分光光度计检定记录格式

分光光度计检定记录格式
分光光度计检定记录格式

紫外、可见、近红外分光光度计检定记录

检定日期:年月日送检单位联系电话

制造厂仪器类别

仪器型号室温(℃)

出厂编号相对湿度(%RH)

证书编号检定依据 JJG178-2007

检定地点检定结论

计量标准名称计量标准测量范围不确定度/准确度等级/最大允许误差

氧化钬滤光片(220~650)nm U=0.3nm k=2

中性滤光片10%~40% U=0.3% k=2

干涉滤光片(450~700)nm U=0.9nm k=2

镨钕滤光片(400~820)nm U=0.3nm k=2 计量标准证书编号计量标准证书有效期

1、外观

2、波长示值误差与重复性nm

标准物质标准波长测量值平均值误差重复性

3、噪声与漂移%

项目透射比0% 透射比100% 漂移(30min)

测量值

4、最小光谱带宽nm

标准光谱带宽

测量光谱带宽

5、透射比示值误差与重复性%

波长/nm 标准值测量值平均值误差重复性

235

257

313

350

% 波长/nm 标准值测量值平均值误差重复性

440

546

635

6、基线平直度

波长范围测定值

A段

B段

C段

7、电源电压适应性

电源电压/V 198 242

透射比值/%

8、杂散光

标准物质测量波长/nm 杂散光/%

杂散光滤光片420 360 220

9、吸收池配套性%

波长/nm 池号池号池号池号

220

440

10、安全性能MΩ

检定员:年月日核验员:年月日

紫外可见分光光度计检定中的常见问题分析

紫外可见分光光度计检定中的常见问题分析 发表时间:2018-01-17T15:17:40.770Z 来源:《建筑学研究前沿》2017年第23期作者:王悦杨洋 [导读] 紫外可见分光光度计的工作原理是通过对被测物质在不同波长范围内光的吸收度的不同反应。 大连市计量检测研究院辽宁大连 116033 摘要:由于紫外可见分光光度计具备的灵敏度高、操作简单的特性,因此这些被广泛的应用在医学、化学、生物学等学科领域,同时,在医院、冶金、化工、食品安全等行业也被广泛应用。紫外可见分光光度计检测的准确性直接影响着使用的有效性,因此,为了确保实验结果的准确需要对紫外可见光光度计检定中的误差进行控制。 关键词:紫外可见;分光光度计;检定;常见问题 引言 紫外可见分光光度计的工作原理是通过对被测物质在不同波长范围内光的吸收度的不同反应,进而对物质进行分析的一种仪器。紫外可见分光光度计使用简单、灵敏度高,被广泛应用在各个领域。紫外可见分光光度计的组成基本相同,由氘灯和钨灯作为光源系统,经过光棱镜或光栅滤光的反应,然后通过样品吸收池吸收,并最终对物质进行检测。 1紫外可见分光光度计的检定 1.1波长最大允许误差 波长点测量出零度和满度之后,将检测物质放置在样品光路中,然后沿着同一波长方向逐点对检测物质的透射比值进行检测,并求出峰值波长。测得的波长平均值与标准值之间的误差即为波长误差,规定对波长最大误差做出了规定,并对低压石英汞灯、氧化钬滤光片和氧化钬溶液等九种标准物质进行了标准误差的限定,其中氧化钬滤光片、镨钕滤光片、干涉滤光片等由于使用方便,便于保存,是使用最广泛的检测紫外可见分光光度计波长示值误差的标准物质。氧化钬滤光片具有较完整的波长吸收峰值点,而镨钕滤光片却是在波长较小的情况下没有吸收峰,因此,通常情况才,要将这两者结合起来使用。 1.2透射比示值误差检定 在规定标准下,比如出现波长 235nm、波长 257nm、波长313nm、波长 350nm、波长 440nm、波长 546nm、波长 635nm 时,要开始校正检测仪器的满度和检测仪器的零度,以对检测物质进行透射比的对比。同样的,实际检测得出的平均值与标准值之间的差异即为检测误差,规程规定的透射比标准物质有重铬酸钾标准溶液、紫外光区透射比滤光片和光谱中性滤光片,在这些规定的标准数值中,波长235nm、波长 257nm、波长 313nm和波长 350nm 这四种用的是重铬酸钾标准溶液。便于保存以及携带方便,紫外光区透射比滤光片通常用来检测上述提到的四种波长误差,而另外三种则使用光谱中性滤光片来检定。 1.3杂散光检定 杂散光检定通常会选择截止滤光片来进行检测,而且检测仪器调出零度和满度后,如果检测物质处在相同波长的情况下,会通过测量滤光片的透射比,进而通过这种透射比值将对检测物质的杂散光进行检定。 2紫外可见分光光度计检定中的误差分析 2.1检测环境不符合规定所造成的误差 紫外可见分光光度计在对物质进行检测时,其检测结果的准确性可能会受检测环境的影响,如果不对检测环境进行适当的控制,可能会引起误差,从而不利于检测结果的准确性。比如,如果不对紫外可见分光光度计进行密封处理,或者是使用了密封性不是很好的检测仪器,会使得光源系统直接受到强光的照射,这种情况下会减少杂散光,从而不利于检测结果,容易产生误差。如果检测环境中灰尘较大,滤光片沾染灰尘,这些都是误差产生的原因,因此,在进行检测工作时,一定要在标准环境下进行,避免出现不必要的误差,以确保检测结果的准确性。 2.2检定方法不当造成的误差 在对波长示值进行检测时,连续法曾经被使用,这种方法通过连续驱动波长进行传动检测,直接利用仪器透射比示值的变化测试峰值波长,这种检测方法使得波长传动连续驱动,从而测试得到的光谱会受到光谱曲线的影响,容易产生很大的误差,因此,这种方法经过实践检验后最终被否定。根据在JJG178 -2007《紫外、可见、近红外分光光度计》的规定,使用紫外可见分光光度计进行检测时可以使用逐点法,逐点法是通过调整零度和满度,在绘制 T - λ 曲线的基础上,从而测试透射比最大值所对应的波长。使用逐点法可以减少仪器光源、波长传动机构等对检测结果的影响,使得检测结果可以最大限度的反应出仪器的波长。使用逐点法进行检测时,为了确保监测数据的准确性,一定要按照规定的标准和要求进行检测,避免出现不必要的误差,影响数据检测的准确性。 2.3标准滤光片造成的误差 标准滤光片的定值误差和方向性引起的误差都是标准滤光片带来的误差,标准滤光片的标准值是不断变化的,随着时间的不断推进,波长值可能会发生变化,如果不对波长值实时进行更显,就会产生一定的误差,不利于检测结果的准确性。 2.4检测人员操作不当引起的误差 检测过程是由检测人员来操作的,由于检测人员操作不当也可能会引起误差,比如检测人员的检测习惯、专业素养都会对检测结果产生影响。例如使用指针式紫外可见分光光度计进行检测时,由于每个人的习惯是不同的,这样会使得观测位置有差异,不同的检测人员会有不同的数值,可能会造成误差的产生,不利于数据检测的准确性。 2.5检测仪器储存不当引起的误差 检测仪器储存不当会使得仪器受潮、灰尘覆盖,而这些都会影响检测仪器检测时数值的不准确性,也是误差产生的原因。 3紫外可见分光光度计检定中常见问题的解决对策 3.1杂散光问题的解决对策 紫外可见分光光度计的光敏元件十分敏感,同时还需要散热来保持元件温度正常,空气中漂浮的灰尘会通过散热孔进入附着在光敏元

