电转化仪
电转化仪
仪器型号：Gene Pulser II
生产商：USA Bio-Rad
工作原理：Gene Pulser Ⅱ电转化仪器可用于原核细胞、酵母和哺乳动物细胞的转化。仪器采用Pulse Trac波形传送系统，能产生最精确的指数衰减的脉冲，可在电转化
杯里获得最佳的细胞转化。
电穿孔是一个物理过程，利用电脉冲瞬时穿透原核细胞或真核细胞的细胞膜，
使得细胞能够吸收各种不同种类的生物分子。当用化学或其他物理方法转化某
些类型的细胞效率不高或有毒性时，电转化则可能是一种有用的方法。
Gene Pulser Ⅱ电穿孔仪由三个部分组成：Gene Pulser Ⅱ装置及两个附属设备
Pulse Controller PLUS和Capacitance Extender PLUS。Gene Pulser Ⅱ可与另两个
附属设备中的任意一个一起使用：对于细菌和酵母细胞的电转化（高电压/低电
容），使用Pulse Controller PLUS；对于哺乳动物细胞和胚胎组织的电转化（低
电压/高电容），则应使用Capacitance Extender PLUS。
系统参数：
输入电压220-240V，50-60HZ
输入电流15A
最大输出电压和电流2500V，125A（正常负荷）
电弧时限定值1500A
输出波形Pulse Trac指数衰减，RC时间常数取决于所选的样品和电容器
输出电压调节50-2500V范围（取决于电容器）内，低电压范围（50-500V）和
高电压范围分别具有2V和10V的调节精度。
工作环境温度0-35oC
湿度0-95%，无冷凝
简易操作指南：1：打开电源
2：根据自己的情况设置参数：如电容 c=25μF, 电压 v=1.8kV (0.1cm 电击杯)，R=200Ω
3:将电击杯两壁水檫干
4：电转：所产生的时间常数一般为4.6—5.0ms
5:立即加入培养液恢复培养
注意：电击杯两壁水一定要檫干；所制备的感受态细胞一定要干净，否则电流过大
【VIP专享】电转化注意事项
电转化注意事项 作者: global.wun(站内联系TA)发布: 2009-10-20 一、制备感受态的菌液收集时间： 1、准确测定OD值：OD在1.2～1.5之间。 1）为了准确测定OD值，建议将菌液稀释不同浓度测定（1、2、4、8、16倍稀释，看其OD值是否呈线性关系）。每个倍数做3－5个重复，应该可以大致推断OD值是否准确！菌液看上去浑浊，但OD值不高，很可能OD稀释倍数不够！ 2）OD值是否测准也可以这样估算：OD600为40左右时，菌体湿重（6000rpm离心5min ）约0.95g/10ml。高密度发酵时菌体湿重将相应下降。 2、75ml的菌，经18h左右的培养，最后sorbital洗涤完毕后，50ml离心管里所剩菌体特别浓，需要1ml sorbitol才可溶解为糊状。正常培养的OD在1.2～1.5之间的500ml菌液，收集的感受态也用1ml稀释的，没那么粘稠。可以看看降低培养温度（27摄氏度）或缩短培养时间（12h）。 3、甚至不用转接,直接挑单克隆在50－100mlYPD中摇过夜，效果也很好 二、制备感受态的菌液量 如果只转一个样品，50ml就够了，一般50ml的培养液如果OD值正常的话够做10管感受态的，其他的按比例缩小。用大试管摇5ml菌液，然后取1ml毫升在1.5mlEP管中制感受态，每一步的离心时间30秒就行。整个流程时间短，制备好的感受态用来做转化的效率很高。 山梨醇离心，洗涤的过程之后的重悬的时候注意浓度，不要过于粘稠和稀释。 三、感受态的保存 感受态细胞做好后由于电转化杯还没有处理好等原因，在冰上放几个小时再做可能有一定的影响，尽量马上制备马上转化。如果感受态细胞要保存，不需要加甘油，一般80ul EP 管分装，-70 或-80 摄氏度保存。 另附：酵母GS115点种分离纯化 接种GS115于5ml YPD液体培养基，30℃，200rpm振荡过夜，涂布YPD平板，30℃培养48 小时，用YNB基本培养基和含His的补充培养基作点种分离纯化，挑选在补充培养基生上生长而在基本培养基上不生长的单菌落划YPD平板，4℃保存。 四、电转化注意点： 1、感受态做好后，最后一次吸出sorbital时，不是直接倒调的，而是用毛细管轻吸出来的，这样可能使剩下的感受态纯净些。 2、最后用毛细管取出100ul出来，加入质粒，混匀！（怕量不够，吸得很多，电转时效果
电源转换器使用说明书
精选文档，供参考！ 电源转换器使用说明书 使用您的转换器前，请仔细阅读使用说明书 安全第一 安装或使用不当都有可能有为危险或造成意外伤害。使用前，请仔细阅读说明书，特别要注意警告和注意部分的内容。注意提示您在一定条件下或一些操作方法可能对转换器或其他设施带来危害；警告提示您某些情况可能引起人身伤害。 警告：触电危险，儿童远离 1.交流输出插座与一般家电插座一样，有潜在危险，可以致命。 2.插座、风扇、或通风口不能堵塞。 3.转换器不能浸水、雨淋、淋雨雪。 4.普通AC 电线无论如何都不能直接与转换器连接。 警告：表面发热 连续使用后壳体表面温度会上升到60℃。使用时，保证少于2个端面5CM 内气体通畅。易变高温影响的物体不要放在附近。 警告：爆炸危险 下列环境中禁止使用：附近有易燃、易爆物品，以汽油为动力的船舱底部，丙烷存储罐附近，存放汽车轮胎或铅酸电池的地方。电池会由于氢气渗漏，一旦接触静电火花，易被点燃。 使用时，确保遇到意外情况，能就近得到援助。 注意： 1.不能将带电的直流电源直接插入转换器。 2.不能将接地的直流负载接入转换器。 3.不能在超过60℃的环境下工作。 1.说明 感谢您购买500W 电源转换器。这款转换器体积轻巧，设计合理，代表着高频转换的新潮流。无论接在汽车、船或24V 专用电瓶上，它都能为家用电器如电视机、录像机、电动工具等提供安全可靠的交流电源。设有自动保护功能，使您的转换器、电瓶在超常负载下得到有效保护，方便实用。 请在安装和操作之前仔细阅读本说明书。说明书留存以备参考。 安全特性： 1.过载保护，电流自动切断。 2.内置式保险丝，重新启动时，提供安全保障。 3.低电压保护后，电源自动切断。 4.过温保护后，电源自动切断。 5.输出短路保护。 2.安装指南 基于安全和性能的考虑，安装环境应具备条件： 1.干燥：不能浸水或雨淋 2.阴凉：适合温度在-25℃与40℃之间环境中使用。 3.通风：不能与电池驱动的电器连接，安装环境周围不能有易燃液体如汽油和挥发性的易爆气体。 4.清洁防尘：工作环境对500W 转换器至关重要。 使用导线 1、将转换器与24V 电瓶直接，您就可以使用持续功率为400W 的电器。