第十一章 动物实验设计与数据处理

《细胞生物学》题库+第十一章+细胞增殖及其调控

《细胞生物学》题库第十一章细胞增殖及其调控 一、名词解释 1.MPF 2.细胞周期蛋白 3.APC 4.复制起点识别复合体 5.DNA复制执照因子学说 6.G0期细胞 7.癌基因 8.长因子 9.细胞周期10.联会复合体11.抑癌基因 二、选择题 1.G1期PCC(染色体超前凝集)为( ),S期PCC为( ),G2期PCC为( )。 A.粉末状,细单线状,双线状 B.细单线状,粉末状,双线状 C.双线状,细单线状,粉末状 D.双线状,粉末状,细单线状 2.周期蛋白中有一段相当保守的含100左右氨基酸序列,称为。 A.破坏框 B.PEST序列 C.周期蛋白框 D.PSTAIRE序列 3.破坏框主要存在于周期蛋白分子中。 A.G1期 B.S期 C.G2期 D.M期 4.G1中序列,与G1期周期蛋白的更新有关。 A.PEST序列 B.PSTAIRE序列 C.破坏框 D.周期蛋白框 5.CDK激酶结构域中,有一段保守序列,称( ),此序列与( )结合有关。 A.信号肽,破坏框 B.信号肽,周期蛋白 C.PSTAIRE,周期蛋白 D.PSTAIRE,破坏框 6.APC活性受到监控。 A.纺锤体检验点 B.检验点 C.Mad2 D.cdc2o 7.S期起始的关键因子是。 A.cyclinA B.cyclinB C.cyclinD D.cyclinE 8.染色质在期获得DNA复制执照因子。 A.G1 B.M C.S D.G2 9.复制起点识别复合体的蛋白质为。 A.Acp B.Orc C.Mcm D.Pcc 10.第一个被分离出来的cdc基因是( ),又称( )。 A.cdc2 CDK2 B.cdc1 CDK1 C.cdc2 CDK1 D.cdc1 CDK2 11.RNA和微管蛋白的合成发生在。 A.G1期 B.S期 C.G2期 D.M期 E.G0期 12.有丝分裂器的形成是在。 A.间期 B.前期 C.中期 D.后期 E.末期 13.对药物的作用相对不敏感的时期是。 A.G1期 B.S期 C.M期 D.G2期 E.G0期 14.CyclinA的合成发生在。 A.G1期向S期转变的过程中 B.S期向G2期转变的过程中 C.G2期向M期转变的过程中 D.M期向G2期转变过程中 E.S期 15.下列有关成熟促进因子(MPF)的叙述哪一条是错误的。 A.MPF是一种在G2期形成,能促进M期启动的调控因子 B.MPF广泛存在于从酵母到哺乳动物的细胞中,由P34cdc2和cyclinB两种蛋白组成 C.MPF是一种蛋白激酶在细胞从G2期进入M起起重要作用 D.MPF在整个细胞周期中表达量较为恒定 E.在G2/M期,MPF活性达到高峰 16.细胞周期蛋白依赖激酶是指。 A.cyclinA B.cyclinB C.cyclinC D.cyclinD E.cdkl等17.可作为MPF成分之一的是。 A.cyclinA B.cyclinB C.cyclinC D.cyclinD E.ldkl等 18.cyclinD可与cdk4、5、6结合作用于。 A.G1期向S期转变过程中 B.S期向G2期的转变过程中 C.G2期向M期转变过程中 D.M期向G1期转变的过程中 E.S期 19.在细胞同步化的实验中,秋水仙素是常用的一种试剂,其作用机制是。 A.抑制了二氢叶酸还原酶的活性 B.促进胸苷的合成 C.促进三磷酸腺苷的合成 D.抑制仿垂体微管的聚合 E.抑制中心粒的复制 20.在细胞周期中,哪一时期最适合研究染色体形态结构。 A.间期 B.前期 C.中期 D.后期 E.末期 三、填空题

实验动物房的设计

实验动物房的设计 根据实验动物微生物控制标准,可将实验动物分为四级: 一级普通动物(CV),系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和极少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病,在实验动物饲养和繁殖时,要采取一定的措施,应保证其用于测试的结果具有反应的重现性(即无论不同的操作人员,在不同的时间,用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验,都能获得几乎相同的结果)。 二级清洁动物(CL),要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物(SPF),要求到二级外,还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法,可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物(GF)或栖生动物(GN),无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。栖生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 在病理学检查上,四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康,主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外,显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。 四级不含二、三级微生物病原的病变,脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。 综合上述,对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。 无菌、已知菌以及无特殊病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养,这种环境,目前国际上通用称为屏障环境,即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开,就如胎鼠在母鼠子宫内一样。这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等五大类。 A 隔离系统是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统,用于饲养无菌动物和栖生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度,但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。 B 屏障系统把10000~100000级左右的无菌洁净室作为饲养室,主要用于无特殊病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理,如淋浴、换贴身衣服等。 C 半屏障系统放宽对屏障系统中人及物出入房间时的管理,平面组成大致与屏障系统相同。 D 层流架系统笼具放在洁净的水平层流空气中。常用于小规模饲养,但在一般房间进行饲

2019.04.19. 医疗器械动物实验研究技术审查指导原则 第一部分:决策原则 (2019年第18号)

