基因工程和细胞工程习题.doc
细胞工程考试题
5.生物传感器和信号调控：利用生物传感器和信号调控器件，实现对细胞内环境和外部刺激的监测和响应。
细胞工程中的这些技术手段相互结合，为实现对细胞的精确控制和优化提供了有力的工具。
细胞工程考试题
题目一：细胞工程的定义和主要目标是么？请简要回答。
细胞工程是利用生物学、工程学和医学等多学科综合知识与技术，对细胞进行设计、构建和调控，以开发新型细胞工具、细胞治疗和生物制造等应用。其主要目标是通过对细胞的工程化改造，实现对细胞的功能增强、代谢调控、产物生产和组织再生等方面的控制和优化。
3.农业领域：细胞工程可应用于农作物遗传改良和抗病虫害。通过基因工程和基因编辑技术，可以增加作物的产量、改善质量特性，并提高作物对病虫害的抗性，实现农业的可持续发展。
4.生物制造领域：细胞工程可应用于生物药物的生产和合成生物学。通过工程化的细胞工具，可以大规模生产蛋白质药物和其他生物制品，满足医疗和生物医药领域对高效、安全和可控的生产需求。
题目三：请简要说明在细胞工程中主要采用的技术手段。
在细胞工程中，主要采用以下技术手段：
1.基因工程与基因编辑技术：通过选择性引入、删除或修改特定基因，改变细胞的功能和代谢途径。
2.细胞培养与组织工程技术：通过细胞培养、组织构建和三维打印等技术，实现细胞的体外扩增和组织的定向生长。
3.代谢工程：通过优化基因表达、调控代谢途径和增加底物供应等手段，提高细胞对特定产物的产量和选择性。
题目二：请简述细胞工程的应用领域及案例。
细胞工程在医学、环境、农业和生物制造等领域有广泛的应用。
1.医学领域：细胞工程可用于细胞治疗、组织工程和再生医学。例如，通过工程化的干细胞和基因工具，可以实现再生医学中的组织修复和器官移植，促进伤口愈合和疾病治疗。
基因工程期末试题及答案
基因工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。
2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
4. 在基因工程中，限制性内切酶用于切割DNA分子，产生特定片段。
5. 基因工程可以产生转基因生物，通过对生物基因进行改造，使其具有特定的特性。
6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具，可以精确地修改基因组中的特定片段。
7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗，通过修复或替换异常基因，治疗遗传性疾病。
8. 在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高产量和抗病虫害能力。
9. PCR是一种常用的基因扩增技术，可以通过复制DNA片段来放大特定基因。
10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题（每题10分，共30分）1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。
基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。
其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中，然后转化到宿主细胞中，使重组DNA在宿主细胞中大量复制。
PCR是一种基因扩增技术，通过在DNA复制过程中加入特定引物，使特定基因片段在体外大量扩增。
DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
2. 什么是转基因生物？请举例说明。
转基因生物是指经过基因工程改造，将外源基因导入到目标生物体中，使其具有新的遗传性状的生物。
例如，将耐旱基因导入水稻，使其具有抗旱能力；将Bt毒素基因导入棉花，使其具有抗虫能力。
3. 基因工程在医学领域有哪些应用？举例说明。
基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。
例如，利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因，治疗遗传性疾病。
另外，基因工程也可以用于疫苗研发，通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞，产生病原体的抗原蛋白，从而刺激免疫系统产生抗体，用于预防传染病。
高中生物专题复习：基因工程和细胞工程
基因工程和细胞工程1．为增加油菜种子的含油量,科研人员将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
(1)研究人员采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因,该技术是利用________的原理,使相应基因呈指数增加。
所含三种限制酶(XbaⅠ、ClaⅠ、SacⅠ)的切点如图所示,则用________和________处理两个基因后,可得到酶D基因和转运肽基因的融合基因。
(2)将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的________中,构建基因表达载体并导入农杆菌中。
为了获得含融合基因的单菌落,应进行的操作是______________________________。
随后再利用液体培养基将该单菌落菌株振荡培养,可以得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间的目的是_____________________________,进一步筛选后获得转基因油菜细胞,提取上述转基因油菜的mRNA,在逆转录酶的作用下获得cDNA,再依据________的DNA片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检测,可判断融合基因是否完成________。
最后采用抗原—抗体杂交法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。
答案：(1)DNA双链复制ClaⅠDNA连接酶(2)TDNA将获得的农杆菌接种在含四环素的固体培养基上培养(3)利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞融合基因转录2．人外周血单核细胞能合成白细胞介素2(IL?2)。
该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解。
研究人员将IL?2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,在酵母菌中表达出具有IL?2生理功能且不易降解的IL?2?HSA融合蛋白,技术流程如图。
