铁皮石斛原球茎的富硒培养条件优化

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铁皮石斛的组织培养与快速繁殖(2)

铁皮石斛的组织培养与快速繁殖(2)
2008 年 2 月 Feb. 2008
热带农业科学 CHINESE JOURNAL OF TROPICAL AGRICULTURE
第 28 卷第 1 期 Vol.28, No.1
铁皮石斛的组织培养与快速繁殖①
秦廷豪② (四川省制糖糖料工业研究所 四川资中 641200)
摘 要 以 铁皮 石 斛(Dendrobium candidum Wallich ex Lindley)无菌 苗 分 成的 茎 段 、带顶 芽 的 茎段 和 根 蔸 3 类 外 植 体在 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L 上均 能 诱 导出 丛 芽 , 只有 根 蔸 能诱 导 原 球茎 , 且 诱 导丛 芽 倍 数 高 于 其 它 两 类 ; 在 此 培 养 基 上 原 球 茎 的 增 殖 系 数 高 于 其 它 组 合 的 培 养 基 ; 温 度 对 原 球 茎 继 代 增 殖 有 明 显 影 响 , (25± 1)℃最 适合 原 球 茎的 生 长 繁殖 ; 温 度 对 生 根 的 影 响 较 为 明 显 , 较 低 的 温 度(23℃)有 利 于 减 少 分 生 苗 的 数 量 , 形 成健壮高大的试管苗, 适量的香蕉能促进形成粗壮的根和苗。 关键词 铁皮石斛 ; 组织培养 分类号 S567.23+9
热带农业科学
第 28 卷第 1 期
1. 1 材料 将铁皮石斛茎段诱导出的无菌苗依苗的高度分
切成 2~3 节, 2 个 假鳞茎为一 节, 切除过 长 的 根 系, 留约 1 cm 长的根, 从根茎处将根、茎分开, 茎 以下称为根蔸, 以上为茎段。上述切段外植体分为 带顶芽的茎段、茎段和根蔸。
原 球 茎 诱 导 培 养 基: ① MS+6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.2 mg/L; ② MS +6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L; ③ MS +6-BA 2.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L; ④ MS +6-BA 4.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L; ⑤ MS +6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L; ⑥ MS+6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.5 mg/L; ⑦ MS +6-BA 0.5 mg/L +NAA 1.0 mg/L。

铁皮石斛栽培标准

铁皮石斛栽培标准

铁皮石斛栽培标准
铁皮石斛是一种珍贵药材,其栽培标准如下:
1.土壤:铁皮石斛喜欢生长在肥沃、排水良好、PH为6.5-7.5的土
壤中。

2.温度:铁皮石斛适宜在温暖潮湿的环境中生长,温度保持在15℃
至30℃之间。

3.光照:铁皮石斛需要充足的阳光照射,但在炎热的夏季必须要遮荫。

4.水分:铁皮石斛是喜水植物,需保持土壤中的湿度,但不宜过度浇水。

5.施肥:在生长期间,可根据需要进行适当的追肥,以提高产量和品质。

6.种植:种植时应注意铁皮石斛的生长习性,可采用栽培架等方式,
以方便栽培和管理。

7.病虫害防治:铁皮石斛易受到蚜虫、白粉病等病虫害的威胁,应及
时采取措施进行防治。

综上所述,铁皮石斛的栽培标准主要包括土壤、温度、光照、水分、
施肥、种植和病虫害防治等方面的要求。

只有严格按照标准进行栽培和管理,才能保证铁皮石斛的产量和品质。

铁皮石斛组织培养研究进展组织培养.

铁皮石斛组织培养研究进展组织培养.

