微生物检验重点知识

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微生物检验主要知识点总结

微生物检验主要知识点总结

微生物检验主要知识点总结一、微生物检验的概念微生物检验是指利用现代生物学技术手段检验和鉴定食品、饮用水、药品、环境等物品中微生物的种类和数量的一种实验室检验方法。

微生物检验的主要目的是为了评估物品中微生物的数量及种类是否达到卫生标准,以保障人们的健康和安全。

二、微生物检验的重要性1. 保障公共卫生:微生物检验可以及时发现食品、饮用水、药品等物品中存在的微生物污染,有针对性地采取相应的措施,从而保障公共卫生。

2. 保障产品质量:微生物检验可以帮助企业检测产品是否受到微生物污染,保障产品的质量和安全。

3. 疾病预防:微生物检验可以检测出病原微生物,为疾病的预防和控制提供科学依据。

三、微生物检验的主要流程1. 采样:根据不同的检验对象,选择合适的采样方法和设备进行样品采集。

2. 样品处理:将采集的样品进行处理,以提取出微生物进行检测。

3. 细菌培养:将样品中的微生物分离培养,以获取单一的微生物种类。

4. 微生物鉴定:通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法对微生物进行鉴定。

5. 微生物计数:对样品中的微生物进行计数或定量。

6. 结果分析:根据检验结果,评估样品是否符合相关的卫生标准。

四、微生物检验中的常用方法1. 培养法:将样品涂在含有营养物质的培养基上,利用条件恰当的培养环境,使样品中的微生物进行生长。

2. 影像法:通过显微镜观察培养好的微生物,观察其形态特征,进行鉴定。

3. 生化鉴定法:根据微生物的代谢过程,通过一系列的生化反应,鉴别微生物属种。

4. 分子生物学方法:利用PCR、DNA测序等技术,对微生物进行鉴定。

五、微生物检验中的常见问题1. 选择合适的检验方法:不同的微生物污染可能需要不同的检测方法,需根据具体情况选择合适的方法。

2. 样品的处理和保存:样品的处理和保存条件对检验结果有着重要的影响,需要严格按照标准操作。

3. 检验结果的分析和判断:检验结果可能存在假阳性、假阴性等情况,需要结合其他信息进行分析和判断。

检验师微生物检验知识点集锦

检验师微生物检验知识点集锦

检验师微生物检验知识点集锦微生物检验是现代医学中的重要检验项目之一,主要用于检测病原微生物的存在和种类,以及对药敏试验进行评估。

作为初级检验师,你需要掌握以下几个方面的知识点:1.微生物基础知识-微生物的分类和命名规则:包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等分类。

-微生物的形态和结构:掌握不同类别微生物的形态特征和结构组成,如细菌的形状、胞壁和胞质等。

-微生物的生长条件:了解微生物的生长条件,包括温度、湿度、pH值和营养物质等。

2.微生物检验方法-样品采集及处理:理解不同样品(如血液、尿液、分泌物等)的采集方法和处理步骤,以确保样品的准确性和可靠性。

-培养方法:熟悉不同微生物的培养方法,包括琼脂培养基的配制、接种方法和培养条件等。

-鉴定方法:了解常见微生物的鉴定方法,包括形态学鉴定、生化试验和分子生物学方法等。

-药敏试验:掌握药敏试验的原理和操作步骤,用于评估微生物对不同抗生素的敏感性,并为临床治疗提供参考。

3.常见病原微生物-常见病原菌:学习常见病原菌的分类、形态和致病特点,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。

