电镜简介

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第一章电子显微镜的类型、结构及其原理

第一节引言

电子显微镜(electron microscope,EM)隶属于电子显微术(electron microscopy)。电镜学科可以说是数门学科完美结合的典范,电镜学科又是一门边缘学科,即各门学科互相交叉,互相渗透,是沟通不同学科的桥梁。电镜是目前应用最广泛的科学研究工具之一,是材料、半导体、地质、考古、应用物理及生物医学等几十门学科的研究利器。作为形态观察研究的工具之一,电镜具有极高的分辨率、原子级的观察尺度,是科学研究者遨游微观世界最得心应手的工具之一。特别是20世纪90年代之后的电镜,已不仅用于形态分析,而是结合了各种元素分析、离子定位、元素浓度定量分析附件的多功能型仪器,有的与计算机联机,已能进行图像分析、图像处理及远程图像传输与分析。这一系列高新技术的发展,为科学研究特别是生物医学科学研究开创了许多新的研究天地。在生物医学科学研究中,功能变化与超微结构形态变化的统一研究,即功能形态的实时研究,一直是困惑生物界的难题。因为许多生物体的功能变化多为生物体内元素、离子的浓度与位点变化所引起,要了解其功能变化,就必须知道与功能变化有关的元素、离子的浓度及位点变化。目前惟有结合了各种定位、定量分析附件的电镜(称为分析电镜),才能完成这种独特的研究。

下面介绍电镜中常提到的几个名词概念:

分辨率:指能分辨相邻两点的最小间距.人眼的分辨本领为0.2 mm; 光学显微镜的分辨本领为0.2UM;透射电子显微镜的分辨本领为0.2nm

超微结构:指用光学显微镜所不能分辨的细微形态结构以及生物大分子的结构.

超微结构的长度计量单位用纳米(nm)表示:

1mm=1000um; 1um=1000nm; 1nm=10 .

1什么叫电镜:

电镜是以电子束为光源,利用电磁透镜成像,并结合特定的机械装置和高真空技术而构成的一种精密的电子光学仪器。

2 电镜的特点:

a.分辨本领高: 分辨本领(resolution,简称分辨率)是电子显微镜最重要的参数之一,分辨本领的高低决定一台电镜的优劣。分辨本领就是能否清楚地辨认物体间细节的本领,透射电子显微镜的分辨本领为0.2nm;而光学显微镜的分辨本领为0.2UM;人眼的分辨本领为0.2mm,那么, 限制分辨本领的关键是所用光源的波长,要提高分辨本领,只有采用短波长的光源。因此,Broglie和Busch发现的短波长的电子波长特性,为一种新的显微镜——电子显微镜的诞生奠定了理论基础。

b.放大倍数大: 一台电子显微镜除有最佳分辨本领外,尚须具有合理的放大倍率,只有这样,才能依靠电镜最佳的分辨本领,以人眼区分精细的物体.放大倍数与分辨本领存在着以下关系: M=δ眼/δ镜M:放大倍数; δ眼:人眼的分辨本领; δ镜:电镜的分辨本领.电镜的放大倍数可以从几百倍到几千倍几万倍以至几十万倍范围观察.

第二节电子显微镜的类型

1.透射电子显微镜

透射电镜(transmission electron microscope,TEM)是应用最广泛的一种电子显微镜,占使用电镜的80%,其分辨率,放大倍率及各项性能比其它类型电镜高,透射电镜是用电子束照射标本,用电磁透镜收集穿透标本的电子,并放大成像,用以显示物体内部超微结构的装置.透射电镜所产生的图像是平面的.它的分辨率可达0.2 nm.放大倍数可达40—100万倍. 它要求样品极薄,因此样品必须制备成50——70nm的超薄切片。

2.扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope)SEM

扫描电子显微镜是利用细电子束在样品上逐点逐行进行扫描,收集样品产生的某种信号,对样

品表面的形态进行观察的装置.由光镜或TEM所产生的图像是平面的,而扫描电镜能观察样品表面凸凹不平的结构,得到立体的.富有真实感的图像.如:细胞表面的微绒毛.纤毛.伪足等.还可以观察冷冻断裂的组织内部结构. 扫描电子显微镜的分辨率可达0.3 nm,放大倍数可达20万倍.它主要是利用二次电子成像。扫描电镜的特点和应用如下

扫描电镜之所以能够在许多领域内得到广泛的应用,主要是扫描电镜有许多突出的优点:⑴扫描电镜能直接观察较大体积样品表面的三维立体结构,具有明显的真实感,这弥补了透射电镜的不足,因为透射电镜分辨率虽高,但样品必须是薄切片,因而只能观察物体的二维平面结构。正因为如此,所以扫描电镜在工业上应用非常广泛。

⑵放大范围很宽,可以从10倍到20万倍之间连续变化。即使在高倍观察时,也能获得足够清晰的图象。

⑶样品制备非常方便,如果是金属导电样品,直接就可以观察,如是非导电材料,只要镀上一层导电金属碳膜,就可以观察。因此,样品处理比透射电镜要简单得多。

⑷当透射电镜的放大倍数增加时,透镜的焦深和景深随之减少,而扫描电镜在放大倍数变化时焦距不变,景深也基本不变。因此,观察和照相都很方便。

⑸便于对样品进行综合分析,如果同EDX、Anger电子谱及电子衍射等仪器结合,即构成分析电镜,可在观察形态结构的同时进行化学元素的成份分析。

⑹由于扫描电镜的图象不是透镜形成的几何光学图象,而是按照信号顺序依次记录的,因此,不仅可以避免透镜成像的缺陷,而且有利于图象分析与处理,把图象信号记录在磁带或磁盘上,便于以后需要时再现或用计算机进行图象处理,进一步提高图象质量。

3. 高分辨率的扫描透射电镜(STEM)

高分辨率的扫描透射电镜是20世纪70年代初期由美国芝加哥大学首先研制出来的一种新型电镜。

其工作原理居于扫描电镜和透射电镜之间,既有扫描电镜和透射电镜的优点,又弥补了它们各自的缺陷,目前广泛使用的STEM主要分两类。

(1)超高真空的场发射式电镜利用场发射电子枪可以获得很高的亮度,可获得的分辨率为0.2—0.3nm,已接近透射电镜的分辨率。但这种场发射电子枪必须处于超高真空,真空度达13.33×10-9 pa (10-10mmHg以上),灯丝是单晶钨针尖,这是一种最具发展前途的电镜。但造价也极高。

(2)附加在透射电镜或扫描电镜上的STEM

这种STEM为附件型,一般附加在SEM或TEM上,其分辨率较低。如是透射电镜附件型, 分辨率可达1—1.5nm, 如是扫描电镜附件型分辨率一般只有4--6 nm.这种附件型STEM主要用于X射线能谱、波谱分析或电子损失谱分析,用以观察元素的分布图。

