分子生物学 杨建雄
第9单元核酸的生物合成
（一）名词解释
1.半保留复制；
2.冈崎片段；
3.复制体；
4.编码链；
5.内含子；
6.外显子（exon）。（二）填空题
1.DNA复制时，连续合成的链称为前导链；不连续合成的链称为后随链。
2.DNA合成的原料是四种脱氧核苷三磷酸；复制中所需要的引物是 RNA 。
3.DNA合成时，先由引物酶合成 RNA引物，再由 DNA聚合酶3 在其3′端合成DNA链，然后由 DNA聚合酶1 切除引物并填补空隙，最后由 DNA连接酶连接成完整的链。
4.细菌的DNA连接酶以 NAD 为能量来源，动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶以ATP 为能源。
5.大肠杆菌RNA聚合酶的全酶由α2ββ′σ组成，其核心酶的组成为α2ββ
6.RNA转录过程中识别转录启动子的是因子，协助识别转录终止部位的是
因子。
7.真核细胞mRNA合成后的成熟过程包括、、、。
8.遗传信息由RNA传递到的过程称为逆转录，由催化。
(三) 选择题（在备选答案中选出1个或多个正确答案）
1．DNA复制时，下列哪一种酶是不需要的
A．DNA指导的DNA聚合酶 B．DNA连接酶 C．拓朴异构酶 D．解链酶
E．限制性内切酶
2.DNA复制中的引物是
A．由DNA为模板合成的DNA片段 B．由RNA为模板合成的RNA片段
C．由DNA为模板合成的RNA片段 D．由RNA为模板合成的RNA片段
E．引物仍存在于复制完成的DNA链中
3.DNA复制时，子链的合成是
A.一条链5′→3′，另一条链3′→5′ B．两条链均为3′→5′
C．两条链均为5′→3′ D．两条链均为连续合成 E．两条链均为不连续合成
4.在E.coli细胞中DNA聚合酶Ⅰ的作用主要是
A. DNA复制
B. E.coliDNA合成的起始
C. 切除RNA引物
D. 冈崎片段的连接
5.需要DNA连接酶参与的过程有
A．DNA复制B．DNA体外重组C．DNA损伤的切除修复D．RNA逆转录
6.DNA损伤的光修复作用是一种高度专一的修复方式，它只作用于紫外线引起的
A.嘧啶二聚体
B. 嘌呤二聚体
C.嘧啶-嘌呤二聚体
D.为两个单独的嘧啶碱基
7.真核细胞RNA聚合酶Ⅱ催化合成的是
A．18SRNA B．mRNA C．tRNA D．5SRNA E．rRNA
8.转录指下列哪一过程
A. 以RNA为模板合成DNA
B. 以DNA为模板合成RNA
C. 以RNA为模板合成蛋白质
D. 以DNA为模板合成DNA
9.hnRNA是
A.存在于细胞核内的tRNA前体
B.存在于细胞核内的mRNA前体
C.存在于细胞核内的rRNA前体
D.存在于细胞核内的snRNA前体
10.基因有两条链,与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做
A. 有义链
B. 反义链
C. 重链
D. cDNA链
11.下列关于逆转录酶的叙述哪一个是错误的
A.它以RNA为模板指导DNA的合成
B.它也可以DNA为模板指导DNA的合成
C.它具有RNase H活性
D.逆转录酶的作用不需要引物
（四）判断题
1.在E.coli细胞和真核细胞中都是由DNA聚合酶Ⅰ切除RNA引物。
2.逆转录酶催化RNA指导的DNA合成不需要RNA引物。
3.RNA病毒不含DNA基因组，根据中心法则它必须先进行反转录，才能复制和增殖。
4.原核细胞和真核细胞的RNA聚合酶都能够直接识别启动子。
5.大肠杆菌染色体DNA由两条链组成，其中一条链充当模板链，另外一条链充当编码链。（五）分析和计算题
