草莓炭疽病病原菌的鉴定及防治药剂筛选

浮选药剂配制方法

浮选药剂在使用前进行合理的配制，对提高药效有重要作用。配制方法主要根据药剂的性质决定，常见的有下列几种方法：一、配成水溶液大多数溶于水的药剂都采取此法，一般配成5％～10％或者更稀一些的水溶液添加。溶液不宜配得太稀，太稀体积过大；但也不宜太浓，浓度太大对用量少的药剂很难正确控制用量，也不便输送。二、加溶剂配制有些不溶或者难溶于水的药剂，可将其溶于特殊的溶剂中再添加。例如，把油酸溶入煤油中再添加，可以增强它在矿浆中的弥散性，还可以加强油酸的捕收作用；白药可以溶于邻甲苯胺中再使用。三、乳化法脂肪酸类捕收剂、柴油经过乳化，可以增加其在矿浆中的弥散性，提高功效。常用的乳化法是：强烈机械搅拌、通入蒸汽或用超声波，若加入乳化剂效果更好。如妥尔油与柴油在水中可加乳化剂——烷基芳基磺酸酯。许多表面活性物质都可以作为乳化剂。四、皂化脂肪酸类捕收剂常用此法配制。如铁矿石浮选时，常采用氧化石蜡皂与妥尔油作捕收剂。为提高其水溶性，可配入10％左右的碳酸钠，使妥尔油皂化，并用热水加温成热的皂液添加。再如油酸，其水溶性差，但与碳酸钠作用生成油酸钠后，水溶性变好。五、配成悬浊液或乳浊液如石灰可加水磨成石灰乳添加。六、酸化在使用阳离子捕收剂(胺类)时，由于水溶性差，必须加盐酸或醋酸作用配成胺盐，才能溶于水中使用。七、原液添加有些药剂在水中的溶解度很小，难以配成真溶液或稳定的乳浊液，如松醇油、甲酚黑药、煤油等，可不必配成溶液，而是直接将原液按用量添加。水溶性药剂的配制方法，一般是先把药剂在容器内用少量水溶解，待溶解完后，

再逐渐加水配成所要求的浓度。在生产现场，为了配制方便，可在配药槽上刻上标示容积的刻度尺，把称好的已知药量的药剂放入槽内，加水至刻度标示的与浓度相符的位置，搅拌至完全溶解，即可使用。

苯醚甲环唑使用技术手册

苯醚甲环唑使用技术手册！苯醚甲环唑是有机杂环类内吸治疗性广谱低毒杀菌剂，又名世高、贝迪、双亮、优乐等。主要剂型有92%、95%、97%原药，10%、15%、20%、30%、37%、60%水分散粒剂，10%、20%、25%、30%微乳剂，5%、10%、20%、25%水乳剂，3%、30克/升悬浮种衣剂，25%、250克/升、30%乳油，3%、10%、25%、30%、40%悬浮剂，10%、12%、30%可湿性粉剂。苯醚甲环唑的特点： 1.内吸传导，杀菌谱广苯醚甲环唑属三唑类杀菌剂，是一种高效、安全、低毒、广谱性杀菌剂，可被植物内吸，渗透作用强，施药后2小时内，即被作物吸收，并有向上传导的特性，可使新生的幼叶、花、果免受病菌为害。对蔬菜没有抑制生长作用。 2.耐雨冲刷、药效持久黏着在叶面的药剂耐雨水冲刷，从叶片挥发极少，即使在高温条件下也表现较持久的杀菌活性，比一般杀菌剂持效期长3~4天。 3.剂型先进，作物安全水分散粒剂投入水中可迅速崩解分散，形成高悬浮分散体系，无粉尘影响，对使用者及环境安全。不含有机溶剂，对推荐作物安全。

4.苯醚甲环唑可与丙环唑、嘧菌酯、多菌灵、甲基硫菌灵、咯菌腈、醚菌酯、咪鲜胺、氟环唑、精甲霜灵、已唑醇、代森锰锌、抑霉唑、霜霉威盐酸盐、丙森锌、吡唑醚菌酯、多抗霉素、中生菌素、井冈霉素、噻霉酮、噻呋酰胺、戊唑醇、嘧啶核苷类抗生素、福美双、吡虫啉、溴菌腈、噻虫嗪等复配。不同作物病害上的应用：（1）果树上的使用防治香蕉叶斑病、黑星病，叶片发病初期，用25%苯醚甲环唑乳油2000~3000倍液喷雾，用足够的稀释药液全株叶部喷雾，每隔10天再喷1次。防治梨黑星病，发病初期，用10%苯醚甲环唑水分散颗粒剂6000~7000倍液喷雾。发病严重时可提高浓度，建议用10%苯醚甲环唑水分散颗粒剂3000~5000倍液喷雾，间隔7~14天，连续喷药2~3次。防治梨果实轮纹病，用25%苯醚甲环唑乳油2000~3000倍液，效果显著。防治苹果斑点落叶病，发病初期，用10%苯醚甲环唑水分散颗粒剂2500~3000倍液或10%苯醚甲环唑水分散粒剂33~40克/100升水喷雾。发病严重时可提高浓度，建议用10%苯醚甲环唑水分散颗粒剂1500~2000倍液喷雾，间隔7~14天，连续喷药2~3次。防治苹果轮纹病，用10%苯醚甲环唑水分散粒剂2000~2500倍液

