普通微生物的形态观察
微生物学实验一 微生物制片及形态观察
实验一微生物制片及形态观察一、显微镜油镜的使用显微技术是微生物检验技术中最常用的技术之一。
显微镜的种类很多，在实验室中常用的有：普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。
1. 结构光学显微镜是由光学放大系统和机械装置两部分组成。
光学系统一般包括目镜、物镜、聚光器、光源等；机械系统一般包括镜筒、物镜转换器、镜台、镜臂和底座等（图1－1）。
图1－1 光学显微镜结构图标本的放大主要由物镜完成，物镜放大倍数越大，它的焦距越短。
焦距越小，物镜的透镜和玻片间距离（工作距离）也小。
油镜的工作距离很短，使用时需格外注意。
目镜只起放大作用，不能提高分辨率，标准目镜的放大倍数是十倍。
聚光镜能使光线照射标本后进入物镜，形成一个大角度的锥形光柱，因而对提高物镜分辨率是很重要的。
聚光镜可以上下移动，以调节光的明暗，可变光栏可以调节入射光束的大小。
显微镜用光源，自然光和灯光都可以，以灯光较好，因光色和强度都容易控制。
一般的显微镜可用普通的灯光，质量高的显微镜要用显微镜灯，才能充分发挥其性能。
有些需要很强照明，如暗视野照明、摄影等，常常使用卤素灯作为光源。
2. 原理显微镜的放大效能（分辨率）是由所用光波长短和物镜数值口径决定，缩短使用的光波波长或增加数值口径可以提高分辨率，可见光的光波幅度比较窄，紫外光波长短可以提高分辨率，但不能用肉眼直接观察。
所以利用减小光波长来提高光学显微镜分辨率是有限的，提高数值口径是提高分辨率的理想措施。
要增加数值口径，可以提高介质折射率，当空气为介质时折射率为1，而香柏油的折射率为1.51，和载片玻璃的折射率（1.52）相近，这样光线可以不发生折射而直接通过载片、香柏油进入物镜，从而提高分辨率。
显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积，而物镜的放大倍数越高，分辨率越高。
3. 使用方法1）低倍镜观察先将低倍物镜的位置固定好，然后放置标本片，转动反光镜，调好光线，将物镜提高，向下调至看到标本，再用细调对准焦距进行观察。
微生物菌落及个体形态观察,实验报告
微生物菌落及个体形态观察,实验报告
实验目的：
观察微生物菌落的形态及个体形态，了解微生物的生长特点和性状。
实验材料和设备：
1. TSY琼脂培养基
2. 火焰灭菌器
3. 培养皿
4. 显微镜
5. 无菌培养基
6. 实验手套及护目镜
实验步骤：
1. 准备培养基：将TSY琼脂培养基按照说明书制备好，热离
心并倒入培养皿中。
2. 灭菌处理：使用火焰灭菌器对培养皿进行灭菌处理，避免外界细菌的污染。
3. 分菌涂布：将待观察的微生物菌液取少量涂布于培养皿表面，通过灭菌针均匀地划过琼脂表面。
4. 培养：将培养好的培养皿倒置放置于恒温培养箱中，设定合适的温度和湿度条件，使其适宜生长。
5. 观察生长：每隔一段时间使用显微镜观察微生物的菌落生长情况，并记录下来。
实验结果：
通过观察发现，微生物菌落的生长形态各异。
有的菌落呈圆形，
边缘光滑，整齐排列；有的菌落呈不规则的形状，边缘模糊，有分枝延伸出；还有一些菌落呈现为六边形或星形等不寻常的形状。
个体形态方面，通过显微镜观察发现微生物细胞大小不一，有的呈球形，有的呈杆状，形态多样。
实验结论：
微生物菌落的形态和个体形态具有多样性，不同的微生物具有不同的生长特点和形态。
通过观察可以初步了解微生物的外观特征，并对微生物的分类和鉴定提供参考。
不同形态的菌落和个体形态的研究对于深入了解微生物的生态环境和功能具有重要意义。
微生物形态观察实验报告
实验报告课程名称：生命科学趣味实验实验名称：微生物形态观察指导教师：一、实验目的：1．掌握普通光学显微镜的原理、结构、各部分的功能和使用方法。
2．了解酵母菌、霉菌的个体形态特征。
二、实验原理：显微镜成像原理：目镜、物镜各自相当于一个凸透镜，被检标本置于聚光器与物镜之间，即物镜下方1～2倍焦距之间，物镜可使标本在物镜的上方形成一个倒立放大实像（倒像），该实像正好位于目镜的下焦点（焦平面）之内，目镜进一步将它放大成一个虚像，通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处。
三、实验仪器、材料酵母菌涂片、霉菌涂片。
奥林巴斯显微镜、擦镜纸等。
四、实验方法：1 显微镜安置取显微镜时一手握住镜臂，一手托住底座，使显微镜保持直立、平稳，置显微镜于平整实验台上，镜座距实验台边缘约3～4 cm，接通电源。
注意：显微镜移动时切忌用单手拎提。
2 选择物镜将低倍物镜放入光路。
3 调整光强打开显微镜主电源，调整照明度。
通过亮度调整旋钮来改变电压大小从而调整显微镜亮度强弱。