将红色导线上的圆形端子接在转换器/电瓶的正极上，黑色导线上的圆形端子接在负极上。 注意：正/负极接反可能会损坏转换器。因此而造成的损失，不属于保修范围。 2、旋紧接线柱，但不要过紧。 3、将黑色夹子夹在电瓶的负极上。将红色夹子夹在电瓶的正极上。两个夹子连接正确。过松可能会导致电流意外下降，导线过热，从而损坏机器或导致火灾。 4、开启转换器。如果转换器不工作，请检查第三点。 5、用完后，将导线与电瓶分离。 3.使用方法 500W 转换器适用于220V ，持续功率为400W 或小于400W 的电器。交流输出波形为“修正后的正弦波”，是指所使用电源的功能上与正弦波相似。 功率或“瓦数”是指产品的额定功率。产品在启动瞬间，耗电量大于正常工作时间。电视、显示器、电动机在启动时电量达到峰值。尽管500W 转换器可以承受1000W 功率消耗，有时500W 以下的电器峰值功率可能会超过转换器所承受的峰值电流，引发过载保护，电流被关断。同时带动多个电器，可能发生这种情况。如果需要同时使用多个电器，先关闭电器开关，打开转换器开关，然后逐个打开电器开关。应最先开起峰值最高的电器。 显示和控制系统 1.转换器一端有2个AC 输出插座。2个220V/持续功率之和400W 或400W 以下的电器可同时接入。 2.转换器开关开时，有交流电源输出。 3.绿色指示灯（电源指示）工作，表示两个交流插座有交流输出，转换器工作正常。 4.红色指示灯（保护指示）工作，表示因过/欠压/过载/过温，导致转换器关断。 操作： 1.正确连接24V 输出或电瓶，打开开关，绿色指示灯工作，有交流电输出。 2.将电器插入转换器，打开开关，一次插入一个电器。 3.电瓶电量快耗尽时，电流开始下降。当转换器感应到输入电流降到20.4-21.6V 时，报警器发出蜂 鸣声。此时，电脑或其他敏感电器应及时关闭。 4.忽视报警声，转换器将在电流降到18.4-19.6V 时自动关断。这样可以避免电瓶被过充。电源切断后，红色保护指示灯工作。
马波斯气动量仪气电转换放大器调整说明书
马波斯气动量仪气电转换放大器 灵敏度及零位调整操作说明书 一、概略 各部图示： 放大器 电源 a.灵敏度调节钮（倍率调节钮）。 d.放大器进气口。 b.零位调节钮。 e.排气口。 c.放大器出气口（至气测头）。 f.电源指示灯。g.电源开关。
二、测量前准备 1.按要求准备好马波斯工作的电源和气源。（供气压力0.15～0.2Mpa,供气压 力恒定，气源干燥无水、无油） 2.将“灵敏度调节钮”、“零位调节钮”右旋到底（全部关闭）。 三、确认当前测量事件对于放大器灵敏度和零位所需要调节的方向，方法如下: 1．样件或标准环选用的原则： 1.1 要避免样件圆度及锥度不良对测量所造成的误差。 1.2 要尽量按照工艺控制上下限的范围选用样件。 2. 准备好二个已经标定好实际尺寸的产品样件或标准环，按标定值计算出它 们的绝对值差如 D1 = V1max-V1min； 3. 将两个样件分别放入气动测头，按触摸屏显示值计算出它们的绝对值差如 D2 = V2max-V2min； 4. 调整方向的确定：如D1 > D2,则“灵敏度调节钮”和“零位调节钮”都要 统一向右调节； 如D1 < D2,则“灵敏度调节钮”和“零位调节钮”都要向左调节。 四、内径测量调整举例说明： 1. 假定两个产品样件标定值分别为 V1max = -1μm；V2max = -10μm； 则 D1 = V1max-V1min = -1-(-10)=9μm； 那么 D = D1/2 = 9/2 = 4.5μm； 2.将气动测头放入大尺寸样件，调节“灵敏度调节钮”直至触摸屏显示值 = D = 4.5μm； 3.将气动测头放入小尺寸样件，调节“零位调节钮”直至触摸屏显示值 = -D = -4.5μm； 4.再将气动测头放入大尺寸样件，调节“灵敏度调节钮”直至触摸屏显示值 = D = 4.5μm； 5.再将气动测头放入小尺寸样件，调节“零位调节钮”直至触摸屏显示值 = -D = -4.5μm； 6.反复多次直至气动测头放入大尺寸样件显示值 = 4.5μm；气动测头放入小
转供电必须具备的条件及费用关系
转供电必须具备的条件及费用关系 一是必须经供电企业委托；二是征得该地区有供电能力的直供用户同意；三是供电企业与委托转供户签订协议。 转供电委托费用 转供电协议应当约定转供费用，转供委托费用按委托的业务项目的多少，由双方协商确定。 转供电损耗承担 向被转供户供电的公用线路与变压器的损耗电量应由供电企业负担。 相关法律法规规定 《中华人民共和国电力法》 第二十六条供电营业区内的供电营业机构，对本营业区内的用户有按照国家规定供电的义务；不得违反国家规定对其营业区内申请用电的单位和个人拒绝供电。 《电力供应与使用条例》 第二十条在公用供电设施未到达的地区，供电企业可以委托有供电能力的单位就近供电。非经供电企业委托，任何单位不得擅自向外供电。 《供电营业规则》
第十四条用户不得自行转供电。在公用供电设施尚未到达的地区，供电企业征得该地区有供电能力的直供用户同意，可采用委托方式向其附近的用户转供电力，但不得委托重要的国防军工用户转供电。 委托转供电应遵守下列规定： 1、供电企业与委托转供户（以下简称转供户）应就转供范围、转供容量、转供期限、转供费用、转供用电指标、计量方式、电费计算、转供电设施建设、产权划分、运行维护、调度通信、违约责任等事项签订协议。 2、转供区域内的用户（以下简称被转供户），视同供电企业的直供户，与直供户享有同样的用电权利，其一切用电事宜按直供户的规定办理。 3、向被转供户供电的公用线路与变压器的损耗电量应由供电企业负担，不得摊入被转供户用电量中。 4、在计算转供户用电量、最大需量及功率因数调整电费时，应扣除被转供户、公用线路与变压器消耗的有功、无功电量。最大需量按下列规定折算： （1）照明及一班制：每月用电量180千瓦时，折合为1千瓦； （2）二班制：每月用电量360千瓦时，折合为1千瓦； （3）三班制：每月用电量540千瓦时，折合为1千瓦； （4）农业用电：每月用电量270千瓦时，折合为1千瓦。 5、委托的费用，按委托的业务项目的多少，由双方协商确定。
费希尔I2P-100型电气转换器