-常见病毒和真菌:了解一些常见的病毒和真菌的致病性和检测方法,例如流感病毒、念珠菌等。

-传染病的检测:学习不同传染病的检测方法,包括艾滋病、结核病和流行性感冒等。

4.质控和质量管理-质量控制:了解微生物检验中的质量控制措施,如内外质控、质量标准和质量评估等,确保结果的准确性和可靠性。

-安全措施:掌握微生物检验过程中的安全措施,如个人防护、试剂的正确使用和实验室的卫生管理等。

除了以上的基础知识,你还需要掌握实验中的仪器操作、数据分析和结果解读等技能。

微生物检验是一个综合性较强的检验项目,需要不断学习和实践,提高自己的技术水平和判断能力。

微生物检验技术知识点

微生物检验技术知识点

微生物检验技术知识点1.培养方法:培养是微生物检验的基础,通过将样品接种到培养基上,使微生物在合适的环境中繁殖生长。

培养方法包括常规培养和不同培养手段。

常见的培养手段有液体培养、固体培养和胶体培养等。

2.鉴定方法:微生物的鉴定是判断其种属、属或是菌株的过程。

传统的鉴定方法包括形态学、生理生化特性和生物学特性等,而现代鉴定方法则应用了分子生物学等技术。

常用的鉴定技术有酶联免疫吸附试验(ELISA)、脱氧核糖核酸(DNA)杂交和聚合酶链反应(PCR)等。

3.纯化和分离方法:对于复杂的微生物种群,需要进行纯化和分离,以便对特定的微生物进行进一步的研究。

纯化和分离方法包括传统的分光技术、平板法和筛选法,以及最新的流式细胞术、脉冲场凝胶电泳(PFGE)和DNA测序技术等。

4.对微生物的抗生素敏感性检测:抗生素敏感性是指微生物对抗生素的反应情况。

抗生素敏感性检测可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗细菌感染疾病。

目前常用的抗生素敏感性检测方法包括纸片扩散法、E测试和微量稀释法等。

5.流行病学监测:微生物检验技术在流行病学监测中发挥着重要作用。

通过对微生物种群的监测和分析,可以及时发现并控制传染病的传播。

流行病学监测常用的技术包括病原体分子鉴定、序列分析和生物信息学分析等。

6.污染控制技术:微生物检验技术也在环境和食品安全方面发挥着重要作用。

通过对环境和食品中微生物的检验,可以评估污染程度,并采取相应的控制措施。

常用的污染控制技术包括灭菌消毒、高温杀菌和辐照等。

7.微生物基因工程:微生物基因工程是指利用基因工程技术对微生物进行改造,以生产有用的产物或者改善微生物的特性。

微生物基因工程的应用广泛,可以用于制药、农业、环境工程等领域。

常见的微生物基因工程技术包括基因克隆、基因敲除和基因转导等。

总之,微生物检验技术是一门广泛应用于医学、生物学、环境工程等领域的技术。

通过不断地研究和创新,微生物检验技术将为疾病诊断、污染控制和资源利用等问题提供更好的解决方法。

微生物检验(完整版)

微生物检验(完整版)

