HPLC测定杭白菊茎叶蒙花苷含量
高效液相色谱法测定菊蓝抗流感片中蒙花苷含量
菊蓝抗流感片是丹东药业有限公司独家研制的 品种 ，收载于卫 生部药 品标 准 《 中药 成方制剂》
１ 仪器 与试药
取本 品 １ ，除 去包 衣 精 密 称定 研 细 ，取 约 ０片 １ｇ ，精 密 称 定 ，置 具 塞 锥 形 瓶 中 ，精 密 加 人 甲 醇 ０ Ｌ 引１０ｍ ，称 定 重 量 ，加 热 回 流［ ２ｈ ４ ，放 冷 ， １ 再 次称定重 量 ，用 甲醇补足 减失 的重量 ，滤过 ，取 续滤 液 ，即得 。
长为 ３６ｒ 。柱温为室温，进样量 ｌ Ｌ ２ ｍ 引 ｉ Ｏ 。
ｍ Ｌ于 ２ Ｌ量瓶中，分别加 甲醇定容并摇匀。分 ５ｍ
收稿 日期 ：２ １ —０ ０ ０ ４—１ ０ 作者简 介：魏敏 （９ ６ ） １５ 一 ，女 ，辽宁丹 东人 ，研究方 向：药品质量检验与分析。
第２
魏
敏 ，单淑敏 ，许海鹏 ：高效液相色谱法测定菊蓝抗流感片中蒙花苷含量
２ 方 法 与结果
依菊蓝抗流感片处方制备不含野菊花 的阴性样
品 ，按 “ ． ” 项下 方法制 备 阴性 样 品溶 液 ，进 样 ２３ 分析 ，结果 表 明阴性样 品无 干扰 。 。
２ ５ 线性 关 系考察 ．
２ １ 色谱条 件 ．
精密称取蒙花苷对照品 ２ ．２ｍ 于 １０ｍ 量 ５ １ ｇ ０ Ｌ
的范 围内具有 良好 的线性 关 系 。 ２ ６ 精 密度 试验 ．
２． ４ ５
３ 讨论
精密吸取蒙花苷对照品溶液 １ Ｌ ０ ，在上述色 谱条 件下 ，重 复进 样 ６次 ，计 算仪器精密度 Ｒ Ｄ Ｓ
高效液相色谱法测定三花膏中蒙花苷含量
高效液相色谱法测定三花膏中蒙花苷含量邱慧;戴群芳;汪保林【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2016(025)019【摘要】目的：建立测定三花膏中蒙花苷含量的高效液相色谱（HPLC）法。
方法以三花膏中野菊花药材中的主要活性成分蒙花苷为对照品，采用Phenomenex Luna C18反相色谱柱(250 mm ×4.6 mm，5μm )，以甲醇( A )－含10 mmol/L H3PO4的水溶液( B，48：52)为流动相进行等度洗脱，流速为1.0 mL/min，检测波长为334 nm，柱温为35℃。
结果蒙花苷质量浓度在4.67~46.74 g/L范围内与峰面积线性关系良好（ r=0.9999，n=5），加样回收率为99.75%，RSD为1.80%（ n=6）。
结论该方法简便、准确，专属性强，适用于三花膏中蒙花苷的含量测定。
%Objective To develop an HPLC method for the content determination of linarin in Sanhua Ointments. Methods Linarin, which was the main active ingredient of Flos Chrysanthemi Indici in Sanhua Ointments, was used as the reference standard. The isolation was performed on a Phenomenex Luna C18 reversed phase column ( 250 mm × 4. 6 mm, 5 μm ) with the mobile phase consisting of methanol-water ( containing 10 mmol/L H3PO4 ) ( 48 :52 ) , isocratic elution;the flow rate was 1. 