4 调整聚光器位置和孔径光阑在孔径光阑环上刻有物镜倍率（10倍，40倍），观察时将其与使用物镜相对应倍率放到正面。
5 放置标本调粗调旋钮使载物台下降，向外拉开机械式载物台样本夹自前向后将标本切片放入平台，标本放稳后，再将标本夹轻轻放回原位；通过垂直旋转移动杆和水平旋转移动杆来上下和左右移动标本。
6 聚焦① 对焦要领为：从侧面看，转动粗调旋钮，使物镜尽可能接近标本；一边看目镜，一边调粗调旋钮，使载物台下降；看到标本后，再用细调旋钮正确对焦。
② 调整瞳距：一边看目镜，一边移动双目镜筒，让左右视野一致。
标识●的位置表示瞳距。
③ 调整屈光度数：以右眼看右侧目镜，旋转粗、细调旋钮对好焦距；以左眼看左侧目镜，旋转屈光度调整环，对好焦距。
④ 目镜眼罩使用方法：戴眼镜时候，将眼罩折叠，可防止眼镜和目镜接触所造成擦痕；不戴眼镜时候，将折叠眼罩向外拉长，可防止目镜和眼睛之间射入不必要光线，利于观察。
细菌的形态观察实验报告
一、实验目的1. 掌握显微镜油镜的使用方法。
2. 通过观察细菌的形态结构，了解细菌的基本特征。
3. 熟悉细菌的分类方法，为后续的细菌鉴定工作打下基础。
二、实验原理细菌是微生物的一种，具有个体微小、结构简单、繁殖迅速等特点。
细菌的形态结构主要包括细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等基本结构，以及鞭毛、荚膜、芽孢等特殊结构。
通过观察细菌的形态结构，可以初步判断其种类，为后续的细菌鉴定工作提供依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性球菌、革兰氏阳性杆菌、革兰氏阴性杆菌。
2. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、无菌操作台、无菌试管、酒精灯、火柴、镊子、滴管、染色液（结晶紫、碘液、番红）等。
四、实验步骤1. 细菌涂片制作（1）取无菌试管，加入适量的细菌培养液。
（2）用无菌镊子取少量细菌培养液，滴于载玻片上。
（3）用无菌盖玻片轻轻压在细菌培养液上，使细菌均匀分布。
（4）用酒精灯对载玻片进行轻微加热，使细菌固定。
2. 细菌染色（1）用滴管滴加适量的结晶紫染液于载玻片上的细菌涂片上。
（2）染色约1分钟，然后用滴管滴加适量的碘液。
（3）染色约1分钟，用蒸馏水冲洗载玻片上的染色液。
（4）用番红染液复染约1分钟，用蒸馏水冲洗载玻片上的染色液。
3. 细菌观察（1）将载玻片置于显微镜下，调整光圈和焦距，使视野清晰。
（2）观察革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性球菌、革兰氏阳性杆菌、革兰氏阴性杆菌的形态结构。
（3）记录观察结果，包括细菌的大小、形状、排列方式、染色特性等。
五、实验结果与分析1. 革兰氏阳性球菌：呈球形，直径约1～2微米，排列成单行、双行或链状。
染色后，菌体呈紫色。
2. 革兰氏阴性球菌：呈球形，直径约1～2微米，排列成单行、双行或链状。
染色后，菌体呈红色。
3. 革兰氏阳性杆菌：呈杆状，直径约0.5～1微米，长度约为2～5微米，排列成单行、双行或链状。
染色后，菌体呈紫色。
4. 革兰氏阴性杆菌：呈杆状，直径约0.5～1微米，长度约为2～5微米，排列成单行、双行或链状。
微生物实验报告(微生物形态观察、分布、灭菌消毒)
FOR PERSONAL USE ONLY IN STUDY AND RESEARCH; NOT FOR COMMERCIAL USE微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜（油镜）的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜（油镜）的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油，然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，以免碰撞玻片，用双眼观察目镜，同时调节细调节器，直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时，用右手持镜壁，左手托镜座，平端于胸前2.油镜用毕后，要立即用擦镜纸擦去香柏油；再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头；最后，用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去，以免损伤油镜头3.镜头擦净后，降低接物镜并将其转成八字形，罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3．