1.若使15N标记的大肠杆菌在14N培养基中生长三代，提取DNA，并用平衡沉降法测定DNA密度，其14N-DNA分子与14N－15N杂合DNA分子之比应为多少？
2.真核生物DNA聚合酶有哪几种？它们的主要功能是什么？
3.真核细胞中有几种RNA聚合酶？它们的主要功能是什么？
4.真核生物三类启动子各有何结构特点？
第10单元蛋白质的生物合成
（一）名词解释
1.遗传密码；
2.摆动假说；
3.SD序列；
4.信号肽；
5.多聚核糖体。
（二）填空题
1.反密码子第位碱基和密码子第碱基的配对允许有一定的摆动，称为变偶性。
2.在原核细胞翻译起始时，小亚基16SrRNA的3′端与mRNA5′端的之间互补配对，确定读码框架，fMet- tRNA f占据核糖体的位置。
3.细胞内多肽链合成的方向是从端到端，而阅读mRNA的方向是从
端到端。
4.在形成氨酰- tRNA时，由氨基酸的基与tRNA3′末端的基形成酯键。为保证蛋白质合成的正确性，氨酰tRNA合成酶除了对特定氨基酸有很强的之外，还能将“错误”氨基酸从氨酰化-tRNA复合物上下来。
5.转肽酶催化生成的化学键是，该酶还具有活性。
6.肽链延伸包括：进位、、和。
7.翻译延长阶段的进位，是指进入位。翻译延长阶段的转位是指
与做相对运动。
8.体内大多数蛋白质形成正确的构象需要的帮助，某些蛋白质的折叠还需要
互换酶和异构酶的催化。
（三）选择题（在备选答案中选出1个或多个正确答案）
1.多肽链的氨基酸序列取决于
A．tRNA B. 18S rRNA C. 28S rRNA D．mRNA E. 氨基酰-mRNA合成酶
2.密码GGC的对应反密码子是（中科院-中国科技大学2000年考研题）
A．GCC B. CCG C. CCC D. CGC E. GGC
3.关于密码子，错误的叙述是
A．每一密码子代表一种氨基酸 B. 某些密码子不代表氨基酸
C．一种氨基酸只有一种密码子 D. 甲硫氨酸只有一种密码子
E. 密码子有种族特异性
4.一个N端为丙氨酸的20肽，其开放的阅读框架至少应该由多少个核苷酸残基组成？
A．60个 B. 63个 C. 66个 D. 57个 E. 69个
5.氨基酰- tRNA中，tRNA与氨基酸的结合键是
A．盐键 B. 磷酸二酯键 C. 肽键 D. 糖苷键 E. 酯键
6.原核生物和真核生物翻译起始不同之处
A．真核生物的Shine-Dalgarno序列使mRNA与核糖体结合B．真核生物帽子结合蛋白是翻译起始因子之一 C．IF 比eIF种类多 D．原核生物和真核生物使用不同起始密码E．原核生物有TATAAT作为翻译起始序列，真核生物则是TATA
7.关于核蛋白体转肽酶，错误的叙述是
A．转肽不需要GTP B. 转肽不需要ATP C．活性中心在小亚基
D. 活性中心在大亚基 E．活性中心与rRNA有关
8.一个氨基酸参入多肽链，需要
A．两个ATP分子 B．一个ATP分子，两个GTP分子
C．一个ATP分子，一个GTP分子 D．两个ATP分子，一个GTP分子
E．两个GTP分子
9.信号肽段的作用是
A．指导DNA合成的启动 B．指导多肽链糖基化 C．引导多肽进入内质网D．指导RNA合成的启动 E．指导蛋白质合成的启动
10.多肽链合成后，其Ser可
A．乙酰化 B．糖基化 C．磷酸化 D．甲基化 E．硫酸化
11.蛋白质合成后加工不包括
A．蛋白质的磷酸化 B．信号肽的切除 C．蛋白质的糖基化
D．酶的构像变化 E．蛋白质的乙酰化
12.以下哪一种抑制剂只能抑制真核生物的蛋白质合成
A．氯霉素 B. 红霉素 C．放线菌酮 D．嘌呤霉素 E．四环素
（四）判断题
