不同地区小菜蛾对氯虫苯甲酰胺和茚虫威的抗性初报

2012年第6期857

收稿日期：2011-

12-20基金项目：国家公益性行业（农业）科研专项（201103021，200803001）；科技部对欧盟科技合作项目专项经费（0904）作者简介：章金明（1975－），男，浙江新昌人，硕士，从事害虫综合治理研究工作。E-mail ：zhanginsect@https://www.360docs.net/doc/5010214862.html, 。通信作者：吕要斌，E-mail ：luybcn@163．com 。

文献著录格式：章金明，宋亮，黄芳，等.不同地区小菜蛾对氯虫苯甲酰胺和茚虫威的抗性初报［J ］．浙江农业科学，2012（6）：857－859，561.

不同地区小菜蛾对氯虫苯甲酰胺和茚虫威的抗性初报

章金明1

，宋

亮

1，2

，黄芳1，郦卫弟1，郑雪良3，张蓬军1，吕要斌

1，2

（1.浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所，浙江杭州310021； 2.浙江师范大学化学与生命科学学院，浙江金华

321004；

3.衢州市柑橘科学研究所浙江衢州

324000）

摘要：在十字花科种植较多的浙江省7个地区（常山、慈溪、杭州、金华、丽水、三门、上虞）采用室

内浸液法和诊断剂量法进行小菜蛾对氯虫苯甲酰胺和茚虫威的抗药性试验。结果显示，上述地区小菜蛾种群对氯虫苯甲酰胺抗药性水平有一定的差异。金华地区小菜蛾种群对氯虫苯甲酰胺敏感性下降，抗性指数为8.55，其余6个地区的小菜蛾对氯虫苯甲酰胺较为敏感，抗性指数0.42 3.24。小菜蛾对茚虫威的抗药性水平差异较大。其中金华地区小菜蛾对茚虫威的抗性指数68.69，慈溪和常山地区小菜蛾抗性指数分别为25.82和15.17，丽水、杭州、三门和上虞地区小菜蛾种群分别产生了9.74，7.16，5.99和5.73的低抗药性。结果还显示，诊断剂量法可定性判别小菜蛾的抗药性，可用于田间小菜蛾的抗性监测。

关键词：小菜蛾；氯虫苯甲酰胺；茚虫威；抗药性

中图分类号：S 435.112+

.1

文献标志码：A 文章编号：0528-

9017（2012）06-0857-03小菜蛾Plutella xylostella （L.）是十字花科作

物的主要害虫之一，在全国各地均有分布，尤其在南方各省蔬菜产区发生严重。当前小菜蛾的防治仍然依赖化学农药，频繁用药和小菜蛾本身世代短、繁殖快的特点导致小菜蛾对农药易产生抗性。据报道，我国小菜蛾已经对90%以上的药剂产生了抗性，防控形势严峻，抗性问题已经成为制约我国十

字花科蔬菜产业发展的重要障碍［1］

。

氯虫苯甲酰胺（chlorantraniliprole ）和茚虫威（indoxacarb ）是美国杜邦公司开发的两个高效、低毒杀虫剂，前者通过高效激活昆虫肌肉鱼尼丁受体，过度释放细胞内钙库中的钙离子，导致昆虫瘫痪死亡

［2］

，而后者通过阻断神经细胞中的钠离子

通道起到杀虫作用［3］

。氯虫苯甲酰胺和茚虫威可

有效防治几乎所有鳞翅目害虫，目前已经在多种作物上用于害虫防治。由于害虫的抗性治理依赖于田间抗性形成过程的有效监测，且已有研究显示，当小菜蛾处于低抗至中抗水平时，其抗药性是不稳定的，而达到极高抗水平后会趋于稳定，及早采取抗