马铃薯药剂拌种最佳配方的筛选

马铃薯药剂拌种试验效果分析高智杰1陈颖2 （1．黑龙江省克山农场科技园区，黑龙江克山 161621） 2。黑龙江绥化农垦晨环生物科技有限公司，黑龙江绥化）摘要：经过2007-2008年田间药效试验，筛选出64%杀毒矾 Wp0.5㎏+农用链霉素30 g拌马铃薯种薯1000kg 药剂配方，具有促苗早发、防病增产作用，增产2.62%。关键词：马铃薯；杀菌剂拌种；产量 Field experiment Effect Analysis of Seed-dressing from Potato GAO Zhijie1 Chenying2 （1. Agr icultur al Science -Technology district of KeShan Farm, Heilongjiang province, keshan, Heilongjiang 161621, China; 2. Suihua agricultural settlement C henhuan biological Science Technology CO.LD ,suihua, Heilongjiang 152000, C hina） Abstract：According this field experiment from 2007 to 2008, the result indicates that the bactericides of 64% oxadixyl-mancozeb wp 0.5kg+ agricultural streptomycin 30g for seed dressing 1000kg seed potatoes, it can promote seedling growth, control potato diseases and increase potato yield; the yield raises 2.62 per cent. Key Words：potato; bactericide seed dressing; yield 1.材料与方法 1.1供试药剂 A. 72%硫酸链霉素可溶性粉剂华北制药集团制剂有限公司生产；江苏宝灵化工生产； B. 58%甲霜灵锰锌W P 日本曹达公司生产； C. 50%多菌灵 W P D. 64%杀毒矾WP 先正达公司生产； 1.2供试作物：马铃薯，品种（东农303），保苗7.4万株/hm2。 1.3试验地基本情况：试验区设在克山农场马铃薯试验区内，土壤类型为淋溶黑土，土壤有机质含量5.3%，PH值6.6；马铃薯试验区前作大豆，秋整地，春耢地，春起垅，春施肥；施肥量：亩施纯量20kg，N：P：K=2：1.5：1。 1.4试验处理： (1) 58%甲霜灵锰锌Wp0.5kg+50%多菌灵Wp1kg+滑石粉50kg； (2) 58%甲霜灵锰锌Wp0.5kg+农用链霉素30g +滑石粉50kg； (3) 64%杀毒矾 Wp0.5㎏+50%多菌灵Wp1kg； (4) 64%杀毒矾 Wp0.5㎏+农用链霉素30 g； (5) 空白对照 (CK)；拌种薯量均为1000kg。 1.5试验设计：试验设5个处理，3次重复，随机区组法排列，小区行长5m，行距0.8m，3行区，小区面积12㎡，总面积288㎡。 1.6拌种时间和方法：在播种前1天种薯切块，纵切；薯块大小在40g左右；将药剂配成母液，加水稀释，边喷洒边搅拌，使薯块着药均匀，摊开阴干装袋后等待播种。 1.7播种方法：5月10日当10cm耕层处地温稳定通过10℃时开始人工播种，人工开沟，等距点播，株距17cm、播深8cm，人工覆土踩实，机械镇压。 1.8田间管理：马铃薯在整个生育期中耕培土3次，人工除草6遍,做到试验区全田无大草。8月3日马铃薯试验区喷灌1次；喷药预防马铃薯晚疫病5次，每次间隔7-10天，喷洒药剂依次为58%甲霜灵锰锌WP、1%碘制剂、腐殖酸有机液肥、687.5g/L银法利悬浮剂(SC)2次。 1.9田间调查：生育期调查；病害调查,调查病害发病率、病情指数，计算防效；马铃薯收获前实收测产、每小区收中间行，考种并进行产量分析。 2．试验结果与分析

