牛黄解毒片中蒽醌类成分鉴别
牛黄解毒片的鉴别方法
实验二牛黄解毒片的鉴别一、实验目的1.掌握中药制剂理化定性鉴别的方法和原理。
2.熟悉牛黄解毒片的理化定性分析和薄层定性检识。
二、仪器与试药1.仪器微量升华装置 TLC装置恒温水浴锅显微镜滤斗定性滤纸乳钵酒精灯2.试药牛黄解毒片规格：0.3g/片胆酸对照品乙醇镁粉盐酸氢氧化钠过氧化氢 1％香草醛硫酸溶液二氯甲烷过氧化氢三、实验原理根据中药制剂中某些有效成分的理化性质不同而进行鉴别；利用对照品作为对照进行TLC检识，以鉴别中成药的真伪。
四、实验内容1.牛黄解毒片显微鉴别取本品片芯，研成粉末，取少许，置显微镜下观察：(1)草酸钙簇晶大，直径60～140 m。
(2)不规则碎块金黄色或橙黄色，有光泽。
2.牛黄解毒片定性鉴别（1）理化鉴别：取本品6片，(除去包衣)，研细，加乙醇10mL，温热10分钟，滤过，滤液作如下反应：①取滤液5mL，加镁粉少量与盐酸0.5mL，加热，即显红色。
②另取滤液4mL，加氢氧化钠试液，即显红色，再加30％过氧化氢溶液，加热，红色不消失，加酸成酸性，则红色变成黄色。
（2）微量升华定性鉴别：取牛黄解毒片1片，研细，进行微量升华，所得白色升华物，加新制的1％香草醛硫酸溶液2滴。
液滴边缘渐显玫瑰红色。
（3）牛黄解毒片的TLC鉴别：薄层板制备：硅胶G板(手工铺板或预制板)。
牛黄的TLC定性鉴别：①供试品溶液制备：取本品2片，研细，加二氯甲烷15mL，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，加乙醇0.5mL溶解，作为供试品溶液。
②对照品溶液制备：取胆酸对照品，加乙醇制成每mL含2mg的溶液，即得。
③点样与展开：分别吸取上述溶液各5mL，点于同一硅胶G板上，以正己烷-醋酸乙酯-醋酸-甲醇(20:25:2:3)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘约10分钟，置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
大黄的鉴别：①供试品溶液的制备取本品1片，研细，加甲醇20mL,超声处理15min,滤过，取滤液10mL,蒸干，残渣加水10mL 使溶解，加盐酸1mL,加热回流30min,放冷，用乙醚振摇提取2次，每次20mL,合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷2mL使溶解，作为供试品溶液。
牛黄解毒片的鉴别方法
实验二牛黄解毒片的鉴别一、实验目的1.掌握中药制剂理化定性鉴别的方法和原理。
2.熟悉牛黄解毒片的理化定性分析和薄层定性检识。
二、仪器与试药1.仪器微量升华装置 TLC装置恒温水浴锅显微镜滤斗定性滤纸乳钵酒精灯2.试药牛黄解毒片规格：0.3g/片胆酸对照品乙醇镁粉盐酸氢氧化钠过氧化氢 1％香草醛硫酸溶液二氯甲烷过氧化氢三、实验原理根据中药制剂中某些有效成分的理化性质不同而进行鉴别；利用对照品作为对照进行TLC检识，以鉴别中成药的真伪。
四、实验内容1.牛黄解毒片显微鉴别取本品片芯，研成粉末，取少许，置显微镜下观察：(1)草酸钙簇晶大，直径60～140 m。
(2)不规则碎块金黄色或橙黄色，有光泽。
2.牛黄解毒片定性鉴别（1）理化鉴别：取本品6片，(除去包衣)，研细，加乙醇10mL，温热10分钟，滤过，滤液作如下反应：①取滤液5mL，加镁粉少量与盐酸0.5mL，加热，即显红色。
②另取滤液4mL，加氢氧化钠试液，即显红色，再加30％过氧化氢溶液，加热，红色不消失，加酸成酸性，则红色变成黄色。
（2）微量升华定性鉴别：取牛黄解毒片1片，研细，进行微量升华，所得白色升华物，加新制的1％香草醛硫酸溶液2滴。
液滴边缘渐显玫瑰红色。
（3）牛黄解毒片的TLC鉴别：薄层板制备：硅胶G板(手工铺板或预制板)。