722N分光光度计使用方法

722N可见分光光度计使用说明书 目次 1仪器的主要用途--------------------------------------------------1 2仪器的工作环境--------------------------------------------------1 3仪器的主要技术指标及规格----------------------------------------1 4仪器的工作原理--------------------------------------------------2 5仪器的光学原理--------------------------------------------------2 6仪器的安装、使用与维护------------------------------------------3 7 仪器的调校和故障分析--------------------------------------------5 8 仪器的成套性----------------------------------------------------6 9 仪器的保管及免费修理期限----------------------------------------7 制造计量器具许可证编号: 产品执行标准的编号:Q/YXLZ50-2004

1仪器的主要用途 722N可见分光光度计能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定 量的分析。该仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门,是理化实验室常用的分析仪器之一。 2仪器的工作环境 仪器应安放在干燥的房间内,使用温度为5℃~35℃,相对湿度不超过 85%。 使用时放置在坚固平稳的工作台上,且避免强烈的震动或持续的震动。 室内照明不宜太强,且避免直射日光的照射。 电扇不宜直接向仪器吹风,以免影响仪器的正常使用。 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 供给仪器的电源电压为AC220V22V,频率为50Hz1Hz,并必须装有良好的接地线。 推荐使用交流稳压电源,以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为1000W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 2.7避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使用。 3仪器的主要技术指标及规格 仪器类别:2类 光学系统:单光束、衍射光栅。 波长范围:330nm~800nm。 光源:钨卤素灯12V30W。 接收元件:光电池。 波长准确度:2nm。 波长重复性:≤1nm。 光谱带宽: 5nm。 杂光:≤%(在360nm处)。 透射比测量范围:%~%。 吸光度测量范围:~。 浓度直读范围:0000~1999。 透射比准确度:%。 透射比重复性:≤%。 噪声:100%噪声≤%,0%噪声≤%。 稳定性:亮电流≤%/3min, 暗电流≤%/3min。 电源:AC220V22V, 50Hz1Hz。

紫外可见分光光度计计量标准技术报告.docx

)))))))) 计量标准技术报告 计量标准名称紫外可见分光光度计检定装置 计量标准负责人 建标单位名称(公章)新月市质量技术监督检验测试中心填写日期

目录 一、建立量准的目的?????????????????????( 01 ) 二、量准的工作原理及其成??????????????( 01) 三、量准器及主要配套????????????????( 02 ) 四、量准的主要技指??????????????????( 03 ) 五、境条件?????????????????????????( 03 ) 六、量准的量溯源和框???????????????( 04 ) 七、量准的重复性???????????????????( 05 ) 八、量准的定性考核????????????????????( 06 ) 九、定或校准果的量不确定度定?????????????( 07 ) 十、定或校准果的???????????????????( 11 )十一、??????????????????????????( 12 )十二、附加明?????????????????????????( 12 )

