瑞氏-吉姆萨染液配法
英文拼写 Wright's stain
是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，溶于甲醇。后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。
使用方法
瑞氏（Wright's staim；美蓝－伊红Ｙ）染色：
1．瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料黄色伊红（Eostm Y）合称伊红美蓝染料即瑞氏（美蓝－伊红Ｙ）染料。
2．用甲醇作瑞氏染料溶剂，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶剂，有两种作用：
（1）甲醇使瑞氏染料中美蓝（M）与伊红（E）在溶液中离解，可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。
甲醇
ME（瑞氏染料）----→M+ + E-
在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青，美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色，但不能使胞浆染为蓝色，多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色，染色主要是化学作用，是离子彼此结合的反应。
（2）甲醇具有强大的脱水力，可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积，提高细胞对染料吸收作用，同时由于甲醇吸附染色液中的水，使染色液升温，加速染色反应。
染液配制
(1) 瑞氏染液配制：
瑞氏染料 830gm或1g
甲醇（AR）500ml或600ml
○先称干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置乳钵内，用乳棒轻轻敲碎染料成粉末，再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末，加少许甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸内显“一面镜”光泽，而无染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮，静置片刻，将上层液体倒入一清洁储存瓶内（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重复数次，至乳钵内染料及甲醇用完为止，摇匀，密封瓶口。
○存室温暗处，储存愈久，则染料溶解、分解就越好，一般储存3个月以上为佳。
(2) 缓冲液：
●缓冲液作用：
○染色对氢离子浓度是十分敏感的，据观察pH值的改变，可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。
○缓冲液须保持一定的pH使染色稳定，PBS的pH 一般在6.4~6.8，
○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用，使pH恒定。
缓冲液配制
（pH6.4~6.8，弱酸性）：
配方1 ：配方2：
1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml
1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml
H2O(新鲜) 加至1000ml
置室温黑暗处，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污染则应报废。
姬姆萨（Giemsa's stain；天青-伊红）染色
1．姬姆萨染料是伊红(AzurII Eqsin)和天青（蓝）2号合成的。
2．姬姆萨染料（Giemsa, 天青-伊红）染液配制：
姬姆萨染料（粉末）0.5g或7.5g
甲醇（AR）33ml 或500ml
甘油（AR）33ml或500ml
●先将姬姆萨染料放入乳钵中，逐渐倒甘油研磨溶于甘油中，置于56℃水温箱内，90～120分钟，然后加入甲醇，摇匀后放置数天，过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处，时间越长越好。
●使用染液可临时配置）：姬姆萨染液1ml，加DDH2O10ml混匀。即可使用。
染色步骤
（1）先用甲醇固定2～3分钟。
（2）将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液15～30分钟。
（3）涂片用自来水冲洗，在室温中干燥待查。
染液鉴定
瑞氏或姬姆萨染色液鉴定：刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定：
1．取1滴染液于乳白玻板上，自行迅速扩散开，其颜色变紫红色，且有伪足形成。
2．取1滴染液加1滴缓冲液，染液由深蓝色立即变为紫红色。
3．取血片或骨髓片进行试染检查，观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况，pH是否合适及染色合适时间。如有上述变化，表明染液合格，可供使用。
混合染色
瑞氏染色(Wright's)-姬姆萨（Giemsa's）混合染色：
●瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。
●姬姆萨染色对胞浆着色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒着色较清晰, 色泽纯正,而对胞核着色偏深,核结构显示较差。
●故采用以瑞氏染液为主，姬姆萨染液为辅的混合染色。
染色步骤:
1. 先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖；
2. 稍等片刻再加姬姆萨染液2-3滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定)；
3. 稍等1-2分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液形成表面张力而终止染色液加入；
4. 染色30-40分钟；
5. 分色：用自来水缓缓冲洗至少3分钟以上,待干，勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。
吉姆萨染液配法：
以1g的姬姆色素染料加入66ml甘油，混匀，60度保温溶解两小时，再加入66ml甲醇混匀，即配成姬姆色素原液，此原液用前用PBS（6.8）稀释十倍左右就可以使用（此为姬姆萨工作液）。工作液可保存一个月左右。
1．贮备液
Giemsa粉1g
纯甘油66ml
甲醇66ml
先将Giemsa粉置于研钵中加少量甘油，充分研磨，呈无颗粒的糊状。再将全部甘油加入，放入56℃温箱中2小时，然后加入甲醇，保存于茶色瓶中。一般两周后使用为好。
2．工作液
临用时将贮备液与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合。