D 103197X 012 Type i2P-100 Electro-Pneumatic Transducer The Type i2P-100 electro-pneumatic transducer,shown in figure 1 uses a patented converter module that converts a milliampere input to a proportional pressure output. Both the current input and pressure output range are user-configurable in the field. The converter module uses small parts of minimum mass, which are balanced symmetrically around a pivot point at the center of the mass. This balanced arrangement results in a high performance instrument that reduces sensitivity to vibration.An integral pneumatic relay provides the high capacity necessary to drive pneumatic control valve/actuator assemblies without additional boosters or positioners. The transducer also provides stable, accurate operation when its output is transmitted to small volume chambers, such as a pneumatic positioner or other pneumatic instrument.Reduced sensitivity to vibration combined with high capacity and first order lag characteristics make the i2P-100 transducer ideal for direct mounting on control valve/actuator combinations. Features D Low Pneumatic Supply Consumption —The transducer has low pneumatic supply consumption which cuts operating costs. D Approved for use with Natural Gas —The i2P-100 is approved for use with natural gas as the pneumatic supply. D High Output Capability and Rangeability —The integral output relay volume of the transducer is adequate to drive valve/actuator combinations without requiring a positioner or volume booster.Selectable user field-configurable dip switch setting for output range of 0.2 to 2.0 bar (3 to 30 psi).D Split Range — Selectable user field configurable two-way split range using either half of the standard input signal. W8710 INTEGRAL RELAY REPLACEABLE FILTER WITH REMOVABLE ORIFICE VENT Figure 1. Type i2P-100 Electro-Pneumatic Transducer D Corrosion Resistant —Separate housing compartments isolate the electronics from the pneumatic process. The electronics module is encased in a rugged plastic shell which protects the conformal coated electronics and dip switches from corrosion and damage. Converter module coils have corrosion resistant coating and all flexures are gold plated to provide protection from hostile environments. D Tolerant of Dirty Supply Medium —Free-flow pilot stage design and large internal air passages provide excellent tolerance to dirty pneumatic supply, by reducing the effects of contaminant buildup and erosion. The removable primary orifice and and replaceable 5 micron filter are easy to remove for service and maintenance (see figure 1).D Easy Maintenance —Modular electronics and converter modules contained in separate housing compartments, isolating the electronics from the process, allow for easy replacement in the field for reduced maintenance costs. D Vibration Resistance —The transducer, used in a standard valve/actuator mounted application,exhibits an output shift of less than 1 percent of span when tested to SAMA Standard PMC 31.1,Condition 3.
