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酿酒酵母表达载体

pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,

酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF,pY15TEF,pY16TEF,

酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,

酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109;质粒pGADT7,pGBKT7;对照质粒pGBKT7-53,pGBKT7-lam,pGADT7-T,PCL1,

酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,

毕赤酵母表达载体

pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZα

A,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc,

配套毕赤酵母Pichiapink,

毕赤酵母宿主X33,KM71,KM71H,GS115,

原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列,

pET-GST,pGEX系列(含GST标签),pMAL系列

pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列,pQE系

列,pTrc99a,pTrcHis系列,pBV220,221,222,pTXB系列,pLLP-ompA,pIN-III-ompA (分泌型表达系列),pQBI63(原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF(+), pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk

233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK (+),pBlueScript SK(-)pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒: pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒:

pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1,pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣: pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞: DH5a JM101 JM103

JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21(DE3)HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21(AI)BL21(DE3)plysS TG1 TB1 DH5a(pir)Tuner(DE3)Bl21 codonplusRIPL Novablue (DE3)Rosetta Rosetta(DE3)Rosetta(DE3)plys Rosetta-gami(DE3)Rosetta-gamiB(DE3), Rosetta-gamiB(DE3)plysS Orgami(DE3)OrgamiB(DE3)HMS174(DE3)

植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,

pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIA

super1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体

pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,

T-DNA插入载体(随机突变体库)pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体

pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1

枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,

pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,

pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,

pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01,配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,

WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33

RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0,pSilencer 2.1-U6 hygro, pSilencer 3.1-H1 hygro,pSilencer 3.1-H1 neo, pSilencer 4.1-CMV neo, pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体(oligoengine)pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体(clontech): RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-Ready

pSIREN-RetroQ-ZsGreen(Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide)RNAi慢病毒载体(addgene): pLKO.1

哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B,pSecTag2 A,pVAX1,pBudCE4.1,pTracer CMV2,pcDNA3.1(-)/myc-His A ,pcDNA6-Myc/His B,pCEP4, pIRES,pIRESneo,pIRES hyg3,pCMV-myc,pCMV-HA,pIRES-puro3,pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT,pBIND,pACT-MyoD,

pBIND-Id,pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ,pOPI3CAT,pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统(Invitrogen):pcDNA4/TO/Myc-His A,pcDNA4/TO/Myc-His B,pcDNA4/TO/Myc-His C,pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ,pcDNA6/TR四环素调控系统(Clontech):pTet-On,pTet-Off,pTRE2,pRevTRE,pRevTet-On,pRevTet-off信号通路报告载

体:pGAS-TA-Luc,pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc,pIκB-EGFP,pNFAT-TA-Luc,pCaspase3-sensor,pAP1(PMA)

-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro],pGL4.75;p53-Luc,pAP-1-Luc, pNF-κB-Luc,pSRE-Luc,

pFA2-Elk1,pFC-MEKK,pFR-luc,Gateway系统(invitrogen)

pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR,

乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株,

pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523,pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosus

GG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii

广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体

pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体

pLAFR3,pMP2444(GFP), pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体

pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,

pOJ260,pPG611.1,pPG612.1,

腺病毒载体/慢病毒,逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒,腺病毒系统(Stratagene): pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,

pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cell

line 腺相关病毒系统(Stratagene): pAAV-MCS,pAAV-RC,pHelper,pAAV-LacZ,

pAAV-IRES-hrGFP,pCMV-MCS,慢病毒载

体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,

RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,

pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。病毒包装:二质粒包装系统一: psPAX2 pMD2.G 二质粒系统

二: pCMV-dR8.2 dvpr pCMV-VSVG 三质粒包装系统具有更高的包装效

率: pMDLg/pRRE pRSV-Rev pMD2.G Invitrogen包装系统: PLP1 PLP2

PLP/VSVG

基因重组载体敲除载体自杀质粒RED重组系统载体

pKD3,pKD13,pKD4,pCP20,pKD46, pCVD442,pk18mobsacB,p2NIL, pMAD(革兰氏阳性菌基因敲除),pBT2,RN4220,pKC1139,pOJ260,

pJQ200SK,pSET152,pWHM10, pk18mobsacB, pGOAL17,pGOAL19,基因打靶载体PL253,PL451,PL452,PL453,配套菌株EL250,EL350,pMLM290,292,

KJBAC1,pST1374

荧光蛋白表达载体荧光定位质粒报告基因载体pEGFP,pEYFP,pECFP,pDsRED, pmCherry,pAcGFP,hrGFP,ZsGreen,pDsRed1-C1, pDsRed1-N1,

pDsRED-Monomer-N1, pEYFP-C1, pEYFP-N1, pEGFP-1,pEGFP-C1, pEGFP-N1, pEGFP-N3, pcDNA-EGFP1,pECFP-N1,pECFP-C1, pAcGFP1-1 pDsRED2-ER, pDsRED2-Mito, pDsRED2-Nuc,pDsRED2-Peroxi , pEYFP-Golgi, pEYFP-Mem, pEYFP-ER , pEGFP-Actin, pECFP-ER, pIRES2-EGFP, pLEGFP-C1,pLEGFP-N1,pDsRED-Express-N1,pIRES2-DsRed,pIRES-AcGFP1,pmCherry-C1,N1 启动子增强子报告载体(Promega,带有Luc荧光报告基因):pGL3-basic,pGL3-control,pGL3-enhancer,pGL3-promoter,pRL-TK,pRL-CMV,pRL-SV40, 信号通路报告载体(Clontech): pGAS-TA-Luc,pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc,pIκB-EGFP,pNFAT-TA-Luc,pCaspase3-sensor,pAP1(PMA)-Luc 信号通路报告载体(Promega):

pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFAT-RE

/Hygro],pGL4.75 信号通路报告载体(Stratagene): p53-Luc,pAP-1-Luc,pNF-κB-Luc,pSRE-Luc, pFA2-Elk1,pFC-MEKK,pFR-luc

昆虫表达载体杆状病毒表达载体系统pFastBac1,pFastBac1-Gus,pFastBacHT A pFastBacHT-CAT,pFastBacDual,pBlueBacHis2 A DH10Bac配套大肠杆菌,pMIB

v5-His B ,pIZT/V5-His,

Taq,Pfu高表达载体菌株KOD, T4连接酶高表达质粒载体,高产基因工程菌株、酶基因KOD,T4 kinase激酶,Tth反转录酶MMLV,Klentaq PCR酶,Cre酶,RNA inhibitor抑制酶,DL2000质粒

