仔猪水肿病病原的分离鉴定
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仔猪水肿病病原菌分离鉴定及防治
一
、
病原菌的分离鉴定
小 白鼠购 自唐 山市卫校
齐 ：Ｓ Ｓ琼脂表面茵 落呈均 匀红色 ｉ营养 生 物夺氧 生物拮抗 增强机体免疫 力 、 肉汤浑浊 ，管 底有粘性 沉淀 合 成各种酶和 营养物 质的独特作 用 ；因 革兰 而 在仔 猪 水肿 病的 治疗 中被 广泛 应 用。
（ ） 料 一 材
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仔猪水肿病病原菌分离鉴定及防治
马永兴 河北 省唐 山市兽 医工作站
３ 新闻热线［１）７６３５ １ 订阅服务 １１）７６３５ １ 投稿信箱Ｄ Ｊ ６ Ｅ ６１ ００８７５８ 转 ３ ００８７５８ 转 ７ ＷＢ＠２３ＮＴ
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三、诊断治疗
３从 药敏试验可 以看 出， 对许 多 ． 该茵
时， 也在饲料 中添 加 中药和微生态制 剂。
０头仔 物涂片 ，分别进行 革兰氏染色和运动 力 肝 、 脾肿大 出血 。 肠涨气 ， 并从死亡小 鼠 采取上述措施后 ，预 防性 治疗的 ７
检查。
８ 内脏器官分离 到分 离到同一菌株 。对照 猪 ，无 一发病 ；治疗 病猪 １ 头 ，除一头 组小鼠未 见异 常。 （ ）药敏试验 六 结 果见表 ２ 。
胃壁水肿 结肠肠系膜及淋 巴结水肿 整 个肠系膜 呈凉粉样 水肿部位切开 可见 在粘膜 层和肌 层之 间有一 层胶 胨样物 ， 切面厚度为 １ ｃ 表 面有大量 液体流 —３ ｍ 出 呈无色 、 茶色或红 色 胃底有弥漫性 出血 肠粘膜红肿 ；心包 、 胸腔 腹腔有 较 多积液 液体 澄清无色 黄 色或红色
一起仔猪水肿病的诊断与治疗
２ 临床症状
５ 加强饲养管理 ． １
仔猪断奶时做好饲养管理 ，注意防寒保 暖和饲料转换 。
注意合理饲 喂 ， 断奶后半个 月内 ， 要按 照哺乳期补饲 的次 数
本病的潜伏期很短 ， 在暴 发初期常呈急性经过急性 的常 见不到 明显症状就 突然死亡 。发病慢的病 猪表现精神沉郁 ， 食欲减退或废绝 。多数病猪体 温不 高 ，少数病猪达 ４ ℃以 ０
５ 防控 措施
我县养殖场李某共 饲养仔猪 １５头 ，病猪初期排稀便 ， ３ 曾用过肠毒灵和氟苯尼考 ， 状有所减轻 ， 症 期间户主给病猪 注射过林可霉素和庆大霉素 ， 但治疗效果不是很明显。同舍 ３ ０头猪 中陆续 发病 ， 现步态不稳 ， 表 摇摆转 圈 ， 严重者前腿 不能站立 ，— ｄ内死亡 。遂来我站求诊。 １２
５， 姜 ５ ， ｇ生 ｇ 白术 ５ ， ｇ 苍术 ５ ， ｇ 白茯苓 ５ ， ｇ 车前草 １ｇ 云 曲 ０， ７， ｇ 滑石粉 １ｇ黄柏 ５ ， ０， ｇ 黄芩 ５ ， ｇ泽泻 ５ 。水煎去渣 、 ｇ 熬制成 汁 １０～ ０ ｍ ， ３次灌服 ，ｄ服完（ ５ ２０ Ｌ 分 １ 上述药物 为一 头猪用
头部 、 颈部有水肿 ， 急性 的发病数小时死亡 ， 一般在 ２ ｄ死 ～３ 亡， 病程长 的延至 ５ ｄ 有极少数能耐过 自愈 。 ～７ ，
３ 病 理 变 化
对未发病 的健康猪实行预防投药 ， 可用呼乐芬和气 丰利
预混剂 、 泻痢净等药物 ， 从仔猪断奶 前一周开始添加 ， 连续使
