梅毒实验室诊断方法
梅毒实验室诊断标准
一、梅毒分类诊断标准（一）一期梅毒的诊断标准。
1、病史：有性接触史或性伴感染史。
2、临床表现：具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。
3、实验室检查：硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性和TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性。
同时符合1、2、3为确诊病例。
同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查）或结果为阴性的为疑似病例。
（二）二期梅毒的诊断标准1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史。
2、临床表现：病期2年内，多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损，尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹，也可出现其它损害（关节、眼、内脏等）。
3、实验室检查：皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA （或TPHA或TP-ELISA）阳性。
同时符合1、2、3为确诊病例。
同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）的为疑似病例。
（三）三期梅毒的诊断标准。
1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。
2、临床表现：病期2年以上。
有如下特征中的任一项表现，包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿，上腭、鼻中隔等穿孔性损害；骨、眼损害，其它内脏损害；神经梅毒；心血管梅毒。
3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA （或TPHA或TP-ELISA）阳性；或脑脊液检查：WBC≥10×106/L，蛋白>500mg/L，并排除其它引起这些异常的原因。
或三期梅毒组织病理变化。
同时符合1、2、3为确诊病例。
同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。
（四）隐性梅毒的诊断标准。
性病实验室梅毒SOP
目的：规范的梅毒螺旋体检验操作，确保检测结果准确。
适用范围：性病实验室工作人员责任人：实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。
1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性，医务人员应戴手套谨慎操作。
1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法，各期梅毒的检测方法及部位见下表。
1.2.1血液1.2.1.1血清标本根据需要，用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml，室温静置1-2小时（或37℃静置30分钟），待血液凝固、血块收缩后，3000r/min离心10-15分钟，分离新鲜血清，备用。
也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。
溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。
1.2.1.2血浆标本根据需要，用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml，轻轻颠倒混匀8-10次，3000r/min离心10-15分钟，分离血浆，备用。
血库血浆以及EDTA 抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验（一般仅用于RPR实验，），但易出现假阳性反应（需用血清复试），如用其他抗凝剂应首先评价后再用。
1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂，1岁以下儿童采用足跟部）。
一次性采血针刺破皮肤，用无菌棉签擦掉第一滴血。
收集滴出的血液，立即用于检测。
1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测，或取渗出液直接涂片，用于镀银染色试验。
1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，刮取渗出液，加入有DNA保存液（1ml/管）的标本管中，备用。
