实验十一 玫瑰花环形成试验
医学免疫学实验指导
实验十一玫瑰花环形成试验由长沙达尔锋生物科技有限公司整理
【文章介绍】
实验是映证理论，对学生进行基本技能训练和培养科学研究能力的手段。BioRike博瑞克根据《医学免疫学实验指导》一书系统整理了14个实验项目，每个实验说明实验目的，实验原理，实验内容方法，实验要求及注意事项，希望广大师生能够从中有所收获。
BioRike简介：BioRike（中文简称“博瑞克”）是长沙达尔锋生物科技有限公司旗下的产品品牌,由旗下专业的生命科学实验室BioRike博瑞克研发和生产。BioRike是一家致力于生命科学和生物技术领域的高科技实验室，专门从事以Elisa试剂盒、抗体、细胞因子、免疫检测试剂盒、血清等免疫学产品为主的生物试剂的研发与销售。
【实验目的】
1.掌握淋巴细胞转换试验的原理和方法。
2.熟悉淋巴细胞的形态特征。
【实验目的】
1.掌握淋巴细胞转换试验的原理和方法。
2.熟悉淋巴细胞的形态特征。
【实验原理】
人外周血T淋巴细胞表面具有绵羊红细胞受体，在体外一定条件下将人淋巴细胞与绵羊红细胞两者混合，可以形成以T细胞为中心，周围黏附着多个绵羊红细胞的花环，为E花环试验（erythrocyte rosette test）。应用最广的有总E花环试验（Et,t为total的缩写）和活性E 花环试验（Ea,a为active 的缩写）。Et代表被检标本中T淋巴细胞的总数，Ea则反映具有高亲和力绵羊红细胞受体的T细胞数，这部分T细胞的免疫学功能更能反映机体细胞免疫功能和动态变化。E花环试验主要用于了解机体细胞免疫功能。广泛应用于肿瘤免疫、移植免疫及免疫性疾病的研究，为某些疾病诊断和防治提供免疫学方面的重要参考。
【实验材料】
1.1%肝素水溶液。
2.Hanks'液(无Ca2+、Mg2+)PH7.4-7.6。
3.淋巴细胞分离液（市售商品）。
4.绵羊红细胞悬液：取新鲜绵羊血以1:1的比例与爱氏血球保存液混合，置4℃备用，2周内使用。
5.0.8% 戊二醛、姬姆萨染液。
6.离心机、水浴箱，显微镜等。
【实验方法】
1.无菌抽取患者静脉血1毫升，加入事先有0.05毫升肝素液的试管内,混匀抗凝。
2.加Hanks'液1毫升于上述试管稀释血液，然后缓慢加入盛有1毫升淋巴细胞分离液的试管中，注意不要打乱交界液面。
3.2000 转/分钟水平离心20分钟。
4.小心吸取血浆层和分离液层之间的白色膜状的淋巴细胞层，Hanks'液洗涤两次，最后用含20%小牛血清的Hanks'液将细胞调成2×106/毫升。
5.将爱氏液保存的绵羊红细胞用Hanks'液洗涤三次，弃上清，将压积红细胞用Hanks' 液配成1% 细胞悬液（8×10 7 / 毫升）。
6.Et 试验：将淋巴细胞悬液0.1 毫升和绵羊红细胞0.1 毫升混匀（细胞数合适比例为1 :100 ），37 ℃水浴10 分钟，低速离心500 转/ 分钟，5 分钟，再置4 ℃2小时或过夜。取出后弃去大部分上清，轻轻摇匀，加0.8% 戊二醛2 滴固定数分钟后涂片，自然干燥后加1 滴姬姆萨染液，覆以盖玻片，高倍镜观察。凡淋巴细胞周围吸附3 个或以上绵羊红细胞者为阳性花结细胞。
7.Ea试验:将淋巴细胞悬液0.1毫升和绵羊红细胞0.02毫升混匀（两者比例为1:20）,低速离心500转/分钟，5分钟,弃去大部分上清，轻轻摇匀，加0.8%戊二醛2滴固定数分钟后涂片，其余程序同Et试验。
【实验结果】
随机计数200 个淋巴细胞，记录其中形成花结的和未形成花结的淋巴细胞数，然后根据下列公式计算E花结形成百分率：E花结形成百分率= 形成花结细胞数/（花结细胞数+未形成花结细胞数）×100%，一般正常值Et为50-70%，Ea正常值为25—35%。
【注意事项】
1.一定要用新鲜血，否则会影响细胞活性，且绵羊红细胞受体会从T细胞表面脱落。
2.计数前，重悬和混匀细胞要轻柔，否则花结会散开消失。
思考题：
3.E 花环形成的原理是什么？为什么测Ea比Et更有意义？
玫瑰精油的粗提取实验
玫瑰精油的提取实验 Rose's essential oil extraction experiments 【引言】从玫瑰花中提取出的玫瑰油称为“液体黄金”，是世界香料工业不可取代的原料，多用于制造高级香水等化妆品。工业上大约5kg玫瑰花瓣才能提取出一滴纯正的玫瑰精油。提取出的玫瑰油不含有任何添加剂或化学原料，是纯天然的护肤品，具有极好的抗衰老和止痒作用，能够促进细胞再生、防止肌肤老化、平抚肌肤细纹，还具有使人放松、愉悦心情的功效。 【Introduction】Be called "the liquid gold " from the rose oil drawing out in the rose, the raw material being that world spice industry is not allowed to replace, is used to make the high-grade perfume waiting for cosmetics much. On industry, 5 kg roseleafs ability extracts out one drops of pure extract of roses oil approximately. The rose oil drawing out is not contained having any additive or chemistry raw material , is not is a pure natural skin-care article , is not have extremely good resisting growing old composing in reply an effect relieving itching , is not is able to boost a cell regenerating , is not prevent skin ageing , the tie from stroking thin lines of skin lightly, have the effect using delighted to loosen, state of mind of person. 【摘要】植物芳香油具有较强的挥发性，还能随水蒸气蒸发，因此可以利用蒸馏法提取植物芳香油。法国香水业作为一种工业生产，最初就是通过蒸馏法来获得芳香油的。玫瑰油、薄荷油、肉桂油、熏衣草油、檀香油等主要由蒸馏法获得。 本实验主要通过水蒸气蒸馏法，粗提取玫瑰精油。利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，油水混合物又会重新分出油层和水层。 理想实验装置如下图，由条件限制，实验装置较简陋，与下图稍有不同。 【Abstract】Plant aromatic oil is highly volatile, but also with the evaporation of water vapor, it can use the distillation of aromatic oil extraction plants. French perfume industry as an industrial production, is the first to get through the distillation of aromatic oil. Rose oil, mint oil, cinnamon oil, lavender oil, sandalwood oil obtained by distillation. The experiment passes steam distillation mainly, oil picking up extract of roses roughly. Compound , the queen who cools down making use of steam stronger fugacity plant aromatic oil to be carried out , forming fringe benefit, fringe benefit the compound may divide out the oil layer and water-course again. The experiment device pursues an ideal as follows , reason condition restricts , the experiment device is simpler and cruder, time of picture has a little of diversity.
