微生物检验实验室致病性大肠埃希菌标准操作规程

微生物检验实验室致病性大肠埃希菌标准操作规程

1. 概述

致病性大肠埃希菌包括肠产毒型大肠埃希菌、肠致病型大肠埃希菌、肠侵袭型大肠埃希菌、肠出血型大肠埃希菌和肠凝聚型大肠埃希菌5群。与普通大肠埃希菌的生化反应相似，应结合血清反应（O、H和K抗原）、毒性试验（ST和LT肠毒素）和临床症状，分别鉴定5型致病性大肠埃希菌。

2. 标本类型

粪便标本。

3. 鉴定

3.1 形态染色与一般大肠埃希菌相同。

3.2 培养特性在麦康凯琼脂平板上形成不透明、粉红色或无色菌落。

3.3 生化反应与普通大肠埃希菌相似。

3.4 鉴别要点在山梨醇麦康凯琼脂平板上形成无色菌落。IMViC++--，

3.5 不发酵或迟发酵山梨醇，为本菌的主要特征。

3.6 操作步骤

3.6.1 氧化酶试验参见氧化酶试验标准操作规程。

3.6.2 致病型大肠埃希菌的鉴定

肠致病型大肠埃希菌（EPEC）婴幼儿水样或蛋花汤样便，鉴定为大肠埃希菌后用EPEC分型血清作O:H分型。

肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）水样便，鉴定为大肠埃希菌后需要测定ST和LT两种肠毒素及血清分型。ST的检查可用兔肠段结扎试验，免疫学或分子生物学方法（DNA 探针）检测。

肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）细菌性痢疾样便，生化特性与志贺菌相似，不发酵或迟发酵乳糖，赖氨酸脱羧酶阴性，无动力，符合EIECO:H血清分型，豚鼠眼结膜试验、HELA细胞侵入试验阳性。

肠出血型大肠埃希菌(EHEC) 早期为水样便后为血便，有50多个血清型，最具代表性的是O157：H7不发酵或迟发酵山梨醇，在山梨醇麦康凯琼脂平板上形成无色菌落，可用EHECO:H诊断血清进行分型。

4. 药敏

参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件。

5. 质量控制

参见质量管理程序。

6. 检验结果解释与分析

疑似致病性大肠埃希菌感染，分离菌应先鉴定为大肠埃希菌，再通过不同的方法鉴定到种型，如分离到上述4种腹泻病原菌，应立即向临床发出报告。

7. 临床意义

7.1 EHEC主要引起严重的出血性肠炎，临床表现为低热、痉挛性腹痛，开始水样便，继而血样便。

7.2 EPEC主要引起婴儿腹泻,伴有低热、呕吐和腹泻，黏液便不带血。轻

者不用抗生素治疗，严重者需用抗生素治疗。

7.3 ETCC引起旅游者和婴幼儿腹泻的主要病原菌，临床表现为水样腹泻、恶心、呕吐、寒战，有时发生脱水及中毒症状。轻者不用抗生素治疗，严重者需用抗生素治疗。

7.4 EIEC要侵入结肠粘膜上皮，引起志贺菌样腹泻（粘液脓血便），引起痢疾样腹泻，发热和肠炎，黏液血便，便中有红、白细胞。

8. 鉴定流程

参考文献

[1] 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2008

编写人：AAA、BBB 操作人：本室操作人员

批准人：