警告：Giemsa有毒、易燃、易挥发性，请勿靠近火源、撞击。请勿与人体直接接触
吉姆萨染色步骤
根据需要量，配好工作液，此工作液常温可保存两周。按常规方法制备血涂片，待血膜干后,用甲醇固定 2 ～ 3 分钟；将血涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加稀释好的染色液，使覆盖全部血膜，室温染色15～30分钟。用自来水缓慢从玻片一端冲洗（注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗），凉干后镜检。
快速瑞氏染液
瑞氏染色液说明书 【产品名称】 瑞氏染色液 【包装规格】 货号：DM0005 单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml； 每套/盒包装规格分别为：2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。 【预期用途】 主要用于对血细胞进行染色。 【检验原理】 瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料，各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样，如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料结合后，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色，细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、瑞氏染液瑞氏染料、甲醇 2、磷酸盐缓冲液磷酸盐 【储存条件及有效期】 5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 【样本要求】 1、血细胞涂片染色：要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。 2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色：新鲜标本离开人体涂片后，需尽快以火焰或酒精固定，以避免细胞变形。 3、骨髓涂片染色：涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血，不能用高温或火烤干燥。 4、脱落细胞涂片：取样本并涂片，待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行）；若采用湿片固定法，标本浸泡时间稍长些，效果会更佳；若采用湿片固定液固定标本，固定液用后需经常过滤，更换，防止细胞交叉污染。 【检验方法】 1、滴加瑞氏染液于涂片上，并让染液覆盖整个标本涂片，染色； 2、将等量的磷酸盐缓冲液滴加于瑞氏染液上面，以嘴或洗耳球使两液充分混合，染色； 3、水洗，冲洗时不能先倒掉染色液，可缓慢从玻片一端冲洗，以防有沉渣沉淀在标本上； 4、干燥、镜检。 【检验方法的局限性】 仅供形态学初检观察染色使用。 【注意事项】 1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，必须充分干燥，否则在染色过程中容易脱落，以免影响染色效果。
瑞氏-姬姆萨染液使用说明
瑞氏-姬姆萨染液使用说明 货号：G1020 规格：100ml/500ml 保存：室温避光保存，有效期至少2年。 产品说明： 瑞氏-姬姆萨染液是一种复合染液，兼有瑞氏和姬姆萨染液二者优点，主要应用于血液和骨髓涂片染色。各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同，对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料和碱性染料的亲和力也不同，因此，标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后，相应各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，着色清晰，色泽纯正，但是对胞核着色偏深,核结构显示较差。瑞氏染色对细胞核着色程度适中，细胞核结构和色泽清晰艳丽，对核结构的识别较佳，但对胞浆着色较差，故采用瑞氏姬姆萨混合染色，具有染色效果好，对比清晰，操作简便等特点。 使用方法： 本产品可作为多种组织或细胞的染色使用，不同组织、细胞，不同的用途可以有不同的使用方法。具体方法请根据自己需求参考既有文献，本产品以涂片为例，举例说明，仅供参考。 1、取涂片、自然干燥。 2、滴加瑞氏-姬姆萨染液2-3滴覆盖整个标本涂片，染1-2分钟。 3、滴加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)，轻轻晃动玻片,
与瑞氏-姬姆萨染色液充分混匀，染色3-5分钟。 4、水洗、吸干、镜检。 5、染色后胞浆和胞核的染色清晰分明，细胞核着色呈深浅不同的紫红色，胞浆呈浅红色，胞浆中颗粒区分明显。 注意事项： 1、涂片厚薄适宜，涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。 2、所加染液不能过少，以免蒸发而使染料沉淀。冲洗时间不能过久，以防脱色。 3、染色对pH十分敏感，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应接近中性，否则可能会导致细胞染色异常，形态难以识别，甚至错误。 4、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。 相关试剂： P210010×多聚赖氨酸 G1010姬姆萨染色液 G1040瑞氏染液 G1100伊红染色液 G1140苏木素染色液(常规染色
瑞氏染色
1．检验目的 指导瑞氏染色的操作，进行各种涂片的分类。 2．方法原理 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。各种细胞成分化学性质 不同，对刘氏染液（改良的瑞氏染液）中酸性染料曙红和碱性染料亚甲蓝的亲和力也不 一样，标本涂片经过刘氏染液染色后，各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态、特征的目的。 3．方法性能参数（如线性、检出限、测量区间、不确定度、准确性、精密度、灵敏度和特异性） 3.1染色速度快，效果好。 3.2仅供形态学初学者初检观察染色使用。 3.3是临床最常用的染色技术之一，用于细胞分类、寄生虫检出及分类。 4．标本类型（如血浆、血清、尿液等） 4.1血细胞涂片、脱落细胞学标本（脑脊液、胸腹水等）。 4.2标本采集后要及时制片，以免时间久细胞形态发生退化改变。 5．要求的容器、防腐剂或添加物、仪器、试剂或分析系统 5.1试剂组分： 5.2试剂存储和有效期： 6．校准程序（计量学溯源性）