e玫瑰花环实验实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除e玫瑰花环实验实验报告 篇一：e花环实验报告 e花环实验 一.实验原理 人外周血T淋巴细胞表面具有绵羊红细胞(sRbc)受体，能够与sRbc结合形成花环样细胞团(即e花环)。已证实e 受体是人类T细胞所特有的表面标志。当T细胞与sRbc混合后，sRbc便粘附于T细胞表面，呈现花环状。通过花环形成检查T细胞的方法，称为e花环形成试验。根据花环形成的多少，可测知T细胞的数目，从而间接了解机体细胞免疫功能状态，判断疾病的预后，考核药物疗效等。由于T细胞的异质性，其对sRbc的亲和力亦不同，因而T细胞可形成不同类型的e花环，其中在4℃放置1h以上，所形成的花环数代表T细胞总数，称为总花环(et花环)，而淋巴细胞与sRbc混合后不经4℃作用立即反应形成的花环称为活性花环(ea花环)。 二.实验结果（用图示法表示）
三.讨论①.有的细胞能形成玫瑰花环的原因：人T细胞膜上具有cD2分子，能够与sRbc上的LFA-3结合，从而形成以人T细胞为中心，sRbc环绕四周，形状如玫瑰花环的细胞集团，即e玫瑰花环。此外，nK细胞膜上也有cD2分子，也能形成玫瑰花环，但是nK细胞的量非常少，形成玫瑰花环的数量也少。②.有的细胞不能形成玫瑰花环的原因：a.人血液中含有单核巨噬细胞，其表面没有cD2分子，不能与sRbc表面的LFA-3结合，因此不能形成玫瑰花环。b.实验中所用血液不够新鲜，也可能导致不能够形成玫瑰花环。c.时间不够长，导致T细胞表面的cD2分子不能够与sRbc上的LFA-3充分结合，因此只有一部分sRbc与人T细胞结合，其余sRbc没能够与人T细胞结合形成玫瑰花环。 2.sRbc与淋巴细胞混合后离心速度不能过高，在et花环试验中，置4℃应至少1h以上或过夜。 3.绵羊红细胞以保存1周内最好，超过2周则与淋巴细胞结合力下降，超过5～6周则不能再用。实验室的绵羊红细胞保存的时间太长，导致其与淋巴细胞的结合能力下降，所以有的细胞可以形成e花环，而有的细胞不可以形成e花环。 4.et花环试验sRbc与淋巴细胞混合比例以100∶1～200∶1为宜，ea花环试验中以10∶1～20∶1为宜；淋巴细胞离体后不能超过6h，否则会影响花环形成率。
玫瑰精油成分检测
玫瑰精油成分检测 玫瑰是蔷薇科蔷薇属落叶灌木,从其花瓣中提取的玫瑰精油浓缩了花中的各种芬芳物质。玫瑰精油,主要应用于芳香疗法和香精香料调配。当前玫瑰精油需求量逐年增加并且供不应求。 采用水蒸汽蒸馏法从玫瑰花中提取获得精油,得率为0.023%。按照玫瑰精油标准方法测定精油的物理指标和主要组分,检测结果表明：该精油为黄色液体,具有天然的玫瑰花香,其物理指标和特征组分的百分含量符合标准要求,且主要组分构成与标准中保加利亚玫瑰精油相似。气相色谱-质谱配HP-5MS毛细管柱结合直观推导式演进特征投影法分析玫瑰精油,共鉴定出73个组分,其中香质组分较为完整,高品质玫瑰精油的标识成分β-突厥烯酮也被检测出。 采用HELP法实现了对GC-MS总离子流色谱图混合峰或掺杂峰的解析,特别是成功辨析了L-香茅醇和橙花醇的混合色谱峰,重新确定了它们的百分含量,使对主要组分的分析结果更加接近依据分析的结果。用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)法、邻苯三酚-鲁米诺发光体系和邻菲罗啉-硫酸铜-抗坏血酸-过氧化氢发光体系测定玫瑰精油和玫瑰花渣乙醇提取物的抗氧化活性。在1.5- 50mg/mL的水平内,玫瑰精油对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基具有一定的清除活性。以IC5o比值衡量,玫瑰精油对DPPH·的清除能力是BHT 的1.63%、菠萝多酚的0.91%,对·02和·OH的清除能力分别是菠萝多酚的11.63%和49.85%；玫瑰花渣乙醇提取物对·02的清除能力为菠萝多酚的62.29%,对DPPH·和·OH的清除率则与菠萝多酚相当。
试制了以玫瑰精油作为主香剂的玫瑰香精,该类香精可以添加到一些日化用品、食品及烟草中。此外,GC-MS分析玫瑰露的精油组分,结果表明玫瑰露中芳樟醇、苯乙醇、α-松油醇、橙花醇、L-香茅醇、香叶醇、丁香酚和甲基丁香酚的总百分含量达到88.10%,高于玫瑰精油的54.74%；测定玫瑰花渣乙醇提取物的总黄酮含量,检测结果表明其含量较高,达到8.85%,且玫瑰花渣乙醇提取物抗氧化活性较强,因此玫瑰露和玫瑰花渣都具有一定的应用开发价值。 北京清析技术研究院在华北、华南、华中、华东、西北等地区，建立12大分院及配套实验室，秉承母校校训，以严谨、求实的工作态度，为数千家企业客户提供产品研发、成分分析、材料检测、工业诊断、模拟测试、大型仪器测试、可靠性验证等专业技术服务，还为全国范围内的公安局、法院、检察院、律师事务所、司法鉴定中心、医院、高等院校、中国科学院提供专业技术服务。 经过几十年的团队技术积累，北京清析技术研究院下设环境检测事业部、食品保健品检测事业部、药品化妆品检测事业部、失效分析事业部、公检法服务事业部、高校科研服务事业部、成分分析/配方分析事业部、生物医药事业部等10大部门。
