试剂性能验证方案

酶联试剂性能验证方案

令狐采学

验证试剂名称：

验证时间：

验证实验室负责人:

本方案根据ISO15189要求制定，适用于酶联试剂项目的性能验证，本方案从特异性、敏感性、测定下限、重复性（包括CUT －OFF值的重复性）、符合率5个方面对各个试验项目进行评价。实验准备：

1、质控品：使用商品化质控物进行，包括阴性和阳性。

2、样本的采集和保存：采集时间、保存方式等必须保证一致性。

一、特异性

1、特定病原体以外感染性疾病患者的样本。

2、含有干扰性物质的样本：类风湿因子（RF）阳性、含异嗜性抗体、溶血、脂血、高胆红素样本。

结果判断：非特定病原体感染患者样本均应为阴性。含一定浓度干扰物质的样本检测应为阴性。

二、敏感性

20份不同强度阳性标本在同一批检测，20次检测全部为可测出的阳性结果，我们认可该试剂灵敏度在可接受范围内。

三、检测下限

处于测定下限浓度（如临界点浓度+20%）的样本，重复检测20

次，应至少有18次以上为阳性反应。

四、重复性

1、批内精密性

高、中、低三个浓度的样本，在一批检测内，重复检测20次（孔），计算所得S/CO值的均值和SD，计算批内CV%。

判断结论：应≤试剂说明书所标明的批内变异。ELISA的批内变异CV%应≤15%。

2、批间精密性

高、中、低三个浓度的样本，在10天以上时间内单次（孔或管）重复进行20批检测，计算所得S/CO值的均值和SD，计算批间CV%。

判断结论：应≤试剂说明书所标明的批内变异。ELISA的批内变异CV%应≤15%。

3、cutoff值验证

将阳性样本进行一系列稀释，然后将他们进行重复检测以确定能够获得50%阳性和50%阴性结果的那个稀释度。这一稀释度的分析物浓度即为临界点。

五、符合率

20份已确诊为阳性和20份已确诊为阴性的标本在同一批检测，计算阳性符合率和阴性符合率，阳性符合率和阴性符合率应≥95%以上。

性能验证方案(仅供参考)

性能验证(仅供参考) 1 生化生化室项目需要验证的参数包括批内精密度，批间精密度，正确度，线性范围、参考区间，可报告区间等。适用时，还要考虑分析灵敏度（仅对那些在接近0的低值有临床意义的项目有必要进行确定，必要时，可引用说明书中给出的低值）和干扰试验。 1.1 精密度 1.1.1 标本准备及要求质控品、已经检测过的病人标本或具有血清基质的定值材料。每个项目均需选择至少正常和病理两个浓度水平的验证材料进行验证。所用样本一定要稳定，其基体组成应尽可能相似于实际检测的病人标本，样本中的分析物含量应在该项目的医学决定水平附近。 1.1.2 方案 1.1. 2.1 方案1：对验证材料每天分析1批次，2个浓度，每个浓度重复测定4次，连续5天。记录结果并计算均值、标准差和批内精密度(%)。 1.1. 2.2 方案2：批内精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法，同批次内检测混合的新鲜临床标本20次。记录结果并计算均值（X）、标准差（SD）和批内变异系数CV（%）。批间精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法（或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下），同批次内检测混合的新鲜临床标本20次，同一批号室内质控品某一时间段（至少20天）的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。 1.1.3结果判断从美国临床实验室室间质量评估允许误差表中查阅评价项目的允许误差范围，由实验数据统计的批内不精密度和批间不精密度小于允许误差范围的1/4和1/3作为检测系统不精密度