医疗器械动物实验研究技术审查指导原则第一部分:决策原则 (2019年第18号) 2019-04-19 10:00 医疗器械动物实验研究技术审查指导原则第一部分:决策原则(2019年第18号) 附件1 医疗器械动物实验研究 技术审查指导原则第一部分:决策原则 一、前言 医疗器械安全性和有效性评价研究应采用科学、合理的评价方法,其中动物实验是重要手段之一,其属于产品设计开发中的重要研究,可为产品设计定型提供相应的证据支持;若需开展临床试验,可为医疗器械能否用于人体研究提供支持,降低临床试验受试者及使用者的风险以及为临床试验设计提供参考。 但并不是所有医疗器械均需要通过动物实验验证产品安全性和有效性。为了对开展动物实验的必要性判定提供指导,特制订本原则。 本原则为医疗器械动物实验研究技术审查指导原则系列中的第一部分,为判定是否开展医疗器械动物实验的决策原则,关于动物实验设计等其他方面的内容请参见其他部分指导原则。 本原则是供申请人和技术审评人员使用的技术指导性文件,不涉及注册审批等行政事项,亦不作为法规强制执行,如有能够满足法规要求的其他方法,也可以采用,但应提供充分的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规

的前提下使用本原则。 本原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制订的,随着法规和标准的不断完善,以及科学技术的不断发展,本原则相关内容也将进行适时地调整。 二、适用范围 本原则适用于决策医疗器械是否需在活体动物上进行在体实验,不包括在非活体动物、离体组织或器官上进行的研究。 以下情况可参考本原则: (一)医疗器械申请人在设计开发阶段确定是否需要开展动物实验时; (二)医疗器械监管机构在技术审评环节评价开展动物实验的必要性时。 本原则不替代GB/T 16886系列标准等医疗器械生物学评价相关的技术文件。如通过动物实验方式评价医疗器械的生物相容性,亦应符合GB/T 16886系列标准等生物学评价相关技术文件。 如有针对特定产品的指导原则发布,则遵循相应产品的指导原则。 本原则不适用于按照医疗器械管理的体外诊断试剂。 医疗器械临床试验伦理审查时,可参考本原则中适用部分以评估临床前动物实验的必要性。 三、基本决策原则 在医疗器械设计开发阶段,决策是否开展动物实验时,建议考虑动物福利伦理原则及风险管理原则。 (一)动物福利伦理原则 申请人需遵循动物实验的“替代(Replacement)、减少(Reduction)和优化(Refinement)”原则,即3R原则。 申请人在决策是否开展动物实验前,需要特别考虑动物福利伦理,充分开展实验室研究,不宜采用动物实验替代实验室研究。 —2 —

如何设计动物实验

如何设计动物实验 一般来说,动物实验的研究工作应该明确描述,研究的目的和/或者需要验证的假说。1、选择特定动物模型的原因。2、动物种、品系、来源和类型。3、每个独立实验步骤的详细描述,包括研究设计和使用动物数量。4、数据分析所用的统计学方法。动物实验设计有重要的意义的意义1、正确的动物实验设计对提高科学研究质量、发表高水平的学术论文非常重要2、目前许多动物实验质量不高。3、一个好的实验设计,对统计学分析来说帮助很大,可以使问题变得更加容易解决4、一个不正确的实验设计,导致结果信息无用。实验设计的主要目的一是保证所测变量的任何差异是由处理造成的,而不是其他非对照变量引起;另一个目的是通过控制确定的变量在尽可能小的范围内,减少所测反应的变异性,这样对处理效应的评介更准确。我将它分为以下几个步骤 一、实验设计的最初步骤 1、查阅文献 A: 明确研究焦点B:明确方法 C:明确模型D:评估实验 2、科研方法 A:观察和描述科研中的现象B:系统的陈述问题和解释问题的假说C:利用假说预测新的观察结果D:验证假说 3、问题的陈述、研究的目标和提出假说 ?问题提出:实验将说明的问题是什么,意义 ?研究目标:总目标,特殊问题 ?假说:对每一个至少给出两个预计结果 4、动物模型的确定 ?使用系统发育水平最低的动物,符合3R原则 ?使用的动物具有研究要求种属或品系专一特点,特定研究目的必须特点?实验期间动物模型维持条件 ?动物模型来源渠道 ?最终确定动物模型前征询实验动物兽医意见 5、实验合作者的确定 ?在研究的过程中,明确应用的试验技术操作,并确认具有相应操作专长的人员来完成。 ?让合作者了解实验:设计、计算、样品收集.... ?实验动物中心可以提供动物实验有关技术操作培训及昂贵设备服务 二、动物实验设计 1、研究方案 根据问题、目标、假说,提出实验操作安排的计划并文字化 考虑的方面: A:动物模型持续时间B: 模型中预期疾病的进程(决定测定的最适时间点) C:人员参加的时间,实验花费D:给药方法 E:风险评估F:统计学方法选定 2、实验单元 可以是一个动物,也可以是一组动物群体

动物实验的设计和实施

动物实验的设计和实施 一般来说,动物实验的研究工作应该明确描述:: 研究的目的和/或者需要验证的假说。 选择特定动物模型的原因。 动物种、品系、来源和类型。 每个独立实验步骤的详细描述,包括研究设计和使用动物数量。 数据分析所用的统计学方法。 动物实验设计的意义 一、正确的动物实验设计对提高科学研究质量、发表高水平的学术论文非常重要 二、目前许多动物实验质量不高 1、动物质量不高,低级别动物给实验结果的科学性带来影响。 2、实验设计和统计学分析能力有限 三、一个好的实验设计,对统计学分析来说帮助很大,可以使问题变得更加容易解决 四、一个不正确的实验设计,导致结果信息无用。 动物实验的分类 1、确证性的实验:用一种最大可能,正确解答问题的系统方法,收集有关处理实施后动物反应的科学数据。 2、探索性的实验:为产生新的假说提供素材。 这两类实验都涉及在实验人员的控制下,对动物施加一定的处理或操作,来发现是否处理在实验对象上引起一定的反应,或者对这种反应进行定量。 3、检验性实验:是观察性的实验,用于发现科研人员不能控制的变量之间的联系。这种联系可能是暂时的也可能是长期的。 实验设计的主要目的一是保证所测变量的任何差异是由处理造成的,而不是其他非对照变量引起;另一个目的是通过控制确定的变量在尽可能小的范围内,减少所测反应的变异性,这样对处理效应的评介更准确。 动物模型应用的重要步骤 一、动物实验通常是研究某种类、品系或性别动物的生物学特性,并间接推断人或其他研究对象的相关方面。 二、3个重要方面 1、基于对研究对象和模型(候选)动物中疾病发展方面掌握的已有知识 2、进行一个或多个实验,观察模型对所实施的处理如何反应 3、考察模型实验的结果与研究对象物种的相关性 3R原则