《香樟精油的提取》的实验设计
《香樟精油的提取》的实验设计 一、实验背景 香料是一种能被嗅感嗅出气味和被味感品出香味的物质，是用以调制香精的原料。植物性天然香料也称植物性精油(essential oil)，是由植物的花、叶、茎、根和果实，或者树木的叶、木质、树皮和树根中提取的易挥发芳香组分的混合物。 香料的发展历史悠久，从黄帝神农氏时代人们采集树皮、草根作为医药用品来驱疫避秽开始，现已有5000多年的历史。起初人们把这些有香味的物质作为敬神拜福，清净身心之用，也用于祭祀和丧葬方面，后逐渐用于饮食、装饰和美容。大约在8-10世纪，人们已经知道用蒸馏法分离香料。1370年第一种用乙醇提取的香水—匈牙利水(Eaudela Reimed Hongarie)出现了，开始只是从迷迭香中蒸馏制得，其后才逐渐从薰衣草等植物中制得。自1420年，人们开始在蒸馏中采用蛇形冷凝器后，精油提取发展迅速，法国的格拉斯(Grasse)因生产花油和香水，而成为世界著名的天然香料(特别是香花)的生产基地。此后各地逐步采用蒸馏提取精油，同时从柑桔树的花、果实及叶中提取精油，这样就从香料植物固体转变成液体，提取了植物中的精油，这是划时代的进展。18世纪后，天然香料的提取方法也随着化学工业和机械工业的发展而发展，当时除了水蒸气蒸馏法外，天然香料还可以通过减压分馏和水蒸气蒸馏的方法而得到提纯和单离，然后单离物再通过化学合成方法获得新香料，这样单离合成香料就在19世纪下半时期诞生了。那时，挥发性溶剂浸提法也开始应用。其后，天然香料制造者开始用手工压榨提取精油，进而再发展到用机器进行冷榨、冷磨方法来提取一些精油，使得许多精油的品质得到大大改善，这为饮料、食品的加香提供了极有利的条件。随着天然香料应用范围不断扩大，香料工业急剧发展，天然香料提取技术也得到不断改进。如今，植物芳香油广泛地应用于轻工、化妆品、饮料和食品制造等方面。在本课题中，我们将了解提取植物芳香油的原理，设计简单的实验装置，从香樟中提取芳香油。
免疫学实验报告
实验报告一 姓名：王亚斌班级：生物技术12（1）学号：2012332860026 实验一：_淋巴细胞的分离 一、实验目的 1.熟悉人外周血淋巴细胞的组成 2.熟悉人外周血淋巴细胞分离的方法 3.熟悉密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理和方法 二、方法步骤、观察内容 1、采静脉血2ml加入抗凝管，轻轻摇动试管，混匀，5min后加入Hank's 液2ml，手动轻轻摇匀。 2、将抗凝血全部沿管壁缓慢加至另一含2ml淋巴细胞分离液管的液面上，注意保持两种液体界面清晰。 3、将试管平衡后置水平式离心机，1000rpm离心20min。 4、用毛细吸管仔细吸取血浆与分层液界面处淋巴细胞层至一刻度离心管内。 5、加入5倍体积的Hank's液，手动旋转试管使液体混匀，1000rpm离心10min，弃上清，沉淀即主要为淋巴细胞（或单位个核细胞）。加入含10%灭活小牛血清Hank’s液1 ml，混匀后进行计数。 （备注：如做淋巴细胞转化或其它培养，所用试剂、器材应是无菌的。） 6.细胞存活率检测：取10ul淋巴细胞悬液加入0.4%台昐蓝染色液10ul，混匀。取10ul加入血细胞计数板，精制片刻，置显微镜高倍镜下观察。 三、观察结果
利用显微镜观察如上图所示。单个核细胞总数=（四个大方格中单个核细胞总数/4）x稀释倍数x细胞悬液毫升数x10的四次方 利用细胞计数方法得知总细胞数为639. 根据细胞存活率=活细胞数/（活细胞+死细胞）x100%=（639-26）/639=96% 活细胞不折色，折光性强。死细胞由于染料可渗入细胞内，故死亡细胞染成蓝色，死细胞体积较大，无光泽。 四、分析讨论 1. 人外周血中的淋巴细胞组成？ 2. 根据细胞的表面标志分离淋巴细胞的原理是什么？ 1.答：血液循环中的淋巴细胞。主要由T细胞(占70%～80%)和B细胞(占20%～30%)组成 2.答：外周血中单个核细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同.淋巴细胞分离液是一种密度介于1.075∽1.090之间而近似于等渗的溶液,用它做密度梯度离心,使一定密度 的细胞按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离.