乙型肝炎病毒表面抗原试剂盒性能验证方案

乙型肝炎病毒表面抗原试剂盒性能验证方案报告人：时间：批准人：时间：宿迁市中医院检验科

目录一、系统信息二、验证目的三、检测原理四、验证过程五、验证结果六、验证结论七、参考文献八、附件

一、系统信息 ●项目名称：乙型肝炎病毒表面抗原（酶联免疫法） ●设备名称及型号：AutoBio phomo酶标仪/Anthos fluido洗扳机 ●试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）批号：201610402 有效期：20171024 厂商：上海科华生物工程股份有限公司●质控品名称：康彻思坦HBsAg质控品 0.2IU/ml 批号：201611007 有效期：20181121 厂商：北京康彻思坦生物技术有限公司二、验证目的验证HBsAg检测性能是否满足临床要求。三、检测原理采用抗－HBs包被反应板，加入待测样本，经孵育后，加入抗－HBs-HRP，当样本中存在HBsAg时，该HBsAg与包被抗－HBs结合并与抗－HBs-HRP结合形成抗－HBs-HBsAg-抗－HBs-HRP复合物，加入TMB底物产生显色反应，反之则无显色反应。四、验证过程 4.1 批内精密度选择康彻思坦HBsAg 0.2IU/ml浓度质控品，在一批检测内，重复检测10次（孔），计算所得S/CO值的均值和SD，计算批内CV%。判断结论：批内精密度变异CV%应≤15%。 4.2 检测结果符合率 4.2.1 按要求选择样品进行验证选取至少40例样本，结果为阴性和阳性的样品各20例，按常规样本检测程序进行检测，结果按下列公式进行计算，得到阴/阳结果符合率：敏感性：被测试剂盒测定真阳性数/(真阳性数+假阴性数)*100% 特异性：被测试剂盒测定真阴性数/（真阴性数+假阳性数）*100% 符合率：被测试剂盒测定（真阳性数+真阴性数）/（真阳性数+假阴性数+真阴性数+假阳性数）*100% 4.2.2 结果判断：敏感性=100%；特异性=100%；符合率=100% 4.3 检出限验证 4.3.1 选取一个已知浓度的定值质控，按原倍、1:1 、1:2 、1:3、1：4、1：5……等稀

ISO15189实验室认可性能验证方案报告

医学实验室ISO 15189认可性能验证实验方案为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准确性，特制定本方案。适用于强生VITROS产品的试验项目的性能验证，包括V250/V350/V950/FS5.1//V3600/V5600上所能开展的所有定性检测项目。本方案从准确度、精密度、参考围、线性围以及方法学比对5个方面对各个试验项目进行评价。一、精密度（Precision）：精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度，表示测定结果中随机误差大小程度的指标。精密度通常用不精密度表示。可以分别评价连续精密度（批精密度）、重复性不精密度（中间精密度，包括批间、日间精密度等）和再现性精密度。本方案采用批和天间两种方法对各个试验项目的精密度进行评价。全部实验过程使用同批号试剂和质控品，并且保证检测当日质控在控。 1、批精密度（连续精密度）：方法：在检测患者标本过程中，连续运行高低水平质控品各20次，记录检测结果。计算批精密度的CV值和SD值。结果评价（1）厂家评价标准：计算精密度指数=验证SD/厂商SD，精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。具体见《精密度评价》表格。（2）按照国际推荐标准：批精密度应在CLIA88允许误差的1/4以，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。 2、天间精密度（中间精密度）：

方法：同样使用两个水平的质控品，若需复溶冻干质控品做实验，要注意选择产品的稳定性和瓶间差。要严格控制每次复溶冻干品时的操作手法。连续测试20天，每天检测1次。在次过程中不能更换试剂批号及质控品批号，是否需要重新定标则取决于实验室。测试完成后记录检测结果。结果评价（1）厂家评价标准: 计算天间的SD及CV值，并计算精密度指数=验证SD/厂商SD。精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。具体见《精密度评价》表格。（2）按照国际推荐标准：批精密度应在CLIA88允许误差的1/3以，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。二、准确度准确度(accuracy)指检测结果与被测量物真值之间的接近程度。是分析测量围、分析灵敏度以及生物参考区间评价的基础。准确度的评价方法很多，比如检测定值参考物质，同参考方法进行比对，同有溯源性的检测系统进行方法学比对，卫生部临检中心质评的汇报结果均可以作为评价准确性的方法之一。本方案采用测定定值标准物质的方法来评价各个检测项目的准确度。定值标准物质采用厂家定值标准品。方法：（1）试验期间保证机器状态正常，保证试验当日室质控在控。（2）按厂家要求准备各个项目的新批号定标品（要与定标时使用