微生物检验(完整版)微生物检验是一种用于检测和鉴定微生物的方法,它在医学、食品安全、环境保护等领域都有着重要的应用价值。

微生物检验可以帮助人们了解微生物的种类、数量、分布以及对人类和环境的影响,从而采取相应的控制和预防措施。

本文将从微生物检验的基本原理、常见方法和应用领域等方面进行介绍。

一、微生物检验的基本原理。

微生物检验的基本原理是通过对样品中的微生物进行分离、培养、鉴定和计数,从而得到微生物的种类和数量。

其主要包括以下几个步骤:1. 取样,首先需要从待检样品中取得适当的样品,如食品、水、空气、土壤等。

取样的方法和条件需根据具体的检验要求和标准来确定。

2. 分离,将样品中的微生物分离出来,通常采用的方法有稀释涂布法、滤膜法、过滤法等。

分离出的微生物可以进行后续的培养和鉴定。

3. 培养,将分离出的微生物进行培养,提供适当的营养物质和环境条件,促使微生物的生长和繁殖。

培养的时间和温度等条件需根据不同的微生物种类来确定。

4. 鉴定,对培养出的微生物进行形态学、生理学和生物化学特性等方面的鉴定,确定其种属和数量。

常用的鉴定方法有显微镜观察、生化试验、分子生物学方法等。

5. 计数,对培养出的微生物进行计数,得到微生物的数量。

常用的计数方法有平板计数法、膜过滤法、涂片计数法等。

二、微生物检验的常见方法。

微生物检验的常见方法主要包括传统方法和现代方法两大类。

1. 传统方法,传统方法主要包括涂布法、滤膜法、过滤法、薄层法等。

这些方法简单易行,成本低廉,适用于一般的微生物检验需求。

但传统方法通常需要较长的培养周期,且对微生物的种类和数量有一定的限制。

2. 现代方法,现代方法主要包括PCR法、蛋白质质谱法、流式细胞术等。

这些方法具有高灵敏度、高特异性和高通量的特点,能够快速准确地检测和鉴定微生物。

但现代方法的设备和技术要求较高,成本较高,适用于对微生物检验有较高要求的领域。

三、微生物检验的应用领域。

微生物检验在医学、食品安全、环境保护等领域都有着重要的应用价值。

微生物检验基础知识点总结

微生物检验基础知识点总结

微生物检验基础知识点总结微生物检验是临床诊断中的重要技术手段,通过对患者样本中的微生物进行分离、鉴定和药敏试验,可以确定感染性疾病的病原体及其对药物的敏感性,为临床治疗提供重要依据。

微生物检验涉及到许多基础知识点,下面将分别从微生物分类、微生物培养、微生物鉴定和药敏试验等方面来总结微生物检验的基础知识点。

一、微生物分类微生物是一种广泛分布于自然界中的生物体,包括细菌、真菌、病毒和原生动物等。

而在临床微生物检验中,最常见的微生物主要是细菌和真菌。

下面将分别介绍细菌和真菌的分类。

1. 细菌的分类细菌是一类单细胞生物,其形态多样,包括球菌、杆菌、螺旋菌等。

从生物学特性上可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

(1)革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌直接在植物或培养基上形成蓝、紫色颗粒。

细胞壁是由聚糖和一种特殊的脂质组成。

革兰氏阳性菌包括葡萄球菌、链球菌等。

这类细菌能在治疗性的延续性用药下适度存活。

(2)革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌则是指革兰氏润湿的时候是红色的细菌,单层数细胞壁,比革兰氏阳性菌的致病能力更强,但是也更容易受到抗菌素或药物的影响。