BiFC双分子荧光表达载体FRET系统载体pBiFC-VC155,pBiFC-VN173,pBiFC-bFosVC155,pBiFC-bFos(deltaZIP)VC155,pBiFC-bjun-VN173,

pCE-BiFC-VN173,pCE-BiFC-VC155,

真菌表达载体黑曲霉米曲霉黄曲霉表达质粒pBC-hygro,pAN7-1,pBARGPE1, 真菌ATMT农杆菌介导转化载体 pBHt1,pBIG2RHPH2-GFP-GUS等,

酵母单杂交三杂交载体,酵母双杂交系统pGBKT7,pGADT7,pCL1,pGBKT7-53,pGADT7-T,pGBKT7-Lam,配套酿酒酵母AH109 酵母单杂交系统(Clontech):pHISi,pLacZi,pHis2,pHIS2.1 酵母三杂交系统:pBridge, YBZ1菌

株 Cytotrap Two-Hybrid System(Stratagene): pSos, pSos MAFB, pMyr

噬菌体展示系统载体1.噬菌体展示抗体scFv 质粒:pCANTAB5E 宿主菌:TG1 辅助噬菌体:M13K07 可溶表达菌:HB2151 2.噬菌体展示抗体Fab 质粒:pcomb3 宿主菌:XL1-Blue 辅助噬菌体:VCSM13

pEVOL,

pBudCE4.1,pBudCE4.1-EGFP,Zeocin,pEGFP-C3,2,1,pmCherry-C1,-N1,pLOVE-mi R302/367,pDsRed2-N1,pAcGFP1.1,TALE toolbox

kit,pIRES-hyg3,pIRES-Neo3,pIRES-puro3,pSIREN-RetroQ-ZsGreen,GST

14-3-3,pDsRed-Monomer-N1,M50 super8x

TOPFlash,pRK793,pCMV-tag5B,pCMV-tag2B,pCMV-N-HA,

pUAST,pw-25,PAC-5.1-HISA,pSLIK-Neo,pCMV-myc-cyto,pCMV-myc-nuc,疫苗表达载体

pVAX1,pAdEasy-1,pShuttle,pAdTrack,pAdTrack-CMV,-polyA,pShuttle-EGFP,BJ51 83,pXC1,pBHGE3,pSUPER-retro-GFP-Neo,pORF-lacZ,pORF-TK,

pCOX2-Luc,pcDNA3.1(-)-myc-His A,pcDNA3.1-p300,pINP, pOprE, pCR2.1 TOPO,pLP1,pLP2,pLP/VSVG,Stbl3,plenti6/V5-DEST,pLVX-shRNA1,2,pLVX-IRE S,tdTomato,FUW-teto-hOCT4,hSOX2,hMYC,hKLF4,FUW-M2rtTA,pSecTag2

A,pEYFP-C1,pEGFP-N1,-C1,pcDNA3.1-V5-His

A,B,C,pcDNA3.1-EGFP,pLEGFP-C1,α-MHC Promoter,Marc-145猴肾细胞,Sf9,BmN昆虫家蚕细胞,酵母载体

pYES2,pYES2.0,INVSc1,pYES3,pYES6,pRS41H,pRS303,304,305,

306,pRS424,425,426,414,415,416,pY13,14,15,16,YBZ1,L40酵母菌,

pESC-His,pYIP5,pHIS2,pHIS2.1,pHISi,pLacZi,酵母重组载体pUG6,pSH47,植物载体pCAMBIA1300-EGFP,

pTCK303,pTRV1,pTRV2,pFGC5941,pUN1301,pSN1301,C58C1,R1601,AGL1农杆菌感受态,原核载体pQE3,pQE30,31,32,pQE60,61,62,M15,DH10Bac,Origami (B)DE3,XL1-Blue,Rosetta gamiB(DE3)pLysS,TKB1,ER2566,DB3.1,

JM105,TOP10,DH5a,DH5alpha lambda pir,C43(DE3)菌株感受态,pTrcHis

A,B,C,pTWIN1,pTYB1,pTYB11,pACYC184,pMAL-c5x,c2x,p5x,c4x,pBV220,221,2 22,pCold

I,II,III,TF,pET22a,pET29a,pET28a,pET39b,pET41a,pET42a,p15A,pET-sumo,pBAD His A,B,C,pBAD24,34,pETDuet-1,pRSFDuet-1,pCDFDuet-1,pACYCDuet-1,原核荧光pQBI63,pMP2444,链球菌表达、敲除载体pKC1139、pOJ260、pWHM3,pSET152,pVA981,多宿主载体

pGOAL19,pBBR1MCS-2,-5,-6,pDSK519,pLA2917,pRK2013,

pVLT33,pMAD,RN4220金葡菌株,真菌载体

pBARGPE1,pAN7-1,pBHt1,pBIG2RHPH2-GFP-GUS,乳酸菌载体

MG1363,pNZ8148,NZ9000,pNZ9530,pMG36e,枯草芽孢杆菌载体

pHT43,pWB980,pHT300PLK,pMA5,pUTminiTn5,巨大芽孢杆菌表达载体

pHIS1525,WH320菌,谷氨酸棒状杆菌表达载体pEC-XK99E,敲除载体

pk18mobsacB,

pET载体

3a, 3d

5b

11a A+

12a A+

15b A+

16b A+

17b A+

19b A+

20b A+

21a,21b,21d A+ 22b A+

23a,23b A+

23a-tev

24a K+

25b K+

26b K+

27b K+

28a,28b,28c K+ 28a-sumo

28a-p53

29a K+

30a ,30c K+

31b A+

32a A+

32a pelB A+ 35b K+

39b K+

40b K+

41a,41b k+

42a,42b K+

43b A+

43.1a A+

48b K+

49b K+

50b K+

pETduet-1 pACYCduet-1 pCDFduet-1

pRSFduet-1

pColAduet-1

pET His

pET DsbA

pET GST

pET Trx

pQE载体

PQE2

pQE9

pQE30,31,32,

pQE30UA

pQE30LacIq

pQE40L

pQE60

pQE70

pQE80L

其他原核表达载体PBBR1 MCS Cm+ PBBR1 MCS-2 K+ PBBR1 MCS-3 Tet+ PBBR1 MCS-4 A+ PBBR1 MCS-5 庆大霉素