4.高压电子显微镜

高压电子显微镜通常是指加速电压为200kv以上的透射电子显微镜。首先是由法国建成的,。加速电压为1MV。高压电镜的基本原理与常规投射电镜相似,但体积却要大的多,一般相当于两三层楼房那样高,结构也很复杂。高压电镜的优点很多,其一,因为应用了超高压,所以可以获得高能电子束。常规100kv 电镜中的样品厚度一般不超过100 nm,而1000kv 高压电镜中的样品厚度可接近10um..因此,对样品制备非常有利,特别是观察难以制成超薄切片的金属样品极为方便。其二,因为高压电镜的景深很长,所以用高压电镜观察时,厚样品中不同平面的细节均可清楚地成像在同一平面上,有利于立体像的拍摄,便于获得更丰富的三维结构信息。其三,高压电镜的样品室一般为环境样品室,因而有可能观察活体生物样品,这对生物医学研究有着广阔的前景。目前已取得了一些成果,如培养细胞、血细胞方面的研究。但高压电镜价格很高,维护困难,一般只在国家级的研究中心应用。

5. 低压电子显微镜

高压电镜的电子束具有很强的穿透力,因而能使样品减少辐射损伤并能提高分辨率,但高压电镜使样品的反差明显减弱,这对生物样品大为不利。因而人们提出了使样品辐射损伤降低而反差增强的低压电镜。目前可在加速电压为3kv时获得1nm的分辨率。透射型低压电镜目前很少应用,主要是在SEM 上配置低压装置,称高分辨率低压扫描电镜

6、环境扫描电子显微镜在环境扫描电镜出现以前,电镜研究用的生物样品均要经过脱水、树脂包埋等处理,以使电镜光源——电子束在高真空中穿透样品而成像。这种研究方法观察到的生物样品结构是死的、非实时的。因而,限制了电镜在生物医学中的应用。1995年国外推出了样品室压力在666.67——1333.33Pa(5—10mmHg)常压下的环境扫描电镜,可在几乎接近常压下观察生物样品,可以观察活体生物成长发育时的超微结构变化。因而,环境扫描电镜的出现,将使电镜在生物医学研究中产生惊人的飞跃。

7、新型的电子显微镜

(1)、扫描隧道显微镜

(2)原子力显微镜这两种显微镜是开展纳米科学研究的新型的纳米级显微镜

(3)、激光扫描共聚焦显微镜

TEM透射电镜习题答案及总结

电子背散射衍射:当入射电子束在晶体样品中产生散射时,在晶体内向空间所有方向发射散射电子波。如果这些散射电子波河晶体中某一晶面之间恰好符合布拉格衍射条件将发生衍射,这就就是电子背散射衍射。 二、简答 1、透射电镜主要由几大系统构成? 各系统之间关系如何? 答:三大系统:电子光学系统,真空系统,供电系统。 其中电子光学系统就是其核心。其她系统为辅助系统。 2、照明系统的作用就是什么?它应满足什么要求? 答:照明系统由电子枪、聚光镜与相应的平移对中、倾斜调节装置组成。它的作用就是提供一束亮度高、照明孔经角小、平行度好、束流稳定的照明源。它应满足明场与暗场成像需求。 3、成像系统的主要构成及其特点、作用就是什么? 答:主要由物镜、物镜光栏、选区光栏、中间镜与投影镜组成、 1)物镜:强励磁短焦透镜(f=1-3mm),放大倍数100—300倍。 作用:形成第一幅放大像 2)物镜光栏:装在物镜背焦面,直径20—120um,无磁金属制成。 作用:a、提高像衬度,b、减小孔经角,从而减小像差。C、进行暗场成像3)选区光栏:装在物镜像平面上,直径20-400um, 作用:对样品进行微区衍射分析。 4)中间镜:弱压短透镜,长焦,放大倍数可调节0—20倍 作用a、控制电镜总放大倍数。B、成像/衍射模式选择。 5)投影镜:短焦、强磁透镜,进一步放大中间镜的像。投影镜内孔径较小,使电子束进入投影镜孔径角很小。 小孔径角有两个特点: a.景深大,改变中间镜放大倍数,使总倍数变化大,也不影响图象清晰度。 焦深长,放宽对荧光屏与底片平面严格位置要求。 4、分别说明成像操作与衍射操作时各级透镜(像平面与物平面)之间的相对位置关系,并画 出光路图。 答:如果把中间镜的物平面与物镜的像平面重合,则在荧光屏上得到一幅放大像,这就就是电子显微镜中的成像操作,如图(a)所示。如果把中间镜的物平面与物镜的后焦面重合,则在荧光屏上得到一幅电子衍射花样,这就就是电子显微镜中的电子衍射操作,如图(b)所示。

扫描电镜简述

J I A N G S U U N I V E R S I T Y 冶金工程专业硕士研究生结课论文论文题目:扫描电镜SEM分析技术综述 课程名称:Modern Material Analytic Technology 专业班级: 2015级硕士研究生 学生姓名 学号:2211505072 学院名称:材料科学与工程学院 学期: 2015-2016第一学期 完成时间: 2015年11月 30 日

扫描电镜SEM分析技术综述 摘要 扫描电子显微镜(如下图所示),简称为扫描电镜,英文缩写为SEM(Scanning Electron Microscope)。它是用细聚焦的电子束轰击样品表面,通过电子与样品相互作用产生的二次电子、背散射电子等对样品表面或断口形貌进行观察和分析。现在SEM都与能谱(EDS)组合,可以进行成分分析。所以,SEM也是显微结构分析的主要仪器,已广泛用于材料、冶金、矿物、生物学等领域。 本文主要对扫描电镜SEM进行简单介绍,分别从扫描电镜发展的历史沿革;工作原理;设备构造及功能;在冶金及金属材料分析中的应用情况;未来发展方向等几个方面来对扫描电镜分析技术进行综述。 关键词: 扫描电子显微镜二次电子背散射电子 EDS 成分分析 扫描电子显微镜

目录 一扫描电镜 (4) 1.1 近代扫描电镜的发展 (4) 1.1.1场发射扫描电镜 (4) 1.1.2 分析型扫描电镜及其附件 (5) 1.2 现代扫描电镜的发展 (6) 1.2.1低电压扫描电镜 (6) 1.2.2 低真空扫描电镜 (6) 1.2.3环境扫描电镜ESEM (7) 1.3 扫描电镜工作原理设备构造及其功能 (7) 1.3.1扫描电镜工作原理 (8) 1.3.2 扫描电镜的主要结构及功能 (9) 1.4 扫描电镜性能 (11) 1.5扫描电镜在冶金及金属材料分析中的应用 (12) 二结论 (14) 三参考文献 (14)

透射电镜实验报告

透射电镜实验报告 实验报告 课程名称电镜技术成绩姓名学号实验日期 2013.3.27 实验名称透射电子显微镜原理、结构、性能及成像方指导教师 式 一、实验目的与任务 1. 初步了解透射电镜操作过程 2. 初步掌握样品的制样方法(主要是装样过程) 3.拍摄多晶金晶体的低分辨率照片(<300000倍)和高分辨率照片(>300000 倍),并对相关几何参数、形态给予描述。用能谱分析仪对样品的成分进行分析。 二、实验基本原理 1.仪器原理 透射电子显微镜是以图像方式提供样品的检测结果,其成像的决定因素是样品对入射电子的散射,包括弹性散射和非弹性散射两个过程。样品成像时,未经散射的电子构成背景,而像的衬底取决于样品各部分对电子的不同散射特性。采用不同的实验条件可以得到不同的衬底像,透射电子显微镜不仅能显示样品显微组织的形貌,而且可以利用电子衍射效应同样获得样品晶体学信息。本次实验将演示透射电镜的透射成像方式和衍射成像方式。 (1)成像方式 电子束通过样品进入物镜,在其像面形成第一电子像,中间镜将该像放大,成像在自己的像面上,投影镜再将中间镜的像放大,在荧光屏上形成最终像。 (2)衍射方式