1.2.3淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结，注入0.3ml无菌生理盐水并反复抽吸2-3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。
5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的评价
5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的评价摘要目的评价分析5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的效果。
方法基于本次研究需求，分别采取梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、化学发光法（CLIA）、甲苯胺红不加热血清试验（Trust）、酶联免疫吸附试验（ELISA）以及免疫印迹法（WB）对120例标本实施梅毒螺旋体抗体检测，对比分析5种检测法阳性率，将WB作为参照分析其他4种检测法的总符合率、特异度以及敏感度。
结果经分析，TPPA法、CLIA法、ELISA法以及Trust法和WB法阳性率对比差异无统计学意义（P>0.05）；将WB检测法当作确认试验，TPPA 法、CLIA法、ELISA法特异度、敏感度和总符合率均比较高。
结论经研究结果分析可知，TPPA法、CLIA法、ELISA法不管是敏感度，还是特异度均比较高，实际应用中可根据梅毒螺旋体抗体实际情况合理选用检测法。
关键词血清学；梅毒螺旋体抗体；检测在临床中梅毒作为常见性传播疾病之一，传染性非常高，目前在献血员以及临床患者输血之前、各种创伤性检验中梅毒血清学检验已成为常规检测中一项基本项目，基于该形势下，选用快捷、灵敏度和特异度均比较高以及操作便捷的检测法对于正确筛查与诊断梅毒也变得尤为重要[1，2]。
本次研究就5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的效果进行评价。
现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料本次研究所用标本来自2012年7月～2015年5月到本院诊治患者120例，全部标本均实施梅毒螺旋体抗体检测，其中男50例，女70例，年龄32～56岁，平均年龄（45.26±4.9）岁。
1. 2 方法于空腹状态下采集3 ml静脉血，以3000 r/min进行离心，离心时间一般为10 min，经血清分离实施检测。
5种血清检测法所用仪器如下：洗板机、水浴箱、Clem Clin化学发光免疫分析仪、振荡器、Roto-2600c酶标仪以及离心器等；所用试剂有CLIA试剂、ELISA试剂、TPPA试剂、WB试剂以及Trust试剂。
梅毒实验室诊断标准
梅毒实验室诊断标准梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，其临床表现多种多样，因此需要依靠实验室检测来进行确诊。
梅毒实验室诊断标准是指在临床诊断中，通过实验室检测方法来确定患者是否感染了梅毒。
本文将介绍梅毒实验室诊断的标准和方法，以帮助临床医生更准确地诊断和治疗梅毒患者。
1. 血清学检测。
梅毒的血清学检测是目前最常用的实验室诊断方法之一。
常见的血清学检测包括梅毒螺旋体抗体检测和非梅毒螺旋体抗体检测。
梅毒螺旋体抗体检测主要包括梅毒螺旋体特异抗体检测和非特异抗体检测，其中梅毒螺旋体特异抗体检测包括梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体颗粒凝集试验（MHA-TP）和梅毒螺旋体血清凝集试验（FTA-ABS）等。
非梅毒螺旋体抗体检测则包括非梅毒螺旋体特异抗体检测和非特异抗体检测，如梅毒螺旋体抗原检测和梅毒螺旋体DNA检测等。
2. 直接检测。
除了血清学检测外，梅毒的直接检测也是一种重要的实验室诊断方法。
直接检测包括梅毒螺旋体的显微镜检查、组织培养和核酸检测等。
其中，梅毒螺旋体的显微镜检查是通过显微镜观察患者体液或病变组织中的梅毒螺旋体，是一种直接而快速的诊断方法。
组织培养则是将患者体液或病变组织进行培养，以寻找梅毒螺旋体的生长。
核酸检测则是通过PCR等方法检测患者体液或病变组织中的梅毒螺旋体DNA，是一种高度敏感和特异的检测方法。
3. 其他检测方法。
除了上述的血清学检测和直接检测外，还有一些其他的实验室诊断方法可用于梅毒的诊断，如梅毒螺旋体的免疫组化检测、蛋白质多肽检测和生物传感器检测等。
这些方法在梅毒的诊断中起着一定的辅助作用，可以提高诊断的准确性和灵敏度。
总结。
梅毒实验室诊断标准是通过血清学检测、直接检测和其他检测方法来确定患者是否感染了梅毒。
这些实验室诊断方法各有优势和局限性，临床医生应根据患者的临床表现和实验室检测结果综合判断，以提高梅毒的诊断准确性和治疗效果。