7．质量控制，控制品使用水平和频率，允许限的纠正措施 8．程序步骤 8.1标准方法： 8.1.1加刘A（0.5-0.8ml）染色30S。 8.1.2再将刘B滴加于A液上面（滴量为A液的两倍）。以洗耳球轻吹，让两液充分 混合，染色1min。 8.1.3水洗（不能先倒染色液，以流水轻轻冲去），待干后镜检。 8.2快速染色，适用于脱落细胞学标本： 8.2.1加刘A（0.5-0.8ml）后，立即将刘B滴加于A液上面（滴量为A液的两倍）。以 洗耳球轻吹，让两液充分混合，染色10-20S。 8.2.2水洗（不能先倒染色液，以流水轻轻冲去），待干后镜检。 9．计算结果原理 10．生物参考区间 11．警告值、危急值（适用时） 12．检验结果可报告区间 12.1红细胞呈淡红色，白细胞浆中颗粒清楚，并显示出各种细胞特有的色彩，细胞核染 紫红色，核染色质结构清楚。 12.2脱落细胞学标本如脑脊液、胸腹水沉渣涂片，因其细胞通透性较高，应行快速染色 如染色偏深，无法辨识核结构，应适当缩短染色时间，以免误判。 13．对超出可报告范围的结果的处理 14．实验室解释 15．安全防护措施 所有标本按具有潜在传染性的标本处理。 16．最常见的误差源。 17．方法的局限性（如乳糜血、溶血、高胆红素血等干扰影响、交叉反应等） 18．参考文献 18.1全国临床检验操作规程-第三版 18.2《刘氏染液厂家说明书》 19．有关引用程序与文件 20．SOP涉及的记录与表格
瑞氏染液使用说明
瑞氏染液使用说明 货号：G1040 规格：50ml/100ml 保存：室温避光保存，有效期至少2年。 产品说明： 瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料伊红（Eostm Y）组成的复合染料，溶于甲醇。伊红通常为钠盐，有色部分为阴离子。美蓝通常为氯盐，有色部分为阳离子。甲醇的作用：一是溶解美蓝和伊红，使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色；二是固定细胞形态，加速染色反应，增强染色效果。 使用方法： 本产品可作为多种组织或细胞的染色使用，不同组织、细胞，不同的用途可以有不同的使用方法。具体方法请根据自己需求参考既有文献，本产品以涂片为例，举例说明，仅供参考。 1、取涂片、自然干燥。 2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醇所固定。 3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,与瑞氏染色液混匀，静置5分钟。 4、水洗、吸干、镜检。 5、细菌染成蓝色，组织细胞胞浆红色，细胞核蓝色。
注意事项： 1、涂片厚薄适宜，涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。 2、所加染液不能过少，以免蒸发而使染料沉淀。冲洗时间不能过久，以防脱色。 3、染色对pH十分敏感，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应接近中性，否则可能会导致细胞染色异常，形态难以识别，甚至错误。 4、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。 相关试剂： P210010×多聚赖氨酸 G1010姬姆萨染色液 G1100伊红染色液 G1140苏木素染色液(常规染色) G1120H-E染色试剂盒
瑞氏-姬姆萨复合染色液使用说明
瑞氏-姬姆萨复合染色液使用说明 货号：G3990 保存：室温避光保存，有效期至少2年。 产品内容： 2×100ml2×500ml Storage 试剂(A):Wright-Giemsa Stain100ml500ml RT避光试剂(B):磷酸盐缓冲液100ml500ml RT 产品说明： 瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料，对原生质的染色有很好的区别作用。吉姆萨染液由天青Ⅱ与伊红混合而成，染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深，核结构显色不佳，常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。 Wright-Giemsa Stain以进口瑞氏色素和姬姆萨色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。染液中加中性甘油，防止甲醇挥发或氧化，同时也可使血细胞染色较清晰。该染液的特点：由瑞氏-姆姆萨复合染色液和磷酸盐缓冲液组成，等量混合使用或分别处理标本使用。 使用方法(仅供参考)： 1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片，待涂片自然干燥。 2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
3、滴加适量Wright-Giemsa Stain覆盖涂片，室温染色1～2min。 4、涂片滴加等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动玻片或采用其他方式混合，使磷 酸盐缓冲液不Wright-Giemsa Stain混匀，室温静置3～10min。 5、步骤3、4亦可以采用如下方法:取Wright-Giemsa Stain和磷酸盐缓冲 液等量混合，即为Wright-Giemsa工作液，滴加该工作液于血液涂片或骨髓涂片上，室温静置3～10min。 6、用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。(注:也可用磷酸盐缓冲液等量 稀释后，冲洗玻片，时间控制在30s左右。） 7、干燥。镜检:先用低倍镜观察血涂片，再用油镜。 染色结果： 细菌、细胞核蓝色 组织细胞的细胞质、血红蛋白、嗜酸性颗粒粉红或橘红色 注意事项： 1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。 2、涂片染色中，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液，以免染料 沉着于涂片上。 3、染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。 4、染色过深可用甲醇或乙醇适当脱色，最好不复染。 5、如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。 6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
瑞氏-吉姆萨染液是什么