pMal c2x,p2x,5x,5E

pBV220,221,222

pTrc99a,pTrcCKS,pTrcHis A,B,C

pBAD24,33,43,pBADHis A,B,C,pBADmycHisA pEZZ18

pThio HisA A+

pGEX4T-1,4T-2,4T-3,5X-1,6p-1,2t,3x pColdI

pColdII

pColdIII

pColdTF

pTwin1

pRsetA,B,C

PLLP-STQ

pINⅢ-ompA

pkk223-3

pSE380

pJLA502

pMBP-C,pMBP-p

pTYB11,pCYB1

Origene-N-His GST A+

pPin point CAT A+

pPin point xa1 A+

pPin point xa2 A+

pPin point xa3 A+

pCW ori

常见克隆载体

puc18,puc19,puc118,puc119

pBlue Script SK+,

pBlue ScriptⅡSK+

pEGM-3ZF(+)A+

pEGM-11ZF(+)A+

pACYC184

pBR322

基因敲除

pKD3,pKD4,pKD46,pcp20

pK18mobSacB

海肾荧光素酶报告基因

pGL3basic,promotor,enhancer,control pGL3 CM

pGL4.29,4.30

毕赤酵母表达载体

pPIC9

pPIC9k

pPIC9k-1

pPIC9k-His

pPIC3.5

pPIC3.5k

pAO815

pHIL-S1

pPICZalphaA,B,C

pPICZalpha D

pPICZalpha E

pPICZalpha GA,GB

pPICZalpha FC

pPICZA,B

pGAPZalphaA,B,C

pMETalphaA,B,C

pFLD-cat A+

pFLD-cat Z+

毕赤酵母宿主菌

JC220

JC308

GS200

GS190

GS115

KM71

KM71H

Y1991

SMD1168

SMD1168H

X33

酿酒酵母表达载体

pYES2,pYES2-flag

pYES2NTA,NTB,NTC

pYES3CT

pYIP5,pYRP7,pADH2

pRSH41,pDC315,pDF15,pUG6

pESC-His,BFD14,BFD15,pDNR1,p334,pDR195 pRS316,pRS316HA

YEplac112,YCplac33,YCplac22-EGFP, YEplac195,YEpLac181,YIP211

pYX212,pYX212-VHB

酿酒酵母宿主菌

INSV-1

YPH499

YM4271

W303-1A

真核哺乳动物荧光载体pEGFP N1,N2,N3 Origene GFP

pLEGFP N1

pEGFP C1,C3

AIF-EGFP N1

pECFP N1,C1

pEYFP N1,C1

pEYFP-golgi pEYFPmem

pBFPN1

FIV-BFP

pDsred MonomerN1 pDsRed1 mito pDsRed2 mito pDsRed N1,C1 pDsRed2 N1,C1 pDsRed2-ER

mRFP

真核哺乳动物载体pIRES

pIRES2-EGFP pADeasy-1

pADeasy-1(Bj5183)pAdtrack

pAdtrack CMV pShuttle

pShuttle CMV

pRL CMV

pVAX1

pVAST

pCI

pCI neo+

pCMV-myc

pflag-CMV2

pcDNA3.1 +

pcDNA3.1 zeo+

pcDNA3.1 neo+

pcDNA3.1 MycHisA

pcDNA3.1 MycHisB

pcDNA3.1-HBV genome

pcDNA3-mRFP

Hsp70-pcDNA3.1

pcDNA 4 Max B

psuper GFP neo

psuper Retro GFP neo

pSilencer4.1CMV puro+

pSilencer4.1CM neo+

psuper GFP neo

psuper retro GFP neo

pdisplay

pBud CE4.1

ptet on, ptet off

pRL-tk,pRL-CMV

植物表达载体

pcambia1301,1302,1303,1304,1305.2 2300,2301

3300

pcambia1301(EHA105)

pcambia1381Z,1391Z

PBI121,221

PBI221-GFP

植物农杆菌宿主

EHA105,LBA4404

植物RNAi载体

PHANNIBAL,PKANNIBAL

启动子检测

pEGFP-1

pkk232-8

分子伴侣:

PGKJE8,PGro7,pTf16,pKJE7,pGTf2

酵母双杂交

pGADT7,pGBKT7,pGADT7-T,pGBKlam,pGBK-53,pCL1 AH109,Y187

酵母单杂交

pGAD53m,p53-blue,p53-His,pLacZ,pHis,pHisi-1,

哺乳动物双杂交

pBIND-GFP,pBIND-ID,pGAD424,pGBT9,pG5lac,

大肠杆菌宿主菌

JM101,105,109,110

HB101,K802,C600,TH1,AM1,W3110,DH10bac

Y1089,Y1090,BL21,BL21(DE3),MG1655

BL21(DE3)plysS,BL21AI,BL21SI,BL21codon plus RIPL,BL21 trxB (DE3),BL21 star

DH5α,DH5αλpir,JM109,JM109(DE3),Top10,Top10F,,K12,DB3.1,XL1-blue,XL-10gold,BM25.8,SG1117,Turbo,TG1,TB1,C41(DE3),C43(DE3),Turner(DE3),M15,E2566,C2566,ER2529,JF1125,Bj5183,Stbl3,Stbl4 HMS174(DE3), HMS174(DE3)plysS, AD494(DE3)

Novablue(DE3),Rosettalblue(DE3)

Rosetta(DE3),Rosetta(DE5),Rosetta(DE3)plysS,

Orgami(DE3),OrgamiB(DE3),Orgami(DE3)plysS

Rosetta-gami2(DE3)plysS,Rosetta-gami(DE3),

Rosetta-gamiB(DE3),Rosetta-gamiB(DE3)plysS, Rosetta-gami(DE3)placI

枯草表达系统pMA5,pHCMC05,pGFP22,pGFP315,pHP13,pHP13-43,pHY-43,pWB980,pAOX1

枯草宿主菌:BS168,DB403,BCL,1A75,WB600,WB800N

昆虫表达系统:pfastBacI,pfastII,pfastIII,pfastBacHTA,pfastBacHTB,pfastBacHTC,pfastBacdual

巨大芽孢杆菌系统:pHis1525

巨大宿主菌:YYBM1,WH320

乳酸球菌表达系统 pMG36e,NZ9000,MG1363

乳酸酵母表达系统 pKLAC1,GG799

白色念珠菌系统pCR4,pCR4-GFP,p5921

酿酒酵母表面展示系统:pYD1,EBY100

标准微生物菌株

ATCC27853 铜绿假单胞菌ATCC29212 粪链球菌

ATCC29213 金黄色葡萄球菌ATCC35218 大肠杆菌

ATCC 35098四联球菌

NRRL Y-12968热带假丝酵母NRRL Y-2021德巴利酵母NRRL Y-1603毕赤氏巴斯德酵母DSM3586野油菜黄

如何阅读分析质粒图谱

如何阅读分析质粒图谱 日期:2012-04-18来源:未知作者:xilu点击:次 如何阅读分析质粒图谱 载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素 1. 复制起始位点Ori即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 2. 抗生素抗性基因可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+ 3. 多克隆位点MCS 克隆携带外源基因片段 4. P/E 启动子/增强子 5. Terms 终止信号 6. 加poly(A)信号可以起到稳定mRNA作用 如何阅读质粒图谱 第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) 所谓穿梭质粒是指一类人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记,因而可以在两种不同类群宿主中存活和复制的质粒载体。此概念不仅用于不同的微生物菌群之间,也可以推广到真核生物表达载体的构建,如用于枯草的pBE2、酵母的pPIC9K、哺乳动物表达载体pMT2 和用于植物细胞的Ti 质粒。这些穿梭质粒不仅可以在大肠杆菌中复制扩增,也可以在相应的枯草、酵母、动物或植物细胞中扩增和表达。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。 第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。 1. Ampr水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 2. tetr可以阻止四环素进入细胞。 3. camr生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。

