验证磁珠法与酚抽法——真核细胞DNA提取
磁珠法提取dna原理
磁珠法提取dna原理磁珠法提取DNA原理。
磁珠法提取DNA是一种常用的DNA提取方法，其原理是利用磁珠的特殊性质和DNA与磁珠之间的亲和力，通过磁场的作用将目标DNA分离提取出来。
该方法具有操作简便、高效快速、不需有机溶剂等优点，因此在分子生物学和临床诊断领域得到了广泛的应用。
首先，磁珠法提取DNA的原理基于磁珠的特殊性质。
磁珠是一种微米级的磁性颗粒，通常由聚合物或者二氧化硅等材料制成，表面可以修饰上亲和基团，使其能够与目标物质发生特异性结合。
在DNA提取中，磁珠表面通常修饰上亲和基团，如硅烷基、羧基等，能够与DNA分子发生亲和作用。
其次，DNA与磁珠之间的亲和力是实现DNA提取的关键。
DNA分子在碱性条件下呈现负电荷，而磁珠表面修饰的亲和基团通常带有正电荷或者亲水基团，因此能够与DNA发生静电作用或者氢键结合，形成亲和复合物。
通过这种亲和作用，目标DNA能够与磁珠结合，从而实现DNA的分离和提取。
最后，利用磁场的作用将目标DNA分离提取出来是磁珠法提取DNA的关键步骤。
在DNA与磁珠形成亲和复合物后，可以通过外加磁场的作用将磁珠与非目标物质分离，然后用洗涤缓冲液去除杂质，最终用低离子强度的洗脱缓冲液将DNA从磁珠表面洗脱下来。
通过这一系列步骤，可以实现高纯度、高回收率的DNA提取。
综上所述，磁珠法提取DNA的原理是基于磁珠的特殊性质和DNA与磁珠之间的亲和力，通过磁场的作用将目标DNA分离提取出来。
这种方法操作简便、高效快速，适用于各种类型的样品，因此在科研和临床实验中得到了广泛的应用。
随着技术的不断发展，磁珠法提取DNA将会在生命科学领域发挥越来越重要的作用。
提取dna的方法及原理
提取dna的方法及原理提取DNA的方法及原理DNA提取是生物学和遗传学研究中的一项基础操作，它是获取DNA样本的过程。
DNA提取的方法有很多种，下面将介绍几种常用的DNA提取方法及其原理。
1. 高盐法高盐法是一种简单且常用的DNA提取方法。
其原理是利用高盐溶液中DNA与其他细胞组分（如蛋白质）之间的亲和性差异。
在高盐环境下，DNA更容易溶解而不与蛋白质结合，从而实现DNA的提取。
具体步骤包括细胞破碎、加入高盐溶液、离心分离DNA和去除蛋白质等。
2. 酚/氯仿法酚/氯仿法是一种经典的DNA提取方法。
其原理是利用酚和氯仿两种溶剂的密度差异，将DNA从细胞中分离出来。
具体步骤包括细胞破碎、加入酚/氯仿混合液、离心分离DNA和去除蛋白质等。
3. 硅胶柱法硅胶柱法是一种高纯度DNA提取方法。
其原理是利用硅胶柱上的硅胶颗粒与DNA之间的亲和性差异。
DNA样本在经过一系列处理后，通过硅胶柱，DNA能够与硅胶颗粒结合，而杂质则被洗脱。
最后，通过洗脱DNA，即可获得高纯度的DNA。
硅胶柱法的优点是提取纯度高、操作简单，适用于分子生物学研究和临床诊断。
4. 磁珠法磁珠法是一种高效、快速的DNA提取方法。
其原理是利用带有亲和基团的磁珠与DNA之间的亲和性，实现DNA的选择性吸附和洗脱。
具体步骤包括磁珠悬浮液制备、样本加入、磁珠与DNA结合、磁珠分离、洗脱DNA等。
除了上述常用的DNA提取方法外，还有其他一些特殊的DNA提取方法，如酶解法、离心法、凝胶切割法等。
这些方法在不同的实验和应用中具有各自的特点和优势。
总结起来，DNA提取的方法多种多样，选择适合的方法取决于实验目的、样本类型和实验条件等。
无论采用哪种方法，都需要严格控制实验操作，以确保提取到高质量的DNA样本。
DNA提取的成功与否直接影响到后续的实验结果，因此在进行DNA提取时，需要注意样本的保存、细胞破碎的方式、溶解液的选择等因素，以获得可靠且高纯度的DNA。
真核生物基因组总DNA的提取与鉴定
使蛋白质变性
液
Tris -HCl 缓冲夜，维持稳定的pH值（8.0）
酚的作用
•酚可以使蛋白质变性沉淀、抑制DNA酶活性。 •PH8.0的Tris溶液可以使抽提出的DNA进入水相 。