0 mL/min, the detection wavelength was 334 nm and the column temperature was set at 35 ℃. Results The linearity of linarin was good in the range of 4. 67-46. 74 g/L ( r=0. 999 9, n=5 ) , the average recovery rate was 99. 75% and RSD was 1. 80%( n=6). Conclusion This method is simple,accurate, and specific for the content determination of linarin in Sanhua Ointments.【总页数】3页(P61-63)【作者】邱慧;戴群芳;汪保林【作者单位】江西省南昌市洪都中医院，江西南昌 330000;江西省南昌市食品药品检验所，江西南昌 330038;江西省南昌市食品药品检验所，江西南昌 330038【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0【相关文献】1.高效液相色谱法测定百花膏中芦丁含量 [J], 赵钟祥;蔡亚玲;李小莉;阮金兰2.高效液相色谱法测定三黄痔疮膏中盐酸小檗碱含量 [J], 黄星;李德勋;肖顺经;张远强3.高效液相色谱法测定藏药三味龙胆花丸中龙胆苦苷含量 [J], 张巍云4.高效液相色谱法测定清热止痛胶囊中蒙花苷的含量 [J], 王改平;倪梦梦;裴香萍;孙琳;魏孟玲;刘红凤5.高效液相色谱串联质谱法测定牙膏中蒙花苷含量 [J], 王亚茹; 熊小婷; 夏泽敏; 黄日林; 谭焯针; 佘文勋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
RP-HPLC对野菊花药材中蒙花苷和木犀草素的含量测定
RP-HPLC对野菊花药材中蒙花苷和木犀草素的含量测定黄兰芷;刘毅;蔡艳华【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2009(031)008【摘要】目的:研究不同产地,不同采收期以及不同加工方法对野菊花质量的影响,为野菊花的质量控制和深入开发提供理论依据.方法:采用高效液相色谱技术,测定野菊花主要有效成分蒙花苷和木犀草素,考察各样品有效成分差异.色谱柱Agilent ZORBAX SB C18(250 mm×4.6 mm,5 μm).测定波长:326nm;流动相:甲醇-水-四氢呋喃(50:46:4);流速:1.0 mL/min.结果:产地不同对野菊花质量有影响,但采收期对野菊花质量影响更大,加工方法对野菊花质量影响不大.结论:必须重视野菊花产地和采收期对药材质量的影响,尤其是采收期,对其质量的影响是所有因素中最主要的,应该在花初开放时采收.【总页数】5页(P1242-1246)【作者】黄兰芷;刘毅;蔡艳华【作者单位】重庆邮电大学生物信息学院,重庆,400065【正文语种】中文【中图分类】R283【相关文献】1.不同产地野菊花药材中蒙花苷及总黄酮含量测定 [J], 宋宏刚;裴彩云;赵韶华;宋剑;许红辉2.高速逆流色谱分离纯化野菊花中蒙花苷和木犀草素 [J], 王维娜;余琦3.反相高效液相色谱法同步测定野菊花中绿原酸、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和蒙花苷含量 [J], 林丽美;王永炎;许招懂;刘菊妍;张启伟;冯伟红;王智民4.RP-HPLC法同时测定野菊花中木犀草素-7-O-葡萄糖苷和蒙花苷 [J], 谭晓杰;贾英;李清;陈晓辉;毕开顺5.HPLC测定野菊花中蒙花苷与木犀草素的含量 [J], 崔兰冲;李小芩;韩莹;李发美因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法[发明专利]