玫瑰精油的提取说课稿
《植物芳香油的提取》说课稿 一、概述 （一）教学内容分析 《植物芳香油的提取》是普通高中课程标准实验教科书生物选修1专题6课题1的内容。课程标准的要求是“研究从生物材料中提取某些特定成分”。本课题通过设计简易的实验装置来提取玫瑰精油和橘皮精油，使学生了解提取植物芳香油的基本原理和初步学会这些植物芳香油的提取技术：蒸馏法和压榨法。实践这些技术，不仅能够加深学生对植物有效成分的认识、增进对实验原理的理解，而且能够锻炼学生设计和安装实验装置的能力。 （二）教学对象分析 高二的学生在化学课上学习过有关蒸馏和萃取的知识，也具一定的有机化学基础，他们有较强的求新求异的心理，团队合作意识强。但对设计实验、评价实验的宏观把握性欠缺；缺乏一定的预见性和持久性；对不同实验原料的性质了解不足，需要教师合理组织和引导。 二、说教学目标 知识与技能 1、说出提取植物芳香油的常见方法和基本原理。 2、掌握玫瑰精油和橘皮精油的提取方法和原理。 过程与方法 1、尝试根据常见的实验材料选择恰当的提取方法。 2、设计简易的实验装置来提取植物芳香油。 情感态度与价值观 1、形成严谨、科学、务实的态度和精神。 2、通过小组间合作提高团队合作意识。 三、说教学重点、难点 教学重点：植物芳香油的提取技术；针对原料的不同特点，采取不同的提取方法。 教学难点：运用水蒸气蒸馏法、压榨法从植物材料中提取芳香
油实验设备的安装和使用。 四、说教学策略与方法 讲授法、自主讨论法、合作交流法、演示法。 五、说教学资源 教材、PPT、导学案、交互式白板课件、橘皮精油的提取视频、玫瑰花、橘子皮。 六、说教学过程 教学 环节 教师活动学生活动设计意图 创设情境导入新课以送人玫瑰手留余香为例，引出玫 瑰中具有能产生香气的物质，被人 提取出来可以制成玫瑰精油。 完成上节课布置的收集资料的作 业。 1.天然香料的主要来源。 2简要介绍几种你所熟知的精油 （学生收集资料完成）。 学生以小组形式收 集资料，小组代表 展示收集到的问题 答案。 展示收集到的资料， 培养学生独立搜集 整理资料、语言组 织、语言表达的能 力。 阅读教材回答问题阅读教材P72自学完成“植物芳香 油的提取方法”，并回答问题。 植物芳香油的提取方法有哪些？ 每种方法的原理是什么？ 学生自主学习，阅 读教材72页，归纳 出问题答案并回 答。 通过讨论，结合已学 有机物知识，总结出 提取方法和提取原 理。 探究实验蒸馏提取玫瑰精油介绍玫瑰精油的原理和性质。 提问：玫瑰精油该采取哪种提取方 法？ 利用PPT展示图片，做菜时锅盖会 学生根据玫瑰精油 的性质思考后回答 ——水蒸气蒸馏 法。 利用学生已有的有 机化学知识为本节 课服务，引导学生将 化学知识用于生物 学科的学习，认同学
玫瑰提取工艺
玫瑰提取工艺 摘要：玫瑰花是一种具有很高的食用价值和药用价值的花卉. 目前, 玫瑰花最主要的用途是作为玫瑰精油的 提取原料, 玫瑰鲜花用水蒸气蒸馏提取玫瑰油后，玫瑰花渣中还残留相当多的玫瑰精油。新鲜的玫瑰花渣经离心脱水后，用有机溶剂浸提，经浓缩、纯化，得到浓缩液!然后用分子蒸馏分离，可将花渣中残留的玫瑰精油提取出来。分子蒸馏采用二级蒸馏法。其中产生的大量玫瑰残渣一般作为废料处理, 这造成很大的浪费. 因此, 对玫瑰花渣的利用是提高玫瑰花经济效益的重要途径.目前对玫瑰花的研究和应用比较广泛, 而对玫瑰花渣的关注却相对较少. 关键词: 玫瑰花渣; 玫瑰精油; 化学成分; 蒸馏 玫瑰( Rosa rugosa)是蔷薇科( Rosaceae)蔷薇属( Rosa)多年生常绿或落叶性灌木. 玫瑰在我国的栽培历史悠久, 目前在全国各地均有种植. 玫瑰花性味甘温, 具有行气解郁、疏肝理气、和血散淤和收敛等多种医疗保健功效, 是集药用、食用、美化、绿化于一体的木本植物[ 1, 2] . 目前玫瑰花最主要的用途是作为精油的提取原料. 其精油具有优雅、柔和、细腻、甜香若蜜、芬芳四溢的玫瑰花香, 有/ 液体黄金0之美誉. 玫瑰精油的提取一般都采用水蒸汽蒸馏的工艺, 提取率约在0. 25‰- 0. 3‰ , 因而产生大量的玫瑰花渣[ 3] . 随着玫瑰产业的发展, 如何对玫瑰精油的副产物进行合理综合利用, 逐渐成为人们关注的热点. 长期以来, 副产物玫瑰花渣除一部分经自然风干做燃料, 其余大部分都作为垃圾扔掉了. 发酵、霉变后的花渣臭气冲天, 既浪费了资源又严重污染了环境. 我国对于玫瑰花的研究较为广泛, 而对玫瑰花渣的研究相对比较少. 本文对我国玫瑰花渣的研究现状做一综述. 通过对玫瑰花渣的前期研究表明, 玫瑰花渣的进一步综合利用是可行的, 社会效益、经济效益、环境效益将会在玫瑰花渣的综合利用中得到统一[ 1, 4] 一、玫瑰精油的提取 用水蒸汽蒸馏法从玫瑰鲜花中提取玫瑰油!是目前普遍采用的玫瑰油生产技术!但是这种方法的出油率仅为万分之三"据试验!用二氧化碳超临界萃取玫瑰鲜花!出油率可达万分之十!这说明水蒸汽蒸馏并没有将玫瑰鲜花中的玫瑰油全部提取出来!在水蒸汽蒸馏后的玫瑰花渣中还含有相当多残留的玫瑰油"这些玫瑰花渣目前仅当作肥料或燃料使用"为了充分利用玫瑰花资源!降低玫瑰油生产成本!必须想办法把花渣中残留的玫瑰油提取出来"本项研究采用有机溶剂浸提水蒸汽蒸馏提取玫瑰油后的玫瑰花渣!然后利用分子蒸馏技术进行分离纯化!提取出了纯正的玫瑰精油!精油得率达0.048% 1、试验材料 玫瑰花渣，溶剂采用沸程为60～90℃的分析纯石油醚!用3000ml烧瓶#调温电热套加热进行常压分馏取低于75℃的馏分用于试验 2、试验方法（1）萃取 称取贮存的玫瑰花渣1.5kg放入15L不锈钢桶内!加入4倍的溶剂(体积比),每隔半小时搅拌一次,浸泡2h以上.然后过滤,滤液用于浓缩,花渣再加入4倍的溶剂进行第二次萃取,第二次萃取液倒入装有1.5kg玫瑰花渣的另一不锈钢桶内,再加入4倍的溶剂,循环萃取四次,萃取四次后的花渣加入少量水用蒸馏法回收溶剂后弃掉。（2）过滤 用滤纸过滤第一次萃取液!滤液进行浓缩。（3）真空浓缩 用旋转蒸发仪进行真空浓缩（4）脱蜡
精油提取方法