基于STM32的智能电源转换器
基于STM32的智能电源转换器 发表时间：2019-07-17T12:39:47.400Z 来源：《基层建设》2019年第13期作者：刘春明韩玲王冠超[导读] 摘要：为了减少用电设备待机功耗的问题，本文设计了一种基于STM32F103的具有检测用电设备电流以及电流谐波问题的可以远程控制的智能插座。 山东海信绿苑房地产开发有限公司山东省济南市 250100 摘要：为了减少用电设备待机功耗的问题，本文设计了一种基于STM32F103的具有检测用电设备电流以及电流谐波问题的可以远程控制的智能插座。 0、引言 待机能耗是指电器虽然没有使用，但其插头仍然插在插座的状态下所消耗的电能[1]。据中国节能认证中心对家庭待机能耗做过的调查显示，待机能耗占到家庭电力消耗的 10% 左右，仅以电视机为例，平均每台电视机的待机能耗是8.07 W，按每天待机 10 h 大约耗电 0.08度。待机能耗引起的资源和环境问题越来越受到社会的广泛关注，智能电源转换器因其方便、节能成为国内外新节能产品的研究热点[2] 本文设计的智能电源转换器在用户将转换器中主要设备关闭后，造成电路中电流骤减，基于 ARM 系列单片机 STM32F103 的微控制器能迅速检测到电流减小，从而认定主要设备关闭，之后切断插座电源，智能插座上的所有用电设备将全部实现自动断电。智能电源转换器还可以检测用电设备的谐波信息，通过SX1278模块经过节点上传至服务器用于数据分析。 1、智能电源转换器的总体设计 为了解决此电源转换器的需求，本文以STM32f103单片机为核心，霍尔元件的电流检测芯片、电流信号调理电路、SX1278无线模块构成系统的总体结构。 2、硬件设计 2.1微处理器的选择 微控制器选择STM32F103C8T6，其供电电压典型值为3.3V，一系列的省电模式可保证低功耗应用的要求。图1是STM32F103C8T6最小系统。 2.2电流检测芯片选型 电流检测原件选用ACS712，通过该铜制电流路径施加的电流能够生成可被集成霍尔?IC?感应并转化为成比例电压的磁场，通过将磁性信号靠近霍尔传感器，实现器件精确度优化。 图1 单片机最小系统图2 电流检测电路 2.3 SX1278通信模块 通信模块采用了Semtech公司生产的、具有优良远程通信能力的SX1278射频处理器。MCU与SX1278通过串行外设接口总线进通信，包括设置参数和读写先进先出（first input first output，FIFO）。SX1278可以通过6根连接线DIO0～DIO5中断MCU，完成异步事件处理。为判断接收和发送[3]。 3、软件设计 智能电源转换器完成对插座电气参数的采集和控制，并将数据通过SX1278无线模块上传至物联网节点。物联网节点通过TCP/IP协议将数据发送至服务器，在上位机进行数据显示，以及绘制历史曲线并进行数据分析。 3.1智能电源转换器程序设计 系统上电初始化，开机以后，终端模块需要加入节点网络当中，完成自组网。组网完成后，智能电源转换器采集电流电压信息，并进行FFT分解，根据智能电源转换器与物联网节点间协议，系统每过一段时间将采集到的信息通过物联网节点定时上传。 3.2上位机程序设计 上位机软件使用python语言编写。Python 是一种面向对象的解释型计算机程序设计语言。上位机软件可显示电流电压以及谐波的实时数据，并能控制电源转换器的开关状态。 4 系统测试分析 完成本系统所有的理论设计以后在实验室搭建了测试环境上电运行检测。
电转化
电转化实验方案 准备转化用质粒DNA，线性化，去磷酸化 1 GS115 的纯化和感受态处理 2 确定电击转化条件，DNA转化GS115 3 选择His+转化子 4 筛选His+转化子的遗传霉素抗性 5 证实重组菌的Mut+Muts表型 6 PCR 鉴定基因是否存在7 检测基因表达8 1、准备转化用质粒DNA，线性化，去磷酸化 1.1 质粒DNA提取（大量） 利用试剂盒提取质粒DNA 1.2质粒的线性化 利用Sacl进行线性化，线性化步骤如下：（新构建载体，和亲本载体，单拷贝质粒抗0.25mg/ml 遗传霉素） 试剂标准体积实际体积 Sac1 1 ul 1.5 10XL buffer 2 ul 4 底物DNA 3.5ul 40 灭菌蒸馏水13.5ul 34.5 37℃下反应3h（60℃，15min） 利用PCR产物回收试剂盒回收酶切产物，可直接用于转化。 １
利用PCR产物回收试剂盒回收和利用乙醇沉淀的方法都能获得转化子。 乙醇回收酶切质粒： 1）加入2倍体积的无水乙醇和0.1倍体积的3MNaAc（PH5.2），混匀，沉淀质粒DNA。 2）零下20℃数小时（大于2小时），12000rpm离心10-20min，弃去上清。 3）300ul 70%乙醇洗涤一次，12000转离心10min，弃去上清。 4）37℃烘干水和乙醇 5）用20ulddH2O重新溶解，电泳检测。 注意： 由于重组质粒的DNA分子量较大，同样的酶切条件下酶切效果不一样。 酶切质粒的含量较低，应该大提质粒。 1.3去磷酸化（可选步骤） 去磷酸化可以提高转化效率，在转效率低的情况下，可以考虑磷酸化处理. 2、GS115 的纯化和感受态处理 2.1接种GS115于5ml YPD液体培养基，30℃，200rpm振荡过夜，涂布 YPD 平板，30℃培养48 小时，用 YNB基本培养基和含His的补充培养基作点种分离纯化，挑选在补充培养基生上生长而在基本培养基上不生长的单菌落划YPD平板，4℃保存。 2.2 感受态制备 1)挑取酵母单菌落，接种至含有5ml YPD培养基的50ml三角瓶中，30℃、 250-300r/min培养过夜；（最好每次都从平板上挑酵母菌） 2)取1ml的培养物接种至含有100ml新鲜培养基的250三角摇瓶中，30℃、 150r/min培养过夜（12h），至OD600达到1.3-1.5（1.0-1.3）； 3)将细胞培养物于4℃，1500g离心5min，用100ml的冰预冷的无菌水将 菌体沉淀重悬； 4)按步骤3离心，用50ml的冰预冷的无菌水将菌体沉淀重悬； ２