瑞氏-吉姆萨染色液说明书 【产品名称】 瑞氏-吉姆萨染色液 【包装规格】 货号：DM0007 单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml； 每套/盒包装规格分别为：2×20ml/盒、 2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。【预期用途】 主要用于对血细胞进行染色 【检验原理】 瑞氏染料是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用；吉姆萨染料由天青Ⅱ与伊红混合而成，染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，吉姆萨染色对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深，核结构显色不佳，常与瑞氏染色联合使用。 瑞氏-吉姆萨染色液是利用Romanowsky Stain技术原理改良而成的，细胞的着色过程是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理吸附作用，又有化学亲和作用，各种细胞及相关成分由于其化学性质不同，对瑞氏-吉姆萨染色液中的酸性染料(伊红)和碱性染料(亚甲蓝)的亲和力也不一样，标本涂片经瑞氏-吉姆萨染色后，相应各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、瑞氏-吉姆萨染液瑞氏染料、吉姆萨染料、甲醇 2、磷酸盐缓冲液磷酸盐 【储存条件及有效期】 5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 【样本要求】 1、血细胞涂片染色：要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。 2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色：新鲜标本离开人体涂片后，需尽快以火焰或酒精固定，以避免细胞变形。 3、骨髓涂片染色：涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血，不能用高温或火烤干燥。 4、脱落细胞涂片：取样本并涂片，待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行）；若采用湿片固定法，标本浸泡时间稍长些，效果会更佳；若采用湿片固定液固定标本，固定液用后需经常过滤，更换，防止细胞交叉污染。 【检验方法】 1、滴加瑞氏-吉姆萨染液于涂片上，并让染液覆盖整个标本涂片，染色； 2、将等量的磷酸盐缓冲液滴加于瑞氏-吉姆萨染液上面，以嘴或洗耳球使两液充分混合，染色； 3、水洗，冲洗时不能先倒掉染色液，可缓慢从玻片一端冲洗，以防有沉渣沉淀在标本上； 4、干燥、镜检。 【检验方法的局限性】 仅供形态学初检观察染色使用。 【注意事项】 1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，必须充分干燥，否则在染色过程中容易脱落，以免影响染色效果。
迪夫快速染色液
迪夫快速染色液 货号：G1542 保存：室温，避光，12个月 试剂盒组成： 规格 4×250mL Storage 名称 试剂(A):Diff-QuikⅠ250mL×2RT避光 试剂(B):Diff-QuikⅡ250mL×2RT避光 简介： 迪夫快速染色液是在Wright染色基础上改良而来的一种快速染色方法，是细胞学检查中常用的染色方法之一。该染色液采用世界卫生组织(WHO)推荐的快速染色方法而配制，与Wright Stain类似都是利用Romanowsky Stain技术原理改良而来的，染色结果与瑞氏染色液也极其相似，但迪夫快速染色所需的时间极短，一般90s以内即可完成染色。 迪夫快速染色液主要用于血细胞涂片、骨髓涂片、阴道分泌物涂片、脱落细胞涂片。迪夫快速染色非常适合用于批量浸染，且背景清晰无沉渣。 操作步骤（仅供参考）： 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，自然干燥后Diff-Quik Fixative固定20s。 1、Diff-QuikⅠ染色5～10s。 2、Diff-QuikⅡ染色10～20s。 3、水洗后立即趁湿在显微镜下观察。 4、将观察后认为有价值的片子带回实验室，用二甲苯透明，封固、保存。 染色结果： 细胞核、白细胞深蓝色 基质、淋巴细胞紫色 细胞质、红细胞粉红色 注意事项： 1、Diff-Quik Fixative是Diff-Quik专用固定液，如使用量大，可用甲醇替代。 2、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。
3、血细胞涂片染色要求新鲜全血或EDTA抗凝血。 4、骨髓涂片染色要求制备好的涂片在空气中快速摇动或扇干，以防止细胞皱缩变形或因空气潮湿而溶血，不能用高温或火烤来干燥涂片。 5、阴道分泌物涂片染色要求新鲜标本涂片后，尽快以火焰或酒精固定，以免细胞变形。 6、脱落细胞涂片固定可采用自然干燥或固定液固定。 7、涂片染色中请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液，以免染料沉着于涂片上。 8、染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。 9、染色过深可用甲醇或酒精适当脱色，最好不复染。 10、如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。 11、pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸碱污染，以免影响染色效果。
迪夫快速染色液(Diff-Quik Stain)试剂盒
迪夫快速染色液(Diff-Quik Stain)试剂盒 货号：G1540 规格：3×100mL/3×500mL 保存：室温，避光，有效期12个月。 试剂盒组成： 规格 3×100mL3×500mL Storage 名称 试剂(A):Diff-Quik Fixative100mL500mL RT避光 试剂(B):Diff-QuikⅠ100mL500mL RT避光 试剂(C):Diff-QuikⅡ100mL500mL RT避光 产品说明： Diff-Quik染色是在Wright染色基础上改良而来的一种快速染色方法，是细胞学检查中常用的染色方法之一。该染色液采用世界卫生组织(WHO)推荐的快速染色方法而配制，与Wright Stain类似都是利用Romanowsky Stain技术原理改良而来的，染色结果与瑞氏染色液也极其相似，但迪夫快速染色所需的时间极短，一般90s以内即可完成染色。 迪夫快速染色液含固定液，主要用于血细胞涂片、骨髓涂片、阴道分泌物涂片、脱落细胞涂片。Diff-Quik 染色非常适合用于批量浸染，且背景清晰无沉渣。 操作步骤（仅供参考）： 1.常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，自然干燥后Diff-Quik Fixative固定20s。 2.Diff-QuikⅠ染色5～10s（上下提动玻片2-3次，使染液均匀分布），立即取出。 3.Diff-QuikⅡ染色10～20s（上下提动玻片2-3次，使染液均匀分布），立即取出。 4.水洗后立即趁湿在显微镜下观察或者95%乙醇5s，100%乙醇（Ⅰ）5s，100%乙醇（Ⅱ）30s，二甲苯1min 脱水透明封片观察。 第1页，共2页
瑞氏染液