如果样品是晶体,它的电子衍射花样呈现在物镜后焦面上,改变中间镜电流,使其对物镜后焦面成像,该面上的电子衍射花样经中间镜和投影镜放大,在荧光屏上获得电子衍射花样的放大像。 2.仪器结构 主机主要由:照明系统、样品室、放大系统、记录系统四大部分构成。 3.透射电子显微镜的样品制备技术 4.图像观察拍照技术 透射电镜以图像提供实验结果。在观察样品之前对电子光学系统进行调查,包括电子枪及象散的消除。使仪器处于良好状态。观察过程中选合适的加速电压和电流。明场、暗场像及选区电子衍射的观察和操作方法不同,应按况选择。三、实验方法与步骤 1( 登陆计算机 2( 打开操作软件 3( 检查电镜状态 4( 装载样品 5( 插入样品杆 6( 加灯丝电流 7( 开始操作 8( 结束操作 9( 取出样品杆 10( 卸载样品 11( 刻录数据 12( 关闭操作软件 13( 退出计算机

TEM-透射电镜习题答案及总结

电子背散射衍射:当入射电子束在晶体样品中产生散射时,在晶体内向空间所有方向发射散射电子波。如果这些散射电子波河晶体中某一晶面之间恰好符合布拉格衍射条件将发生衍射,这就是电子背散射衍射。 二、简答 1、透射电镜主要由几大系统构成各系统之间关系如何 答:三大系统:电子光学系统,真空系统,供电系统。 其中电子光学系统是其核心。其他系统为辅助系统。 2、照明系统的作用是什么它应满足什么要求 答:照明系统由电子枪、聚光镜和相应的平移对中、倾斜调节装置组成。它的作用是提供一束亮度高、照明孔经角小、平行度好、束流稳定的照明源。它应满足明场和暗场成像需求。 3、成像系统的主要构成及其特点、作用是什么 答:主要由物镜、物镜光栏、选区光栏、中间镜和投影镜组成. 1)物镜:强励磁短焦透镜(f=1-3mm),放大倍数100—300倍。 作用:形成第一幅放大像 2)物镜光栏:装在物镜背焦面,直径20—120um,无磁金属制成。 作用:a.提高像衬度,b.减小孔经角,从而减小像差。C.进行暗场成像3)选区光栏:装在物镜像平面上,直径20-400um, 作用:对样品进行微区衍射分析。 4)中间镜:弱压短透镜,长焦,放大倍数可调节0—20倍 作用a.控制电镜总放大倍数。B.成像/衍射模式选择。 5)投影镜:短焦、强磁透镜,进一步放大中间镜的像。投影镜内孔径较小,使电子束进入投影镜孔径角很小。 小孔径角有两个特点: a.景深大,改变中间镜放大倍数,使总倍数变化大,也不影响图象清晰度。 焦深长,放宽对荧光屏和底片平面严格位置要求。 4、分别说明成像操作与衍射操作时各级透镜(像平面与物平面)之间的相对位置关系,并 画出光路图。 答:如果把中间镜的物平面和物镜的像平面重合,则在荧光屏上得到一幅放大像,这就是电子显微镜中的成像操作,如图(a)所示。如果把中间镜的物平面和物镜的后焦面重合,则在荧光屏上得到一幅电子衍射花样,这就是电子显微镜中的电子衍射操作,如图(b)所示。

电子显微镜简介

电子显微镜简介 人类的肉眼是认识客观世界的重要工具。但因受分辨能力的限制,在300年前光学显微镜尚未出世之前,人类对世界的认识只能停在肉眼水平。光学显微镜的诞生提供了一把金钥匙,为我们打开了微观世界知识宝库的第一道大门,从而出现了组织学、细胞学、细胞病理学等前所未有的新学科。然而,光学显微镜因受照明光波波长的限制,其分辨能力也有限。自1932年德国Max Knolls 和Ernst Ruska发明了电子显微镜,为我们打开了微观世界知识宝库的第二道大门。目前电镜不仅可以观变一般细胞的超微结构,而且还可以探讨其分子结构;从一般超微结构的定性观,走向定量分析;从透射电镜超薄切片的平面观察,进入扫描电镜三维空间的立体表面观变和元素分析,使人们的认识不断深化。 一、分辨率和放大倍数 电镜的分辨率是指分辩二点间最小距离的能力。德国理论光学家Ernst Abbe证实光学显微镜分辨率的极限为照明光源波长的一半,如照明光源的平均波长为5000A(1A=10-10m)光学显微镜分辨率的极限则为2500A(0.25μm=250nm)。电镜利用波长极短的电子束为光源,其分辨率可达2-2.5A(0.2-0.25nm),比光镜高1000倍,比肉眼高一百万倍。 二、透射电镜(transmission electron microscope)的结构与原理 (一)光学透镜与电子透镜 1.透镜:光镜以可见光作光源,经玻璃透镜(凸或凹)使光线会聚或发散,形成放大的实像或虚像。电镜则以电子束为光源。电子具有波动性和粒子性,经过电磁透镜时,在电场或磁场作用下,可以改变其前进的轨道。因而,可利用电场或磁场控制电子运动的轨迹,使之产生偏转、聚集或发散。 2.电磁透镜:根据轴对称的弯曲磁场对电子束能起聚焦的作用的原理制成。磁场范围比焦距小得多的轴对称磁场透镜称为短磁透镜。短磁透镜的焦距与磁场强度的平方呈反比。磁场强度越强,焦距越短、放大倍数越大。短磁透镜的磁场强度则与透镜励磁线圈的匝数呈反比。近代高辨率电镜透镜,在线圈的内侧有高精度加工的非常轴对称的纯铁或铁钴合金高导磁材料制成的“极靴”,线圈外包有铁壳屏罩。当线圈通过电流时,就会在极靴间隙产生轴对称磁场。这种短磁透镜的焦距等于极靴间隙宽度。“极靴”内孔越小、上下“极靴”间隙越小,透镜的放大率越大。因此,“极靴”是电镜的关键部分,对电镜的分辨率起着决定性作用。只要改变透镜线圈的是电流,就能相应地改变透镜的焦距和放大率。 (二)电镜成像原理 电子显微镜以电子束为光源。由热阴极发射的电子,在几十至几百千伏加速电压作用下,经聚光镜聚焦成束,以较高速度投射到很薄的样品上,并在与样品中的原子发生碰撞时,改变方向,产生立体角发散。散射角的大小与样品的密度和厚度有关:质量、厚度越大者,电子散射角也越大,通过的电子被样品后面小孔光栏挡住的就越多,像的亮度较暗;质量、厚