药性治理措施对防止或延缓抗性发展至关重要［4］

。因此从阻止或治理抗性的需要出发，对浙江省十字花科主产区小菜蛾种群对氯虫苯甲酰胺和茚虫威的

抗药性进行监测，可为制定小菜蛾抗性治理策略和有效防控其为害提供科学依据。

1

材料与方法

1.1

供试材料

抗性监测用虫源于2011年4–6月采集自浙江省内十字花科蔬菜较多的区域，具体地点为杭州市（江干区水墩村散户花菜地）、慈溪市（宗江街道二塘新村万国农场甘蓝地）、上虞市（海通农业有限公司农场甘蓝地）、三门县（沿赤乡下洋墩村青花菜地）、丽水市（莲都区夏河门村散户甘蓝地）、金华市（汤西镇黄堰头村散户甘蓝地）、常山县（天马镇五联村常山神农果蔬专业合作社农场）。田间采集回来的蛹直接保存于5?冰箱，而高龄幼虫在实验室内用甘蓝饲养，待其化蛹后与先前保存的蛹一同羽化。成虫羽化后提供10%蜂蜜水，收集所产的卵，并在7 9叶大小的甘蓝植株上饲养至3龄中期供试验用。小菜蛾室内饲养条件为温度（25?1）?，相对湿度60% 70%，光照周期14h?10h 。

供试药剂5.22%氯虫苯甲酰胺乳油和4.86%茚虫威乳油由广东省农业科学院植物保护研究所提供，并标定准确含量。

8582012年第6期1.2小菜蛾抗药性测定1.2.1

生物测定法

抗药性测定采用浸液法

［4－6］

。用洁净的甘蓝叶片，剪成直径6.5cm 的圆片（避免主叶脉）。将叶片在药液中浸泡10s 后取出晾干（25?，2h ），将

晾干的叶片放在直径6.5cm 的塑料培养皿中，并接入3龄中期幼虫10头，覆盖双层吸水卷纸后盖上，正面朝上置于培养箱中。培养箱温度（25?1）?，相对湿度60% 70%，光照周期14h ?10h 。根据2个杀虫剂的杀虫特性，药后48h 检查死亡率。以小毛笔轻触虫体，不能协调运动的虫体视为死亡。试验以清水处理的甘蓝叶片作为对照，每处理重复4次。1.2.2

诊断剂量法

又称为区分剂量法，这种方法将引起99%敏感种群个体死亡的剂量（有时也用田间推荐浓度）作为抗性监测的区分浓度，在区分浓度下小菜蛾幼虫的存活率可作为抗性个体频率。具体方法同生物测定法1.2.1节。每个药剂处理幼虫10头，重复8次，以清水处理作为对照。

氯虫苯甲酰胺和茚虫威对室内敏感种群的致死

中浓度LC 50值分别为0.2320mg ·L －1

和0.5200mg ·L －1，用于抗性监测的诊断剂量则为5.476和2.000mg ·L －1；以上数据由广东省农业科学院植物保护研究所及南京农业大学植物保护学院、中国农业科学院蔬菜花卉研究所和云南省农业科学院农业环境资源研究所提供的敏感种群测定获得。

1.3

数据分析方法

试验数据采用DPS 数据处理系统软件［7］

进行

统计，计算毒力回归方程的斜率、LC 50值及其95%置信限。

小菜蛾抗性水平分级参考全国植保总站药械处

［8］

和尹艳琼等

［9］

制定，是按抗性指数大小划分

（抗性指数是指抗性害虫的LC 50值与敏感害虫的LC 50的比值，简写为RR ）：敏感（RR ＜5）、低抗（5≤RR ＜10）、中抗（10≤RR ＜40）、高抗（40≤RR ＜160）、极高抗（RR ≥160）。

2

结果与分析

2.1

不同地区小菜蛾对氯虫苯甲酰胺和茚虫威的抗药性

由表1可以看出，除金华外，杭州、慈溪、

上虞、三门、丽水和常山6个地区的小菜蛾对氯虫苯甲酰胺比较敏感，没有产生抗药性。其中，杭州和丽水种群的LC 50值最小，分别仅为0.0970mg ·L －1和0.1147mg ·L －1，抗性指数＜1；上虞、常山、慈溪、三门种群的LC 50值次之，分别为0.2549，0.2792，0.5139和0.7519mg ·L －1，四者的抗性指数1.10 3.24；而金华地区小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的LC 50值（1.9830mg ·L －1）相比有明显上升，

