链霉菌发酵各阶段菌丝形态
发酵工程制药实验-链霉菌发酵
实验2灰色链霉菌的活化一、实验目的学习制备高氏一号斜面培养基的方法以及斜面接种技术。
二、实验原理高氏一号斜面培养基是一种合成培养基，用于培养放线菌。
三、实验试剂与仪器1. 菌种：灰色链霉菌；2. 培养基：可溶性淀粉20g，硝酸钾1 g，氯化钠0.5 g，磷酸氢二钾0.5 g，硫酸镁0.5 g，硫酸亚铁0.01 g，琼脂20 g，水1000毫升，PH7.2—7.4（配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中）；3. 器材：天平、500mL刻度量杯、小刀、牛角匙、玻棒、纱布、18mL×180mL试管、棉花、电炉、烧杯、记号笔、酒精灯、接种环等。
四、实验步骤1. 高氏一号培养基的制备（1）按配方称量药品，加热搅拌至琼脂完全熔化，补水至1000mL。
趁热分装于18mL×180mL试管，斜面以8mL为宜。
（3）分装完毕后，塞好棉塞并将试管捆扎好。
高压蒸汽灭菌：121℃灭菌20min，灭菌后趁热摆斜面。
2. 斜面接种接种是将纯种微生物，在无菌操作条件下，移植到已灭菌并适宜该菌生长繁殖所需要的培养基中。
为了获得微生物的纯种培养，要求接种过程中必须严格进行无菌操作。
一般是在无菌室内，超净工作台或实验台酒精灯火焰旁进行。
（1）左手拿试管菌种，右手拿接种环，先将金属环烧灼灭菌，再将接种环在空白培养基处冷却，挑取菌落，在火焰旁稍等片刻。
（2）左手将试管菌种放下，拿起斜面培养基。
在火焰旁用右手小指和手掌边缘拔下棉塞并夹紧，迅速将接种环伸入空白斜面，在斜面培养基上轻轻划线，将菌体接种于其上。
划线时由底部向上划一直线，一直划到斜面的顶部。
注意勿将培养基划破，不要使菌体沾污管壁。
（3）灼烧试管口，在火焰旁将棉塞塞上。
接种完毕，接种环上的余菌必须灼烧灭菌后才能放下。
（4）斜面置于28℃恒温箱中，培养5～6d观察结果。
实验3 灰色链霉菌的摇瓶种子制备一、实验目的学习制备摇瓶种子培养基的方法以及种子扩大培养技术。
丝状真菌液体深层发酵菌丝体形态控制研究进展
丝状真菌液体深层发酵菌丝体形态控制研究进展蒋雪薇;李浩;杨琛;许延涛;罗晓明【摘要】丝状真菌广泛用于工业发酵生产中,其菌丝体形态与发酵液粘度、目的产物产量有着密切关系,是发酵过程控制的关键因素之一.文章综述了丝状真菌液体深层发酵中菌丝体的形态特征及其分析与表征方法、菌丝球形成机理及菌丝体形态控制对发酵影响的研究进展,指出量化描述丝状真菌的生长是精确控制发酵过程的基础.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2016(032)009【总页数】5页(P209-212,236)【关键词】丝状真菌;液体深层发酵;菌丝体形态控制【作者】蒋雪薇;李浩;杨琛;许延涛;罗晓明【作者单位】长沙理工大学化学与生物工程学院,湖南长沙410114;长沙理工大学化学与生物工程学院,湖南长沙410114;长沙理工大学化学与生物工程学院,湖南长沙410114;长沙理工大学化学与生物工程学院,湖南长沙410114;长沙理工大学化学与生物工程学院,湖南长沙410114【正文语种】中文丝状真菌在医药、食品、农业以及环保等发酵工业上应用十分广泛，是工业大宗发酵产品的主要贡献者之一，其可以生产许多具有重要经济价值的代谢产物，如抗生素、有机酸、酶制剂等，具有巨大的工业和社会价值[1-2]。
丝状真菌在液体深层发酵中，菌丝体形态特征及菌丝体生理特性是重要参数，这些参数的变化会对发酵产物的积累产生较大的影响，其中菌丝体形态的变化主要是通过影响发酵液粘度为主的流变学参数来影响发酵产物的积累[3]。
发酵液流变学特性的变化会导致发酵过程中传质效果变化，致使营养物质、氧等底物的吸收及产物的生成发生变化，从而导致代谢途径发生改变，甚至产生有害的副产物，最终影响到目标产物的产率[4-5]。
另外，菌丝体的形态还会对下游提取工艺产生影响，从而影响到产物提取收率[6-7]。
可以说，丝状真菌液体深层发酵中，菌丝体形态控制是目标产物收获量控制的关键之一[8-9]。