DNA酚抽提法示意图
蛋白酶K的作用
•水解组蛋白，促进DNA与组蛋白的分开。 DNA酚抽提法示意图
DNA的沉淀
无水乙醇沉淀 ➢ 沉淀前往往加入NaAc等盐离子，作用是中和
核酸分子表面的负电荷，有助于分子之间的 聚集。 ➢ 无水乙醇可以吸收分子之间的水，使DNA沉 淀析出，无水乙醇使用前冰冻，可以减少 DNA沉淀析出过程释放热量对DNA的损伤。
TE
10mmol/L Tris-HCl 1mmol/L EDTA
上样缓冲溶液（6 × 或10×）
甘油/蔗糖（增加DNA溶液的密度） 溴酚蓝（电泳指示剂，约相当于300bpDNA） 二甲苯氰（电泳指示剂，约相当于4000bpDNA）
无水乙醇沉淀500l真核生物基因组dna的提取三5dna沉淀的洗涤与干燥6dna溶解与电泳鉴定琼脂糖凝胶电泳鉴定eb与dna的结合eb可嵌入到碱基平面使核酸在uv发下发出桔红色荧光
基因组DNA的分离与纯化
一、酚抽提法的原理
以含EDTA、SDS的裂解液裂解细 胞，经蛋白酶K消化后，用PH8.0的 Tris 饱和酚抽提蛋白质，离心后取上 层水相，无水乙醇沉淀DNA。
0.5~1.4%琼脂糖凝胶
水相的吸取
SDS（去垢剂）
5.DNA沉淀的洗涤与干燥
6.DNA溶解与电泳鉴定
三 结果
琼脂糖凝胶电泳鉴定
EB可嵌入到 碱基平面，使 核酸在 UV 激 发下发出桔红
色荧光。
EB与DNA的结合
DNA的提取方法
DNA的提取方法DNA提取是在分子生物学研究和临床诊断中非常重要的步骤。
DNA提取的目的是获取足够纯净的DNA样本，以供后续实验和分析使用。
这篇文章将介绍几种常用的DNA提取方法。
1.高盐法：高盐法是最常用的DNA提取方法之一、它通过加入高盐浓度的缓冲液来破坏细胞膜并释放DNA。
首先，待提取的细胞或组织样本被收集并转移到离心管中。
接下来，加入裂解缓冲液，通常含有高浓度的盐并对抗离子泵，从而使细胞膜破裂并释放DNA。
裂解后，使用酒精或酚/氯仿萃取法来分离DNA与其他细胞组分。
最后，通过旋转沉淀法或乙醇沉淀法从溶液中提取DNA。
2.CTAB法：CTAB法是一种适用于植物和真菌等高纤维、低DNA含量的样品提取方法。
CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）作为一种阴离子表面活性剂，可以结合在DNA和脂质上，并形成沉淀，从而使DNA分离出来。
首先，样本被粉碎并浸泡在CTAB缓冲液中，含有CTAB、盐和EDTA等。
接下来，DNA与其他细胞组分一起沉淀，通过聚乙二醇进行沉淀，并通过离心分离。
然后，洗涤DNA沉淀并通过乙醇沉淀法或旋转沉淀法提取DNA。
3.柱式纯化法：柱式纯化法是一种用于高质量DNA提取和纯化的流程。
该方法基于DNA与硅胶膜吸附和洗脱的原理。
首先，细胞或组织样品经过裂解后，溶液经过去蛋白酶和去RNA酶处理。
然后，将样品通过柱子，DNA与硅胶膜相互作用，并形成强烈的结合，同时其他细胞组分被清除。
接着，使用洗涤缓冲液去除杂质，最后使用低盐缓冲液来释放DNA。
这种方法可以提供高纯度的DNA样本，适用于大规模DNA提取和高通量分子生物学实验。
4.磁珠法：磁珠法是一种基于磁性珠子的DNA提取方法。
该方法使用特定大小和表面修饰的磁性珠子将DNA选择性地吸附到表面上。
首先，待提取的细胞或组织样本被裂解，并加入磁珠和DNA结合缓冲液。
接下来，通过磁力将磁珠与DNA结合物分离出来，并洗涤去除杂质。
最后，通过低盐缓冲液将DNA释放出来并收集。
dna提取磁珠法
dna提取磁珠法
DNA提取磁珠法是一种高效、快速、简便的DNA提取方法。
该方法
利用磁珠表面的亲和性分子与DNA的亲和性结合，将DNA分离出来。
该方法具有操作简单、提取效率高、纯度高等优点，被广泛应用于生
物学、医学、农业等领域。
DNA提取磁珠法的原理是利用磁珠表面的亲和性分子与DNA的亲和
性结合，将DNA分离出来。
首先，将样品加入到含有磁珠的混悬液中，磁珠表面的亲和性分子与DNA结合，形成磁珠-DNA复合物。