电转化
电转化感受态细胞的制备 1.用枪头挑取单克隆菌落，投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。（同时做培 养基和枪头的空白对照） 2. 37℃，220rpm，培养14-16个小时。 3. 第二天，以1：100的比例将这10ml菌液倒入1000ml LB液体培养基中，37度，220rpm， 振摇2-3小时，每半小时测一次OD，当OD值达到0.3-0.4时，停止培养。 4. 将菌液在冰上预冷30分钟，随后将菌液分装到500ml 预冷的离心杯中，4℃，2500rpm 离心10分钟。 5. 弃上清，离心杯中加入少量ddH2O，使沉淀悬浮后，再将水注满离心杯，4℃，4000rpm 离心10分钟。 6. 弃上清，加少量灭菌水，重悬菌体，再将水注满离心杯，4000rpm，4℃，离心10min。 7. 弃上清，往离心杯中加入少量10%甘油(灭菌，预冷)，重悬菌体，再加满10%甘油, 4℃, 4000rpm, 离心10min。 8. 弃上清，每个离心杯中加入5ml10％的甘油，使沉淀悬浮后，将菌液以300ul/管分装 于1.5ml的离心管中，-80 ℃冰箱中保存。同时取100 μl感受态加0.01ng puc18直接电穿孔转化，检测转化效率。 9. 次日观察转化子生长情况，并记录。 2．连接产物纯化 1．将连接产物转移至一1.5ml Eppendorf管中，加入下列试剂: 10ul of ddH2O 2ul of 3M NaAC（PH5.2） 50ul of 无水乙醇 轻轻混匀，稍微离心并将其置于-20℃放置1小时以上； 2.4℃，top Speed 离心30分钟； 3.小心移去上清，避免接触到管底的沉淀物；
电穿孔法转化大肠杆菌TG1的条件优化
药 物 生 物 技 术 Pharmaceutical Biotechnology 2001,8(3):143～146 电穿孔法转化大肠杆菌TG1的条件优化Ξ 李 南,凌世淦2,吴梧桐1 (11中国药科大学生物制药学院,南京210009;21军事医学科学院基础医学研究所分子病毒学实验室,北京100850) 摘 要 研究了质粒pFab74X经电穿孔转化大肠杆菌TG1菌株的影响因素,并优化其转化条件。电场强度和脉冲时间的影响较为复杂,两者适当组合才可获得高转化效率。此外,采用对数生长早期的细菌,提高细菌浓度和降低筛选用氨苄青霉素的浓度均可提高转化效率。 关键词 电穿孔;转化效率;大肠杆菌TG1 中图分类号:Q68,Q936 文献标识码:A 文章编号:100528915(2001)0320143204 构建cDNA文库或基因文库时,转化效率高低是决定其多样性的关键因素之一。但常用的磷酸钙及原生质体等转化法转化效率均较低,批间差异较大,转化后再生时间长。电穿孔法(E lec2 troporation)则较好的解决了这个难题,它是利用瞬间高压电脉冲作用于受体细胞,使细胞表面产生暂时性的孔隙,从而将DNA、RNA、蛋白质等多种生物分子或颗粒导入胞内的方法,也称为电转化法。由于电穿孔是一个物理过程,适用范围广,转化效率高,特别是针对易受溶酶体消化的生物分子[1]及没有合适遗传转化系统或转化效率低的细胞,效果显著。目前,电穿孔法已经广泛应用于生物学、医药学、食品学等各个领域,成为转化细胞的常用方法。 电穿孔法最早是应用于真核细胞。1982年, W ong和Neumann成功的用电穿孔法转化小鼠成纤维细胞[2],但效率不高。现在,由于技术改进,操作简便快速,转化效率高,已广泛应用于原核细胞外源生物分子的导入。但影响转化效率的因素众多,不同的电穿孔体系[3]、受体细胞[4]、外源生物分子[5],其最佳转化条件均有一定差异。因此要获得高转化效率必须寻找这些因素的最佳组合。本文探讨了电场强度、脉冲时间、细菌浓度、细菌生长周期及转化子筛选过程氨苄青霉素浓度对TG1细菌转化效率的影响,并优化转化条件,以便利用TG1菌株建立高度多样性的基因文库,促进基因工程药物的发展。