造血干细胞在外周血干细胞移植中检测的意义和方法 综述 陈明铸
造血干细胞在外周血干细胞移植中检测的意义和方法（综述）
造血干/祖细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)从20世纪40年末发展至今作为一种可以治疗造血系统的多种疾病的治疗方法，已经被广泛在临床上使用。其中外周血干细胞移植（PBSCT）在80年代被应用于临床后大有替代骨髓移植的倾向。外周血干细胞移植（PBSC transplantation, PBSCT）的优势包括：（1）造血功能的快速恢复；（2）减少肿瘤细胞污染；（3）降低病人费用；（4）增加移植物中T细胞和NK细胞数量，产生移植物抗白血病效应(GvL),降低移植后复发；（5）避免麻醉和手术等。[1] 同时PBSC的产物更适于体外调控，如CD34+细胞的筛选、肿瘤细胞的清除和基因移植。PBSCT在近年来得到了迅速的发展。在国外已经成为血液病及部分实体肿瘤患者大剂量放射治疗或化学药物治疗后重建骨髓造血的常规治疗措施。
然而，在进行PBSCT时需要采用不同的动员方案，以将骨髓（BM）内造血干内造血干/ 祖细胞动员到外周血( PB) , 因为外周血采集物中造血干/ 祖细胞( PBSC) 的数量对移植的成功有着直接的影响。所以PBSCT的关键因素为确定移植所需PBSC的小量及采集PBSC的最佳时机。目前主要有4 种检测PBSC的方法: ①早期使用的集落培养法, 其检测粒- 巨噬细胞集落形成单位(CFU- GM ) , 但无法定量计数PBSC , 并因方法的复杂性和不规范性, 致使CFU- GM结果差异较大, 只适用于标本的回顾性分析。②全自动血细胞计数仪检测幼稚细胞( I M I+细胞) 、造血祖细胞( HPC) , 该方法经济、快捷、简便,但特异性较差,存在幼稚细胞干扰。因此,无法用于指导自体外周血干细胞移植。③FCM定量检测CD34+细胞。CD34是与HPC有关的膜表面分子,表达于不同分化阶段的HPC 表面, 其性质为含磷的糖蛋白。CD34+细胞实际上包括所有的HPC , 如CFU- GM , 红细胞暴发形成单位( CFU -E) , 巨核细胞集落形成单位( CFU- Mk) , 混合细胞集落形成单位( CFU - Mix) 和原始细胞集落形成单位( CFU- Blast ) 。利用CD34 抗体, 结合FCM 检测CD34+细胞, 快速、灵敏、特异, 已广泛应用, 并成为分析HPC 的推荐参考方法。④分子生物学方法分析CD34m RNA , 其特异、敏感、快速、准确,但实验条件、技术要求较高,目前临床开展较为困难。[2]
一、集落培养法检测粒-巨噬细胞集落形成单位（CFU-GM）
集落培养法是指对外周血中单个核细胞（PBMNC）进行体外培养，2周后观察CFU-GM数目，以间接反映PBSC数，CFU-GM可以反映特定系列祖细胞增殖能力。对PBSCT所需的CFU-GM数量有不同报道，即（15-50）×104CFU-GM/Kg体重。如此大量的造血祖细胞（HPC），可在病人经化疗，血象开始恢复后，每天2-5次，连续2-5d进行白细胞过滤而获得。尤其在化疗后给予人类重组粒-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF），病人外周血中可出现HPC 的暴发增殖。此时，可利用集落培养法检测CFU-GM。检测时，通常以肝素抗凝血经离心或溶血去除红细胞，得白细胞富集液，或经白细胞过滤器得到PBMNC采集液，以（2-4）×104个细胞/ml一式3份移入含有各种营养成分和CSF的半固体培养基进行培养。经37℃、5%CO2、95%湿度条件下温育14d，用倒置显微镜观察CFU-GM（定义为≥50个细胞/集落），用CFU-GM 百分数乘以标本中细胞总数即为外周血中的CFU-GM数。Siena等对未治疗的实体瘤病人外周血集落培养法进行重复性研究发现，含有50-150个集落的变异系统(CV)为1%-30%，而大于150个或小于50个集落的CV可超过30%。
尽管集落培养法开展最早，不可直观计数，但其无法定量计数 PBSC。而且，由于方法的复杂性和不规范性，包括使用许多生物试剂，主观性地判断结果（如利用显微镜计数CFU-GM）以及缺乏标准化操作规程等，致使不同实验室得到的CFU-GM结果差异很大，故其只能作为骨髓功能恢复所需细胞数的大致估计。此外，集落培养法主要检测的是分化较为成熟的祖细胞，即粒-巨噬细胞系，而对更为接近PBCS的细胞，如长期培养起始细胞（LTC-IC）和延长
LTC-IC（ELTC-IC）则无法分析。尽管目前采用体外培养法能对上述两类细胞进行检测，但其为半定量，方法复杂，耗时长（至少需5周），无法指导临床采集暴发增殖的PBSC。因此，集落培养法只适用于标本的回顾性分析。
二、血细胞计数仪检测幼稚细胞HPC
细胞计数仪（如Sysmex公司的SE-9500，XE-2100，XE-5000等）利用幼稚细胞（immature myeloid information, IMI）通道，检测外周血中的幼稚细胞（即IMI+细胞）及HPC，最近年来发展起来的一门新技术。很多研究表明血细胞分析仪检测HPC具有较好的重复性且与FCM检测骨髓动员后HPC具有较好的相关性。[3]
以Sysmex XE-5000 为例，Sysmex XE-5000作为Sysmex公司X系列全自动五分类血液分析仪最新和最高端的产品，除了采用传统的电阻抗法和射频电阻抗法还运用半导体激光及流式细胞技术。并且根据不同细胞的不同性质设有DIFF通道，WBC/BASO通道，NRBC通道，IMI通道，RBC/PLT-I通道，RET/PLT-O通道，HGB通道可以快速准确的对血液中各种细胞进行测定。其中在IMI通道中，XE-5000利用成熟粒细胞膜表面含较高量的脂质及较低量的蛋白质而幼稚粒细胞膜表面则相反的原理。溶解红细胞、血小板、成熟白细胞、淋巴系幼稚细胞并使粒系的幼稚细胞保持原状。检测时在IMI通道中加入含聚乙二醇次乙基团和含硫氨基酸的表面活性剂以破坏细胞膜，导致成熟粒细胞膜破坏而幼稚粒细胞膜部分受损，从而使聚乙二醇次乙基团和硫化氨基酸进入细胞与细胞膜和细胞内容物结合。（见图一）不同的幼稚粒细胞对试剂的作用有所不同，利用直流电法测量细胞的大小，而射频则透入细胞内测量细胞核的大小及核与胞浆的密度。从而实现根据不同阶段的幼稚细胞的体积、核的大小、核浆比的不同，区分幼稚细胞使其分布在坐标系的不同位置目的。在以射频信号为纵轴，直流电信号为横轴的IMI散射图上不同的细胞占据的位置不同, 越幼稚粒细胞其核密度越低因而越接近横轴。Takahisa等的研究证实最接近于横轴的细胞团中以CD34+细胞为主，故该仪器将这一细胞团中的细胞数设置为参数造血干/祖细胞（HPC）。[4]
但是，值得注意的是由于使用IMI通道所检出的HPC是一类细胞膜具有多量多量磷脂成分、细胞内容物较少、体积较小的细胞。有学者指出HPC与CD34+细胞检测的是不同的前体细胞群。所以这种方法与FCM检测被标记的CD34+细胞从而反应外周血干细胞数量是两种不同的思路。有报道称外周血中的幼稚细胞对HPC的检测有干扰，因此HPC的检测不适用于自体外周血干细胞移植时的检测。但在没有幼稚白血病细胞存在时，如同种异体外周血干细胞移植（Allo-PBSCT），选择正常人作供体，此时分析HPC意义较大，可对采集HPC的最佳时机提供较佳而且简便的方法。[5][6]