用 ３ ４周 ， ～ 能有很好的预防效果。 同时进行免疫接种 ， 使用仔 猪大肠埃希氏菌病三价灭活疫苗 ， １ 对 ０—１ ５日龄仔猪 ， 颈部 深层肌肉注射 ２ Ｌ 头 。 ｍ／ ５ ． 中西 医疗法 ４ 中药用 防风大蒜 散 ： 防风 １ｇ 大蒜 １ｇ 商陆 ５ ， ０， ０， ｇ 猪苓
５ 加强饲养管理 ． １
仔猪断奶时做好饲养管理 ，注意防寒保 暖和饲料转换 。
注意合理饲 喂 ， 断奶后半个 月内 ， 要按 照哺乳期补饲 的次 数
本病的潜伏期很短 ， 在暴 发初期常呈急性经过急性 的常 见不到 明显症状就 突然死亡 。发病慢的病 猪表现精神沉郁 ， 食欲减退或废绝 。多数病猪体 温不 高 ，少数病猪达 ４ ℃以 ０
５ 防控 措施
我县养殖场李某共 饲养仔猪 １５头 ，病猪初期排稀便 ， ３ 曾用过肠毒灵和氟苯尼考 ， 状有所减轻 ， 症 期间户主给病猪 注射过林可霉素和庆大霉素 ， 但治疗效果不是很明显。同舍 ３ ０头猪 中陆续 发病 ， 现步态不稳 ， 表 摇摆转 圈 ， 严重者前腿 不能站立 ，— ｄ内死亡 。遂来我站求诊。 １２
５， 姜 ５ ， ｇ生 ｇ 白术 ５ ， ｇ 苍术 ５ ， ｇ 白茯苓 ５ ， ｇ 车前草 １ｇ 云 曲 ０， ７， ｇ 滑石粉 １ｇ黄柏 ５ ， ０， ｇ 黄芩 ５ ， ｇ泽泻 ５ 。水煎去渣 、 ｇ 熬制成 汁 １０～ ０ ｍ ， ３次灌服 ，ｄ服完（ ５ ２０ Ｌ 分 １ 上述药物 为一 头猪用
头部 、 颈部有水肿 ， 急性 的发病数小时死亡 ， 一般在 ２ ｄ死 ～３ 亡， 病程长 的延至 ５ ｄ 有极少数能耐过 自愈 。 ～７ ，
３ 病 理 变 化
对未发病 的健康猪实行预防投药 ， 可用呼乐芬和气 丰利
预混剂 、 泻痢净等药物 ， 从仔猪断奶 前一周开始添加 ， 连续使
用 ３ ４周 ， ～ 能有很好的预防效果。 同时进行免疫接种 ， 使用仔 猪大肠埃希氏菌病三价灭活疫苗 ， １ 对 ０—１ ５日龄仔猪 ， 颈部 深层肌肉注射 ２ Ｌ 头 。 ｍ／ ５ ． 中西 医疗法 ４ 中药用 防风大蒜 散 ： 防风 １ｇ 大蒜 １ｇ 商陆 ５ ， ０， ０， ｇ 猪苓
仔猪水肿病大肠杆菌的分离鉴定及其毒力基因的检测
仔猪水肿病是 由产志贺毒 素大肠 杆菌 （ Ｔ Ｃ 引 ＳＥ ） 起 的断奶仔 猪 的一 种 急性 传染 病［ 。该病 首先 报 道 １ ］
的时间是 １ ３ ９ ８年 ， 随后许 多 国家 均有 发 病报 道Ｌ ］ ２。 仔 猪水肿病发病 急 、 死亡快 ， 而且 多发 于生 长快 、 营养
性肠毒素 Ｓ １和热 不稳定性肠毒素 Ｌ ） 。 Ｔ Ｔ１［ 等 ４
笔者从新疆 石河 子地 区部 分猪 场 疑似仔 猪 水肿
病 的猪 场 病 例 中先 后分 离 到 ３株 细 菌 ， 过 形 态特 通
性、 培养特性 、 生化特性 、 血清学 鉴定 以及动物试 验 等
一
好 、 观健康 肥 壮 、 外 断乳 后 １２周 的仔 猪 。具 体 表 现 —
第２ ９卷
第５ 期
２１ 年 １ ０１ ０月
石河子大学学报 （ 自然 科 学版 ） Ｊ ｕｎ ｌ ｆ ｈｈｚ Ｕｎｖｒ ｔ（ ａｕａ Ｓ ｉ ｃ） ｏ ｒａ ｏ ｉｅｉ ｉ ｓ ｙ Ｎ ｔｒｌ ｃ ｎ ｅ Ｓ ｅｉ ｅ
Ｖｏ ． ９ ＮＯ ５ １２ ．
Ｏｃ ． ２ １ ｔ Ｏ１
从 中分离得 到 ３ 细菌 ， 过形 态特 点 、 养特 性 、 化特 性 等 观察 确定 为 大 肠杆 菌 。３株分 离 菌血 清 型均 为 株 通 培 生
０１９ 且 均 能 使 人 工 感 染 小 鼠死 亡 。药 敏 实 验 结 果 表 明 ， 离 株 对 部 分 抗 生 素 有 不 同 程 度 的 耐 药 性 。Ｐ Ｒ检 测 结 ３， 分 Ｃ 果 显 示 ， 株 菌均 携 带 黏 附 素 （ ｅ Ａ） 类 志 贺 毒 素 （ Ｌ －ｅ基 因 。由 此 可 以 确 定 可 离 的 ３株 细 菌 是 本 次 仔 猪 感 染 ３ Ｆｄ 和 Ｓ Ｔ２）