1 材料与方法 111 材料与仪器 E1coli TG1supE hsdΔ5thiΔ(lac2proAB)F’[traD36proAB+lacI q lacZΔM15]和质粒pFab74X (613kb,Ap r),由军事医学科学院基础医学研究所分子病毒学实验室保存;蛋白胨和酵母提取物为Ox oid公司产品,MOPS购自北京鼎国生物工程公司,氨苄青霉素(简称Ap)和其余试剂为进口或国产分析纯;S B培养基(3%蛋白胨,2%酵母提取物,1%MOPS,014%葡萄糖,10mm ol/L MgCl2, pH710),S OB培养基(2%蛋白胨,015%酵母提取物,0105%NaCl,215mm ol/L K Cl,10mm ol/L MgCl2, pH710),S OB2A培养基(含100mg/L Ap的S OB培养基),S OC培养基(S OB培养基,加20mm ol/L葡萄糖),S OC2A培养基(含100mg/L Ap的S OC培养基);I N2101型基因脉冲导入仪(天津理工学院), Lambda2UV/VIS型光谱分析仪(美国Perkin2 E lmer公司)。 112 菌株制备 将270℃冻存的TG1菌种分别于S OB和S OB2 A琼脂平板上划线培养,验证其为Ap s。从S OB 平板上挑取单菌落,37℃于S B培养基中培养至OD600约为110。取培养物按1∶100的比例重接于S B培养基中,37℃培养至OD600约为016。培养物冰浴中放置30min后,在4℃以4000r/min离心 341 Ξ收稿日期:2001203212 基金项目:北京市自然科学基金资助,N o.7002031 作者简介:李南(1976年生),男,江苏南京人,中国药科大学硕士生,分子生物学,E2mail:s outh-lee@etang1com
EPC1110电气转换器
EPC1110电气转换器性能介绍： EPC1110电气转换器使用方式，正反作用可方便调换校整，正反作用不必注明，常规型以正作用提凸轮特性（一般调节阀凸轮特性为线性，不必注明，等百分比和非线需特注）。执行机构行用户需100mm或超过100mm行程调节阀配套时，订货需特殊注明）附件：（常规的附件可随产品提供）非常规附件安装联板，运动联板组件是否要，要请提供执行机构型号，气管外径。 EPC1110电气转换器安装尺寸： DN L H D D1 D2 b f n-d 10 115 153 90 60 41 14 3 4-φ14 15 115 153 95 65 46 14 3 4-φ14 20 115 153 105 75 56 16 3 4-φ14 25 125 153 115 85 65 16 3 4-φ14 32 150 176 140 100 76 18 3 4-φ18 40 165 176 150 110 84 18 3 4-φ18 50 190 192 165 125 99 20 3 4-φ18 EPC1110电气转换器产品特点： EPC1110电气转换器是一种新型结构的电气转换单元，它可将不同输入电流信号转换成相对应输出的气动信号。该转换器内部有一个气动功率放大器，可以得到较高输出功率的气动信号到各种气动执行机构， 以提高执行机构的动作速度。 EPC1110电气转换器的用途： 按阀门定位器输出和输入信号的增益符号分为正作用阀门定位器和反作用阀门定位器。正作用阀门定位器的输入信号增加时，输出信号也增加，因此，增益为正。反作用阀门定位器的输入信号增加时，输出信号 减小，因此，增益为负
电转条件
（1）将第4步得到的连接物与300μl感受态细菌混匀旋转1min,转移到电穿孔小槽中电脉冲穿孔。 （2）电穿孔时的参数可选择 2.5kV,0.2cm电击杯,25μFD和200欧姆(BioRad公司的Electroparation Pulser)或用BioRad公司的E.coli Pulser转化。立即冲洗电击杯,先用1ml,然后用2ml室温SOC冲洗细菌,立即于37℃振荡培养(250r/min)1h。 （3）加入10ml 37℃预热的SB(含20μg/ml氨苄青霉素,Amp),立即涂布平板,做100μl,10μl,1μl三种涂布; （4）其余培养物于37℃振荡培养(以下均为300r/min)1h,补加Amp至终浓度为50μg/ml,再于37℃培养1h。 （5）将培养物全部转接于100ml含50μg/ml Amp的SB中,37℃过夜培养。 （5a）制备质粒DNA,插入另一条链的可变区基因。通常先构建轻链库,再构建重链库；回到步骤（1）将第二条链插入已构建的第一链的库中。插入第二条链后,进行步骤（6）,省略步骤（5）和（5a）。 （6）加入辅助噬菌体M13K07 1012pfu;将培养物转入100ml SB(含50μg/ml Amp),37℃振荡培养2h。 （7）加入卡那霉素至70μg/ml,30℃或37℃振荡培养过夜。 （8）4000r/min离心细菌,4℃15min,将上清转移至一个干净的无菌瓶中,加入4％PEG 8,000和3％NaCl,用摇床振荡5min以使其溶解。 （9）冰浴沉淀噬菌体30min。 （10）9000r/min离心(4℃)20min弃上清。在纸巾上吸干10min,尽可能除去PEG。 （11）用2ml TBS/1％BSA重悬,转移入5ml离心管中,14,000r/min离心5min,取上清贮存4℃(长期保存应加入0.02％NaN3)。只有新鲜制备的噬菌体可以用下面的筛选,因为残存的蛋白酶很容易将ScFv从噬菌体表面切下。长期贮存的制备物应重新感染扩增再用于筛选。（12）从离心的细菌中制备噬菌粒DNA,贮存。
电转化方案