图一
三、流式细胞术（flowcytometry , FCM）检测CD34+细胞
因为外周血与骨髓中HPC表达同样的CD34抗原(CD34+)，所以外周血干细胞的检测可采用抗体标记CD34+细胞并检测其数量。为评估骨髓动员效果, 判断最佳采集时机, 用流式细胞术进行CD 34+造血干细胞绝对计数已成为造血干细胞移植的常规检查之一。流式细胞术（flowcytometry , FCM）是在保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏的状态下，从分子水平上获取多种信号实现对单个细胞进行定量分析或纯化分选。[7]
CD34是80 年代中期发现的一种细胞表面分子, 此分子在BM 和PB 未成熟的造血细胞及所有具有造血潜能的集落形成细胞上表达, 包括多能和定向造血祖细胞。CD34+细胞实际上包括所有的HPC，如CFU-GM，红细胞暴发形成单位(BFU-E),巨核细胞形成单位（CFU-Mk）,混合细胞集落形成单位（CFU-Mix）和原始细胞集落形成单位（CFU-Blast）。后两种HPC明显具有许多干细胞的特征，如它们可以自我更新，也可定向分化为一定数目的造血细胞系。体内试验也发现，经过致死剂量照射的狒狒移植足够数量的自体CD34+细胞，可以完全恢复其造血功能，同样的现象也可在经过骨髓、摧毁性治疗的病人中出现。CD 34+细胞在正常BM 单个核细胞中约占1 %- 4 %。多数实验表明FCM 测定CD 34+细胞数量与CHU 实验具有良好的正相关。由于CD34+细胞在BM、脐带血, 或是在动员后的PB中,含量均很低, 因而造成测定结果的重复性和准确性均很差。准确计数CD34+细胞的数量,可判定动员方案是否成功，何时开始采集及何时终止采集PBSC ,并可用于比较多个移植中心的疗效。目前流式细胞仪计数CD34+细胞是检测造血干细胞数量的参考方法。
以目前较为流行的ProCOUNT法为例进行说明。ProCOUNT计数CD34+细胞是根据干/祖细胞特性而加以识别，用核酸染料（nucleic acid dye，NAD）、CD34 PE和CD45 PreCP三种试剂染色，在NAD/SSC散点图中设定造血干/祖细胞门R1，（高核酸含量，侧向散射光SSC弱）在CD45 PreCP/SSC散点图中设定造血干/祖细胞门R2（CD45表达较低，SSC小）在NAD/CD34PE 散点图中再设定造血干/祖细胞门R3（核酸含量高、CD34高表达）和荧光微球（Beads）门R4，最后结果再根据TruCOUNT管内含定量的荧光微球（Beads）作为内参结合R1+R2+R3中的造血干细胞/祖细胞数量和标本用量，即可换算成每微升标本中造血干细胞的绝对数量。
[4] 该技术具有一下几个方面的优势。首先,采用核酸染料/CD34PE/CD45PerCP三色分析。实验使用核酸染料设定阈值,不受散射光、抗体荧光等参数影响,这样就保证了所有CD34+造血干细胞(包括CD45dim/-的细胞)都包括在分析数据中。ProCOUNT试剂盒采用Ⅲ类CD34单克隆抗体(抗-HPCA-2),藻红蛋白(PE)标记,使之具有最大信噪比;对于经蛋白酶处理的浓缩样本,亦能保证造血干细胞鉴定的可靠性。第二,与双平台方法相比较,ProCOUNT方法为单平台方法,只使用流式细胞仪进行绝对计数,标本处理为溶血免洗法,从而不会导致细胞丢失,使结果更加准确,易于标准化,室间结果也具有较好的可比性。同时,单平台方法也避免了在造血干细胞计数过程中应该报告占白细胞的百分比,还是应该报告CD34+细胞占有核细胞的百分比的争议[12],直接报告每微升血中造血干细胞的绝对数量。第三,在ProCOUNT法中采用了TruCOUNT绝对计数管(即预先加有已知准确数量的标准荧光微球)做定量分析,从而避免了血细胞计数可能带来的误差,这种TruCONT方法采用的是每微升样本中已知数量的参照微粒,使细胞的绝对计数与流式细胞仪上获取的细胞量无关,故结果更加可靠。虽然，FCM测定CD34+细胞是检测HPC数量的参考方法，但FCM法需特殊仪器，操作技术要求高，价格昂贵，结果的重复性欠佳，促使人们追求更经济、快捷、简便的方法。[8]
四、分子生物学方法分析CD34 mRNA
目前，主要有2种方法，即：实时反转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）和单个细胞反转录PCR（single-cell RT-PCR）。实时RT-PCR利用带有荧光的TaqMan探针和可实时检测荧光的仪器，如ABI Prism 7700序列检测系统，来进行动态检测。实时RT-PCR可根据CD34 mRNA 的不同剪接方式定量分析完整型CD34（CD34F）和截短型CD34+（CD34T）mRNA。实时RT-PCR 检测特点为：扩增反应仍处于对数增长期时，进行实时检测。由于该期无反应成分之间的干扰，故cDNA定量的精密度大为提高。而且实时RT-PCR无需对PCR反应产物予以处理，因此可减少PCR产物的携带污染，同时其检测范围更宽，速度更快。
单细胞RT-PCR则联合应用RT-PCR和流式细胞术定量检测CD34 Mrna,是鉴定、分离和检测含量很少细胞的突破性方法。原理为：首先用流式细胞仪单细胞分选技术分离CD34+细胞，再利用RT-PCR技术对该细胞进行CD34特异性转录子的分选和鉴别。通常基于ingle-hitpoisson模型，对含量极低的目的DNA采用有限稀释和全或无PCR反应模式来定量PCR扩增前的目的基因总数。该方法对流式细胞术分选单个细胞技术要求十分高，必须利用来自一个基因的CD34 PCR产物作为分选操作时的阳性对照。
值得注意的是，膜表面分子CD34的半衰期比CD34 mRNA长得多，事实上，仅有0%的CD34+细胞具有活跃的CD34基因转录。而且，根据该模型，在CD34+/CD38-细胞亚型（推测为未定向祖细胞）100%表面CD34 mRNA转录子，而在CD34+/CD38+亚型（推测为定向祖细胞）表达则大为降低。此结果可部分解释为何移植物中虽含有相同的CD34+细胞数，但移植效果却不同的现象。Baech等认为分子生物学检测CD34 mRMA方法灵敏、准确、快速，具有临床和科研推广价值，将会在干细胞移植中为临床提供不同祖细胞亚群的更为准确的数量。
目前，分析外周血干细胞4种方法各有特点。现阶段在造血干细胞在外周血干细胞的定量检测中多用流式细胞仪（FCM）的方法，但由于其操作繁琐费时，且费用昂贵，利用血细胞分析仪测定HPC方法也得到了迅速发展。
参考文献：
[1]黎明. 外周血干细胞分析技术进展[J]. 上海医学检验杂志, 2002, 17(3): 186-188
[2]彭黎明. CD34 定量分析外周血干细胞的研究[J]. 中国实验诊断学, 2001, 5(5): 225-228
[3]王大光. Sysmex XE-2100血液分析仪外周血造血干细胞检测与CD34 + 流式细胞仪检测的相关性[J]. 实验与检验医学, 2009, 27(2): 199-200
[4]凌励.Sysmex XE - 2100 血细胞分析仪在外周血干细胞临床检测中的功能评价[J]. 中华检
验医学杂志, 2003, 26(11): 697-698
[5] 郭婧婧, 武四云, 陈远林. 外周血造血干细胞最佳采集时机的快速判断方法[J]. 中南大学学报（医学版）, 2005, 30(5):570-573.