![一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/ae8f60f7a76e58fafbb00365.png)
专利名称：一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法专利类型：发明专利
发明人：张云平,王华
申请号：CN201711363705.X
申请日：20171218
公开号：CN108061769A
公开日：
20180522
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法，属于化学检测领域。
旨在提供一种萃取迅速、检测精度高的测定野菊花中蒙花苷含量的方法。
该方法依次包括下述步骤：步骤1：将0.25g 野菊花粉末与0.3g硅藻土混合均匀放入ASE萃取池；步骤2：用丙二醇萃取，并收集丙二醇萃取液；步骤3：采用HPLC法测定丙二醇萃取液中的蒙花苷的含量。
本发明可代替药典方法对野菊花中的蒙花苷进行提取以及质量监控。
申请人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所
地址：543000 广西壮族自治区梧州市万秀区西环路中段198号
国籍：CN
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反相高效液相色谱法测定野菊花中蒙花苷的含量
ｉ ｆｍｅｈ ｎ ｌ ａｅ ｒ ｇｏ ｔａ ｏ —ｗ ｔｒ—ａ ｅｉ ｃｄｇａ ｉｌ ５ ： ４ ｎ ｃ ｔ ａ ｉ ｌｃａ（ ２ ｃ ６： ２） ｎ ｈ ｂ ｏｂ ｎ ｅｗ ｓｍｏ ｉ ｒｄ ａ ３ ｎ Ｒｅｕ ｔ ｈ ａｉｒｔ ｎ ａ ｄ ｔｅａ ｓｒ ａ ｃ ａ ｎｔ ｅ ｔ３ ４ ｍ． ｓ ｌｓＴ ｅｃ ｌ ａｉ ｏ ｂ ｏ
Ｋ ｅ ｏ ｄｓ： ｌｓＣ ｒｓｎｈ ｍｉＩｄｃ ； ｌ ａｉ Ｃ ｎｅ ｔ ｅｅｍｉａｉｎ； ＲＰ ＨＰ Ｃ ｙｗ ｒ Ｆ ｏ ｈｙａ ｔｅ ｎ ｉｉ ｉ ｒ ｎ ｎ； ｏ ｔｎ ｔｒ ｎ ｔ ｄ ｏ — Ｌ
野 菊花 为菊 科 植 物 野 菊 Ｃ ｒｓｎｈｍ ｍ ｉ ｉ ｍ Ｌ ｈｙａｔｅ ｕ ｄｃ ．的 干燥 头 水浴加热 回流 ３ ｉ， ｎ ｕ ０ｍｎ 如法操作 ， 循环 ５次 ， 分别获得样 ～样 ， 状花序 ， 性微寒 、 味苦辛 ， 归肝 、 心经 。功能清热解毒 ， 主治疔疮痈 密塞备用 。 上述实验重复 ４次 。得 ： 样 ～ 样 、 ……、 ．～ 样 共 样 ～， 肿， 目赤肿痛 ， 头痛眩晕 。野菊花主含黄酮类化合物 ， 以蒙花苷 并 ２ Ｏ份试样。各试样微孔滤膜 （ ． ５ｔ 过滤 ， ０ ４ ａ ｍ） 弃去初 滤液 ， 收集 的含量 最高 。在《 中国药典 》 ２ ０ （０ ５年版 ） 订起草 时， 修 笔者 续滤液照 “ ． 样 品测定 ” ２９ 项下方法测定蒙花苷峰的峰面积 。 建立了 Ｒ Ｐ—Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ法测 定其 中蒙花 苷含 量的方 法 ， 取得 了满意 各实验 以第 ５份试样 （ 最后 一次取样 ） 的峰面积为 １０ ， ０ ％ 分 的效果。由于现 版药典 《 起草说 明》 未能公 开发行 ， 故而将 有关 别计算第 １至第 ４份试样 的峰面积百分数。见表 １ 。 研究结果报道如下 ， 以供参考 。 取 ４次实验均值 ， 以时 间为横坐标 ， 峰面积百分 数为纵 坐标 １ 器 材 作 曲线 图 。见 图 １ 。 