4. neor(kanr) 氨基糖苷磷酸转移酶使G418(长那霉素衍生物)失活 5. hygr使潮霉素β失活。 第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号

如何阅读质粒图谱(更新版本)

如何阅读质粒图谱 最近由于实验需要,需要查阅载体图谱,到园子里搜罗一番,发现虽然有人问载体图谱阅读的问题,也有前辈回答,但都不详细,借自己也在琢磨这个问题的机会,将我学到的东西整理一下,于 大家分享。 载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素 #复制起始位点Oril 即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 #抗生素抗性基因可以便于加以检测,如Amp+l ,Kan+ #多克隆位点MCS 克隆携带外源基因片段l #P/E 启动子/增强子l #Termsl 终止信号 #加poly(A)信号l 可以起到稳定mRNA作用 二、如何阅读质粒图谱 第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) 第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。 (1)Ampr 水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 (2)tetr 可以阻止四环素进入细胞。 (3)camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 (4)neor(kanr)氨基糖苷磷酸转移酶使G418(卡那霉素衍生物)失活 (5)hygr 使潮霉素β失活。 第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号 #启动子-促进DNA转录的DNA顺序,这个DNA区域常在基因或操纵子编码顺序的上游,是DNA分子上可以与RNApol特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。 #增强子/沉默子-为真核基因组(包括真核病毒基因组)中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。/沉默子-负增强子,负调控序列。 #核糖体结合位点/起始密码/SD序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA有核糖体的两个结合位点,对于原核而言是AUG(起始密码)和SD序列。l #转录终止顺序(终止子)/翻译终止密码子:结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA的保守序列,此位点down-stream有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。

服装基础知识大全

服装基础知识汇总 内衣文胸的款式分类 牛仔裤的发明者—李维·施特劳斯 袜子生产工艺流程 服装洗水后出现的问题及基本原因 牛仔布的分类 牛仔裤用量的计算方法 服装色差的识别成因与预防 “服装”的英语名词解释 衬衫简介与应用常识 西装简介与应用常识 Levi"s牛仔裤相关知识 衬衫的分类 服装包装颜色中英文对照 服装包装产品中英文对照 服装术语 服装基础知识之产品行业术语 服装基础知识之穿着分类术语 牛仔裤上吊牌的英语含义 泳衣的分类

服装辅料的种类特点与检验 帽子常用词汇中英文对照 服装专业(车缝)词汇中英文对照 服装材料的选择和鉴别小常识 羊毛衫的分类 胸罩罩杯尺寸说明表 服装分类大全(一) 服装分类大全(二) 服装分类大全(三) 内衣文胸的款式分类 无肩带文胸或可卸式文胸-----适合于较宽的领口或袒领的外衣。 背心式文胸-----舒适无束缚感,适合少女穿着。 环带型文胸-----配合环带型领的外衣。 衬垫型文胸-----是为胸部不丰满的女性设计的,在罩杯中加用衬垫以提高乳房的丰满度。 低开口文胸-----开口很低,以配合V型领或低开领的外衣。 透明文胸-----以透明织物制成,十分性感,已逐渐成为时尚。 连身型无肩带文胸-----可以同时衬托乳房和收紧腰部,适合乳房较平的女性。

连身型有肩带文胸-----同时衬托乳房和收紧腰部,适合乳房较平且下垂的女性;黑色透明纱设计,兼有神秘感和现代感。配以深色礼服,更显女性魅力。 无缝型文胸-----采用高弹力织物,罩杯不用缝合。前扣型文胸-----便于穿脱,同时增加胸部的丰满感。 牛仔裤的发明者—李维·施特劳斯 成长记录 2002年10月1日,上海万人体育馆熙熙攘攘,但所有人的眼光都被一个东西吸引住了,一条长28.9米,腰围19米,重247公斤,挂起来有8层楼高的牛仔裤,人们都在议论纷纷,这是我们日常生活所穿的牛仔裤吗?竟然可以如此巨大,但它的确是一条裤子,虽然如此巨大,但它跟普通的牛仔裤没什么两样,只不过是放大了10倍……这就是世界著名的牛仔裤制造商李维(Levi’s公司的作品,这条牛仔裤已经被英国吉尼斯总部确定为“世界第一”。当然,还有一个第一是李维·施特劳斯创造的,因为他是世界上第一个发明牛仔裤的人。 不安分的淘金者 1829年,李维·施特劳斯出生于一个德国的小职员的家庭,作为德籍犹太人,李维从小就很聪明,顺顺利利地上完中学、大学,就如他的父辈一样,他当上了一个文员。

质粒载体的发展

质粒载体的发展 质粒载体即,在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因,以质粒为载体,将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞,进行重组、筛选、扩增的过程。 目录