微生物知识1．细菌按形态分类：球菌：球形（包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等）杆菌：杆状（包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等）螺旋菌：螺旋状（包括螺旋菌、弧菌等）2．细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3．细菌的特殊结构荚膜：如肺炎双球菌鞭毛：又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如：变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞：如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4．微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类：细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类：真菌、原生动物、显微藻类非细胞类：病毒、亚病毒5．真菌单细胞：圆形、芽生孢子。
如：酵母菌多细胞：菌丝及孢子、孢子出芽。
如：霉菌6．白假私酵母菌（白念）生物学性状：G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性：皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查：直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7．新型隐球菌生物学性状：圆形酵母型菌、外周有厚荚膜（比菌体大1-3倍）致病性：吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿；侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查：脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查；墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔：1支；大镊子：1支；火柴：1盒；蜡笔：1支；试管架：1个；酒精灯：1个；接种环：1支；Olympus显微镜：1台；显微镜使用记录本：1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1）球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌（子弹形）、脑膜炎双球菌（蚕豆形）、四联菌2）杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌（异染颗粒）、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3）螺形菌弧菌——霍乱弧菌；螺菌；螺杆菌——幽门螺杆菌；弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus)；肺炎双球菌(pneumo coccus)；脑膜炎球菌(meningococcus)；破伤风杆菌（Clostridium Tantenus）；霍乱弧菌（vibrio cholera)；芽胞(spore)；鞭毛（flagellum)；荚膜(capsule)；钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图，已交。
微生物的种类和特征
微生物的种类和特征微生物是一类极小的生物体，不能用肉眼直接看到，需借助显微镜进行观察。
微生物在自然界中广泛存在，包括细菌、真菌、病毒、原生动物和藻类等。
它们具有以下的特征：1. 细菌（Bacteria）：细菌是单细胞微生物，形态呈球形、杆状、螺旋状等多样化，大小仅为几微米。
细菌具有细胞壁，内部则包含细胞质、核糖体和染色体等结构。
细菌不具备真正的细胞核，其基因组不包裹在核膜中，而是浸于细胞质中。
细菌可以根据需氧性分为厌氧菌和需氧菌，其中一部分的细菌能够利用光合作用进行独立自主的生存。
2. 真菌（Fungi）：真菌是生活在陆地和水中的一类生物体。
它们通常由菌丝形态构成，菌丝之间可以通过分生孢子繁殖。
真菌具有分为子实体，可分为子实体菌与子实体霉。
子实体菌包括酵母菌和霉菌，而子实体霉则包括了蘑菇和伞菌、露菌等。
与细菌不同，真菌的细胞壁透性较低，它的生长速度比较缓慢。