Ｖ ＲＡ Ａ Ｉ Ｎ高效液相 色谱仪 ， ｒ Ｓａ ２ ５泵 ，ｒ Ｓａ ４ ０自动 Ｐｏ ｔ １ ｒ Ｐｏ ｔ １ ｒ 表 １ 回流 提 取 时 间 与 提 取率 进样系统 ，ｒ Ｓ ｒ １ Ｐｏ ｔ ０检测器 ， ａａ ｔ ． ａ３ Ｖ ｒ ｎＳａ ５ ５色谱 工作站 。Ｓ ｉ ｉ ｒ ｈ— ｍ ｄｕ高效 液相 色 谱仪 ，Ｃ １Ａ ａｚ Ｌ 一 Ｄ泵 ， Ｐ 一１Ａ检 测 器 ， 国 ０ ＳＤ ０ 美 Ａ ａＳａ 色谱 工作 站。Ｈａｂ ｎ一 ｌ ｎ ｔｒ ｎ ｏ ７Ｃ ８ 色谱柱 （ ． ｍ×２０ｍ ４ ６ｍ ５ ｍ， ５ ｍ） 江苏汉邦科技有限公 司 ； ｉ ｏｓＴ 色谱柱 （ ． ｍ ： Ｄａ ｎｉ Ｍ Ｃ ｍ ｌ ４ ６ｍ ｘ ５ ｉ， Ｉ 。Ｖ ＲＡ Ａ Ｙ ５ ｒｂ ２０ｍｎ ５ ｘ ｍ） Ａ Ｉ Ｎ Ｃ Ｒ ０ Ｐｏｅ紫外 分光 光度 计 ， Ｃ ｒ ｎｕ ａ Ｗｉ Ｖ色谱 工作 站。ＭＥ Ｆ Ｅ Ｇ １５ Ａ ０ ｙ Ｔ Ｌ ＲＡ ３ 、 Ｂ２４一Ｎ电子天 平 。Ｙ Ｂ—Ｚ真空恒温干燥箱 ： 天津药典标准仪器厂。 流动相用 甲醇 、 乙腈为 色谱 纯 ， 为注射用水 。试 药均为 分 水 析纯 。试液按《 中国药典｝ ０ ０年 版 Ｉ 附录方 法配制 ， ２０ 部 一般 溶 液按常规方法制备。 野菊花 对 照 药 材 （ ９ ５２ ０ ０ 、 花 苷 对 照 品 （ ５ ８— ０ ９ —００ ２） 蒙 １２ ２０ ０ ） 中 国药 品 生 物制 品检 定 所 。 ０ １１ ： 野菊花药材为全 国各地药检所 提供的商 品药材样 品及 中 国 药 品生物制 品检定所标本馆馆 藏标本 。
建立HPLC同时测定杭菊叶中5种绿原酸类成分及木犀草苷的方法
建立HPLC同时测定杭菊叶中5种绿原酸类成分及木犀草苷的方法关键词：杭菊叶；绿原酸；黄酮；生长过程；动态变化；杭白菊又称杭菊，是菊科植物Chrysanthemum morifoliumRamat.的干燥头状花序，具有散风清热，平肝明目、清热解毒功效[1],是着名的浙江道地药材“浙八味”之一。
杭菊在采收的同时，会产生大量的茎、叶，并且产量比菊花大的多，这些茎、叶往往被视作副产品丢弃，而菊叶具有清肝明目、解毒消肿等功效，可用于头风、目眩、疔疮、痈肿等证[2],具有一定的药用价值。
杭菊叶中尚含有大量有机酸、黄酮等成分，其中绿原酸类成分含量较高，包括单咖啡酰基奎宁酸：绿原酸（3-O-咖啡酰基奎宁酸）、新绿原酸（5-O-咖啡酰基奎宁酸）、隐绿原酸（4-O-咖啡酰基奎宁酸），二咖啡酰基奎宁酸：异绿原酸A （3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸）、异绿原酸B（3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸）、异绿原酸C （4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸），具有抗诱变、抗菌、抗病毒、清除自由基、抗氧化、降血压血脂等多种生物活性[3,4].杭菊为浙江道地药材，主产于桐乡等地，杭菊叶资源丰富，为了合理开发和综合利用杭菊叶，本文建立了HPLC同时测定菊叶中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、木犀草苷的方法；分析了杭菊叶不同生长过程中绿原酸类成分与木犀草苷的变化趋势；并比较了同期采收的杭菊叶与杭菊花中绿原酸类成分与木犀草苷的含量差异，以期为确定杭菊叶的采收时间、质量控制、资源综合利用提供科学依据。