(精品)JEM2100透射电镜简易操作说明

JEM-2100 操作说明 一、合轴操作 1.照明系统合轴 (1).找亮:当打开灯丝,并且灯丝电流发射之后,应该在荧光屏上找到电子束,若打开灯丝后没有发现电子束,请进行以下操作:将放大倍数降低到10K左右,移动轨迹球,撤除所有光阑,基本上以上操作可以解决大多数没亮的情况 若仍然找不到亮,则需调整GUN TILT进行找亮 当然,也可以在用户模式下直接对GUN进行清零操作NTRL!正常情况下就能找到电子束了。

(2)灯丝像调节:放大倍数为X40K,将光斑用beam shift移动到屏幕中心,慢慢降 低灯丝电流,并且用BRIGHTNESS旋钮将光斑聚到最小,随着灯丝电流下降,可以观察到灯丝像出现。 如图所示标准的六硼化阑灯丝像是均匀对称的四瓣花型的,若发现花瓣不对称,说明灯丝偏了,需要用GUN TILT调节到对称即可。调节完毕后将灯丝电流升高到正常数值,即稍能看到一点灯丝像阴影。 (3)1、5合轴:将束斑调到SPOTSIZE 5,用beam shift 将束斑移动至屏幕中间,切换至SPOTSIZE 1 ,用gun shift将偏移的束斑移动至屏幕中间,重复此过程直到当切换SPOTSIZE1到5时束斑基本上不发生偏移即可。 (4)聚光镜消象散:观察各个束斑形状,如果发现束斑形状椭圆,则用CONDSTIG 键将束斑调圆即可。 (5)加聚光镜光阑:聚光镜光阑红点位置表示退出,其余的点的大小表示当前所加入的光阑孔大小,顺时针加入光阑至合适的孔径,一般用1号或2号光阑孔,加完后用beam shift 将光斑移动至屏幕中心,这时顺时针转动BRIGHTNESS将光斑放大到与屏幕同大,若光阑没有加正,则光斑不是均匀覆盖屏幕,即光斑补随BRIGHTNESS同心放大,此时调节光阑前端和右侧的两个旋钮使光斑圆心与屏幕同心即可。

JEOL2010透射电镜操作过程

JEM-2010 例行簡易操作步驟

TEM 例行操作(JEOL 2010 Alignment ) 儀器及真空狀態之準備動作 1. 確定SIP VACUUM < 5 X 10-5 Pa 2. 確定 SF6氣壓 3. FILAMENT ON 4. 升壓加200KV 5. 檢查試片位置是否歸零 6. 確定D V值為 +0 (一) 電子槍線圈傾斜校準(Gun tilt, 在FEG 時為Anode wobbler) 1.試片移開螢幕,倍率調至15K。 2.Spot size 選用1,調整brightness鈕,將電子束縮為最小亮點,以Gun shift X,Y將亮點移至 螢幕中央。 (二) 電子槍偏移校準(Beam shift) 1.倍率仍設為15K ,Spot size換至3(or 5)。 2.以brightness鈕將電子束縮至最小,以Beam shift 將電子束移至正中心。 3. Spot size換回1 ,以Gun shift X,Y調整,將電子束移至正中心。 4.重覆1、2、3 步驟,直到不論Spot size 1或Spot size 3(或5)之電子束皆在螢幕正中心為止。 (三) 飽和電流校準(Current density saturation, 建議以法2及法3作校正) 法1:(正規但不建議:一般初學者常會因為不正常操作,導致電流值過大而減短燈絲壽命) 1. 先將Filament值降到零,從小Filament值開始調起,再慢慢加大電流值。 2. 當螢幕上有不對稱的燈絲投影形狀時,調整bias使燈絲在螢幕上呈現對稱的形狀,此時燈絲 之電流為趨近飽和狀態。

最新北京大学透射电镜F20与F30-操作流程详细步骤整理--邓玉豪-1220

精品文档 精品文档北京大学透射电镜F20与F30 操作流程详细步骤整理 一.登陆检查 1.登陆账户用户名和密码。 2.检查之前的实验记录本,有异常请汇报。 3.检查电镜状态,CCD是开的(绿灯亮),左边屏幕三 个窗口,右边屏幕一个窗口。打开左边屏幕窗口 vacuum overview,菜单内GUN=1,COLUMN=6-12, CAMERA<40。GUN\COLUMN\ CAMERA背景为浅绿色, COL VALVES COLSED为黄色,其他的灰色。电压300KV, OPERATE为黄色,EXTRACTION VOLTAGE=38000-45000V,电流为30-155uA。如果 COLUMN<30,加液氮。盖好黑色挡板,操作台上弄好 毛巾。等待10分钟再操作电镜。 二.样品插入 1.检查COL VALVES COLSED(黄色)是关闭的,Turbo on 为灰色,将样品杆位置归零(Search-stage-holder)。 加液氮,液氮一般使用时间3—4小时。 2.样品杆正面是平的,注意用销子固定好。装样品时将 微栅正面朝下放置。然后盖上固定夹子。旋转180度 到背面,轻敲样品杆,确认样品牢固不掉。切忌不要 触碰黄色金属部分! 3.确认COLUMN<12,样品杆位置归零。确认红色指示 灯不亮。分子泵是关着的。首先接通电缆插座,然后 点击电脑相应的驱动,先回答问题。然后将限位针对 准CLOSE标线插入,插不动了停止,红灯亮,分子泵 开。打开抽真空示意图→Vacuum Overview,开始抽真 空,两个3min。插入过程中切忌转动样品杆。红灯亮 时不可以插拔样品杆。 4.红灯熄灭后,立即绕轴逆时针旋转至OPEN线,让销 钉对准小孔,插入样品杆至最里面。确保到位。三.样品观察 1.将上下联通,SETUP-COLUMN真空<12,开启COL VALVES,如果储气罐满了,会先抽储气罐应该可以观 察到束斑了。关灯。 2.聚光镜对中和消色散:左边屏幕进入stigmater,按 condenser,用左右多功能钮,将光斑调圆,按象散键, 退出调整。用INTENSITY汇聚光斑,将其平移到荧光 屏中心。按BRIGHTNESS顺时针转散电子束,用聚光 镜前、左旋钮对中,同心圆。反复操作这一步骤。(调 整光斑大小,最后观察得到一个同心圆。) 3.粗调样品高度,先找到需要观察的样品,在10K以上放 大倍数,用INTENSITY调节照明,到样品最透明为止。 放入小聚焦荧光屏,插入针头调节目镜,聚焦钮汇聚,2-8万倍聚焦(正交)步长为3-4,10万以上步长为1-2。 记录DEFOC的数值,在SETUP-SEARCH-STAGE-SET,Z值中填写DEFOC的数值,点击GOTO,再按EUCENTRIC HIGH FOCUS。找到样品记录位置,以免丢失。 4.拍照时的注意事项:插入CCD时,小心腿不要碰到 CCD。光斑要大,如果聚焦太小,光太强容易损坏CCD。 不用的时候一定要关闭。拍照倍数要在M模式下,不 要在LM下。不用CCD时,一定关闭CCD。L2翻起。 其中F20的CCD可以进行视频录制。 5.踩带轴:(1)、2,6合轴,调焦。(2)、86000X, 找到薄区且带有特点易记的区域(踩带轴过程中样品 会动,这样便于识别出自己感兴趣的区域)。(3)、 将光斑汇聚到一点。(4)、按diffraction,寻找菊池 线。菊池线汇聚的焦点一般为一正带轴,菊池线汇聚 数目越多,晶带指数越低。再按diffraction,散开光 斑。用左键盘左上角四个按钮调节样品位置,不断按 diffraction查看带轴是否踩正。不断调节,直至踩正, 踩正后的衍射斑点中心在屏幕中心小黑点处,并且周 围斑点亮度应对称。 6.物镜象散调节(看高分辨的时候需要调节好象散): 找到样品的非晶区域,放大到500Kx,用CCD采集显 微像,打开实时FFT,调节聚焦观察圆斑变化,打开 stigmater菜单,按OBJECTIVE。用多功能钮调整成圆 形,再调节聚焦,观察是否为圆形。关闭象散窗口。 象散需要在高分辨倍数调节,例如500Kx。 7.衍射图像:选区衍射的面积约200nm,如果过小的样 品或者小的晶体混在一起难以做出好的选取衍射图 案。(移出选区光阑,选区光阑3为800nm,选区光 阑4为200nm。)选定感兴趣的区域,调整高度和聚 焦,放大倍数在100Kx左右(加入选区光阑),用 INTENSITY散开电子,按DIFFRACTION,得到衍射花 样,调节INTENSITY观察方向。调节AB将衍射花样调 整到中心(左上角A增大,左下角B增大)。电子衍 A+ B+