铁皮石斛组织培养研究进展1、1 种子萌发1.2 基本培养基铁皮石斛种子在N6,改良N6,MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6,White等培养基上均可萌发。

赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响,除残外,所有的基本培养基均优于其减半培养基,其中以N6最好,SH 、Kn 、MS 次之,l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。

曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH 、改良N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养,得出最适培养基为改良N6或自制PT 培养基。

罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响,30d 种子发芽率均达到95 % ,但1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。

1.3 激素在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发,浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长,过高起抑制作用。

2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。

6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。

KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大,当浓度超过1mg/L 时,对胚萌发和成苗起抑制作用。

ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用,但张铭等发现ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量,浓度以0.5mg/L为最佳。

1.4 天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发,但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响,干扰其正常发育过程。

1.5 炭源在组培过程中适当添加活性炭,可以吸附代谢过程中产生的废弃物,防止组织褐变,并刺激胚胎的发生与生根,可加人2 %蔗糖。

曾宋君等在改良N6+NAA 0.2mg/L 的最适培养基上,发现以白糖、片糖为炭源时,胚萌发和成苗的效果比蔗糖好,这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2 原球茎增殖2.1 基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS,MS等作为基本培养基。

铁皮石斛组织培养的工艺条件研究

铁皮石斛组织培养的工艺条件研究

铁皮石斛组织培养的工艺条件研究作者:田思源来源:《科技资讯》2012年第08期1铁皮石斛的概述及其药用价值铁皮石斛,为石斛属珍稀濒危药用植物,俗称铁皮枫斗,又称黑节草,属于兰科附生兰类,是一种珍稀的药用植物和和名贵的室内观赏植物。

野生的铁皮石斛大多分布在东亚、东南亚及澳大利亚等国家和地区。

在我国主要分布于秦岭、淮河以南的云南、广西、贵州、浙江等地的山区[1]。

铁皮石斛的种子极小、无胚乳,自然条件下需要与某些真菌共生才能萌发,很难用实生苗栽培;而传统的分株、扦插等方式的繁殖率极低,加上人为的过度采挖和破坏生境,其资源已濒临灭绝,被国家列为重点保护的药用植物之一。

鉴于铁皮石斛在我国栽培的地域局限性,规模化开发石斛活性物质急需要开辟新的途径。

而铁皮石斛组培以其繁殖规模大、速度快为优势是生产有效物质的一种有前途的途径和手段,是解决其资源紧缺问题的有效途径。

因此对铁皮石斛组织培养及其工艺条件的深入研究就具有了非常重要的意义,它不仅具有显著的经济效益和社会效益,同时也具有显著的生态效益。

2多种条件对铁皮石斛组织培养的影响2.1 不同添加物对铁皮石斛外植体的影响香蕉、苹果、椰子等水果中含有多种天然植物激素及丰富的无机盐离子,对铁皮石斛幼芽增殖有明显的促进作用。

在组织培养中添加香蕉泥、苹果汁、椰子汁可以丰富石斛快繁时所需要的多种激素。

从实验数据中得出香蕉泥效果最好。

刘骅[2]等研究表明,基本培养基以B5或1/2MS,选用10%的香蕉水提物,NAA 2mg/L是铁皮石斛试管苗壮苗的适宜培养基。

马治国等对铁皮石斛原球茎分化适宜培养基研究也得出相似结论。

2.2 不同温度对铁皮石斛外植体生长的影响不同温度对铁皮石斛外植体的生长有十分明显的影响。

在温度为25℃比20℃、30℃和35℃更有利于外植体的出芽率和生长势的提高。

20℃时,石斛出芽率也是较高的。

但是30℃之后,出芽率急剧下降,35℃时石斛出芽受到完全抑制,出芽率为零。

铁皮石斛原球茎多糖的诱导、提纯、理化性质及生物活性研究

铁皮石斛原球茎多糖的诱导、提纯、理化性质及生物活性研究

铁皮石斛原球茎多糖的诱导、提纯、理化性质及生物活性研究多糖是石斛的主要药用成分。

现代药理学研究表明,石斛多糖具有延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤、降血糖等多种药理活性。

铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl)是石斛中的极品,具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳的功效。