实验三 酵母菌、霉菌、放线菌的形态观察
实验三酵母菌、霉菌、放线菌的形态观察一目的要求1.观察酵母菌的个体形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。
2.掌握酵母菌的菌落特征及其与细菌菌落的区别。
3．学会识别霉菌的菌落特征，掌握霉菌的乳酸石炭酸制片法。
4．学习观察霉菌个体形态及各种无性孢子的方法。
5．学会观察放线菌的菌落特征，个体形态及其繁殖方式。
二实验原理1．酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，多数是圆形或椭圆形，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍。
用美蓝对酵母菌的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
2.霉菌形态比细菌、放线菌复杂，个体比较大，具有分支的菌丝体和分化的繁殖器官。
霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
因此，在观察时要注意菌丝直径大小，菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖形成的孢子是那一种？孢子是怎样着生的？3.放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝，基内菌丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝，并进一步分化产生孢子丝及孢子。
孢子的表面光滑或粗糙、圆或椭圆，孢子有各种颜色，这些形态特点都是鉴定放线菌的重要依据。
三实验材料1．菌种（1）啤酒酵母、面包酵母、裂殖酵母、热带假丝酵母;（2）毛霉、黑根霉、青霉、黑曲霉;（3）白色链霉菌、红色链霉菌2. 0.1%的美蓝染色液，乳酸石炭酸溶液、乳酸石炭酸棉蓝溶液, 芽孢染色液、无菌水、盖玻片、载玻片，接种钩，接种铲。
四内容与步骤1．酵母菌(1)菌落特征和菌苔特征的观察。
观察菌落表面干燥或湿润、隆起形状、边缘整齐度、大小、颜色等，并用接种环挑菌，注意与培养基结合是否紧密。
链霉菌的研究概况
链霉菌的研究概况海南大学课程论文题目名称：链霉菌的研究概况学院：专业班级：姓名：学号：评阅意见评阅成绩评阅教师：2014年11 月22 日链霉菌的研究概况（工作单位，姓名）摘要链霉菌(Streptomyces)属于链霉菌属，是高等的放线菌。
链霉菌是一类革兰氏阳性细菌，是一种没有细胞核的原核生物,共约1000多种，其中包括和很多不同的种别和变种。
它主要生长在含水量较低、通气较好的土壤中，一些链霉菌也可见于淡水和海洋。
由于许多链霉菌产生抗生素的巨大经济价值和医学意义，对这类放线菌已做了大量研究工作。
研究表明，抗生素主要由放线菌产生，而其中90%又由链霉菌产生，著名的、常用的抗生素如链霉素、土霉素，抗真菌的制霉菌素，抗结核的卡那霉素，能有效防治水稻纹枯的井冈霉素等，都是链霉菌的次生代谢产物。
有的链霉菌能产生一种以上的抗生素，有化学上，它们常常互不相关；可是，从全世界许多不同地区发现的不同种别，却可能产生同抗生素；改变链霉菌的营养，可能导致抗生素性质的改变。
这些菌一般能抵抗自身所产生的抗生素，而对其他链霉菌产生的抗生素可能敏感。
金黄垂直链霉菌作为链霉菌的一种，它能拮抗多种真菌和细菌，且对香蕉枯萎病的防治效果好，因此，该链霉菌在植物病害的生物防治领域广阔的应用前景。
关键词：链霉菌应用发展第一章绪论1.1综述链霉菌有发育良好的分枝菌丝，菌丝无横隔，分化为营养菌丝、气生菌丝、65孢子丝。
营养菌丝又名基内菌丝，色浅，较细，具有吸收营养和排泄代谢废物的功能；气生菌丝是颜色较深，直径较粗的分枝菌丝；气生菌丝成熟分化成孢子丝，孢子丝再形成分生孢子。
孢子丝和孢子的形态、颜色因种而异，是分种的主要识别性状之一。
已报道的有千余种，主要分布于土壤中。
已知放线菌所产抗生素的90%由链霉菌属属产生。