请回答：(1)图中③过程的模板是________,表达载体1中的位点________应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2。
(2)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL?2蛋白对应的碱基序列不能含有__________,才能成功表达出IL?2?HSA融合蛋白。
高中生物二轮专题复习专题八 专题八 基因工程和细胞工程专题强化练
5.根据资料回答下列问题： 资料一 PCR(多聚酶链式反应)三个基本反应步骤是模板DNA在体外加 热至90～95 ℃时解旋成单链，温度降至55 ℃左右，引物与模板单链按碱 基 互 补 配 对 的 原 则 结 合 ， 再 调 至 72 ℃ 左 右 时 ， DNA 聚 合 酶 沿 5′→3′(磷酸到五碳糖)的方向延伸引物合成互补链。三个步骤完成一 次称为一个循环。
解析 对胰岛素基因进行修饰，生产出不易被分解的高效胰岛素，这属 于蛋白质工程的范畴。
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4.近年来，生物工程运用分子生物学的最新成就，发展出一系列的技术， 可以为人类健康、生产、生活等提供服务。运用所学知识回答下列问题： (1)科学家为了建立生产干扰素的乳腺生物反应器，一般通过_显__微__注__射_技 术导入哺乳动物的_受__精__卵_中，然后再将它送入母体内，最终发育成能生 产干扰素的转基因哺乳动物。 (2)单克隆抗体具有特异性强、灵__敏__度__高__、可以大量制备等优点。制备单 克隆抗体有两个重要的理论基础：一是在动物免疫反应的过程中每一个 B淋巴细胞_只__分__泌__一__种__特__异__性__抗__体_；二是小鼠骨髓瘤细胞能够_无__限__增__殖_。 (3)在胚胎工程中，通过对供体母羊注射促__性__腺__激__素__，促使其超数排卵， 从而获得大量羊的卵母细胞。
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解析 目的基因的两端都有BamHⅠ的识别序列，质粒的抗生素A抗性基 因上也有BamHⅠ的识别序列，故应选用的限制酶是BamHⅠ，此时抗生 素B抗性基因作为标记基因，故筛选时培养基中要添加抗生素B。若重组 质粒已导入了受体细胞却不能表达，很可能是因为用同种限制酶切割后， 目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能互补，可能出现目的 基因反向连接在质粒上的情况。
2019高考生物大二轮复习精品练案：专题十六 基因工程和细胞工程 (含答案)
模块六专题十六1．(2018·深圳调研)叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中，该技术能有效改良植物的品质。
请回答：(1)转基因技术的核心步骤是__基因表达载体的构建__，完成该步骤所需要的酶有__限制酶和DNA连接酶__。
(2)将植物体细胞处理得到原生质体，再通过__农杆菌转化法__或__基因枪__法，将目的基因导入原生质体，使原生质体再生出细胞壁之后，通过__植物组织培养__技术培养可得到相应的转基因幼苗。
(3)来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，就此分析，原因是__叶绿体DNA与原核生物DNA结构类似(由于叶绿体大多数基因的结构、转录与翻译系统均与原核生物类似)__。
(4)对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，其遗传方式__不遵循__(答“遵循”或“不遵循”)分离定律，不会随__花粉__(“花粉”或“卵细胞”)传给后代，从而保持了__母本__(“父本”或“母本”)的遗传特性。
[解析](1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，所需要的酶有限制酶和DNA连接酶；(2)植物细胞导入受体细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。
原生质体再生细胞壁之后，通过植物组织培养获取幼苗；(3)叶绿体DNA与原核生物DNA结构类似。
(4)分离定律适用于有性生殖过程中细胞核遗传，故叶绿体转基因不遵循分离定律，为母系遗传。
2．(2018·天津市和平区生物一模)已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。
疫苗的生产和抗体的制备流程如图1所示。
请回答下列问题：(1)过程①代表的是__逆转录__，过程③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它们应该能被受体细胞的__RNA聚合酶__所识别，以便于其催化转录过程。
(2)如图2为A基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNA中A和U总数是__400__个。
第1、2章基因工程和细胞工程综合测试
第1、2章基因工程和细胞工程综合测试编制：秦磊审核：张统省校对：王曼1、下列不能作为植物组织培养的材料是：A．秋海棠的叶B．马铃薯的块茎C．成熟的花粉D．木质部中的导管细胞下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是2.A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同3.下图中所示黏性末端属于由同一种限制酶切割而成的是()A．①②B．①③C．①④D．②③4.作为基因的运输工具——质粒载体，必须具备的条件及理由是()A．能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B．具有多个限制性核酸内切酶切点，以便于目的基因的表达C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件D．能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选5.质粒之所以能做基因工程的载体，是由于它()A．含蛋白质，从而能完成生命活动B．能够自我复制，而保持连续性C．是RNA，能够指导蛋白质的合成D．具有环状结构，能够携带目的基因6.采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是()①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵A．①②B．②③C．③④D．①④7.采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。
但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。