[6] 杨申淼. 外周血造血干/ 祖细胞动员与采集时动态快速监测造血祖细胞的意义[J]. 中国实验血液学杂志, 2003, 11(3): 292-296
[7]王兰兰. 临床免疫学检验[M]. 北京:人民卫生出版社, 2012. 186-187
[8] 北京市临床流式细胞分析协作组. 流式细胞术三色分析调查成年人外周血CD34造血干细胞绝对计数参考范围[J]. 中华检验医学杂志, 2002, 25(1): 58-60
自体外周血造血干细胞移植的护理
自体外周血造血干细胞移植的护理 ［关健词］造血干细胞移植层流病房护理 ［目的］：造血干细胞移植期间如何将消毒隔离、预防感染和出血、心理护理贯穿整个护理过程中。方法：通过总结我科自2006年10月～2009年7月在我科行自体外周血造血干细胞移植共25人的护理过程。结果：25例行自体外周血造血干细胞移植病人成功出院。结论：造血干细胞移植过程中将消毒隔离、预防感染和出血、心理护理贯穿整个护理过程中至关重要。造血干细胞移植的成功护理工作有着不可抹灭的作用。 外周血造血干细胞移植,因其采集方法简便,移植后造血重建快,痛苦相对较少,易于被患者个人或供者接受,而广泛应用于临床治疗[1]。病人在入层流病房后，我们紧紧围绕加强消毒隔离、预防感染和出血、心理护理来护理病人。在护理自体干细胞移植病人中取的较满意的效果。现总结如下: 1、临床资料： 2006年10月～2009年7月在我科行自体外周血造血干细胞移植共25例。其中男性12例，女13例。其中淋巴瘤17例（霍奇金淋巴瘤2例、非霍奇金淋巴瘤15例）；急性白血病4例(M5型2例、M2型1例、M1型1例)；多发性骨髓瘤4例。 2、护理方法 2、1．五官及全身皮肤的护理 口腔粘膜、牙龈、眼结膜、鼻腔、肛周是造血干细胞移植过程中最
易发生感染的部位，做好口腔、眼睛、鼻腔、肛周的护理至关重要。具体做法：①1.口腔，每日用1：4朵贝氏液及4％碳酸氢钠液交替餐前、餐后漱口,之后以每3 h含漱1次,每次含漱时间为5 min左右,特别注意在两颊部和咽部要充分接触。口腔护理2次/日。②.眼睛、耳、鼻腔，每日用氯霉素和0.1%利福平眼药水交替点眼4次/日，75%乙醇擦外耳道4次/日,用1∶2000洗必泰液擦鼻腔4次/日。③. 会阴、肛周每天及每次便后用1∶2 000洗必泰溶液坐浴,并用红霉素软膏涂抹肛周。会阴抹洗2次/日。④.每日用1∶2 000洗必泰擦浴,饭前和便后用1∶1000洗必泰液毛巾擦手。护理过程中注意口腔粘膜、眼结膜、鼻腔、肛周有无异常。注意全身皮肤有无瘀点、瘀斑。有无血尿、黑便等。 2、2锁骨下静脉置管的护理 注意预防锁骨下静脉导管感染、防止空气栓塞、脱管、管腔堵塞。每日观察导管口有无渗血、渗液；在静脉置管处皮肤直径5 cm～10 cm 每日安尔碘消毒，每日更换无菌敷料及肝素锁。注意输液器与导管衔接紧密,液体不能输空,每日检查导管有无裂痕；各种治疗护理避免牵拉导管,静脉插管时导管插入深度作明确标记,并记录其长度数据。导管与皮肤的缝线要牢固,每日交接留置导管的情况；病人化疗反应恶心呕吐频繁时,特别注意局部固定[2]，导管外脱禁止送回。输入血制品及采集血标本后,立即用理盐水彻底冲洗导管。全天输液结束后用1∶1 000的肝素钠稀释液2～3ml封管。 2、3胃肠道的护理 患者的饭菜、饮料等必须新鲜,每日无菌饮食(食物需经微波炉消毒后方可食用,餐具每次也同时消毒)。进食高营养易消化食物。水果须先用清水洗过后,再用1∶2000洗必泰液浸泡30分,温开水冲洗后用无菌刀削皮食用；口服药片两面经紫外线各照射30min后供患者服用；进食不易
自体骨髓移植( 陆道培)
自体骨髓移植( 陆道培） 自体骨髓移植主要适用于治疗恶性淋巴瘤和多发性骨髓瘤，有时在急性白血病时，没有合适供者时也可采用。自体移植的基本过程主要有以下几个步骤：造血干细胞的动员、造血干细胞的采集和冻存、合适的机会进行自体移植、移植后的维持治疗。 自体骨髓移植治疗 (一) 急性白血病 异基因移植对急性白血病虽有很好的疗效，但多数患者缺乏适合的供髓者及高昂的移植费用，受到较大限制。自体骨髓移植作为异基因移植的一种替代治疗，在近10年内得到迅速的发展。目前虽已积累了不少临床资料，但由于各家的报告的疗效相差较远，至今对自体骨髓移植在急性白血病治疗中的地位尚有争议 (二)慢性粒细胞白血病 自体骨髓移植对慢性粒细胞白血病的疗效差，异体骨髓移植是最佳选择。 自体骨髓移植对恶性淋巴瘤有良好的治疗作用，故它已成为恶性淋巴瘤不可缺少的一种治疗方法，据统计，欧洲26国在1992年内共做自体骨髓移植3399例，其中恶性淋巴瘤1394例，为各病之首。同期用异基因骨髓移植治疗的淋巴瘤只有123例。北美于1992-1993年间所做的5492例自体骨髓移植中恶性淋巴瘤(霍奇金652例，非霍奇金淋巴瘤1417例)也多于白血病等其他病种。 自体移植的造血干细胞的动员 因为自体移植采集病人自己的造血干细胞，如果在疾病冶疗的早期进行干细胞采集，可能会有肿瘤细胞的污染。但是，如为了充分清除体内肿瘤细胞污染，在进行很多次的化疗后，再进行采集，叉可能采集不到充足量的造血干细胞。这是因为每次化疗都对骨髓有损害作用，其中的损害也包括对造血干细胞的损伤.削弱了骨髓的的储存能力。为了平衡这两点，自体移植采集+细胞的时机一般选择在进行几个疗程有效的化疗后，体内的肿瘤负荷比较步时，同时骨髓中的干细胞又损伤得不太严重时。具体到不同病种和不同病人，应因人而异，这应泼南有经验的临床医生来决定。 自体移植的时机 在采集出足够的造血干细胞后，应选择一合适的机会进行大剂量化疗和放疗然后回输干细胞。这个时机的选择也很重要。因为自体移植的治疗作用完全依赖于预处理方案中的化疗和/或敢疗，寄希望于这次化放疗能完全或接近完全清除体内的肿瘤细胞。如果在移植时，体内的肿瘤细胞残存较多，靠这一次的化放疗难以清除所有肿瘤细胞。所以，自体移植的时机最好应是在疾病得到完全缓解时，甚至在获得缓解后再进行巩固治疗一段时间后进行。在恶性淋巴瘤的病人，应尽力遵循这个原则，急性白血病亦是如此。在多发性骨髓瘤病人，固有些病人难以获得完全缓解，而且自体移植是取得完全缓解的重要手段，自体移植也不能彻底治愈多发性骨髓瘤。所以，在多发性骨髓瘤病人的自体移植时，可不必强求达到完全缓解状态。 自体骨髓移植的主要不足：复发 我们在前面已提到自体移植与异基因移植相比，有的病人年龄可放宽至65岁;移植过程中的并发症和移植相关死亡率低;移植后生活质量影响小;移植费用较低。有这么多的优点，那为什么不所有血液肿瘤均选用自体移植呢’自体移植与异基因移植相比，其主要的不足就是治疗作用弱，在恶性程度更高的疾病，如急性白血病，疗效不是很满意，移植后复发的几率较大。所以，不同的病种选用