其中链霉菌属的基内菌丝多分枝，常产生各种水溶性或脂溶性色素，本属种数最多，因许多种是抗生素的产生菌而且产生抗生素的种类最多而著名（如链霉素等）。
放线菌和霉菌的形态结构观察(共26张PPT)
、乳酸石
炭酸溶液
、载片及盖
片、显
微
示(一无)霉隔菌菌菌丝落、特假征根的、观匍察匐枝镜、孢、子囊接梗、种孢子环囊 、接种针、酒精灯、蒸馏水等。
实验内容（放线菌）
(一)菌落形态的观察
观察放线菌菌落表面形状、大小、颜色、边缘，以及 有无色素分泌到培养基内等；
并用接种环挑取菌落，注意菌丝在培养基上着生的紧密情 况。
并用接种环挑取菌落，注意菌丝在培养基上着生的紧密情况。
(二)其他物品 (三)孢子形状的观察（印片染色法）
并用接种环挑取菌落，注意菌丝在培养基上着生的紧密情况。 高倍镜(400×)下观察灰色链霉菌和淡紫灰链霉菌的孢子及孢子丝。
图2-100为根霉属的接合孢子
％美蓝染液 实 验 二
孢子囊破裂后能观察到囊托及囊轴。
灰色 链霉菌
印片法或 直接观察法
个体形态及生殖方式图
(三)描述产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的菌落 的颜色及特征
与培养
微生物 名称
大小
表面 形状
菌丝 颜色
孢子 颜色
菌丝 高矮
生长 密度
基 结合程
嗅 味
度
黑根霉
产黄青霉
黄曲霉
(四) 绘制产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的个体 形态及生殖方式图
微生物名称
菌丝结构（及分化结构）
无性孢子
黑根霉(糖化酶、 示无隔菌丝、假根、匍匐枝、
酿酒)
孢子囊梗、孢子囊
产黄青霉(青霉素 示有隔菌丝、分生孢子梗及其
)
分枝方式、小梗
黄曲霉(蛋白酶、ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ示有隔菌丝、足细胞、顶囊、
制酱油)
分生孢子梗及小梗
孢囊孢子 分生孢子 分生孢子
2.2 放线菌
放线菌属，丝状菌落 （ × 18000）
小 单 孢 菌 属
2.3 蓝细菌（蓝藻，蓝绿藻）
• 是一类含有叶绿素a、具有放氧性光合作 用的原核生物。过去也称为蓝藻或蓝绿藻。 • 蓝细菌与藻类的最大区别：无叶绿体、无 真核、有70S核糖体，细胞壁中含有肽聚 糖，对青霉素和溶菌酶敏感等。
2.3.1 蓝细菌
菌落质地硬而且致密，菌落小而不广泛延伸。 菌落表面呈紧密的绒状或坚实、干燥多皱。
接种针难以挑取，有时可挑碎，有时可将整 个菌落挑起。 基内菌丝和孢子常有 颜色，使得菌落的正 反面颜色常不一致。
放线菌的菌落特征
A：诺尔斯氏链霉菌 B：皮疽诺卡氏菌 C：酒红指孢囊菌 D：游动放线菌 E：小单胞菌 F：皱双孢马杜拉放线菌
肺炎支原体
本章小结
原核生物的共同特征是细胞细小，核的结构原 始，无核膜包裹，细胞壁含独特的肽聚糖，细 胞内无细胞器分化，无有丝分裂。 通过革兰氏染色可把所有原核生物区分为G+和 G-两大类，并能揭示其在结构、生理、遗传、 生态等特性上的不同，故此染色法具有重要的 理论和实践意义。 原核细胞的共同结构有细胞壁（支原体例外）、 细胞质膜、细胞质、核区和各种内含物等，部 分种类的细胞壁外还有荚膜、鞭毛、菌毛和芽 孢等特殊构造。芽孢高度耐热，在理论与实践 上均很重要。
（3）可有效去除氮、磷，可作水体富营养化的指示生物。
（4）有的蓝细菌是污染水体中发生“赤潮”及“水华”的原凶
蓝细菌造成无锡太湖水华
2.4 古细菌
古生菌是一群具有独特的基因结构或系统发育 生物大分子序列的单细胞原核生物；
多生活在地球上极端的生境或生命出现初期的 自然环境中，营自养和异养生活；
具有特殊的生理功能，如在超高温、高酸碱度、 高盐及无氧状态下生活； 具有独特的细胞结构，如细胞壁骨架为蛋白质 或假胞壁酸，细胞膜含甘油醚键；以及代谢中的 酶作用方式既不同于细菌又不同于真核生物。
链球菌菌落特征
链球菌菌落特征链球菌是一类广泛存在于自然界中的细菌，它们的菌落特征是独特而具有识别性的。
链球菌菌落通常呈现出以下几个特点。