探讨临床体外诊断试剂性能验证方案的建立

探讨临床体外诊断试剂性能验证方案的建立发表时间：2017-03-08T10:41:35.243Z 来源：《心理医生》2016年36期作者：刘广亁[导读] 随着我国体外诊断试剂行业的迅猛发展，我国体外诊断试剂厂家也越来越多。（宁阳县中医院检验科山东宁阳 255000）【摘要】目的：参考《同型半胱氨酸测定试剂（盒）（酶循环法）》（YY/T 1258-2015）和《临床化学体外诊断试剂（盒）》（GB/T 26124-2011）标准对四川新健康成生物股份有限公司的同型半胱氨酸测定试剂盒（酶循环法）进行性能验证，探讨临床体外诊断试剂性能验证方案的建立，确保正确选择产品。方法：选择2016年1月—6月在本院健康体检的志愿者血清作为待检样本，通过对该试剂的试剂空白、分析灵敏度、准确度、批内精密度和测定范围的检测，对结果综合分析，建立体外诊断试剂性能验证方案。结果：结果显示，试剂空白吸光度≥1.7222，试剂空白吸光度变化率为0.0050；分析灵敏度≥0.1074；准确度︱相对偏差︱≤5.69%；测定10.0μmol/L样本和20.0μmol/L样本的批内精密度分别为2.31%和2.03%；测定范围相关系数r=0.9997，在[2.0，10.0]μmol/L区间内，︱绝对偏差︱≤0.3μmol/L；在(10.0，50.0]μmol/L区间内，︱相对偏差︱≤2.15%。结论：建立正确的体外诊断试剂性能验证方案有助于掌握更加准确的产品质量信息，为临床诊治提供更加准确的结果。【关键词】体外诊断试剂；试剂空白；分析灵敏度；准确度；批内精密度；测定范围【中图分类号】R197.39 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）36-0272-03 To explore the establishment of performance verification scheme of in vitro diagnostic reagent Liu Guangqian. The Laboratory of the Hospital of Traditional Chinese Medicine of Ningyang, Shandong, 255000, China 【Abstract】Objective Evaluating Performance of the Homocysteine（Hcy）assay kit by nzyme cycle method by the YY/T 1258-2015 and the GB/T 26124-2011 standard, to explore the establishment of performance verification scheme of in vitro diagnostic (IVD) reagent, ensure proper selection of products. Method Choosing healthy volunteers’ serum samples for research, testing the reagent blank, analysis sensitivity, accuracy, batch precision and determination range, analyzed results comprehensively, and To establish an IVD reagent performance validation protocol. Results The results showed that, the reagent blank was much more than 1.7222, the reagent blank absorbance change rate was 0.0050. The analysis of sensitivity was much more than 0.1074. The absolute value of the accuracy was no more than 5.69%. Determination of 10 mol/L samples and 20 mol/L samples, the batch precision was 2.31% and 2.03%. The r was 0.9997, in the [2.0，10.0] μmol/L, the absolute value of the absolute deviation was no more than 0.3 μmol/L, in the (10.0，50.0]μmol/L, the absolute value of the relative deviation was no more than 2.15%. Conclusion It can be useful to master more accurate product quality information by establishing the correct IVD reagent performance validation program, to provide more accurate results for clinical diagnosis and treatment. 【Key words】 In vitro diagnostic reagent;Reagent blank; Analysis of sensitivity; Accuracy;Batch precision;Determination range 随着我国体外诊断试剂行业的迅猛发展，我国体外诊断试剂厂家也越来越多，相对于国外成熟市场，国内厂家普遍规模小、品种少[1]，面对众多品牌的同类产品该如何做出正确的选择呢？本文旨参考《临床化学体外诊断试剂（盒）》（GB/T 26124-2011）标准对四川新健康成生物股份有限公司的同型半胱氨酸测定试剂盒（酶循环法）进行性能验证，探讨临床体外诊断试剂性能验证方案的建立，确保正确选择产品。报道如下。 1.一般资料 1.1 临床样本来源不同浓度的临床样本均来源于2016年1月—6月在本院健康体检的志愿者，血清样本的分离工作按照本院血清标准操作规程。样本要求非溶血、非黄疸、非脂血。 1.2 仪器与试剂主要仪器为日本日立全自动生化分析仪。试剂为同型半胱氨酸测定试剂盒（酶循环法）（批号为0416041），企业工作校准品[批号：XC-HCY-201401（1 2.3μmol/L）]，均由四川新健康成生物股份有限公司提供。 1.3 参考依据 YY/T 1258-2015《同型半胱氨酸测定试剂（盒）（酶循环法）》[2]，GB/T 26124-2011《临床化学体外诊断试剂（盒）》[3]。 1.4 方法 1.4.1试剂空白（1）要求试剂空白吸光度值≥0.8000（主波长340nm，光径10mm）；试剂空白吸光度变化率（△A/min）≤0.0200(主波长340nm，光径10mm)。（2）试验方法用纯化水测定试剂盒，在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5min（t）后的吸光度（A2），A2测试结果即为试剂空白吸光度测定值，计算出吸光度变化值(|A2-A1|/t），即为试剂空白吸光度变化率（△A/min），结果应符合上述要求。 1.4.2分析灵敏度（1）要求每10.0μmol/L同型半胱氨酸的吸光度变化率（△A/min）≥0.0100。（2）试验方法用（10.0±5.0）μmol/L的样本测试同型半胱氨酸测定试剂盒（酶循环法），记录在试剂盒规定参数下产生的吸光度改变，换算为10.0μmol/L同型半胱氨酸的吸光度变化率(|△A/min|)，结果应符合上述要求。 1.4.3准确度（1）要求