骨髓间充质干细胞移植治疗心血管疾病的临床研究新进展
骨髓间充质干细胞移植治疗心血管疾病的临床研究新进展 自2001年骨髓干细胞被首次用于治疗心肌梗死以来，干细胞移植治疗心血管疾病的临床研究已历经了10余年。近年来，BMSC因其可塑性、遗传稳定性和免疫耐受性而成为用于心肌修复较为理想的细胞。本文主要对BMSC移植治疗心血管疾病的临床研究的现状和进展加以综述。 1 BMSC的特点 BMSC位于骨髓的基质，占骨髓有核干细胞的0.001%～0.01%，能够分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞及心肌细胞等。BMSC的标志物主要为CD29和CD44，研究表明，BMSC具有可塑性、遗传稳定性和免疫耐受性，成为心肌修复的理想细胞。 2间充质干细胞的预处理 移植后细胞成活率较低是影响干细胞移植疗效的主要因素。移植后约90%的干细胞发生细胞凋亡。而细胞移植前的预处理可有效保护细胞，提高其抗缺血和缺氧的能力，提高移植后细胞存活率。 预处理主要有以下几种方法。首先，缺血缺氧预处理。此举可激活SDF-1a/CXCR4轴。基质细胞衍生因子-1（SDF-1）不仅是一种重要的趋化因子，而且具有抑制间充质干细胞的凋亡、增加间充质干细胞的存活率及增殖活性等作用。其次，SDF-1预处理。Liu[1]等通过免疫印迹和PCR技术证实，SDF-1预处理激活了Akt和Erk促生存信号通路，且上调了Bcl-2/Bax的比值。 3 BMSC在心血管疾病治疗中的应用 3.1 BMSC移植疗法的适应症目前主要有以下3种适应症，即：急性心肌梗死，慢性缺血性心力衰竭，扩张型心肌病。 3.1.1急性心肌梗死众多实验研究证明，间充质干细胞移植在减少梗死面积、保藏收缩功能以及缓解左心室重构方面均起到有利作用。而生物材料可作为干细胞的支架，也可用作移植干细胞临时的黏附基质。CUI等[2]将自聚肽纳米纤维支架用于承载骨髓源性心肌干细胞移植，结果表明此法有利于移植细胞在受损心肌内的存活和向功能性心肌的分化，并促进心功能恢复，其疗效优于单纯干细胞移植。 3.1.2缺血性心肌病有关研究表明，治疗的最佳时间为心肌梗死发病后1个月。然而，最佳治疗时间的确定仍需进一步的临床证据。 3.1.3扩张型心肌病先前的临床前研究证实，干细胞移植疗法在动物的特发性扩张型心肌病模型中有显著的作用。临床上应用干细胞移植疗法治疗重度扩张
造血干细胞移植技术临床应用质量控制指标2017版
附件2 造血干细胞移植技术临床应用 质量控制指标 （2017年版） 一、造血干细胞移植适应证符合率 定义：造血干细胞移植术适应证选择正确的例数占同期造血干细胞移植术总例数的比例。 计算公式： 造血干细胞移植适应证符合率 =造血干细胞移植术适应证选择正确的例数同期造血干细胞移植术总例数×100% 意义：体现医疗机构开展造血干细胞移植技术时，严格掌握适应证的程度，是反映医疗机构造血干细胞移植技术医疗质量的重要过程性指标之一。 二、异基因造血干细胞移植植入率 定义：异基因造血干细胞移植术后100天内，实现造血重建（患者外周血中性粒细胞＞0.5×109/L 与血小板＞20×109/L ）的患者例次数占同期异基因造血干细胞移植患者总例次数的比例。 计算公式： 异基因造血干细胞移植植入率 =异基因造血干细胞移植术后100天内实现造血重建的患者例次数同期异基因造血干细胞移植患者总例次数×100% 意义：反映医疗机构造血干细胞移植技术水平的重要指标之一。 三、重度（Ⅲ-Ⅳ度）急性移植物抗宿主病发生率 定义：急性移植物抗宿主病（aGVHD ），是指造血干细胞移植术后100天内，由于移植物抗宿主反应而引起的免疫性疾病，主要表现为皮疹、腹泻和黄疸，是异基因造血干细胞移植的主要并发症和主要死亡原因。重度（Ⅲ-Ⅳ度）急性移植物抗宿主病发生率，是指异基因造血干细胞移植术后发生重度（Ⅲ-Ⅳ度）急性移植物抗宿主病患者例次数占同期异基因造血干细胞移植患者总例次数的比例。
计算公式： 重度（Ⅲ?Ⅳ度）急性移植物 抗宿主病发生率=重度 Ⅲ?Ⅳ度 异基因造血干细胞移植术后 发生急性移植物抗宿主病患者例次数同期异基因造血干细胞移植患者总例次数×100% 意义：体现医疗机构对不同移植方式造血干细胞移植术后aGVHD 预防水平，是反映医疗机构造血干细胞移植技术医疗质量的重要过程性指标之一。 四、慢性移植物抗宿主病发生率 定义：慢性移植物抗宿主病（cGVHD ），是指造血干细胞移植术100天后，由于移植物抗宿主反应而引起的慢性免疫性疾病。慢性移植物抗宿主病发生率，是指异基因造血干细胞移植术后发生慢性移植物抗宿主病患者例次数占同期异基因造血干细胞移植患者总例次数的比例。 计算公式： 慢性移植物 抗宿主病发生率=异基因造血干细胞移植术后发生慢性移植物抗宿主病患者例次数同期异基因造血干细胞移植患者总例次数×100% 意义：体现医疗机构对造血干细胞移植术后cGVHD 预防水平，是反映医疗机构造血干细胞移植技术医疗质量的重要过程性指标之一。 五、异基因造血干细胞移植相关死亡率 定义：异基因造血干细胞移植术后100天内非复发死亡患者数占同期异基因造血干细胞移植患者总数的比例。 计算公式： 异基因造血干细胞移植相关死亡率 =异基因造血干细胞移植术后100天内非复发死亡患者数同期异基因造血干细胞移植患者总数×100% 意义：体现医疗机构对造血干细胞移植术后患者的综合管理水平，是反映医疗机构造血干细胞移植技术医疗质量的重要结果指标之一。 六、异基因造血干细胞移植总体生存率 定义：异基因造血干细胞移植后1年和3年随访（失访者按未存活患者统计）尚存活的患者数占同期异基因造血干细胞移植患者总数的比例。 计算公式：
第二十章 造血干细胞移植