1 材料1.1 仪器Thermo U3000型高效液相色谱仪，1/10万电子天平（Sartorius R200D）；B3200S-T 超声机（必能信超声有限公司）；Simplicity 纯水仪（美国密理博公司） .1.2 试药新绿原酸（15012821）、绿原酸（14111207）、隐绿原酸（15020603）、异绿原酸A （13041309）、异绿原酸B（15042210）、木犀草苷（13100904）购自成都普瑞法科技开发有限公司，其纯度均≥98%.甲醇（色谱纯140405）购于天津四友，水为超纯水（自制），甲醇、磷酸均为分析纯。
HPLC法测定消炎片中蒙花苷的含量研究
HPLC法测定消炎片中蒙花苷的含量研究辛颖【摘要】目的：使用反向高效液相法对消炎片中蒙花苷的含量进行测定。
方法：使用Aglient Zorbax SB-C1（84.6mm×250mm,5μm）色谱柱,以甲醇-乙腈-0.04%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速：1.0ml/min;检测波长：334nm;柱温：35℃;进样量：10μl。
结果：蒙花苷有较宽的线性范围和良好的线性关系,回归方程为A=3.64011c-10.28,r=0.9998（n=5）;加样平均回收率为103.12%,RSD=0.73%（n=6）。
结论：该方法具有快速、高效、准确的特点,适合用于控制消炎片中野菊花质量的控制。
【期刊名称】《黑龙江科技信息》【年(卷),期】2012(000)029【总页数】1页(P13-13)【关键词】消炎片;蒙花苷;HPLC法;含量测定【作者】辛颖【作者单位】哈药集团三精制药股份有限公司,黑龙江哈尔滨150001【正文语种】中文【中图分类】G消炎片具有清热解毒的功效，临床上常用于上呼吸道感染引起的发热、支气管炎的咳嗽有痰及疖肿等，其主要成分是蒲公英、紫花地丁、野菊花和黄芩。
现行的质量标准只有显微结构鉴别和黄酮类化合物定性鉴别，尚无对药物中野菊花的主要成分蒙花苷的定量检测。
[1]本文通过HPLC法对消炎片中的蒙花苷含量进行测定，以确定药物中野菊花质量的优劣，现报道如下：1.1 实验仪器。
Waters 600-2487高效液相色谱仪（Waters-600四元高压输出泵，Waters-2487双通道紫外可见光检测器，Waters-Millennium32色谱管理软件），BSA2234型电子分析天平（Sartorius），UV-9000双光束紫外-可见分光光度计（上海元析仪器有限公司），AS20500BDT超声波清洗器（杭州汇尔仪器设备有限公司）。
1.2 实验材料。
蒙花苷标准品（上海源叶生物科技有限公司，批号：90111，纯度＞97%），3批消炎片（白山市长白山制药有限责任公司，批号：86903289000276；黑龙江鼎恒升药业有限公司，批号：86903728000829；修正药业集团股份有限公司，批号：86903594001302），其他所用试剂均为色谱纯。
HPLC法测定菊花及其炮制品中主要成分的含量
HPLC法测定菊花及其炮制品中主要成分的含量付美霞;胡伶俐【摘要】目的:建立检测菊花及其炮制品种主要成分的方法,并对三批菊花及其炮制品中的主要成分绿原酸(C16H18O9)、木犀草苷(C21H20O11)、异绿原酸A(C25H24O12)进行含量测定.方法:色谱柱Agilent XBD C18(4.6 mm×250 mm,5.0 μm),流动相乙腈/0.1％磷酸,流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长348 nm.结果:三种化合物的分离度较好,理论塔板数较高,绿原酸:A =8.278 71C +4.935 05,R=0.999 9(n =7),浓度范围为8.656～86.56 μg/mL;木犀草苷:A=15.866 45C-2.036 02,R=0.999 9(n=7),浓度范围为4.16～41.60 μg/mL;异绿原酸A:A=8.514 90C+1.2142 8,R=1.0(n=7),浓度范围为18.92～189.20 μg/mL,三种化合物的峰面积和浓度有良好的线性关系.