然后，利用磁力将磁珠-DNA复合物沉淀到底部，将上清液倒掉。
最后，用
缓冲液洗涤磁珠-DNA复合物，将DNA从磁珠上解离出来。
DNA提取磁珠法具有以下优点：
1. 操作简单：该方法只需要几个简单的步骤，不需要复杂的设备和技术，因此操作简单。
2. 提取效率高：该方法可以高效地提取DNA，提取率可以达到90%
以上。
3. 纯度高：该方法可以提取高质量的DNA，纯度可以达到1.8以上。
4. 适用范围广：该方法适用于多种样品类型，包括血液、组织、细胞等。
DNA提取磁珠法在生物学、医学、农业等领域有广泛的应用。
在生物学领域，该方法可以用于基因克隆、基因测序、基因表达分析等。
在医学领域，该方法可以用于疾病诊断、药物研发等。
在农业领域，该方法可以用于植物基因组学研究、动物育种等。
总之，DNA提取磁珠法是一种高效、快速、简便的DNA提取方法，具有操作简单、提取效率高、纯度高等优点，被广泛应用于生物学、医学、农业等领域。
dna提取方法
dna提取方法DNA提取方法。
DNA提取是分子生物学实验中的重要步骤，它是从生物样本中分离出DNA分子的过程。
DNA提取方法的选择对后续实验结果有着重要影响，因此需要根据具体的实验目的和样本类型选择合适的提取方法。
下面将介绍几种常用的DNA提取方法。
1.酚/氯仿提取法。
酚/氯仿提取法是最早应用的DNA提取方法之一，它利用酚和氯仿的不同密度来分离DNA、RNA和蛋白质。
首先，将生物样本溶解在盐溶液中，然后加入等体积的酚/氯仿混合液，混合均匀后离心。
DNA会沉淀在上清液和酚层之间的界面上，可以用吸管或者移液器将其吸取出来。
这种方法操作简单，适用于提取中小片段的DNA。
2.离心柱法。
离心柱法利用离心柱中的硅胶膜或硅胶颗粒来吸附DNA，通过离心将其他杂质分离。
首先，将生物样本溶解在裂解液中，然后加入乙醇使DNA沉淀，将混合液加入离心柱中，离心后DNA会被固定在柱子上，然后通过洗涤和离心的步骤去除杂质，最后用去离子水洗脱DNA。
离心柱法提取的DNA纯度高，适用于高通量实验。
3.磁珠法。
磁珠法是近年来发展起来的一种DNA提取新方法，它利用表面修饰的磁珠与DNA的亲和性来实现DNA的分离纯化。
首先，将生物样本与磁珠混合，磁珠上的表面修饰物能够与DNA结合，然后利用磁力将磁珠与DNA一起沉淀，将上清液去除，再进行洗涤和溶解步骤，最后用磁场将磁珠与DNA分离。
磁珠法可以高效地提取DNA，并且适用于自动化操作。
4.酶解法。
酶解法是一种通过酶的作用来分解细胞壁和膜，释放DNA的方法。
首先，将生物样本加入含有蛋白酶和细胞壁裂解酶的裂解液中，经过一定时间的酶解后，细胞壁和膜会被破坏，DNA被释放出来。
然后通过加入蛋白酶抑制剂来停止酶的作用，最后进行离心等步骤来分离DNA。
酶解法适用于提取含有细胞壁和膜的样本。
综上所述，DNA提取方法的选择应根据实验的具体要求和样本的特点来确定。
不同的提取方法有着各自的优缺点，科学家们可以根据实际情况选择合适的方法来提取DNA，以保证后续实验的顺利进行。
dna提取方法
dna提取方法DNA提取方法。
DNA提取是分子生物学研究中的重要步骤，它是从细胞或组织中分离出DNA分子的过程。
在实验室中，我们常常需要从不同来源的样本中提取DNA，以进行PCR扩增、测序、鉴定等分子生物学实验。
因此，熟练掌握DNA提取方法对于科研工作者来说至关重要。
1. 样本的准备。
在进行DNA提取之前，首先需要准备样本。
样本可以是血液、组织、细胞培养物、植物材料等。
不同的样本来源需要采用不同的提取方法，因此在进行提取之前，需要对样本进行适当的处理，如细胞裂解、组织破碎等，以确保样本中的DNA能够被充分释放出来。
2. 常用的DNA提取方法。
目前常用的DNA提取方法包括酚/氯仿法、盐类沉淀法、硅胶柱法、磁珠法等。
这些方法各有特点，适用于不同类型的样本和实验需求。
在选择提取方法时，需要根据样本的性质、实验的目的以及实验室条件等因素进行综合考虑。