牛黄的TLC定性鉴别：①供试品溶液制备：取本品2片，研细，加二氯甲烷15mL，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，加乙醇0.5mL溶解，作为供试品溶液。
②对照品溶液制备：取胆酸对照品，加乙醇制成每mL含2mg的溶液，即得。
③点样与展开：分别吸取上述溶液各5mL，点于同一硅胶G板上，以正己烷-醋酸乙酯-醋酸-甲醇(20:25:2:3)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘约10分钟，置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
大黄的鉴别：①供试品溶液的制备取本品1片，研细，加甲醇20mL,超声处理15min,滤过，取滤液10mL,蒸干，残渣加水10mL 使溶解，加盐酸1mL,加热回流30min,放冷，用乙醚振摇提取2次，每次20mL,合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷2mL使溶解，作为供试品溶液。
实验九牛黄解毒片的分析
实验九牛黄解毒片的分析实验目的1. 了解牛黄解毒片的组成及药理作用；2. 掌握色谱法测定四种化合物在牛黄解毒片中的含量；3. 学会操作液相色谱仪进行药物分析。
实验原理牛黄解毒片主要成分为牛黄、黄连、黄柏、半夏、厚朴。
其中，牛黄具有清热解毒、生肌止痒、祛风祛湿等功效；黄连、黄柏具有清热解毒、燥湿止痢、消炎止痛等功效；半夏具有祛痰止咳、降逆平喘、止呕止泻等功效；厚朴具有止咳平喘、润肠通便等功效。
牛黄解毒片的复方组成具有多种功效，能够有效地缓解发热、头痛、身痛等症状，具有广泛的应用价值。
本实验采用高效液相色谱法（HPLC）对牛黄、黄连、黄柏和半夏四种化合物在牛黄解毒片中的含量进行测定。
使用色谱柱对不同化合物进行分离，然后通过紫外检测器检测各自的吸收峰，最后结合标准曲线计算出牛黄解毒片中各个成分的含量。
实验步骤1. 标准曲线的制备（1）准备牛黄、黄连、黄柏和半夏的标准品。
（2）将标准品分别溶解在甲醇中，制成不同浓度的标准溶液。
（3）分别将各个标准溶液采用HPLC方法分别检测四种化合物的峰面积，并制成峰面积-浓度曲线。
2. 牛黄解毒片的制样（1）取牛黄解毒片10g粉末，加入50ml甲醇中，用超声波处理2h，离心，取上清液，过滤。
（2）取1ml上清液放在10ml量筒中，加甲醇至刻度。
3. HPLC分析（1）将待测样品注入HPLC系统的样品瓶中，启动仪器，设置流速、波长、柱温等参数。
（2）通过梯度洗脱的方式，将各个化合物分离。
（3）借助紫外检测器检测各化合物在药品中的含量，并结合标准曲线计算出各个成分的含量。
实验结果根据实验所得数据，可计算得出牛黄解毒片中各个成分的含量如下表所示：| 成分 | 含量（mg/g） ||----------|-------------|| 牛黄 | 27.6 || 黄连 | 33.1 || 黄柏 | 15.4 || 半夏 | 6.9 |本实验使用HPLC法测定了牛黄解毒片中的牛黄、黄连、黄柏和半夏四种化合物的含量。
2022年中药制剂分析自考试题及答案
2022年中药制剂分析自考试题及答案中药制剂分析试卷(课程代码03053)一、单项选择题{本大题共20小题，每小题1分，共20分)在每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，请将其代码填写在题后的括号内。
错选、多选或未选均不得分。
1.牛黄解毒片的鉴别：取样品1片，研细后置微量升华装置，收集白色升华物，加新制的1％香草醛硫酸1滴，液滴边缘渐显玫瑰红色。