由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料。 目录 简介 使用方法 染液配制 缓冲液配制 染色步骤 染液鉴定 混合染色 简介 英文拼写Wright's stain 是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，溶于甲醇。后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。 使用方法 瑞氏（Wright's staim；美蓝－伊红Ｙ）染色： 1．瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料黄色伊红（Eostm Y）合称伊红美蓝染料即瑞氏（美蓝－伊红Ｙ）染料。 2．用甲醇作瑞氏染料溶剂，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶剂，有两种作用： （1）甲醇使瑞氏染料中美蓝（M）与伊红（E）在溶液中离解，可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。 甲醇 ME（瑞氏染料）----→M+ + E- 在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青，美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色，但不能使胞浆染为蓝色，多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色，染色主要是化学作用，是离子彼此结合的反应。 （2）甲醇具有强大的脱水力，可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积，提高细胞对染料吸收作用，同时由于甲醇吸附染色液中的水，使染色液升温，加速染色反应。 编辑本段染液配制 (1) 瑞氏染液配制： 瑞氏染料830gm或1g 甲醇（AR）500ml或600ml ○先称干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置乳钵内，用乳棒轻轻敲碎染料成粉末，再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末，加少许甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸内显“一面镜”光泽，而无染料粉粒沉着。 ○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮，静置片刻，将上层液体倒入一清洁储存瓶内（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重复数次，至乳钵内染料及甲醇用完为止，摇匀，密封瓶口。 ○存室温暗处，储存愈久，则染料溶解、分解就越好，一般储存3个月以上为佳。 (2) 缓冲液： ●缓冲液作用： ○染色对氢离子浓度是十分敏感的，据观察pH值的改变，可使蛋白质与染料形成的化合物重
瑞氏染液配制、使用方法及注意事项
瑞氏染液配制、使用方法及注意事项 南宁市二医院检验科马升俊 1.瑞氏染色的原理： 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物（天青）组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。各种细胞由于其所含化学成分不同，对染料的亲和力也不一样，因此，染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。 2.试剂的配制： 2.1 瑞氏染液的配制： 2.1.1 自配染液:瑞氏染粉0.1g，甲醇（AR）60ml。 将瑞氏染粉放入清洁干燥研钵中，先加少量甲醇，充分研磨使染料溶解，将巳溶解的染料倒入棕色试剂瓶中，未溶解的再加少量甲醇研磨，直至染料完全溶解，甲醇全部用完为止。染液配好后放于室温下，一周后即可使用。新配制染液效果较差，放置时间延长，染色效果越好。久置应密封，以免甲醇挥发或氧化成甲酸。染液中也可加中性甘油2～3ml，除可防止甲醇过早挥发外，也可使细胞着色清晰。 2.1.2 成品瑞氏染液: 现巳有成品瑞氏染液，如四川迈克科技公司出的快速瑞氏染色试剂（500ml/瓶）其只需室温密闭储存，可长期稳定，染色效果好。2.2 缓冲液的配制: 称取磷酸二氢钾（无水）0.3 g，磷酸氢二钠（无水）0.2 g；加蒸馏水至1000 ml使其溶解。配好后磷酸盐缓冲溶液应校正PH值，其范围在PH6.4～6.8即可，后塞紧瓶口备用。 3. 瑞氏染色的使用方法： （以血涂片为例）： 3.1把制好的血涂片编好号，然后将血片平放在染色架上； 3.2加瑞氏染液数滴，使其覆盖整个血膜，固定细胞约1分钟； 3.3滴加等量或稍多的缓冲液（可按1：2滴加），使染液充分混匀，染色5～10分钟；
瑞氏-姬姆萨复合染色液
瑞氏-姬姆萨复合染色液 简介： 瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用。吉姆萨染液由天青Ⅱ与伊红混合而成，染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深，核结构显色不佳，常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。Wright-Giemsa Stain 以进口瑞氏色素和姬姆萨色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片，待涂片自然干燥。 2、 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。 3、 滴加适量Wright-Giemsa Stain 覆盖涂片室温染色。 4、 涂片滴加等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动玻片或采用其他方式混合，使磷酸盐缓冲液与 Wright-Giemsa Stain 混匀室温静置。 5、 步骤3、4亦可以采用如下方法: 取Wright-Giemsa Stain 和磷酸盐缓冲液等量混合， 即为Wright-Giemsa 工作液，滴加该工作液于血液涂片或骨髓涂片上室温静置。 6、 用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。(注: 也可用磷酸盐缓冲液等量稀释后，冲洗玻 片，时间控制在30s 左右。） 7、 干燥。 8、 镜检: 先用低倍镜观察血涂片，再用油镜。 编号 名称 DM0007 2×100ml DM0007 2×500ml Storage 试剂(A): Wright-Giemsa Stain 100ml 500ml RT 避光 试剂(B): 磷酸盐缓冲液 100ml 500ml RT 使用说明书 1份
迪夫快速染色液(Diff-Quik Stain)使用说明书