的易感或抗性、产生限制酶、产生稀有的氨基酸和毒素、决定毒力、降解复杂有机分子,以及形成共生关系的能力和在生物界内转移DNA的能力。 编辑本段质粒的基本特征 质粒(plasmid)是细菌或细胞染色质以外的,能自主复制的,与细菌或细胞共生的遗传成分。其特点如下: 是染色质外的双链共价闭合环形DNA (covalently closed circuar DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋结构,不同质粒大小在2-300kb之间,<15kb的小质粒比较容易分离纯化,>15kb 的大质粒则不易提取。 能自主复制,是能独立复制的复制子 (autonomous replicon)。一般质粒DNA复制的质粒可随宿主细胞分裂而传给后代。按质粒复制的调控及其拷贝数可分两类:严紧控制(stringent control)型质粒的复制常与宿主的繁殖偶联,拷贝数较少,每个细胞中只有1个到十几个拷贝;另一类是松弛控制(relaxed control)型质粒,其复制宿主不偶联,每个细胞中有几十到几百个拷贝。每个质粒DNA上都有复制的起点,只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制,不同质粒复制控制状况主要与复制起点的序列结构相关。有的质粒的可以整合到宿主细胞染色质DNA中,随宿主DNA复制,称为附加体,例如细菌的性质粒就是一种附加体,它可以质粒形式存在,也能整合入细菌的DNA,又能从细菌染色质DNA上切下来。F因子携带基因编码的蛋白质能使两个细菌间形成纤毛状细管连接的接合(conjugation),通过这细管遗传物质可在两个细菌间传递。 质粒对宿主生存并不是必需的 这点不同于线粒体,线粒体DNA也是环状双链分子,也有独立复制的调控,但线粒体的功能是细胞生存所必需的。线粒体是细胞的一部分,质粒也往往有其表型,其表现不是宿主生存所必需的,但也不妨碍宿主的生存。某些质粒携带的基因功能有利于宿主细胞的特定条件下生存,例如,细菌中许多天然的质粒带有抗药性基因,如编码合成能分解破坏四环素、氯霉素、氨芐表霉素等的酶基因,这种质粒称为抗药性质粒,又称R质粒,带有R质粒的细菌就能在相应的抗生素存在生存繁殖。所以质粒对宿主不是寄生的,而是共生的。医学上遇到许多细菌的抗药性,常与R质粒在细菌间的传播有关,F质粒就能促使这种传递。 现在分子生物学使用的质粒载体都已不是原来细菌或细胞中天然存在的质粒,而是经过了许多的人工的改造。从不同的实验目的出发,人们设计了各种不同的类型的质粒载体,近年来发展很快,新的有特定用途的质

最新中国行业分类大全

最新中国行业分类大全 编辑:mxh0985@https://www.360docs.net/doc/f42338062.html, 2012.07.31 《财富中国》根据发达国家的行业界定与行业演变规则,对中国的行业进行新分类:一、机构组织 政府机构,各国驻华行政机构,贸易公司,经济组织,协会,其他机构 二、农林牧渔 农业:粮食,豆类,蔬菜及制品,水果及制品,坚果,杂果,干果,咖啡,可可及制品,棉类,麻类,含油子仁,果仁,籽,食用菌,烟草,花木,竹木,藤苇,干草,木炭,植物提取物,动物提取物,动植物油,动植物种苗,家禽,牲畜,养殖动物,蚕茧,蚕丝,羽毛,羽绒,羊绒,生皮,毛皮,动物毛鬃,肠衣,禽蛋,饲料,饲料添加剂,肥料,农药,园艺用具,农用品,农用机械,林业设备及用具,畜牧养殖业设备及用具,渔业设备及用具,粮油加工机械,饲料加工机械,屠宰及肉类初加工设备,农副产品加工,木材加工,家具制造机械,其他 三、医药卫生 保健用品,减肥增重产品,个人保养,药材,中药饮片,康复产品,制药设备,医疗器械制造设备,计生用品,其他 四、建筑建材 房地产,市政工程:市政道路建设,市政公用设施建设,自来水输水工程,集中供暖、供热、供气工程,文教、卫生、体育、音乐等公益设施建设,纪念性建筑设施建设,各类建筑工程,木材板材,石材石料,水泥及制品,石灰,石膏,混凝土及制品,建筑玻璃,陶瓷,搪瓷及制品,塑料建材,金属建材,防水,防潮材料,耐火,防火材料,隔热,吸声材料,绝缘材料,特种建材,施工材料,砖,瓦及砌块,墙体材料,天花板,地板,门窗,壁纸,锁具,建筑装饰五金,管件管材,厨房设施,卫浴设施,涂料,胶粘剂,作业保护,活动房,堆垛搬运机械,建筑及相关设备,陶瓷,木工机械设备,搪瓷生产加工机械,工程承包,建筑装潢设计,其他

各种表达载体介绍

pET 载体中,目标基因克隆到 T7 噬菌体强转录和翻译信号控制之下,并通过在宿主细胞提供 T7 RNA 聚合酶来诱导表达。 Novagen 的 pET 系统不断扩大,提供了用于表达的新技术和选择,目前共包括 36 种载体类型、 15 种不同宿主菌和设计用于有效检测和纯化目标蛋白的许多其它相关产品。 优点 · 是原核蛋白表达引用最多的系统 · 在任何大肠杆菌表达系统中,基础表达水平最低 · 真正的调节表达水平的“变阻器”控制 · 提供各种不同融合标签和表达系统配置 · 可溶性蛋白生产、二硫键形成、蛋白外运和多肽生产等专用载体和宿主菌 · 许多载体以 LIC 载体试剂盒提供,用于迅速定向克隆 PCR 产物 · 许多宿主菌株以感受态细胞形式提供,可立即用于转化 阳性 pFORCE TM 克隆系统具有高效克隆 PCR 产物、阳性选择重组体和高水平表达目标蛋白等特点。 pET 系统概述 pET 系统是在大肠杆菌中克隆和表达重组蛋白的最强大系统。根据最初由 Studier 等开发的 T7 启动子驱动系统, Novagen 的 pET 系统已用于表达成千上万种不同蛋白。 控制基础表达水平 pET 系统提供 6 种载体 - 宿主菌组合,能够调节基础表达水平以优化目标基因的表达。没有单一策略或条件适用于所有目标蛋白,所以进行优化选择是必要的。 宿主菌株 质粒在非表达宿主菌中构建完成后,通常转化到一个带有 T7 RNA 聚合酶基因的宿主菌(λDE3 溶原菌)中表达目标蛋白。在λ DE3 溶原菌中, T7 RNA 聚合酶基因由 lacUV5 启动子控制。未诱导时便有一定程度转录,因此适合于表达其产物对宿主细胞生长无毒害作用的一些基因。而宿主菌带有 pLysS 和 pLyE 时调控会更严紧。 pLys 质粒编码 T7 溶菌酶,它是 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物,因此可降低其在未诱导细胞中转录目标基因的能力。 pLysS 宿主菌产生低量 T7 溶菌酶,而 pLysE 宿主菌产生更多酶,因此是最严紧控制的λ DE3 溶原菌。 有 11 种不同DE3 溶原化宿主菌。使用最广泛的为 BL21 及其衍生菌株,它的优点在于缺失 lon 和 ompT

所有质粒载体汇总

酿酒酵母表达载体 pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP, 酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF pY15TEF, pY16TEF, 酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47, 酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424,酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109;质粒pGADT7,pGBKT7 ;对照质粒pGBKT7-53 , pGBKT7-lam , pGADT7-T , PCL1,酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,丫187,丫190, 毕赤酵母表达载体 pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZ a A,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc , 配套毕赤酵母Pichiapink, 毕赤酵母宿主X33, KM71 , KM71H , GS115, 原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62等原核表达载体,包括pET系列,pET-GST, pGEX 系列(含GST标签),pMAL 系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,- p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis 系列,pQE 系列,pTrc99a,pTrcHis系列, pBV220,221,222,pTXB 系列,pLLP-ompA,pIN-III-ompA (分泌型表达系列),pQBI63 (原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPi nPoi nt-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF (+) , pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk 233- 3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK (+) ,pBlueScript SK (-) pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C,大肠杆菌冷激质粒:pColdI pColdII pColdIII pColdTF原核共表达质粒:pACYCduet-1,pETduet- 1,pCDFduet-1, pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣:pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞:DH5a JM101 JM103