动物实验室管理规定

动物实验室管理规定 为加强对动物实验室的规范化管理,保证实验动物质量,确保实验研究和检测结果准确可靠以及安全评价符合标准,同时为了防止人畜共患病的发生及蔓延,根据我动物实验室实际情况规定如下: 1.实验动物的管理及使用必须严格按照《实验动物管理条例》和《广东省实验动物管理条例》的有关条款执行。 2.国家对实验动物生产和使用实行许可证制度。本动物实验室(屏障环境)已获得《广东省实验动物使用许可证》,面向广大科研工作者开放。需要开展动物实验的单位和个人,可向动物实验室提出申请,经审批通过并按规定办理相关手续后,即可进入实验室进行实验动物的饲养和实验操作。 3.本办法所称实验动物,是指经人工饲养培育,遗传背景明确或者来源清楚,对其质量实行控制,用于科学研究、教学、医药、生产和检定以及其他科学实验的动物。 4.在动物实验室进行动物实验活动的人员必须严格遵守动物实验实验室各项规章制度,服从工作人员的管理和安排。 5.深圳第三人民医院实验动物管理委员会负责指导和监督实验动物工作,动物实验室具体负责动物实验的管理、监督和检查工作。 6.动物实验室的工作人员(包括管理人员、实验动物技术人员和饲养人员)必须经过正规的实验动物培训,并持有“广东省实验动物学会”颁发的《实验动物技术培训班结业证书》或相关实验动物从业人员资格证书。实验动物从业人员实行定期健康体检制度,确认无传染病(含微生物和寄生虫)和其他影响实验动物工作疾病的人员方可上岗。 7.凡申请进入动物实验室进行动物实验操作的人员(包括研究生)必须提交相关实验动物从业人员资格证书,无证人员必须参加本动物实验室举办的岗前培训,经考核合格并取得深圳第三人民医院动物实验室颁发的《实验动物上岗培训合格证》后,方可申请进入动物实验室从事动物实验操作。 8.购买实验动物必须选择有资质的实验动物生产单位,在动物进入动物实验室的同时提交《实验动物生产许可证》复印件和《实验动物质量合格证》原件。

实验动物学复习提纲

实验动物学复习提纲 1.实验动物学:实验动物学研究实验动物和动物实验的一门综合性学科。 2.实验动物:实验动物指由人工培育,来源清楚,遗传背景明确,对其携带的 微生物和寄生虫实行监控,用于生命科学研究、药品与生物制品生产和检定,以及其他科学研究的动物。 3.动物实验:研究如何利用技术手段对实验动物实施各项操作,获得科研所需 的样品、数据和结果。其中包括实验技术、实验方法、实验设备、各项实验操作规程等。 4.中医实验动物学:以中医药理论为基础,运用实验动物学的理论和方法,进 行中医药研究的实验学科。 5.AEIR:是进行生命科学实验研究所必需的四个基本条件。“A”即animal(实 验动物),“E”系equipment(设备),“I”为information(信息),“R”是reagent(试剂)。 6.3R:替代原则:要求尽可能采用低等实验动物或非实验动物,以替代高等实 验动物进行实验。 减少原则:要求尽可能减少实验动物的用量,甚至可以降低统计学要求。 优化原则:要求优化实验设计和操作,以减轻动物的痛苦。 7.5大自由:①应提供给动物满足生长发育和繁衍后代的营养食物和清洁的饮 水,使其免受饥渴。②应提供给动物适当的栖息之地和饲养场所,使其能休息和睡眠。③应提供预防动物疾病和患病后及时诊疗的措施,使其免受疾病和伤害的痛苦。④应提供给动物安静的饲养环境,无刺激动物发生应激和恐惧的场面和声音。⑤应提供给动物同类一起自由玩耍、表达天性的空间和自由。 8.实验动物的四大特点:遗传限定、微生物和寄生虫的监控特点、适宜环境和 均衡营养、应用于科学研究。 9.实验动物学在生物医学研究中的意义:①在生物学研究上,实验动物用于研 究生命现象的奥秘,从而揭示生命的本质。②在医学研究上,探讨人类疾病发生、发展、转归机制和治疗方法是生物医学的主要任务。而实验动物作为人的替身具有可控性强、操作简便、经济等特点,用于疾病机理及诊疗方法(包括药物、物理治疗与手术等)研究,特别是烈性传染病、放射病研究和新医疗器械的应用等,具有不可替代的作用。 10.实验动物的分类:包括动物学的分类(界、门、纲、目、科、属、种)和实 验动物学的分类(品种和品系)两部分。 11.品种:是人们根据不同需要而对动物进行改良、选择,即定向培育,并具有