一、建立计量标准的目的 紫外可见分光光度计属强制检定的计量器具,为了统一这些计量器具的量值,向企业提供全面可靠的计量 服务,确保该计量器具不影响我市的工业安全生产,卫生环境检测,建立了这一社会公用计量标准。 二、计量标准的工作原理及其组成 紫外可见分光光度计检定装置根据 JJG178-2007 《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》提供的方 法 , 紫外、可见分光光度计的主要检定项目是波长准确度和透射比准确度两项。 1、波长准确度检定: 在规定的条件下,用被测紫外可见分光光度计直接测标准滤光片(或溶液),测得的透射比波谷(波峰)所对应波长值,重复测量 3 次,其算术平均值与标准波长之差,即为波长示值误差。 2、透射比准确度检定: 用被测可见分光光度计在规定的波长处,以空气为参比,分别测(透射比标称值为10%、 20%、 30%)标准中性滤光片的透射比(示值),用被测紫外分光光度计在规定的波长处,以空白为参比,测重铬酸钾-高氯酸标准溶液的透射比(示值),重复测量 3 次,其算术平均值与相应下的透射比的标准值之差,即为透 射比的示值误差。 紫外可见分光光 氧化钬滤光片 镨铒滤光片 度计 镨钕滤光片 杂散光滤光片 干涉滤光片 低压汞灯 重铬酸钾 - 高氯酸标准溶液 标准中性滤光片

721可见分光光度计使用方法

721可见分光光度计使用方法 一、开机预热 仪器在使用前应预热30分钟。 二、波长调整 转动波长旋钮,并观察波长显示窗,调整至需要的测试波长。 注意事项:转动测试波长调100%T/0A后,以稳定5分钟后进行测试为好(符合行业标准及质监局检定规程要求)。 三、设置测试模式 按动“功能键”,便可切换测试模式。相应的测试模式循环如下:*开机默认的测试方式为吸光度方式 四、结果打印(721型无此功能) 在得到测试结果后按动“打印”键便可打印结果(需外接标准串行打印机)。 五、光源切换(适用于752、754、755B型) 因为仪器在紫外区和可见区使用不同的光源,所以需要波动光源切换杆来手动的切换光源。建议的光源切换波长为340nm,即200nm-339nm适应氘灯,340nm-1000nm使用卤素灯。 注意事项:如果光源选择不正确,或光源切换杆不到位,将直接影响仪器的稳定性。特殊测试要求除外。 六、比色皿配对性 仪器所附的比色皿是经过配对测试的,未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。适应比色皿一套两只,供紫外光谱区使用,置入样品架时,两只石英比色皿上标记Q或箭头方向要一致。玻璃比色皿一套四只,供可见光谱区使用。 石英比色皿和玻璃比色皿不能混用,更不能和其他不经配对的比色皿混用。用手拿比色皿应握比色皿的磨砂表面,不应该接触比色皿的头光面,即透光面上不能有手印或溶液痕迹,待测溶液中不能有气泡、悬浮物,否则也将影响样品的测试精度。比色皿在使用完毕后应立即清洗干净。 七、调T零(0%T) 1.在T模式时,将遮光体置入样品架(如图七所示),合上样品室盖,并拉动样品架拉杆使其进入光路。然后按动“调0%T”键,显示器上显示“00.0”或“-00.0”,便完成调T零,完成调T零后,取出遮光体。 注意事项:1.测试模式应在透射比(T)模式; 2.如果未置入遮光体合上样品室盖,并使其进入光路便无法完成调T零;

可见分光光度计操作规程

722N可见分光光度计操作规程 (IATF16949-2016/ISO9001-2015) 一、使用步骤 1、连接仪器电源线,确保仪器供电电源有良好的接地性能; 2、接通电源,使仪器预热20分钟。(不包括仪器自检时间); 3、用键设置测试方式:透射比(T),吸光度(A),已知标准样品浓度值方式(C)和已知标准样品斜率方式(F); 4、用波长选择旋钮设置您所需的分析波长; 5、将参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中,打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖。一般情况下,参比样品放在第一个槽位中。比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹,被测溶液中不能有气泡、悬浮物,否则会影响样品测试的精度; 6、将0%T校具(黑体)置入光路中,在T方式下按“0%T”键,此时显示器显示“000.0”; 7、将参比样品推(拉)入光路中,按“0A/100%T”键调0A/100%T,此时显示器显示的“BLA”直至显示“100.0”%T或“0.000”A为止。 8、当仪器显示器显示出“100.0”%T或“0.000”A后,将被测样品推(拉)入光路,便可从显示器上得到被测样品的透射比或吸光度值。 二、注意事项 1、每次使用后应检查样品室是否积存有溢出溶液,经常擦拭样品室,以防废液对部件或光路系统的腐蚀;