扫描电镜实验报告doc

扫描电镜实验报告 篇一:扫描电镜实验报告 扫描电镜实验报告 班级:材化11学号: 41164049 姓名:李彦杰日期: XX 05 16 一、实验目的 1. 了解扫描电镜的构造及工作原理; 2. 扫描电镜的样品制备; 3. 利用二次电子像对纤维纵向形貌进行观察; 4. 了解背散射电子像的应用。 二、实验仪器 扫描电子显微镜(热发射扫描型号JSM-5610LV)、真空镀金装置。扫描电镜原理是由电子枪发射并经过聚焦的电子束在样品表面扫描,激发样品产生各种物理信号,经过检测、视频放大和信号处理,在荧光屏上获得能反映样品表面各种特征的扫描图像。扫描电镜由下列五部分组成,主要作用简介如下: 1.电子光学系统。其由电子枪、电磁透镜、光阑、样

品室等部件组成。为了获得较高的信号强度和扫描像,由电子枪发射的扫描电子束应具有较高的亮度和尽可能小的束斑直径。常用的电子枪有三种形式:普通热阴极三极电子枪、六硼化镧阴极电子枪和场发射电子枪。前两种属于热发射电子枪;后一种则属于冷发射电子枪,也叫场发射电子枪,其亮度最高、电子源直径最小,是高分辨本领扫描电镜的理想电子源。电磁透镜的功能是把电子枪的束斑逐级聚焦缩小,因照射到样品上的电子束斑越小,其分辨率就越高。扫描电镜通常有三个磁透镜,前两个是强透镜,缩小束斑,第三个透镜是弱透镜,焦距长,便于在样品室和聚光镜之间装入各种信号探测器。为了降低电子束的发散程度,每级磁透镜都装有光阑;为了消除像散,装有消像散器。样品室中有样品台和信号探测器,样品台还能使样品做平移、倾斜、转动等运动。 2. 扫描系统。扫描系统的作用是提供入射电子束在样品表面上以及阴极射线管电子束在荧光屏上的同步扫描信号。 3. 信号检测、放大系统。样品在入射电子作用下会产生各种物理信号、有二次电子、背散射电子、特征X射线、阴极荧光和透射电子。不同的物理信号要用不同类型的检测系统。它大致可分为三大类,即电子检测器、阴极荧光检测

扫描电镜的基本结构和工作原理

扫描电镜的基本结构和工作原理 扫描电子显微镜利用细聚焦电子束在样品表面逐点扫描,与样品相互作用产行各种物理 信号,这些信号经检测器接收、放大并转换成调制信号,最后在荧光屏上显示反映样品表面各种特征的图像。扫描电镜具有景深大、图像立体感强、放大倍数范围大、连续可调、分辨率高、样品室空间大且样品制备简单等特点,是进行样品表面研究的有效分析工具。 扫描电镜所需的加速电压比透射电镜要低得多,一般约在1~30kV,实验时可根据被 分析样品的性质适当地选择,最常用的加速电压约在20kV左右。扫描电镜的图像放大倍数在一定范围内(几十倍到几十万倍)可以实现连续调整,放大倍数等于荧光屏上显示的图像横向长度与电子束在样品上横向扫描的实际长度之比。扫描电镜的电子光学系统与透射电镜有所不同,其作用仅仅是为了提供扫描电子束,作为使样品产生各种物理信号的激发源。扫描电镜最常使用的是二次电子信号和背散射电子信号,前者用于显示表面形貌衬度,后者用于显示原子序数衬度。 扫描电镜的基本结构可分为电子光学系统、扫描系统、信号检测放大系统、图像显示 和记录系统、真空系统和电源及控制系统六大部分。这一部分的实验内容可参照教材第十二章,并结合实验室现有的扫描电镜进行,在此不作详细介绍。 三、扫描电镜图像衬度观察 1.样品制备 扫描电镜的优点之一是样品制备简单,对于新鲜的金属断口样品不需要做任何处理,可 以直接进行观察。但在有些情况下需对样品进行必要的处理。 1) 样品表面附着有灰尘和油污,可用有机溶剂(乙醇或丙酮)在超声波清洗器中清洗。 2) 样品表面锈蚀或严重氧化,采用化学清洗或电解的方法处理。清洗时可能会失去一些 表面形貌特征的细节,操作过程中应该注意。 3) 对于不导电的样品,观察前需在表面喷镀一层导电金属或碳,镀膜厚度控制在5-10nm 为宜。 2.表面形貌衬度观察 二次电子信号来自于样品表面层5~l0nm,信号的强度对样品微区表面相对于入射束的 取向非常敏感,随着样品表面相对于入射束的倾角增大,二次电子的产额增多。因此,二次电子像适合于显示表面形貌衬度。 二次电子像的分辨率较高,一般约在3~6nm。其分辨率的高低主要取决于束斑直径,而 实际上真正达到的分辨率与样品本身的性质、制备方法,以及电镜的操作条件如高匝、扫描速度、光强度、工作距离、样品的倾斜角等因素有关,在最理想的状态下,目前可达的最佳分辩率为lnm。 扫描电镜图像表面形貌衬度几乎可以用于显示任何样品表面的超微信息,其应用已渗透 到许多科学研究领域,在失效分析、刑事案件侦破、病理诊断等技术部门也得到广泛应用。在材料科学研究领域,表面形貌衬度在断口分析等方面显示有突出的优越性。下面就以断口分析等方面的研究为例说明表面形貌衬度的应用。 利用试样或构件断口的二次电子像所显示的表面形貌特征,可以获得有关裂纹的起源、