猪水肿病病原分离鉴定及防治试验
引起的肾病变及新城疫相 区别 ， 前两者一般法 氏囊无 变化 ， 新 城疫一般有绿粪 ， 十二指肠淋 巴滤泡有肿胀或 出血现象 。
化 特征 性 强 ， 容易 作 出诊 断 。非 典 型性 法 氏囊 病 各个 方 面 表 现 均 不 明显 ， 上基 层 实验 室 设 施 不 完善 ， 断 时 必须 加 诊
将 分离 到 的优 势血 清 型菌 株 分别 接种 于 肉汤 内 ，７ ３ ℃ 培养 １ ８ｈ作为种 子 液 。然 后再 分别 接种 于普通 琼脂 平 板 ， ３ ℃培养 １ 用 灭 菌 生 理 盐水 洗 菌 苔 并 混 合 。 常规 方 ７ ８ｈ， 按
将 分 离 菌 株 分 别 接 种 于 葡 萄 糖 、 糖 、 芽 糖 、 露 乳 麦 甘 醇、 蔗糖 反应 管 和葡 萄糖磷 酸盐 蛋 白胨水 培养 基 （ ２管 ）蛋 、 白胨水 培 养 基 、枸 橼 酸盐 培 养基 、尿 素 培养 基 ３ ℃反 应 ７
法计 数 ， 活 菌数 达 ８ ｌ９ ｒ 以上 ，． 使 ｘ ０ 个／ｎ ｌ ０ ％甲醛 ３℃灭活 ３ ７
３ 诊 断
根据发病用药过程 、 现场观察 及剖检特 征进行综 合分析 ，
５ 小 结
鸡 典 型 性法 氏囊病 因发 病 急 ， 床症 状 明显 ， 理 变 临 病
初步诊 断为非典 型法 氏囊病 。但应注意 与中毒病 或饲料问题
１ 多 价 油 乳 剂 灭 活 苗 的 制 作 ． ４
１ ． 细菌 分离 ．１ ２ 无 菌取 肠 系膜 淋 巴结 、 、 ， 肝 脾 划线 接种 于麦康 凯 琼脂 平 板 、伊 红 美 兰琼 脂 平 板 和鲜 血 琼脂 平 板 。７ ３ ℃培 养 ２ ｈ ４
后 观察 结果 。 １ ． 生化试 验 ．２ ２
化 特征 性 强 ， 容易 作 出诊 断 。非 典 型性 法 氏囊 病 各个 方 面 表 现 均 不 明显 ， 上基 层 实验 室 设 施 不 完善 ， 断 时 必须 加 诊
将 分离 到 的优 势血 清 型菌 株 分别 接种 于 肉汤 内 ，７ ３ ℃ 培养 １ ８ｈ作为种 子 液 。然 后再 分别 接种 于普通 琼脂 平 板 ， ３ ℃培养 １ 用 灭 菌 生 理 盐水 洗 菌 苔 并 混 合 。 常规 方 ７ ８ｈ， 按
将 分 离 菌 株 分 别 接 种 于 葡 萄 糖 、 糖 、 芽 糖 、 露 乳 麦 甘 醇、 蔗糖 反应 管 和葡 萄糖磷 酸盐 蛋 白胨水 培养 基 （ ２管 ）蛋 、 白胨水 培 养 基 、枸 橼 酸盐 培 养基 、尿 素 培养 基 ３ ℃反 应 ７
法计 数 ， 活 菌数 达 ８ ｌ９ ｒ 以上 ，． 使 ｘ ０ 个／ｎ ｌ ０ ％甲醛 ３℃灭活 ３ ７
３ 诊 断
根据发病用药过程 、 现场观察 及剖检特 征进行综 合分析 ，
５ 小 结
鸡 典 型 性法 氏囊病 因发 病 急 ， 床症 状 明显 ， 理 变 临 病
初步诊 断为非典 型法 氏囊病 。但应注意 与中毒病 或饲料问题
１ 多 价 油 乳 剂 灭 活 苗 的 制 作 ． ４
１ ． 细菌 分离 ．１ ２ 无 菌取 肠 系膜 淋 巴结 、 、 ， 肝 脾 划线 接种 于麦康 凯 琼脂 平 板 、伊 红 美 兰琼 脂 平 板 和鲜 血 琼脂 平 板 。７ ３ ℃培 养 ２ ｈ ４
后 观察 结果 。 １ ． 生化试 验 ．２ ２