这类细菌包括大肠杆菌、沙门氏菌等。

2. 真菌的分类真菌是一种含有真核细胞核的微生物,包括酵母菌和菌丝菌两类。

(1)酵母菌酵母菌是一种单细胞真菌,能在酵母天然的酵母营养生长,大部分为革兰氏染色阳性,不表现形成孢子的原始生长特性。

酵母菌包括念珠菌、假丝酵母等。

(2)菌丝菌菌丝菌是一类多细胞真菌,其细胞由菌丝组成,通常由菌落分离。

它们通常是真菌,因为它们在呼吸和生长条件下形成的真菌菌丝。

菌丝菌包括白色念珠菌、曲霉菌等。

二、微生物培养微生物培养是微生物检验中的重要环节,通过在适当的培养基上提供适当的温度、湿度、氧气和营养物质,使微生物在含有以上条件的环境中进行繁殖和生长。

1. 培养基的分类与特点培养基是一种含有适量营养成分的物质,用于微生物的生长和繁殖。

根据不同的需求和用途,培养基可分为富营养基、简单基、选择基和不同温度适应基等。

微生物学检验重点知识总结

微生物学检验重点知识总结

微生物学检验重点知识总结微生物学是研究微生物的结构、生理、生化、生态以及与人类和环境的关系的一门学科。

在微生物学检验中,掌握以下重点知识是非常重要的。

1.微生物分类学:微生物可以分为原核生物和真核生物。

原核生物包括细菌和古细菌,真核生物包括真菌、原生动物和线虫等。

了解微生物的分类和命名体系,对于正确识别和鉴定微生物是至关重要的。

2.微生物培养技术:微生物的培养是检验微生物的基础。

掌握常见的微生物培养方法,如液体培养、平板培养和深层培养等,并了解培养基的配制和消毒操作的方法。

3.微生物的生长特性:微生物的生长特性包括生长曲线、生长速率、最适生长温度和最适生长pH等。

了解微生物的生长特性对于选择合适的培养条件和进行微生物检验是非常重要的。

4.微生物的鉴定方法:微生物的鉴定是微生物学检验的重点。

常见的微生物鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性检测、免疫学检测和分子生物学检测等。

掌握常用的微生物鉴定方法和技术,可以准确快速地鉴定微生物。

5.微生物与人类健康的关系:微生物在人类健康中起着重要作用。

了解微生物对人类健康的影响,如微生物的致病机制、致病微生物的鉴定和抗微生物药物的应用等,有助于预防和治疗微生物引起的疾病。

6.微生物在环境中的作用:微生物在环境中起着重要的生态作用。

了解微生物在土壤、水体和大气中的功能和影响,对于环境保护和资源利用具有重要意义。

7.微生物学检验方法:微生物学检验方法包括微生物计数、微生物培养、抗微生物药敏试验、细菌鉴定和病毒检测等。

掌握常见的微生物学检验方法和技术,能够准确、快速地检测微生物。

8.检验结果的解读和分析:对于微生物学检验结果的解读和分析是非常重要的。

了解常见的微生物学检验参数和阈值,能够根据检验结果判断微生物的致病性和药物敏感性等。

总结起来,微生物学检验的重点知识包括微生物的分类和命名、微生物培养技术、微生物的生长特性、微生物的鉴定方法、微生物与人类健康的关系、微生物在环境中的作用、微生物学检验方法以及检验结果的解读和分析等。