裤子分类

褶裥是与服装面料相同或对比强烈的布条聚拢在一起,以提升服装的丰满感;或附着在服装的特定部位,起强调、突出的作用。 1、按长度分类:长裤和马裤 (1)长裤的长度一般为:3尺长、3尺1寸长、3尺2寸长、3尺3寸长。 (2)马裤分:七分裤(长度为70cm,2尺1寸) 八分裤(长度为80cm,2尺4寸) 九分裤(长度为90cm,2尺7寸) 十分裤(长度为97cm,2尺9寸) 2、按版型分类:直筒、西裤、锥型裤/铅笔裤/小脚裤、喇叭裤、斜裁裤 (1)直筒: A:小直筒特点:裤口6寸5左右,中裆以下基本一致,穿着合体。 B:中直筒特点:裤口7寸左右,裤腿比小直筒稍胖,穿着能拉长腿型,把腿衬得匀称修长而直。 C:大直筒特点:裤口8寸左右,裤腿较宽,穿着飘逸。 (2)西裤特点:胯围,臀围,腿围比小直筒稍胖,裤型与直筒大致相同。 (3)锥型裤/铅笔裤/小脚裤特点:胯围,臀围,腿围较胖,裤口较小,上宽下窄。 (4)喇叭裤分为:大喇叭裤和微喇叭裤。 (5)斜裁: a.斜裁小直筒特点:做成直筒裤,穿着腿部修长。 b.斜裁中直筒特点:使人腿型匀称,顺直而圆润。 c.斜裁喇叭裤特点:时尚,把人体黄金分割。 3、按适应场合分类:休闲裤和正装裤。 (1)休闲裤: a.牛仔裤特点:款式紧绷束身,富青春气息。 b.时装休闲特点:前卫休闲、通常较注重外观装饰性。 c.运动休闲特点:宽松舒适,适于运动。 (2)正装裤特点:可以多种搭配,适合正式场合穿着,款式多样。 4、按腰线分类:高腰裤、中腰裤和低腰裤 (1)高腰裤特点:裤腰高于腰线以上适合束上衣穿着。 (2)中腰裤特点:裤腰刚好卡在腰线位置,运用最多。 (3)低腰裤:特点:裤腰低于腰线以下,或叫无腰裤。 关于九分裤的定义,网上流传着两种不同的看法。 九分裤 第一种:是指裤子的长度按照人正常裤子长度的九分(9/10)长做出来的。

(整理)质粒的分子生物学与质粒载体

第三章质粒的分子生物学与质粒载体 一、填空题 1.基因工程中有3种主要类型的载体:——-------、------------一、-----------. 2.由于不同构型的DNA插入EB的量不同,它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同,SC DNA的泳动速度—----------—,OC DNA泳动速度—---------—,L DNA居中,通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。 3.质粒的复制像染色体的复制一样,是从特定的起始点区开始的。然而,质粒的复制可以是—---—向的、或是—----—向的。在杂种质粒中,每个复制子的起点都可以有效地加以使用。但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地位。并认为:当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后,在正常情况下—------—的复制起点可能被苯闭。 4.就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:—-----—、—---------—、—----------------—。另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 5.如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中,则属于—---------—群,这是因为它们的——————————所致。 6.质粒拷贝数是指细胞中—------------------------—。 7.复制子由三部分组成:(1)—-----------------—---(2)——-----------————(3)—--------------—。 8.酵母的2μm质粒有------------,可以配对形成哑铃结构。 9.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后,一部分细胞中已测不出质粒,这种现象叫----------------。 10.pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于----——,它的四环素抗性基因来自于—-----------—,它的氨苄青霉素抗性基因来自于—---------—。 11.质粒的消失同染色体基因的突变是不同的,前者不能恢复,后者可以通过—------—恢复该基因的性状。 12.ColEl质粒复制的起始需要三种酶,即—-----------—、一------------和一------。 13.YAC的最大容载能力是—-----------—,BAC载体的最大容载能力是—---------—。 14.pSCl01是一种---------——复制的质粒。 15.把那些没有可检测表型的质粒称为—--------------—。 16.转座子主要由下列部分组成:(1)—-----————————(2)---------------—— (3)—----------------—。

如何阅读质粒图谱

一、载体主有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一、一个合格质粒的组成要素 复制起始位点Ori,即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。抗生素抗性基因:可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+ 多 克隆位点:MCS克隆携带外源基因片段 P/E:启动子/增强子 Terms:终止信号 加poly(A)信号:可以起到稳定mRNA作用 二、如何阅读质粒图谱 第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) Ori的箭头指复制方向,其他元件标注的箭头多指转录方向(正向)。 第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记: (1)Ampr:水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 (2)tetr :可以阻止四环素进入细胞。 (3)camr:生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 (4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸转移酶,使G418(卡那霉素衍生物)失活。 (5)hygr:使潮霉素β失活。 第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点,便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆

载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 相关概念: 启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号 启动子-促进DNA转录的DNA顺序,这个DNA区域常在基因或 操纵子编码顺序的上游,是DNA分子上可以与RNApol特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。 增强子/沉默子-为真核λ基因组(包括真核病毒基因组)中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。沉默子-负增强子,负调控序列。 核糖体结合位点/起始密码/SD序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA有核糖体的两个结合位点,对于原核而言是AUG(起始密码)和SD序列。 λ转录终止顺序(终止子)/翻译终止密码子:结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA的保守序列,此位点down-stream有一段GT 或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA的保守序列,此位点down-stream有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。 三、载体及其分类 载体:即要把一个有用的基因(目的基因——研究或应用基因)通过基因工程手段送到生物细胞(受体细胞),需要运载工具(交通工具)携带外源基因进入受体细胞,这种运载工具就叫做载体(vector)。 P.S.基因工程所用的vector实际上是DNA分子,是用来携带目的 基因片段进入受体细胞的DNA。 载体的分类 按功能分成:(1)克隆载体:都有一个松弛的复制子,能带动 外源基因,在宿主细胞中复制扩增。它是用来克隆和扩增DNA片段(基因)的载体。(所以有时实验时扩增效率低下,要注意是不是使用的严谨型载体)(2)表达载体:具有克隆载体的基本元件 (ori,Ampr,Mcs等)还具有转录/翻译所必需的DNA顺序的载体。