1. 形态特征链球菌菌落的形态通常呈现为白色或乳白色，有时也会呈现出灰色或黄色。
菌落的形状多样，可以是圆形、不规则形或类似于花朵的形状。
菌落表面光滑而整齐，边缘清晰。
2. 大小和形状链球菌菌落的大小和形状有一定的差异，取决于不同的链球菌种类。
一般来说，菌落的直径在1-2毫米左右，但也有大型链球菌菌落直径可达到5毫米以上。
菌落的形状可以是圆形、卵圆形、不规则形等。
3. 表面特征链球菌菌落的表面通常是光滑而湿润的。
观察菌落时，可以看到菌落表面有细小的颗粒状结构，这是由细菌细胞聚集形成的。
有些链球菌菌落表面还会出现透明的胶状物质，这是链球菌分泌的黏附物质。
4. 菌落边缘链球菌菌落的边缘通常是整齐而光滑的，在显微镜下观察时可以看到菌落边缘有一圈清晰的边界。
有些链球菌菌落的边缘可能会呈现出波浪状或齿状。
5. 生长速度链球菌菌落的生长速度较快，通常在24小时内可以形成可见的菌落。
菌落刚开始形成时，可能呈现出点状或绒毛状的小颗粒，随着时间的推移，颗粒逐渐增多并扩大，最终形成完整的菌落。
6. 颜色变化有些链球菌菌落在培养过程中会出现颜色变化。
例如，某些链球菌在培养基中产生酸性物质，导致菌落呈现出黄色或橙色。
此外，一些链球菌在培养基中产生酶类物质，可以使菌落呈现出绿色。
7. 光学性质链球菌菌落在显微镜下观察时，可以通过调整镜片的焦距来观察菌落的内部结构。
在透射光下观察，可以看到菌落内部有细菌细胞的排列和分布情况。
总结起来，链球菌菌落具有白色或乳白色的颜色，形态多样，大小和形状各异。
菌落表面光滑湿润，边缘整齐清晰。
菌落生长快速，有些菌落会产生黄色或橙色的颜色变化。
观察菌落时，可以通过显微镜观察到菌落的内部结构。
这些特征可以帮助我们鉴定和区分不同种类的链球菌。
对链球菌的菌落特征的研究，有助于深入了解链球菌的生物学特性，对其的病原性和致病机制进行研究，为疾病防控提供科学依据。
微生物学整理 简答题
二、简答题1.简述微生物学发展史上5个时期的特点和代表人物。
（1）史前期——朦胧阶段（约8000年前1676）特点：人们虽然没有看到微生物，但已经不自觉的利用有益微生物、防止有害微生物。
代表人物：中国古代劳动人民。
（2）初创期——形态学时期（1676-1861）特点：这一时期微生物学的研究工作主要是对一些微生物进行形态描述。
代表人物：列文虎克，微生物学的先驱者。
（3）奠基期——生理学时期（1861-1897）特点：这一时期的主要工作是查找各种病原微生物，把微生物学的研究从形态描述推进到生理学研究的新水平，建立了系列微生物学的分支学科。
代表人物：巴斯德（微生物学之父）和科赫（细菌学的奠基人）。
（4）发展期——生化水平研究阶段特点：微生物学的研究进入分子水平，微生物学家的研究工作从上一时期的查找病原微生物转移到寻找各种有益微生物的代谢产物。
代表人物：E.Büchner生物化学奠基人。
（5）成熟期——分子生物学水平研究阶段特点：微生物学从一门运用学科发展为前沿基础学科，其研究工作进入分子水平，而微生物因其不同于高等动植物的生物学特性而成为分子生物学研究的主要对象。
在应用研究方面，向着更自觉、更有效和可认为控制的方向发展，与遗传工程、细胞工程和酶工程紧密结合，成为新兴生物工程的主角。
代表人物：J.Watson和F.Crick：分子生物学奠基人。
2.巴斯德的贡献（1）否定自然发生学说（曲颈瓶实验），建立胚种学说。
（2）发酵是由微生物引起的。
（3）推动免疫学的产生。
（4）研究“酒病”、蚕病、鸡霍乱、牛羊炭疽病、人类狂犬病。
（5）发明巴氏消毒法。
（6）制作炭疽病和狂犬病的疫苗。
3.科赫的贡献（1）建立平板分离法、细菌染色，悬滴培养和显微摄影等技术。
（2）分离了炭疽芽孢杆菌、结核分枝杆菌和霍乱弧菌等重要病原菌。
（3）提出并证实病原菌必须遵循的科赫法则。
4.微生物共有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？五大共性：体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；分布广，种类多。