一、酵母菌电转化方案: 方案一。 1、负80度取出涂平板。30度培养二天。 2、取平板单菌落接种到10ml YPD培养基的50ml的三角瓶中30度过夜摇培 3、4度3000~4000rpm半分钟离心收获细胞。 4、用20ml TE/LioAC(0.1M/0.1M pH7.5)重悬细胞，并在30度摇床摇培45分钟 5、加0。5ml 1M DTT 再摇15分钟 6、加20ml双蒸水4度3500rpm离心半分钟 第一次沉淀用30ml冰冷的无菌水重悬 第二次沉淀用20ml冰冷的1M 的山梨醇重悬 第三次沉淀用1ml冰冷的1M 的山梨醇重悬 8、每40ul一个转化体系分装 9、转化条件1。5KV 20uF 200Ω 40ul yeast /reaction 100ng DNA/reaction<5ul 10、加150ul 1M山梨醇快速混合酵母和DNA，然后涂在选择培养基上。 方案二、 1、负80度取出涂平板。30度培养二天。 2、取平板单菌落接种到10ml YPSD（加SORBITOL）培养基的50ml的三角瓶中30度过夜摇培 3、4度3000~4000rpm半分钟离心收获细胞。 4、加20ml双蒸水4度3500rpm离心半分钟 5、第一次沉淀用30ml冰冷的无菌水重悬 第二次沉淀用20ml冰冷的1M 的山梨醇重悬 第三次沉淀用1ml冰冷的1M 的山梨醇重悬 6、每40ul一个转化体系分装 7、转化条件1。5KV 20uF 200Ω 40ul yeast /reaction 100ng DNA/reaction<5ul 8、加1000ul 1M山梨醇快速混合酵母和DNA， 9、30度温浴1~2小时，不能摇动。然后涂在选择培养基上。
几种阀门定位器与电气转换器工作原理的介绍(附带结构图)
几种阀门定位器工作原理介绍： 气动阀门定位器（一） 气动阀门定位器是按力平衡原理设计工作的，其工作原理方框见上图所示，它是按力平衡原理设计和工作的。如图所示当通入波纹管的信号压力增加时，使杠杆2绕支点转动，档板靠近喷嘴，喷嘴背压经放大器放大后，送入薄膜执行机构气室，使阀杆向下移动，并带动反馈杆(摆杆)绕支点转动，连接在同一轴上的反馈凸轮(偏心凸轮)也跟着作逆时针方向转动，通过滚轮使杠杆1绕支点转动，并将反馈弹簧拉伸、弹簧对杠杆2的拉力与信号压力作用在波纹管上的力达到力矩平衡时仪表达到平衡状态。此时，一定的信号压力就与
一定的阀门位置相对应。以上作用方式为正作用，若要改变作用方式，只要将凸轮翻转，A向变成B向等，即可。所谓正作用定位器，就是信号压力增加，输出压力亦增加;所谓反作用定位器，就是信号压力增加，输出压力则减少。一台正作用执行机构只要装上反作用定位器，就能实现反作用执行机构的动作;相反，一台反作用执行机构只要装上反作用定位器，就能实现正作用执行机构的动作。 气动阀门定位器（二） 气动阀门定位器是一种将电气信号转换成压力信号的转换装置，以压缩空气或氮气为工作气源来控制工业炉调节阀的开度大小。普遍用于工业炉温度自动控制系统中对气动阀门执行机构的连续控制。 气动阀门定位器是按力平衡原理工作的，实现由输入的4～20mA电流信号控制气动阀门由0～100％的开启度。其工作原理如下图。
当需要增加阀门开启度，计算机控制系统的输出电流信号就会上升，力矩马达①产生电磁场，挡板②受电磁场力远离喷嘴③。喷嘴③和挡板②间距变大，排出放大器④内部的线轴⑤上方气压。受其影响线轴⑤向右边移动，推动挡住底座⑦的阀芯⑨，气压通过底座⑦输入到执行机构⑩。随着执行机构气室⑩内部压力增加，执行机构推杆⑥下降，通过反馈杆⑩把执行机构推杆@的位移变化传达到滑板⑩。这个位移变化又传达到量程④反馈杆，拉动量程弹簧16。当量程弹簧16和力矩马达①的力保持平衡时，挡板②回到原位，减小与喷嘴③间距。随着通过喷嘴③排出空气量的减小，线轴⑤上方气压增加。线轴⑤回到原位，阀芯⑧重新堵住底座⑦，停止气压输入到执行机构⑩。当执行机构⑩的运动停止时，定位器保持稳定状态。 电气阀门定位器工作原理 1.杠杆 2.活塞膜片 3.反馈弹簧 4.杠杆 5.凸轮 6.反馈轴 7.联结 8.传动轴 9.执行机构 10.先导阀滑阀芯 11.先导阀体 12.零点和范围联动机构 13.内部反馈弹簧 14.转换块
信号转换器原理
转换器 开放分类：应用科学建筑材料机电一体化电子 编辑词条分享 ?新知社新浪微博人人网腾讯微博移动说客网易微博开心001天涯MSN ? 1 设备类型 ? 2 转换模式 ? 3 接口类型 ? 4 传输速率 ? 5 网络标准 ? 将一种信号转换成另一种信号的装置。 协议转换器
接口转换器 转换器从原理上可分为协议转换器、接口转换器两大类。从应用上又可以分光纤转换器、光电转换器、视频转换器等等。例如视频转换器就是一种连接电脑和电视的设备，它可以把电脑上的内容转换并显 示在电视机上，让人们可以在电视上学电脑，上网，玩游戏，做商业演示，看股票等等。 典型的转换器常见的转换模式有以下几种： V．35与G.703接口之间的转换； Ethernet（RJ45）与RS232之间的转换； 单模光纤与多模光纤之间的转换； 光纤接口与Ethernet（RJ45）之间的转换； 以太网口与E1的接口转换； USB接口与其他接口之间的转换等等。 转换器典型的接口类型有以太网接口，E1接口、串行接口（RS232）、SC/ST接口、USB接口等。 RJ-45 接口转换器 1．以太网接口 接口标准：IEEE802.3