此法系鉴别片剂中的哪类成分【】A．冰片B.香豆素C.挥发油D．羟基葸醌2.中药制剂砷盐检查法中加入KI试液的作用为【】A．去除H2S的干扰B．将5价砷还原为3价砷C.使砷斑更清晰D．在锌粒表面形成Zn-Sn齐3.中药制剂重金属检查：常常需要进行有机破坏，主要原因是【】A．除去制剂中的水分B．除去共存组分的干扰C．使有机结合的重金属游离D．使重金属转化成铅4．运用HPLC法进行中药制剂中指标成分含量测定时，最常用的色谱柱是【】A．C18柱B．氨基柱C．氰基柱D.硅胶柱5．薄层扫描法定量分析时，采用内标法的主要优点在于【】A．消除展开剂挥发造成的影响B.克服由于薄层板厚薄不均匀造成的影响C．防止边缘效应造成的影响D．消除点样量不准确造成的影响6.中药制剂分析的取样原则是【】A.随机取样B.均匀合理C．宜少不宜多D.宜多不宜少7.用uv法进行含量测定，需测定某一波长处一系列不同浓度的对照品溶液吸收度的方法是【】A．吸收系数法B.比较法C.标准曲线法D．计算分光光度法8．可用于样品分离净化的预处理方法是【】A．高效液相色谱法B.气相色谱法C.液-固萃取法D.超声提取法9.运用GC法分析中药制剂中的化学成分，应用最广泛的的检测器是【】A．UVDB．TCDC．ECDD.FID10．RP-HPLC法是指所用固定相和流动相的极性大小为【】A．固定相极性大于流动相的HPLC法B.固定相极性小于流动相的HPLC法C．固定相极性等于流动相的HPLC法D．固定相极性大于或小于流动相的HPLC法11．含生物碱类成分的中药及中药制剂分析时，所用的碱化试剂应根据生物碱的性质及共存杂质选定，其中常用的碱化试剂为【】A.氢氧化钠B．碳酸钠C．碳酸氢钠D.氨水12.根据药品检验标准操作规范要求，采用紫外-可见分光光度法测定药品含量，待测供试品溶液的吸光度以在哪一范围之间为宜【】A．0.1-0.9B．0.2-0.8C.0.3-0.7D.0.4-0.613．用气相色谱法对中药制剂进行鉴别或定量分析，主要适用于含哪类成分的中药制剂【】A．苷类成分B．生物碱类成分C．酸性成分D.挥发性成分14．中药注射剂注入人体后，能使血液脱钙、产生抗凝血作用和产生血栓的杂质为【】A．鞣质B．蛋白质C．草酸盐D.树脂15．用C18柱进行中药制剂中生物碱类成分的HPLC测定时，为克服拖尾的问题，可采用的方法为【】A．调整检测波长B．流动相中加入三乙胺C．调整流动相中甲醇比例D．调整注入HPLC仪供试品溶液的量16.采用RP-HPLC法测定中药制剂中大黄素、大黄酸、丹参素等化学成分时，下列哪一条件对分离及测定是重要的【】A．温度B．流速C.检测器D.流动相pH17．对于含黄芪或人参的中药制剂，运用HPLC法测定黄芪甲苛或人参皂苷等具有梦外末端吸收成分的含量时，检测器的最佳选择是【】A．UVDB．FIDC.ELSDD.FD18．气相色谱法测定中药制剂中有效成分含量最常用的定量分析方法为【】A．外标法B.内标法C.归一法D.标准曲线法19．测定中药制剂中总生物碱类成分含量，可选择的测定方法是【】A.UV法B．TLCS法C.GC法D．RP-HPLC法20.评价中药制剂含量测定方法的回收率试验结果时，一般要求回收率【】A.在80～120％，RSD≤5％(n≥6)B．在85～115％，RSD≤4％(n≥6)C.在90～110％，RSD≤4％(n≥6)D．在95～105％，RSD≤3％(n≥6)二、多项选择题(本大题共10小题，每小题2分，共20分)在每小题的四个备选项中至少有两个是符合题目要求的，请将其代码填写在题后的括号内。
牛黄解毒片薄层色谱鉴别实验注意事项
牛黄解毒片薄层色谱鉴别实验注意事项牛黄解毒片薄层色谱鉴别实验注意事项一、实验前的准备工作1.1 材料准备牛黄解毒片、尼古丁酸、优丽菌素、氯化钠等1.2 设备准备薄层色谱仪、扫描仪、电子天平、移液器等1.3 实验环境实验室应保持干燥、洁净、通风良好的环境，并且穿戴好防护用品。
二、实验步骤2.1 样品制备牛黄解毒片粉末称取适量，加入10%尼古丁酸乙酯溶液，加热水浴挥干，再添加少量优丽菌素和氯化钠，混匀后再用氯仿提取，提取液用干燥剂去除水分，以备薄层色谱分离。
2.2 薄层色谱分离将制备好的样品点于预制的薄层色谱板上，然后将色谱板竖立于色谱槽中，用氯仿-乙酸乙酯-甲醇-乙酸为流动相，进行薄层色谱分离。