希望本文对临床医生在梅毒的实验室诊断方面有所帮助，提高对梅毒的诊断和治疗水平。
梅毒的实验室检查与技术规范
梅毒的实验室检查与技术规范概述梅毒（syphilis）是一种由螺旋体梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的性传播疾病。
梅毒的及时检测和确诊对于治疗及防止梅毒的传播至关重要。
本文将探讨梅毒的实验室检查方法和相关的技术规范。
实验室检查方法血清学检测血清学检测是梅毒的首选检测方法，常用的血清学检测方法包括非梅毒螺旋体凝集试验（non-treponemal tests）和梅毒螺旋体特异性试验（treponemal tests）。
非梅毒螺旋体凝集试验包括梅毒螺旋体血清检测（VDRL）和荧光梅毒螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS）。
这些试验通过检测抗体反应来判断是否感染梅毒，并可评估感染程度。
梅毒螺旋体特异性试验主要包括T. pallidum颗粒凝集试验（TP-PA）和ELISA试验。
这些试验可以进一步证实梅毒感染，并对阳性样本进行确认。
分子生物学检测分子生物学检测方法可以直接检测梅毒螺旋体的基因组或其特异性基因片段。
常见的分子生物学检测方法包括聚合酶链式反应（PCR）和DNA杂交试验。
PCR技术可在早期感染时检测到梅毒螺旋体的DNA，具有高度敏感性和特异性。
DNA杂交试验主要用于检测神经梅毒，可检测到T. pallidum在脑脊髓液中的存在。
细菌学检测细菌学检测是直接观察样本中是否存在活动的梅毒螺旋体。
常用的细菌学检测方法有暗视野显微镜检查、苏木精-伊红染色和螺旋体培养。
在显微镜下观察暗视野试验时，活动的梅毒螺旋体会显示出旋转的运动。
苏木精-伊红染色可以染出梅毒螺旋体的形态。
螺旋体培养可以将梅毒螺旋体培养出来，但是需要较长的培养周期，并且并非常规检测方法。
技术规范为确保梅毒实验室检查结果的准确性和可靠性，以下是一些常见的技术规范：1.实验室人员需接受充分的培训，熟悉各项检测方法和技术操作流程，并按照操作规程执行。
2.所有试剂和材料必须符合质量管理规范，并保持良好的保存和标识。
3.实验室必须建立完善的质量控制体系，包括使用标准品进行日常质控、参加外部质控项目以及进行内部质量评估。
检测梅毒的四种方法及其临床意义
近年来．紫杉醇作为主要的抗肿瘤化疗药物在消化道恶 性肿瘤的治疗上受到重视。Ｋｉｍ等应用紫杉醇，联合氟尿嘧啶 和顺铂治疗晚期胃癌取得５１％的有效率［２１。美国ＭＤ Ａｎｄｅｒｓｏｎ 癌症治疗中心Ａｊａｎｉｄ等将其用于治疗上消化道肿瘤，取得很 好的疗效１３１。紫杉醇用于治疗食管癌的单药有效率町达１６％－ ３１％。王瑞林教授采用醛氢叶酸．氟尿嘧啶，顺铂治疗晚期食 管癌，具有较好治疗效果１４１。紫杉醇与顺铂、氟尿嘧啶无交叉 耐药性，联合应用ＨＴ以明显提高疗效。初治患者的有效率为 ６２．５％～７７．０％阁。
１２０例非梅毒对照组中．经１１Ｐ地ＬＩＳＡ检测阴性例数为１１４ 例，特异性为９５％。 ３讨论
据文献报道｜ｌｌ。人体感染梅毒螺旋体后血清中产生的抗 螺旋体抗体比抗类脂质抗体出现早。且特异性抗体出现早、 消失迟，即使经过正规抗梅毒治疗，仍可检测出其特异性抗 体。甚至可终生检出。ＥＬＩＳＡ采用双抗原夹心法，即在聚乙烯 微孔条上预标记基因表达梅毒抗原，用辣根过氧化物酶（ＨｆｕＰ） 标记基因重组梅毒抗原，检测血清中１１Ｐ－－ＩｇＧ抗体和早期的ＩｇＭ 抗体。该法利用抗原的不同特性，联合使用可得到更高的敏 感性和特异性嘲。ＴＰ—ＥＬＩＳＡ有结果客观准确，操作简便，试 剂成本低等优点。可作为早期梅毒诊断的方法，尤其适用于 二期梅毒的诊断。但ＴＰ—ＥＬＩＳＡ本身也存在问题，如标本中 一些类过氧化物酶样物质的增高，血浆蛋白紊乱等，会造成 假阳性１４ｔ。而当标本梅毒螺旋体抗体滴度低于试剂检测限时， 又可出现假阴性。从上述结果中可看到，对于对照组的检测， １２０例中出现６例假阳性。ＳＹＰ采用纯化重组基因的梅毒抗 原，以胶体金作为指示标记于硝酸纤维素膜上进行反应，以 双抗原夹心法原理快速定性检测梅毒螺旋体抗体。灵敏度也 较高，见表１。但血清／浆中浓度过低时，ＳＹＰ会产生假阴性反 应。ＳＹＰ成本低，操作简便。结果明了快速，但不适于批量检 测。ＴＰＰＡ为梅毒确证试验，其特异性和敏感性相当高１３ｔ，但操 作较复杂，对操作人员水平要求也较高。有资料表明ＨＩ，ＴＰＰＡ 对早期梅毒的检出率较低，有可能是梅毒患者血清梅毒螺旋 体抗体滴度未达到试剂盒的检测范围。而产生假阴性反应的 原因。这点从表１中也可看出。
梅毒检测PPT
排除梅毒感染
实验室梅毒检验结果分析
新生儿血清RPR和TPPA检测为阳性，不能 诊断为胎传梅毒。
实验室梅毒检验结果分析
胎传梅毒的实验诊断