3. 病毒（Virus）：病毒是一种非细胞的微生物，它们只能在寄生于其他生物细胞内进行繁殖。
病毒由核酸（DNA或RNA）和蛋白质壳组成，没有细胞质或细胞核。
病毒通过感染宿主细胞，将其当作自己的"工厂"来复制自己的遗传物质，从而进行繁殖。
病毒不能自主进行新陈代谢，需要依靠它们所寄生的细胞来提供能量和资源。
4. 原生动物（Protozoa）：原生动物是一类单细胞的异养生物，它们属于真核生物的一部分。
原生动物通常以异养方式获取养分，例如摄食、吸收或囊泡摄取等。
它们具有细胞膜、细胞核以及其他细胞器官，包括细胞质、线粒体和食品囊泡。
原生动物的形态多样，包括虫状、杆状、球状等。
5. 藻类（Algae）：藻类包括多种单细胞或多细胞植物，通常以光合作用为能源来生存。
藻类的细胞膜包裹着细胞质、叶绿体和核，它们还具有细胞壁来提供支持和保护。
藻类形态多样，包括单细胞的球形藻、多细胞的海藻以及链状藻等。
这些微生物在自然界中扮演着重要的角色。
例如，细菌参与了自然界中的各种生物循环过程，包括氮循环和碳循环等。
几种常见酵母菌、霉菌的形态结构观察
微生物实验报告几种常见酵母菌、霉菌的形态结构观察姓名：学号：系别：班级：日期：同组成员：一、摘要通过对酵母菌、霉菌形态结构观察，了解酵母菌、霉菌形态结构的形态结构知识。
实验结果为：1、酵母菌一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬性。
菌落形态与细菌相似，但较大较厚，呈乳白色或红色，表面湿润、粘稠，易被挑起。
2二、实验目的1、学习酵母菌、霉菌形态结构。
2、学习酵母菌、霉菌观察方法。
3、了解酵母菌、霉菌在实际中的意义。
三、实验原理酵母菌：酵母菌多呈圆形、卵圆形，有的呈分支的菌丝状。
无性繁殖以出芽生殖为主，少数以分裂方式繁殖；有性生殖是通过不同遗传性的细胞接合产生子囊孢子的方式进行。
子囊孢子可用孔雀绿进行染色观察。
观察细胞形态和内部结构可采用染色的方法。
美蓝是无毒性的染料，新陈代谢旺盛的细胞具有较强的还原能力，使美蓝从蓝色的氧化型变成无色的还原型；而死亡细胞无此还原力，故被染成蓝色。
霉菌：霉菌可产生复合分枝的菌丝体，分基内菌丝、气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍/高倍显微镜即可观察。
四、实验材料与仪器1、菌种：产黄青霉、黑曲霉、黑根霉、总状毛霉、酿酒酵母、热带假丝酵母斜面菌种。
2、培养基：PDA培养基、0.05%美蓝染液、5%孔雀绿染液、半固体PDA培养基、乳酸苯酚固定液等。
3、仪器及用具：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、镊子、滴管、吸水纸等。
五、实验内容和步骤酵母菌形态观察1、酵母菌活体观察及死亡率的鉴定（1）取酿酒酵母PDA斜面，以无菌水洗下菌苔制成菌悬液。
（2）取洁净载玻片一张，滴加0.05%美蓝染液1滴于载玻片中央，用接种环取酵母菌悬液与染色液混匀，染色2-3min，加盖玻片，在高倍镜下观察酵母菌个体形态。
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
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微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
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3．革兰氏染色法：
革兰氏染色法将细菌分为G＋和G- ，这由两类细菌细胞 壁结构和组成不一样而决定。用结晶紫初染后，全部细菌都 染上蓝紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘 复合物，增强了染料与菌体结协力。用乙醇脱色处理时，两 类细菌脱色效果是不一样。G＋细菌细胞壁主要由肽聚糖形 成网状结构组成，且壁厚、类脂含量低，用乙醇脱色时使细 胞壁脱水、网状结构孔径缩小，通透性降低，使得结晶紫— 碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内。虽经洗脱和复染依然 保持初染剂蓝紫色。G-细菌则不一样，因为其细胞壁肽聚糖 层较薄，类脂含量高，所以在脱色处理时，类脂被乙醇溶解， 细胞壁通透性增大，使结晶紫—碘复合物比较轻易被洗脱出 来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂颜色。
总菌数 A 16104 B 32000A B（个 / ml） 5