猪源性水肿病大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析
培养 ２ ， ４ｈ 挑取 麦康 凯琼脂 平 板上 生长 典 型 的 ２ ～３ 个菌 落 接 种 普 通 琼 脂 斜 面 ， 养 ２ 。用 ２ ｍＬ 培 ４ｈ ０ ５ 石炭 酸生 理盐 水洗下 普通 琼脂 斜 面上 的菌 苔 ， ． １ １ 高压 ２ｈ， 去 Ｋ 抗 原 和 Ｈ 抗 原 的 Ｏ 不 凝 集 ２℃ 除 性 ， 成浓 稠 的 （ 凝集 原 。 制 ） 吸取 多价 因子 血清 ８ Ｌ Ｏ ，滴 加 于 洁净 的玻 片 上， 再吸取 ３ Ｌ制备好 的凝 集原用 牙签 与之充 分混 Ｏ 匀 ， ３ｍｉ 观察 结果 ， “ ＋ ” 于 ｎ内 呈 ＋ 以上 的 凝 集判 为 阳性。用凝集原与可凝集的多价血清 内的每一单 价因 子作同样的凝集试验 ， 确定 每株大肠杆菌 的血清型。 １４ ３ 生化 鉴定 挑取 普 通 琼 脂 平 板 上 的 纯培 养 ．． 物 分别接 种 三糖铁 琼脂 斜 面 、 白胨 水 、 蛋 葡萄糖 蛋 白 胨 水 、 橼 酸盐琼 脂 斜 面 和 葡 萄糖 、 枸 乳糖 、 糖 等 发 蔗 酵 管 ， 养 ２ 。 培 ４ｈ １ ５ 致 病性 检测 ． １ ５ １ 菌液 制备 将 纯 种菌 株 接 种 于 普 通 营 养 肉 ． ． 汤 ， ３ ℃培 养 １ ， 置 ７ ８ｈ 然后 将 菌 液 用 比浊法 和平 板 表 面涂 布法 稀释 至 １ ８ ０ Ｆ ｍＬ， ． ×１ Ｃ Ｕ／ 备用 。 １ ５ ２ 菌液毒素猪感染性试验 取制备 的菌液 １ ． ． Ｏｎ 肌 肉注射 ３ ０日龄断 奶仔 猪 ２只 ； 设对 照组 分别 注 另 射 无 菌 肉汤 ３ ＯｍＬ及 １ Ｏ ｍＬ各 １只 。对 注 射 后 的 仔猪 隔离 饲养 ， 观察 其发病 及死 亡情 况 ， 对死 亡 的仔 猪立 即剖 检 ， 察病 理学 变化 ， 观 无菌 采 取肝 脏 、 脏 、 脾 心血 、 脑脊 液 、 胃大 小弯 水肿 液 、 系膜 淋 巴结涂 片 ， 肠 革 兰 氏染 色 ， 检 。 镜 同时 在 麦 康 凯 平 板 上 划 线 分 离
仔猪水肿病病原菌的分离及生物学特性的鉴定
表 １ 分 离 菌 Ｉ ２ Ｅ 生化 试 验 牧 兽 医
Ｅ ｏ０． ｃｏ∞＿ ＾ ３ ｄＩ
一
一
肠 杆 菌引起 的仔 猪水 肿病 。 ３２仔 猪 水肿病 发病 机理 较 为复 杂 ， ． 目前 公认 的是 ： 病原 性 大肠 杆 菌进 入肠 道 ， 过宿 主抗 菌作 耐 用． 附着 于肠 黏膜 上 定殖 ． 用肠 道 内 的适 宜 条 件 利 大 量 繁殖 ， 生水 肿病 毒 素 ， 产 当猪 体 经肠道 吸收毒 素进 人 血 液 ， 引起 肠 毒 血症 ， 致水 肿 病 发 生 。 即 导 猪水 肿病 的 发生 往往 与 某些 应激 因素有关 。缺 乏 运 动 、 寒 、 乳 前 后 饲料 变 更 突 然 、 料 单 纯 或 受 断 饲 吃 了过量 稠 厚 的高 蛋 白饲 料导 致 消化 不 良和 胃肠 机 能 紊 乱 等 ，都 是诱 发 仔 猪水 肿 病 的 重 要 因 素 。本 病 例 的发 病诱 因有 三方 面 ： 一是 仔 猪 断 乳 分 栏 ． 然 改 变生 活环 境 ： 是 断 乳 期 间 突 突 二 然 变 更 饲 料 ： 三是 自配 饲料 中 蛋 白质 含 量过
１ ． 离 菌 的 鉴 定 ３分
１ ． 离菌 染 色特性 的鉴 定 将 培 养 物 涂 ． １分 ３ 片 ． 别 进行 革 兰 氏染 色 和 染 色特 性 、 动 力 检 分 运
查。