以下有关叙述正确的是()A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子的重组DNA分子导入羊的受精卵C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞中，不存在于其他体细胞中D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA8.《人类基因治疗》报道，在美国佛罗里达大学基因治疗中心接受基因治疗的三名遗传性失明患者都重新获得了一定的视力，并且没有严重的副作用。
基因工程和细胞工程测试题(附答案,可用于考试)
高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级（时间：90分钟分数：100分）一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。
每题只有一个选项符合题意。
）1．以下说法正确的是（）A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B．质粒是基因工程中惟一的运载体C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（）A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂3．有关基因工程的叙述正确的是（）A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C.质粒都可作运载体D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（）A.基因工程B.组织培养C.诱变育种D.杂交育种5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体B．培养人的B细胞能够无限地增殖C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥7．以下对DNA的描述，错误的是（）A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息B.同种生物个体间DNA完全相同C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达D.一个DNA分子可以控制多个性状8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（）A.氨基酸结构B.蛋白质空间结构C.肽链结构D.基因结构9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（）A.DNA双螺旋结构模型的建立B.遗传密码的确立及其通用性的发现C.生物体细胞全能性的证明D.遗传信息传递的“中心法则”的发现10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（）A.分子杂交技术B.抗原—抗体杂交C.抗虫或抗病的接种D.基因枪法11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（）A.植物组织培养B. 单克隆抗体C. 植物体细胞杂交D.细胞核移植12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（）A.基本原理相同B.诱导融合的方法类C.原生质体融合D.可用灭活的病毒作诱导剂13．下列哪一项属于克隆（）A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D．将某种瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系14. 在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个）放入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是（）A．640 B．8100 C．600 D．864015.下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是（）A.培养基成分不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株16. 用于核移植的供体细胞一般都选用（）A.受精卵B.传代10代以内的细胞C.传代10~50代以内的细胞D.处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞17.下面对动物细胞融合技术及意义的叙述，不合理的是（）A.将来有可能通过此方法来生产白细胞介素B.通过克服远源杂交不亲和现象来获得新物种C.有助于对细胞这一生命单位的更为科学的认识D.融合本身与生物膜的流动性直接相关18.下列不属于动物细胞工程应用的是（）A．大规模生产干扰素．用于抵抗病毒引起的感染B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞C．大规模生产食品添加剂、香料等D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖19．科学家用小鼠骨髓癌细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓癌细胞融合的是（）A．经过免疫的B淋巴细胞B．不经过免疫的T淋巴细胞C．经过免疫的T淋巴细胞D．不经过免疫的B淋巴细胞20．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。
高中生物专题复习：基因工程和细胞工程
基因工程和细胞工程1．为增加油菜种子的含油量,科研人员将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种.(1)研究人员采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因,该技术是利用________的原理,使相应基因呈指数增加.所含三种限制酶(XbaⅠ、ClaⅠ、SacⅠ)的切点如图所示,则用________和________处理两个基因后,可得到酶D基因和转运肽基因的融合基因.(2)将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的________中,构建基因表达载体并导入农杆菌中.为了获得含融合基因的单菌落,应进行的操作是______________________________.随后再利用液体培养基将该单菌落菌株振荡培养,可以得到用于转化的侵染液.