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2. 区分酵母菌死活细胞基础原理 美蓝是一个无毒性染料，它氧化型呈蓝色，
还原型是无色。用美蓝对酵母菌活细胞进行染 色时，因为细胞新陈代谢作用，细胞内含有较 强还原能力，能使美蓝由蓝色氧化型变成无色 还原型。所以，含有还原能力酵母活细胞是无 色或淡蓝色，而死细胞或代谢作用衰老细胞则 呈蓝色，借此即可对酵母菌死细胞和活细胞进 行判别。
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四. 试验内容
1. 酵母菌形态观察及死活细胞判别 (1) 在载玻片上加半滴美蓝染液，在染液上 滴一滴菌液。取一块盖玻片，先将一边与菌液 接触，然后慢慢将盖玻片放下盖在菌液上。
(2) 将标本片放3分钟后，先用低倍镜然后用 高倍镜观察酵母菌形态和出芽情况，并依据颜
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简单染色法
这是最常用的染色方法。由 于细菌在中性环境下一般带负电 荷，所以通常采用一种碱性染料 如美蓝、碱性复红、结晶紫等进 行染色。美蓝还是一种活体染 料，用它可对活细胞和死细胞进 行鉴别。
步骤：
涂片干燥 固定 染色 （美蓝，1-2min）镜检
超净台上点燃酒精灯
滴加一滴生理盐水于玻片上
灼烧接种棒灭菌
二、实验原理
微生物与人的关系：
1. 地球上存在的CO2 90%以上是微生物分 解有机物产生的。 2. 一个成人胃肠道内容物中约有1～2公斤 微生物细胞。 3. 常用抗生素约有80-90%由微生物产生。
常见的四大类微生物
微生物 原核微生物 细菌 真核微生物 霉菌
放线菌 酵母菌
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自然界中各种微生物是混杂生活 在一起的。在实验室中，可以利用特 定的培养基及特殊的培养方法对微生 物进行纯培养。不同的微生物其培养 特征不同。由于微生物细胞小而透 明，因此必须借助显微技术和染色技 术才能进行细胞结构和形态的观察和 研究。
培 养 基
培养基是人 工配制的适合微 生物生长繁殖或 积累代谢产物的 营养基质，用以 培养、分离、鉴 定、保存各种微 生物或积累代谢 产物。
超净工作台
超净工作 台是进行微生 物操作最常用 的仪器。其空 气过滤装置和 紫外杀菌灯管 保证超净工作 台内是一个无 菌的环境。
制作平板培养基
接 种
无菌操作
微生物的形态观察
What is true for E.Coli is also true for elephant , only more so .
一、实验目的
1. 学习无菌操作技术。 2. 学习微生物培养的基本知识， 比较四大类微生物的菌落形态。 3. 学习微生物涂片、染色的技 术，初步认识微生物的细胞形 态。
将玻片置于显微镜下观察
大肠杆菌形态
放线菌形态
酿酒酵母形态
青霉形态
革兰氏染色
革兰氏染色法是细菌学中最 重要的鉴别染色法，可将细菌分 成革兰氏阳性菌（染色蓝紫色） 和革兰氏阴性菌（染色红色）两 大类。原理是由于这两类菌细胞 壁的结构和组成不同。
步骤：
制片（涂片、干燥、固定） 初染（结晶紫，1-2min） 媒染（碘液，1min） 脱色（95%乙醇，滴洗） 复染（番红，2min） 干燥 镜检
恒温培养箱
三 实验内容
(一) 微生物的培养及菌落形态观察
微生物的菌落形态
单个微生物细胞在适宜的固体培养 基表面或内部生长、繁殖到一定程度 可以形成肉眼可见的、有一定形态结 构的子细胞生长群体，称为菌落。当 众多菌落连成一片时，便成为菌苔。 不同微生物在特定培养基上生长形成 的菌落或菌苔一般都有稳定的特征， 可以成为对该微生物进行分类、鉴定 的重要依据。
枯草杆菌
大肠杆菌
结论：
大肠杆菌：红色，G－ 枯草杆菌：蓝紫色，G+
四、问题与分析
1. 在日常生活中，微生物给我们带 来了哪些有益的影响和有害的影 响? 2. 试比较四大类微生物的菌落和细 胞形态特征。
实验全程录像
挑取一环菌体
使菌体与载玻片上的水滴充分混匀 涂成薄膜
使涂片在室温中自然干燥 （也可用电吹风吹干）
烤片：涂菌一面朝上，载玻 片过微火2‾3次
玻片不能直接在火上烤，否则细胞形态毁坏！
滴加染色液覆盖于涂菌处，染色约2分钟
水洗多余的染液
水流不能直接冲洗在涂菌的地方！
标本自然晾干（也可用电吹风吹干）
细 菌
大肠杆菌
单菌落
放线菌
培养正面观
培养背面观放线菌 5460酵母菌菌苔 菌落
酿酒酵母
酵母菌
红酵母
霉 菌
黑曲霉
霉 菌
青霉
（二）微生物的染色及细胞形态观察
微生物个体微小，且较透明，研究 其形态必须借助染色法使菌体着色，与 背景形成对比，才能在显微镜下进行观 察。根据实验目的的不同，可分为简单 染色法、鉴别染色法和特殊染色法等。