１ ． 菌三 糖 铁 试 验 将 典 型可 疑 菌 落 接 ． ２细 ３ 种 于三 糖铁 琼脂斜 面 ，７Ｃ 养 ２ 时 ，观察 颜 ３ ｑ培 ４小 色 变化 。
２ ０ ０ ６年 第 ８期
刍
２ ０ ０
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规模 养 猪
整 齐 ：Ｓ琼 脂表 面菌 落 呈 均匀 红 色 ： Ｓ 营养 肉汤 浑浊 ， 管底 有 黏性 沉淀 。 ２２分 离菌的 染 色特 性 鉴 定 革 兰 氏染 色 可 ． 见到 呈 单 或双 排列 、 荚膜 、 芽胞 、 端 钝 圆 的 无 无 两 革 兰 氏阴性 小杆 菌 ； 动力 检查 阳性 。 运 ２３三糖 铁 试验 三糖 铁 试验 结 果 ： 面培 养 ． 斜 基 变黄 ， 层变 黄 ， 酸产 气 。初 步 鉴定 为大 肠 杆 底 产 菌。 ２４细 菌 Ａ Ｉ ． Ｐ 鉴定 系统 的检 测结 果 见表 １ 。
Ｅ ｏ０． ｃｏ∞＿ ＾ ３ ｄＩ
一
一
肠 杆 菌引起 的仔 猪水 肿病 。 ３２仔 猪 水肿病 发病 机理 较 为复 杂 ， ． 目前 公认 的是 ： 病原 性 大肠 杆 菌进 入肠 道 ， 过宿 主抗 菌作 耐 用． 附着 于肠 黏膜 上 定殖 ． 用肠 道 内 的适 宜 条 件 利 大 量 繁殖 ， 生水 肿病 毒 素 ， 产 当猪 体 经肠道 吸收毒 素进 人 血 液 ， 引起 肠 毒 血症 ， 致水 肿 病 发 生 。 即 导 猪水 肿病 的 发生 往往 与 某些 应激 因素有关 。缺 乏 运 动 、 寒 、 乳 前 后 饲料 变 更 突 然 、 料 单 纯 或 受 断 饲 吃 了过量 稠 厚 的高 蛋 白饲 料导 致 消化 不 良和 胃肠 机 能 紊 乱 等 ，都 是诱 发 仔 猪水 肿 病 的 重 要 因 素 。本 病 例 的发 病诱 因有 三方 面 ： 一是 仔 猪 断 乳 分 栏 ． 然 改 变生 活环 境 ： 是 断 乳 期 间 突 突 二 然 变 更 饲 料 ： 三是 自配 饲料 中 蛋 白质 含 量过
１ ． 离 菌 的 鉴 定 ３分
１ ． 离菌 染 色特性 的鉴 定 将 培 养 物 涂 ． １分 ３ 片 ． 别 进行 革 兰 氏染 色 和 染 色特 性 、 动 力 检 分 运
查。
１ ． 菌三 糖 铁 试 验 将 典 型可 疑 菌 落 接 ． ２细 ３ 种 于三 糖铁 琼脂斜 面 ，７Ｃ 养 ２ 时 ，观察 颜 ３ ｑ培 ４小 色 变化 。
２ ０ ０ ６年 第 ８期
刍
２ ０ ０
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规模 养 猪
整 齐 ：Ｓ琼 脂表 面菌 落 呈 均匀 红 色 ： Ｓ 营养 肉汤 浑浊 ， 管底 有 黏性 沉淀 。 ２２分 离菌的 染 色特 性 鉴 定 革 兰 氏染 色 可 ． 见到 呈 单 或双 排列 、 荚膜 、 芽胞 、 端 钝 圆 的 无 无 两 革 兰 氏阴性 小杆 菌 ； 动力 检查 阳性 。 运 ２３三糖 铁 试验 三糖 铁 试验 结 果 ： 面培 养 ． 斜 基 变黄 ， 层变 黄 ， 酸产 气 。初 步 鉴定 为大 肠 杆 底 产 菌。 ２４细 菌 Ａ Ｉ ． Ｐ 鉴定 系统 的检 测结 果 见表 １ 。
仔猪水肿病大肠杆菌的分离鉴定
快波及 全群 ， 多数 仔猪 由于剧烈腹泻而脱 水 ， 最后 衰竭死 亡。 为了制定有效 的防制方 案 ， 们从发病 猪场采集 病料 。 我 进行 病原菌分离鉴定试验。 证实其病原为引起仔猪 水肿病 的大肠 杆菌。现报告如下： １ 材料与方法