(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间的目的是_____________________________,进一步筛选后获得转基因油菜细胞,提取上述转基因油菜的mRNA,在逆转录酶的作用下获得cDNA,再依据________的DNA片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检测,可判断融合基因是否完成________.最后采用抗原—抗体杂交法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达.答案：(1)DNA双链复制ClaⅠDNA连接酶(2)TDNA将获得的农杆菌接种在含四环素的固体培养基上培养(3)利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞融合基因转录2．人外周血单核细胞能合成白细胞介素2(IL?2).该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解.研究人员将IL?2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,在酵母菌中表达出具有IL?2生理功能且不易降解的IL?2?HSA融合蛋白,技术流程如图.请回答：(1)图中③过程的模板是________,表达载体1中的位点________应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2.(2)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL?2蛋白对应的碱基序列不能含有__________,才能成功表达出IL?2?HSA融合蛋白.启动子是________识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA.(3)培养人外周血单核细胞时,需要将温度控制在________℃,此外还需要通入________________(气体).(4)应用____________技术可检测酵母菌是否表达出IL?2?HSA融合蛋白.(5)如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞,经胚胎培养后移入受体母牛子宫内可以存活的生理学基础是__________________________________________________.答案：(1)IL?2的cDNA a(2)终止密码子RNA聚合酶(3)37 无菌的95%空气和5%CO2(4)抗原—抗体杂交(5)母牛子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应3．(广东肇庆模拟)“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一,其本质是利用腺病毒和人P53基因(抑癌基因)拼装得到的重组病毒.人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复,使其恢复正常,或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡,阻止细胞癌变.“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒,其致病力很弱,其基因不整合到宿主细胞的基因组中,无遗传毒性；载体经基因工程改造后,只对细胞实施一次感染,不能复制,不会污染.请回答下列问题：(1)在“今又生”的生产中,为了获得更高的安全性能,在载体一般应具备的条件中,科学家选择性地放弃了一般载体都应具有的________________特点.检测P53基因的表达产物,可以采用________________________技术.(2)如果要大量扩增P53基因,一般采用PCR技术,该技术中需使用一种特殊的酶：________________________.与体内DNA复制相比较,PCR反应要在______________中才能进行,并且要严格控制________条件.(3)如果要获得胚胎干细胞进行研究,则胚胎干细胞可来源于囊胚的________________,或胎儿的原始性腺；在培养时,细胞充满培养皿底部后停止分裂,这种现象称为________.如果想继续培养则需要重新用________处理,然后分瓶继续培养,这样的培养过程通常被称为传代培养.答案：(1)自我复制抗原—抗体杂交(2)热稳定DNA聚合酶(Taq酶) 一定的缓冲溶液温度(3)内细胞团接触抑制胰蛋白酶4．请回答以下有关基因工程的问题：(1)基因工程中切割DNA的工具酶是________.DNA连接酶根据其来源不同,分为________和________.(2)利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成________.(3)____________________是基因工程的核心步骤.启动子是________识别和结合的部位,它能驱动基因转录出mRNA.(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________.(5)要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用的方法是________技术.答案：(1)限制性核酸内切酶(限制酶) E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶(顺序可颠倒)(2)引物(引物对)(3)基因表达载体的构建RNA聚合酶(4)农杆菌转化法(5)DNA分子杂交5．油菜中油酸为不饱和脂肪酸,能降低人体血液的胆固醇含量,减少人体患心血管病的风险.F基因控制合成的油酸酯氢酶催化油酸形成饱和脂肪酸,转反义F基因油菜能提高菜籽油的油酸含量.请分析回答下列问题：(1)从油菜细胞的染色体DNA获取F基因后进行大量扩增的方法为________.利用该方法扩增目的基因的前提是________________.(2)构建反义F基因表达载体时,需要用到的工具酶有________________；农杆菌可用来将反义F基因表达载体导入油菜细胞,从分子角度分析,其具有的特点是________________________________________________________________________.构建反义F基因表达载体时没有设计标记基因,其可能的原因是________________________________________________________________________.(3)Le启动子为种子特异性启动子,将F基因反向连接在Le启动子之后构建了反义F基因.检测转反义F基因油菜细胞内F基因转录的mRNA含量,结果表明,因杂交形成双链RNA,细胞内F基因的mRNA水平下降.由此推测,反义F基因的转录抑制了F基因的________(填“复制”“转录”或“翻译”)过程.若F基因转录时,两条单链(a1、a2)中a1为转录的模板链,则反义F基因转录时的模板链为________.