酚/氯仿法，这是一种传统的DNA提取方法，通过酚/氯仿混合物将DNA从其他细胞成分中分离出来。
这种方法操作简单，适用于小规模的样本提取，但需要注意酚/氯仿对操作者和环境的危害。
盐类沉淀法，盐类沉淀法利用盐类溶液中DNA的溶解度随浓度变化而发生变化的特性，将DNA从溶液中沉淀出来。
这种方法适用于大规模样本提取，操作简单，且不需要有机溶剂，对实验室环境影响较小。
硅胶柱法，硅胶柱法利用硅胶膜的吸附作用，将DNA从其他成分中分离出来。
这种方法提取的DNA纯度较高，适用于对DNA纯度要求较高的实验，如测序、克隆等。
磁珠法，磁珠法利用磁珠颗粒与DNA之间的亲和作用，将DNA从混合物中分离出来。
这种方法操作简便，适用于高通量样本提取，且可以实现自动化操作，提高提取效率。
3. 实验操作注意事项。
在进行DNA提取实验时，需要注意以下几个方面的操作事项：严格遵守实验操作规程，做好个人防护，避免接触有害化学物质；样本的处理要细致，避免污染和损伤，以确保提取的DNA质量；在使用盐类沉淀法、硅胶柱法和磁珠法时，需要注意各步骤的温度、离心速度、洗涤液的配制等细节，以确保提取效果；实验后要对提取的DNA样品进行储存，避免冻融和污染，以保证后续实验的顺利进行。
核酸提取纯化方法
核酸提取纯化方法引言核酸提取是分子生物学研究中的一个重要步骤，它主要包括纯化 DNA 和 RNA 两种核酸的过程。
在研究领域，纯化高质量的核酸样品对于准确分析和解读生物信息至关重要。
本文将介绍几种常用的核酸提取纯化方法，包括酚-氯仿法、离心柱法和磁珠法，并对每种方法的优缺点进行评述。
1. 酚-氯仿法酚-氯仿法是一种传统的核酸提取纯化方法，它基于核酸在酚和氯仿两相体系中具有不同溶解度的原理。
具体步骤如下：1.收集待提取的样品，如细菌培养物或组织样品。
2.加入等体积的酚-氯仿溶液，同时加入破碎剂（如玻璃珠或硅胶），彻底混合。
3.离心样品，使得酚相和氯仿相分离。
4.分离上层透明的水相，其中富含 DNA 或 RNA。
5.加入冷异丙醇或乙醇，沉淀核酸。
6.通过离心将沉淀的核酸分离。
7.用缓冲液溶解核酸沉淀，获得纯化后的 DNA 或RNA 样品。
酚-氯仿法提取的核酸样品质量较高，适用于小规模样品的提取。
然而，由于该方法对操作者的技巧要求较高，并且在操作过程中可能存在酚和氯仿对人体的损害风险，所以目前已逐渐被离心柱法和磁珠法取而代之。
2. 离心柱法离心柱法是一种基于硅胶膜和纤维素膜的核酸提取纯化方法，凭借其简单、快速和高效的特点已经成为目前最常用的核酸提取方法之一。
具体步骤如下：1.添加细胞裂解缓冲液到待提取样品中，通过细胞裂解将核酸释放到溶液中。
2.准备离心柱，将离心柱放入收集管中。
3.将样品溶液加到离心柱中，使其通过硅胶膜或纤维素膜。
4.通过洗涤液洗去杂质。
5.加入低盐缓冲液或水，洗脱核酸。
6.将洗脱的核酸收集到新的收集管中。
离心柱法的优点在于简单、快速且对样品的处理量较大，能够同时提取多个样品。
然而，该方法对于某些特殊样品（如富含多酚化合物或多糖的样品）可能会产生一定的干扰。
3. 磁珠法磁珠法是一种新兴的核酸提取纯化方法，它利用了磁珠的磁性和高亲和性，能够快速、高效地提取纯化核酸。
具体步骤如下：1.准备磁珠混悬液，并加入样品。
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验证磁珠法与酚抽法——真核细胞DNA提取摘要生物科技飞速发展，新的技术不断的涌现，提取基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤，传统方法有：有PC 抽提/醇沉淀方法、高盐沉淀蛋白质/醇沉淀方法、离心柱法和生物磁珠法，这几种方法各有其优势和劣势。
本文在真核细胞DNA 提取的方面上对比了磁珠法和酚抽法。
实验结论：磁珠法在动物组织DNA提取中表现优异，操作简便，提取到的样品(OD260-OD320)/(OD280-OD320)在 1.7-2.0左右，(OD260-OD320)/(OD230-OD320)在2以上，电泳条带清晰，无拖尾现象，点样孔无滞留，说明纯度较高，DNA片段完整。