2、仪器使用完毕应盖好防尘罩。可在样品室及光源室内放置硅胶袋防潮,但开机时一定要取出; 3、长期不用仪器时,尤其要注意环境的温度、湿度,定期更换硅胶。 4、工作条件:环境温度:5~35℃;相对湿度:不大于85%RH; 三、期间核查 1、波长范围检查:主机正常开机并预热30分钟,模式为“透射比”档, 转动波长旋钮至波长范围两端按100%T健,应能正常调节100%T,开样品室盖时按0%T应能正常调节0%T。 2、透射比重复性检查:将主机波长设定至550nm,仪器调0%T,调100%T。 置入透射比为40%T左右并在附近平坦吸收的样品(例如:中性滤光片)连测三次检查显示值,其最大差值应在±0.3%T内。 3、定点噪声检查:设定波长在550nm,仪器调0%T,调100%T,设定标尺至“吸光度”,观察显示窗内数字跳动在0.002A范围内。 4、波长重复性检查:设置标尺为“透射比”,采用分光光度计通用的镨钕滤光片作样品。以空气为空白,仪器调0%T,调100%T,将样品置入光路,读出在520~540nm波长范围内与样品标准峰值相对应的波长值。重复三次,波长读数误差不应大于±1nm。 5、核查周期:半年一次 四、设备维护 1、为确保仪器稳定工作,电压波动较大的地方,建议用户配备220V稳压器; 2、仪器接地要良好; 3、干燥剂应保持其干燥性,发现变色立即更换或活化后再用;

分光光度计

分光光度计 2011-03-01 11:06标签:blank 光度计 color style 光学 下面分别叙述这几个部分的光学系统的特性。 1光源系统 分光光度计的光源系统由光源和照明系统组成。 1.1光源 分光光度计中对光源有一定要求,理想的辐射光源应具备以下一些特性: (1)在所使用的被长范围内提供连续辐射,即光源应发射连 (2)辐射能量随波长的变化尽可能小,且有足够的强度。 (3)使用寿命较长。 (4)要有良好的稳定性,特别是对单光束仪器。 在190一360nm波长范围紫外波段,常用的光源是氢弧灯和氘弧灯,氘灯的紫外光发射强度比氢灯强。在360一2500nm波长范围可见和进红外波段,常用白炽钨灯作为光源。图2为氢灯、钨灯的光谱能量分布图。 在2—50µm波长的中远红外波段内,常用的光源是能斯脱和硅碳棒,其光谱能量分布如图3所示。另外,对于要求较低的仪器,灼热的金属丝(如镍铬丝)可以作为红外光源;而在远红外区高压汞灯也是一种常用的光源。 图2 光源能量分布图3 红外辐射光源 A-氢灯,B一钨灯,C一不同温度T的黑体辐射A-能斯脱,B-硅碳棒 1.2照明系统 光源系统的照明系统一般有两中:单光束照明系统和双光束照明系统。光源系统中的反射镜的作用是把光源发出的光线集中在单色 器的入缝上,使整个狭缝照明均匀并充满单色器的孔径。 在照明系统为单光束的仪器,只要求光源反射镜引入一个高通量的光束即可,对光源的成像质量要求不高。图4为一种单光束照明系统光路图。 在双光束照明系统的分光光度计中,光源系统并不直接照明单色仪的狭缝,如图5所示。光度系统处于单色器和光源之间,而在光度系统中,有一个梳形减光楔,光源必须首先成像在减光楔上。减光楔通过光度系统要求清晰地成像在单色器的入缝上。 图4单光束照明系统图5双光束照明系统 2单色器系统 单色器是分光光度计的核心部分,仪器的主要光学特性和工作特性基本上由单色器决定。它的作用是将光源发出的白光色散成各种波长的单色光,从出射狭缝中导出,照于样品上。分光光度计中的单色器是一个完整的色散系统,除了色散元件——棱镜或光栅外,还有入射和出射狭缝以及一组反射镜。根据工作光谱范围、色散率、分辨串等性能指标的要求,可分别选用棱镜或光栅分光的单色器,双联单色器,也可采用滤色片分光的单色器等。 2.1虑光片 滤光片是最简单、最廉价的单色装置。由于它的单色性不好,使测定精度大大受到限制。它的特性可以用最大透光波长(或称中心波长)和谱带半宽度(有效带宽)来表征。最大透光波长是指在此波长光源的辐射最强。有效带宽是指最大透光度值的一半处的谱带宽度。在分光光度计中,滤光片一般用来消除单色器的杂散光。滤光片可分为五种:中性滤光片,截止滤光片,通带滤光片,干涉滤光片以及校正滤光片(标准滤光

分光光度计的性能检查

分光光度计的性能检查 (1)波长校正:使用光电比色计或分光光度计,在更换光源灯、重新安装、搬运或检修后,以及仪器工作不正常时,都要进行波长校正。就是正常工作的仪器,每隔一个月也要检查一次波长,必要时进行校正,这样才能保证波长读数与通过样品的波长符合,保证仪器的最大灵敏度。方法常用谱钕滤光片校正法,适用于721型仪可见光区的波长校正,常以585nm 或529nm处的吸收峰或T%为标准。鉴于721型仪器的出射光波长较宽,不易将573nm和585nm 的两峰或两谷分开,校正时易产生误差,故推荐用529nm处的峰或谷为标准来进行波长校正。校正时,将仪器按要求预热。要求电源电压稳定。波长度盘置580nm处,T%调至最大,在比色杯处放一白纸条,观察是否有光强均匀、边缘无光晕或杂光的光斑,如不符合要求,可调节灯泡位置使其符合要求,是为波长校正的粗调。再把灵敏度扭置于“1”(最低档),波长度盘对准529nm,电表机械零点为零,在光路空白时调T%为100%T,并反复查零点和100%T 稳定情况。将谱钕滤光片插入光路,慢慢旋转波长度盘,找到透光率最低的一点(向左右微旋波长度盘时,该点透光率值均增加),这一点即为波长529nm。检查波长度盘的指示值是不是529nm,如指示值为534nm,此时波长工误差为5nm,超出规定(±1nm)必须进行调整。 调整方法:将波长度盘对准529nm,从光路取出谱钕滤光片,光路空白时调电表指针到100%T,再将谱钕滤光片插入光路。打开仪器左侧小盖板,找到波长校正螺丝(3个中左侧柄长的一个);反时针方向微微调节(负误差时顺时针方向),使电表指针的指示T%为最低。反复检查波长误差情况,直到符合仪器技术指标为止。盖好左侧小盖板,校正结束。 有些高档仪器如岛津UV-260型双光束分光光度计,可使用氢灯或置谱钕滤光片于测定比色槽内,编入滤工扫描程序后,仪器即可自动地在一定波长范围内进行波长校正。高档分光光度仪的光学系统密封在一个单元组件内,若发生故障,波长不准,常须请制造商派专人修理。其它尚有谱线校正法、干涉滤光片校正法和有色溶液校正法等,可参考有关资料。 (2)线性检查:线性检查包括仪器线性及测定方法线性两个方面的检查。线性误差表现为溶液的浓度与吸光度不成线性关系,出现正偏离或负偏离的现象。这种偏离,按比耳定