1．若1个氨基酸有3个遗传密码，则这3个遗传密码的前两个核苷酸通常是相同的。
2．由于遗传密码的通用性，用原核生物表达真核基因不存在技术障碍。表达出的蛋白质通常是有功能的。
3.氨酰-tRNA合成酶可以通过合成反应的逆反应切除误载的氨基酸。
4.所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在tRNA末端核糖的3ˊ-羟基上。
5.在核糖体上形成肽链所需的能量，由水解GTP来提供。
6.生物合成蛋白质时，A 位的氨基酸转移到P位，使P位的肽链延长，A 位空载的-tRNA 随后便脱落。
7.蛋白质能够折叠成何种三维结构，主要是由分子伴侣决定的。
（五）分折与计算题
1．论述遗传密码的特点。
2.如果mRNA上的阅读框已被确定，它将只编码一种多肽的氨基酸顺序。从一蛋白质的已知氨基酸顺序，是否能确定唯一的一种mRNA的核苷酸序列？为什么？
3.如果E.Coli 染色体DNA的75%可用来编码蛋白质，假定蛋白质的平均相对分子质量为60000，以三个碱基编码一个氨基酸计算，（1）若该染色体DNA大约能编码2000种蛋白质，求该染色体DNA的长度？（2）该染色体DNA的相对分子质量大约是多少？（氨基酸残
基的平均相对分子质量是120，核苷酸对的平均相对分子质量是640）。
4.原核生物与真核生物翻译起始阶段有何异同？
5.简述信号肽假说的基本内容。
6.肽链合成后的加工修饰有哪些途径？
第11单元基因表达的调控和基因工程
（一）名词解释
1.操纵子；
2.启动子；
3.增强子；
4.衰减子；
5.反式作用因子；
6.降解物基因活化蛋白；
7.克隆技术；
8.限制性核酸内切酶；
9.基因组DNA文库； 10. cDNA文库。（二）填充题
1．正调控和负调控是基因表达的两种最基本的调节形式，其中原核细胞常用模式，而真核细胞常用模式。
2．在原核细胞中，由同一调控区控制的一群功能相关的结构基因组成一个基因表达调控单位，称为，其调控区包括基因和基因。
3.有些基因的表达较少受环境的影响，在一个生物体的几乎所有细胞中持续表达，因此被称为；另有一些基因表达极易受环境的影响，在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因是可的基因，相反，如果基因对环境信号应答时被抑制，这种基因是可的基因。
4.在基因重组技术中，切割DNA用，连接DNA用。
5.除噬菌体外，和也是分子克隆的常用载体。
6.用动物病毒DNA改造的基因载体有和。用于植物基因工程的常用载体是。
7.将重组质粒导入细菌称，将噬菌体DNA转入细菌称。
8.Southern印迹法、Northern印迹法和Western印迹法是分别用于研究、和转移和------鉴定的几种常规技术。
（三）选择题（在备选答案中选出1个或多个正确答案）
1．一个操纵子通常含有
A.一个启动序列和一个编码基因
B.一个启动序列和数个编码基因
C.数个启动序列和一个编码基因
D.数个启动序列和数个编码基因
E两个启动序列和数个编码基因
2．有关操纵子学说的论述，正确的是
A.操纵子调控系统是真核生物基因调控的主要方式
B.操纵子调控系统是原核生物基因调控的主要方式
C.操纵子调控系统由调节基因、操纵基因、启动子和结构基因组成
D.诱导物与阻遏蛋白结合启动转录
E.诱导物与启动子结合而启动转录
3．转录因子是
A.调节DNA结合活性的小分子代谢效应物
B.调节转录延伸速度的蛋白质
C.调节转录起始速度的蛋白质
D.调节转录产物分解速度的蛋白质
E.促进转录产物加工的蛋白质
4．阻遏蛋白（阻抑蛋白）识别操纵子中的
A.启动基因