酚抽法操作繁琐，裂解体系中的蛋白质不会被一次去除，必须靠多次抽提，方可彻底去除。
且每次抽提都会损失部分核酸。
另外，体系太粘稠的坏处是，蛋白质难以彻底去除，以及基因组 DNA 会断裂得更厉害，所以要注意裂解液与样品的比例。
最大的优势是成本低廉，对实验条件要求较低，对于经费紧张的实验室较为实用。
关键词：磁珠法，酚抽法，DNA提取目录验证磁珠法与酚抽法——真核细胞DNA提取 (1)摘要 (1)目录 (2)文献参考 (3)实验操作 (5)实验结论 (6)参考文献 (7)致谢 (7)文献参考提取基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。
在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。
一般真核细胞基因组DNA有107-9 bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取，酚抽法是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提而实现的。
生物磁珠是一种新型的功能化固体载体，其表面包被有活性基团，可以与多种生物活性物质发生偶联，兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点，在外磁场的作用下可以定向移动和集中，当撤去外磁场后，稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体中，从而使固液相的分离变的十分快捷方便，通过简单的洗脱可以得到纯度很高的靶向物质。
核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础，核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的最重要因素，也是下游分子生物学试验成败的关键。
目前常见的核酸纯化方法有PC 抽提/醇沉淀方法、高盐沉淀蛋白质/醇沉淀方法、离心柱法和生物磁珠法，这几种方法各有其优势和劣势。
一、PC抽提法PC 抽提是去除蛋白质有效的手段，但超过了该饱和度，裂解体系中的蛋白质不会被一次去除，必须靠多次抽提，方可彻底去除。
且每次抽提都会损失部分核酸。
另外，体系太粘稠的坏处是，蛋白质难以彻底去除，以及基因组 DNA 会断裂得更厉害，所以要注意裂解液与样品的比例。
PC 抽提的另外一个用途是，利用酸性酚可以部分去除 DNA 的特点，在 RNA 抽提时获得 DNA 残留极少的RNA。
不过有一点要提醒的是，某些植物样品，在去除某些杂质之前，是不能使用 PC 抽提的，否则核酸必定降解。
PC抽提最大的优势是成本低廉，对实验条件要求较低，对于经费紧张的实验室较为实用。
二、高盐沉淀法高盐沉淀蛋白质/醇沉淀方法，同样也是一个非常不错的方法。
与 PC 抽提方法相比，除了纯度的稳定性可能要低一点外，该方法几乎克服了 PC 抽提的所有缺点。
更快、更轻松的去除蛋白质所可以用于大规模抽提，但其不足之处是纯度 (蛋白质残留) 不够稳定，蛋白质的沉淀效率在4℃会更好一些。
三、离心柱法离心柱纯化法，是目前试剂盒提取广泛应用的方法。
其最大特点是受人为操作因素影响小，纯度的稳定性很高 (虽然纯度不一定比PC 纯化方法更高)。
加入的液体通过离心后会进入另外一个离心管中，与含有核酸的柱子完全是分开的，所以洗涤更彻底。
其致命弱点是样品过量，提取效率较低，且需要反复离心，操作复杂，成本也较高。
四、生物磁珠法生物磁珠法是将纯化介质包被在纳米级生物磁珠表面，通过介质对核酸的吸附，在外加磁场下使核酸附着于磁珠定向移动，从而达到固液分离纯化的作用。