透射电镜实验

实验二透射电镜结构原理及明暗场成像 一、实验内容及实验目的 1.结合透射电镜实物介绍其基本结构及工作原理,以加深对透射电镜结构的整体印象,加深对透射电镜工作原理的了解。 2.选用合适的样品,通过明暗场像操作的实际演示,了解明暗场成像原理。 二、透射电镜的基本结构及工作原理 透射电子显微镜是一种具有高分辨率、高放大倍数的电子光学仪器,被广泛应用于材料科学等研究领域。透射电镜以波长极短的电子束作为光源,电子束经由聚光镜系统的电磁透镜将其聚焦成一束近似平行的光线穿透样品,再经成像系统的电磁透镜成像和放大,然后电子束投射到主镜简最下方的荧光屏上而形成所观察的图像。在材料科学研究领域,透射电镜主要可用于材料微区的组织形貌观察、晶体缺陷分析和晶体结构测定。 透射电子显微镜按加速电压分类,通常可分为常规电镜(100kV)、高压电镜(300kV)和超高压电镜(500kV以上)。提高加速电压,可缩短入射电子的波长。一方面有利于提高电镜的分辨率;同时又可以提高对试样的穿透能力,这不仅可以放宽对试样减薄的要求,而且厚试样与近二维状态的薄试样相比,更接近三维的实际情况。就当前各研究领域使用的透射电镜来看,其主要三个性能指标大致如下: 加速电压:80~3000kV 分辨率:点分辨率为0.2~0.35nm、线分辨率为0.1~0.2nm 最高放大倍数:30~100万倍 尽管近年来商品电镜的型号繁多,高性能多用途的透射电镜不断出现,但总体说来,透射电镜一般由电子光学系统、真空系统、电源及控制系统三大部分组成。此外,还包括一些附加的仪器和部件、软件等。有关的透射电镜的工作原理可参照教材,并结合本实验室的透射电镜,根据具体情况进行介绍和讲解。以下仅对透射电镜的基本结构作简单介绍。1.电子光学系统 电子光学系统通常又称为镜筒,是电镜的最基本组成部分,是用于提供照明、成像、显像和记录的装置。整个镜筒自上而下顺序排列着电子枪、双聚光镜、样品室、物镜、中间镜、投影镜、观察室、荧光屏及照相室等。通常又把电子光学系统分为照明、成像和观察记录部分。 2.真空系统 为保证电镜正常工作,要求电子光学系统应处于真空状态下。电镜的真空度一般应保持在10-5托,这需要机械泵和油扩散泵两级串联才能得到保证。目前的透射电镜增加一个离子泵以提高真空度,真空度可高达133.322×10-8Pa或更高。如果电镜的真空度达不到要求会出现以下问题: (1) 电子与空气分子碰撞改变运动轨迹,影响成像质量。 (2) 栅极与阳极间空气分子电离,导致极间放电。 (3) 阴极炽热的灯丝迅速氧化烧损,缩短使用寿命甚至无法正常工作。 (4) 试样易于氧化污染,产生假象。 3.供电控制系统

冷冻电镜简介

1 冷冻电镜发展背景 人类基因组计划的完成,标志着科学已进入后基因组时代。虽然大量的基因序列得到阐明,但是生物大分子如何从这些基因转录、翻译、加工、折叠、组装,形成有功能的结构单元,尚需进一步的研究。后基因组时代人类面临的一个挑战是解析基因产物—蛋白质的空间结构,建立结构基因组学,并在原子水平上解释核酸—蛋白,蛋白—蛋白之间的相互作用,从而阐明由这些生物大分子和复合物所行使的生物学功能。在此过程中,结构生物学在其中扮演着重要角色。对生物大分子结构的解析,不仅具有深远的基础意义,而且具有广阔的应用前景。通过对核酸、蛋白质及其复合物的结构解析,人们对它们的功能的理解更加透彻,就可以根据他们发挥功能的结构基础有针对性地进行药物设计,基因改造,疫苗研制开发,甚至人工构建蛋白质等工作,从而对制药、医疗、疾病防治、生物化工等诸多方面产生巨大的推动作用。 日前用于解析生物大分子空间结构的主要手段是X射线晶体学技术和核滋共振波谱学。X射线晶体学可给出分子的高分辨结钩,核磁共振波谱学则可测定分子在溶液中的精确构像,并可研究构像的动态变化。虽然X射线晶体学和核磁共振波谱学是解析生物大分子结构的强有力工具,但各有局限性。X射线晶体学解析的结构常常是分子的基态结钩,而对解析分子的激发态和过渡态却往往无能为力:生物大分子在体内常常发生相互作用并形成复合物而发挥功能,这些复合物的结晶化非常困难。核磁共振波谱学虽可获得分子在溶液中的结构并可研究结构的动态变化,但目前只能用于分子量较小的生物大分子(<10000道尔顿),而对分子量大的生物大分子尤其是超分子复合物却无能为力。 人类对生物体系的研究经历了由个体到器官,由器官到组织,由组织到细胞,由细胞到生物大分子这样一个层次由高到低的过程。随着科学的发展,人们对生物体系的研究又转向由低层次到高层次,由简单体系到复杂体系。在此过程中,细胞作为生命的基本单位起着承上启下的重要作用。多少年来,科学家的一个梦想是能观察到生物大分子在细胞内的行为,几十年来,人们对大量的生物大分子及其复合物应用电子显微镜进行研究,发展出了强有力的电子显微学来研究生物大分子结构的方法学。近年来,由于快速冷冻和低温冷却技术的引进,导致了冷冻电子显微学技术的诞生。冷冻电镜在研究生物大分子结构尤其是超分子体系的结构方面取得了突飞猛进的发展,在生物学领域的应用越来越受到重视,逐渐成为一种被普遍接受的公认的研究生物大分子尤其是超分子体系结构的有效研究手段,成为连接生物大分子和细胞的纽带和桥梁。