临床微生物检验知识点

临床微生物检验知识点

临床微生物检验知识点1.微生物学基础知识:了解细菌、真菌、病毒、寄生虫等病原微生物的基本特征,包括形态、生长要求、代谢特性等。

2.微生物的分离和培养:熟悉常规培养基的选择和制备,掌握不同微生物的适宜培养条件,如温度、pH值、氧气需求等。

3.微生物鉴定:根据微生物的形态和特性进行初步鉴定,如形态学特征、革兰氏染色、厌氧性检测等。

此外,还可以使用生物化学试纸、血清学试验、分子生物学等方法进行鉴定。

4.耐药性检测:对微生物进行药敏试验,了解其对各类抗生素、抗真菌药物、抗病毒药物的敏感性和耐药性。

这有助于临床医生选择合适的药物治疗感染。

6.检验流程和规范:了解微生物检验的标本采集、处理和保存的基本要求,掌握各类检验方法的操作步骤,遵守无菌操作规范,以保证检验结果的准确性和可靠性。

7.抗生素治疗和微生物学监测:了解抗生素的分类、作用机制和临床应用,以及微生物的产生耐药性的机制和监测方法。

合理应用抗生素,避免滥用和不当使用,是临床微生物检验的重要目标之一8.感染控制:了解医院感染控制的基本原则和措施,包括手卫生、环境清洁、消毒灭菌、隔离措施等。

临床微生物检验在感染控制中发挥着重要作用,通过对患者、环境和医务人员的监测,提供科学依据进行感染防控。

9.病原微生物的定量检测:对一些病原微生物,如HIV、肺结核菌等,需要进行定量检测。

这有助于预测疾病进展、评估治疗效果和制定治疗方案。

10.新技术和新方法的应用:随着科技的进步,临床微生物检验也不断发展,新的方法和技术被广泛应用,如实时荧光PCR、质谱技术、核酸杂交等。

了解这些新技术的原理和应用,可以提高检验的灵敏度和特异性。

总结起来,临床微生物检验的知识点涉及微生物学基础、分离培养、鉴定、药敏试验、诊断、标本采集处理、抗生素治疗和感染控制等方面。

掌握这些知识,可以提高临床微生物检验的准确性和可靠性,为临床医生提供更科学的诊断和治疗建议。

微生物检验技术重点

微生物检验技术重点

微生物检验技术重点第一章绪论1.食品卫生标准的内容:感官指标、理化指标、微生物指标2.食品微生物检验的意义:是衡量食品卫生质量的重要指标,也是判定被检食品能否食用的科学依据;可以判断食品加工环境及食品卫生的情况,为卫生管理工作提供科学依据;可以有效地防止或减少食物中毒和人畜共患病的发生;保证产品的质量,避免不必要的损失.3.食品微生物检验的范围:生产环境的检验;原辅料的检验;食品加工、储藏、销售等环节的检验;食品的检验4.食品卫生标准中的微生物指标:菌落总数、大肠菌群、致病菌、霉菌及其毒素、其他指标5.菌落总数:是指在被检样品的单位重量(g)、容积(ml)或表面积(cm2)内,所含能在严格规定的条件下(培养基及其PH、培养温度与时间、计数方法等)培养所生成的细菌集落总数6.大肠菌群(MPN):需氧与兼性厌氧,在37℃能分解乳糖产酸产气,以革兰氏阴性杆菌为多。

7.致病菌主要包括:沙门氏菌、致贺氏菌、金黄色葡萄球菌、致病性链球菌、大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血性杆菌8.食品微生物检验方法的新进展:(1)微量生化反应系统:API-细菌鉴定系统;(2)气相色谱法;(3)荧光免疫分析(4)电阻抗技术(5)放射测量法(6)PCR技术9.食品微生物检验的概念:食品微生物检验是应用微生物学的理论与方法,研究外界环境和食品中微生物的种类、数量、性质、活动规律、对人和动物健康的影响及其检验方法与指标的一门学科第二章配置实验室:(1)环境(2)人员(3)设备(4)检验用品(5)培养基与试剂环境:实验室环境不应影响检验结果的准确性;实验室的工作区域应与办公室区域明显分开;实验室工作面积和总体布局应能满足从事检验工作的需要,实验室布局应采用单方向工作流程,避免交叉污染;实验室内环境的温度、湿度、照度、噪声和洁净度等应符合工作要求;一般样品检验应在洁净区域进行,洁净区域应有明显的标示;病原微生物分离鉴定工作应在二级生物安全实验室进行微生物实验室建设与布局:1、应考虑和周围环境的关系;一、二级生物安全实验室无需特殊选址,可共用普通建筑物,宜在建筑物一段或一侧。

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一、名词解释:1、溶原性细菌:获得温和噬菌体核酸的细菌。

2、前噬菌体:温和噬菌体整合于细菌染色体(宿主基因组)中的核酸称为前噬菌体。

3、侵袭力:病原微生物能突破宿主的防御系统,在机体内定植、繁殖和扩散的能力。

4、正常菌群MIC(最低抑菌浓度):在体外试验中,抗菌药物抑制培养基中某种细菌生长最低药物浓度,是药物抗菌活性指标,提示药物的抑菌能力(µg/ml)5、MRSA:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌6、迁徙生长现象:变形杆菌在固体培养基上呈扩散性生长,形成以菌种接种部位为中心的,厚薄交替同心圆型的层层波状菌苔7、菌丝:真菌在适宜的环境中,由孢子出芽形成芽管,逐渐延长呈丝状,称为菌丝。

8、二相性真菌:有些真菌在不同寄生环境和培养条件下可出现两种形态,称二相性真菌9、病毒体:一个成熟有感染性的病毒颗粒称为病毒体二、填空、判断、选择、问答部分(一)革兰氏染色的三个原理,操作步骤与临床意义【选择题】1、原理:(1)渗透学说:革兰阳性菌细胞壁结构较紧密,肽聚糖层厚,含脂质少,脱色时乙醇不易渗入,反而使细胞壁脱水,通透性下降,胞内结晶紫与碘的复合物不易渗出。