紫外分光光度计的使用方法

UV2600型紫外分光光度计操作规程 一、开机 1.打开仪器电源。 2.打开电脑,点击UV Analyst 进入光谱分析软件。 3.软件将自动搜索仪器端口,点击“联机”,软件与仪器联机成功。 二、选择测试模式 根据实验需求选择测试模式。仪器提供的测试模式有“波长扫描”“时间扫描”“定点测量”“定量测量”“核酸测量”和“蛋白质测量” 【波长扫描】主要用以检测样品对一定范围波长光的吸收情况,以便对样品进行定性测量。 1.点击左侧主功能栏中的“波长扫描”即可进入波长扫描界面。 2. 根据实验要求,在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以扣除空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 注意:在“基线测量”中所选择的基线必须与参数设置中基线一致! 【时间扫描】是检测样品在特定波长范围内吸光度(或透过率)随时间的推移而发生变化情况。主要用以检测样品的稳定性或进行化学动力学研究。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求,在“设置”设定检测参数。 3 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以后扣除样品空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 【定点测量】是检测样品在特定波长中的吸光度(或透过率)。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求,在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“自动校零”,以扣除该波长中空白溶液的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“测量”,以完成样品的吸光度(或透过率)的测量。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。 【定量测量】可通过检测标准样品或输入特定的系数建立标准曲线后测量样品的浓度值。

752紫外可见分光光度计使用方法解析

752紫外可见分光光度计 一、仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理—一比耳定律。 τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时.透过的光是根据溶液的浓度而变化的,752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。 二、仪器的安装、使用、安装 1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查,电源电压是否正常,接地线是否牢固可靠,在得到确认后方和接通电源使用。 2 仪器经过运输和搬运等原因,会影响波长准确度,应进行仪器调校后使用。 使用:仪器使用前需开机预热30min。 本仪器键盘共有4个键,分别为; 1 A /τ/C/F 1SD 2 ▽/0% 3?/100% 4 A /τ/C/F键:每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。 A——吸光度(Absorbance) T——透射比(Trans) C——浓度(conc) F——斜率(Factor) (2)F值通过按键输入(后面介绍如何设置) 5SD键:该键具有2个功能 a)用于RS232串行口和计算机传输数据(单向传输数据,仪器发向计算机)。 b)当处于F状态时,具有确认的功能,即确认当前的F值,并自动转到C,计算当前的C 值(C=F*A)。 6 ▽/0%键:该键具有2个功能 a)调零;只有在τ状态时有效,打开样品室盖,按键后应显示0.000。 b)下降键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动减1,如果按住本键不放,目动减1会加快速度;如果F值为0后,再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。 7 ?/100%键;该键具有2个功能 a)只有在A、τ状态时有效,关闭样品室盖,按键后应显示0.000、100.0。 b)上升键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动加1,如果按住本键不放,自动加1会加快速度,如果F值为1999后,再按键它会自动变为0,再往键开始自动加l。 例如:设置斜率为1500。 方法一 T)按A/τ/C/F键切换到F状态。 b)如果当前F值为1000,则按?/100%键,直到F值为1500。 C)再按SD键,表示当前的F值为1500,然后自动回到C状态,假如所测的A值为0.234,则此时显示C值为0351。

可见分光光度计校准规程

MV_RR_CNG_0036可见分光光度计检定方法 1.可见分光光度计检定规程说明 编号 JJG 178—1996 名称(中文)可见分光光度计检定规程 (英文)Verification Regulation of Visible Range Spectrophotometer 归口单位浙江技术监督局 起草单位浙江省技术监督检测研究院 主要起草人王洁(浙江省技术监督检测研究院) 批准日期 1996年12月31日 实施日期 1997年6月1日 替代规程号 JJG 178—89 适用范围本规程适用于新制造、使用中和修理后、波长范围为360nm~800nm 或以此为主要谱区的可见分光光度计的检定。 主要技术要求1.稳定性 2.波长准确度 3.波长重复性 4.透射比准确性 5.透射比重复性 6.杂散辐射率 7.光谱带宽 8.τ- A换档偏差 是否分级分为 3 级; 检定周期(年) 1 附录数目 5 出版单位中国计量出版社 检定用标准物质 相关技术文件 备注 附录(本附录仅为技术文件的摘要,如需全文,请与出版发行单位联系)146