扫描电镜SEM&透射电镜TEM简介

扫描电镜SEM&透射电镜TEM简介 1. 光学显微镜以可见光为介质,电子显微镜以电子束为介质,由于电子束波长远较可见光小,故电子显微镜分辨率远比光学显微镜高。光学显微镜放大倍率最高只有约1500倍,扫描式显微镜可放大到10000倍以上。 2. 根据de Broglie波动理论,电子的波长仅与加速电压有关: λe=h / mv= h / (2qmV)1/2=12.2 / (V)1/2 (?) 在 10 KV 的加速电压之下,电子的波长仅为0.12?,远低于可见光的4000 - 7000?,所以电子显微镜分辨率自然比光学显微镜优越许多,但是扫描式电子显微镜的电子束直径大多在50-100?之间,电子与原子核的弹性散射 (Elastic Scattering) 与非弹性散射(Inelastic Scattering) 的反应体积又会比原有的电子束直径增大,因此一般穿透式电子显微镜的分辨率比扫描式电子显微镜高。 3. 扫描式显微镜有一重要特色是具有超大的景深(depth of field),约为光学显微镜的300倍,使得扫描式显微镜比光学显微镜更适合观察表面起伏程度较大的样品。 4. 扫描式电子显微镜,其系统设计由上而下,由电子枪 (Electron Gun) 发射电子束,经过一组磁透镜聚焦 (Condenser Lens) 聚焦后,用遮蔽孔径 (Condenser Aperture) 选择电子束的尺寸(Beam Size)后,通过一组控制电子束的扫描线圈,再透过物镜 (Objective Lens) 聚焦,打在样品上,在样品的上侧装有讯号接收器,用以择取二次电子 (Secondary Electron) 或背向散射电子 (Backscattered Electron) 成像。 5. 电子枪的必要特性是亮度要高、电子能量散布 (Energy Spread) 要小,目前常用的种类计有三种,钨(W)灯丝、六硼化镧(LaB6)灯丝、场发射 (Field Emission),不同的灯丝在电子源大小、电流量、电流稳定度及电子源寿命等均有差异。 6. 热游离方式电子枪有钨(W)灯丝及六硼化镧(LaB6)灯丝两种,它是利用高温使电子具有足够的能量去克服电子枪材料的功函数(work function)能障而逃离。对发射电流密度有重大影响的变量是温度和功函数,但因操作电子枪时均希望能以最低的温度来操作,以减少材料的挥发,所以在操作温度不提高的状况下,就需采用低功函数的材料来提高发射电流密度。

扫描电镜的结构及原理

扫描电镜的结构及原理 一、简介 1特点:扫描电子显微镜主要特点是电子束在样品上进行逐点扫描,获得三维立体图像,图像观察视野大、景深长、富有立体感。在观察样品表面形貌的同时,进行晶体学分析及成分分析。常规的扫描电镜分辨本领通常为7~10nm,加速电压在1~50 kV范围。生物样品一般用10~20kV,成像放大率几十倍至几十万倍。 2用途:扫描电镜可对样品进行综合分析,已成为重要分析工具,纤维、纸张、钢铁质量等,观察矿石结构、检测催化剂微观结构、观看癌细胞与正常细胞差异等。 3日本日立公司产品S-5200型为超高分辨率(ultra-highresolution)扫描电镜,加速电压为1kV时,分辨率可达1.8nm,加速电压为30kV时,分辨率高达0.5nm。此外,还具有独特的电子信号探测系统,不但能观察样品三维形态结构甚至能看到样品的原子或分子结构,在使用性能方面已超越任何一种常规扫描电镜。 二、扫描电镜的结构 扫描电镜的组成 : (1)、电子光学系统: 组成:①电子枪与透镜系统;②电子探针扫描偏转系统 作用:产生直径为几十埃的扫描电子束,即电子探针,使样品表面作光栅状扫描。

①电子枪组成:阴极、阳极、栅极。直径约为0.1mm钨丝制成,加热后发射的电子在栅极和阳极作用下,在阳极孔附近形成交叉点光斑,其直径约几十微米。 扫描电镜没有成像电镜,成像原理与透射电镜截然不同。所有透镜皆为缩小透镜,起缩小光斑的作用。缩小透几十镜将电子枪发射的直径约为30μm电子束缩小成几十埃,由两个聚光镜和一个末透镜完成三个透镜的总缩小率为2000~3000倍。 两个聚光镜分别是第一聚光镜和第二聚光镜,可将在阳极孔附近形成的交叉点缩小。 聚光镜可动光阑位于第二聚光镜和物镜之间,用于控制选区衍射时电子书的发散角。提高角分辨率。 被聚光镜缩小的光斑再由物镜进一步缩小,使光斑直径为几十埃。然后汇聚在样品上。 物镜有两个极靴,分别为上级靴和下级靴。上下级靴的形状不对称,极靴孔径也不同,以适应不同需要。为在物镜上级靴孔内装扫描线圈、消像散器,也为降低球差和色差,上级靴孔径稍大些。为避免透镜磁场对二次电子图像及磁性材料观察的影响,下级靴孔径稍小些。 物镜可动光栅用于调整电子探针孔径角,缩小电子束斑直径,以获得最大探针电流。在观察二次电子图像时,调整物镜可动光栅可获得焦深大的电子显微图像。 ②电子探针扫描偏转系统

透射电子显微镜简易操作指南

T ecnai G2 20 S-TWIN透射电子显微镜简易操作指南说明: ●本文件的目的在于帮助用户记忆培训的内容,不能代替培训。 有意自己操作透射电镜的用户请到现场参加培训。 ●为了把此文件的篇幅限制在一个合理程度,文件内容难于面面 俱到。 ●欢迎各位对本文件的内容提出宝贵意见! 简介: 一.Tecnai G2 20 ST透射电镜 二.Tecnai G2 20 ST透射电镜操作注意事项 三.检查实验室安全及仪器运行状况 四.Tecnai G2 20 ST透射电镜基本操作步骤 1.登陆计算机 2.打开操作软件 3.检查电镜状态 4.装液氮 5.装载样品 6.插入样品杆 7.加灯丝电流 8.开始操作9.结束操作 10.取出样品杆 11.卸载样品 12.真空低温(Cryo Cycle) 13.数据刻录、转化和输出 14.关闭操作软件 15.退出计算机 16.实验记录 (注意:其中4,5,6,10,11等操作是必须由TEM室的高老师进行操作。遇到任何异常的情况都应停止操作,并询问高老师。)

一.Tecnai G2 20 ST透射电镜 ●生产厂家:美国FEI公司 ●主要附件:美国Gatan公司1k×1k CCD相机 美国EDAX公司X射线能谱仪 主要规格及技术指标 最高加速电压200KV 电子枪LaB6或W灯丝 点分辨率0.24nm 晶格分辨率0.14nm 最小束斑尺寸 1.5nm 放大倍数25×-1030K×样品台最大倾转角A:±40°,B:±40° X射线能谱分辨率136ev 分析范围Be-U

主要功能及应用范围 观察各种材料的微观结构并对样品进行纳米尺度的微区分析,如:形貌观察; 高分辨电子显微像; 电子衍射; 会聚束电子衍射; 衍射衬度成像; X射线能谱分析等 仪器工作条件 工作温度:15℃~25℃ 工作湿度: <80% 电力供应:220v(±10%), 50Hz 主要测试项目: 明场像(BF)、暗场像(DF) 高分辨像(HRTEM) 能谱分析(EDX) 选区电子衍射(SAED) 二.Tecnai G2 20 ST透射电镜操作注意事项 1.透射电镜及其附属设备中有高压电、低温、高压气流、电离辐射等 危险因素,因此不正确的使用有可能造成仪器损坏,甚至人身伤亡。 请您正确操作仪器,不要打开仪器的面板或试图接触培训过程中未 允许您操作的部分,即使您对自己的操作很有信心。未获得授权的 用户请勿操作电镜。 2.请勿用透射电镜观察磁性样品,磁性样品有可能给电镜造成严重伤 害。 3.严禁用手触摸样品杆O圈至样品杆顶端的任何部位; 4.在下列情况下必须首先关闭Col. V alves: 插入或拔出样品杆时; 结束操作时; 操作者离开实验室时(无论时间长短); 有任何意外情况发生时。 5.电镜样品台红灯亮时不要插入或拔出样品杆; 6.插入或拔出样品杆之前必须确认样品台已回零;