花精油的提取方法 压榨法：此法适用于含油多的果实，如柑橘、柠檬等。将果皮装入麻袋，用螺旋压榨机或水压机压榨。此法简单，还不会改变植物中花精油的成分。残渣中还含有大量花精油，可再用水蒸气蒸馏法提取一次。 冷浸法：在常温下使油脂吸收花的香气。怕受热损失香气的花，用此法采制最为适当。 制作长60厘米、宽50厘米的木框30-40个，大框内平放着玻璃板，两面涂上厚约1厘米的油脂，每隔4厘米的距离，做一条沟，把鲜花散放其上。 玻璃板上的茉莉花每天换一次，月下香两天换一次，当油脂饱和时，将含花精油的油脂刮下，即成香脂。 温浸法：此法是把花浸在60-70℃的液态油脂中，所用油脂是猪油，成品叫香脂，用植物油来吸收，成品叫香油。产品可直接供应化妆品生产企业，或用酒精浸出其中花精油后，将所得香精冷却至-10℃，除去溶解后的脂肪，再进行减压蒸馏，得浓缩花精油。此法最适宜于采制玻璃油、橙花油等。 抽出法：此法的抽出工作在室温下进行，抽出装置要密闭，内有搅拌设备。浸出完了，减压收回溶剂，抽出液送蒸发装置低温浓缩，再用高纯度酒精溶解，在-20℃条件下冷却，除去不溶成分，然后回收酒精，所提取物叫作绝对花香油。 蒸馏法：此法适合大规模生产。对热稳定、水溶性的花精油，多数采用此法。蒸馏器的格子上还可放上植物的其他部分，如叶、枝、杆、皮、根等均可分别用水蒸气蒸馏，得到不同部位的精油，然后再精馏，除去杂质，如色素、树脂、黏液等，所得精油香气更强烈。 水蒸汽蒸溜法： 蒸溜法是最早使用的一种提炼方法，随着时代的变迁，所用器具已有了明显的改 进，但其原理基本相同：将芳香植物置于蒸馏容器内，再将高温的蒸汽通入其中 （或把香料与水放在一起煮沸），此时植物体内包含芳香成分的精油就会扩散到 水蒸气中，形成油与水的共沸物；其后，将共沸物冷却，由于油不溶于水，从而 便与水分离而形成了我们所需要的精油。 蒸馏法非常方便，而且不必使用化学溶剂，所以现在的应用仍然很普遍。玫瑰、 薰衣草、迷迭香、天竺葵等大都是采用这种方法。 吸香法(Enfleurage)： 吸香法是法国南部南斯(Grasse)提取芳香精油的最古老的一种方法，由于所花费 的人力及时间甚多，故亦是最昂贵的提炼方法。
E花环实验报告
E花环实验 一.实验原理 人外周血T淋巴细胞表面具有绵羊红细胞（SRBC受体，能够与SRBC吉合形成花环样细胞团（即E花环）。已证实E受体是人类T细胞所特有的表面标志。当T细胞与SRBC混合后，SRBC便粘附于T细胞表面，呈现花环状。通过花环形成检查T细胞的方法，称为E花环形成试验。根据花环形成的多少，可测知T细胞的数目，从而间接了解机体细胞免疫功能状态，判断疾病的预后，考核药物疗效等。由于T细胞的异质性，其对SRBC勺亲和力亦不同，因而T细胞可形成不同类型的E花环，其中在4C放置1 h以上，所形成的花环数代表T细胞总数，称为总花环（Et花环），而淋巴细胞与SRBC混合后不经4°C作用立即反应形成的花环称为活性花环（Ea花环）。 二.实验结果（用图示法表示） 三.讨论①?有的细胞能形成玫瑰花环的原因：人 T细胞膜上具有CD2分子，能够与SRBCh的LFA-3结合，从而形成以人T细胞为中心，SRBC环绕四周，形状如玫瑰花环的细胞集团，即E玫瑰花环。此外，NK细胞膜上也有CD2分子，也能形成玫瑰花环，但是 NK细胞的量非常少，形成玫瑰花环的数量也少。
②. 有的细胞不能形成玫瑰花环的原因：a. 人血液中含有单核巨噬细胞，其表面没有CD2分子，不能与SRBC表面的LFA-3结合，因此不能形成玫瑰花环。b.实验中所用血液不够新鲜，也可能导致不能够形成玫瑰花环。 c. 时间不够长，导致T细胞表面的CD2分子不能够与SRBCh的LFA-3充分结合，因此只有一部分 SRB（与人T细胞结合，其余SRB（没能够与人T细胞结合形成玫瑰花环。 2.SRBC与淋巴细胞混合后离心速度不能过高，在 Et花环试验中，置4C应至少 1h 以上或过夜。 3. 绵羊红细胞以保存1周内最好，超过2周则与淋巴细胞结合力下降，超过5?6周则不能再用。实验室的绵羊红细胞保存的时间太长，导致其与淋巴细胞的结合能力下降，所以有的细胞可以形成 E花环，而有的细胞不可以形成 E花环。 4. Et花环试验SRB（与淋巴细胞混合比例以100： 1?200： 1为宜，Ea花环试验中以10 : 1?20 : 1为宜；淋巴细胞离体后不能超过6h,否则会影响花环形成率。 5. 温度对实验结果影响较大，故实验温度条件应保持一致，从4C取出后应立即 计数。 6. 计数前将沉淀细胞重悬时，使细胞团块松散均匀即可，不可强力吹打，以免SRB（从淋巴细胞上脱落。
玫瑰精油的提取及应用的研究
河北科技师范学院 本科毕业论文文献综述 玫瑰精油的提取及应用的研究 院（系、部）名称：理化学院 专业名称：应用化学 学生姓名：闫晓敏 学生学号：1011090225 指导教师：解莹 2011年11月15日 河北科技师范学院教务处
摘要 玫瑰精油在食品和医药行业有着重要的应用。是最常用的名贵花香原料，被广泛地应用于食品、高档化妆品及烟草中。玫瑰精油具有多种药理作用，它有一定的规模和发展潜力。近几年来玫瑰精油的分离提取和研究有了新的进展,研究玫瑰精油的应用特点，分析未来提取玫瑰精油必须解决的问题就成了研究的热点。 关键词：玫瑰精油；提取；药理作用 Advances in Extraction of Rose Essential Oil Abstract Roseessentian oil extracted from rose is called as“liquid gold” , and is widely used in medicine , health protection and beauty make Every year in the world , more and more rose essential oil is demanded . The advances in extractions of rose essential oil developed recently were introduced , and the applications of these processes were analyzed in detail. Keywords roseessential oil extraction pharmacological actions