2.可见分光光度计检定规程摘要 一技术要求 1 外观与初步检查 1.1 样品室应密封良好,无漏光现象。样品架应推拉自如、正确定位。 1.2 仪器处于工作状态时,光源发光应稳定无闪烁现象。当波长置于580 nm处时,在样品室内应能看到正常的黄色光斑。 1.3 仪器光谱范围的两端(有灵敏度换档开关的仪器,可选在合适的灵敏度档次),光量调节系统应能使透射比超过100%。 1.4 吸收池的透光面应光洁,无划痕和斑点,任一面不得有裂纹。 2 稳定度 2.1 仪器零点在3 min内漂移引起的透射比示值变化应符合相应的要求。 2.2 光电流在3 min内漂移引起的透射比示值变化应符合有关要求。 2.3 电源电压220 V变动其±10%时,仪器透射比示值变化应符合有关的要求。 3 波长准确度与波长重复性 4 透射比准确度与透射比重复性 5 杂散辐射率(杂散光) 光栅型仪器在波长360 nm处,棱镜型仪器在波长420 nm处,杂散辐射率应不大于规定的技术指标。 6 光谱带宽 光栅型仪器光谱带宽应不大于规定的技术指标。 7 τ-A换档偏差 带有τ-A换档的仪器,选择开关(或按键)换档引起的吸光度示值偏差应符合要求。 8 吸收池的配套性 配套使用的同一光径吸收池间的透射比之差(在440 nm与700nm处)不得超过0.5%。 9 绝缘电阻 仪器的绝缘电阻应不小于5 MΩ。 二检定条件 10 检定环境条件 10.1 温度(10~30)℃;相对湿度小于85%RH。 10.2 电源电压 (220±22) V,频率(50±1) Hz。 10.3 仪器检定处不得有强光直射;放置仪器的工作台应平稳。周围无强磁场、电场干扰,无强气流及腐蚀性气体。 11 检定设备 11.1 调压变压器,规格为500 VA,输出0~250 V可变。 11.2 频率计,45~55 Hz,准确度0.5%。 11.3 交流电压表,准确度2.5 级。 11.4 兆欧表,试验电压500 V,准确度1.0 级。 * *12 标准器与标准物质 147

分光光度计使用说明

722型分光光度计的使用方法 一、测量原理 分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律:当容液中的物质在光的照射和激发下,产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的,各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时,溶液对光的吸收程度A 与溶液的浓度c(g/l)或液层厚度b(cm)成正比。其定律表达式A=abc (a是比例系数)。当c的单位为mol/l时,比例系数用ε表示,则A=εbc称为摩尔吸光系数。其单位为L·mol-1·cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。 T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或A=K·C·L(比色皿的厚度) 测定时,入射光I, 吸光系数和溶液的光径长度不变时,透过光是根据溶液的浓度而变化的,即“K”为常数。比色皿厚度一定,“L”、“I0”也一定。只要测出A即可算出“C”。 《分光光度计的表头上,一行是透光率,一行是吸光度。》 二、722型分光光度计的使用 1、将灵敏度旋钮调至“1”档(信号放大倍率最小)。 2、开启电源,指示灯亮,选择开关置于“T”,波长调至到测试用波长。仪器预热20分钟。 3、打开试样室(光门自动关闭),调节透光率零点旋钮,使数字显示

为000.0。(调节100%T旋钮),盖上试样室盖,将比色皿 架处于蒸馏水校正位置,使光电管受光,调节透光率100%旋钮使数字显示100.0。如显示不到100.0,则可适当增加微电流放大的倍数。(增加灵敏度 的档数同时应重复(3)调节仪器透光率的“0”位)但尽量使倍率置于低档使用。这样仪器会有更高的稳定性。 4、预热后,按(3)连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置,待稳定后仪器可进行测定工作。 三、吸光度“A”的测量 将选择开关置于A 。调节吸光度调零旋钮,使得数字显示为零,然后将被测样品移入光路,显示值即为被测样品的吸光度值。 四、浓度c的测量 将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值。 注意事项: 1、测量完毕,速将暗盒盖打开,关闭电源开关,将灵敏度旋钮调至最低档,取出比色皿,将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内,关上盖子,将比色皿中的溶液倒入烧杯中,用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内。 2、每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换。

(完整版)紫外可见分光光度计--原理及使用

应用 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。 基本原理 分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。 朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比,即 A= kcl 式中比例常数k与吸光物质的本性,入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度,l为透光液层厚度。 组成 各种型号的紫外-可见分光光度计,就其基本结构来说,都是由五个基本部分组成,即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。 1.光源 在紫外可见分光光度计中,常用的光源有两类:热辐射光源和气体放电光源。热辐射光源用于可见光区,如钨灯和卤钨灯;气体放电光源用于紫外光区,如氢灯和氘灯。 2.单色器 单色器的主要组成:入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。 单色器质量的优劣,主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。 3.吸收池 吸收池又称比色皿或比色杯,按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池,前者不能用于紫外区。吸收池的种类很多,其光径可在0.1~10cm之间,其中以1cm光径吸收池最为常用。 4、检测器 检测器的作用是检测光信号,并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 5、信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计,电位调节指零装置,以及自动记录和数字显示装置等。