与其他几种方法相比，生物磁珠法具有很多无法比拟的优势，如：①提取灵敏度高（微量材料即可提取）②纯化纯度高（完全与蛋白盐等杂质分离）③提取产量高（每mg磁珠能吸附500ug DNA）④分离快速（磁分离只需几秒）⑤自动化操作（加液后完全机器自动化操作，无需人力，提高效率）⑥高通量提取（可同时完成几十甚至几百个样品的提取）⑦无毒无害无污染（试剂中不含任何氯仿、酚等，操作环境更加安全）实验操作一、试剂准备1．TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。
2．TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。
3．裂解缓冲液：250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100 m g/ml。
4．20% SDS 5．2mg/ml蛋白酶K6．Tris饱和酚（pH 8.0）、酚/氯仿（酚∶氯仿=1∶1）、氯仿7．无水乙醇、75%乙醇二、操作步骤（一）材料处理1．新鲜或冰冻组织处理：⑴取组织块0.3-0.5cm3 , 剪碎，加TE 0.5ml，转移到匀浆器中匀浆。
⑵将匀浆液转移到1.5ml离心管中。
⑶加20% SDS 25 m l，蛋白酶K (2mg/ml) 25 m l，混匀。
⑷ 60 ° C水浴1-3hr。
2．培养细胞处理：⑴将培养细胞悬浮后，用TBS洗涤一次。
⑵离心4000g×5min，去除上清液。
⑶加10倍体积的裂解缓冲液。
⑷ 50-55 ° C水浴1-2hr。
（二）DNA提取1. 加等体积饱和酚至上述样品处理液中，温和、充分混匀3min。
2. 离心5000g×10min，取上层水相到另一1.5ml离心管中。
3. 加等体积饱和酚，混匀，离心5000g×10min，取上层水相到另一管中。
4. 加等体积酚/氯仿，轻轻混匀，离心5000g×10min，取上层水相到另一管中。
如水相仍不澄清，可重复此步骤数次。
5. 加等体积氯仿，轻轻混匀，离心5000g×10min，取上层水相到另一管中。
6. 加1/10体积的3M醋酸钠（pH 5.2）和2.5倍体积的无水乙醇，轻轻倒置混匀。
7. 待絮状物出现后，离心5000g×5min，弃上清液。
8. 沉淀用75%乙醇洗涤，离心5000g×3min ，弃上清液。
9. 室温下挥发乙醇，待沉淀将近透明后加50-100 m l TE溶解过夜。
(三）DNA定量和电泳检测磁珠法操作以国内最大磁珠法试剂盒生产商——洛阳惠尔纳米科技有限公司的产品为例1．裂解取20-100mg样品，加10ul BufferA研磨，加300ul BufferB，混匀，转移到1.5mlEP管中，65℃30min。
2. 结合取出EP管，加入10ul磁珠，再加入270ul磁珠结合液，震荡数次，磁分离。
3. 洗涤加入300ul洗涤液I，震荡数次，磁分离，加入300ul洗涤液II，震荡数次，磁分离，加入300ul洗涤液II，震荡数次，磁分离。
开盖，晾干5min。
4. 洗脱加入50-100ul洗脱液，65℃水浴10min。
然后磁分离，进行下游实验。
实验结论1.生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应，能够用高效DNA提取，满足微量生物样本DNA 提取的要求。
2.磁珠表面能够进行化学修饰，从而与DNA进行特异性吸附，去除样品DNA溶液中的抑制物质，如：有机溶剂、去污剂、金属离子、燃料等。
3.生物磁珠表面功能团数量可以控制获得可提取DNA溶液的浓度信息，实现定量的要求。
4.生物磁珠可以通过特殊的合成工艺使其具有超顺磁特性，因此，能够通过仪器进行自动化操作，满足数据库建设对大批量样本提取的需要，减少人为因素。
5.用时少，操作简单，是用于大多数生物检材。
6.低廉，便于广泛应用。
由于纳米生物磁珠合成采用的都是低价无机和有机原料。
无须特殊的仪器设备，使得最终的合成和研发成本都很便宜，适合于我国的基本国情和经济现状。