结论:本方法能够准确快速地对菊花及其炮制中,主要成分进行定量分析,具有简便、稳定、准确等特点.【期刊名称】《中国野生植物资源》【年(卷),期】2015(034)001【总页数】4页(P26-29)【关键词】HPLC;菊花;绿原酸;木犀草苷;异绿原酸A【作者】付美霞;胡伶俐【作者单位】武汉市第五医院,湖北武汉430050;武汉市第五医院,湖北武汉430050【正文语种】中文【中图分类】R284.1菊花是我们生活中最常见药食两用的中药之一，来源于菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)干燥的头状花序，具有散风清热、平肝明目、清热解毒，用于风热感冒，头痛眩晕，目赤肿痛，眼目昏花，疮痈等[1]。
绿原酸、异绿原酸A和木犀草苷是菊花中的主要化学成分。
绿原酸具有清除自由基、抗菌消炎、抗病毒、降糖、降血脂、保肝利胆等多种功效[2-4]；异绿原酸A与绿原酸的药理活性相似，具有抗菌、抗病毒清除自由基、兴奋中枢神经系统等多种生物活性作用[3-7]；木犀草苷具有清热解毒、抗炎、镇咳、祛痰等作用[8-10]。
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HPLC测定杭白菊茎叶的蒙花苷的含量
【摘要】目的：测定杭白菊茎叶中蒙花苷的含量。
方法：以甲醇-乙腈（15:85）为流动相a，0.1%磷酸溶液为流动相b，梯度洗脱；色谱柱为welch materials aq-c18 (5μm, 4.6mm×250mm)；检测波长：334nm；流速：1.0ml/min；进样量：20μl。
结果：蒙花苷在0.401~2.05µg线性关系良好，平均回收率为98.67%，rsd 小于1.68%。
13批杭白菊茎叶中蒙花苷的含量为（0.258±0.089）%。
结论：本方法重现性好，专属性强，为杭白菊茎叶的质量控制和开发利用提供科学依据。
【关键词】杭白菊茎叶；蒙花苷；含量测定
杭白菊是菊科植物菊chrysanthemum morifolium (ramat.)的干燥头状花序，具有“散风清热，平肝明目”等功效[1]，临床上主要用于治疗风热感冒、头痛眩晕、目赤肿痛等疾病。
国内外对杭白菊（花序）的化学成分、药理作用、测定方法等方面已有大量研究[2-6]]，目前关于杭白菊茎叶的研究也有少量报道[7-9]]。
具报道杭白菊茎叶也具有“清肝明目、解毒消肿”等功效[10]，药理研究表明其具有有抗氧化、抗菌等作用[11]。
为了进一步研究杭白菊茎叶的药用价值，本试验对4个不同种植产地的杭白菊茎叶中的蒙花苷进行了含量测定，本研究为杭白菊茎叶的综合开发利用提供依据。
1仪器与材料
仪器：waters 2695 高效液相色谱仪：(四元泵、2998光(电)二
极管矩阵检测器、empower色谱工作站)；十万分之一天平（sartorius 公司）。
试剂：甲醇、乙腈为色谱纯；水为去离子水；磷酸、乙醇为分析纯。
生药样品：杭白菊茎叶采摘于浙江省桐乡市各杭白菊种植产地，由中山市医药公司提供。
所采摘样品室温阴干，分装密封后贮存。
蒙花苷对照品（1528-200910）由中国药品生物制品检定所提供。
2 色谱条件
色谱柱：welch materials aq-c18 (5μm,4.6mm×250mm)；流动相：甲醇-乙腈（15:85）为流动相a，0.1%磷酸溶液为流动相b，梯度洗脱；检测波长：334nm；流速：1.0ml/min；柱温：40℃；进样量：20 μl。
含量测定和指纹图谱的梯度洗脱时间程序分别见表1,色谱图见图1。
3试验溶液制备