第二十章造血干细胞移植 造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantion,HSCT)是指对患者进行全身照射、化疗和免疫抑制预处理后，将正常供体或自体的造血细胞(hematopoieti cell,HC)经血管输注给患者，使之重建正常的造血和免疫功能。HC包括造血干细胞(h omatopoietic stem cell,HSC)和祖细胞(progenitor)。HSC具有增殖、分化为各系成熟血细胞的功能和自我更新能力，维持终身持续造血。HC表达CD34抗原。 经过40余年的不断发展，HSCT已成为临床重要的有效治疗方法，每年全世界移植病例数都在增加，移植患者无病生存最长的已超过30年。1 990年，美国E.D.ThomaS医生因在骨髓移植方面的卓越贡献而获诺贝尔医学奖。 [造血干细胞移植的分类] 按HC取自健康供体还是患者本身，HSCT被分为异体HSCT和自体HSCT。异体HSCT又分为异基因移植和同基因移植。后者指遗传基因完全相同的同卵孪生间的移植，供受者间不存在移植物被排斥和移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)等免疫学问题，此种移植几率仅约占1%。按HSC取自骨髓、外周血或脐带血，又分别分为骨髓移植(bone marrow transplantation,BMT)、外周血干细胞移植(peripheral blood stem cell transplantation,PBSCT)和脐血移植(cord blood transplantation,CBT)。按供受者有无血缘关系而分为血缘移植(related transplantation)和无血缘移植(unrelat ed donor transplantation,UDT)。按人白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)配型相合的程度，分为HLA
自体造血干细胞移植(专业知识值得参考借鉴)
本文极具参考价值，如若有用请打赏支持我们！不胜感激！ 自体造血干细胞移植(专业知识值得参考借鉴) 一概述造血干细胞移植是取患者自身骨髓、异体骨髓或脐血转输给患者，通过移植物中的多能干细胞在体内定居、增殖、分化，使患者机体恢复造血功能、形成免疫力的一种治疗方法。自体造血干细胞移植指移植物供者为患者本人。 二适应证1.肿瘤性疾病 找不到合适供者的患者可藉此方法杀灭肿瘤细胞，延续生命。此类肿瘤有：非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、急性白血病、多发性骨髓瘤、乳腺癌、神经母细胞瘤、睾丸癌、卵巢癌、脑瘤等。 2.自身免疫疾病 使病情易于控制，症状改善的疾病：多发性硬化、系统性硬皮病、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、特发性血小板减少性紫癜、纯红再障等。 三禁忌证年龄＞65岁；心、肺、肝、肾功能不全；不可控制的感染；患其他致命危险疾病者；不能耐受预处理方案；无独立生活能力的精神病患者；无移植适应证者。 四自体造血干细胞移植的步骤1.自体骨髓采集 即应选择白血病已完全缓解，且再经3～4个疗程巩固治疗后，以保证患者骨髓内白血病细胞降至最低负荷，避免移植后白血病复发。抽取的骨髓所含有粒细胞数有严格的要求：①置4℃冰箱保存，72小时内回输，有核细胞数应达到（1～1.5）×108/kg（患者每公斤体重所要求的数量）；②如先冷冻保存，择期再回输，则有核细胞数应达到2×108/kg；③如先进行体外净化，则有核细胞数则应达到3×108/kg。采集骨髓通常是十分安全的，国外3万余例取髓发生严重并发症者仅占0.27%，且大多与麻醉有关，均能恢复，无致死、致残的报告。 2.外周血干细胞采集 近10余年90%的自体移植已从采集骨髓转移至采集外周血中的造血干细胞，因为外周血采集过程安全、简便、减少患者多部位骨髓穿刺的痛苦，也省去了麻醉，避免了麻醉的风险。同时外周血白血病细胞含量远少于骨髓，回输后造血恢复相对较快。但外周血所含造血干细胞仅为骨髓的1%～10%，因此，采集前必须经有效的动员。 （1）外周血干细胞动员大多采用大剂量化疗，继之以粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员的方案。急性白血病使用较多的化疗为中剂量阿糖胞苷（总量为每平方米体表面积3～4克）或大剂量依托
造血干细胞
造血干细胞 一定义 造血干细胞是骨髓中的干细胞，具有自我更新能力并能分化为各种血细胞前体细胞，最终生 成各种血细胞成分，包括红细胞、白细胞和血小板。也是存在于造血组织中的一群原始多能 干细胞。可分化成各种血细胞，也可转分化成神经元、少突胶质细胞、星形细胞、骨骼肌细 胞、心肌细胞和肝细胞等。 干细胞可以救助很多患有血液病的人们，最常见的就是白血病。虽其配型成功率相对较低， 且费用高昂，但其治疗效果好且捐献造血干细胞对捐献者的身体并无很大伤害。 二特征 人体内所有的血细胞都来自造血干细胞（ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＨＳＣ）的定向分化。ＨＳＣ又称多能干细胞，是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，有两个重要特性： （１）高度的自我更新或自我复制能力； （２）可定向分化、增殖为不同的血细胞系，并进一步生成血细胞。造血干细胞采用不对称的分裂方式：由一个细胞分裂为两个细胞。其中一个细胞仍然保持干细胞的一切生物特性，从而保持身体内干细胞数量相对稳定，这就是干细胞自我更新。而另一个则进一步增殖分化为各类血细胞、前体细胞和成熟血细胞，释放到外周血中，执行各自任务，直至衰老死亡，这一过程是不停地进行着的。 三造血干细胞的造血原理 1 造血干细胞具有多潜能性，即具有自身复制和分化两种功能。在胚胎和迅速再生的骨髓中， ＨＳＣ多处于增殖周期之中；而在正常骨髓中，则多数处于静止期，当机体需要时，其中一部分分化为成熟血细胞，另一部分进行分裂增殖，以维持ＨＳＣ的数量相对稳定。人类ＨＳＣ首先出现于胚龄第２～３周的卵黄囊，在胚胎早期（第２～３个月）迁至肝、脾，第５个月又从肝、脾迁至骨髓。从胚胎末期一直到出生后，骨髓成为ＨＳＣ的主要来源。造血干细胞进一步分化发育成不同血细胞系的定向干细胞。定向干细胞多数处于增殖周期之中，并进一步分化为各系统的血细胞系，如红细胞系、粒细胞系、单核-吞噬细胞系、巨核细胞系以及淋巴细胞系。 2由造血干细胞分化出来的淋巴细胞有两个发育途径，一个受胸腺的作用，在胸腺素的催化下分化成熟为胸腺依赖性淋巴细胞，即T细胞；另一个不受胸腺，而受腔上囊（鸟类）或类囊器官（哺乳动物）的影响，分化成熟为囊依赖性淋巴细胞或骨髓依赖性淋巴细胞，即B细胞。并分别由T、B细胞引起细胞免疫及体液免疫。如机体内造血干细胞缺陷，则可引起严重的免疫缺陷病。 四ＨＳＣ的表面标志和定向分化过程 1 ＨＳＣ的表面标志 ＨＳＣ是第一种被认识的组织特异性干细胞，目前主要是通过表面标志来分离纯化ＨＳＣ, 其中有一种方法是用抗体来检测干细胞相关的表面分子ｃ－ｋｉｔ，Ｓｃａ－１，Ｔｈｙ１．１和造血谱系标志如Ｂ２２０，ＣＤ３和Ｍａｃ－１。通过这种方法得到的ＨＳＣ只占所有骨髓细