_大豆根瘤菌剂载体的选择及最佳施用浓度筛选

第33卷第2期2014年 4月大豆科学SOYBEAN SCIENCE Vol．33No．2Apr． 2014 大豆根瘤菌剂载体的选择及最佳施用浓度筛选刘庆莉1，王金生1，刘丽君1，林蔚刚1，王红蕾2，张俐俐3，吴俊江 1 （1．黑龙江省农业科学院大豆研究所，黑龙江哈尔滨150086；2．黑龙江省农业科学院信息中心，黑龙江哈尔滨150086；3．黑龙江省农业科学院，黑龙江哈尔滨150086）摘要：为筛选出适宜根瘤菌吸附且能促进大豆生长、提高产量的优质载体，并且在优质载体的条件下，筛选出大豆根瘤菌液的最佳使用浓度，通过3种载体吸附不同浓度根瘤菌液拌种大豆盆栽播种后，对大豆的生物量、结瘤及产量的对比发现：不同载体介入、大豆接入根瘤菌后均对大豆的生物量及结瘤产生一定的促进作用。根瘤菌以草炭和蛭石为载体，更有利于促使大豆植株生长，积累更多的干物质；草炭的促进结瘤作用持续效果时间较长，液体的持续效果时间最短，而蛭石的持续效果时间相对比较居中；以草炭和蛭石作为根瘤菌载体，低浓度的根瘤菌液接入更能发挥其提高产量的作用，以液体作为根瘤菌载体，根瘤菌接入浓度较高才能发挥其提高产量的作用。结合生产成本来看，草炭土更适宜作为自主研发根瘤菌剂的载体，同时推荐根瘤菌使用浓度为1．4?108 菌细胞 ·mL －1。关键词：大豆根瘤菌；结瘤；载体中图分类号：S565．1文献标识码：A 文章编号：1000- 9841（2014）02-0207-04收稿日期：2013-10-11基金项目：国家“十二五”科技支撑计划（2012BAD14B06）；现代农业产业技术体系（CAＲS-004）；黑龙江省自然科学基金（C201104）；哈尔滨市科技创新人才研究专项资金（2013ＲFXYJ043）。第一作者简介：刘庆莉（1971-），女，技师，主要从事大豆耕作与栽培研究。E-mail ：liuqingli1971@126．com 。通讯作者：吴俊江（1970-），男，博士，研究员，主要从事大豆耕作与栽培研究。E-mail ：nkywujj@163．com 。Chosen of Soybean Ｒhizobia Carrier and Screening of the Best Concentration LIU Qing-li 1，WANG Jin-sheng 1，LIU Li-jun 1，LIN Wei-gang 1，WANG Hong-lei 2，ZHANG Li-li 3，WU Jun-jiang 1 （1．Soybean Ｒesearch Institute ，Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences ，Harbin 150086，China ；2．Information Center of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences ，Harbin 150086，China ；3．Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences ，Harbin 150086，China ） Abstract ：In order to screen the carrier that was more appropriate for the absorption of rhizobia ，improving yield and quality of inoculated soybean ，and screen the best soybean rhizobia bacterial concentration at levels of quality carrier ，three carriers ab-sorbed different soybean rhizobia bacterial concentration with seed dressing were performed according to the biomass ，nodular rate and yields of soybean plant by soil pot experiments．The results showed that different carriers and inoculating soybean rhi-zobia could improve the biomass and nodular rate of soybean plant．Peat and vermiculite were used as carriers of rhizobia could remarkably promote the growth of soybean plant and enhance dry matter accumulation ；thus the lasting effect of nodular was the longest ，followed by vermiculite and liquid．Low level bacterial concentration could remarkably increased soybean yield and quality with peat and vermiculite as carriers ，however the opposite when used liquid as carriers．In conclusion ，in view of the cost ，peat was more appropriate for soybean rhizobia ，and the best bacterial concentration was 1．4?108 cells ·mL －1．Key words ：Soybean rhizobia ；Nodulation ；Carrier 施用根瘤菌菌剂能促进大豆结瘤，有效提高豆科植物的产量，减少生产中的化肥使用量，降低生产成本，而且可以提高土壤肥力，同时，由于根瘤菌剂耐污染能力强［1］，还可以减少因长期使用化肥对环境的破坏［2-3］，对无公害大豆生产以及降低农民投人，保护环境等具有十分重要的作用［4-5］。因此引起了人们的极大兴趣和广泛关注，已成为豆科植物增产的主要研究方向。近年来随着新技术特别是分子生物学技术的发展，各种高效菌种不断被选育或改造，制备菌剂的工艺、保藏菌剂的方法也不断完善和发展，配制成的菌剂的效果越来越好，在农业生产中得到了广泛利用。与此同时，诸如发酵水平低、保质期短和技术不成熟、质量不过关等问题限制了根瘤菌剂的产业化和大面积推广应用。其中，菌种质量的高低一直是影响其应用效果的一个突出问题；载体也是大豆根瘤菌肥料质量控制的一个关键因素［6］。作为根瘤菌的载体很多，如草炭、蛭石、珍珠岩、煤炭、草炭、膨润土和高岭土等。草炭、蛭石由于其营养与pH 适中，表面积比较大和吸附性好，有利于根瘤菌的存活及菌剂保存，是理想的载体［7-9］。另外，草炭和蛭石等资源丰富，价格低廉，适合于在根瘤菌剂生产中应用推广，已成为当代根瘤菌类肥料的主要类型。本文的研究目的是筛选出适宜根瘤菌吸附且接种大豆能促进大豆生长、提高产量的优质载体，

草莓炭疽病与根腐病

草莓炭疽病与根腐病炭疽病和根腐病，把这两种病害放在一起说也是因为它们有不少共同之处，它们危害草莓主要有两个原因，一个是苗子本身带病菌，这就需要在选苗的时候加强注意，不要让病苗进棚，另一个原因是土壤里面带病菌，栽种过程中，很容易给草莓造成伤口，病菌随着伤口侵染，一段时间后病害发生。那它们都有什么表现呢？下面来通过图片，更好地理解以下这两种病害。炭疽病：炭疽病是高温高湿病害，八九月份时发生比较严重，随着气温降低病害发生减少，主要的危害部位有匍匐茎、叶柄、叶片、托叶，出现黑色纺锤型斑点，根系染病由外向内变成褐色，染病后的明显特征是草莓株叶受害可造成局部病斑和全株萎蔫枯死。炭疽病的时候就经常在匍匐茎处入手，炭疽病一般茎会发红，上面有黑色斑点，叶片上也会有表现，出现黑色纺锤型斑点。根腐病：根腐病是低温高湿病害，定植后至初冬均可发生，呈矮化萎缩状，下部老叶叶缘变紫红色或紫褐色，逐渐向上扩展，全株萎蔫或枯死。根系比健康植株根系短小，颜色灰暗，地下部不定根大量死亡，新生根受到病原菌的侵害，生长稀疏。炭疽病根腐病区别

相同之处：炭疽病与红中柱根腐病都是久雨初晴后叶尖突然凋萎，不久呈青枯状，引起全株迅速枯死。不同之处：慢性根腐病下部老叶叶缘变紫红色或紫褐色，而炭疽病匍匐茎、叶柄、叶片染病，初始产生直径3-7毫米的黑色纺锤形或椭圆形溃疡状病斑。根腐病的根部是从内向外腐烂，根部溃烂，发黑，易拔起。炭疽病从外向内侵染，根系是正常，难拔起。防治方法田间技术措施： 1、实行轮作倒茬，一定要选无病地育苗，草莓田要实行4年以上的轮作。 2. 定植时一定要选用不带病的苗子，而且尽量避免产生伤口。 3、采用高畦或起垄栽培，尽可能覆盖地膜。 4、加强管理，雨后及时排水，严禁大水漫灌。 5、清洁田园，发现病株及时清除，带出田外销毁。 6、进行土壤消毒，在草莓采收后，将地里的草莓植株全部挖除干净后施入大量有机肥，深翻土壤灌足水后，在炎热高温季节，地面用透明塑料薄膜覆盖20-30天，利用太阳能使地湿升到50℃左右，杀灭病菌。化学防治手段：根腐病：