试述电子显微镜概况

一、试述电子显微镜概况 答题要点: 1.透射电镜(TEM) 透射电镜即透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM),通常称作电子显微镜或电镜(EM),是使用最为广泛的一类电镜。它的主要特点是利用电子射线(或称电子束也称电子波)穿透样品,而后经多级电子放大后成像于荧光屏。它的主要优点是分辨率高,可用来观察组织和细胞内部的超微结构以及微生物和生物大分子的全貌,在生命科学领域中应用最为广泛。根据加速电压的大小,又可将TEM分为一般TEM(加速电压小于120KV)、高压TEM(加速电压在120KV~500KV之间)和超高压TEM(加速电压大于500KV)。 1)一般TEM。最常用的是100KV电镜。这种电镜分辨率高(点0.3nm,晶格0.14nm),但穿透本领小,观察样品必须很薄,约为30~100nm,如细胞和组织的超薄切片、复型膜和负染样品等。这种电镜在生命科学领域中应用已相当普及。 2)高压TEM。目前常用的是200KV电镜。这种电镜对样品的穿透本领约为100KV电镜的1.6倍,可以在观察较厚样品时获得很好的分辨本领,从而可以对细胞结构进行三维观察。 3)超高压TEM。目前已有500KV、1000KV和3000KV的超高压TEM。这类电镜具有穿透本领强、辐射损伤小、可以配备环境样品室及进行各种动态观察等优点,分辨率也已达到或超过100KV电镜的水平。在超高压电镜上附加充气样品室,使人们可以观察活细胞内的超微结构动态变化。 2.扫描电镜(SEM) 扫描电镜即扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,简称SEM),其主要是利用电子射线轰击样品表面,引起二次电子等信号的发射,经检测装置接收后成像的一类电镜。其特点是景深长,所获得的图像立体感强,可用来观察生物样品的各种形貌特征。在生命科学研究中,采用不同的样品制备技术可观察不同的结构,如用临界点干燥法可观察样品的表面形貌;用冷冻割裂方法可观察样品割裂面的结构;用铸型方法可观察管腔内表面的结构等。 1)一般SEM。目前一般扫描电镜采用热发射电子枪,分辨率为6nm左右,若采用六硼化镧电子枪,分辨率可提高到4~5nm。这种电镜在生命科学领域中的应用也已相当普及。 2)场发射电子枪SEM。由于场发射电子枪具有亮度高、能量分散少,阴极源尺寸小等优点,这种电镜的分辨率已达到3nm。场发射电子枪SEM的另一个优点是可以在低加速电压下进行高分辨率观察,因此可以直接观察绝缘体而不发生充、放电现象。 3)生物用SEM。这种SEM备有冰冻冷热样品台,可把含水生物样品迅速冷冻并对冰冻样品进行观察,可以减少化学处理引起的人为变化,使观察样品更接近于自然状态。如要观察内部结构,还可用冷刀把样品进行切开,加温使冰升华,并在其上喷镀一层金属再进行观察,所有这些过程都在SEM中不破坏真空的状态下进行。 3.电子探针 电子探针主要用于探测微小区域的元素成分。其原义仅是一个物理学名词,意指聚焦了的电子束。当电子束照射样品表面时,可激发X射线,X射线光量子的能量及波长与元素的原子序数有关,称为特征X射线。采用晶体分光光谱法测定X射线的波长和强度来分析样品成分的仪器,称为X射线分光光谱仪或电子探针;用锂漂移硅探头测定X射线能量和强度的仪器称为X射线能谱仪。 4.分析电镜 分析电镜是利用电子射线轰击样品所产生的X射线或俄歇电子对样品元素进行分析的一

扫描电子显微镜介绍

扫描电子显微镜介绍 扫描电子显微镜的设计思想和工作原理,早在1935年便已被提出来了。1942年,英国首先制成一台实验室用的扫描电镜,但由于成像的分辨率很差,照相时间太长,所以实用价值不大。经过各国科学工作者的努力,尤其是随着电子工业技术水平的不断发展,到 1956年开始生产商品扫描电镜。近数十年来,扫描电镜已广泛地应用在生物学、医学、冶金学等学科的领域中,促进了各有关学科的发展。 一.扫描电镜的特点 和光学显微镜及透射电镜相比,扫描电镜具有以下特点: (一) 能够直接观察样品表面的结构,样品的尺寸可大至120mm×80mm×50mm。 (二) 样品制备过程简单,不用切成薄片。 (三) 样品可以在样品室中作三度空间的平移和旋转,因此,可以从各种角度对样品进行观察。 (四) 景深大,图象富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍,比透射电镜大几十倍。 (五) 图象的放大范围广,分辨率也比较高。可放大十几倍到几十万倍,它基本上包括了从放大镜、光学显微镜直到透射电镜的放大范围。分辨率介于光学显微镜与透射电镜之间,可达3nm。 (六) 电子束对样品的损伤与污染程度较小。 (七) 在观察形貌的同时,还可利用从样品发出的其他信号作微区成分分析。 二.扫描电镜的结构和工作原理 (一) 结构 1.镜筒 镜筒包括电子枪、聚光镜、物镜及扫描系统。其作用是产生很细的电子束(直径约几个nm),并且使该电子束在样品表面扫描,同时激发出各种信号。 2.电子信号的收集与处理系统 在样品室中,扫描电子束与样品发生相互作用后产生多种信号,其中包括二次电子、背散射电子、X射线、吸收电子、俄歇(Auger)电子等。在上述信号中,最主要的是二次电子,它是被入射电子所激发出来的样品原子中的外层电子,产生于样品表面以下几nm至 几十nm的区域,其产生率主要取决于样品的形貌和成分。通常所说的扫描电镜像指的就是二次电子像,它是研究样品表面形貌的最有用的电子信号。检测二次电子的检测器(图15(2)的探头是一个闪烁体,当电子打到闪烁体上时,1就在其中产生光,这种光被光导管传送到光电倍增管,光信号即被转变成电流信号,再经前置放大及视频放大,电流信号转变成电压信号,最后被送到显像管的栅极。 3.电子信号的显示与记录系统 扫描电镜的图象显示在阴极射线管(显像管)上,并由照相机拍照记录。显像管有两个,一个用来观察,分辨率较低,是长余辉的管子;另一个用来照相记录,分辨率较高,是短余辉的管子。 4.真空系统及电源系统 扫描电镜的真空系统由机械泵与油扩散泵组成,其作用是使镜筒内达到10(4~10(5托的真空度。电源系统供给各部件所需的特定的电源。 (二) 工作原理 从电子枪阴极发出的直径20(m~30(m的电子束,受到阴阳极之间加速电压的作用,射向镜筒,经过聚光镜及物镜的会聚作用,缩小成直径约几毫微米的电子探针。在物镜上部的扫描线圈的作用下,电子探针在样品表面作光栅状扫描并且激发出多种电子信号。这些电子信号被相应的检测器检测,经过放大、转换,变成电压信号,最后被送到显像管的栅极上并且调

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