答案：(1)PCR技术有一段F基因的核苷酸序列(2)限制酶、DNA连接酶其Ti质粒上的T－DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA 上无标记基因表达产物,有利于食品安全(3)翻译a26．克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞异常凋亡有关.Bcl?2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系.克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图.请回答：(1)图中重组细胞的细胞核来自________细胞,早期胚胎移入受体子宫继续发育,经桑椹胚、囊胚和________胚最终发育为克隆猪.(2)在PCR 过程中可检测出cDNA 中Bcl ?2 cDNA 的分子数,进而计算总mRNA 中Bcl ?2 mRNA 的分子数,从而反映出Bcl ?2基因的转录水平.①图中X 表示________过程.②在PCR 过程中利用________技术可检测出cDNA 中Bcl ?2 cDNA 的分子数.(3)该过程所涉及的现代生物技术有早期胚胎培养、胚胎移植、________和________.(4)目前使用的供体细胞一般都选择传代10代以内的细胞,原因为________________________________________________________________________.答案：(1)体 原肠(2)①反转录 ②DNA 分子杂交(3)动物细胞培养 核移植技术(4)传代10代以内的细胞保持正常的二倍体核型7．应用植物组织培养技术,不仅可实现种苗的快速繁殖,培育无病毒植株,也可加快作物及苗木育种.下面是培育柑橘耐盐植株的实验流程：茎段→愈伤组织―――――――――――――――→处理1：先用γ射线照射处理2：后在培养基中加入物质X 挑选生长的愈伤组织→耐盐植株 回答下列问题：(1)愈伤组织是由离体的茎段经________________过程形成的,此时愈伤组织细胞_______________(填“具有”或“不具有”)细胞的全能性.(2)对愈伤组织进行了两次处理,处理1中γ射线照射的目的是________________,用γ射线不直接处理茎段而是处理愈伤组织,原因是________________________________；处理2中添加的物质X 为________.(3)植物组织培养技术也被广泛应用于其他作物的育种中.在培育白菜—甘蓝、三倍体无子西瓜、农杆菌转化法获得的抗虫棉中,必须用到植物组织培养技术的是________________.答案：(1)脱分化 具有(2)诱发基因突变 愈伤组织细胞分裂能力强,易诱发基因突变 NaCl(或盐)(3)白菜—甘蓝、抗虫棉8．如图为植物体细胞杂交技术流程图,其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞,其基因型分别是AA 和BB.据图分析回答：(1)经过①过程得到的是________,此过程中用到的试剂是________________________.(2)将若干a和b等量混合后转移到培养基上培养,再经过②和③,得到的c细胞可能的类型有________________(用基因型表示).(3)植物体细胞融合成功的标志是________,其产生与细胞内________(细胞器)有关.(4)④和⑤过程分别是________,获得的杂种植物有________个染色体组.(5)植物体细胞杂交与自然状况下的杂交育种相比,前者的主要意义是________________________________________________________________________.答案：(1)原生质体纤维素酶和果胶酶(2)AABB、AAAA、BBBB、AA、BB(3)形成新的细胞壁高尔基体(4)脱分化和再分化四(5)克服远缘杂交不亲和的障碍9．请回答下列关于生物工程的有关问题：(1)基因工程的核心是____________________；将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________,将目的基因导入动物细胞最有效的方法是________.(2)植物体细胞杂交技术中,诱导原生质体融合的化学方法一般是用________作为诱导剂来诱导细胞融合；动物细胞工程中________技术是其他动物细胞工程技术的基础,动物细胞工程的一项重要应用是单克隆抗体的制备,与普通抗体相比单克隆抗体的最主要优点是________________________________________________________________________.(3)胚胎工程中,为了获得产奶量高的奶牛,要对性别进行鉴定,需要取样囊胚期的________做DNA分析,若对囊胚进行胚胎分割,要注意__________________,否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.答案：(1)基因表达载体的构建农杆菌转化法显微注射法(2)聚乙二醇(PEG) 动物细胞培养特异性强、灵敏度高,并可大量制备(3)滋养层将内细胞团均等分割10．单克隆抗体的制备过程如图所示：(1)植物体细胞杂交和单克隆抗体制备,都应用了细胞融合技术,电激和聚乙二醇都可以诱导相应的细胞融合,在诱导动物细胞融合时,还可以用________.细胞融合的原理是________________.(2)融合后的细胞,仅仅由两个细胞互相融合的类型有________种,其中符合要求的细胞是________,其特点为_________________________________________________________.(3)向动物体内反复注射某种抗原,并从动物血清中分离出抗体,这种抗体与单克隆抗体相比,存在的缺点是________________________.由单克隆抗体技术研制成的“生物导弹”由两部分构成,其中一部分被称为“瞄准装置”,它作用的原理是________,其特点为________________________________________________________________________.答案：(1)灭活的病毒诱导细胞膜的流动性(2)3 杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生特定的抗体(3)产量低、纯度低、特异性差抗原与抗体杂交特异性强。