骨髓干细胞移植治疗股骨头坏死疗效分析
骨髓干细胞移植治疗股骨头坏死疗效分析 摘要目的研究对股骨头坏死采用骨髓干细胞移植方法治疗的效果。方法20例股骨头坏死患者，在接受治疗过程中，干细胞动员之后，骨科与血液内科合作对患者进行刮除死骨、植骨和骨髓干细胞移植。所有的股骨头坏死患者经过手术治疗后，均对病理诊断给予证实。结果20例患者经过手术治疗后出院，6个月后，对于股骨头坏死部位进行数字化减影血管造影术复查，发现在股骨头坏死区域的血管有所延伸，股骨头侧支的吻合度提升。所有患者治疗优良率为70.00%。结论对股骨头坏死采用骨髓干细胞移植方法治疗，不仅能够使关节功能在一定程度上得以恢复，而且对股骨头坏死区域的血液供应情况有所改善，是安全、有效的治疗方法。 关键词股骨头坏死；骨髓干细胞移植；创伤性 1 资料与方法 1. 1 一般资料对本院2013年12月～2014年12月20例股骨头坏死患者的临床资料进行回顾性分析。20例患者中，男14例，女6例，年龄22～43岁，平均年龄（31.0±3.2）岁。按照股骨头坏死的Ficat分期[1]，其中双侧股骨头坏死7例，单侧股骨头坏死13例，由于酒精中毒而导致的股骨头坏死8例，由于激素类药物所导致的股骨头坏死12例。股骨头坏死患者临床表现为单侧髋关节疼痛，特别是股骨头关节活动的时候，由于疼痛严重而使得活动受到限制。所有接受研究的股骨头坏死患者都接受过物理疗法、中医治疗和各种药物治疗，均没有获得良好的治疗效果，没有使髋关节的疼痛缓解。 1. 2 方法患者在接受手术的前1 d晚皮下注射300 μg的吉粒芬，进行骨髓干细胞总动员。对骨髓干细胞的采集，在手术前2 h，要对干细胞进行采集、分离和鉴定，采用含有2 ml的肝素钠注射器在髋骨的上棘处抽取20 ml的骨髓。在无菌操作下采集骨髓干细胞，并实施分离术，从髂后上嵴处抽取250～350 ml 的骨髓血，经过对骨髓血的沉淀和离心处理，之后制备成为干细胞悬浊液25 ml。关于干细胞的鉴定，将采集到的骨髓干细胞稀释之后，经过分离，采用流式细胞法进行鉴定，以将CD33、CD34、CD90和CD34检测出来。 股骨头坏死患者的治疗，当股骨头患处的病变被确认后，进行药物灌注。所使用的药物为50 ml干细胞混悬液，35～40 ml的灯盏细辛，25 ml银杏叶注射液，30 min注射完毕。药物注射的过程中还要注意观察患者的反应，如果患者患处有烧灼的感觉，将药物灌注的速度放缓。手术结束后，静脉滴注抗生素，口服复方丹参片3 d。如果患者治疗效果不良而需要重复治疗，要间隔1个月后进行治疗。 术后护理，手术结束后，患者平卧6 h，对患者体温、脉搏、呼吸以及血压等变化情况进行分析。常规采用抗生素以预防感染。手术3 d后，使用运动仪进行被动功能锻炼，3周后患者可拄拐下床活动。在出院3、6、12个月时接
造血干细胞在外周血干细胞移植中检测的意义和方法 综述 陈明铸
造血干细胞在外周血干细胞移植中检测的意义和方法（综述） 造血干/祖细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)从20世纪40年末发展至今作为一种可以治疗造血系统的多种疾病的治疗方法，已经被广泛在临床上使用。其中外周血干细胞移植（PBSCT）在80年代被应用于临床后大有替代骨髓移植的倾向。外周血干细胞移植（PBSC transplantation, PBSCT）的优势包括：（1）造血功能的快速恢复；（2）减少肿瘤细胞污染；（3）降低病人费用；（4）增加移植物中T细胞和NK细胞数量，产生移植物抗白血病效应(GvL),降低移植后复发；（5）避免麻醉和手术等。[1] 同时PBSC的产物更适于体外调控，如CD34+细胞的筛选、肿瘤细胞的清除和基因移植。PBSCT在近年来得到了迅速的发展。在国外已经成为血液病及部分实体肿瘤患者大剂量放射治疗或化学药物治疗后重建骨髓造血的常规治疗措施。 然而，在进行PBSCT时需要采用不同的动员方案，以将骨髓（BM）内造血干内造血干/ 祖细胞动员到外周血( PB) , 因为外周血采集物中造血干/ 祖细胞( PBSC) 的数量对移植的成功有着直接的影响。所以PBSCT的关键因素为确定移植所需PBSC的小量及采集PBSC的最佳时机。目前主要有4 种检测PBSC的方法: ①早期使用的集落培养法, 其检测粒- 巨噬细胞集落形成单位(CFU- GM ) , 但无法定量计数PBSC , 并因方法的复杂性和不规范性, 致使CFU- GM结果差异较大, 只适用于标本的回顾性分析。②全自动血细胞计数仪检测幼稚细胞( I M I+细胞) 、造血祖细胞( HPC) , 该方法经济、快捷、简便,但特异性较差,存在幼稚细胞干扰。因此,无法用于指导自体外周血干细胞移植。③FCM定量检测CD34+细胞。CD34是与HPC有关的膜表面分子,表达于不同分化阶段的HPC 表面, 其性质为含磷的糖蛋白。CD34+细胞实际上包括所有的HPC , 如CFU- GM , 红细胞暴发形成单位( CFU -E) , 巨核细胞集落形成单位( CFU- Mk) , 混合细胞集落形成单位( CFU - Mix) 和原始细胞集落形成单位( CFU- Blast ) 。利用CD34 抗体, 结合FCM 检测CD34+细胞, 快速、灵敏、特异, 已广泛应用, 并成为分析HPC 的推荐参考方法。④分子生物学方法分析CD34m RNA , 其特异、敏感、快速、准确,但实验条件、技术要求较高,目前临床开展较为困难。[2] 一、集落培养法检测粒-巨噬细胞集落形成单位（CFU-GM） 集落培养法是指对外周血中单个核细胞（PBMNC）进行体外培养，2周后观察CFU-GM数目，以间接反映PBSC数，CFU-GM可以反映特定系列祖细胞增殖能力。对PBSCT所需的CFU-GM数量有不同报道，即（15-50）×104CFU-GM/Kg体重。如此大量的造血祖细胞（HPC），可在病人经化疗，血象开始恢复后，每天2-5次，连续2-5d进行白细胞过滤而获得。尤其在化疗后给予人类重组粒-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF），病人外周血中可出现HPC 的暴发增殖。此时，可利用集落培养法检测CFU-GM。