近年来,由于过度消耗,石斛野生资源已濒临绝迹。

由此,提出铁皮石斛胚性组织原球茎(protocorm)替代其原植株成为药源的可能性。

但迄今有关铁皮石斛原球茎多糖的研究尚未见报道。

本研究旨在优化铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的培养条件,了解铁皮石斛原球茎多糖的理化性质和生物活性。

研究结果如下:1.铁皮石斛原球茎悬浮培养诱导高含量多糖的研究(1)铁皮石斛原球茎生长、多糖积累以及营养物消耗的动态变化为筛选适合铁皮石斛原球茎的最佳培养方式,对比了固体培养和液体悬浮培养这两种培养方式,并研究了液体悬浮培养基质的营养消耗趋势,同时分析了液体培养液中pH值和电导率的变化。

结果表明:原球茎在固体培养条件下,培养60d后干重达到最大为13.40g /L,多糖产量最大值为2412.5mg/L,在液体悬浮培养条件下,干重需要50d 达到最大为17.64g/L,多糖产量最大值为3081.2mg/L,液体悬浮培养在干重量、多糖含量和多糖产量等方面优于固体培养。

在70d的周期内,悬浮培养原球茎以近“S”型曲线生长;原球茎在培养初期生长较缓慢,培养10d后原球茎生长进入快速生长期,原球茎干重量在第50d有最大值(17.64g/L),随后下降,60d后原球茎开始衰亡。

多糖的积累与原球茎生长有一定的相关性,多糖含量从10d起开始逐步增长,30d达到最大(213.5mg/g·DW),而后迅速降低。

在悬浮培养过程中,糖和磷的消耗速度较快,铵态氮优于硝态氮被吸收利用;pH值在培养前10d快速下降,随后又逐渐回升;在指数生长期,培养基中电导率降低与原球茎干重量增加之间有线性负相关性。

铁皮石斛种植条件和方法

铁皮石斛种植条件和方法

铁皮石斛种植条件和方法
铁皮石斛是一种常见的兰花,具有较高的观赏和药用价值。

以下是铁皮石斛的种植条件和方法:
1. 环境条件:
- 铁皮石斛喜欢温暖湿润的环境,适宜生长温度为20-25摄氏度。

- 直接阳光照射时间不宜过长,4-6小时的散射光照可以满足其生长需求。

- 空气湿度较高,50-60%的相对湿度是较为适宜的。

2. 培养介质:
- 铁皮石斛对土壤要求不严格,可使用通透性好、肥沃的兰花专用土。

- 培养介质的pH值在6-7之间最适宜。

- 可以在介质中添加适量的腐叶土或泥炭,以增加负离子含量和增强水保持能力。

3. 浇水和施肥:
- 铁皮石斛喜欢湿润的环境,但要避免积水,过度浇水容易导致根部腐烂。

- 灌溉时可使用温水,每周保持根部湿润,但干燥适度有助于花朵的形成。

- 每月施一次稀薄的肥料,可选择兰花专用肥料或有机肥料。

4. 光照管理:
- 铁皮石斛需要适量的光照进行正常的光合作用,但阳光直射时间不宜过长。

- 在夏季或强光环境下,可进行适当的遮阴措施,如白纱遮光。

5. 空气湿度管理:
- 铁皮石斛对空气湿度较高的环境较为适宜,可以通过增加杯盘水或设置加湿器等方式提高空气湿度。

- 可以定期用喷雾器给植株喷水,但避免水珠在花朵上停留。

6. 移栽管理:
- 铁皮石斛不宜频繁移栽,最佳移栽时间是秋季或春季。

- 移栽时注意保护根系,尽量避免对根系的伤害。

以上是铁皮石斛的种植条件和方法的一些基本要点,希望对您有帮助。

铁皮石斛的组织培养技术

铁皮石斛的组织培养技术

铁皮石斛的组织培养技术简介铁皮石斛(Scientific name: Dendrobium officinale),是一种珍贵的药用植物,在中医药中有着悠久的历史和广泛应用。