抗性指数达8.55，相对于其他6个监测点其敏

感性明显下降。

表1

浙江省不同地区小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗药性

市县毒力曲线相关系数LC 50/（mg ·L －1）

95%置信区间抗性指数杭州y =10.61+5.54x 0.96250.09700.0794 0.13960.42慈溪y =5.66+2.27x 0.99330.51390.3804 0.6973 2.22上虞y =6.04+1.75x 0.98720.25490.1932 0.3518 1.10三门y =5.24+1.94x 0.98700.75190.5468 1.3157 3.24丽水y =7.63+2.79x 0.99660.11470.0903 0.13940.49金华y =4.27+2.44x 0.9910 1.9830 1.6055 2.53678.55常山县

y =5.57+1.02x

0.9973

0.2792

0.1491 0.4415

1.20

而浙江省7个监测点田间小菜蛾种群对茚虫威的抗药性则存在很大差异（表2）。上虞、三门、杭州和丽水监测点茚虫威对小菜蛾的致死中浓度LC 50值分别为2.9797，3.1133，3.7210和5.0663mg ·L －1，抗性指数5.73 9.74，但仍属于对茚虫

威低抗性。常山和慈溪小菜蛾种群对茚虫威的LC 50值为7.8875mg ·L －1和13.4256mg ·L －1，抗性指数分别为15.17和25.82，属中等抗性水平。而在本次监测中，金华地区小菜蛾对茚虫威抗性最高，抗性指数达68.69，已形成高抗性。

表2浙江省不同地区小菜蛾对茚虫威的抗药性

地点毒力曲线相关系数LC5095%置信区间抗性指数杭州市y=3.57+2.51x0.9906 3.7210 2.9723 4.69227.16慈溪市y=3.45+1.37x0.999213.42569.0520 22.766325.82上虞市y=3.20+3.79x0.9837 2.9797 2.5003 3.4702 5.73三门县y=4.38+1.26x0.9602 3.1133 1.8666 4.4545 5.99丽水市y=3.48+2.16x0.9771 5.0663 3.9513 6.34679.74金华市y=2.37+1.70x0.985635.719227.2849 50.214668.69常山县y=3.63+1.53x0.99537.8875 5.2923 15.947915.17

2.2诊断剂量法监测小菜蛾对氯虫苯甲酰胺和茚

虫威的抗性

利用研究团队提供的抗性诊断剂量（氯虫苯甲酰胺和茚虫威的抗性诊断剂量分别为5.476mg ·L－1和2.000mg·L－1），以诊断剂量作为抗性监测的区分浓度，在区分浓度下小菜蛾幼虫的存活率可作为种群的抗性个体频率，结果见图1。

图1浙江省不同地区小菜蛾在2种药剂区

分浓度下的存活率（抗性频率）

图1显示，以区分浓度下小菜蛾幼虫存活率超过20%为产生抗药性的信号为标准［4］，浙江7个地区的小菜蛾种群在茚虫威的抗性区分浓度下的存活率均很高，最低的三门也有47.50%的存活率，而最高的金华地区小菜蛾100%存活，均已经对茚虫威产生了抗药性。另外，按照抗性区分浓度下的存活率从大到小排列依次为金华100%＞慈溪87.50%＞丽水82.50%＞杭州79.49%＞常山77.50%＞上虞72.50%＞三门47.50%，这个抗药性监测结果与浸液法获得的结果（表2）比较接近，但不完全一致。

同样方法对氯虫苯甲酰胺的抗性监测显示，除金华监测点小菜蛾抗性个体频率（存活率）为7.50%外，其余6个监测点的存活率均为0，表明浙江省7个监测点田间小菜蛾种群对新药剂氯虫苯甲酰胺均属敏感。而浸液法试验中，金华地区小菜蛾产生了8.55的低抗性。

3小结与讨论

氯虫苯甲酰胺作为一个邻氨基苯甲二酰胺类新式杀虫剂于2008年在中国正式上市，目前在浙江省主要用于稻纵卷叶螟、二化螟等水稻害虫的防治，而在蔬菜上应用才刚刚开始。浙江省7个地区小菜蛾抗药性监测结果表明，氯虫苯甲酰胺由于应用时间短，各地田间小菜蛾种群对其较为敏感，实际测得的LC