具有下列实验室四个指标之一，可确诊为胎 传梅毒： 暗视野检查梅毒螺旋体阳性； 患儿非梅毒螺旋体血清抗体滴度持续上升； 患儿非梅毒螺旋体血清学定量试验结果比母 亲高2个稀释度（4倍），(低于或等于该值 并不排除胎传梅毒)； 患儿检出19（s）-IgM
仪器材料
1.试剂：梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）试 剂盒（日本富士100人份），内有： “A”溶解用液； “B”血清稀释液； “C”致敏颗粒（冻干）； “D” 非致敏颗粒（冻干）； “E”阳性质控血清（液体）。
仪器材料
“C”致敏颗粒（冻干） “D” 非致敏颗粒（冻干) 试验前30分钟按说明书规定量加“A”溶液混匀。
操作步骤
加“D” 非致敏颗粒：第3孔加D液25uL，第4
孔加“C” 致敏颗粒25uL。
混合：将反应板置震荡器震荡30秒。 反应：放湿盒内，室温孵育2小时后观察结果。
结果判定：
试验结果未致敏颗粒不出现凝集者， 才可做出结果判定。如果孔内标本非致 敏和致敏颗粒均产生凝集者，标本需做 重吸收试验。
做最后确定。
实验室梅毒检验结果分析
梅毒的诊断：必须依靠病史、临床症状、实 验检查进行综合分析。
实验室检查结果对诊断梅毒起决定性意义。
实验室梅毒检验结果分析
RPR＋、 TPPA-
RPR假阳性
RPR＋、 TPPA + 现症梅毒
RPR－、 TPPA+ 既往感染，极早期梅毒
RPR－、 TPPA-
加样：吸取50ul血清(浆)分别与各圈中盐水作 稀释度后，然后涂布整个圈内。
梅毒的实验室诊断及临床应用
性 。但这些疾病的抗体滴度多较低 ， 一般＜ ：， １ 常在 ６个月 内 ８
转 为阴性 。一些 自身免 疫性疾病 ， 如系统性 红斑狼疮 、 干燥 综合征 、 盘状红斑狼疮 、 自身免 疫性 溶血性贫血 、 桥本 甲状腺 炎、 慢性 肾炎 、 麻风 、 类风 湿关 节炎 、 湿性 心脏病 、 风 系统 性 硬化征 、 醉品成瘾 ； 麻 孕妇 和老年人 ；％～ ％的一般人 群 ， １ ２ 可
增： 常采用 Ｔ 外 噤抗原设计弓 物 ， Ｐ Ｉ 检测样本中 Ｔ 。 Ｐ
Hale Waihona Puke 假 阳性 反应 ， 即生 物学假阳性 。一些感染性疾 病 ， 如麻疹 、 风 疹、 水痘 、 牛痘疹 、 病毒 性肝炎 、 上呼吸道感染 、 传染性单核细 胞增 多症 、 肺炎链球 菌肺炎 、 亚急性细菌性心 内膜炎 、 活动性
动活跃 的 Ｔ 。③镀银染色或 墨汁染色镜检 ： Ｐ 同暗视野显微镜 观察取材 ， 经镀银 染色或墨 汁染色后 ， 普通光学 显微镜 镜 用 检， 可见固定的 Ｔ 。 Ｐ ④多功能显微镜诊 断仪 ： 可直接观察 ｒ ， ｒ Ｐ 但仪器较贵 ， 以普及 。⑤直接荧光试验 ： 难 用异硫氰酸荧光素 标记 １ ’ Ｐ外膜 蛋自制备的单 克隆抗体 ，用荧光 显微镜 观察抗 原抗体复合物 ， 出现黄绿色荧光 ， 表明样本中含 ｒ 。 Ｉ ⑥基 因扩 ’ Ｐ
清学检测。 １ 梅毒病原体检测
梅毒病原体检测适宜诊断早期梅毒 ，特别是在一期梅毒 早期 ，当 ｒ ｆ Ｐ非特异性抗体和特异性抗体还 未产生或量较少
时 ， 断梅毒不可或缺 的方法 。常用 的方法如下 ： Ｔ 培 是诊 ① Ｐ
养： 虽然实验室培养可 以取得成 功 ， 但培 养条件要求较高 ， 难
梅毒实验室诊断金标准
梅毒实验室诊断金标准
梅毒是一种由螺旋体属细菌梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的性传播疾病。
实验室诊断梅毒的金标准包括以下几种方法：
1. 直接检测：通过显微镜观察梅毒螺旋体的存在。
常用的方法包括暗视场显微镜检查（dark-field microscopy）和免疫荧光染
色（immunofluorescence staining）。
2. 血清学检测：主要包括非特异性反应和特异性反应两个层次的检测。
- 非特异性反应：通过检测体液中的非特异性抗体来提供梅
毒感染的线索。
最常用的是非梅毒螺旋体抗原卡（Non-Treponemal Antigen Test），主要有梅毒假阳性试验（Rapid Plasma Reagin，RPR）和梅毒螺旋体试验（Venereal Disease Research Laboratory，VDRL）等。
- 特异性反应：通过检测体液中的特异性抗体来确认梅毒感
染的诊断。
最常用的是梅毒螺旋体抗原检测（Treponemal Antigen Test），主要有梅毒螺旋体颗粒血清试验（Treponema Pallidum Particle Agglutination Assay，TPPA）和梅毒螺旋体酶
联免疫吸附试验（Treponema Pallidum Enzyme Immunoassay，TP-EIA）等。
这些实验室诊断方法可以互相配合，提供梅毒感染的准确诊断
结果。
综合上述的非特异性反应和特异性反应的检测结果，并结合临床表现和流行病学史，可以得出梅毒的确诊结论。
梅毒的实验室诊断标准