１１ ． 材 料
１． ．４血清学 签定 ２
菌株 进行玻板凝集 试验进行 血清 鉴定 ，结果如 下 ： ３ ７ ０１８
株 、 ３６株 、 ４ ６株 、９ Ｏ１９ Ｏ１１ ０ ５株 、 ２ ３株 ，６ ３株 、４ ２株 、 ００ ０４ ０５ ０１ ｌ 株 、 ７ １ 、 ６ 株 ， ４ １ 、 ０ １ ０ ３ 株 Ｏ １ Ｏ１９ 株 未定型的 ２ 。 株 ３ 小结与讨论
色 、Ｉ 、 、 、 嶂形 光滑 湿润 中央隆起 、 中等大小的菌落 。转接于 Ｌ 琼 Ｂ
脂平板上 ３ ℃培养 ２ ｈ ７ ４ 后得到纯培养菌， 菌落呈圆形 、 、 光滑 湿 润、 、 隆起 半透明的近无色菌落。镜枪呈革兰氏阴性短 ｆ 菌。
２２ 致 病性 试 验 ．
１１ 病料 ．１ ． １１ ．， ２培养基
落， 作细菌涂 片 、 革兰氏染 色镜检 ， 同时接种 于 Ｌ 琼脂平板 ， Ｂ
３￣培养 ２ ｈ 即得细菌纯培 养物 。 ７Ｃ ４。 作者简介 ： 牛艺儒（９ １ ）男， 山西长治人 ， １８ － ， 汉， 在读硕士研 究
３１ ． 大肠埃希氏菌存在 于人 和动物的肠道内 ，少数特殊血清
生， 山西农业大学 动物科技学院， 主要从事预防兽医学工作 。
对所有可疑菌株进行生化试验 ，所有菌株发酵葡萄糖 、 ＭＲ 试验 、 靛基质试验全部ＩＪ 对乳糖 、 ｊ ， ｆ ＝ １ 甘露醇均有发酵作用 ，—Ｐ Ｖ 试验阴性 ， 氧化酶阴性 ， 均符合大肠杆菌的生化特点 。 ２４致病性 茵株的 。 血清型鉴定 ．
１１ ． 材 料
１． ．４血清学 签定 ２
菌株 进行玻板凝集 试验进行 血清 鉴定 ，结果如 下 ： ３ ７ ０１８
株 、 ３６株 、 ４ ６株 、９ Ｏ１９ Ｏ１１ ０ ５株 、 ２ ３株 ，６ ３株 、４ ２株 、 ００ ０４ ０５ ０１ ｌ 株 、 ７ １ 、 ６ 株 ， ４ １ 、 ０ １ ０ ３ 株 Ｏ １ Ｏ１９ 株 未定型的 ２ 。 株 ３ 小结与讨论
色 、Ｉ 、 、 、 嶂形 光滑 湿润 中央隆起 、 中等大小的菌落 。转接于 Ｌ 琼 Ｂ
脂平板上 ３ ℃培养 ２ ｈ ７ ４ 后得到纯培养菌， 菌落呈圆形 、 、 光滑 湿 润、 、 隆起 半透明的近无色菌落。镜枪呈革兰氏阴性短 ｆ 菌。
２２ 致 病性 试 验 ．
１１ 病料 ．１ ． １１ ．， ２培养基
落， 作细菌涂 片 、 革兰氏染 色镜检 ， 同时接种 于 Ｌ 琼脂平板 ， Ｂ
３￣培养 ２ ｈ 即得细菌纯培 养物 。 ７Ｃ ４。 作者简介 ： 牛艺儒（９ １ ）男， 山西长治人 ， １８ － ， 汉， 在读硕士研 究
３１ ． 大肠埃希氏菌存在 于人 和动物的肠道内 ，少数特殊血清
生， 山西农业大学 动物科技学院， 主要从事预防兽医学工作 。
对所有可疑菌株进行生化试验 ，所有菌株发酵葡萄糖 、 ＭＲ 试验 、 靛基质试验全部ＩＪ 对乳糖 、 ｊ ， ｆ ＝ １ 甘露醇均有发酵作用 ，—Ｐ Ｖ 试验阴性 ， 氧化酶阴性 ， 均符合大肠杆菌的生化特点 。 ２４致病性 茵株的 。 血清型鉴定 ．
仔猪水肿病病厌原菌的分离及血清型鉴定
０１ １ 株 、 ３ 株 、 １ ０ ０７ １ 未定 型的 ２株 。
３ 讨 论
的单个小 菌落 划线接种 于麦康凯琼 脂平板 和伊红美 兰琼脂 平板 ， ３ ￣培养 ２ｈ 观察结果 。 于 ７Ｃ ０， １ 染 色镜检 挑取 单个菌落进行 革兰 氏染 色 ，在光学显 ． ６
微镜下观察细菌 的形态特点 。
行血清型鉴定 ，结果 如下： ３ ５株 、 ３ ４株 、 ４ ３株 、 ０１ ９ ０１ ８ ０１ １