利用不同的方法筛选和鉴定转化子

生物工程上游技术实验综合实验设计利用不同的方法筛选和鉴定转化子生命科学学院生工121 指导老师: 田长恩、周玉萍摘要本次实验我们小组通过含Amp的培养基初步筛选出转化子、菌落直接PCR、摇菌培养观察细菌表达形态等一系列实验方法，从6个转化子中筛选出了2个目的重组子.，从而达到实

验的基本目的，基本掌握了转基因生物筛选鉴定的基本方法。关键词筛选、菌落直接PCR、摇菌培养、电泳引言在质粒载体上进行克隆时，由于重组质粒转化的大肠杆菌的量少，连接产物没有也不可能在经过分离纯化而获得纯的重组质粒，连接产物中混有载体自连而成的空载体、载体与目的片段连接而成的目的重组质粒和载体与非目的片段连接而成的非目的重组质粒。同时，宿主的转化效率极低，因此，绝大部分宿主是没有被转化的，所以很有必要对转化产物进行筛选与鉴定。首先，通过抗生素抗性从转化后代中筛选出转化子。然后，通过菌落直接PCR从转化子中筛选出候选转基因生物。最后，摇菌培养观察菌株表达形态。通过抗生素抗性筛选，从转化后代中筛选出转化子。因为非转化菌没有质粒而缺乏相应的抗生素抗性，所以可将转化产物涂布在含有相应抗生素的培养基上筛选，只有含有相应抗性的抗生素抗性基因才能生长繁殖形成菌落。通过菌落直接PCR从转化子中筛选出转基因生物，扩增出特殊目的基因片段，判断所得转化子是否为重组子。但因为PCR技术的高灵敏性，往往会产生假阳性结果，所以有必要进一步进行鉴定.。从候选重组子中进行摇菌培养关注菌株表达形态，若出现荧光蛋白则说明菌株成功转化并表达了GFP荧光蛋白。三、使用仪器、材料 1、材料：实验九准备好的菌株。 2、实验仪器及设备:PCR仪、恒温摇床、台式高速离心机、恒温水浴锅、琼脂糖凝胶电泳装置、电热恒温培养箱、电泳仪、超净工作台、微量移液抢、1.5mL离心管等。 3、主要试剂：10×PCR buffer 、dNTP mixture 、前向引物(P1) 、反向引物r(P2) 、 rTaq 酶、灭菌蒸馏水、LB液体培养基：四、实验步骤 1、转化子筛选：在实验九含有Amp的筛选培养基中长出的菌落中挑选出6个白色单菌落，并做好标记，这6个单菌落即为转化子。 2、菌落直接PCR：用无菌牙签把6个白色单菌落，先在编好号的6支PCR反应管中的底部分别涂擦，然后在PCR管中配制60μL反应体系.并按每管9μL分装好反应体系。反应体系如下: DNA template buffer （用牙签挑取菌落在PCR管中涂抹） 10×PCR buffer 6μL

石油降解菌的分离

从环境样品中分离筛选石油降解菌的方案

引言随着经济技术的迅速发展，石油日渐成为我过的主要能源，且需求量日益增大。研究表明，石油生产和运输环节会对土壤造成严重污染，且污染面积不断扩大。目前，我国石油行业每年产生的含油污泥多大八十万吨。由于石油的粘度大、粘滞性强，会再短时间内形成小范围的高浓度污染，长期的石油污染还会影响土壤的通透性，减少土壤肥力，阻碍植物生长。同时，石油中所含的多环芳香烃具有“三致”效应，一些挥发组分能引起人体麻醉、窒息和化学性肺炎等疾病。因此，石油污染对土壤生态系统的平衡和人体健康都有很大的危害。目前，针对石油污染治理的方法主要包括：物理方法、化学方法以及生物修复法，但物理方法修复费用较高，耗材较多：化学方法会使用大量化学淋洗剂，很容易造成二次污染。相较而言，微生物修复技术由于生产费用低、不产生二次污染等特点而被视为一项最具有应用前景的修复技术。而且随着分子生物学的发展，无论是DNA文库的建立，还是多态性分析方法的进步，都为污染物的生物修复提供了全新的技术支持。既然生物修复法有诸多优点，那么就应该充分发挥其特性。本文则是着眼于环境样品，分离筛选其中的石油降解菌，以扩大培养进行更大规模的石油降解。摘要在长期被石油污染的土壤中，微生物可逐渐改变自身的代谢条件以适应环境。即以石油烃为碳源进行生长、繁殖，同时将石油烃降解。因此在这种土壤中存在着可降解石油烃的微生物，但石油烃降解菌的筛选、分离是生物法处理石油污染的关键。从这个角度考虑，以长期石油污染的土壤中微生物为菌源，从中筛选、分离出高效的石油烃降解菌。要降解哪里的石油就用哪里的土壤培养石油降解菌。目前，国内对极端条件下石油降解微生物研究较少，尤其是对低温、耐盐的石油降解菌，中国北方的大部分湿地，盐碱程度比较高，成年气温较低。无论是来源于海上还是来源于石油化工的污染都比较严重。本文针对大连开发区因石油泄露而被污染的白石湾，就地选取材料进行石油降解菌的筛选以及分离研究。