第三章服装款式的风格类型

第三章服装款式的风格类型 服装款式经过漫长的历史演变,己经形成了很多固定的具有一定风格的特征。服装风格是一个抽象概念,它是艺术作品的创作者对艺术的独特见解,是对与之相适应的独特手法所表现出来的作品的面貌特征的描述,必须借助于某种形式的载体才能体现出来。在服装设计中,服装风格是设计师通过运用各种服装要素的组合来表现的。影响服装风格趋向的因素,有很多方面如款式结构、面料、搭配等。由于款式结构的灵活多样性,所以也最能体现其风格。 在张立宁的《服装款式系统的风格量化和款式数据库设计与实现》[15] 一文中根据成熟的服装品牌 风格的分析与归纳,将女装款式风格分为特点鲜明的8种风格类型经典型、运动型、休闲型、民族型、优雅型、中性型、前卫型和轻快型。 ①优雅风格 具有较强女性特征,讲究细部,强调精致,做工考究,注重细节,装饰较女性化,兼具时尚感,较成熟,外观与品质较华丽的服装风格。如图2.3 图 2.3 优雅风格的服装 ②经典风格 具有传统服装的特点,相对较成熟的,适合大多数中年女性和相对保守的青年女性穿着,能被大多数女性所接受,平实、朴素、个性化特征不强烈,时尚感稍弱,但适应面广,讲究穿着品质的服装风格。如图2.4

图 2.4 经典风格的服装 ③中性风格 削弱女性特征,借鉴男装设计元素,以潇洒、利落的效果为主,有一定的时尚度、外观硬朗而较有品位的服装风格。如图2.5 图 2.5 中性风格的服装 ④休闲风格 以穿着的轻松、随意、舒适为主,年龄层跨度较大,适应多阶层的消闲、会友、外出、购物等日常活动的穿着,使着装者具有亲和力的服装风格。如图2.6

图 2.6 休闲风格的服装 ⑤轻快风格 轻松、明快,适应年轻女性日常穿着,具有朝气和活力,活泼可爱、具有少女气息的服装风格。如图2.7 图 2.7 轻快风格的服装 ⑥运动风格 借鉴运动装设计元素,充满活力,较多运用块面分割余条状分割及拉链、商标等装饰,穿着面较广,具有都市气息的服装风格。如图2.8 图 2.8 运动风格的服装 ⑦民族风格 汲取中西方民族、民俗服饰元素。中式借鉴中国传统服饰如唐装、旗袍等设计手法以及少数民族服装的形式要素。西式则以国外民族服装为灵感来源,如波西米亚风格、日耳曼民族风格、俄罗斯民族风格等具有复古气息的服装风格。如图2.9

查询质粒方法汇总

如何查找质粒图谱之我见——plasmid map, Vector Sequence方法汇总 经常在坛子里看到一些人求助质粒图谱,很多时候我发现其实有些质粒图谱还是很容易找到了,刚开始帮忙查找了下,还公布了一些查找质粒图谱比较好的网站,后来看得多了,很多时候,这样的帖子直接跳过了。今天又看到几个求质粒图谱的帖子,因此决定就查找质粒图谱的方法,写个总结帖子,希望对虫子们有些帮助。这些方法,大部分是自己学习的过程中积累的,也许总结得还不够全面,望其他虫友指正。 方法一:安装软件Vector NT 做分子实验,经常和不同的质粒打交道,了解各种质粒的图谱信息是必需的,invitrogen公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音,功能强大、界面美观,使用起来很人性化。后面的很多方法都是基于在这款软件的使用之上,因此个人觉得要想对质粒图谱了解更直观,安装这款软件是非常必要的。而且,一旦安装了这款软件,你就发现这款软件的软件包里面会包括invitrogen公司的所有质粒图谱信息和其他比较常见和经典的质粒图谱。这里就不一一细说,各位虫子可以自己体验下。(这款软件的下载和使用说明书站内很多) 方法二:查找质粒图谱的网站: 这个之前有人求助质粒图谱时,我在回应求助帖里面公布过几个我经常用的网址,估计不是专题,很多人没看到,现在在此重新总结下 1.Vector Database 地址:https://https://www.360docs.net/doc/f42338062.html,/g?a=vdb 这个网站很页面很人性化,直入主题,也是我经常用到一个网站,比如同样这个帖子求pRS类质粒图谱(注意,是一类质粒图谱,没关系,照样能找到),直接在搜索框输入pRS,可以看到,之类质粒一共有三十多个。

质粒载体基础

第一节质粒载体 一、质粒的基本特性 1.质粒的复制 通常一个质粒含有一个与相应的顺式作用控制要素结合在一起的复制起始区(整个遗传单位定义为复制子)。在不同的质粒中,复制起始区的组成方式是不同的,有的可决定复制的方式,如滚环复制和θ复制。在大肠杆菌中使用的大多数载体都带有一个来源于pMB1 质粒或ColE1 质粒的复制起始位点。图3-1 是其复制其始示意图。 在复制时,首先合成前RNAⅡ,即前引物,并与DNA 形成杂交体;而后RNase H 切割前RNAⅡ,使之成为成熟的RNAⅡ,并形成三叶草二级结构,该引物引导质粒的复制。形成的RNAⅠ可控制RNAⅡ形成二级结构,同时Rop 增强RNAⅠ的作用,从而控制质粒的拷贝数。削弱RNAⅠ和RNAⅡ之间相互作用的突变,将增加带有pMB1 或(ColE1)复制子的拷贝数。 图3-1 带pMB1(或ColE1)复制起点的质粒在复 制起始阶段所产生的转录的方向及其粗略大小。 2.质粒的拷贝数 质粒拷贝数分为严谨型与松驰型。严谨型质粒每个细胞中拷贝数有限,大约1 ~几个;松驰型质粒拷贝数较多,可达几百。表5-1 就是不同类的质粒与复

制子及拷贝数的大致关系。 表3-1 :质粒载体及其拷贝数 pUC 系列质粒的复制单位来自质粒pMB1 ,但其拷贝数较高。pMB1 质粒的复制并不需要质粒编码的功能蛋白,而是完全依靠宿主提供的半衰期较长的酶(DNA 聚合酶Ⅰ,DNA 聚合酶Ⅲ),依赖于DNA 的RNA 聚合酶,以及宿主基因dnaB 、dnaC 、dnaD 和danZ 的产物。因此,存在抑制蛋白质合成并阻断细菌染色体复制的氯霉素或壮观霉素等抗生素时,带有pMB1(或ColE1)复制子的质粒将继续复制,最后每个细胞中可积聚2~3 千个质粒。3.质粒的不相容性 两个质粒在同一宿主中不能共存的现象称质粒的不相容性,它是指在第二个质粒导入后,在不涉及DNA 限制系统时出现的现象。不相容的质粒一般都利用同一复制系统,从而导致不能共存于同一宿主中。两个不相容性质粒在同一个细胞中复制时,在分配到子细胞的过程中会竞争,随机挑选,微小的差异最终被放