检测时，通常以肝素抗凝血经离心或溶血去除红细胞，得白细胞富集液，或经白细胞过滤器得到PBMNC采集液，以（2-4）×104个细胞/ml一式3份移入含有各种营养成分和CSF的半固体培养基进行培养。经37℃、5%CO2、95%湿度条件下温育14d，用倒置显微镜观察CFU-GM（定义为≥50个细胞/集落），用CFU-GM 百分数乘以标本中细胞总数即为外周血中的CFU-GM数。Siena等对未治疗的实体瘤病人外周血集落培养法进行重复性研究发现，含有50-150个集落的变异系统(CV)为1%-30%，而大于150个或小于50个集落的CV可超过30%。 尽管集落培养法开展最早，不可直观计数，但其无法定量计数 PBSC。而且，由于方法的复杂性和不规范性，包括使用许多生物试剂，主观性地判断结果（如利用显微镜计数CFU-GM）以及缺乏标准化操作规程等，致使不同实验室得到的CFU-GM结果差异很大，故其只能作为骨髓功能恢复所需细胞数的大致估计。此外，集落培养法主要检测的是分化较为成熟的祖细胞，即粒-巨噬细胞系，而对更为接近PBCS的细胞，如长期培养起始细胞（LTC-IC）和延长
中国异基因造血干细胞移植治疗血液系统疾病专家共识(Ⅰ)——适应证、预处理方案及供者选择(完整版)
中国异基因造血干细胞移植治疗血液系统疾病专家共识(Ⅰ)——适应证、预处理方案及供者选择(完整版) 异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)已经广泛用于恶性血液病和非恶性血液病的治疗。在我国，仅参加HSCT登记的移植中心已经达到60个，但各个中心的移植指征、预处理方案和供者选择各不相同。为了规范我国allo-HSCT适应证和移植时机、为患者推荐合适的预处理方案和供者，我们在参考NCCN指南、欧洲骨髓移植协作组(EBMT)指南的基础上，制订了体现中国特色的专家共识。 一、allo-HSCT的适应证和移植时机 当具有某些特征的患者采用非移植疗法预期效果很差，或者已有资料显示该组患者接受移植的疗效优于非移植时，这类患者具有HSCT的指征。 (一)恶性血液病 1．急性髓系白血病(AML)： (1)急性早幼粒细胞白血病(APL)：APL患者一般不需要allo-HSCT，只在下列情况下有移植指征： 1)APL初始诱导失败； 2)首次复发的APL患者，包括分子生物学复发(巩固治疗结束后PML/RARα连续两次阳性按复发处理)、细胞遗传学复发或血液学复发，经再诱导治疗后无论是否达到第2次血液学完全缓解，只要PML/RARα仍阳性，具有allo-HSCT指征。 (2)AML(非APL)：
1)年龄≤60岁： ①在CR1期具有allo-HSCT指征： Ⅰ．按照WHO分层标准处于预后良好组的患者，一般无须在CR1期进行allo-HSCT，可根据强化治疗后微小残留病(MRD)的变化决定是否移植，如2个疗程巩固强化后AML/ETO下降不足3 log或在强化治疗后由阴性转为阳性； Ⅱ．按照WHO分层标准处于预后中危组； Ⅲ．按照WHO分层标准处于预后高危组； Ⅳ．经过2个以上疗程达到CR1； Ⅴ．由骨髓增生异常综合征(MDS)转化的AML或治疗相关的AML。 ②≥CR2期具有allo- HSCT指征：首次血液学复发的AML患者，经诱导治疗或挽救性治疗达到CR2后，争取尽早进行allo-HSCT；≥CR3期的任何类型AML患者具有移植指征。 ③未获得CR的AML：难治及复发性各种类型AML，如果不能获得CR，可以进行挽救性allo-HSCT，均建议在有经验的单位尝试。 2)年龄>60岁： 如果患者疾病符合上述条件，身体状况也符合allo-HSCT的条件，建议在有经验的单位进行allo-HSCT治疗。 2．急性淋巴细胞白血病(ALL)： (1)年龄>14岁： 1)在CR1期具有allo-HSCT指征：原则上推荐14~60岁所有ALL患者在CR1期进行allo-HSCT，尤其诱导缓解后8周MRD未转阴或具有预
浅析造血干细胞移植的发展历史与适应症
浅析造血干细胞移植的发展历史与适应症 造血干细胞移植(HSCT)是通过大剂量放化疗预处理，清除受者体内的肿瘤或异常细胞，再将自体或异体造血干细胞移植给受者，使受者重建正常造血及免疫系统。陆道培医院发现该技术目前广泛应用于恶性血液病、非恶性难治性血液病、遗传性疾病和某些实体瘤治疗，并获得了较好的疗效。 发展历史 造血干细胞移植主要包括骨髓移植、外周血干细胞移植、脐血干细胞移植。由于骨髓为造血器官，早期进行的均为骨髓移植。1958年法国肿瘤学家Mathe首先对放射性意外伤者进行了骨髓移植。1968年Gatti应用骨髓移植成功治疗了一例重症联合免疫缺陷患者。上世纪70年代后，随着人类白细胞抗原(HLA)的发现、血液制品及抗生素等支持治疗的进展，全环境保护性治疗措施以及造血生长因子的广泛应用，造血干细胞移植技术得到了快速发展。1977年托马斯报道100例晚期白血病病人经HLA相合同胞的骨髓移植后，13例奇迹般长期生存。从此全世界应用骨髓移植治疗白血病、再生障碍性贫血及其他严重血液病、急性放射病及部分恶性肿瘤等方面取得巨大成功，开创临床治疗白血病及恶性肿瘤的新纪元。骨髓移植技术使众多白血病患者得到救治，长期生存率提高50%—70%。为发展此项技术做出了重要贡献的美国医学家托马斯因而获得了1990年度的诺贝尔医学奖。在中国，骨髓移植奠基人陆道培教授于1964年在亚洲首先成功开展了同基因骨髓移植，又于1981年首先在国内成功实施了异基因骨髓移植。目前异基因造血干细胞移植长期存活率已达75%，居国际先进水平。上世纪70年代年发现脐带血富含造血干细胞，1988年法国血液学专家Gluckman首先采用HLA相合的脐血移植治疗了一例范可尼贫血患者，开创了人类脐血移植的先河。1989年发现G-CSF动员造血干细胞的作用，动员的外周血成为干细胞新供源，1994年国际上报告第一例异基因外周血造血干细胞移植。近20年来，不仅在造血干细胞移植的基础理论包括造血的发生与调控、造血干细胞的特性及移植免疫学等方面有了长足的发展，而且在临床应用的各个方面包括移植适应症的扩大、各种并发症的预防等也有了很大发展，使移植的疗效不断得以提高，并且相继建立了一些国际性协作研究机构，如国际骨髓移植登记处(IBMTR、欧洲血液及骨髓移植协作组、国际脐血移植登记处等，还建立了地区或国际性骨髓库，如美国国家骨髓供者库和中国造血干细胞捐献者资料库等，对推动造血干细胞移植的深入研究和广泛应用起到了积极作用。