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基因工程习题1、下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是%1一： z ② z —③ 一④A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②2、以下各种酶与其作用部位不相匹配的是：A、解旋酶一一磷酸二酯键B、肽酶一一肽键C、ATP水解酶一一高能磷酸键D、限制酶一一磷酸二酯键3、科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并由乳腺分泌抗体，相关叙述中正确的是%1该技术将导致定向变异%1DNA连接酶把目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来%1蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料④受精卵是理想的受体A.①②③④B.①③④C.②③④D.①②④4、以下有关蛋白质工程是叙述，不正确的是：A.蛋白质工程发展的基础是基因工程，是延伸出来的第二代基因工程B.蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核昔酸序列的过程C.E溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性不是蛋白质工程应用的体现D.蛋白质工程既能改造现有的蛋白质，也能制造新的蛋白质5、利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。
下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是：A.棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及mRNAC.山羊乳腺细胞中检测到人生长素DNA序列D.酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白6、下列关于基因文库的说法不正确的是：A.某果蝇X染色体上的所有基因组成的文库是部分基因文库B.取出果蝇某细胞中全部mRNA,通过反转录产生的全部DNA片段称为该果蝇的基因组文库C.某种生物的基因组文库大于cDNA文库D.可以从基因文库中获取目的基因7、下列关于构建基因表达载体的叙述不正确的是：A.是基因工程的核心B.其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时能表达和发挥作用C.一般用抗生素抗性基因作为目的基因D.基因工程中的受体细胞有所不同，基因表达载体的构建也有所差别8、有关PCR技术的说法，不正确的是：A.PCR中用到的Taq酶与体内DNA聚合酶相比具有热稳定性B.PCR技术的原理是DNA双链复制C.利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段己知目的基因的核昔酸序列D.PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DMAa酶I —AGATCT-—TCTAGAb酶I —GGATCC-—CCTAGG-9、基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。
己知限制酶1的识别序列和切点是一G I GATCC—,限制酶11的识别序列和切点是一I GATC—。
根据图示判断下列操作正确的是：GGATCC 目的基因GATC111II11III11II1II1CCTAGG CTAG注:Genel和Gene II表示两种标记基因Q衰示限制酶仅有的识别序列放大A.质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶II切割B.质粒用限制酶II切割，目的基因用限制酶I切割C.目的基因和质粒均用限制酶I切割D.目的基因和质粒均用限制酶I【切割10、某线性DNA分子含有3 000个碱基对(bp),先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。
限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。
下列有关说法正确的是a酶切割产物(bp)b酶再次切割产物(bp)1 600； 1 100； 300800； 300A.在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个B.a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接C.a酶与b酶切断的化学键分别为磷酸二酯键和氢键D.用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后,-TCTAGG^序列会明显增多11、下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。
卡那霉素抗性基因(kan「)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。
下列叙述正确的是()。
A.构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株C.卡那霉素抗性基因(kan r)+有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点D.抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传-^11 一 双链DNA ^^90-95 t ④ 55-60 T70-75r⑤组织细胞 |分离 mRNA™™ mRNA-cDNA_J®^ 复合体^7^12、（2014天津卷）4.为达到相应目的，必须通过分子检测的是A. 携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B. 产生抗人白细胞介素一8抗体的杂交瘤细胞的筛选C. 转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D. 21三体综合征的诊断13、 如图是利用基因工程技术培育转基因植物，生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中Pst I 、Sma I 、EcoR I 、川治I 为四种限制性内切酶。
下列说法错误的是Pst I Sma I EcoR I含抗Kt®一因的DNA~I抗原基因玄由/表达吨抗卡丹逐、IA. 图示过程是基因工程的核心步骤B.表达载体构建时需要用到限制酶IC. 抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D. 除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构14、以下为形成cDNA 过程和PCR 扩增过程示意图。