格兰阴性菌细胞壁结构较疏松,肽聚糖层薄,含脂质多,易被乙醇溶解,是细胞壁通透性增加,胞内结晶紫与碘的复合物易被乙醇溶解溢出而被脱色。

【主要学说——细胞壁结构学说:G+菌和G-菌的细胞壁成分差异大,对脱色剂的反应不同】(2)化学学说:革兰阳性菌含大量核糖核酸镁盐可与结晶紫、碘牢固结合,而不易被乙醇脱色。

革兰阴性菌内所含核糖核酸镁盐少,故易被脱色。

(3)等电点学说:革兰阳性菌的等电点(pH2~3)比格兰阴性菌(pH4~5)低,在相同pH的条件下,革兰阳性菌比格兰阴性菌所带的负电荷多,与带正电荷的碱性染料结合较牢固,而不易脱色。

2、操作步骤:①细菌涂片、干燥,经火焰固定(菌膜>1cmX1cm)②结晶紫染色1min,水洗甩干③加碘液媒染1min,水洗甩干④加95%乙醇脱色30s,水洗甩干⑤用稀释复红或沙黄复染30s,水洗吸干后镜检3、临床意义:①鉴别细菌②选择治疗用药③与细菌致病性有关(二)细菌的基本结构及功能、细菌的特殊结构及功能、细菌的变异机理【选择题】细菌蛋白质的合成场所:核糖体(同时也是药物作用的部分)细菌内毒素的化学成分:脂多糖1、细菌的基本结构基本结构:由外向内依次为细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等。

(1)细胞壁a.主要功能:①维持细菌固有形态②抵抗低渗作用③物质交换作用2、化学组成和结构a.肽聚糖:是细菌细胞壁的主要成分,也是原核细胞所特有的成分革兰阳性菌的肽聚糖(多):聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥三部分构成的三维网架结构革兰阴性菌的肽聚糖(少):聚糖骨架、四肽侧链两部分构成的二维网架结构b.磷壁酸:革兰阳性菌细胞壁特有。

作用:调节、维护细菌细胞内离子平衡作用,是革兰阳性菌重要的表面抗原,与细菌致病性有关。

壁磷壁酸:由肽聚糖延伸;膜磷壁酸:由细胞膜延伸c.外膜层:革兰阴性菌细胞壁特有。

细胞壁肽聚糖外侧,由外向内依次为脂多糖、脂质双层、脂蛋白三部分①脂多糖:格兰阴性菌内毒素,脂质A为主要毒性成分第1/12页(2)细胞膜:一层柔软而富有弹性的半渗透性双层脂质生物膜结构,脂质双层中镶嵌有多种蛋白质。

中介体:细胞膜内陷折叠而成的囊状结构。

(3)细胞质有质粒(是染色体外遗传物质)包括:F质粒(至育性质粒)R质粒(耐药性质粒)Vi质粒(毒力质粒)2、细菌的特殊结构(鞭毛、荚膜、芽孢和菌毛)(1)鞭毛:附着在菌体上面胞壁外的细长呈波浪形弯曲的丝状物。

a.类型:周毛菌,单毛菌,双毛菌,丛毛菌。

b.作用和意义:①是细菌的运动器官②与细菌致病性有关③与细菌鉴定、分类及分型有关(2)菌毛:是指菌体表面具有比鞭毛更细、短而直的丝状附属物。

化学本质:蛋白质a.普通菌毛:是细菌的黏附器官,与细菌致病性密切相关b.性菌毛:F质粒控制,表面有性菌毛的称为雄性菌(F+),无性菌毛称为雌性菌(F-)(3)荚膜:某些细菌在细胞壁外包绕的一层黏液性物质。