常用pGEX载体图谱

Rosetta系列的表达菌株可以提供T7 RNA聚合酶,它能表达PET系列载体上的外源基因。。。pGEX系列载体上的外源基因不需要T7 RNA聚合酶,普通的大肠杆菌经IPTG诱导即可表达 Tac启动子是一组由Lac和trp启动子人工构建的杂合启动子,受Lac阻遏蛋白的负调节,它的启动能力比Lac和trp都强。其中Tac 1是由Trp启动子的-35区加上一个合成的46 bp DNA片段(包括Pribnow 盒)和Lac操纵基因构成,Tac 12是由Trp的启动子-35区和Lac启动子的-10区,加上Lac操纵子中的操纵基因部分和SD序列融合而成 蛋白标签: A myc tag is a polypeptide protein tag derived from the c-myc gene product that can be added to a protein using recombinant DNA technology. It can be used for affinity chromatography, then used to separate recombinant, overexpressed protein from wild type protein expressed by the host organism. It can also be used in the isolation of protein complexes with multiple subunits. A myc tag can be used in many different assays that require recognition by an antibody. If there is no antibody against the studied protein, adding a myc-tag allows one to follow the protein with an antibody against the Myc epitope. Examples are cellular localization studies by immunofluorescence or detection by Western blotting. The peptide sequence of the myc-tag is (in 1- and 3-letter codes, respectively): N-EQKLISEEDL-C, N-Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu-C, where N stands for Amino-terminus and C stands for Carboxy terminus. The tag is approximately 1202 Daltons in atomic mass and has 10 amino acids. It can be fused to the C-terminus and the N-terminus of a protein. It is advisable not to fuse the tag directly behind the signal peptide of a secretory protein, since it can interfere with translocation into the secretory pathway. A monoclonal antibody against the myc epitope, named 9E10, is available from the non-commercial Developmental Studies Hybridoma Bank

服装风格介绍

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(于1989年,国内最早女式时装的设计开发生产加工及销售的专业太和(淘宝专卖店) 服饰集团之一) 相信很多店主对女装的各种风格没有全面了解过,为此, 网友特意各种女装风格辛苦收集、总结到一块,以方便各位店 主查阅。快收藏起来吧,每个季初看看.。 1、瑞丽风格(到淘宝淘瑞丽风格女装) 瑞丽是一本时装杂志,它一个月有三本是关于服装的。有 “可爱先锋”,主要受众群是学生MM;“伊人风尚”主要受众群 是年轻白领;而“服饰美容”大家都可以看。但总体说来,瑞 丽的主要风格还是以甜美优雅深入人心。看它们的专属模特桥 本丽香就是最好的诠释。 2、嘻皮风格:(到淘宝淘嬉皮风格女装) 嬉皮士(英语Hippie的音意译)本来被用来描写西方国 家1960年代和1970年代反抗习俗和当时政治的年轻人。嬉皮士 这个名称是通过《旧金山纪事》的记者赫柏.凯恩普及的。嬉 皮士不是一个统一的文化运动,它没有宣言或领导人物。嬉皮 士用公社式的和流浪的生活方式来反应出他们对民族主义和 越南战争的反对,他们提倡非传统的宗教文化,批评西方国家 中层阶级的价值观。 “新嬉皮主义”风尚延续,多种元素的混合搭配特点:从 细节上看,繁复的印花、圆形的口袋、细致的腰部缝合线、粗 糙的毛边、珠宝的配饰等,都将成为个性化穿着的表达方式; 从颜色上看,暖色调里的红色、黄色和橘色,冷色调里的绿色

质粒载体分类及阅读

质粒载体分类及阅读 一.九种表达载体 Pllp-OmpA, pllp-STII, pMBP-P, pMBP-C, pET-GST, pET-Trx, pET-His, pET-CKS, pET-DsbA 二.克隆载体 pTZ19R DNA pUC57 DNA PMD18T PQE30 pUC18 pUC19 pTrcHisA pTrxFus pRSET-A pRSET-B pVAX1 PBR322 pbv220 pBluescript II KS (+) L4440 pCAMBIA-1301 pMAL-p2X pGD926 三.PET系列表达载体 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Dsb Fusion Systems 39b and 40b Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression System 33b Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? p ET Expression Systems Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression Systems plus Competent Cells Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET GST Fusion Systems 41 and 42 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET NusA Fusion Systems 43.1 and 44 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Vector DNA Protein Purification ? Purification Systems ? Strep?Tactin Resins and Purification Kits 四.PGEX系列表达载体 T EcoR pGEX-1 I/BAP pGEX-2T pGEX-2TK pGEX-3X

认识质粒图谱

一、如何阅读质粒图谱 载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一、一个合格质粒的组成要素 复制起始位点Ori,即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。 而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 抗生素抗性基因:可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+ 多l克隆位点:MCS克隆携带外源基因片段 P/E:启动子/增强子 Terms:终止信号 加poly(A)信号:可以起到稳定mRNA作用 二、如何阅读质粒图谱 第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) Ori的箭头指复制方向,其他元件标注的箭头多指转录方向(正向)。 第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记: (1)Ampr:水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 (2)tetr :可以阻止四环素进入细胞。 (3)camr:生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 (4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸转移酶,使G418(卡那霉素衍生物)失活。 (5)hygr:使潮霉素β失活。 第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点,便于外源基因的插入。 如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。 一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。 这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 二、相关概念: 启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号 启动子-促进DNA转录的DNA顺序,这个DNA区域常在基因或操纵子编码顺序的上游,是DNA分子上可以与RNApol特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。 增强子/沉默子-为真核l基因组(包括真核病毒基因组)中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。沉默子-负增强子,负调控序列。 核糖体结合位点/起始密码/SD序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA有核糖体的两个结合位点,对于原核而言是AUG(起始密码)和SD序列。 l转录终止顺序(终止子)/翻译终止密码子:结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA 的保守序列,此位点down-stream有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA的保守序列,此位点down-stream有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。 三、载体及其分类 载体:即要把一个有用的基因(目的基因——研究或应用基因)通过基因工程手段送到生物细胞(受体细胞),需要运载工具(交通工具)携带外源基因进入受体细胞,这种运载

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