
伊康医学检验所临床常用项目一览表 检测项目临床意义价格标本要求报告时间唐氏综合征筛查用于产前唐氏综合征筛查200 血清1ML 3个工作日 肿瘤异常糖链蛋白TAP测定一次组合检测几十种异常糖链糖蛋白，提高肿瘤 检测的准确性，根据糖链的质变来诊断，因此灵 敏度高，特异性强，出具图文报告 370 血清2ML 1个工作日 甲状腺五项 （T3、T4、TSH、FT3、FT4）增高：甲亢、妊娠、急性肝炎。 降低：甲减、长期营养不良、其他全身性疾病 200 血清2ML 24小时 妊娠甲状腺功能检测五项（FT3、FT4、TSH、TG-AB、TPC-AB）增高：甲亢、妊娠、自身免疫性甲状腺炎，慢性 淋巴细胞性甲状腺炎等。 降低：甲减、低蛋白血症、长期营养不良、自身 免疫性甲状腺炎等。 200 血清2ML 24小时 降钙素原（PCT）细菌感染，全身炎症反应综合征脓毒症的早期及 鉴别诊断 230 血清1ML 24小时 糖类抗原CA50 广谱肿瘤标志物，可用于胰腺、肝、卵巢、肠道、 胃、肺等肿瘤的诊断和疗效监测。 80 血清1ML 4个工作日 液基细胞学检查TCT 两者结合检测灵敏度极高，HPV阴性同时TCT 正常者，其发病率风险很低，随访间隔可延至3 年HPV阳性但TCT正常者，可每年随访一次， 对HPV和TCT同时阳性及HPV阴性但TCT阳 性者进行病理切片检查确诊170 宫颈刷出物 2个工作日 人乳头瘤病毒（HVP）340 宫颈刷出物 女性肿瘤四项 （APF、CEA、CA125、CA153）用于女生常见肿瘤（如原发生肝癌、肺癌卵巢癌、 子宫内膜等）诊断和治疖监测，以及乳腺癌的辅 助诊断 235 血清1ML 24小时 孕酮测定（PGN）增高：妊娠、糖尿病孕妇、多胎、原发性高血压、 先天性肾上腺增生等 40 血清1ML 1个工作日 微量元素6项检测人体内微量元素平衡状态，预防微量元素失 衡所致疾病的发生；铅为有毒金属元素；铅增高 可引起肾上腺皮质功能减退，高血压、贫血、胃 肠功能紊乱、儿童智力下降和行为异常等，损伤 生殖细胞及性功能 60 专用管24小时 甲胎蛋白（AFP）测定用于原发生肝癌的诊断，疗效预后监测：畸胎瘤 及胎儿畸形诊断。病毒性肝炎、肝硬化患者AFP 也会有不同程度的升高。 37.5 血清1ML24小时 癌胚抗原（CEA）测定是肺癌和肠癌的首选标志物，用于肺癌、子宫、 乳腺、消化系统肿瘤、肝转移癌等诊断和治疗、 复发监测、判断预后 37.5 血清1ML 24小时 糖类抗原CA19-9测定用于胰腺癌、胆囊癌、胃癌等肿瘤的辅助诊断及 疗效观察 80 血清1ML 24小时 糖类抗CA72-4测定胃癌首选标志物，可用于肠癌、胰腺癌、肝癌的 辅助诊断及疗效监测。 80 血清1ML 24小时 孕妇叶酸水平测定三项：维生素B12；叶酸；红细胞内叶酸维生素B12和叶酸缺乏可导致营养性和巨幼细 胞性贫血，如得不到及时纠正，可导致不可逆性 神经系统损伤，妊娠期血清维生素B12和叶酸水 平低下可导致胎儿神经管缺损 105 血清1ML 24小时 特异?人绒毛膜促性腺激素（?-HCG）早孕、异位妊娠、女性生殖系统肿瘤及绒癌术后 随访指标：睾丸肿瘤等40 血清1ML 24小时