化学本质:多糖类,少数为多肽通常在机体内和营养丰富的培养基中易形成荚膜a.作用:①抗吞噬②抗杀伤③抗干燥④与致病性有关⑤细菌鉴别和分型的依据⑥免疫原性(4)芽孢:是某些细菌在一定条件下细胞质、核质浓缩脱水而形成的一个折光性很强,具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。

a.形成条件:缺乏营养物质,有害代谢产物的堆积b.性质:休眠状态,非繁殖态。

芽孢可脱离母体单独存活c.特性:①保留原菌活性②细菌的休眠状态③可转变为繁殖体(不是繁殖方式)d.作用和意义:①增强细菌抵抗力②判断灭菌效果的指标③鉴别细菌(5)细菌的非典型形态与结构细菌L型:即细菌细胞膜缺陷型,无细胞壁仍可存活主要生物学特性:①多形性②大多数染成革兰阴性③普通培养不上涨(3%~5%高渗培养)④缓慢生长⑤荷包蛋样菌落(中间凸起,四周扁平)⑥可返祖3、细菌变异的机制(1)基因突变——点突变突变:是指细菌遗传物质的结构发生突然而稳定的改变,所致的变异现象可遗传给后代。

(2)基因转移及重组a.基因转移:外源性遗传物质由供体菌转入受体菌细胞内的过程。

b.基因重组:供体菌的基因进入受体菌细胞,并在其中自行复制与表达,或与受体菌DNA整合在一起的过程。

c.基因转移及重组的方式:转化、接合、转导、溶原性转换、原生质融合等①转化:受体菌直接摄取环境中供体菌游离的DNA片段,并将其整合至自身基因组中,从而获得供体菌的部分遗传性状。

②接合:通过性菌毛相互沟通,将遗传物质从供体菌直接转移给受体菌。

③转导:以噬菌体为载体。

将供体菌的遗传物质转移到受体菌,经重组而使受体菌获得供体菌的某些遗传性状。

④溶原性转换。

⑤原生质融合。

第2/12页(三)培养基的制备方法,常用培养基的原理及用途(SS MAC MIU O/F采用的指示剂,结果观察等),常见生化反应的原理1、制备程序:调配—>溶化—>矫正pH—>过滤澄清—>分装—>灭菌—>检定—>保存矫正pH:一般将培养基的pH值矫正至7.4~7.6。

由于培养基经高压灭菌后,其pH降低约0.1~0.2,因此矫正时pH应比实际值高0.1~0.2分装:①基础培养基:一般分装于三角烧瓶,灭菌后备用;②琼脂平板;③半固体培养基:一般分装于试管中,分装量约为试管长度的1/3,灭菌后直立凝固待用;④琼脂斜面:分装量约为试管1/5,灭菌后趁热放置斜面凝固,斜面长度约为试管长度的2/3;⑤液体培养基:分装与试管,分装量为试管长度的1/3,灭菌后备用保存:标记名称、制备时间等,保鲜袋内存放于4℃冰箱或冷暗处,保存时间一般不超2周。

2、常用培养基的原理及用途(1)SS:强选择分离致病肠杆菌(2)MAC:弱选择分离正常肠杆菌(3)MIU:①原理:见各试验各自原理。

动力:有鞭毛的细菌有动力,穿刺培养后穿刺线不清晰。

②用途:检测细菌动力+靛基质试验(吲哚试验)+尿素酶试验③结果观察:a.接种线变宽、变模糊,培养基变浑浊为动力阳性;b.加入靛基质试剂后形成玫瑰吲哚,则为靛基质试验阳性;c.整只试管变为桃红色,则为尿素酶试验为阳性(产生尿素酸分解培养基中尿素产碱,使酚磺酞指示剂显桃红色)(4)KIA:①原理:乳糖发酵+葡萄糖发酵+葡萄糖产气+硫化氢②用途:肠杆菌科细菌的鉴定和鉴别。

③结果判断:a.整个培养基呈黄色,则乳糖发酵阳性;b.斜面呈红色,则葡萄糖发酵阳性;c.试管底部有气泡,说明葡萄糖产气阳性;d.整只试管变黑,则硫化氢阳性(细菌能分解培养基中硫氨基酸,可产生H2S,H2S与培养基中枸橼酸钠铵铁反应,产生黑色FeS)(5)O/F:①原理:细菌分解葡萄糖产生有机酸,使培养基pH下降,培养基由绿色变为黄色。