终端速率：10M/100/1000Mbps 工作模式：全双工、半双工 终端接头：RJ45接口 2．E1接口 网络接口：G.703、G.704、G.823 网络速率：2.048Mbps 网络接头：BNC（75欧姆）等 线路编码：HDB3码 3．串行接口 接口速率：19200bps 接口标准：RS-232 SC/ST接口转换器 4．SC/ST接口 ST接口：10Base-F SC接口：100Base-FX 5．USB接口 USB1.1：12Mbps USB2.0：480Mbps 不同的转换器产品由于转换接口的不同，传输速率也不同，典型接口传输速率如下：
EPC型电气转换器原理及特点
EPC1000型电气转换器原理及特点 ▲概述 随着科学技术的进步,许多高参数、大容量、石化、电力、冶金大型装置配用的过程控制仪表采用电子仪表或计算机，仪表联络信号为统一的4-20mA电流信号，而控制系统中的终端执行元件采用优点独特、性能可靠的气动执行器（气动控制阀），这就提出电流信号和气动信号兼容的课题。本电气转换器已解决了电流模拟量信号（4-20mA）转换成气动模拟量信号（20-100kPa或0.2-1kg/cm2）成为现实。 QZDB型系列电气转换器系工业自动化仪表品种之一，它具有多种输入信号转换、标准输出气动信号和非标准气动信号转换，可供选用。根据使用环境的要求，产品有普通型、本安型以及隔爆型，其产品被广泛用于石油、化工、冶金、电站、轻纺、医药以及食品等工业部分的自控系统中。 ▲ 用途和特点 电气转换器典型的用途： ·电动仪表和气动仪表联络信号间的转换。 ·电动仪表输出信号经I/P转换，以20-100kPa气动信号区控制气动阀门定位器。 ·电动仪表输出信号经I/P转换直接操作气动调节阀的阀门开度。 ▲ 特点 ·设计新颖、先进、合理，目前市场上体积最小，重量最轻的一种产品。结构紧凑，通用化程度高，经不同组合可制成普通型、本安型和隔爆型产品。 ·转换精度高，0.5、1级可供选用，使用可靠性好，MTBF>8000小时。 ·气动功率放大器为低耗气结构，空气消费量少，节约能源，投资回收率高。 ·气路中设有指示汽源、输出压力的小形压力表，具有防腐、防水密封性好的特点。 ·产品调试简单，使用方便。 ▲ 结构与工作原理 结构： 电气转换器由线圈电磁力部件、喷咀板气动元件、气动功率放大器、信号接线端子盒以及安装板、卡箍式管接头等组成。 电气阀门定位器|电气转换器专家常熟市常仪仪表有限公司 ▲ 工作原理 ·电气转换器是基于力平衡工作的，其工作原理如图3所示。
高效电转化率条件的探索_张建琼
第23卷第2期南京师大学报(自然科学版)V o l.23N o.2 2000年JOU RNAL O F NAN J I N G NORM AL UN I V ER S IT Y(N atural Science)2000 高效电转化率条件的探索 张建琼1,张雪萍1,谢维2,单祥年2,林陵1 (11南京铁道医学院微生物免疫学教研室,南京,210009) (21南京铁道医学院生物学教研室,南京,210009) [摘要] 对影响DNA电转化效率的主要因素进行探索.结果表明:在相同的电场强度、电阻和电 容条件下,电脉冲时间的长短对电转化效率有较大影响,电脉冲时间太长或太短均使转化效率降 低;用对数生长早中期的细菌制备感受态细胞,经液氮速冻后储存于-70℃,能获得高转化效率. [关键词] 大肠杆菌;电转化;转化效率 [中图分类号]R392.11; [文献标识码]A; [文章编号]1001-4616(2000)02-0072-04 0 引言 噬菌体抗体库技术已广泛用于许多疾病,尤其是病毒性疾病体液免疫应答的研究,从噬菌体抗体库获得的重组抗体可成为研究、诊断和治疗的有效分子工具.要使目的抗原能从抗体库中筛选出相应的抗体,就得保证抗体库有足够的库容量及库中的抗体片段有足够的多样性,影响这一有效表位多样性的主要因素除了设计优良的PCR引物外,还有细菌的转化效率.目前所用的转化方法首选的是电穿孔法,其转化效率高达1010个转化子 Λg DNA,但如果在培养基中加入抗生素,其转化效率将显著地降低,而氨苄青霉素和四环素是构建抗体库常用的抗菌素.所以目前所报道的抗体库的容量最高为108,平均介于106～107之间[1～3].影响转化效率的因素很多,为了构建优良的噬菌体抗体库,通过优化各个参数,获得高转化效率,为构建高库容量噬菌体抗体库奠定了基础. 1 材料与方法 111 主要仪器 美国B i o2R ad公司电脉冲基因转移仪,美国IEC高速冷冻离心机,美国B eckm an DU270紫外分光光度计. 112 主要试剂及培养基 W izard P lu sM in i p rep s DNA Pu rificati on System为美国P rom ega产品;酵母提取物为英国O xo id产品;蛋白胨为日本制药株式会社产品;四环素、卡那霉素、M O PS为上海生工(Sangon)生物工程公司产品;其余试剂为国产分析纯产品.SOB、SOC、SB培养基自配,无菌10%甘油(用纯水配制). 113 菌株与质粒D NA 大肠杆菌XL12b lue,-70℃保存.pU C18质粒为本室保存,经W izard P lu s M in i p rep s 收稿日期:1999-09-05 基金项目:江苏省应用基础基金资助(BJ97070) 作者简介:张建琼,女,1960—,博士,南京铁道医学院副教授,从事分子病毒学与免疫学教学与研究.