分光光度计期间核查.doc

文档来源为 :从网络收集整理.word 版本可编辑 .欢迎下载支持. 文件编号HZHJ(FY)/ZY-HC-(02)作业指导书 -2014 主题批准页第 1 页共 6 页 第 1 版第 0次修订颁布日期 : 2014 年 01 月 01日 分光光度计 期间核查指导书 编制人: 审核人: 批准人: 批准日期: 版号:第 1 版 实施日期: 2014 年 0 1 月 01 日 控制状态: 文件编号HZHJ(FY)/ZY - HC -( 02)作业指导书-2014 第 2 页共 6 页 主题 第 1 版第0次修订修订页 2014年 01月 01日 颁布日期 : 序号 章节修订修订审核批准批准版号修订内容 人人人日期号次序

文件编号HZHJ(FY)/ZY-HC-(02)- 作业指导书 主题分光光度计期间核查指导书 2014 第 3 页共 6 页 第 1 版第0次修订颁布日期 : 2014 年 01 月01日 分光光度计期间核查作业指导书 1.适用范围: 适用于本公司实验室内的SP-752 紫外可见分光光度计、 SP-721 可见分光光

度计的期间核查。 2.目的: 分光光度计进行运行检查,使之在相隔的两次检定间隔内能保持检测性能的 置信度,完成分光光度计预定的功能。 3.引用文件: JJG178-2007《紫外、可见分光光度计检定规程》、HZHJ(FY)/ZY - CZ-(08) -2009《 SP-721 可见分光光度计操作规程》、HZHJ(FY)/ZY -CZ -(09) -2009《 SP-752 紫外可见分光光度计操作操作规程》。 4.核查项目: 准确度、重复性,线性。 5.仪器主要技术参数: 5.1 SP-752 紫外可见分光光度计技术参数 ;波长精度( nm):± 2;波长重复性: 1nm。 to 125.0%T,0A to 2.5A,0C to 9999C(0-9999F)。 5.2 SP-721 可见分光光度计技术参数 ;波长精度( nm):± 2;波长重复性: 1。 to 125.0%T,0A to 2.5A,0C to 1999C(0-1999F)。 文件编号HZHJ(FY)/ZY-HC-(02)作业指导书 -2014 主题分光光度计期间核查;透射比重复性: 0.6%T。 6.期间核查方法:第 4 页共 6 页 第 1 版第 0次修订颁布日期 : 2014 年 01 月 01日 仪器经开机预热后,按《水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法》 HJ 535-2009 和《SP-721 可见分光光度计操作规程》,使用标准溶液或者质控样进行 分析,绘制标准曲线及测定标准溶液的浓度,并计算相对误差. 1.外观:仪器应有生产厂名、型号、编号,外观无损伤(使用中及修理后的仪 器其外观缺损应不影响正常工作)。 2.准确度检测相对误差应≤ 5%。相对误差: (X-S)/S*100% 3、测量信号与标液浓度的线性关系检查:标准曲线的相关系数r 应≥ 0.999 。线

分光光度计说明

722可见分光光度计使用说明书 1.仪器的主要用途 722可见分光光度计能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的的分析。仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门,是理化实验室常用的分析仪器之一 2.仪器的工作环境 2.1仪器应安放在干燥的房间内,使用温度为5℃~35℃,相对湿度不超过85%。 2.2使用时放置在坚固平稳的工作台上,且避免强烈的震动或持续的震动。 2.3 室内照明不宜太强,且避免直射日光的照射。 2.4 电扇不宜直接向仪器吹向,以免影响仪器的正常使用。 2.5 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 2.6供给仪器的电源电压为AC220V±22V,频率为50Hz±1Hz,并必须装有良好的接地线。推荐使用交流稳压电源,以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为1000W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 2.7 避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使7 避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐 蚀气体的场所使用。 3 仪器的主要技术指标及规格 3.1 光学系统:单束光、衍射光栅。 3.2 波长范围:330nm~800nm。 3.3 光源:钨卤素灯12V30W。 3.4 接收元件:光电池。 3.5 波长准确度:≤±2nm。

3.6 波长重复性:1nm。 3.7 光谱带宽:<6nm。 3.8 杂散光:0.7%τ(在360nm处)。 3.9 透射比测量范围:0.0%τ~100.0%τ。 3.10 吸光度测量范围:0.000A~1.999A。 3.11 浓度直读范围:0000~1999。 3.12 透射比准确度:±1.0%τ。 3.13 透射比重复性:0.5%τ。 3.14 噪声:≤0.3%τ。 3.15 稳定性:亮电流≤0.5%τ/3min, 暗电流≤0.2%τ/3min。 3.16 电源:AC220V±22V,50Hz±1Hz。 3.17 外型尺寸:570mm×400mm×260mm。 3.18 净杂散光测量范围:18 净重:22kg。 4.仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物 质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理--比耳定律。 τ=I/I0 logI0/I=KCL A=KCL