3.1对照品溶液的制备取蒙花苷对照品约10mg，精密称定，置于50 ml量瓶中，加70%乙醇溶液至刻度，摇匀，即得。
（每1ml含蒙花苷205μg）
3.2供试品溶液的制备取杭白菊茎叶细粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶，精密加入70%乙醇50ml，密塞，称定重量，加热回流2小时，放冷，冷却至室温，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
4方法学考察
4.1线性关系
分别精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml蒙花苷对照品溶液置10ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀。
按上述色谱条件进样测定，以峰面积对进样量进行线性回归，得线性方程为：a=2.000×109c ＋1.597×104 ，r=0.999 8。
结果表明：蒙花苷在0.41~2.05µg 范围内线性关系良好。
4.2精密度试验取同一对照品溶液，按上述色谱条件连续进样6次，测得蒙花苷峰面积的rsd为0.96%、。
4.3重复性试验取同一批供试品6份，按“3.2”项制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，结果蒙花苷为0.312%；rsd为1.25%。
4.4稳定性试验取同一供试品溶液，按上述色谱条件分别于0、2、4、8、12、24h进样测定含量，蒙花苷含量的rsd为1.02%。
4.5加样回收率试验取已知含量的样品0.5g，精密称定，精密加入蒙花苷对照品1.658mg，照“3.2”项下操作，测定含量，结果蒙花苷的平均回收率分别为98.67%，rsd为1.68%（n=6）。
5样品测定
取杭白菊茎叶样品，照“3.2”项下制备供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，计算蒙花苷的含量，结果见表2。
6讨论与结论
6.1方法学验证表明，在实验条件下，用rp- hplc法测定杭白菊茎叶中蒙花苷的含量，其色谱系统能够适应测定需要，分离度、重复性试验能够满足药典要求。
样品重复性实验、样品溶液稳定性、加样回收率、耐用性实验结果均很满意。
6.2耐用性实验
6.2.1色谱柱的选择分别比较了agilent tc-c18（5μm,4.6mm ×250mm）、grace smart rp18(5μm,4.6mm×250mm )和welch materials aq-c18（5μm,4.6mm×250mm），使用welch materials aq-c18，能实现蒙花苷的完全分离，基线稳定，因此选用该色谱柱。
②流动相的选择比较了乙腈-0.1%磷酸水、甲醇-0.1%磷酸水、甲醇-乙腈（20：80）-0.1%磷酸溶液，甲醇-乙腈（15：85）-0.1%磷酸溶液等梯度洗脱系统，发现选用甲醇-乙腈（15：85）-0.1%磷酸溶液梯度洗脱系统，分离度好，基线平稳。
6.2提取条件的选择。
分别考察了提取方法（索氏提取，超声提取，加热回流提取，沸水浴回流提取）、提取溶剂（水，30%，50%，70%，90%乙醇）、提取次数（1，2，3次）。
比较色谱图中各主要成分的峰面积，选择70%乙醇水浴回流2小时即能提取完全。
6.3研究结果表明，浙江省桐乡市4个产地的杭白菊茎叶均检出蒙花苷，杭白菊茎叶有一定的药用价值。
本研究为杭白菊芭叶的开发利用提供一定参考价值。
参考文献
[1] 中国药典[s].2010年版，一部，292.
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