学术规范与实验室安全 第六章答案

学术规范与实验室安全第六章答案 1.实验室生物安全的重要性包括哪些方面? 答:1.病原体从实验室泄露; 2.杀伤性生物武器的威胁; 3.基因技术的后果; 4.实验动物传播人畜共患病(自然医源性疾病); 5.与医学实验室关系密切。 2.生物危害和生物安全性分级包括那些内容? 第一级:对于人及动物的危害较轻且对于环境的危害为轻微的; 第二级:对于人及动物的危害为中等的,对于环境的危害为轻微的; 第三级:对于人及动物的危害为高度的,对于环境的危害为轻度的; 第四级:对于人及动物的危害为最高的,对于环境的危害为最高的。 3.分级防护设备的运行规范包括哪些方面? 包括:1.一级屏障:实验室生物安全防护;个体防护装备; 2.二级屏障:实验室的设计改造; 3.三级屏障:严格遵守操作程序。 4.离心机内感染性物质破裂时如何处置? 一.非封闭离心机内带有感染性物质离心管破裂具体如下(1)如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂,应关闭机器电源,让机器密闭(例如30分钟)使气溶胶沉积。如果机器停止后发现破裂,应立即将盖子盖上,并密闭(例如30分钟)。 (2) 所有操作都应戴结实的手套(如厚橡胶手套),必要时可在外面戴适当的一次性手套。当清理玻璃碎片时应当使用镊子,或用镊子夹着的棉花来进行。所有破碎的离心管、玻璃碎片、离心桶、十字轴和转子都应放在无腐蚀性的、已知对相关微生物具有杀灭活性的消毒剂内。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中,然后回收。 (3) 离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂擦拭,并再次擦拭,然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理.

二.可封闭的离心桶内离心管发生爆炸:若怀疑封闭的离心桶内有管子破裂,应在生物安全柜内打开离心桶盖子查看。确有破裂时,松开离心桶盖子,但不要打开,放入黄色垃圾袋,直接高压灭菌。或者采用化学消毒法,将离心桶和内容物放在已知对相关微生物具有杀灭活性的消毒剂内(60分钟以上)。离心杯在消毒以后应再用清水洗净后干燥。向实验室安全员报告,进行事故记录。 5.运输途中感染性物质泄漏如何处置? 1.先将污染区域隔离,无关人员撤离; 2.穿好防护装备; 3.用吸收材料覆盖泄露物质,从外围向中心倾倒适当量的消毒剂,使消毒剂与溢洒物质混合并作用30-60分钟; 4.将污染材料置于防漏、防穿透的废弃物容器中密封; 5.对溢出区域再次清洁或消毒,并消毒手套和防护衣; 6.所有处理材料和防护服都放入废弃物容器中密封; 7.向主管部门报告泄漏情况。 8.出现严重情况时要向当地疾病预防和控制中心报告。 6.各类污染物的消毒处置原则包括那些方面? 分类收集;回收利用;减量化;无公害;分散于集中处理结合。

实验动物房总体建筑设计原则SICOLAB

医学实验动物房设计(详细)SICOLAB 实验动物房总体建筑设计原则 根据国家科委《实验动物管理条例》、国家卫生部《医学实验动物管理实施细则》的具体要求,结合广西的具体情况,目前广西尚未有能够提供合格的SPF级实验动物的单位,而我所是药品检验单位,国家科委要求2000年底前药品检定应使用清洁级实验动物。因此,我所新建的实验动物中心设计的原则是以建立动物饲养繁殖和实验饲养相结合的综合基地,该工程的环境与设施要求达到SPF级标准。该中心的设计具有小规模、起点高、设计完善、布局设置合理,可使用面积大,利用率高,具有节能、节资等特点 平面布局设计加层新建的十层楼长48m,宽103m,楼层高为38m;其中十楼西侧长24m暂作普通级设施使用,十楼东侧长24m为SPF级设施即SPF级实验动物中心,十一楼为饲料加工房和空调、风机机房。SPF级实验动物中心内设置有货物电梯、淋浴室1间,2套更衣1、更衣2和风淋室,洁净物品储藏室1间,洗刷消毒室1间,清洁走廊和亚清洁走廊,隔离观察室(检疫室)1间,饲育室6间及实验室2间,平面布局采用三走廊方式,中间走廊为清洁走廊,二边走廊为亚清洁走廊,清洁真走廊与亚清洁走廊之间为饲育室和实验室。饲育室区和实验室区各走廊均有密封门严格隔开,饲育室区和实验室区分别设置有独立的更衣1、更衣2和风淋室,以便各区域的人员运行各行其道,防止交叉感染。 3 空调通风系统 31 空调系统 311 空调设计及SPF级环境设施设计的主要参数:温度:夏季24℃±2℃,冬季22℃±2℃;湿度:RH(50±10)%;光照度:不小于300~350LX,明暗比12∶12h,日光灯照明,且设紫外灭菌灯;通风:采用全新风,顶棚送风,四角回风;净化度:1万级(每立升空气中粒径大于05μm的尘埃粒子数小于或等于350个);噪音:低于50dB;氨浓度:低于20ppm;正压控制:清洁走廊、饲育室(或实验室)、亚清洁走廊、外环境的压力梯度20Pa。 312 空调系统的设计和选用空调系统是实验动物屏障设施中重要设备,主要起调温调湿作用。由于SPF级实验动物中心采用全新风,屏障系统内部与外环境之间换气量大,空调系统在运转时消耗能源相当大,因此,在设计SPF级实验动物设施时必须考虑设备的一次性投资和运转的维持费用两方面问题。我所经过大量调查,采用清华同方股份有限公司生产的FSLR60型风冷模块式冷热水机组空调2台,每台机组制冷量为66kW,输入功率为231kW。2台机组可依据使用情况自动控制十楼普通级环境(约24m2)和SPF级实验动物中心环境(约250m2)的温度和湿度。该机组具有以下优点: ①无需专用机房和水塔,使用方便 ②节省能源,降低维持费用。 ③管理方便。空调机组的工作状态及送风状态都在远程控制上显示及控制,利于使用和管理。 ④维修方便。该机组为模块式组合,可以在工作状态不断电情况下进行维修,更换元件简易,方便;且主要元件均为美国进口元件,不易损坏。 32 通风系统送风系统采用清华同方股份有限公司生产的变频风机,通过该机设置的集成模块可以调节风速和风量,节省运转费用。全新空气经空调净化箱初效、中效过滤、恒温后,由变频风机加压,通过送风管道从各室顶部中央600mm×600mm或400mm×400mm高效过滤器送入各室内、清洁走廊和亚清洁走廊等。排风系统由2台排风机(其中一台为备用机)组成,在各室四角壁及清洁走廊、亚清洁走廊与各室隔墙处均设置回风口,废气从回风口经排风管道在机房排风箱内集中外排。4 建筑室内净化装饰工程及电气设备工程 41 建筑室内净化装饰工程室内四壁墙体和吊顶顶壁均采用50mm厚保温泡沫夹心彩钢板,其外形美观,隔音、保温、阻燃、密闭性能较好。室内竖角和横角选中100铝合金圆弧。进气、排气管道位于技术杂层,室内装饰高23m,技术夹层高15m;内门均采用彩钢夹心板密封推开门,门上设置观察窗,各室内隔墙之