分光光度计期间核查方法、记录表,用于实验室资质审核

分光光度计期间核查方案 1.目的: 保证检测设备量值的准确性、正确性,从而确保检测结果的稳定性、可靠性。 2.适用范围: 适用于本实验室分光光度计在使用中或修理后的期间核查。 3.职责: 检验室负责期间核查的组织实施; 办公室负责协助期间核查工作的实施。 4.内容: 4.1 通用技术要求 4.1.1 开机前,要检查电源插座是否按规定“L”接火线,“N”接零线(接大地);使用时应避免强光照射。 4.1.2 铭牌标志清晰完整、内容翔实,各紧固件紧固良好、旋钮等开关不见工作正常、电缆线接插件能紧密配合,可调节部件无卡滞跳凸等现象。 4.2 预热仪器 按操作规程对设备通电预热20分钟后,使仪器处于正常运行状态。 4.3 进行波长示值误差与重复性 分别于313nm、412nm处以空气作空白,调整仪器透射比为100%,遮挡光后调整透射比为0%,如此数次之后即

可置入标准物质),读取吸光度测量值,重复上述步骤在波长检定点附近单向逐点测出标准物质的透射比谷值或吸光度峰值(同时记录透射比值)。连续测量3次,三次透射比谷值或吸光度峰值平均值与波长标准值之差即为波长示值误差,波长最大值与波长最小值之差即为波长重复性;三次透射比平均值与透射比标准值之差即为透射比示值误差,透射比最大值与透射比最小值之差即为透射比重复性; 五.结果评定: 以核查结果中最低级别注明仪器级别,同时参考当期检定合格证书指标,有一项指标不符合要求即判为不合格。 六.期间核查周期: 期间核查周期为一年,时间安排在分光光度计年度检定周期中间进行(一般为5月份)。 七.期间核查结果处理: 对以上检查结果,应填写“仪器设备期间核查记录”,于年底统一归档。在期间核查过程中若发现仪器工作不正常或评定指标未能达到规定要求,应及时通知设备管理员,由设备管理员组织有关人员确定,并组织维修或送检,维修后的仪器经检定或核查达到技术性能要求后方能投入使用。

分光光度计检定规程详细

分光光度计检定规程详细 UV-2450简介V-2450是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计,性能卓越且操作简单方便,与功能强大的操作软件UVProbe结合,可以具备强大的功能。小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。 UV-2450紫外可见分光光度计特点1.高水平的超低杂散光 UV-2550采用优异的DDM(双闪耀衍射光栅、双单色器)技术实现了超低杂散光(0.0003%以下)和高光通量。UV-2450虽然采用单单色器,杂散光也在0.015%以下。低的杂散光可以对高浓度的样品不进行稀释而直接测定。 2.通用型的软件UVProbe UV-2450/2550通过新一代的中英文双语操作软件UVProbe控制,包含光谱测定、光度测定、动力学测定和报告处理四大模块,从基本的测定到研究解析都可以通过它实现。UVProbe实现了真正的QA/QC功能,完全支持GLP、GMP。另外还可以加载膜厚测定、色彩分析等软件。 3.丰富的附件选择和广泛的应用领域 生命科学领域:可对从生命体内得到的微量样品进行测试。积分球测试:可以对浑浊样品和粉末状的样品进行测试。反射附件:可以对光学材料进行相对反射和绝对反射的测定。 UV 2450紫外可见分光光度计检定规程本仪器工作波段为190~900nm,,将其分为190~340nm、340nm~900nm两段分别检定。 1、计量性能要求1.1波长最大允许误差:A段:0.5,B段:1.0 1.2波长重复性:A段:0.2,B段:0.5 1.3噪声与漂移:0%透射比:0.1;100%透射比:0.2;漂移:0.2 1.4透射比最大允许误差:A段:0.5,B段:0.5 1.5透射比重复性:A段:0.2,B段:0.2

可见光分光光度计的操作方法

可见光分光光度计的操作方法 学时:2学时 一、实验原理 利用可见光等测定物质的吸收光谱,利用此光谱对物质进行定性定量分析和物质结构分析的方法,称为分光光度法,使用的仪器是分光光度计。分光光度计灵敏度高,测定速度快,应用范围广,是生物化学研究中必不可少的基本手段之一。 可见光光谱:光是电磁波,可用波长“λ”表示,电磁波谱是由不同性质的连续波长的光谱所组成,对于生物化学来说,最重要的波长区域是可见光和紫外光。光的波长是二个相邻的波峰之间的距离。λ=C/V 其中,λ-波长;C-光速;V-频率;单位时间要通过一个定点的波数。可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。 根据朗伯-比尔(Lambert- Beer)定律:A=εbc,(A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,b为液池厚度,c为溶液浓度)可以对溶液进行定量分析。ε越大,吸收光的能力越强,相应的分光光度法测定的灵敏度就越高。ε值越大,说明电子跃迁的几率越大,通常ε=10~105:一般认为ε>104为强吸收;ε=103~104为较强吸收;ε<102为弱吸收,此时分光光度法不灵敏。通常使用分光光度计可检测出的最小吸收度A=0.001,所以b=1cm,ε=105时,可检测的溶液最小浓度是C=10-8mol/L。 二、分光光度计的基本参数和组成与构造 1. 722S可见光分光光度计的基本参数 波长范围:340-1000nm 波长精度:±2nm(360-600nm) 表面刻度:(T)0-100%(A)0-2 2. 组成与结构 各种型号的分光光度计不论是何种型式,基本上都是由五部分组成:(1)

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