迪夫快速染色液(Diff-Quik Stain)使用说明书 货号：G1541 规格：2×100mL/2×500mL 保存：室温，避光，有效期12个月。 试剂盒组成： 规格 2×100mL2×500mL Storage 名称 试剂(A):Diff-QuikⅠ100mL500mL RT避光 试剂(B):Diff-QuikⅡ100mL500mL RT避光 产品说明： Diff-Quik染色是在Wright染色基础上改良而来的一种快速染色方法，是细胞学检查中常用的染色方法之一。该染色液采用世界卫生组织(WHO)推荐的快速染色方法而配制，与Wright Stain类似都是利用Romanowsky Stain技术原理改良而来的，染色结果与瑞氏染色液也极其相似，但迪夫快速染色所需的时间极短，一般90s以内即可完成染色。 迪夫快速染色液含固定液，主要用于血细胞涂片、骨髓涂片、阴道分泌物涂片、脱落细胞涂片。Diff-Quik 染色非常适合用于批量浸染，且背景清晰无沉渣。 操作步骤（仅供参考）： 1.常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，自然干燥后用Diff-Quik Fixative固定20s。 2.Diff-QuikⅠ染色5～10s（上下提动玻片2-3次，使染液均匀分布），立即取出。 3.Diff-QuikⅡ染色10～20s（上下提动玻片2-3次，使染液均匀分布），立即取出。 4.水洗后立即趁湿在显微镜下观察。 5.将观察后认为有价值的片子带回实验室，用二甲苯透明，封固、保存。 染色结果： 第1页，共2页
细胞核、白细胞深蓝色 基质、淋巴细胞紫色 细胞质、红细胞粉红色 注意事项： 1.Diff-Quik Fixative是Diff-Quik专用固定液，如使用量大，可用甲醇替代。 2.血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。 3.血细胞涂片染色要求新鲜全血或EDTA抗凝血。 4.骨髓涂片染色要求制备好的涂片在空气中快速摇动或扇干，以防止细胞皱缩变形或因空气潮湿而溶血， 不能用高温或火烤来干燥涂片。 5.阴道分泌物涂片染色要求新鲜标本涂片后，尽快以火焰或酒精固定，以免细胞变形。 6.脱落细胞涂片固定可采用自然干燥或固定液固定。 7.涂片染色中请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液，以免染料沉着于涂片上。 8.染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。 9.染色过深可用甲醇或酒精适当脱色，最好不复染。 10.如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。 11.pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸碱污染，以免影响染色效果。 第2页，共2页
迪夫快速染色液(Diff-Quik Stain)
Leagene 。com 北京雷根生物技术有限公司 迪夫快速染色液(Diff-Quik Stain) 简介： Diff-Quik 染色是在Wright 染色基础上改良而来的一种快速染色方法，是细胞学检查中常用的染色方法之一,染液是采用世界卫生组织(WHO)推荐的快速染色方法而配制，与Wright Stain 类似都是利用Romanowsky Stain 技术原理改良而来的，染色结果与瑞氏染色液也极其相似，但迪夫快速染色所需的时间极短，一般90s 以内即可完成染色。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，自然干燥或酒精灯火焰处理或Diff-Quik Fixative 固定。 2、 Diff-Quik Ⅰ染色。 3、 Diff-Quik Ⅱ染色。 4、 将观察后认为有价值的片子带回实验室，用二甲苯透明，封固、保存。 注意事项： 1、 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。 2、 血细胞涂片染色要求新鲜全血或EDTA 抗凝血。 3、 骨髓涂片染色要求制备好的涂片在空气中快速摇动或扇干，以防止细胞皱缩变形或因空 气潮湿而溶血，不能用高温或火烤来干燥涂片。 4、 涂片染色中请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液，以免染料沉着于 涂片上。 5、 染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。 6、 染色过深可用甲醇或酒精适当脱色，最好不复染。 有效期： 12个月有效。 编号 名称 DA0098 3×100ml DA0098 3×500ml Storage 试剂(A): Diff-Quik Fixative 100ml 500ml RT 试剂(B): Diff-Quik Ⅰ 100ml 500ml RT 避光 试剂(C): Diff-Quik Ⅱ 100ml 500ml RT 避光 使用说明书 1份
瑞氏吉姆萨复合染色液
瑞氏-吉姆萨复合染色液(Wright-Giemsa stain ) 产品简介： 瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用。吉姆萨染液由天青2与伊红混合而成，染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳，常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。 Leagene Wright-Giemsa stain以进口的瑞氏色素和吉姆萨色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。染液中加中性甘油，防止甲醇挥发或氧化，同时也可使血细胞染色较清晰。 Leagene Wright-Giemsa stain的特点： 由瑞氏-吉姆萨复合染色液和磷酸盐缓冲液组成，等量混合使用或分别处理标本使用。 产品组成： 主要成分： 试剂(A): 主要由瑞氏色素、吉姆萨色素、甲醇等组成。 试剂(B): 主要由磷酸盐等组成。 自备材料： 1、载玻片 2、蒸馏水或去离子水 3、染色架 4、显微镜 操作步骤（仅供参考）： 1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片，待涂片自然干燥。
2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。 3、滴加Leagene Wright-Giemsa stain覆盖涂片，室温染色1～2min。 4、涂片滴加等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动玻片或采用其他方式混合，使磷酸盐缓冲液与 Wright-Giemsa stain混匀，室温静置3～10min。 5、步骤3、4亦可以采用如下方法：取Leagene Wright-Giemsa stain和磷酸盐缓冲液 等量混合后，即为Wright-Giemsa stain工作液，滴加工作液于血液涂片或骨髓涂片上，室温静置3～10min。 6、用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。（注：也可用磷酸盐缓冲液等量稀释后，冲洗 玻片，时间控制在30s左右。） 7、干燥、镜检: 先用低倍镜观察血涂片，再用油镜。 