克隆的筛选和快速鉴定

实验六克隆的筛选和快速鉴定一、目的掌握快速细胞破碎法测定大小不等的众多的质粒DNA；和菌落PCR快速鉴定克隆。二、原理在这个实验方法中，只需配制一种细胞缓冲液（它可以在室温下保存，长期使用）。利用破碎细胞缓冲液中的阴离子去污剂SDS在37℃溶解膜蛋白，使细胞破裂，并解聚核蛋白，SDS还能与蛋白质结合形成复合物，使得蛋白质沉淀。利用EDTA螯合金属离子，防止破碎细胞的脱氧核糖核酸酶对DNA的降解。然后高速离心，去除细胞碎片核大部分的染色体DNA和RNA蛋白，将含有质粒DNA的上清夜直接进行点样电泳和分离。在琼脂糖凝胶上分离开的个组分中，有染色体DNA，不同大小的质粒DNA和RNA，它们都可以经肉眼观察或拍照显示。或者用设计好的引物，做菌落PCR快速鉴定克隆。三、试剂与仪器（一）试剂 1．破碎细胞缓冲液50mmol/L Tris-HCl (pH6.8)、1% SDS、2mmol/L EDTA、400mmol/L 蔗糖和0.01%溴酚蓝。配制方法：1mol/L Tris-HCl (pH6.8) 10ml 20% SDS 10ml 250mmol/L EDTA 1.6ml 蔗糖27.2g 1.2%溴酚蓝 1.67ml 加ddH2O至200ml 2．10mg/ml 溴乙啶 3．TBE电泳缓冲液（5×） 4．Taq DNA聚合酶(5U/μl) 5．10×反应缓冲液（含25mmol MgCl2） 6．dNTP 7．点样缓冲液Loading buffer（10×）：0.25%溴酚蓝，40%甘油。（二）仪器 1．电泳仪2．1.5ml 离心管3．Tip 4．培养皿5．PCR扩增仪6．台式离心机 7．紫外分析仪8．恒温水浴四、操作步骤（一）快速细胞破碎法测定 1．取1.5ml离心管编号码，每管加入50μl破碎细胞缓冲液。 2 3．待转化的细菌菌落长到2mm时

根瘤菌及其应用

根瘤菌与豆科植物及其应用摘要：自贝叶林克1888年首次从豆科植物根瘤中分离获得根瘤菌以来，国内外的许多学者都为揭开这一大自然的奥秘进行着孜孜不倦的研究，成为生命科学最为活跃的领域之一。人们从生物学，生态学，生理生化，分类和遗传等方面对根瘤菌进行了广泛研究，在根瘤菌和根瘤的形态结构，固氮酶的结构和功能，固氮机理和作用调件，根瘤菌在细菌分类学中的地位直到固氮基因，结瘤基因，固氮生态等应用方面都有着较快发展，20世纪90年代共生固氮体系已进入分子水平，研究转入根瘤菌与宿主豆目植物植物的相互识别和信息传递以及根瘤菌群体感应等方面。关键词：根瘤菌生物固氮根瘤菌应用一．根瘤菌的生物学特征根瘤菌：根瘤菌主要指与豆类作物根部共生形成根瘤并能固氮的细菌，一般指根瘤菌属和慢生根瘤菌属；两属都属于根瘤菌目。根瘤菌侵入寄主根内，刺激根部皮层和中柱鞘的某些细胞，引起这些细胞的强烈和生长，使根的局部膨大形成根瘤；根瘤菌在根内定居，植物供给根瘤菌以矿物养料和能源，根瘤菌固定大气中游离氮气，为植物提供氮素养料，两者在拮抗寄生关系中处于均衡状态而表现共生现象。根瘤菌的形态特征：根瘤菌是短杆状细菌，因生活环境和发育阶段的不同，在形态上有显著变化.根瘤菌在固体培养基上和土壤中呈杆状，端生或周生鞭毛能运动，革兰氏染色阴性，无芽孢，培养较久

菌体粗大，染色不均。生存习性：根瘤菌与植物的共生体系具有很强的固氮能力。已知全世界豆科植物近两万种。根瘤菌是通过豆科植物根毛、侧根杈口(如花生)或其他部位侵入，形成侵入线，进到根的皮层，刺激宿主皮层细胞分裂，形成根瘤，根瘤菌从侵入线进到根瘤细胞，继续繁殖，根瘤中含有根瘤菌的细胞群构成含菌组织。根瘤菌进入这些宿主细胞后被一层膜套包围，有些菌在膜套内能继续繁殖，大量增加根瘤内的根瘤菌数，以后停止增殖，成为成熟的类菌体；宿主细胞与根瘤菌共同合成豆血红蛋白，分布在膜套内外，作为氧的载体，调节膜套内外的氧量。类菌体执行固氮功能，将分子氮还原成NH3，分泌至根瘤细胞内，并合成酰胺类或酰尿类化合物，输出根瘤，由根的传导组织运输至宿主地上部分供利用。与宿主的共生关系是宿主为根瘤菌提供良好的居住环境、碳源和能源以及其他必需营养，而根瘤菌则为宿主提供氮素营养。二．根瘤菌与豆科植物根瘤菌(root nodule bacteria)是与豆科植物共生，形成根瘤并固定空气中的氮气供植物营养的一类杆状细菌。这种共生体系具有很强的固氮能力。已知全世界豆科植物近两万种。根瘤菌是通过豆科植物根毛、侧根杈口(如花生)或其他部位侵入，形成侵入线，进到根的皮层，刺激宿主皮层细胞分裂，形成根瘤，根瘤菌从侵入线进到根