分析性能评估报告(试剂盒)

xxx测定试剂盒（xxx法）分析性能评估资料 xxxx公司

目录目录 (2) 1．概述 .............................................................................. 错误！未定义书签。2．**试剂盒及相关信息........................................................ 错误！未定义书签。 2.1**试剂盒批号和规格 ........................................................ 错误！未定义书签。 2.2校准品和质控品 ................................................................ 错误！未定义书签。 2.3试验仪器 ............................................................................ 错误！未定义书签。 3 性能评估资料.................................................................... 错误！未定义书签。 3.1空白对照评估资料 ............................................................ 错误！未定义书签。 3.1.1实验要求...................................................................... 错误！未定义书签。 3.1.2实验方法...................................................................... 错误！未定义书签。 3.1.3实验结果...................................................................... 错误！未定义书签。 3.2准确性评估资料................................................................. 错误！未定义书签。 3.2.1 实验要求..................................................................... 错误！未定义书签。 3.2.2实验方法...................................................................... 错误！未定义书签。 3.2.3实验结果...................................................................... 错误！未定义书签。 3.3特异性评估资料................................................................. 错误！未定义书签。 3.3.1实验要求...................................................................... 错误！未定义书签。 3.3.2实验方法........................................................................ 错误！未定义书签。 3.3.3实验结果...................................................................... 错误！未定义书签。 3.4精密度评估资料 ................................................................ 错误！未定义书签。 3.4.1 实验要求..................................................................... 错误！未定义书签。 3.4.2实验方法...................................................................... 错误！未定义书签。 3.4.3 实验结果..................................................................... 错误！未定义书签。 3.5分析灵敏度评估资料......................................................... 错误！未定义书签。 3.5.1 实验要求...................................................................... 错误！未定义书签。 3.5.2实验方法 ........................................................................ 错误！未定义书签。 3.5.3 实验结果...................................................................... 错误！未定义书签。

CFDA-20161025 同型半胱氨酸测定试剂盒技术审评指导原则(征求意见稿)(20161025)资料

同型半胱氨酸测定试剂（盒）注册技术审查指导原则（征求意见稿）本指导原则旨在指导注册申请人对同型半胱氨酸测定试剂（盒）注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。本指导原则是对同型半胱氨酸测定试剂（盒）的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。一、适用范围同型半胱氨酸测定试剂（盒）用于体外定量测定人血清或血浆中同型半胱氨酸的浓度。从方法学考虑，本指导原则主要指基于分光光度法原理，利用全自动、半自动生化分析仪或分光光度计，在医学实验室采用酶循环法进行同型半胱氨酸定量检验所使用的临床化学体外诊断试剂,根据测定方法可分为速率法和终点法两种。本指导原则不适用于干式同型半胱氨酸测定试剂（盒）。依据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理

总局令第5号）、《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管[2013]242号）同型半胱氨酸测定试剂(盒)管理类别为Ⅱ类，分类代号为6840。二、注册申报资料要求（一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、有关生物安全性方面说明、研究结果的总结评价、同类产品上市情况介绍等内容，应符合《体外诊断试剂注册管理办法》（以下简称《办法》）和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家食品药品监督管理总局〔2014〕第44号公告）相关要求。下面着重介绍与同型半胱氨酸测定试剂（盒）预期用途有关的临床背景情况。体内的同型半胱氨酸（HCY)来源于蛋氨酸，蛋氨酸主要来源于食物。蛋氨酸分子含有甲基，在ATP作用下生成S-腺苷蛋氨酸后，可通过各种转甲基作用为体内已知的50多种具有重要生理活性的物质提供甲基。血浆中同型半胱氨酸分为结合型和游离型两种，以四种分子形式存在。我们通常测定的是血浆中总同型半胱氨酸。国外，1995年Bouskey等汇集分析了27个研究单位、总人数为4666例的临床研究结果。发现10%的冠心病患者是由高同型半胱氨酸血症所致。血浆HCY 每增加5 mol/L，相当于血清胆固醇增加0.5mol/L（20mg/dL）对血管造成的危害。一项对587例血管造影确诊的冠心病患者进行的4.6年随访研究，共有64例死亡。四年时间里，同