指示剂溴麝香草酚蓝(黄色<—绿色—>蓝色)②用途:用于肠杆菌和非发酵菌的鉴别,葡萄球菌和微球菌的鉴别③结果判断:O:开放管变黄,封闭管不变(绿色);F:开放管变黄,封闭管也变黄;K:开放管不变,封闭管变绿(产碱);N:开放管不变,封闭管也不变(不利用)3、常见生化反应的原理(一)十个基础试验IMViC试验:I——吲哚试验 M——甲基红试验 V——V-P试验 C——枸橼酸盐试验1、糖(醇、苷)类发酵试验①原理:细菌分解糖产生有机酸,使培养基pH下降,指示剂溴甲酚紫由紫变黄(酚红则是由红变黄),如该菌具有甲酸解氢酶,可进一步分解甲酸产生H2和CO2,使倒插管中出现气泡。

②方法:细菌接种糖发酵管,37℃、24h孵育后观察结果③结果判断:有的细菌能分解某些糖产酸产气(AG/+),有的只能产酸而不产气(A/+),有的则不能分解糖类(N/-)2、葡萄糖氧化/发酵试验(O/F试验)①原理:细菌分解葡萄糖产生有机酸,使培养基pH下降,指示剂溴麝香草酚蓝(黄色<—绿色—>蓝色)②方法:2支试管,一只加灭菌的液体石蜡覆盖,使培养基与空气隔绝;另一只不加灭菌的液体石蜡,培养基暴露于空气中。

35℃培养18~24h后,观察结果③结果判断:氧化型细菌(O)——仅在有氧环境中分解葡萄糖,在无氧环境中不分解,加液体石蜡不变色,不加液体石蜡变色;发酵型细菌(F)——在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖,两管均变色第3/12页不利用型细菌(N)——有氧或无氧的环境中都不能分解葡萄糖,两管均不变色产碱型细菌(K)——开放管变蓝,封闭管不变色3、甲基红试验(MR试验)①原理:细菌发酵葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步分解成甲酸、乙酸、乳酸等混合酸,培养基pH下降至4.4以下,加入甲基红指示剂变为红色,为MR试验阳性;若因其他因素使培养基pH在5.4以上,则甲基红指示剂呈黄色,为MR试验阴性。

②方法:将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培育18~24h,滴加甲基红试剂,呈现红色为MR试验阳性,黄色为阴性4、V-P试验①原理:有些细菌在发酵葡萄糖产生丙酮酸后,能使丙酮酸脱羧生成中性的乙酰甲基甲醇,其在碱性环境中北空气中的氧氧化成二乙酰,二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含胍基发生反应,生成红色化合物。

②方法:将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培育18~24h,按每毫升培养基加入0.3%肌酸或肌酐的40%KOH溶液0.1ml,充分混匀后观察,出现红色为V-P试验阳性。

5、靛基质试验(吲哚试验)①原理:某些细菌含色氨酸酶,分解培养基中的色氨酸产生靛基质(吲哚),靛基质与对二甲基氨基苯甲醛反应,生成红色复合物。

②方法:将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培养18~24h,再在培养基中加入靛基质指示剂(对二甲基氨基苯甲醛),试剂与培养基两液面接触处呈红色为阳性,无色为阴性。

6、硫化氢试验①原理:有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸,产生H2S,H2S与培养基中Fe2+(或Pb2+)反应生成黑色的硫化亚铁或硫化铅②方法:接种细菌,35℃培养18~24h,呈现黑色沉淀者为阳性,无变化者为阴性7、尿素酶试验①原理:有些细菌能产生尿素酶,可分解尿素生成氨和CO2,氨在水液中形成碳酸铵,使培养基呈碱性②方法:将待检菌接种于尿素培养基中,培养后出现红色为阳性,不变色(橙色)为阴性。

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