梅毒的实验室诊断标准梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，其诊断对于预防和治疗具有重要意义。
实验室诊断是梅毒诊断的重要手段之一，本文将介绍梅毒的实验室诊断标准，以帮助临床医生更准确地诊断和治疗梅毒。
一、血清学检测。
血清学检测是梅毒诊断的金标准之一。
包括非梅毒螺旋体抗体（非梅毒螺旋体特异性抗体）和梅毒螺旋体抗体（梅毒螺旋体特异性抗体）两种检测方法。
非梅毒螺旋体抗体包括非梅毒螺旋体血凝试验（Nontreponemal serologic test，如RPR试验）和梅毒螺旋体抗体包括梅毒螺旋体血凝试验（Treponemal serologic test，如TPPA试验）。
在实验室诊断中，通常要求首先进行非梅毒螺旋体抗体检测，如RPR试验，若结果阳性，则需进行梅毒螺旋体抗体检测，如TPPA试验，以确认诊断。
二、直接检测。
直接检测是指在患者临床症状出现后，通过镜检或PCR等方法直接检测患者体液中的梅毒螺旋体。
常用的直接检测方法包括血清暗视野显微镜检查、梅毒螺旋体DNA检测等。
直接检测方法能够更快速地确定患者是否感染了梅毒，对于早期感染的患者具有重要意义。
三、其他实验室检测。
除了血清学检测和直接检测外，还有一些其他实验室检测方法可辅助梅毒的诊断，如梅毒螺旋体培养、梅毒螺旋体分子生物学检测、梅毒螺旋体抗原检测等。
这些方法在实验室诊断中起着重要的辅助作用，能够提高梅毒诊断的准确性和灵敏度。
综上所述，梅毒的实验室诊断标准主要包括血清学检测、直接检测和其他实验室检测方法。
在临床实践中，医生应根据患者的临床表现和实验室检测结果，综合判断患者是否感染了梅毒，以便及时进行治疗和干预。
希望本文能够帮助临床医生更好地理解梅毒的实验室诊断标准，提高梅毒的诊断水平，为患者的健康保驾护航。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
梅毒实验室诊断梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。
一、显微镜检查法（一）暗视野显微镜检查【基本原理】梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。
【仪器材料】1．暗视野显微镜。
2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。
【标本采集】1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。
2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。
【操作步骤】1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。
2．聚光：将标本玻片置载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。
3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。
【结果判读】梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20μm，直径小于0.2μm，有6～12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。
暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。
【结果报告】1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。
2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。
【临床意义】1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。
2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。
3．如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。
【注意事项】1.取材时尽量避免出血，以免影响镜下观察。
2.取材后应立即置暗视野显微镜下观察。
3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。
（二）镀银染色检查【基本原理】梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。
【仪器材料】1．显微镜。
2．罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。
【标本采集】1. 皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液涂片。