糖化血红蛋白测定试剂盒(酶法)注册技术审查指导原则

附件2 糖化血红蛋白测定试剂盒（酶法）注册技术审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对糖化血红蛋白测定试剂盒（酶法）注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。本指导原则是对糖化血红蛋白测定试剂盒（酶法）的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。一、适用范围从方法学考虑，在本文中糖化血红蛋白测定试剂是指以多步酶耦联法为基本原理，利用全自动、半自动生化分析仪或分光光度计，在医学实验室对人体全血样本中糖化血红蛋白占总血红蛋白比例间接进行体外定量分析的试剂。依据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总

局令第5号），糖化血红蛋白测定试剂盒管理类别为Ⅱ类，分类代号为6840。本指导原则不适用于：（一）单独申请注册的糖化血红蛋白校准品和质控品。（二）酶法原理之外的其他糖化血红蛋白测定试剂盒。二、注册申报材料要求（一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、有关生物安全性的说明、研究结果的总结评价以及同类产品上市情况介绍等内容，应符合《体外诊断试剂注册管理办法》和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014年第44号）的相关要求，下面着重介绍与糖化血红蛋白测定试剂预期用途有关的临床背景情况。糖化血红蛋白（Haemoglobin A1c，HbA1c）测定试剂盒用于检测人体样本中糖化血红蛋白的含量，临床上主要用于糖尿病（Diabetes）的辅助诊断和血糖水平的监控。糖化血红蛋白的浓度主要反映被检者过去8—12周体内血糖的平均水平，不受抽血时间、是否空腹、是否使用胰岛素以及其他能使血糖水平短暂波动的因素影响。糖化血红蛋白检测特异性强、重复性好、灵敏度高, 被明确规定为国际公认的糖尿病监控“金标准”。 HbA1c的检测方法，常见的有色谱法、酶法和胶乳增强免疫比浊法等。其中酶法试剂又分为两种，一种是在一次样本与试剂的反应中通过吸光度变化值直接测得糖化血红蛋白占总血红蛋白（Haemoglobin，Hb）百分比例的试剂（以