石油烃类的微生物降解研究

石油烃类的微生物降解研究石油作为重要能源之一已被世界各国广泛使用，随之而来的石油烃污染已经对人类生存的土壤及水体环境造成了严重的危害，微生物降解是一种处理石油烃污染的理想方法。综述了降解菌种类和不同烃类的微生物代谢途径，分析了包括温度、营养物、氧和pH值等环境因素对石油烃降解的影响，为进一步的研究应用提供参考依据。随着工业和经济的发展，人类对能源的需求日渐增多，促进了石油工业的飞速发展；在石油生产、贮运、炼制加工及使用过程中，不可避免地会有石油烃类的溢出和排放，造成土壤及水体的石油污染。据统计全球每年倾注到海洋的石油总量在200~1000万t之间。辽宁省环境中心监测站的化验结果显示，在辽河油田的重度污染区内，土壤中的含油量已达到10 000 mg／kg以上，是临界值(200 mg／kg)的50多倍，严重影响了油田附近的生态环境。石油烃类物质引起的环境污染越来越引起人们的关注。利用物理、化学方法处理石油烃可以得到较受到了限制翻。生物处理方法是近年来发展起来的，具有处理效果好、费用低、对环境影响小、无二次污染及应用范围广等优点，是迄今为止处理石油烃污染比较好的一种方法。 1.降解石油烃类的微生物种类国外在20世纪40年代就开展了细菌降解石油烃的研究，我国这方面的研究始于20世纪70年代末期。研究表明，在土壤和水体环境中存在着大量能够降解石油烃的微生物，主要是细菌和真菌；细菌在海洋生态系统的石油烃类降解中占主导地位，而真菌则是淡水和陆地生态系统中更为重要的修复因子。石油烃降解菌和藻类见表1。

大量研究表明，当菌群处于石油污染环境中时，利用烃类化合物的微生物数量急剧增长，尤其是含降解质粒的微生物。Atlas报道在正常环境下降解菌一般只占微生物群落的1％，而当环境受到石油污染时，降解菌比例可提高到10％。含质粒细菌在石油烃污染环境中出现的频率和数量LL-t~污染环境高，说明质粒在石油烃的降解中可能起着重要作用。降解质粒的存在为降解工程菌的构建提供了可能。 2.石油烃类的微生物代谢途径 2.1 直链烷烃通常认为饱和烃在微生物作用下，直链烷烃首先被氧化成醇，醇在脱氢酶的作用下被氧化为相应的醛，然后通过醛脱氢酶的作用氧化成脂肪酸；氧化途径有单末端氧化、双末端氧化和次末端氧化[7]。在转化为相应的脂肪酸后，一种转化形式为直接经历随后的／3一氧化序列，即形成羧基并脱落2个碳原子；另一种转化形式为脂肪酸先经历60一羟基化形成∞一羟基脂肪酸，然后在非专一羟基酶的参与下被氧化为二羧基酸，最后再经历一氧化序列

大棚草莓主要病虫害及绿色防控技术

大棚草莓主要病虫害及绿色防控技术文/xx 一、草莓主要病虫害种类 1、草莓主要病害危害草莓的主要病害有黄萎病、炭疽病、轮斑病、蛇眼病、角斑病、褐斑病、灰霉病、白粉病等，其中前7种病害主要发生在草莓育苗期或移栽定植初期，而灰霉病、白粉病是草莓生产中后期的重要病害。 2、草莓主要虫害危害草莓的主要害虫有：斜纹夜蛾、红蜘蛛、棕榈蓟马、蚜虫以及地老虎、蝼蛄、蛴螬等地下害虫等。二、草莓病虫绿色防控技术 1、农业防治农业防治是利用农业生产技术措施，增强植株对外界不利因素的抗逆性，同时恶化有害生物生存环境，避免或减轻病虫蔓延和为害，其内容包括。 ①选择健壮母株：近几年来基本改变了以生产苗就地繁育苗的习惯，莓农基本上采用了上年越冬的健壮苗和脱毒苗繁育，大大地减少了植株带病，提高了植株抗性，降低了病虫危害机率，提高了草莓苗的繁育系数。 ②异地育苗：发挥山区优势，采用异地育苗方式，不仅可以与生产园地隔离，减少病虫的传播危害，还能利用山区的昼夜温差，加速莓苗繁育，促进草莓花芽提早分化，争夺草莓生产季节，使草莓苗提早移植，提早开花结果。

③清洁xx：结合农事操作，及时人工剥除植株上的病、残、老叶，投入残叶收集箱内，集中处理，减少病虫的蔓延，增加通风透光条件。 ④秧苗假植：通过秧苗假植，植株健壮，根系发达，并提倡营养钵育苗，减少根系伤害，移栽后植株在近期内恢复生长，抗逆性增强。 ⑤加强管理：高畦深沟，合理密植，适时排灌，防止积水。防止土壤过干过湿；适当增施氮肥和钾肥，施用充分腐熟的有机肥或草木灰，调节土壤pH值。对于红颊、章姬等品种，采用搭棚避雨育苗，或夏季高温季节育苗地遮盖遮阳网，可以减轻炭疽病等病害发生，并能促进莓苗生长。 ⑥合理轮作：实行水旱轮作。避免连作重茬或与茄科作物轮作。 2、土壤消毒在长期连作的条件下，土壤消毒是一项防治土传病害、地下害虫的重要措施。既可防治病虫与杂草危害，又能促进土壤中的元素分解，解决以往草莓与蔬菜不能轮作问题，还能促进草莓植株生长，增强植株抗逆性，提高草莓前期产量和品质，增加效益。（1）石灰氮土壤消毒方法： ①宜选择夏秋高温季节，大棚蔬菜收茬清园后，结合土壤翻耕、基肥使用、高温闷棚消毒进行，宜在播种定植前20天以上进行。②在农家肥等有机肥施用后，全田每亩撒施石灰氮30～50公斤，随后深耕土壤，灌水保持土壤含水量70%以上，用薄膜覆盖畦面，密闭大棚增温。③一般10天左右后消毒完成，然后揭膜通风透气，翻耕土壤整地，晾晒7天以上方可播种或定植作物。石灰氮土壤消毒的注意事项：