B.结构基因
C.操纵基因
D.内含子
E.调节基因
5.在下列哪种情况下，乳糖操纵子的转录活性最高
A.高乳糖，低葡萄糖
B.高乳糖，高葡萄糖
C.低乳糖，低葡萄糖
D.低乳糖，高葡萄糖
E.不一定
6.顺式作用元件是指
A.基因的5ˊ侧翼序列
B.基因的3ˊ侧翼序列
C.基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列
D.基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列以外的序列
E.具有转录调节功能的特异DNA序列
7.反式作用因子是指
A.具有激活功能的调节蛋白
B.具有抑制功能的调节蛋白
C.对自身基因具有激活功能的调节蛋白
D.对另一基因具有激活功能的调节蛋白
E.对另一基因有调节功能的蛋白质因子
8.下列关于限制性内切酶的叙述哪一项是错误的
A.它能识别DNA特定的碱基顺序，并在特定的位点切断DNA
B.切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构
C.它能专一性降解经甲基化修饰的DNA
D.是重组DNA的重要工具酶
E.主要从细菌中获得
9.基因工程中，不常用到的酶是
A.限制性核酸内切酶
B.DNA
C.DNA解链酶
D.DNA连接酶
E.反转录酶
10下列哪项不能作为表达载体导入真核细胞的方法？
A.磷酸钙转染
B.电穿孔
C.脂质体转染
D.氯化钙转染
E.显微注射
11.重组体的筛选方法有
A.抗药标志筛选
B.标记补救
C.分子杂交
D.免疫化学
E.酶联免疫检测
12.cDNA是指
A.在体内合成的与病毒DNA或RNA互补的DNA
B.在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA
C.在体外经转录合成的与DNA互补的RNA
D.在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA
E.在体内经转录合成的与DNA互补的RNA
13．建cDNA文库时，首先需分离细胞的
A.染色体DNA
B.线粒体DNA
C.总mRNA
D.tRNA
E.rRNA
（四）判断题
1.高等真核生物的大部分DNA是不为蛋白质编码的。
2.大多数管家基因编码低丰度的mRNA.
3.乳糖可以诱导乳糖操纵子的表达，所以乳糖对乳糖操纵子的调控属于正调控系统。
4.某些蛋白质既可以作为阻遏蛋白又可以作为激活蛋白参与基因表达的调控。
5.准备用原核生物表达真核基因时，最好通过cDNA获取目的基因。
6.用原核生物表达真核生物的糖蛋白，其表达产物不会有正常的生物学功能。
7.Ti质粒可以随土壤农杆菌进入植物细胞。
8.用λ噬菌体作克隆载体时，外源DNA片断越小，克隆的成功率越高。
9.基因克隆选择的宿主细胞必须无限制性核酸内切酶。
10.采用蓝白斑选择法时，蓝色菌落或噬菌斑是含有重组载体的克隆。
（五）分析与计算题
1.简述操纵子的基本结构。
2.举例说明基因表达的诱导与阻遏，正调控与负调控。
3.概述原核生物基因表达调控的特点。
4.概述真核生物基因组的特点。
5.概述真核生物基因表达调控的特点。
6.简答真核生物基因表达的调控方式。
7.常用的限制性核酸内切酶有哪些特点？
8.在基因克隆中，目的基因有哪些主要来源？
9.什么是cDNA文库？cDNA文库与基因组文库有何差别？
10.用于DNA重组的载体应具备什么条件？常用的载体有哪一些？各有何特点？
11.简述连接目的基因与载体的主要方法？
12.概述筛选和鉴定DNA重组体的常用方法。