实验动物学名词解释打印版

1.实验用动物:广义上来说,所有用于科学研究、检测鉴定和教学示范的动物都可以称为实验动物或实验用动物(Experimental Animals),包括野生动物、经济动物、家畜家禽、警卫动物、观赏动物和实验动物。 2.实验动物(Laboratory Animals)是指经人工饲养,对其携带微生物和寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,用于科学研究、教学、生产、检定以及其它科学实验的动物。 3.实验动物学是一门研究实验动物和动物实验的综合性基础学科,具有完整的理论体系。 4. 比较医学是对不同种动物(包括实验动物和人)的基本生命现象,以及健康和疾病状态进行类比研究的科学。 5.动物福利是指动物在整个生命过程中应得到人类的保护,其基本原则是要善待动物,保证动物的健康和快乐,减少动物死亡的痛苦,死后应得到妥善处理。 6.替代(Replacement):替代是指用其它实验方法替代用哺乳类动物进行实验研究。 7.减少(Reduction):减少是指某一研究必须要使用实验动物,而又没有可靠的替代方法时,应考虑把使用动物的数量减少到实验研究目的所必需的最少数量。 8.优化(Refinement):优化是指通过改进和完善实验程序、利用先进仪器设备,减轻或避免给动物造成痛苦和不安,提高动物福利的同时,获得可靠的实验结果。 9.种(Species):是生物分类学上的基本单位,由自然选择形成。在一般情况下,同种动物能共同生活、交配、繁衍后代,而异种动物之间存在生殖隔离,即使相近种的动物交配产仔,其后代也没有繁殖能力。10.品种(stock):是种以下的非自然分类单位,由人工选择和定向培育出来的,具有某些生物学特性,能稳定遗传。 11.品系(strain):是实验动物分类学上专用名词,采用一定的交配方式繁殖且祖先明确的动物群。具有相似的外貌、独特的生物学特征和稳定的遗传特性。12.近交(inbreeding)即近亲交配。从一个动物群体中有意识地选用血缘关系比较接近的雌雄个体进行交配。近亲交配有三种形式:兄妹交配、母子交配和父女交配,最常用的形式是全同胞兄妹交配。 13.近交系(inbred strain)是指采用连续全同胞兄妹交配(brother-Sister inbreeding)20代以上而培育成的动物14.近交系的亚系分化是指一个近交系内各个分支的动物之间,已经发现或十分可能存在遗传差异的现象。 15.重组近交系(recombinant inbred strain,RI):由两个近交系杂交后,再经连续20代以上兄妹交配培育成的近交系,称为重组近交系。16.重组同类系(recombinant congenic strain,RC):由两个近交系杂交后,子代与两个亲代近交系中的一个近交系进行数次回交(通常回交2次),在不对特殊基因进行选择的前提下,再近亲交配14代以上而育成的近交系。 17.同源突变近交系(coisogenic inbred strain):指两个近交系除了在一个确定位点等位基因不同外,其它遗传基因全部相同。 18.同源导入近交系(Congenic inbred strain):是指通过杂交-互交和回交的方式将个体的一个基因导入到近交系中,由此形成一个新的近交系。这个新的近交系与原来的近交系只是在一个很小的染色体片段上的基因不同。 19.封闭群(closed colony)是指以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个种群,在不从外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上的动物群体。 20.杂交群:由两种不同的近交系杂交所繁殖的第一代杂交动物称为杂交群(Hybrid),又称为系统杂交动物,或“F1”代。 21.普通级动物(Conventional animal,简称CV动物)不带有国家标准所规定的人兽共患病病原体和动物烈性传染病病原体的动物。 22.清洁级动物(Clean animal,简称CL动物)指除普通级动物应排除的病原体外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体的实验动物。 23.无特定病原体级动物(Specific pathogen free animal,简称SPF动物)指除清洁动物应排除的病原体外,不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原体的实验动物。 24.无菌动物(Germfree animal,简称GF)指用现有的检测技术和方法在动物体内外的任何部位均无可检出一切生命体的实验动物。 25.悉生动物(Gnotobiotic animal,简称GN)又称已知菌动物,指动物体内带有明确的微生物种类的动物。 26. 哨兵动物:所谓的“哨兵动物”是指为微生物检测所设置的指示动物。哨兵动物一般采用免疫功能正常的清洁级或SPF级封闭群动物。 27.屏障环境是专门为清洁级、SPF级动物饲养和动物实验设计的环境,符合动物居住的要求。 28. 必须氨基酸:有些氨基酸动物体内不能合成,或合成量不能满足需求,必须由饲料供给,这类氨基酸称为必须氨基酸 29. 必需脂肪酸:在不饱和脂肪酸中,亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸在动物体内不能合成,必须由饲料供给,称为必需脂肪酸。 30.全价营养配合饲料是将各种饲料原料粉碎后按一定