染色结果： 细菌、细胞核蓝色 组织细胞的细胞质、血红蛋白、嗜酸性颗粒粉红或橘红色 注意事项： 1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色结果。 2、涂片染色中，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液，以免染料沉着 于涂片上。 3、染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。 4、染色过深可用甲醇或酒精适当脱色，最好不复染。 5、如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液的浓度。 6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期：12个月有效。 相关产品： 产品编号 产品名称 DM0002吉姆萨/姬姆萨染色液(Giemsa stain,1:9) DM0005瑞氏染色液(Wright Stain ) DM0015标准革兰氏染色试剂盒(Gram Stain) DM0035抗酸染色试剂盒(Kinyoun冷染法) DM0080乳酸酚棉蓝染色液
瑞氏吉姆萨复合染色液
外周血涂片的制作方法 1、采血：胶头滴管吸取血液，血液直接滴加到洗净烘干并且硅化过的载玻片的一头。 2、推片：将推片的平齐端置载玻片上血滴的稍前方，将推片略向后移使与血液相接触，血液遂于推片与载玻片的夹角间散开。以约30度的夹角向前均匀地推动推片即可制成血涂片。其薄厚度要适中，分布均匀而无空泡，边缘整齐。 3、固定：推片做好后，涂片后潮干固定，以免细胞漂落太多，影响制片质量， 甲醇固定液固定：涂片直接浸入固定液内，因固定液充足，固定效果较好。但细胞易脱落而发生交叉污染，因此应该分瓶固定，固定液回收时应过滤。多数标本用此法固定，固定时间15-30分钟。 4、染色：瑞氏-基姆萨双染 1）从固定缸里取出载片后，在室温下通风晾干。将载片平放在玻璃板上准备染色。 2）所用的两种染料事先过滤好（染料中有颗粒物，会沉淀在载玻片上影响载片的质量） 3）将染料滴加到载玻片上以后，让其均匀覆盖住载片上的血细胞，染色时间约为2到3分钟。等瑞氏染液有变红的趋势时，迅速滴加与瑞氏染液等量的PBS 溶液。继续染色2到3分钟。 4）染色时间到后，用PBS溶液冲片，小股水流，防止将大量的细胞从载片上冲落下来从而影响以后的观察。冲片结束后将载片放到阴凉处风干。 5）在玻璃板上放好牙签，将风干的载片倒扣在一根牙签上，从背面滴加基姆萨染液进行扣染。染色时间约为10分钟。时间到后用蒸馏水冲片，洗净染液后常温下风干。 5、封片：中性树胶封片，制作成永久涂片。 6、显微观察：将干燥后的血涂片置显微镜下观察。用低倍镜观察血涂片体、尾交界处的血细胞。在显微镜下，成熟红细胞染成粉红色；血小板染成紫色；中性粒细胞胞质染成粉红色，含紫红色颗粒；嗜酸性粒细胞含大的桔黄色颗粒；嗜碱性粒细胞胞质含有大量深紫蓝色颗粒；单核细胞胞质染成灰蓝色；淋巴细胞胞质染成淡蓝色。 所需材料：硅化过的载玻片，推片，甲醇瑞氏-基姆萨双染，过滤，PBS，牙签，蒸馏水，中性树胶，显微镜，吸耳球 1．载玻片使用前，必须仔细清洗，并用乙醇或软布清洁。 2．推片选择边缘光滑的载玻片，在两角分别作斜线标记，然后用玻璃切割刀裁去两角，制成约15mm宽度的推片。 目的：制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片
瑞氏染色原理及作用
瑞氏染色原理及作用 本篇文章由专业生化试剂供应商岚兴生物为您提供。 瑞氏染液由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，溶于甲醇 ，后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。瑞氏染色法就是用瑞氏染色液对细菌进行染色。那么瑞氏染色原理是什么？ 瑞氏染色原理： 瑞氏染料是由碱性染料美蓝（ Methvlem blue ）和酸性染料黄色伊红 （ Eostm Y ）合称伊红美蓝 染料即瑞氏 （美蓝－伊红Y）染料。伊红钠盐的有色部分为阴离子，无色部分为阳离子，其有色部分为酸性，故称伊红为酸性染料。美蓝通常为氯盐是碱性的，美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐，其有色部分为阳离子，无色部分为阴离子，恰与伊红钠盐相反。 为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须进行染色。瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。 细胞的各大种成分均由蛋白质构成，由于蛋白质是两性电解质，所带正电荷的数量随溶液pH而定。对某一蛋白质而言，如环境pH
瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。 瑞氏染液染色鉴定 瑞氏或姬姆萨染色液鉴定：刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定： 1．取1滴染液于乳白玻板上，自行迅速扩散开，其颜色变紫红色，且有伪足形成。 2．取1滴染液加1滴缓冲液，染液由深蓝色立即变为紫红色。 3．取血片或骨髓片进行试染检查，观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况，pH是否合适及染色合适时间。如有上述变化，表明染液合格，可供使用。 以上为瑞氏染色原理，瑞氏染色是目前最常用而又最简单的染色方法。瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美蓝混合经化学作用后，变成中性之 伊红化美蓝，久置后，经氧化而含有天青。此三种染料分别和细胞核及浆中的NH3+和COO-等结合，使细胞核及胞浆着色。由于系中性染料，又有缓冲液调节酸碱度，所以细胞受染后，蓝红等颜色都较适中，核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚。
%8d快速瑞氏姬姆萨染色液的配制和应用
８２８ 晦学理沧与实践２（３０２年第１５巷第７期ＪＭｅｄ＇１３１ｃｏｒ＆ＰｒａｃＶｏｌ１５，Ｎｏ７－Ｊｕｌｙ２００２———一————一———一———————————一————— 正确，耗时ｊ３～１５１。，一Ｆ均鉴定值为８７８％．比常规鉴定法快些，但细菌鉴定的符音率相对低些。刈链球菌鉴定的符台率为７ｌ４％，耗州３。１５ｈ．其中，化脓性链球菌、Ｂ群链球菌在３ｈ即可鉴定出米，鉴定值均在９２％以上。从对肺炎链球荫的鉴定情况束看，卫生部一北发了３次（（９７０４、９８１０、２００６），Ｈ有第３次鉴定出来．＝分析原因有：链球菌不易乳化，而且很难混匀．存实际操作叫，可将菌液浓度词到１＃＃”麦氏单位；另一方面，所发质控菌株来自呼吸道感染，多为混台菌，婀不能丹纯，会影响鉴定结果。 ３．３革兰氏阳｝生杆蔺一一共发了５株，Ｖｉｔｅｋ一３２对ｃ＋ｂ的鉴定不如Ｇ＋ｃ．在做ｃ＋ｃ的鉴定时需注意：①正确观察细菌溶血情况和操作触酶试验；②注意镜下细菌的形态和排列方式； ③将Ｖｉｉｅｋ一３２的生化档定结果采用双歧检索表进行鉴定。在所发的５株荫巾．笔者根据Ｖｉｔｅｋ一３２的生化反应结果．