凝血、止血机理与血凝仪器测定方法综述

要 的时 间 。
些先 进 的血 凝 仪 器 可 以进 行 多 项 目测 定 包 括 纤 维
系统 的一 些 物质 。纤溶 与凝 血 过 程一 样 ， 是 由一 系
列 因子参与 ， 依次激活并逐级放大的一个系统 。主
要 测定 的物 质有 ： （ １ ）纤溶 酶 原 Ｐ Ｌ Ｇ，又称 血 浆 素 原； （ ２ ）激 肽 释 放 酶 原 Ｐ Ｋ； （ ３ ）高 分 子 量 激 肽 原 Ｈ ＭＷＫ； （ ４ ）尿 激 酶原 ； （ ５ ）纤 溶 酶原 激 活 物 Ａ Ｐ Ａ、 （ ６ ）尿激 酶 Ｕ Ｋ等 。还 包 括纤 溶 系统 中存 在 的多种 抑制 因子 ， 如： （ ７ ）纤 溶酶 原 激 活物 抑 制剂 Ｐ Ａ Ｉ ； （ ８ ）
理 用药 。 ２ 仪 器的检 测原 理 和基 本方 法
血 样 品时 ， 计 算
电路 首 先检 测 出标 准 品 的凝 固时 间 ， 再 根据 凝 固时
间从标准曲线上求出浓度或潘 眭。 ２ ． ２ 免 疫 学 方法 该 法 是 以要 检测 的 血 浆 中 物 质
使 用 光 学法 检 测 时 ， 一 般 是将 预温 好 的 待检 血
的纤 维 蛋 白还 要 适 时 地 被 体 内正 常 存 在 的 纤 溶 系 统 所溶解 ， 以保证 血 液畅通 和机 体 的正 常功能 。 由此可 见 ， 凝 血 的过 程 是非 常复 杂 的 。 医学 上
浆标本和试剂 快速混合 ，在混合瞬间吸光 度非常 弱， 随着 样 品 和试 剂混 合 物 中 的纤 维 蛋 白凝 块 的形
验 项 目需 要 自动 选 取 曲线 上 的一 点 所 对 应 的时 问
和蛋 白 Ｓ （ Ｐ Ｃ 、 Ｐ Ｓ ） ； （ ３ ） 肝 素辅 因子 Ｉ Ｉ （ Ｈ Ｃ —Ｉ Ｉ ） 等等。
血 栓／ 止血 实验 中还 包括 纤 维蛋 白溶 解 系统 ， 有
为 凝血 时 问 ； 仪器 内 的计算 电路 对做 出 的曲 线求 二 次微 分 ， 二次 微 分为 零 的点 ， 就是 凝 固终 点 ； 因 为凝 血是一个酶促的加速过程 ， 到凝 固终 点 时 ， 反 应 速 度 和加 速度 都 达 到最 大 ， 此 时凝 固 曲线 的 二 次微 分 为零 。如凝 血测 定 常规项 目中的凝 血酶 原 时 间（ Ｐ Ｔ ） 的测 定 ，就 是 在待 测 血浆 中加 人 过量 的 因子 Ｉ Ｉ Ｉ 和 钙离子 ， 使血浆发生体外凝 固， 在 凝 固 过 程 中纤 维 蛋 白原 逐 渐 变成 纤 维蛋 白 ，其理 化 性 会 发生 改 变 ， 使得 仪器 透 射光 的强度 也会 发 生改 变 ， 仪器 Ｃ Ｐ Ｕ电 路 会 自动 根 据 光 强 度 的 变 化 来 判 断 血 浆 凝 固所 需
又相 互 依 存 的复 杂 体 系 ， 其 问 是互 相 交 叉 ， 关 系 错 综 复杂 ， 在正 常情 况 下 维持 动 态平 衡 。如果 一 方 面 发生 异 常即会 打 破平 衡 ，导致 出血 或 血 栓形 成 ， 如 出血 ， 除 了血 小 板 和血 管 因素 之 外 ， 可 能 是凝 血 因 子先 天 或后 天 缺乏 ， 也可能是抗凝物质过少 ， 或者 是纤 溶 亢进 。而血 栓 性疾 病 ， 则 会 是 天 然抗 凝 物 质 缺乏 或 对抗 凝 物 质 有 抗 性 ，也 可 能 是 纤 溶 系统 缺 陷 。只有 借 助于 检 验结 果 ， 才能 弄清 病 因的 实质 合