7.适应了建立DNA数据库所需的大量生物样本的提取，为我国DNA数据库的建设铺平了道路，打下了基础。
与传统提取DNA法相比速度更快！纯度更高！一般情况下不需离心操作，单一样品多应在1h内提取完毕。
对全血、骨骼、植物等提取DNA在不PCR扩增的情况下能在凝胶电泳中看到较为明亮的条带。
动物组织提取基因PCR扩增电泳图参考文献1、张晓娟, 胡选萍等. 山药叶片总RNA提取方法的比较[J]. 安徽农业科学, 2010,38（33）: 18728-187292、代小梅, 程晓霞, 曾会明等. 日本结缕草总RNA提取和mRNA分离方法的优化[J]. 生物技术通报, 2010-04-26: 88-923、施江, 高双成, 孔祥生, 等. 牡丹ACC氧化酶基因片段的克隆及其反义表达载体的构建[J]. 河南农业科学, 2009, 1: 94-974、史国安, 郭香凤, 韩建国, 等. 牡丹开花和衰老期间乙烯及脂质过氧化的研究[J]. 西北农业大学学报, 1999, 27(5): 50-535、侯小改, 刘改秀, 段春燕等. 露地牡丹花期调控研究初探[J]. 河南农业科学.2006, 3: 83-856、孔祥生, 张妙霞. 牡丹的快繁研究[J]. 北方园艺, 1998, 121(3): 87-897、Eason J, Pinkney T, Heyes J, et al. Affect of storage temperature and harvestbud maturity on bud opening and vase life of Paeonia lactiflora cultivars[J]. New Zealand JouRNAl of Crop and HoRTicultural Science, 2002, 30: 61-678、周琳, 贾培义, 刘娟等. 乙烯对‘洛阳红’牡丹切花开放和衰老进程及内源乙烯生物合成的影响[J]. 园艺学报. 2009, 36(2): 239-2449、成仿云, 高水平, 于晓南. 芍药花蕾成熟及开花的阶段划分与形态类型[J]. 园艺学报. 2009, 36 (4): 611-61310、范丙友, 高水平, 刘改秀等. 牡丹ACS基因片段的克隆及反义植物表达载体构建[J]. 华北农学报. 2010, 25(6): 34-2711、周琳, 董丽. 牡丹ACC 氧化酶基因cDNA克隆及全序列分析[J]. 园艺学报. 2008, 35(6): 891-89412、Fulton T A, Hall A J, Catley J L. Chilling requirements of Paeonia cultivars[J].Scientia HoRTiculturae. 2001, 89: 237-24813、李霞, 张玉刚, 郑国生等. 芍药切花瓶插期衰老进程及膜脂过氧化研究[J].园艺学报. 2007, 34 (6): 1491-149614、刘鲜艳, 刘雅莉, 王越进, 等. 百合ACC氧化酶基因全长cDNA的克隆及序列分析[J]. 西北植物学报. 2008, 28(2): 0651-065615、史国安, 包满珠. 植物切花乙烯致衰机理与化学调节[J]. 河南科技大学学报. 2003, 23(2): 1-416、James D A. Harvesting, postharvest management of Alaska grown cut flowerpeonies and hedonic analysis of United States wholesale peony markets[J]. Fairbanks: University of Alaska Fairbanks, 2008, 132-13817、蔡蕾, 张晓红, 沈红香等. 乙烯对不同切花月季品种开花和衰老的影响[J].园艺学报. 2002, 29 (5) : 467 - 472致谢洛阳惠尔纳米科技有限公司是国内最大磁珠法试剂盒生产商，生产工艺领先于世界，产品深受分子诊断公司、科研院所、院校好评。