免疫学实验
免疫学检验备考版 辛酸/硫酸铵法提纯IgG 在酸性条件下( pH4.5)，血清或腹水中非IgG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig)，能被辛酸等短链脂肪酸沉淀，上清中剩余的蛋白主要为IgG，再用硫酸铵沉淀上清，即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。 50%溶血试验（CH50）测定补体实验 绵羊红细胞（SRBC），与相应抗体（溶血素）结合后，可激活待检血清中的补体而导致SRBC 溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关，但不是直线关系，而呈S曲线关系，故通常取反应曲线中间部位即50％溶血（CH50）为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途径，C1～9任何一种成分缺陷都可使CH50降低，所以此实验反映了总补体的活性。 补体结合试验的基本原理 抗原抗体复合物可以结合补体，这是补体结合试验的依据。绵羊红细胞和其相应抗体（溶血素）的复合物结合补体后出现溶血现象。因此，绵羊红细胞和溶血素被作为补体结合试验中判断待测系统中有无抗原抗体反应的复合物系统。如待测系统产生抗原抗体复合物，则可结合一定量补体，此时加入溶血系统则不出现溶血。如待测系统中只有抗原或抗体，不能结合补体，加入溶血系统则与游离补体结合而发生溶血，这就是补体结合试验的基本原理。 补体结合试验中有5种成分参与反应，分属于3个系统：①反应系统，即已知的抗原（或 抗体）与待测的抗体（或抗原）；②补体系统；③指示系统，即SRBC与相应溶血素， 试验时常将其预先结合在一起，形成致敏红细胞。反应系统与指示系统争夺补体系统， 先加入反应系统给其以优先结合补体的机会。 如果反应系统中存在待测的抗体（或抗原），则抗原抗体发生反应后可结合补体；再加 入指示系统时，由于反应液中已没有游离的补体而不出现溶血，是为补体结合试验阳性。 如果反应系统中不存在的待检的抗体（或抗原），则在液体中仍有游离的补体存在，当 加入指示系统时会出现溶血，是为补体结合试验阴性。因此补体结合试验可用已知抗原 来检测相应抗体，或用已知抗体来检测相应抗原。 单向免疫扩散实验 (1)原理：待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例合适的部位，形成白色沉淀环，沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关。 (2)技术要点：将抗体和热融化琼脂(约50%)混合，倾注成平板。待凝固后在琼脂板上打孔，孔中加入已稀释的抗原液，和不同浓度的抗原标准品，置37～12℃温箱，24～48h后观察孔周围沉淀环。量取沉淀环直径，通过抗原标准品，计算待测抗原的浓度。
玫瑰精油的提取实验
实验玫瑰精油的提取 一、实验原理玫瑰含的挥发油成分：香茅醇、香叶醇与芳樟醇、香茅醇、、苯乙醇，橙花醇、丁香醇、金合欢醇及其酯类、倍半萜及其衍生物等，所以玫瑰精油的化学性质稳定，难容于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸汽一同蒸发。本实验通过水蒸馏法提取，并通过分液漏斗分离得到粗玫瑰精油。 二、仪器试剂分液漏斗、100mL量筒、500mL蒸馏瓶、橡胶塞、蒸馏头、200℃温度计、直型冷凝管、接液管、250mL锥形瓶，以及连接进水口和出水口的橡皮管、铁架台两个、酒精灯、石棉网、电子称；新鲜的玫瑰花、0.1 g/mL 氯化钠、无水硫酸钠。 三、实验步骤花瓣用清水冲洗，去掉上面的灰尘等杂质，沥干水分；称取50 g玫瑰花瓣，放入500 mL的圆底烧瓶中，加入200 mL蒸馏水；按附一步骤安装蒸馏装置；可以在蒸馏瓶中加几粒沸石，防止液体过度沸腾；打开水龙头，缓缓通入冷水，然后开始加热；加热时可以观察到，蒸馏瓶中的液体逐渐沸腾，蒸气逐渐上升，温度计读数也略有上升；当蒸气的顶端达到温度计水银球部位时，温度计读数急剧上升；在整个蒸馏过程中，应保证温度计的水银球上常有因冷凝作用而形成的液滴，控制蒸馏的时间和速度，通常以每秒1～2滴为宜；蒸馏完毕，收集锥形瓶中的乳白色的乳浊液，向锥形瓶中加入质量浓度为0.1 g/mL的氯化钠溶液，使乳化液分层；然后将其倒入分液漏斗中，用分液漏斗将油层和水层完全分开；打开顶塞，再将活塞缓缓旋开，放出下层的玫瑰精油，用接收瓶收集；向接收瓶中加入无水硫酸钠，吸去油层中含有的水分，放置过夜。为了更好地将油、水两层液体分离，操作时应注意正确使用分液漏斗。应先撤出热源，然后停止通水，最后拆卸蒸馏装置，拆卸的顺序与安装时相反。 四、注意事项所有仪器必须事先干燥，保证无水；温度计不可低于蒸馏瓶的侧管口，冷凝管的出水口要向上；蒸馏温度太高、时间太短，产品品质就较差。 五、记录数据 实验前（质量）实验后（质量） 玫瑰 锥形瓶 计算玫瑰精油的产率 M玫瑰/M精油= 附一具体安装顺序和方法如下：(1)固定热源─酒精灯。 (2)固定蒸馏瓶固定蒸馏瓶，使其离热源的距离如图1所示，并且保持蒸馏瓶轴心与铁架台的水平面垂直。(3)安装蒸馏头，使蒸馏头的横截面与铁架台平行。(4)连接冷凝管。保证上端出水口向上，通过橡皮管与水池相连；下端进水口向下，通过橡皮管与水龙头相连。(5)连接接液管（或称尾接管）。 (6)将接收瓶瓶口对准尾接管的出口。常压蒸馏一般用锥形瓶而不用烧杯作接受器，接收瓶应在实验前称重，并做好记录。(7)将温度计固定在蒸馏头上，使温度计水银球的上限与蒸馏头侧管的下限处在同一水平线上。 附二分液漏斗的使用方法如下：(1)首先把活塞擦干，为活塞均匀涂上一层润滑脂，注意切勿将润滑脂涂得太
(完整版)高中生物练习植物有效成分的提取