纤 溶酶 抑制 物 。 凝血 、 抗凝 、 纤 溶 以及 纤 溶 抑制 是 既 相 互 对 抗
仪器 在 测定 待 测 血浆 样 品前 ，必 须 首先 定标 ，
也 就 是 对 已知 浓 度 或 活性 的 标 准 品 的凝 血 时 问 进 行测定 ， 并 以 已知 浓 度或 活 性 的标 准 品 所 对应 的凝
一
合 的 的瞬 间 ， 也就是吸光度最弱时 ， 设 定 吸光 度 值
Ａ ＝ ０ ％， 在 血 浆 和 样 品凝 固 完 全 后 ， 吸光 度 最 强 时 ，
成稳定 的纤 维 蛋 白。
在血 管 损 伤 时 ， 凝 血机制被启动 ， 人 体 内含 有 的多 种天 然抗 凝 物 ， 会 被激 活 成具 有 酶 活性 的凝 血 因子 。血凝 检测 可 以测定 重要 的天然抗 凝物 ， 如（ １ ）
作为抗原 ， 而 试剂 中带 有 相 应 的 抗 体 ， 利 用标 本血
浆 中 的抗 原 和 试 剂 中 的抗 体 发 生 特 异 性 结 合 反 应 对标 本 中待测 物 质进行 定 量分 析 。凝 血实 验 应用 的 免疫 方 法 很 多 ， 如免疫 电泳 、 免 疫 扩 散 法 和免 疫 比 浊法 等 。而全 自动 血凝 仪一 般采 用 免疫 比浊法 。免 疫 比浊法 可分 直接 浊度 分析 和乳 胶 比浊 。直接 浊度 分析 有透射 光 比浊 和散 射光 比浊 两种 。透 射光 比浊 是指 血 凝 仪 光 源部 分产 生 的单 色 光 通 过 待 检 血 浆 时， 在 标 本 中加 人 试 剂 后 ， 抗 原 和 抗 体 反 应 就 会 形
抗凝 血酶 ～ １ １ １ （ Ａ Ｔ 一 １ １ １ ） ； （ ２ ） 凝 血 酶调 节 蛋 白、 蛋白 Ｃ
设定 吸光 度 值 Ａ ＝ １ ０ ０ ％； 在０ ％～ １ ０ ０ ％吸光 度 变化 之 间 ，仪器 检 测 通道 单位 时 间 内分 别采 集 多 个数 据 ， 这 样 吸光 度 的变 化 值 可 做 出一 条 曲线 ， 仪 器 根 据 实
成， 反 应 杯 内标 本 吸 光 度 逐 渐 增 强 ， 当标 本 凝 固 完
全后 ， 吸 光 度 值 就 稳 定 下来 ； 仪 器 在血 浆 和试 剂混
般用瀑布学说来解释。简单的瀑布学说就是 ： 凝 血 有 内源 和 外 源 两 条 途径 和 四个 关 键 步 骤 ： （ １ ） 启 动； （ ２ ） 血 液凝 血 活 酶 形 成 ， （ ３ ） 凝血酶形成 ； （ ４ ） 形
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学装 备 ２ ０ ０ ７年 １ ２月第 ４卷第 ｌ ２期
凝血 、 止血机 Ｌ ｊ 血凝仪器测定方法综述—— 杨
进 等
时没 有沿 陛， 仅 在凝 血开 始后 被激 活 。此 外 ， 所 形成
判 断血浆 凝 固终点 的方 法 。