基因工程综合实训

实习总结报告

为期两周的基因工程综合实训已经结束，实习过程中，在老师的悉心教导和同学们的密切配合下，遇到困难协商解决，整个实习过程格外井然有序。通过这次集中性的基因工程实训，使我们掌握了基因工程的相关常规一起的使用，熟悉基因工程上有技术和下游技术的衔接及相关分析技术，加深了我们队理论知识的进一步掌握和巩固，加深对基本理论和规律的认识，培养了我们的科学思维能力、实验设计能力、科研协作能力、独立分析解决问题能力，严谨的科学态度和精益求精的科学作风，同时，使我们在理论学习掌握后，能独立解决试验中遇到的一些问题，同时培养学生动手动脑的能力，掌握实验的基本技能，达到触类旁通，解决问题的目的。

本次实验以基因工程、分析生物学研究多常用和必须的技术，包括治理的分离提纯、电泳、DNA酶切重组、PCR、亚克隆、表达等。实验技术的训练从试剂配制到实验操作，从核酸到蛋白，从原核生物（大肠杆菌）到真核生物（酵母），只是涵盖了基因工程的上游和下游技术，具有巩固知识和训练能力的意义。实验材料采用穿梭致力为主要表达载体，利用PCR扩增技术获得外源基因，将之连接入载体，继而在大肠杆菌里大量复制，获得足够量的重组质粒。提取到一定量的质粒后，转入酵母细胞进行真核分泌表达，表达产物分泌入培养液中，含表达物的上清液采用SDS-PAGE电泳检测，进行表达产物的活性测试。

实习第一天，我们进行了仪器操作培训，试剂的配置，灭菌和酵母划线培养。其中，仪器设备操作的学习包括移液器、PCR仪、电泳仪、水平电泳槽、恒温箱、摇床、离心机、制冰机、核酸干燥仪、水浴锅、接种环、分光光度计、垂直电泳槽、烧杯、上样器、酶标仪。96孔板PCR管等。

实习第二天，我们进行了多聚酶链式反应（PCR），电泳，酶切，含载体的DH5α扩大培养。

实习第三天，我们进行了提质粒，酶切，连接，挑酵母菌培养过夜。

实习第四天，我们进行了连接产物转化大肠杆菌。

实习第五天，我们进行了酵母感受态的制备及转化。

实习第六天，我们进行了提取重组质粒，酶切鉴定。

实习第七天，我们进行了挑酵母单克隆过夜培养。

实习第八天，我们进行了放大培养，表达，制备SDS-PAGE胶。

实习第九天，我们进行了收菌，SDS-PAGE电泳。

实习第十天，总结本次实训。

本次实验虽然有成功也有失败，但是在实验过程中我们学到了很多。实验让我们体会到了理论与实践相结合是一件多么不容易的事，要想保证做出理想的理论化的结果，即使在书本中一句简简单单的证实，都必须认真做好每一步，付出加倍的努力，还要怀着一颗积极的心态去完成每一个环节，不能想当然得去做实验。此外，实验中的一些细节一定不能忽略，我们最终的重大错误，往往是因为一个小小的

细节而酿成的。总结实验整个过程，我体会到，要想做好一件事，必须全身心的投入其中，认真应对每一个环节。做实验前要做好预习，明白每一个步骤以及每一步的作用，宏观的把握，这样才能保证在实验时不盲目，有一个清晰的思路；实验过程中一定要注意细节，做实验就如同做科学研究，是一个十分严谨的工作，我们必须打起十二分的精神，努力做到百分之百的正确率；合作精神。小组成员只有相互协作，相互提醒才能确保实验的正确性和高效性。

最后，感谢唐建洲老师、陈建荣老师、瞿符发老师对我们实验的教学与指导，让我们通过基因工程的实验巩固了基因工程课堂教授的理论知识。感谢老师耐心讲解与不厌其烦的教给我们各种实验所需仪器设备的使用方法，陪我们大家一起早起晚归，其认真的态度也感染了我们大家。

裴若冰

2013052227