2.3 色谱板显色分离完毕后，将色谱板用紫外灯显色，得到色谱图谱，并将色谱板放入银染剂中，进行银染处理，银染后的色谱样品色带清晰，便于识别。
2.4 色谱图谱的解释通过色谱图谱和标准品比对，可以分析出样品中所含有的成分种类以及含量百分比。
三、实验中的注意事项3.1 样品制备样品制备的过程中，应注意避免与水接触，避免造成样品污染。
3.2 薄层色谱分离流动相的配制应根据实验需要调整好，以避免引入冗余成分影响实验结果。
同时，还应注意色谱板的摆放，尽量避免出现色带重叠或者分离不完整的情况。
3.3 色谱板显色显色的过程中应注意不要让色带接触手指或其他物品，以免沾染杂质影响实验结果。
3.4 实验结果的解释在分析结果时，需要根据实际需要来进行解释，同时还应注意避免主观臆断，保证具备真实性和可靠性。
综上所述，牛黄解毒片的薄层色谱鉴别虽然比较复杂，但是只要我们遵循实验步骤和注意事项，就能取得比较准确和可靠的实验结果。
牛黄解毒片的鉴别
牛黄解毒片的鉴别一、实验目的1、掌握中药制剂的理化鉴别方法。
2、熟悉中药制剂的性状鉴别方法。
二、实验原理牛黄解毒片由人工牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草等组成。
有清热解毒主治清热解毒之功效。
用于火热内盛,咽喉肿痛,牙龈肿痛,口舌生疮等功效。
冰片具有升华性并显香草醛硫酸反应。
牛黄含胆汁酸成份，大黄含黄酮类成份。
可用于显微鉴别和含量测定。
三、实验操作本品为素片或包衣片，若为包衣片，除去包衣后，显棕黄色。
（一）成份鉴别1、冰片的鉴别（升华法）取本品1片，研细，进行微量升华，所得的白色升华物，加新制的1％香草醛的硫酸溶液1～2滴，液滴边缘渐显玫瑰红色。
2、牛黄解毒片中黄芩和大黄的显色反应鉴别（化学反应法）取本品6片，研细，加乙醇10m，温热10分钟，滤过，取滤液5ml，加镁粉少量与盐酸0.5ml，加热，即显红色（黄芩）；另取滤液4ml，加氢氧化钠试液，即显红色，再加30％过氧化氢溶液，红色不消失，加酸成酸性时，则红色变为黄色。
3、黄芩的鉴别（薄层色谱法）对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备：取本品4片，研细，加乙醚30ml，超声处理15min，滤过，弃去乙醚，滤渣置水浴上挥尽乙醚，加甲醇30ml，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml，加热使溶解，滴加盐酸调节PH值为2-3，加乙酸乙酯30ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml，使溶解，作为供试品溶液。
吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层析下，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙酯溶液。
日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（二）黄芩苷含量测定1、对照溶液制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成1mL中含30μｇ的溶液，即得。
8034-2牛黄解毒片检验标准操作程序
目的：规范牛黄解毒片的中间产品、成品检验操作，保证检验结果的准确值。
范围：牛黄解毒片的中间产品、成品。
责任：质检员规定：1性状取本品20片，置白瓷盘中，在明亮处观察色泽及片型是否符合规定，然后除去包衣，观察其色泽，鼻嗅口尝其气味。
2鉴别2.1取供试品研细，置显微镜下观察现象。
2.2取本品1片，研细，进行微量升华，所得白色升华物，加新配制的1％香草醛硫酸溶液1～2滴，观察反应现象。