石油烃降解菌的研究【文献综述】

文献综述食品科学与工程石油烃降解菌的研究 [摘要]石油烃降解菌，是一种能在油水表面上生长而降解石油的微生物，因土壤和近海中含有丰富的N、P等营养原料，所以在近海和土壤中的石油烃降解菌的密集度较高，然而，由于远海中会缺乏N、P等营养物质，所以石油降解菌的繁殖受到一定的制约。当海水一旦受到石油的污染后，降解菌就不能很快消除污染物，所以培养适应能力和降解率高的石油降解菌是解决石油污染的主要方法。 [关键词]石油污染；石油烃降解菌；石油烃（TPH），微生物作为现代工业的关键燃料和原料，石油及其加工品广泛应用在生产和生活的各个领域，包括工业、军事、交通等各行业，但是随着石油工业的快速发展,石油同时也成为海洋环境的主要污染物.据初步统计,由于各种原因,全世界每年有约1.0×107t的石油进入海洋环境中,我国每年排入海洋的石油达1.15×105t[1]。由于工艺水平的限制和处理技术的落后，大量含石油类的废水、废渣不可避免的被排入到生态环境中，严重了影响整个生态系统，尤其是土壤和海洋系统。虽然石油在人类社会发展提供有力的能源来源，但伴随带来的环境污染问题也日益加剧。土壤，是人类赖以生存的重要自然资源之一，要对受石油污染土壤进行完整的治理，并使它在短时间内达到可耕作的标准水平，对于保护生态环境、实现农业和工业的可持续发展具有非常重要的意义。在污染土壤的各种治理的方法中，微生物修复法对环境破坏性小而且消费低而受到人们的重视，近年来的发展尤为迅速，在一定程度上为污染土壤的修复带来技术上的更新，也为解决石油污染问题带来新的希冀。但是，从污染性质来看，即使油井关闭后，其对环境的影响仍会持续相当长的时间[2]。这些都引起了社会各界的普遍关注,近年来，从中央到地方各大主要媒体对这一问题均作了大量专题报道[3]。一、土壤石油污染的来源石油污染,一般指原油的初级加工产品(包括汽油、柴油等)以及各类石油的分解产物所造成的污染。在石油的开采、加工和使用的过程中，造成的石油溢出和泄漏，对环境（空气、土壤、海洋等）产生极大的负面影响。而土壤是作为物质流动和能量循环的重要环境，常常是污染物迁移、停留和积累的最终承受者。石油污染物主要是通过五种方式进入到土壤中：⑴原油的泄漏和溢油意外引起的落地原油污染；⑵含油的矿渣、污泥和废物的堆放，导致石油向土壤渗透并向四周扩散；⑶使用含油污水灌溉农田；⑷汽车尾气的排放所产生的气态石油类污染物渗入到土壤中；⑸药剂污染，即作为各种杀虫剂、防腐剂的溶剂和乳化剂等的石油类物质随药剂使用而进入到土壤中。在这些因素中，前三个因素是引起土壤石油污染最主要的原因，造成污染的面积

信息检索信息搜索、鉴别和筛选

信息检索信息搜索、鉴别和筛选一提到网络搜索，大家马上会想到谷歌和百度。当然，一遇到问题人们可能最先想到的就是这两大搜索引擎。但是呢，好的信息搜索并不只有这两个，每一种搜索引擎都有各自的利弊，选不对搜索引擎，就像选了不合脚的鞋一样，能走路，但艰辛痛苦，也跑不快走不远。使用搜索引擎首先要了解各种搜索引擎特点，否则你可能浪费大量时间。这次搜索，你应该使用百度还是Yahoo？Google还是百度？分析你的需求，选根据需求找拥有相应功能优势的搜索引擎。这里介绍一些： 1.方向着手（1）从行业入手查找，比较好用的是“百度产品大全”（点击首页“更多”选项即可）：行业报告——各行业官方报告、评定、专家解读，行业与单个品牌市场综述、分析，行业与单个品牌数据、过往新闻。当然这个不乏广告成分，所以需要鉴别，当心受骗。（2）寻找特定领域的人了解情况，寻找合适采访对象，如专家学者、老一辈，想熟悉某个领域或了解某个城市、历史、词条……这些比较细致的东西，可以用“百度百科”，网友们集体贡献的智慧是无穷的，而且网友的料也是无穷的，你往往能有意外收获。

另外wikipedia（维基百科）也是巨型资料库，而且更新很快。（3）Google有一个实用搜索功能是“大学搜索”，要知道现在多数有点名的所谓专家学者都没少在大学挂职，各种研究所、实验室、官方组织的这个那个不少也扎根大学，而大学又是产生思想文化的重要阵地。用这个搜索可以一网打尽和某所大学有关的所有东西。（4）现在有一些新开发的搜索引擎，它们可以对网页库中的某类专门的信息进行一次整合。有人称之为：元搜索引擎。这种搜索引擎的特点是大大减少了你整合资料的时间。比如比比猫（Bbmao）。这个搜索引擎的特点是：自动分类、自动去掉重复结果、汇集五大搜索引擎结果。智能分类，你可能在分类中发现一些你不曾想到的东西。不过元搜索是不是好用，可能仁者见仁智者见智，但是只要适应了这种新方式，会给你带来很多方便。 2.技巧着手（1）设计关键词：使用搜索引擎要避免大而空的关键词，它不知道你要找啥，就可能返回很多莫名其妙结果。