迄今全世界进行骨髓移植和外周血造血干细胞移植的患者已超过10万例，其中非血缘关系骨髓移植和造血干细胞移植已达数万例，移植患者无病生存最长的已超过30年。在国内，上世纪90年代初开始建立了中国造血干细胞资料库，目前已登记志愿捐献者140万人，已为2000余患者捐献了造血干细胞进行无关供者造血干细胞移植，随后又在北京、上海、济南、天津、广州和四川等地成立了脐带血库，库存脐血数量超过50000份，估计全国进行脐血移植近1000例 造血干细胞适应症 造血干细胞移植迄今仍然是一种高风险治疗方法，目前主要用于恶性血液疾病的治疗，也试用于非恶性疾病和非血液系统疾病，如重症难治自身免疫性疾病和实体瘤等。 (1) 血液系统恶性肿瘤：慢性粒细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征等。 (2) 血液系统非恶性肿瘤：再生障碍性贫血、范可尼贫血、地中海贫血、镰状细胞贫血、骨髓纤维化、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。 (3) 其它实体瘤：乳腺癌、卵巢癌、睾丸癌、神经母细胞瘤、小细胞肺癌等。 (4)免疫系统疾病：重症联合免疫缺陷症、严重自身免疫性疾病。 由于移植存在致命性合并症，因而非血液系统疾病的造血干细胞移植治疗还未被广泛接受。 疾病分类 (1)按照采集造血干细胞的来源不同分为：骨髓移植、脐血移植、外周血造血干细胞移植等。 (2)按照供体与受体的关系分为：自体骨髓移植/脐血移植/外周血造血干细胞移植、异体骨髓移植/脐血移植/外周血造血干细胞移植。异体移植又称异基因移植，当供者是同卵双生供者时，又称同基因移
2.造血干细胞移植技术临床应用质量控制指标(2017版)
×100% 造血干细胞移植技术临床应用 质量控制指标 （ 2017 年版） 一、造血干细胞移植适应证符合率 定义： 造血干细胞移植术适应证选择正确的例数占同期 造血干细胞移植术总例数的比例。 计算公式： 造血干细胞移植术适应证选择正确的例数 = 同期造血干细胞移植术总例数 意义： 体现医疗机构开展造血干细胞移植技术时，严格 掌握适应证的程度，是反映医疗机构造血干细胞移植技术医 疗质量的重要过程性指标之一。 、异基因造血干细胞移植植入率 定义： 异基因造血干细胞移植术后 100 天内，实现造血 重建（患者外周血中性粒细胞＞ 0.5 × 109/L 与血小板＞ 20× 109/L ）的患者例次数占同期异基因造血干细胞移植患者总例 次数的比例。 计算公式： 异基因造血干细胞移植术后 100 天内实现造血重建的患者例次数 = 同期异基因造血干细胞移植患者总例次数 附件 2 造血干细胞移植 适应证符合率 ×100% 异基因造血干细胞 移植植入率
意义：反映医疗机构造血干细胞移植技术水平的重要指 标之 ×100%
×100% 抗宿主病发生率 同期异基因造血干细胞移植患者总例次数 三、重度（Ⅲ - Ⅳ度）急性移植物抗宿主病发生率 定义： 急性移植物抗宿主病（ aGVHD ），是指造血干细胞 移植术后 100 天内，由于移植物抗宿主反应而引起的免疫性 疾病，主要表现为皮疹、腹泻和黄疸，是异基因造血干细胞 移植的主要并发症和主要死亡原因。重度（Ⅲ - Ⅳ度）急性 移植物抗宿主病发生率，是指异基因造血干细胞移植术后发 生重度（Ⅲ - Ⅳ度）急性移植物抗宿主病患者例次数占同期 异基因造血干细胞移植患者总例次数的比例。 计算公式： 意义： 体现医疗机构对不同移植方式造血干细胞移植术 后 aGVHD 预防水平，是反映医疗机构造血干细胞移植技术医 疗质量的重要过程性指标之一。 四、慢性移植物抗宿主病发生率 定义： 慢性移植物抗宿主病（ cGVHD ），是指造血干细胞 移植术 100 天后，由于移植物抗宿主反应而引起的慢性免疫 性疾病。慢性移植物抗宿主病发生率，是指异基因造血干细 胞移植术后发生慢性移植物抗宿主病患者例次数占同期异 基因造血干细胞移植患者总例次数的比例。 计算公式： 慢性移植物 异基因造血干细胞移植术后发生慢性移植物抗宿主病患者例次数 重度（Ⅲ - Ⅳ度）急性移植物 抗宿主病发生率 重度 （Ⅲ- Ⅳ度 ）异基因造血干细胞移植术 后 发生急性移植物抗宿主病患者例次数 同期异基因造血干细胞移植患者总例次数 ×100%
造血干细胞移植基础知识
造血干细胞移植 适应症 造血干细胞移植迄今仍然是一种高风险治疗方法，目前主要用于恶性血液疾病的治疗，也试用于非恶性疾病和非血液系统疾病，如重症难治自身免疫性疾病和实体瘤等。 （1）血液系统恶性肿瘤：慢性粒细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征等。 （2）血液系统非恶性肿瘤：再生障碍性贫血、范可尼贫血、地中海贫血、镰状细胞贫血、骨髓纤维化、重型阵发性睡眠性血红蛋白尿症、无巨核细胞性血小板减少症等。 （3）其它实体瘤：乳腺癌、卵巢癌、睾丸癌、神经母细胞瘤、小细胞肺癌等。 （4）免疫系统疾病：重症联合免疫缺陷症、严重自身免疫性疾病。 由于移植存在致命性合并症，因而非血液系统疾病的造血干细胞移植治疗还未被广泛接受。 分类 （1）按照采集造血干细胞的来源不同分为：骨髓移植、脐血移植、外周血造血干细胞移植等。 （2）按照供体与受体的关系分为：自体骨髓移植/脐血移植/外周血造血干细胞移植、异体骨髓移植/脐血移植/外周血造血干细胞移植。异体移植又称异基因移植，当供者是同卵双生供者时，又称同基因移植。 （3）根据供者与受者HLA配型相合程度，异体骨髓移植/脐血移植/外周血造血干细胞移植分为：HLA全相合移植、不全相合移植、单倍体相合移植。 （4）根据供者与受者的血缘关系分为：血缘相关移植、非血缘移植即骨髓库来源供者。 （5）根据移植前的预处理方案强度可分为：清髓性造血干细胞移植和非清髓性造血干细胞移植（减低预处理剂量的造血干细胞移植）。 一般根据患者的疾病种类、疾病状态及预后、HLA配型结果及供者年龄等因素综合考虑来选择造血干细胞移植方式。目前异基因造血干细胞移植绝大多数为配型相同的同胞间、半相合父母与子女间、不全相合同胞间的移植，而随着全世界及我国骨髓库的增加，非血缘供者的异基因造血干细胞移植数量也在不断增加。不同移植类型各自优劣不同，自体造血干细胞移植的优点在于不受供者的限制，移植后不发生移植物抗宿主病，不需要使用免疫抑制剂，严重并发症较少，费用较低，缺点是复发率高。异基因造血干细胞移植治疗恶性疾病，植入的供者细胞有持久的抗肿瘤作用，复发率低，但严重并发症多，费用相对较高。HLA配型与造血干细胞移植