动物实验设计

口服避孕药预防化疗对大鼠卵巢损伤的研究 研究背景 卵巢早衰(premature ovarian failure POF)系指妇女在40岁以前绝经,常表现为雌激素水平降低引起的月经紊乱、不孕、围绝经期综合征等一系列症状。POF病因复杂,目前仍不清楚,化疗远期毒副作用是其中之一。随着化学毒性药物在肿瘤及自身免疫疾病的广泛应用,其导致的性腺功能损害成为研究新热点,其中以环磷酰胺(cyclophosphamide,crx)为代表的烷化剂引起的卵巢功能损害研究较多,但其作用机制仍不清楚。一些研究显示,CTX可直接损伤卵巢颗粒细胞,并主要作用于有丝分裂活跃的卵泡,而静止的生殖细胞呈低度敏感。另有学者提出,化疗期间应用口服避孕药抑制卵泡发育,能够减少化疗对卵巢的损害,依据是化疗药物损伤卵巢的机制和口服避孕药的作用机理,即通过雌孕激素负反馈抑制下丘脑.垂体一卵巢轴,从而抑制卵泡发育,储存原始卵泡,保护卵巢储备功能,减少卵巢损伤。相关研究也证实口服避孕药能够降低及预防化疗对卵巢的损伤,促进化疗后卵巢功能甚至是生殖功能的恢复。但也有学者持不同观点,结论尚有争议。本研究旨在探讨化疗期间应用口服避孕药能否保护卵巢功能,以确定口服避孕药的有效性。 目的 本文采用阴道涂片法监测大鼠动情周期,放射免疫法和组织切片法,检测大鼠血清雌二醇(E2)水平、卵泡刺激素(FSH)水平、卵巢重量及卵泡数量,并通过统计学分析,比较实验前后各组实验指标变化,探讨口服避孕药在化疗期间有否起到保护卵巢的作用及其相关机制。 材料与方法 1.SPF级近交系雌性Wistar大白鼠,3月龄,体重1 809~2009。喂食SPF级鼠饲料及净化水,室温20℃~25℃,相对湿度450/0-.55%,每日光照12h,饲养1周熟悉环境后,每日清晨9:00行阴道细胞涂片,显微镜下观察动情周期,选用有正常动情周期的大鼠进入实验。口服避孕药(OC>.—-.达英一35(35pg炔雌醇/2mg醋酸环丙孕酮)。环磷酰胺(CTX),规格0.29x10支。 2.动物实验:75只Wistar雌性大鼠随机分为5组: ①空白对照组:不予任何药物处理; ②CTx组:负荷剂量50 mg/kg腹腔注射,之后8 mg/(kg·d)腹腔注射,连续14d; ③oc组:8.7599炔雌醇/0.5mg醋酸环丙孕酮(溶于lml生理盐水),灌胃,连续25d; ④联合治疗I组:同时给予CTX和OC,连续15d,给药方法同②、③组; ⑤联合治疗II组:先连续10d给予OC灌胃,用药剂量同③组;第11d起加用CTX,给药方法、时间及剂量同④组。3.采用阴道涂片法监测大鼠动情周期,放射免疫法测定E2、FSH浓度。所有卵巢标本均经石蜡包埋,连续切片,苏木素.伊红(HE)染色。 从实验开始到结束,各组大鼠每天行阴道涂片,并于给药结束前,每隔5天(相当于大鼠1个正常动情周期),于动情间期测定各组E2、FSH浓度;停药后第15、30天(相当于3及6个正常动情周期),测定各组E2、FSH浓度。另外,停药当天、第15、30天,分别处死各组1/3大鼠,比较卵巢重量、卵泡数量变化。 4.统计学处理采用SPSSl0.0软件包检验分析,数据以均数士标准差表示,采用的具体统计学方法有单向方差分析、重复测量、析因分析,两两比较采用SNK及LSD法,所有结果均P<0.05具有统计学意义。 数据记录与结果分析 1.各组大鼠E2、FSH浓度及动情周期变化 (1)大鼠E2、FSH行重复测量分析,分别比较各组、各时间点E2、FSH,分析差异是否有统计学意义,实验分组和时间是否有交互作用。 (2)空白对照组:于动情间期测定E2和FSH。观察阴道涂片是否呈正常大鼠的动情周期改变。 (3)CTX组:观察从给药第5天至实验结束,E2和FSH的变化情况,与同期其余4组E2、FSH分别比较,并分析计算差异是否有统计学意义。记录阴道涂片该组大鼠在给药的第几天出现持续不排卵现象,停药多少天后恢复正常动情周期。 (4)OC组:观察并比较从给药第5天至停药第15天,以及停药第30天,该组E2、FSH浓度与同期空白对照组的高低,计算差异是否有统计学意义。记录阴道涂片该组大鼠在给药的第几天出现持续不排卵现象,停药多少天后恢复正

动物心梗实验设计方案

联系个人所学专业,选取某种或某类疾病,设计相关实验的动物模型,详细描述其方法及步骤,并阐述所选动物种类和级别的理由以及该动物日常生活和实验的环境要求(包括进出该环境的顺序),实验过程中的注意事项 MicroRNA-378(miR-378)在心肌肥厚中的研究 一、实验原理: microRNA(miRNA)是一类小分子非编码单链RNA,长约22个碱基,能通过与靶mRNA3’非翻译区(3’UTR)互补配对,使其翻译受到抑制,从而在转录后水平对生物体内基因时序性表达起到精细调节作用。miRNA的表达变化与心肌肥厚的发生、发展密切相关。本实验通过异丙肾上腺素和去甲肾上腺素诱导实验动物心肌肥厚,然后用PCR技术测定心肌细胞中miRNA 的变化。 二、实验目的: 通过统计学方法观察miRNA在正常心肌细胞和心肌肥厚的心肌细胞中的差异,从而将miRNA作为诊断心肌肥厚的潜在的生物学标志。 三、实验材料及步骤:Wistar雄性大鼠30只(200~250g/只,SPF级别),异丙肾上腺素(ISO),去甲肾上腺素(NE),生理盐水。 3.1 分组及造模 3.1.1采用随机数表的方法讲30只wistar大鼠随机分成三组,每组10只,分别为对照组、ISO处理组、NE组。 3.1.2 ISO处理组:10只大鼠连续7天背部皮下注射ISO(4 mg/kg/天),制成心肌肥厚模型。 NE处理组:10只大鼠连续7天背部皮下注射NE(4 mg/kg/天),制成心肌肥厚模型。