临床生物化学检验试剂盒的性能评价

第三节一临床生物化学检验试剂盒的性能评价临床生化检验试剂盒是用化学和生物化学反应的原理二用于完成一个特定体外诊断检验,而包装在一起的一组组分三试剂盒组分可包括抗体二酶二缓冲液二稀释液二校准物二控制物或其他物品和材料,用于体外测定人体体液中的化学和生物化学组分来获取临床诊断信息三它是体外诊断试剂(i nv i t r od i a g n o s i s r e g e n g t s)中的一大类,根据我国国家食品药品监督管理局(S F D A)的‘医疗器械分类目录“,归为临床检验分析仪器类,按医疗器械管理三体外诊断试剂按风险级别进行分类分级管理,Ⅲ二Ⅱ二Ⅰ类产品分别由国家二省级二市级药品监管部门审批,临床生化检验试剂盒多属Ⅱ类产品三一二临床生物化学试剂盒的质量标准 2006年制订了‘临床化学体外诊断试剂(盒)通用技术要求“,规定了临床化学体外诊断试剂(盒)质量检验的通用技术要求,包括术语和定义二分类和命名二要求二试验方法二标签和使用说明二包装二运输和贮存三适用于医学实验室进行临床化学项目定量检验所使用的体外诊断试剂(盒)三该标准是目前临床化学体外诊断试剂(盒)注册审批的标准三二二临床生物化学检验试剂盒的分类根据其物理性状,可以分为干试剂和液体(湿)试剂,干试剂根据制备工艺不同分为干粉二冻干二片剂二干试剂条等三干试剂的优点是运输方便二保存期长,其缺点是组分均一性较差,瓶间差较大,分装过程中的称量误差和复溶时加入水量的误差,都导致瓶间的不均一性,水质的优劣对试剂的稳定性和测定结果的可靠性有相当大的影响三除干试剂条应用于干式生化仪外,其他干试剂已经逐渐被淘汰三液体试剂因组分高度均一二瓶间差小二测定重复性好二不需复溶直接使用等优点,是目前使用最广泛的剂型三液体试剂主要分为单液体型和双液体型三 (一)单液体型单液体型特别适用于半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪三半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪因缺试剂瓶位置或试剂瓶位置少,而适用单试剂三从技术角度讲,要保证足够的试剂盒稳定性,在所有剂型中,单液体型试剂盒对稳定技术的要求最高,尤其是酶法分析试剂盒,将酶二辅酶二色原等组合为单一试剂,稳定技术更高三但抗干扰能力无法与双液体试剂比拟三 (二)双试剂液体型大多数中二大型生化分析仪有两根试剂针,使用双试剂不会影响分析效率三有时为了稳定性的需要,试剂盒内含有三个试剂,临用前将某两个试剂混合,再按双试剂使用三因具备优点多,是目前主流剂型三 1.稳定性能好一与单一液体试剂相比,可以分拆为两个试剂,可采用不同的缓冲体系(离子强度和p H都不同),混合后为最适p H;其稳定技术容易得多,比如,可以将酶和辅酶与色原分开,也可把辅助酶与指示酶分开三 2.可消除样品自身空白一可设计成第一试剂与样品不发生化学和生物化学反应,两者混合后读取第一个吸光度,在两点平衡法中可扣除该吸光度,相当于做了一个空白对照三所以,原来

医学实验室ISO15189认可性能验证实验方案

医学实验室ISO15189认可性能验证实验方案德信诚咨询为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准确性,特制定本方案。本方案从准确度、精密度、参考范围、线性范围以及方法学比对5个方面对各个试验项目进行评价。一、精密度 (Precision):精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度,表示测定结果中随机误差大小程度的指标。精密度通常用不精密度表示。可以分别评价连续精密度(批内精密度)、重复性不精密度(中间精密度,包括批间、日间精密度等)和再现性精密度。本方案采用批内和天间两种方法对各个试验项目的精密度进行评价。全部实验过程使用同批号试剂和质控品,并且保证检测当日质控在控。 1、批内精密度(连续精密度): 方法:在检测患者标本过程中,连续运行高低水平质控品各20次,记录检测结果。计算批内精密度的CV值和SD值。结果评价(1)厂家评价标准:计算精密度指数=验证SD/厂商SD,精密度指数要求小于等于1,或者实测CV小于等于厂家要求的CV,两者符合其一即可。具体见《精密度评价》表格。 (2)按照国际推荐标准:批内精密度应在CLIA88允许误差的1/4以内,见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。 2、天间精密度(中间精密度): 方法:同样使用两个水平的质控品,若需复溶冻干质控品做实验,要注意选择产品的稳定性和瓶间差。要严格控制每次复溶冻干品时的操

作手法。连续测试20天,每天检测1次。在次过程中不能更换试剂批号及质控品批号,是否需要重新定标则取决于实验室。测试完成后记录检测结果。结果评价(1)厂家评价标准: 计算天间的SD及CV值,并计算精密度指数=验证SD/厂商SD。精密度指数要求小于等于1,或者实测CV小于等于厂家要求的CV,两者符合其一即可。具体见《精密度评价》表格。 (2)按照国际推荐标准:批内精密度应在CLIA88允许误差的1/3以内,见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。二、准确度准确度(accuracy)指检测结果与被测量物真值之间的接近程度。是分析测量范围、分析灵敏度以及生物参考区间评价的基础。准确度的评价方法很多,比如检测定值参考物质,同参考方法进行比对,同有溯源性的检测系统进行方法学比对,卫生部临检中心质评的汇报结果均可以作为评价准确性的方法之一。本方案采用测定定值标准物质的方法来评价各个检测项目的准确度。定值标准物质采用厂家定值标准品。方法: (1)试验期间保证机器状态正常,保证试验当日室内质控在控。 (2)按厂家要求准备各个项目的新批号定标品(要与定标时使用的定标品批号不同)各一套,按照标准复溶。 (3)记录该新批号定标品的定值。 (4)在设备上检测各个定标品(多水平)的相关项目,每个水平