2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上。
【操作步骤】1．涂片干燥：将标本涂于干净载玻片作一薄片，于空气中自然干燥。
2．固定：用固定液将涂片固定2～3分钟。
3．洗涤：用无水乙醇洗涤玻片上的油污。
4．媒染：加媒染剂于涂片上，微加热产生蒸汽，染30秒。
5．银染：水洗，加银染液于涂片上，微加热产生蒸汽，染30秒。
6．镜检：水洗、待干，用油镜检查。
【结果判读】显微镜下见到染成棕褐色的梅毒螺旋体为阳性结果。
【结果报告】1．阳性：见到染成棕褐色梅毒螺旋体。
2．阴性：未见到染成棕褐色的梅毒螺旋体。
【临床意义】同暗视野显微镜检查法。
【注意事项】应注意与其他螺旋体加以鉴别。
二、血清学检测法（一）非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验，包括性病研究实验室（VDRL）试验、快速血浆反应素（RPR）环状卡片试验、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等。
VDRL试验【基本原理】梅毒螺旋体感染人体后，宿主会产生抗类脂抗原的抗体（反应素），与一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物抗原反应，可检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体。
【仪器材料】1. 水平旋转仪、显微镜。
2. 试剂盒：VDRL抗原原液、VDRL缓冲液、抗原滴管及针头、带直径14mm 漆圈的玻璃反应板、VDRL试验结果参照图片。
3. 30mL平底玻璃小瓶、生理盐水。
【标本采集】1.血清：抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。
也可采用冻存的血清。
2.脑脊液：采用腰椎穿刺术获得，应由相关专业人员操作。
【操作步骤】1.VDRL抗原配制。
2.VDRL玻片定性试验（1）灭活：血清标本56℃灭活30分钟。
（2）吸样：吸取0.05mL血清放入反应板圈中，将血清涂布到整个圈内。
（3）加抗原：用标准针头加入1滴抗原。
（4）反应：将反应板置水平旋转仪上旋转4分钟，〔(180±5)次/分钟〕，立即置低倍显微镜下观察。
3.VDRL定量试验（1）加稀释液：在圈内加入0.05mL生理盐水（根据需要确定稀释度）。
（2）样本稀释：吸取0.05mL样本与各圈中盐水作系列稀释并涂布整个圈内。
（3）以下步骤同定性试验（2）～（4）。
【结果判读】凝集反应强度分级：3＋～4＋：大的或中等大小的絮状物，液体清亮2＋：絮状物较小，液体较清亮1＋：絮状物较小，均匀分布，液体混浊±：抗原复合物颗粒稍粗－：抗原颗粒均匀、细小【结果报告】1．定性试验：（1）阳性：镜下可见1＋～4＋的絮状凝集物。
（2）阴性：不产生凝集反应。
2．定量试验：滴度：镜下可见絮状凝集物的血清最高稀释倍数。
【临床意义】对一期、二期、潜伏期和晚期梅毒患者的敏感性分别为78%、100%、96%和71%。
脑脊液VDRL阳性对神经梅毒有诊断意义。
【注意事项】1．VDRL用抗原需当天配制。
2．试验反应完毕，应立即观察结果。
RPR试验【基本原理】RPR试验是VDRL试验的一种改良方法。
该法在心磷脂、卵磷脂和胆固醇等组成的抗原中加入活性炭颗粒，与待检血清（浆）中的反应素结合，形成肉眼可见的黑色絮状物。
【仪器材料】1．水平旋转仪。
2．RPR试剂盒：RPR抗原、直径为18mm圆圈的反应卡片、抗原滴管、针头。
【标本采集】1．血清：抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。
也可采用冻存的血清。
2．血浆：各种抗凝剂制备的血浆。
【操作步骤】1．定性试验（1）加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内。
（2）加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头[每毫升（60±1）滴]加1滴抗原。
（3）反应：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟[（100±5）转/分钟]。
立即在亮光下观察结果。
2．定量试验（1）稀释液准备：在圈内加入0.05mL生理盐水（根据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。
（2）加样：吸取0.05mL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。
（3）同定性试验（2）～（4）。