对照组:10只大鼠同法背部皮下注射生理盐水(4 mg/kg/天),制成心肌肥厚模型。 3.2检测造模是否成功 3.2.1高频超声检测 分别于造模后第2周,称取大鼠质量,10%水合氯醛麻醉大鼠后,仰卧固定,将其胸前部剃毛,应用TOSHIBA-6000超声诊断仪,频率为7.5 MHz的探头置于其胸左侧,取径(LVEDD,LVESD)。左室射血分数(EF,%)、左室短轴缩短率(FS,%)、计算左室左室长轴切面,图像深度调至3.0 cm,由二维超声引导,将M型超声取样线置于二尖瓣腱索水平,垂直于室间隔及左室后壁,经M型超声曲线进行测量,每一超声测定值取3个连续心动周期测量均值。超声测量指标:舒张末期及收缩末期室间隔厚度(IVSTd,IVSVTs)、舒张末期及收缩末期左室后壁厚度(LVPWTd,LVPWTs)、舒张末期及收缩末期左室内质量(LVM,mg)。 3.2.2大鼠心肌质量指数的测定 称取大鼠体质量(body weight, BW),摘眼球取血备用,脱颈椎处死,快速打开胸腔取心脏,去除心房组织,分离左、右心室,生理盐水漂洗去血,用滤纸吸干表面水分,电子天平准确称取左心室质量(left ventricle weight, LVW)和全心质量(heart weight, HW)。计算左心室质量与体质量的比值(LVW/BW)、全心质量与体质量的比值(HW/BW),分别记为左心室质量指数(left ventricular weight index , LVWI)和全心质量指数(heart weight index, HWI)。 3.2.3心肌细胞横断面面积测定 每组随机取3只大鼠,取左心室中段,10%福尔马林液固定的心肌组织经乙

动物实验设计

奥扎格雷注射液治疗急性心肌梗死课题来源:自选 设计班级:2012级在职研究生 设计人员:郭红前T2012044 设计日期:2012年10月26日

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实验技术方法 (1) 随机抽样:选正常成年健康重量相近的SD大鼠100只,从造模成功的大鼠中选出 80只大鼠按体重由小变大编号后,从随机数字表中查取随机数字,依次抄录于SD大鼠编号。 (2) 实验编号与分组:先将试验大鼠称重,然后先按体重每10g为一个重量级, 从小到大排列为若干个组,随后用龙胆紫和苦味酸将大鼠进行标记,龙胆紫表示个位,苦味酸表示十位,从大鼠的左爪开始标记,记为1,随后依次将左侧腹部,左后爪,右前爪,右侧腹部,右后爪,颈部,背部,尾部记为2,3,4,5,6,7,8,9。随后得到大鼠1至80的编号,再在随机数表中查询数字并分组。 (3) 实验手术:抓取手术大鼠,观察其是否健康,如果老鼠身体状况有异,应要更换老鼠。然后在电子称上称其重量,并做好记录,根据体重严格计算麻醉剂量,采用胸部注射麻药。大约三分钟左右,大鼠出现站立不稳,醉酒样步态。四肢固定与手术台上,松紧适中,手术过程中注意观察四肢是否出现瘀血,注意按摩。此时,可用大头针刺激大鼠尾巴,如果大鼠的反应不强烈,预示着可以开始手术。首先剪除大鼠前胸区域毛,而后均匀喷洒碘伏溶液于备皮区域。开通人工呼吸,BL一410生物机能实验系统行心电监测,从左胸纵切口分层开胸。 (4) 模型复制:于胸骨左缘第4肋间用血管弯钳稍用力穿透肋间肌进入胸腔,并迅速沿肋间隙方向撑开血管钳而钝性分离肋间肌;术者用另一血管弯钳垂直肋间隙撑开肋骨,暴露心脏。在肺动脉圆锥和左心耳之间,距左冠状动脉起始2mm处穿5—0号无创伤丝线,结扎该段冠状动脉。结扎后可见左室前壁失去原有光泽,变苍白,并出现搏动减弱,心电监测可见肢体导联R波振幅明显升高,随后出现I、aVL导联ST段明显抬高,证实制作AMI模型成功。术后注射青霉素预防感染。 (5) 处理措施: 1.奥扎格雷注射液:建模成功后即刻注射奥扎格雷注射液0.2mg/100g,以后每隔24h按上述剂量注射一次。[10] 2.损伤组:建模成功后不给予任何治疗措施。 (6) 取材:将压力传感器与BL-410生物信号采集系统连接,测量并记录所需要的各项指标。经股静脉注入10%KCl 2 ml,使心脏停搏于舒张期,迅速取出心脏,用PBS液洗去血液,滤纸吸净水分后用电子天平(精确到0.1 mg)分别称取左、右心室实际重量(LV AW、RV AW),计算其与体质量(BW)的比值,得到左、右心室相对重量(LVRW、RVRW)。将心脏从心尖到心底沿长轴横切4等分,用4%多聚甲醛固定24 h后分别石蜡包埋。各取一张5 μm的病理切片作HE染色。[11]用HPIAS彩色病理图文分析系统测量每张切片的心内膜缘总长及心梗部位心内膜缘长度,计算梗死面积。 (7) 指标检测: ①心电图:于术后0h、24h、1w、2w、3w、4w,分别观察其心电图的变化。 ②HE染色切片观察:在24h、1w、2w、3w、4w,时分别从5组中每组随机取出4只大鼠处死,并迅速取出心脏,PBS液洗去血液。用甲4%多聚甲醛固定24 h后分别石蜡包埋。各取一张5 μm的病理切片作HE染色并观察。 ③血流动力学检查(SBP、DBP、LVSP、LVEDP、左室内压最大上升和下降速率) 在24h、1w、2w、3w、4w,时分别从5组中每组随机取出4只大鼠,用3%戊巴比妥钠(45 mg/kg)腹腔注射麻醉,气管切开插管,保持呼吸道通畅。分离右侧颈总动脉,插入2F聚乙烯