结台荫落颜色、形态、溶血情况，触酶试验，完成ｒ９７０１、９８０５、９８０７、９９０１、２００２这５株菌的鉴定．且完全正确。３４时真菌的鉴定，除９７０２鉴定与质控菌株不符外，其余５株垒部鉴定正确．ｊ：ｌ鉴定值均在９９％以上，耗肘２４～４８ｈ，较传统方法提前２４—４８ｈ，总结４年中Ｖｌｔｅｋ一３２对真菌的鉴定情毗，应注意：①在用Ｖｉｌｅｋ一３２测试时，应适当结合形态学观察； ②应注意孵育时间：有的真菌在３０℃培养２４ｈ后．ＹＢＣ卡上机读数可直接鉴定出来，但有的需再孵育２４ｈ再次读数，切记不能将ＹＢＣ昔直接孵育４８ｈ再读数，因为ＹＢＣ暑培养２４ｈ和培养４８ｔ．后．判断备生化反应孔陌性界值是不同的。 综上所述，Ｖｉｔｅｋ．３２的运用，有勘于实验室快速诊断，提高工作效率，但同时，检验人员应加强微生物基础知识和技能的培训，加强对仪器原理的理解，严格按仪器操作规程操作，怍好室内质控工作．只有这样，才能更快，更好地为临床提供可靠的诊断和治疗依据。 收稿日期２００２—０３—１０ （编辑润东） 一种快速瑞氏．姬姆萨染色液的配制和应用许艳英河北省秦皇岛市山海关铁路医院０６６２０５ 传统的瑞氏染色法染色时间长，胞棱着色差，而姬姆萨染色法虽然胞核着色好，但胞浆染色欠佳。本文介绍～种瑞氏一姬姆萨染色液，它具有对胞浆和胞核的染色效果好，结构清晰，染色速度快，简单易行等优点，使染色在３０ｓ内～步完成，此染色液尤其适用于临床常规检验。 １染色液的配制 Ｉ．１储存液瑞氏染粉２．Ｏｇ，聚乙烯咯烷（ｐＶＰ）２０９，姬姆萨染粉０６９，甲醇（ＡＲ）１０００ｍＬ，天青Ⅱ０．６９，甘油１０ｍＬ。充分混匀，溶解即可。 ｌ２磷酸盐缓冲液（ｐＨ６２—６８）磷酸二氢钾６６４９，磷酸氢二钠０２５９，碳酸４ｍＬ。加蒸馏水至１００ｍＬ。 Ｉ３染色应用滤将上述储存液、缓冲液按３：１比倒混合。２染色方法 ２ｌ制作合格的血片，血膜自然干燥后滴加染色应用液铺满血膜（或将血涂片浸人染色缸内），３０ｓ后用自米水冲洗，待自然干燥或用滤纸吸于后镜检。 ２２骨髓片，取合格的骨髓涂片，滴加染色应用液盖满涂片区，染５一ｌＯｍｉｎ后用自来水冲洗，待干镜检。 ３结果 札配置染色应用液之日起，对染色进行了５０ｄ的观察。３１吸光度比值。取染色液２０ｍＬ加人１０ｍＬ甲醇（ｈａ）中，混匀，用７２１分光光度计和ｌｅｎａ比色杯以甲醇（ＡＲ）为空白，分别读取Ａ＝６５（Ｉｎｍ．Ａ＝５２５ｎｍ的哎光度值，按ＲＡ＝６５０ⅡｍＡ／５２５ｎｍＡ汁葬５０ｄ内的ＲＡ．结果ＲＡ从开始的２．１５降至１５０。３２ｐＨ值测定。用广泛棚试纸每天测量染色ｐＨ值，５０ｄ内ｐｌｌ值从开始的８０降至７０。 ３３分别用商倍镜、油镜舰察ＲＢＣ．ＷＢＣ着色情况，每天４ 张血片（２张快速，２张原法）共５０ｄ。 配制染色液当天，染色３０ｓ，红细胞呈浅灰色，中性粒细胞核呈紫红色，浆呈浅灰色，中性颗粒不清楚，嗜酸性颗粒呈桔黄色，嗜碱性颗粒呈暗紫色，淋巴细胞和单校细胞棱星紫红色，浆呈浅灰色，总的说来染色结果稍偏碱。从第４ｄ起中性颗粒明显，呈淡紫红色，２周后偏碱现象基本消除，染色效果明显好于原法。各阶段白细胞胞浆中的颗粒能显示各种细胞的特有色彩，核染紫红色，染色质清楚，粗细松紧可辩。反复试验，新配染液应用液如延长染色时间至１５ｎ，Ｊｎ以上，偏碱现象可以得到纠正。 正常ＲＢＣ呈浅灰色，中央稍拔而硌有蝶形感．中性粒缅胞核呈紫红色．浆呈浅蓝色，中性颗粒呈淡紫红色，嗜酸性颗粒呈桔红色，嗜碱性颗粒呈暗紫色，单核细胞的胞浆颗粒呈细小救紫红色，核呈紫红色，胞浆呈灰蓝色，淋巴细胞核呈紫红色，浆呈谈蓝色。各种颗粒区分明显．所有细胞核着色探浅不同的紫红色，棱染色质随各系细胞及发育阶段不同而糨细结构清晰，核仁清楚。浆细胞系统胞浆染深蓝，天蓝及多染。幼稚红缅胞胞装染不透明探蓝到多染。 笔者采用门诊、病房病人同时各取２张血片作对照，对１５００多例血片用快速染色液与常规瑞氏染色液同时染色，结果表明快速瑞氏一姬姆萨染色液好片率明显高于常规瑞氏染色液，分别为６０％和２９％；温度对快速瑞氏ｎ姬姆萨染色液无明显影响．而对常规瑞氏染色液影响显著，温度越低．所需的染色时间也就越长；染色时间２ｒａｉｎ和５ｒａｉｎ对快速染色液无明显影响，而常规瑞氏染色法一般４ｍｌｎ后才有较好的染片，染色时问２ｍｌｎ和５ｍｌｎ有着显著的差异。 收稿日期２００２—０３—１５（编辑二寸） 万方数据
瑞氏染色法、
瑞氏染色法： 为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及异常变化，血涂片必须进行染色。血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变而来。目前常用瑞氏染色法。 【目的】掌握血涂片的染色方法。 【原理】把已制成的血细胞分布均匀的薄膜涂片，用复合染料染色。其着色的原理包括物理吸附及化学亲和作用。不同种类的细胞及同一细胞的不同成分及不结构，对酸性及碱性染料的结合能力不同，因而使不同种类的细胞染成不同的颜色，呈现各自的特点。 【器材】我们今天的器材是：载玻片、推片、吸耳球、显微镜。 【试剂】 1瑞氏染料由酸性染料伊红(eosin,E)和碱性染料亚甲蓝(methylene blue,M|+)组成的复合染料。 ★亚甲蓝(又名美蓝)为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种结构，通常为氯盐，即氯化美蓝。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料(即天青)。 ★伊红通常为钠盐。 ★将适量的伊红，美蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料。 甲醇的作用：一是溶解美蓝和伊红ME，使其解离为M+和E+，后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色；二是具有很强的脱水作用，可固定细胞的形态，当细胞发生凝固时，蛋白质被沉淀为颗粒状或者网状，增加细胞结构的表面积，提高对染料的吸附作用，增强染色效果。 2瑞氏染液的配制：取瑞氏染料1.0g、甲醇600ml、甘油15ml。 操作如下：将全部染料放入清洁干燥的乳钵中，先加少量甲醇慢慢地研磨(至少半小时)，以使染料充分溶解，再加一些甲醇混匀，然后将溶解的部分倒入洁净的棕色瓶内，乳钵内剩余的未溶解的染料，再加入少许甲醇细研，如此多次研磨，直至染料全部溶解，甲醇用完为止。再加15ml甘油，密闭保存。这只就是我们配制的I液。 说明：新鲜配制的染液偏碱，染色效果较差，经在室温下贮存一定时间，美蓝逐渐转变为天青B后方可使用，这一过程称染料成熟。放置时间愈久，天青愈多，染色效果也就越好。但必须盖严瓶口，以免甲醇挥发或氧化成甲酸。染液中也可加中性甘油3ml，防止甲醇挥发或氧化，同时也可使血细胞染色较清晰，但我们所用的甲醇必须纯净。 II液：又称磷酸盐缓冲液(PH6.4-6.8)，包含磷酸二氢钾0.3g，磷酸氢二钠0.2g、蒸馏水加至1000ml。配好后用磷酸盐溶液校正PH，如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。也可用蒸馏水代替。 3染色：①血涂片自然干燥后，用蜡笔在两端画线，以防染色时染液外溢。随后将玻片平置于染色架上，滴加染液3-5滴，使其盖满血涂片，大约1分钟后，滴加等量或稍多的II液，用吸耳球轻轻混匀。