０８ ３株 、 １株 、 ０ ０９ ０２ １株 、 ４ ０６ １株 、 ０ ０６ １株 、 ５ ０４ １株 、
１ 主要 培养基 ． ２
肉汤 。
麦康凯 琼脂 、 红美兰 、 伊 普通琼 脂 、 普通
便选择针对性较强 的菌株作 为菌苗株 ， 为起到更好的预防效
果， 并为仔猪水肿病 的进一步研究奠定基础。
１ 材 料 与 方 法
１１发生水肿
病仔 猪的心、 、 肝 脾或直肠 内容物 。
小 白鼠均健活。解剖死亡小 白鼠， 肝脏肿大 、 边缘钝圆 、 道 肠 弥漫性出血。采用 营养琼脂平板 ，７Ｃ ３ ￣ 培养 １ｈ 在平板上形 ６， 成圆形隆起 、 光滑 、 无色透 明、 边缘整齐 的小菌落 。挑 取单个 菌落作 生化实验符合上 述生化反应结果 。 ２ 致 病性 菌株 的 ０血清型鉴 定 ． ４ 用 大肠杆 菌抗 ０ 抗 原 多 因子血 清及 单 因子 血清对分 离菌株 进行玻板凝 集试验 进
糖 ， 慢发酵庶糖） 缓 产酸 产气 ， 试 验 阳性 、 － ＭＲ Ｖ Ｐ试验 阴性 、 产生靛基 质 、 三糖铁底层 产酸、 明胶液 化试 验阴性 、 氧化酶试
验阴性 、 过氧化氢酶试验 阳性 、 素酶试验 阴性 。 尿 此结果符合 大肠 杆菌的特 性。 ２３ 致病性 试验 ． 试验组小 白鼠均在 ４ ｈ内死亡 ，对 照组 ８
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摘 要 ： 陕 西 省 周 至 县 ５个 乡镇 疑 似 猪 水 １ 材 料 与 方 法 从
． 肿 病 的 病 、 猪 体 内分 离到 ８株 细 菌 ， 据 其 １ １ 病 料 死 根
形 态 、 养 特 性 和 生 化 特 性 鉴 定 为 大 肠 埃 希 培
自陕西省 周 至县 的 的 广 济 、 峰 等地 的疑 似水 九
养方式 突然改 变 等 可使 仔 猪 抵 抗 力 下 降 ， 会 诱 发 都
本病 的发生 ［ 。近几 年 来 ， 西 省 周 至县 的许 多 养 ５ ］ 陕 猪场不 断有仔 猪 水 肿病 的发 生 ， 给本 县 的养 猪 业 和
农 村致 富工程造 成 了较大 影 响 。预 防该病 的最好 方 法是疫苗 的免 疫 接 种 ， 由于市 售 猪水 肿 病 疫 苗 所 但
猪水 肿病 的有效 防治 提供 理论基 础 。 “ 血 清对分 离 的致病 性 大肠埃希 菌进行 玻板 Ｏ”
收 稿 日期 ：０ ６０ —５ ２ ０ —６０ 作者简介 ： 马应 战 （ ９４ ， ， 西周 至人 ， 理 兽 医师 ， 要 从 事 畜禽 防疫 检 疫 工 作 。 １ ６ 一） 男 陕 助 主
Ｚ Ｈ７分 离株 为 ０１ ８ Ｈ６分 离株 为 ０１ １ ３ ，Ｚ ４，
大肠 埃 希 菌 ０１ ８株 ， ３ 由西 北 农 林 科 技 大学 动 物 科技学 院预 防兽 医 学 实验 室提 供 ； 肠 埃希 菌 标 大 准抗 “ 血 清 ， 自中国兽 药监察 所 。 Ｏ” 购
Ｚ Ｈ４分 离株 为 ０ ， 中 ０１ ８ 为 优 势 血 清 ８其 ３
马 应 战 ， 喜 格 徐
（ 至 县 畜 牧 兽 医 中心 ， 周 陕西 周 至 ７ ０ ０ ） １ ４ ０
中 图分 类 号 ： ８ ２ ６ ２ ￥ ５ ． ３ ￥ ５ ． ８ ￥ ５ ．１ ｆ８ ４４ ｆ８ ８ ２
文 献 标 识 码 ： Ｂ
文 章 编 号 ：０ ７ ５ ３ （ ０ ６ ０ — １ ００ １ ０ —０ ８ ２ ０ ） ９ ０ １ — ３
提早补 料 ， 至用全 价仔 猪料 或浓 缩 料 ， 饲 养水 平 甚 使
突然改 变 Ｉ 候骤 变 或 转 群 、 气 断奶 、 料 中蛋 白质 过 饲