第十一章动物实验管理

第十一章动物实验的管理 内容提要:动物实验的管理是保证动物实验成功的可靠保证。本章主要介绍了动物实验的质量管理、实验动物选择原则、动物实验的设计,目的在于了解动物实验的管理规范和动物实验基本设计思路,提高动物实验的科学性、创新性。 关键词:保动物实验;管理;实验动物选择;试验设计 第一节 动物实验的质量管理 动物实验质量的管理,首先要了解国家、各行业部门、地方颁布实施的有关实验动物和动物实验及涉及实验环节的有关法律、法规、质量标准,在已经获得国家或地方实验动物管理机构颁发的实验动物使用许可证的单位进行实验,然后依据实验单位的特点及实验目的,制定彻实可行的质量管理办法,在生产和实验过程中加以认真严格执行,以保证动物实验的质量达到标准。 当前动物实验要求达到实验室操作规范(Good Laboratory Practice, GLP)和标准操作程序(Standard Operating Procedure, SOP)这些规范和操作对实验动物和实验室条件,工作人员素质,技术水平和操作方法都要求标准化。 一.动物实验质量管理的标准 动物实验质量管理是指在动物实验过程中由第三方即质量监督人员对动物实验全过程达到标准化所实施的职能和活动。质量监督人员在动物实验过程中,应对操作程序、方法、环境条件、受试对象、施加因素和实施途径的标准化实施连续记录和分析。进行动物实验质量管理参照的标准包括: (一) 国家、行业部门和地方已颁布的影响动物实验的标准 如化学试剂的标准、药典、实验动物的质量标准、实验环境条件的标准、仪器设备的标准、饲料饮水标准等法规性标准,有关实验动物质量的标准参见相关章节中的内容。 (二) 洁净动物实验室自行制订的各种标准 如灭菌净化标准、灭菌物品的贮存期标准、以及在国家、行业部门和地方已经颁布的标准或在此基础上本实验室自定的(高于标准)内部标准。 (三) 内部质量标准 由动物实验室会同有关技术、管理部门专家共同制定,作为暂定依据,待批

原生动物实验报告

动物实验(小鼠)的一般操作技术 一目的和要求: 通过实际操作,使学生掌握实验的一般操作方法,包括动物的抓去和固定、编号被毛的 去除给药途径麻醉采血和处死等方法。 二实验内容: 1 实验动物的抓取 2 实验动物性别、发情和配种的鉴定 3 实验动物编号的标记方法 4实验动物被毛的去除术 5 实验动物的给药途径和方法 6 实验动物的麻醉 7实验动物的采血 8 实验动物的处死方法 9 雄性不育小鼠的制备 三实验的方法 1 小鼠的抓取: 抓取时先用手将鼠尾提起,放在实验台上,轻轻拉尾,用左手拇指和食指抓住小鼠两耳 和头颈部皮肤,将鼠置于左手中心,用左手无名指和小指按住尾巴和后肢,即可做其他实验 操作作用。 2 实验动物性别、发情和配种的鉴定: 1抓取小鼠后,观察动物肛门与生殖器之间的距离。距离远的为雄性,距离性别鉴定: ○ 近的为雌性。成熟的雄性小鼠可看到小鼠睾丸的轮廓, 雌性肛门与生殖器之间有一无毛 2 动物仰卧保定,观察乳头。雄性乳头不能明显,雌性乳头明显。小沟。○ 发情鉴定(阴道分泌物检查) 材料:生理盐水,蒸馏水,显微镜,载玻片,细棉签,性成熟小鼠 原理:哺乳类雌性动物性成熟后出现情动周期,啮齿类动物在动情周期不同阶段,阴道 膜发生典型的变化。 操作: . 用左手拇指和食指固定小鼠的颈部,将小鼠倒放在手掌上,用左手小指固定小 鼠尾巴,然后用适宜大小的移液器吸取20至30ul生理盐水于小鼠阴道内反复抽吸5次。 2. 将抽吸得到的液体滴在用多聚赖氨酸预先处理过(防止脱片)的载玻片上,用移液 器吸头将其均匀涂抹开。 3. 涂片自然干燥后,用甲醇固定3分钟。 4. 待其干燥后, 先用瑞氏染液染色5至8分钟,冲洗后立即吉姆萨染液染色5至8分钟,用水漂洗后自然干 燥,待检。 5. 显微镜下观察阴道涂片的变化,见下图。附:小鼠发情周期阴道细胞的 变化小白鼠性周期4~5天,发情持续时间大约9~12小时或20小时,排卵是在发情开始后 2~3小时。 配种鉴定:○1 阴道栓法 ○2 涂片检查法。 3 小鼠编号的标记方法: 用被毛染色法做小鼠编号。用苦味酸(黄色),一般左前肢为1,左侧腹部为2,左后肢 为3,头颈部为4,背部为5,尾根部为6,右前肢为7,右腹部为8,右后肢为9。用两种颜 色可以染到99。 4 小鼠被毛去除: 给药途径和方法:有剪毛法,拔毛法,剃毛法,用硫化钠脱毛法。 5

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