50

值0.0970 0.7519mg·L－1（金华

除外），敏感性高于广州番禺小菜蛾种群的LC

50

值0.8080mg·L－1［10］，与胡珍娣等［11］报道的华南6个地区的小菜蛾对其的敏感性基本一致（粤北连州0.05mg·L－1、粤中惠州0.11mg·L－1、粤中南广州东升0.13mg·L－1、粤中南广州岑村和桂中柳州0.17mg·L－1、赣南信封0.36mg·L－1）。但浙江金华监测点的小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的敏感

性已经下降了，LC

50

已经达1.9830mg·L－1，与敏感种群（0.2320mg·L－1）比抗性指数达8.55，在生产中需要密切关注其抗性发展动态。而茚虫威在浙江用于蔬菜作物上鳞翅目害虫的防治时间较长，结果表明各个监测点小菜蛾对茚虫威的抗药性相对较高，抗性最高的金华点抗性达68.69，属于高抗水平，应停止使用；常山和慈溪地区的抗性指数达15.17和25.82，达中等抗性水平，建议减少使用次数。为防止抗药性进一步增强，在鳞翅目害虫多发期可选用多杀菌素、溴虫腈、Bt制剂和氯虫苯甲酰胺等药剂。而对于新药氯虫苯甲酰胺，一定要严格的控制使用次数，每季作物不得超过2次，重视蔬菜害虫的测报工作，提高用药准确

（下转第861页）

图1兰花茎腐病症状

色，产生大、小两型分生孢子（图2）。小型分生孢子数量多，产生快，性状有圆形、卵形、椭圆形及棒状，5.79 12.03μm?3.44 5.48μm，无分隔，少数有1个分隔；大型分生孢子数量较少，镰刀状，25.44 57.79μm?5.52 7.85μm，有2 3个分隔，单生或假头状着生；厚垣孢子多呈球形，顶生；单瓶梗产孢，产孢梗短。

2.3接种结果

接种后半个月，2，3，4号相继发病，1号对照正常生长。

2.4致病菌再分离和鉴定

从接种后发病的植株根部再次分离出的病原

图2兰花茎腐病病原形

菌，其菌落的外部形态特征如菌落质地、颜色、大小，产孢的结构，分生孢子的类型、大小、分隔数及形状等都与原先分离所得到的、用于接种的菌株完全相同。

3小结

根据鉴定结果，确定镰刀菌（Fusarium sp.）为兰花茎腐病的致病菌。

参考文献：

［1］陈鸿逵，王拱辰.浙江镰刀菌志［M］.杭州：浙江科学技术出版社，1992.

（责任编辑：张瑞麟

檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪

）（上接第859页）

性，与药剂轮换使用结合降低抗性形成风险，提高防治效果。

小菜蛾抗药性治理依赖于其抗性水平及抗性发展动态的有效监测。赵建周等［4］的研究显示，当小菜蛾抗性处于较低水平时，其抗药性是不稳定的，而达到极高抗后则会趋于稳定，因此及时的抗性监测并采取治理措施对防止或延缓抗性发展至关重要。发展一种简便实用的抗性监测方法显得十分迫切，本研究中也尝试用国内部分学者已经在使用的诊断剂量法监测小菜蛾的抗药性［12］，结果显示使用诊断剂量法可以有效监测小菜蛾的抗药性。如按诊断剂量判断金华和慈溪2地田间小菜蛾种群对茚虫威产生了抗药性，其结果可以得到浸液法结果的验证，但是对于具体抗性程度和各个监测点间抗性的比较则比较困难。由于诊断剂量法方法简便，在定性判别是否产生抗药性时具有较高可信度。

参考文献：

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［7］唐启义，冯明光．DPS数据处理系统：实验设计、统计分析及数据挖掘［M］．北京：科学出版社，2007：85－142．［8］全国植保总站药械处．1992年农业害虫抗药性监测公报［J］．植保技术与推广，1993（3）：38－39．

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自然科学版，2005，34（3）：294－296．

（责任编辑：张瑞麟）