据图分析，下列说法正确的是RNA 链 DNA 链 | .①-| |核酸酶斗RNA 单链杂交双链A. 催化①过程的酶是RNA 聚合酶B. ④过程发生的变化是引物与单链DNA 结合C. 催化②⑤过程的酶都是DNA 聚合酶，都能耐高温D. 如果RNA 单链中A 与U 之和占该链碱基含量的40%,则一个双链DNA 中，A 与U 之和也占该DNA 碱基含量的40% 15、右图表示细胞膜上乙酰胆碱（一种神经递质）受体基因 的克隆技术操作过程，下列相关分析中正确的是 （）A. 获得该mRNA 的最佳材料是受精卵B. 构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌构建基因表达 载体、感染细分离相关菌落C.完成过程①②必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA聚合酶D.探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌，获得未被感染的细菌烟草圣细胞一 再生E能产生人胰 植株哀丁岛素的植株16、 (14江苏卷)23.下列关于基因工程技术的叙述正确的是 A. 切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核昔酸序列 B. PCR 反应中温度的周期性改变是为了 DNA 聚合酶催化不同的反应 C. 载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D. 抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达17、 (2013江苏卷)22.小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应, 为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。
下列 相关叙述正确的是A. 设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B. 用PCR 方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列C. PCR 体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA 聚合酶D. 一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞18、 (2013安徽卷)6.下图为通过DNA 分子杂交鉴定含有某特定DNA 的细菌克隆示意图。
下列叙述正确的是A.根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目 B. 外源DNA 必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制C. 重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA 分子脱氧核糖和磷酸交替连接D. 放射自显影结果可以显示原培养仰.中含有特定DNA 的细菌菌落位置19、转基因生物作为生物反应器，用于生产人们所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。
图是通过生物工程培育能产生人胰岛素烟草的过程。
请据图回答：(1) 构建表达载体的A 过程中，需要用到的工具酶有 和 o (2)B 过程中，常用 处理使细菌转化为感受态细胞，从而利于重组质粒的导人。
D 过程采用的方法是。
若把重组质粒导人动物细胞，常采用的方法 是 O (3) E 过程采用的技术是 ,主要包括 和 两个阶段。
该技术 的原理是 o (4) 如果利用DNA 分子杂交技术对再生植株进行检测，F 过程应该用 作为探针。
A重组B土壤农C ,含重组质1 质导入' 杆菌选择培养 粒的细菌1D质粒! -「外源基因一 使龄变性的DHi 时Pst I Sma 1 EcoR I 含抗原基」 因的DNA 二心 抗原基因抗卡那毒 素基因根瘤农杆菌思处质粒、\ 植物 细胞20、如图表示转基因马铃薯的培育过程，请回答相关问题:(1) 如果用马铃薯发育的某个时期的mRNA 反转录产生的 片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做马铃薯的 o(2) 重组质粒中，目的基因的两端还必须有 和终止子。
用含重组质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后，采用 技术检测转基因马铃薯的 上是否插入了目 的基因，同时还要采用 技术检测目的基因是否在转基因马铃薯细胞中表达。
(3) 培育愈伤组织的固体培养基中，除了无机盐、有机营养物质、琼脂、卡那霉素外，还需 添加的物质是,添加卡那霉素的作用是。
21、 (新课标II 卷)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。
若从该植物中 获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。
回答下列问题：(1) 理论上，基因组文库含有生物的 基因；而cDNA 文库中含有生物的 基因。
(2) 若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中 出所需的耐旱基因。
(3) 将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物 的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。
要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测 此再生植株中该基因的,如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的 是否得到提高。
(4) 假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3： 1时，则可推测该耐旱基因整合到了 (填“同源染色体的一条上”或“同 源染色体的两条上” )022、 (2009天津高考理综)水稻种子中70%的磷以植酸形式存在。
植酸易同铁、钙等金属 离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子；同时，排出的大量磷进入水体 易引起水华。
(5) 为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因 水稻品种。
下图是获取植酸酶基因的流程。
据图回答：质粒组Pst I Sma I —EcoK 1 Apa I死细胞 愈伤组织抗卡抗原 那霉基因 、京基因DNA%1 图中基因组文库（小于/等于/大于）cDNA 文库。
%1 B 过程需要的酶是； A 、C 过程中（可以/不可以）使用同一种 探针筛选含目的基因的菌株。