铁皮石斛的组织培养技术是指利用无菌培养方法,通过细胞分裂和再生,培育大量优质的植株,以满足人们对铁皮石斛的需求。

本文将介绍铁皮石斛的组织培养技术的基本步骤和注意事项。

步骤1. 选择合适的外植体材料:铁皮石斛的外植体材料通常选取新鲜的茎段、叶片或花轴,并确保这些材料来自无病虫害的植株。

2. 表面消毒处理:将收集到的外植体材料进行表面消毒处理,常用的消毒剂包括漂白粉和酒精。

消毒时间和浓度应根据不同的外植体材料进行调整。

3. 建立无菌培养基:制备含有适当激素和营养物质的无菌培养基。

常用的基本培养基是MS培养基和B5培养基。

可以根据实验需要调整培养基的成分和浓度。

4. 培养和增殖:将表面消毒后的外植体材料放入含有适当培养基的培养瓶中,并置于暗室或恒温箱中进行培养。

光照和温度是影响铁皮石斛组织培养的重要因素,应根据植物的生长性进行调控。

5. 分化和再生:通过植物激素的投入和适当调控培养条件,促使外植体材料分化和再生成优质的铁皮石斛植株。

这一步骤往往需要持续几个月到数年的时间。

注意事项1. 保持无菌条件:组织培养需要在无菌条件下进行,以避免外源病原微生物的污染。

实验器具、培养基和操作环境必须经过严格的消毒和无菌处理。

2. 控制培养基成分和浓度:培养基的成分和浓度对植物的生长和分化起着重要的影响,需要根据不同的外植体材料和培养阶段进行合理的调整。

3. 确保适当的光照和温度:铁皮石斛对光照和温度有一定的要求,光照不足或温度过高都会影响植物的生长和分化。

应根据植物的生理特性,设置合适的光照和温度条件。

4. 定期检查和处理:组织培养过程中,应定期检查植株的生长状态和培养基的污染情况,并采取适当的措施处理。

需要及时除去培养瓶内的污染物,以保证植株的健康生长。

浅析铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化

浅析铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化
于铁皮石斛原球茎的增殖。
关键词 : 铁皮 ;石斛原球 茎增殖配方;优化 中图分类号 :5 6 7 . 2 文献标识码 :A
铁皮 石斛 ( H e r b a D e n d r o d i i O f i c i n a l i s ),兰科 多年生 附 生草本 植物 。生于海拔 达 1 6 0 0 m的 山地 半阴湿 的岩石 上 ,喜 温 暖湿润气候 和半 阴半 阳的环境 ,不耐寒 。一 般均能 耐 一 5 ℃ 的低 温。石斛可分 为黄草 、金钗 、马鞭等数 1 0种 ,铁 皮石斛 为石斛之极 品,由于其具有药用价值和保健 功能。是历代宫廷 贡 品,其价值就是药用植物界的 “ 大熊猫” , 名列 中华九大仙 草之首野生 “ 铁皮”石斛是 国家重点二 级保护 的珍稀濒危植物 , 它 因表皮呈铁绿 色而得名 _ I J 。铁皮石斛具有独特 的药用价值 , 以其茎入药 ,中药名 :石斛 ,属补益药 中的补 阴药 】 。 自古以来 ,人们用药都是依靠上 山采挖收集野生植株 ,而 野生石斛 的繁殖率又极低 ,人们如此只采挖野生的石斛却 不人 工种植 ,导致石斛 中的上 品—_ _ - 铁皮石斛逐渐枯竭并引发其价 格 一涨再涨 !目前 ,国际市场 l k g 铁 皮石斛 干品高达 1 0 0 0— 3 0 0 0 美元 ,鲜 品收购 价 l k g 仍在 2 0 0 0 元 以上。铁皮石斛 的逐 渐枯竭 , 再加上 开发 生产其药用 、保健 、美容产 品开发商家的 逐 年增 加 ,导致铁皮石斛 的成 品几乎 已无处收购 、有价无货 , 人 工种植 迫在眉睫。