2.3取本品2片，除去糖衣，研细，加氯仿10ml研磨，滤过，滤液蒸干，加乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。
另取胆酸对照品，加乙醇制成每1ml含1mg 的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-醋酸-甲醇-（20：25：2：3）的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘约10分钟，置紫外光灯（365nm）下检视，观察供试品色谱与对照药材色谱中斑点的颜色及位置的对应情况。
2.4取本品1片，除去糖衣，研细，加甲酸20ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液10ml蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸1ml，加热回流30分钟，放冷，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干。
残渣加氯仿2ml使溶解，作为供试品溶液，另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。
另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法试验，取上述三种溶液各4µl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚（30～600C）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
观察供试品色谱与对照药材及对照品色谱中斑点的颜色及位置对应情况。
置氨蒸汽中熏后，日光下检视斑点颜色。
2.5取本品4片，除去糖衣，研细，加乙醚30ml，超声处理15分钟，滤过，弃去乙醚，滤渣置水浴上挥尽乙醚，加甲醇30ml超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干。
HPLC法测定牛黄解毒片中蒽醌类化合物的含量
理论塔板数按照大黄酸 、 大黄素、 大黄酚、 大黄素甲醚算分别是 ９ ０ ３ ５ ， ８ ８ ０ ４ ， ６ ９ ４ ６ ， ４ ０ ７ ３ ， 对照品溶液 和供试品溶液色谱图如 图 １ 和图 ２ 所示 （ 注： １ ． 大黄酸； ２ ． 大黄素； ３ ． 大黄酚； ４ ． 大黄素 甲醚） ．
毒片中大黄酸、 大黄素 、 大黄酚、 大黄素甲醚等 ４ 种蒽醌类化合物含量的测定方法 ， 也为牛黄解毒片中药
配 伍学 的研 究提 供一 定 的支持 ．
１ 仪器 与试药
１ ５ ２ ５型 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ仪 ， 配２ ９ ９ ６ 型二极管阵列检测器（ 美 国 Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ 公 司） ， Ａ Ｌ 一 ２ ０ ４电子天平 （ 梅特勒一 托 利多） ， Ｈ Ｈ一 ２型恒 温水浴 锅 （ 常州 国华 电器有 限公 司 ） ． 大黄酸 、 大黄素 、 大黄酚、 大黄素甲醚对照品购 自中国食 品药品检定研究院， 均为供含量测定用． 甲 醇（ 色谱纯 ， 山东禹王实业有限公司） 、 硫酸 、 磷酸 、 丙酮均为分析纯 ， 水为二次蒸馏水． 牛黄解 毒片 （ 三金 集 团湖南 三金制 药有 限公 司 ， 批号： １ ４ ０ ９ ０ １ ） 购 自鞍 山某药 房 ．
图 １ 对 照 品 色谱 图
图 ２ 样 品色 谱 图
２ ． ２ 溶 液 的制备
２ ． ２ ． １ 对 照品溶 液 的制备
分别精 确 称取 大 黄酸 （ ３ ． ０ ｍｇ ） 、 大黄 素 （ １ ． ９ ｍ ｇ ） 、 大黄酚（ ２ ． ６ ｍ ｇ ） 、 大 黄