高效大豆根瘤菌的筛选

高效大豆根瘤菌的筛选作者：张欣，李玉文转贴自：本站原创 (1．东北林业大学林学院；2．黑龙江省科学院生物肥料研究中心，黑龙江哈尔滨150086) 摘要：将选取的10株大豆根瘤菌菌株(HLJN1001，HLJN1002，HLJN1003，HLJN1004，HLJN10 05，HLJN1006，HLJN1007，HLJN1008，HLJN1009，HLJN10010)与在黑龙江省大面积栽培的5 个大豆品种（垦农18号，垦鉴豆25号，合丰25号，疆丰21-1381号，绥农4号）进行最佳共生匹配双瓶筛选试验，测定了大豆植株株高、叶片颜色、结瘤数、瘤干重和植株地上部分干重等生物学指标并进行统计分析，从中筛选出共生固氮结瘤能力强的优良菌株HLJN1001和HLJN 1003。关键词：大豆根瘤菌；大豆品种；共生匹配；筛选中图分类号：S565.1 文献标识码：A 文章编号：1007—6921(2011)10—0125—03 根瘤菌(Rhizobium)是一类广泛分布于土壤中的革兰氏阴性细菌，它可以侵染豆科植物根部，形成根瘤，固定空气中的分子态氮形成氨，为植物提供氮素营养。但根瘤菌与豆科植物独立存在时，不能利用大气中的N2，而当根瘤菌侵入豆科植物的根细胞并在其中迅速增殖后，可产生类菌体，并在根瘤内出现豆血红蛋白，同时具备类菌体和豆血红蛋白的根瘤便具有固氮能力。研究表明，不同的根瘤菌与大豆品种间的共生固氮能力存在着较大的差异［1,2］。因此，筛选与豆科作物品种匹配、固氮能力好、竞争结瘤能力强的优良菌株，是提高根瘤菌应用效果的重要途径［3］。现选取10株大豆根瘤菌菌株，与5个在黑龙江省大面积栽培的大豆品种进行共生匹配性研究，从中筛选出优良菌株，为大豆育种材料的选择和共生固氮作用的发挥提供依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 供试菌株 HLJN1001，HLJN1002，HLJN1003，HLJN1004，HLJN1005，HLJN1006，HLJN1007，HLJN1008，HLJN1009，

草莓种植病虫害之利器——硫磺熏蒸器

草莓种植病虫害之利器——硫磺熏蒸器硫磺熏蒸器——防治温室花卉病虫害的好帮手温室花卉特别是温室切花玫瑰易发生白粉病、灰霉病、红蜘蛛、蚜虫、白粉虱等病虫害，一般采用喷雾法来防治病虫害,在使用这一方法时,对于一些低矮及生长茂密的作物,难以保证药剂在叶片背面均匀分布,特别是对栖息在叶背的蚜虫及易于飞散的白粉虱的防治效果往往不好.同时使用喷雾的方法增加了棚室的湿度,有利于高湿病害的发生。电热硫磺熏蒸器是采用电炉控温均衡发热方式,通过加热使硫磺升华形成微小的硫磺颗粒,均匀分布于相对密封的温室大棚内,抑制大棚内空气中及月季表面白粉病菌的生长发育。在温室大棚中，使用硫蒸发器，使硫升华为蒸气，扩散到整个温室大棚中间，这种“硫磺蒸发器”能将高纯度的硫磺直接升华，释放出硫分子均匀地分布在作物各个部位而形成一层均匀的保护膜，以起到杀死和防止病原菌侵入的作用，确保了作物的正常生长。试验结果表明,在室温19～26℃范围内,硫磺蒸发量达5～10g/h,室温在30℃时硫磺蒸发量可达12g/h.它能在短时间(约3～4 h)内使硫磺达到白粉病菌致死浓度,从而有效地治疗和预防月季白粉病。在熏蒸器内熏蒸80％敌敌畏乳油对粉虱、红蜘蛛防效达83％.大面积示范防效达85％。草莓白粉病的防治

病害防治，日光温室促成栽培主要病有：白粉病、灰霉病、草莓炭疽病、(终极腐霉)烂果病、草莓枯萎病、芽枯病、线虫病、病毒病等。草莓白粉病：主要侵害叶片和嫩尖；花、果、果梗及叶柄也可受害。防治方法：(1)选用抗病品种。(2)清理干净棚内或田间的上茬草莓植株和各种杂草后再定植，冬春季清扫果园，烧毁腐烂茎叶，生长季及时摘除病叶集中烧毁。(3)合理密植，加强土肥水管理，增强植株长势，提高自身的抗病能力，果农之间尽量不要互相“串棚”，避免人为传播。(4)防止偏施氮肥，控制徒长，注意通风换气，雨后及时防止过湿。 (5)发现病蔓、病果要尽早在晨露未消时轻轻摘下，装进方便袋烧掉或深埋(6)化学防治：把握在发病初期及时药剂防治。硫磺熏蒸预防发病技术：日本之所以目前不抗白粉病的草莓品种丰香、女峰、章姬、鬼怒甘等面积仍然很大，主要采用的是硫磺熏蒸技术抑制了白粉病的危害。硫磺熏蒸技术是在棚内每60-100m2安装一台熏蒸器，熏蒸器内盛20g含量99%的硫磺粉，在傍晚大棚盖帘后开始加热熏蒸。隔日1次，每次4小时，其间注意观察，硫磺粉不足时再补充。熏蒸器垂吊于大棚中间距地面1.5米处，为防止硫磺气体硬化棚膜，可在熏蒸器上方1米处设置一伞状废膜用于保护大棚膜。此种方法对蜜蜂无害。草莓棚内使用的硫磺熏蒸器，是将硫磺加热成液体后，再挥发出的单质硫，单质硫对棚室内的病菌