随着科技 的发展 和社会 的进步 ,人们也认 识 到这个严 峻的问题 ,也有人员专 门从事人工种植铁皮石斛 , 但 是碍于石斛的生长周期 长 ,生长环境要求高 ,人工种植产业 发展前景不是很 乐观。同时 ,许 多国内外学者也利用铁皮石斛 种子和茎尖来进行组织培养的研究 , 成果可观 , 但还是存在试 管苗污染严重 、增殖系数低 、试管苗茎 细弱、移栽成 活率不高 等诸多原因 ,影响了铁皮石斛试 管苗快 繁和大规模 的工厂化种 植 。在石斛组织培养过程 中,石斛原球 茎增殖 又十分关键 。通 过诱导石斛产生大量原球茎 ,将所 得的原球茎切分进行分化形 成大量丛生芽 ,再将丛生芽分苗 ,培养 成小 苗 , 小苗生长成一 定高度 的植株就可 以炼苗种植 ,而达到快速繁殖 的 目的。用铁 皮石斛茎段诱导 出的原球茎通过在不 同的基本培养基 、碳 源 、 激 素水平 、添加物 及培 养方式 进行增殖 培养 ,观察其 生长情 况 。光照 时间 、强度 恒定 ,上午 8 : 0 0~ 1 1 : 3 0 ,下 午 1 4 : 3 0 1 7 : 3 0 ,光 照强 度 1 0 0 0~ 1 6 0 0 l x ,温 度 ( 2 5 ±1 )℃。 以找 出 最适合铁皮石斛原球茎增殖 的培养基以及培养方 式 ,为人工种 植铁皮石斛提供技术支持和种源 口 1 。
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对铁皮石斛 的深人研究及 其经济附加值 的提高具
有 一 定 积极 意 义 。
统 名贵 中草 药 J 。《 中国药 典》 记 载具 有益 胃生
津、 滋 阴清热 之 功 效 。此 外 在 增 强 机 体 免疫 力 、 抗
1 材 料 与 方 法
1 . 1 试 验 材 料
疲劳、 促进 胃液 的分 泌助消化 、 护 肝利胆 、 增强 降 血糖 、 抗 肿 瘤 等 方 面 也 有 独 特 功 效 j 。硒 是 联 合 国卫生组织 确定 的人体 必需微 量元素 , 参 与体 内
1, 2, 4 a n d 6 wh i l e l o w— p o l y mo r p h i c l o c i e me r g e d o n c h r o mo s o me 1 2; SS R ma r k e r a n a l y s i s d a t a a nd S TRUC— TURE2. 2 s o f t wa r e r e v e a l e d t ha t a l l t e s t e d v a r i e t i e s c o u l d b e d i v i d e d i n t o s e v e n s ub g r o u ps , na me d P OP1, P OP2,
研究显示 , 有 机硒 的安全 性及 吸 收率优 于无 机硒 J , 目前获 取有机 硒 的途 径主要 是依靠 植物 转化技术来 实现 , 利用 生物转化 提高有 机硒 的含 量, 从 而 进 入 食 物 链 供 人 或 动 物 食 用 J 。 现 代 药
理 学研 究 证 明铁 皮 石 斛 的某 些 功效 与微 量 元 素 硒
2 0 1 4 . 1
作物 杂 志
C r o p s
铁 皮石斛原球茎的富硒培 养条件优化
杨善 岩 狄 志 鸿
( 中国林业科学院松花粉研究 开发中心/ 浙 江亚林生物科技股份有限公司 , 3 1 1 4 0 0, 浙江杭州)