【结果判读】凝集反应强度分级：3＋～4＋：圆圈内出现中到大的黑色絮状物，液体清亮2＋：圆圈内出现小到中的黑色絮状物，液体较清亮1＋：圆圈内出现小的黑色絮状物，液体混浊－：圆圈内仅见碳颗粒集于中央一点或均匀分散【结果报告】1．定性试验：（1）阳性：出现1＋～4＋强度的凝集反应。
（2）阴性：不产生凝集反应。
2．定量试验：滴度：出现凝集反应的血清最高稀释倍数。
【临床意义】1．RPR试验适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的检查。
2．对未经治疗的一期、二期和潜伏梅毒患者的敏感性分别为86%、100%和98%。
【注意事项】试验应在23～29℃环境中进行。
⏹TRUST试验TRUST试验是用甲苯胺红颗粒代替RPR试验中的碳颗粒作为指示物，所以阳性结果为红色絮状物。
其基本原理、仪器材料、标本采集、操作步骤、结果判读、结果报告、临床意义及注意事项等与RPR试验基本相同。
（二）梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验是以梅毒螺旋体为抗原的特异性的抗原抗体反应，用以检测梅毒抗体，常用的方法有梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）和梅毒螺旋体蛋白印迹试验（TP-WB）等方法。
⏹TPPA试验【基本原理】TPPA试验是用超声裂解梅毒螺旋体制备的抗原，致敏明胶粒子，其致敏粒子与待检血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见的凝集。
【仪器材料】1. 微量震荡器。
2. 试剂盒：“A”溶解用液、“B”标本稀释液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”质控血清。
3．U型反应板。
【标本采集】同RPR试验。
【操作步骤】1．试剂准备：试验前将待检样本和试剂应恢复到室温。
2．加稀释液：每份样本做4孔，加B液至反应孔内，第1孔100µL，第2～4孔各25µL。
3．样本稀释：取血清25µL加至第1孔，混匀后取25µL至第2孔，连续倍比稀释至第4孔，最后1孔混匀后弃去25µL。
4．加对照液：第3孔加D液25µL，第4孔加C液25µL。
5．混合：将反应板置震荡器震荡30秒。
6．反应：置湿盒内，孵育2小时后，或放4℃冰箱过夜观察结果。
【结果判读】观察凝集反应强度，分级如下：4＋：粒子光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠3＋：粒子光滑覆盖大部分孔底2＋：粒子光滑聚集覆盖孔底，周围有一细胞环1＋：粒子光滑集聚覆盖孔底，周围有一明显细胞环±：粒子沉集孔底，中央形成一小点－：粒子紧密沉积孔底中央【结果报告】1．阳性：未致敏粒子不出现凝集（第3孔），血清1︰80以上稀释与致敏粒子产生1＋～4＋凝集反应。
2. 阴性：未致敏粒子和致敏粒子均不产生凝集反应。
【临床意义】1. TPPA可作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验。
2．梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA试验仍可阳性，故TPPA试验阳性不能作为疗效观察的指标。
3．TPPA阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
【注意事项】1. 试验结果为“可疑”时，应选用其他的试验方法进行复验。
2. 如未致敏粒子出现凝集反应，样本进行吸收后再进行试验，或改用其他试验方法。
TPHA试验【基本原理】TPHA试验用超声裂解的梅毒螺旋体菌体为抗原，致敏经醛化、鞣化的羊或禽类红细胞，与抗梅毒螺旋体抗体反应，产生肉眼可见的抗原抗体凝集。
【仪器材料】1. 微量震荡器。
2．TPHA试剂盒：“A”溶解用液、“B”标本稀释液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”质控血清。
3. U型反应板。
【标本采集】同RPR试验。
【操作步骤】1．试剂准备：试验前试剂恢复到15～25℃。
2．加稀释液：加B液至反应板，第1孔25μL，第2孔100μL，第3～5孔各加25μL。
3．样本稀释：取血清25μL加至第1孔，混匀后取25μL至第2孔，混匀后取25μL至第3孔，混匀后弃去25μL，再从第2孔取25μL至第4孔，混匀后取25μL 至第5孔，混匀后弃去25μL。
4．加对照液：第3孔加D液（未致敏细胞）75µL，第4、5孔加C液（致敏细胞）各75μL 。
5．混合：将反应板置震荡器震荡30秒。
6．反应：置湿盒内，15～25℃孵育4小时，或放4℃冰箱过夜观察结果。
【结果判读】同TPPA试验。
【结果报告】同TPPA试验。
【临床意义】同TPPA试验。
【注意事项】有些采用禽类红细胞为载体的TPHA试验，血清不用吸收，可直接进行试验。