量 、 料成份单 一 ， 饲 维生 素 Ｂ和硒 缺乏 ， 阴雨潮湿 、 饲
于普 通 营养 琼脂 和麦 康凯 琼脂 平板 上划 线 ， ３ 在 ７℃ 培 养 ２ ， 取可 疑菌 落抹 片 、 兰 氏染 色 、 ４ｈ 挑 革 镜检 ， 并 将其 接 种于鲜 血 琼 脂斜 面上 进 行 纯 培 养 ， 纯培 养 用 物 再划线 接种 于普通 营 养琼脂 平 板 、 鲜血 琼脂 平板 、 麦 康凯平 板 ， 观察其 生 长表现 。 １ ６ 生化 试 验 ． 将分 离菌及 标准 菌 株按常 规 方法分 别接 种 于生
用菌株 的血清 型 可 能 与 当地 猪 水 肿 病 不 一 致 ， 因而 化 反应 培养基 进行 生化试 验 。
． 菌苗 的免 疫效 果 不 好 。为 有 效 控 制 本 病 ， 们 在 当 １ ７ 分 离茵 的血 清 型鉴 定 我 参照 文献 ［ ］ 产 品说 明 ， 大肠 埃希 菌标准 抗 ６及 用 地 开展 了仔猪 水 肿病 的病 原 分 离 和 鉴 定 ， 以便 为 仔
茵 。动 物致 病 性 试 验 表 明 ， 分 离 茵 中有 ５ 肿 病猪 场的 患病猪 或病 死猪无 菌 采集 淋 巴结 和水 肿 ８株
置冰 ４℃保存备 用 。 株 为 致 病 性 大 肠 埃 希 茵 ， 致 死 小 鼠 和 引起 液 ， 壶 中带 回实验 室 ， 能 ． ０” 断奶 仔 猪 发 病 。 血 清 学 鉴 定 ｚ 、 Ｈ３和 １２ 标 准 大肠 埃 希 茵及 标 准 抗“ 血 清 Ｈ１ Ｚ
水肿 为主要 特征 的传染 病［ ］ １ 。该病 多发 生 于断奶 １
１ ４ 培 养 基 ．
普 通 营 养 琼 脂 平 板 ， 血 琼 脂 平 板 ， 康 凯 平 鲜 麦
板， 糖发 酵 培 养 基 （ 固 体 ） 普 通 肉 汤 ， 丁 肉汤 ， 半 ， 马
周 ～２周 的 小 猪 ， 病 率 较 低 ， 是 其 死 亡 率 可 达 发 但
９ 甚 至更 高 ， ０ 对养 猪生 产危 害极 大［。 ‘。
饲 料和饲 养方 法 的突然 改变 ， 采 用提早 断乳 ， 如
ＭＲ、 靛基 质试 验用 培养基 ， 按常 规方法制 备 。 ＶＰ、 均
１５ 病原 茵 的分 离培 养及形 态染 色特性检 查 ．
无菌 采取病 猪 的肠 系膜 淋 巴结 、 胃壁水 肿 液等 ，
大 学实验 动 物 中心 ， 规 饲 养 。１ ｇ Ｏ ｋ 常 ５ｋ ￣２ ｇ断奶 仔 猪 １ ， 自周 至县 的农 贸市 场 ， 临床 检查 健 ２头 购 经 康， 常规 饲养 。
起 的一种急性 散发性 疾病 ， 以全身 或 局部 （ 主要 为前
肢） 痹 ， 麻 运动 失 调 ， 睑 、 、 、 、 腹 及 腹 股 沟 眼 头 颈 脑 下
型。
关 键 词 ： 猪 水肿 病 ； 仔 大肠 埃 希 茵 ； 离鉴 定 分
猪 水肿病 又 称溶 血 性 大 肠 埃希 菌 病 ， 由定 植 是源自１ ３ 实验 动 物 ．
１ ～２ ８ｇ ２ｇ昆 白系小 白鼠 ３ Ｏ只 ， 自第 四军 医 购
于猪小 肠 的某 些血 清型 的溶血 性 大 肠埃 希菌 异 常繁 殖 ， 生大量 破坏血 管壁 的外 毒 素 ， 产 被机 体 吸收后 引
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动 物 医 学 进 展 ． ０ ６ ２ （ ） １ ０１ ２ ２ ０ ，７ ９ ： １ —１
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仔 猪 水 肿 病 病 原 的分 离 鉴 定