采 用响 应 面分 析 方 法优 化 铁 皮 石 斛
在威胁 , 要 保证 人体健康 , 防治有关 疾病 , 就应 当
有适 量 的摄人 。
原球 茎 富硒 条 件 , 首 选利 用 P l a c k e t t — B u r ma n试 验
进行因素的显著性分析 , 筛选 出具有显著效应 的 3
个 因素: 硒 浓度 >培养 时间 >光照 强度 ; 再通过 最
陡爬 坡 试 验 逼 近 其 最 大 响 应 区域 , 最后 通 过 B o x . B e h n k e n试验 对 其进 行 优 化 , 得 到 最佳 条 件 为硒 浓
关键 词
铁 皮石 斛 ; 原球 茎 ; 硒; 响应 面
微量元素硒富集研究 , 培育 富硒铁皮石斛 原球茎 ,
铁皮 石 斛 ( D e n d r o b i i c a n d i d u m) 为 兰科 多 年 生 附生 草 本植 物 , 被列 为 “ 中华 九 大 仙 草 之 首 ” , 是 传
多 种含 硒 酶 和 含 硒 蛋 白 的 合 成 ; 婴 幼 儿 缺 硒 会 导
选取成熟未 开裂 的铁皮 石斛 蒴果 , 经 组 织 培 养 获 得 在 增 殖 培 养 基 上 继 代 的 原 球 茎 作 为 试 验
材料 。
致抵抗力下降 , 营养阻滞 ; 孕妇缺硒可造成胎儿 畸
变 及 妊娠 高 血 压 , 硒 可 减 少 肝 炎 和肝 癌 病 变 发 生
P OP 3, P OP 4, P O P 5, P OP 6 a n d P 0f y 7 ; T h e mo d e l — b a s e d p o p u l a t i o n s t r u c t u r e a n a l y s i s w a s c o n s i s t e n t w i t h g e n e t i c
度、 培 养 时 间 、光 照 强 度 分 别 为 0 . 3 1 m g / L 、
5 8 . 8 7 d 、 1 8 3 4 . 0 9 1 x 。 原 球 茎 硒 含 量 预 测 值 为
4. 72mg /k g。
生理功能相重叠 , 将铁皮石斛与硒有机结 合 , 开发
富硒铁皮石斛 , 将 具 有 十 分 广 阔 的市 场 前 景 。 笔 者 在植 物 组 培 的 基 础 上 , 进 行 铁 皮 石 斛 原 球 茎 对
I n t h i s s t u d y, S S R p r i me r p o l y mo r p h i c a n a l y s i s s h o we d h i g h - p o l y mo r p h i c l o c i e me r g e d ma i n l y o n c h r o mo s o me s
作 者简介 : 杨善岩 , 硕士, 从 事茵菇栽培及植物 组培 方面的研 究
收 稿 日期 : 2 0 1 3—0 9—1 3; 修 回 日期 : 2 0 1 3—0 9—2 6
选取 成 熟 未 开 裂 的铁 皮 石 斛 蒴 果 , 自来 水 冲
洗表面污渍 5 m i n , 无菌条件下 , 用7 5 . 8 。
1 . 3 试 验方 法
几率 , 对恶性 肿瘤 有显著 的 防治作用 J 。中国营
养 学会 推 荐 成 人摄 人 量 为 6 0~ 2 0 0  ̄ g / d , 而 中国 人 的膳食 结 构 中硒 元 素 含 量 较 低 , 不 能 满 足 正 常 需 要 J 。 硒 的 长 期 摄 人 不 足 是 对 人 体 健 康 的极 大 潜
1 . 2 培养 基
诱导 培养 基 : 1 / 2 M S培 养 基 , 椰子汁 l O O m L /
L , 蔗糖 3 0 L , 琼脂 8 g / L, p H 5 . 6~5 . 8 ; 增 殖 培 养 基: 1 / 2 MS培 养 基 , 椰子 汁 I O O m L / L , 蔗糖 3 0 L,
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