植物有效成分的提取 1. (2011 ?海南高考)许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷 油。 回答问题： (1) ______________________________________________ 薄荷油是挥发性物质。提取薄荷油时应选用_______________________________________________ (鲜、干)薄荷叶作原料，其原 因 (2) 用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是__________ ，原理是___________________ (3) 用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是 常用于分离油层和水层的器皿是___________ 。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是 ________ ，除去固体硫酸钠的常用方法是___________ 。 解析：(1)薄荷油挥发性强，薄荷叶在干燥过程中，薄荷油因挥发含量降低。(2)因薄荷 油易溶于石油醚、酒精等有机溶剂，故用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂为有机溶剂。(3) 向通过水蒸气蒸馏得到的油水混合物中加入NaCI后，增加水的密度，就会出现油水分层现 象。常用分液漏斗将水、油分离。向分离出的油层中加无水Na2SQ的作用是除去少量的水， 用过滤的方法除去薄荷油中的NaSQ。 答案：(1)鲜鲜叶比干叶的薄荷油含量高 (2) 有机溶剂薄荷油溶于有机溶剂，而不溶于水 (3) 增加水层的密度，有利于油层和水层的分离分液漏斗除去少量的水过滤 2. (2011 ?山东高考)研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两 者的提取及应用如图所示。 抑直实验 (1) __________________________ 柚皮易焦糊，宜采用法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过 ________ 除去其中的固体杂质。 (2) ____________________________________________ 筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或______________________________________________________ 接种。对新配置的培养基灭菌时 所用的设备是_________ 。实验前需对超净工作台进行________________ 处理。
动物免疫学实验指导
动物免疫学实验指导 第二版 徐春厚谢为天雍艳红编 动物医学生物技术专业用 广东海洋大学教材科出版 二00七年二月二十八日
目录 实验一凝集试验 (1) 实验二沉淀试验 (4) 实验三溶血试验 (8) 实验四病毒的血凝及血凝抑制试验 (10) 实验五 E-玫瑰花环试验 (13) 实验六 EA玫瑰花环试验 (15) 实验七 EAC玫瑰花环试验 (17) 实验八酶联免疫吸附试验 (18) 实验九荧光抗体技术 (20) 实验十多克隆抗体（免疫血清）的制备 (22)
实验一凝集试验 颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应抗体结合后，在有适量电解质存在下，抗原颗粒可相互凝集成肉眼可见的凝集块，称为凝集反应(Agglutination reaction)或凝集试验。参与凝集反应的抗原称为凝集原（Agglutinogen），抗体称为凝集素（Agglutinin）。 细菌或其它凝集原都带有相同的负电荷，在悬液中相互排斥而呈现均匀的分散状态。抗原与相应抗体相遇后可以发生特异性结合，形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的静电排斥力，此时已有凝集的趋向，在电解质（如生理盐水）参与下，由于离子的作用，中和了抗原抗体复合物外面的大部分电荷，使之失去了彼此间的静电排斥力，分子间相互吸引，凝集成大的絮片或颗粒，出现了肉眼可见的凝集反应。根据是否出现凝集反应及其程度，对待测抗原或待测抗体进行定性、定量测定。 凝集反应包括直接凝集反应和间接凝集反应两大类，本实验主要介绍直接凝集反应。[目的要求] 1. 掌握平板凝集试验和试管凝集试验的操作方法。 2. 掌握凝集试验的结果判定及判定标准。 3. 熟悉平板凝集试验和试管凝集试验所需材料和试剂。 [材料与试剂] 1. 玻板，载玻片，试管（1cm x 8cm），试管架，刻度吸管，滴管，微量可调加样器，滴头（tip头），牙签或火柴棒，记号笔。 2. 灭菌的生理盐水，灭菌的0.5%石炭酸生理盐水。 3. 布氏杆菌病试管凝集抗原，布氏杆菌病平板凝集抗原，布氏杆菌病虎红平板凝集抗原，布氏杆菌病阳性血清，布氏杆菌病阴性血清，被检血清（牛、羊或猪）。 4. 鸡白痢平板凝集抗原，鸡白痢阳性血清，鸡白痢阴性血清，被检鸡血清。 [实验内容及操作方法] （一）试管凝集试验 以牛布氏杆菌病试管凝集试验为例。 1. 试管准备：每份血清用试管4支，另取3支试管作为对照，作好标记，置试管架上。如被检血清有多份，对照只需做1份。
高中生物复习第38讲从生物材料中提取某些特定成分
第38讲从生物材料中提取某些特定成分 测控导航表 知识点题号 1.植物芳香油的提取1,2 2.胡萝卜素的提取 3 3.DNA的粗提取与鉴定 5 4.蛋白质的提取和分离 6 5.综合考查4,7,8 1.(2018·河北石家庄模拟)植物组织中存在许多有机物,不同有机物的提取和鉴定方法不尽相同。根据所学知识,回答下列问题: (1)植物芳香油具有的共同特点有、。 (2)提取玫瑰精油和橘皮精油过程中都要用到的一种化学试剂 是。 (3)从橘皮中提取橘皮精油时,为提高出油率,需要将橘皮干燥,并用 浸泡;为探究浸泡时间对出油率的影响,设置 作为空白对照。 (4)胡萝卜素为色结晶,精提取胡萝卜素所用的萃取剂应该具有,能充分溶解胡萝卜素。 解析:(1)植物芳香油具有的共同特点有挥发性强、易溶于有机溶剂。 (2)提取玫瑰精油和橘皮精油过程中都要用到的一种化学试剂是 Na2SO4。
(3)从橘皮中提取橘皮精油时,为提高出油率,需要将橘皮干燥,并用石灰水浸泡,防止橘皮压榨时滑脱,为探究浸泡时间对出油率的影响,则浸泡的时间为自变量,因此需设置未经浸泡的样品作为空白对照。(4)胡萝卜素为橘黄色结晶,萃取胡萝卜素的萃取剂应该具有能充分 溶解胡萝卜素,且具有较高的沸点、不与水混溶。 答案:(1)挥发性强溶于有机溶剂 (2)Na2SO4 (3)石灰水未经浸泡的样品 (4)橘黄较高的沸点而且不与水混溶 2.(2018·山东聊城模拟)提取植物有效成分时,不同的有机物具有不同的理化特性,所采取的提取方法也不同。分析下列关于提取植物有 效成分的实验,回答相关问题: (1)薰衣草精油是由薰衣草提炼而成。可以清热解毒,清洁皮肤。下面是某同学设计的提取薰衣草精油的实验流程: 薰衣草+水A油水混合物分离油层除水B薰衣草精油 图中的A表示过程,在此过程中,影响薰衣草精油提取量的主要因素有,B过程的目的是。(2提取柠檬精油时,常采用法而不用上述提取薰衣草精油的方法,原因是。
玫瑰精油的粗提取实验
玫瑰精油的提取实验 【引言】从玫瑰花中提取出的玫瑰油称为“液体黄金”，是世界香料工业不可取代的原料，多用于制造高级香水等化妆品。工业上大约5kg玫瑰花瓣才能提取出一滴纯正的玫瑰精油。提取出的玫瑰油不含有任何添加剂或化学原料，是纯天然的护肤品，具有极好的抗衰老和止痒作用，能够促进细胞再生、防止肌肤老化、平抚肌肤细纹，还具有使人放松、愉悦心情的功效。 【摘要】植物芳香油具有较强的挥发性，还能随水蒸气蒸发，因此可以利用蒸馏法提取植物芳香油。法国香水业作为一种工业生产，最初就是通过蒸馏法来获得芳香油的。玫瑰油、薄荷油、肉桂油、熏衣草油、檀香油等主要由蒸馏法获得。 本实验主要通过水蒸气蒸馏法，粗提取玫瑰精油。利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，油水混合物又会重新分出油层和水层。 理想实验装置如下图，由条件限制，实验装置较简陋，与下图稍有不同。 【【关键词】玫瑰精油蒸馏 【key word】Rose Essential oil Distill 【实验方法】 1.称取50 g玫瑰花瓣，剪碎，研磨成泥状物。 2.然后安装蒸馏装置。蒸馏装置包括：铁架台两个、电烤炉、石棉网、 橡胶塞、玻璃导管、温度计、接液管、锥形瓶，以及连接进水口和出水口 的橡皮管。所有仪器必须事先干燥，保证无水。整套蒸馏装置可分为左、 中、右三部分，其中左边的部分通过加热进行蒸馏，中部将蒸馏物冷凝， 右边的部分用来接收。安装仪器一般都按照自下而上、从左到右的顺序。 拆卸仪器的顺序与安装时相反。具体安装顺序和方法如下。 （1）固定热源──电烤炉。 （2）固定蒸馏用的锥形瓶。
（3）连接冷凝装置。 （4）连接尾接管。 （5）将接收瓶瓶口对准尾接管的出口。常压蒸馏一般用锥形瓶而不用烧杯作接受器。 （6）将温度计固定在双孔橡皮塞上，控制实验所需温度。 3.蒸馏装置安装完毕后，可以在蒸馏瓶中加几粒沸石，防止液体过度沸腾。敷上冷毛巾，操作过程中不断滴加冷水，然后开始加热。加热时可以观察到，锥形瓶中的液体逐渐沸腾，蒸气逐渐上升，温度计读数也略有上升。当蒸气的顶端达到温度计水银球部位时，温度计读数急剧上升。在整个蒸馏过程中，应保证温度计的水银球上常有因冷凝作用而形成的液滴。控制蒸馏的时间和速度，通常以每秒1～2滴为宜。蒸馏完毕，应先撤出热源，然后拆卸蒸馏装置，拆卸的顺序与安装时相反。 4.收集锥形瓶中的乳白色的乳浊液，向锥形瓶中加入质量浓度为0.1 g/mL的 氯化钠溶液，使乳化液分层。然后将其倒入分液漏斗中，用分液漏斗将油层和水 层完全分开。打开顶塞，再将活塞缓缓旋开，放出下层的玫瑰精油，用接收瓶收 集。向接收瓶中加入无水硫酸钠，吸去油层中含有的水分，放置过夜。（淡黄色油层如图所示）为了更好地将油、水两层液体分离，操作时应注意正确使用分液漏斗。分液漏斗的使用方法如下。（1）首先把活塞擦干，为活塞均匀涂上一层润滑脂，注意切勿将润滑脂涂得太厚或使润滑脂进入活塞孔中，以免污染萃取液。 （2）塞好活塞后，把活塞旋转几圈，使润滑脂分布均匀。并用水检查分液漏斗的顶塞与活塞处是否渗漏，确认不漏水后再使用。 （3）将分液漏斗放置在大小合适的、并已固定在铁架台上的铁圈中，关好活塞。将待分离的液体从上部开口处倒入漏斗中，塞紧顶塞，注意顶塞不能涂润滑脂。 （4）取下分液漏斗，用右手手掌顶住漏斗顶塞并握住漏斗颈，左手握住漏斗活塞处，大拇指压紧活塞，将分液漏斗略倾斜，前后振荡（开始振荡时要慢）。 （5）振荡后，使漏斗口仍保持原倾斜状态，左手仍握在漏斗活塞处，下部管口指向无人处，用拇指和食指旋开活塞，使其释放出漏斗内的蒸气或产生的气体，以使内外压力平衡，这一步操作也称做“放气”。（6）重复上述操作，直至分液漏斗中只放出很少的气体时为止。再将分液漏斗剧烈振荡2～3 min，然后将漏斗放回铁圈中，待液体静置分层。 【结果与讨论】 本实验中收集到的精油量极少，除仪器反复倾倒损失油之外，还应该有以下几点原因： 1. 蒸馏过程中，由于发酵玫瑰花发生氧化作用，因而使油变酸(酸值高达26．8)．这样，精油质量变劣， 收率也下降(降到0，08％以下) ．因此，采取这种方法，必须考虑到如何防止氧化的问题．人们通常在发酵玫瑰花的过程中加人抗氧剂或防腐剂来抑制氧化过程，以便达到提高精油产率和质量的目的．以20％的食盐水溶液作为防腐剂浸泡玫瑰花，搅拌发酵，所得的精油产率仅有0．07％，因此，该法并不理想．以对苯二酚的稀溶液(25～50mg／L)，作为抗氧剂，将玫瑰花发酵后，再进行水蒸气蒸馏所得精油的质较好．而且蒸馏以后的残值还可以作为肥料使用，这不但消除了大龟下脚料对环境的污染，还能起到防止植物锈病的作用。但对苯二酚是否会污染香料有待考证．况且此种