卡式微柱凝胶技术在ABO、RH(D)血型鉴定中的应用
abo及rhd微注凝胶卡标准操作流程
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ABO、RhD血型抗原的手工微柱凝胶免疫检验法分析
ABO、RhD血型抗原的手工微柱凝胶免疫检验法分析发布时间：2021-05-27T03:04:24.105Z 来源：《健康世界》2021年3期作者：洪亚华[导读] 目的：分析ABO、RhD血型抗原的手工微柱凝胶免疫检验法的应用效果。
方法：应用医学小样本对比分析法，对我院检验科2019年10月-2020年10月之间入我院检验科接受血型抗原检测的血液样本为受试对象，对照组（n=34例）应用凝聚胺法，观察组（n=34例）应用手工微柱凝胶免疫检验法检测，临床就两组检测ABO、RhD血型抗原的结果进行对比分析。
结果：观察组患者临床检验总有效率94.12%（32/34），对照组患者临床检验总有效率73.53%（25/34），观察组显著高于对照组，有统计学意义（P<0.05）。
洪亚华南安市医院福建省泉州市南安市 362300摘要：目的：分析ABO、RhD血型抗原的手工微柱凝胶免疫检验法的应用效果。
方法：应用医学小样本对比分析法，对我院检验科2019年10月-2020年10月之间入我院检验科接受血型抗原检测的血液样本为受试对象，对照组（n=34例）应用凝聚胺法，观察组（n=34例）应用手工微柱凝胶免疫检验法检测，临床就两组检测ABO、RhD血型抗原的结果进行对比分析。
结果：观察组患者临床检验总有效率94.12%（32/34），对照组患者临床检验总有效率73.53%（25/34），观察组显著高于对照组，有统计学意义（P<0.05）。
结论：手工微柱凝胶免疫检验法在ABO、RhD血型抗原检测中的检验价值确切，具有较高的阳性检出率和假阳性识别率，且比凝聚胺法的敏感性和特异性强，值得在输血环节就不规则抗体检测进行推广实施。
关键词：ABO；RhD血型抗原；手工微柱凝胶；免疫检验法输血为临床抢救危、急、重症患者和急慢性出血性疾病的重要方法。
输血后的溶血反应，对患者机体健康造成了极大的损害。
在常规A、B、O 血型之外，RhD血型抗原输入患者体内后，可通过免疫反应而对患者生命健康安全造成不同程度的损害[1]。
人ABORHD血型抗原检定试剂使用说明书
人ABO、RHD血型抗原检定试剂使用说明书（微柱凝胶免疫检测法）[试剂名称]通用名：人ABO、RHD血型抗原检定试剂卡（微柱凝胶免疫检测法）英文名：HUMAN ABO、RHD BLOOD GROUPING `S CARDS （MIAOODUMN GEI IMMUNOASSAY）汉语拼：REN ABO、RHD XUEXING KANGYUAN JIANDING SHIJI KA（WEIZHUNINGJIAO MIANYI JIANCE FA）[原理、用途、特点]：本品将分子排阻层析原理应用于血型血清学检测，专供鉴定人ABO血型、RHD血型抗原，操作简单、快速，所需样本量少，使得临床检测规范化、标准化。
[本品成分]：本品系由聚丙烯塑料透明卡片，卡片上并排六支微柱型管中充填凝胶，从左向右顺序第1支至第3支和第4支至第6支微管凝胶中均分别充以抗A、抗B、抗D单克隆抗体试剂，称之为特异性胶，检测人红细胞ABO、RHD抗原。
[性状]：胶质均匀，胶面整齐，无气泡；液体透明，无杂质。
[适应症]：本品专供鉴定人ABO、RHD血型抗原的微柱凝胶免疫检测。
[用法用量]：标本采集：采集被检对象静脉血，将该血液制备成红细胞标本。
红细胞标本的制备：配制0.5%红细胞生理盐水悬液.[实验步骤]:(1)、将微柱凝胶试剂卡的6个凝胶管标号；（2）、将待检者0.5%红细胞悬液分别加入第1至第3管或第4至第6管中,每管50UL;(3)、即刻使用专用离心机离心，900r/min，2分钟、1500r/min，3分钟取出肉眼判定结果。
结果判定：阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。
反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面为强阳性反应；复合物在胶中为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。
卡式微柱凝胶试验在输血检验血型鉴定中的临床效果
卡式微柱凝胶试验在输血检验血型鉴定中的临床效果发布时间：2021-11-09T08:28:01.728Z 来源：《医师在线》2021年27期作者：杨荣生汪鑫李晓曦[导读] 目的探讨卡式微柱凝胶试验在输血检验血型鉴定中的临床效果。
方法选取2020年1月-2020年12月我院收治的输血患者90例，杨荣生汪鑫李晓曦襄阳市中医医院（襄阳市中医药研究所）输血科湖北，襄阳441000【摘要】目的探讨卡式微柱凝胶试验在输血检验血型鉴定中的临床效果。
方法选取2020年1月-2020年12月我院收治的输血患者90例，分为两组同时进行实验，对照组常规方法检验，研究组卡式微柱凝胶检验。
比较两组检验结果。
结果研究组检验结果高于对照组（P＜0.05）。
结论输血检验血型鉴定中，卡式微柱凝胶检验效果较好，值得推广应用。
【关键词】卡式微柱凝胶；输血检验；血型鉴定；临床效果输血是临床抢救治疗患者的重要组成部分，输血相容性检验对临床输血来说非常重要，快速、准确鉴定血型，是及时、有效输血的先决条件，有利于尽快完成用血治疗，促进患者身体康复。
临床中常规检验血型采用试管法，该方法操作简便，是血型鉴定的经典方法。
但该方法实际工作中对于操作者技术要求高，出现疑难情况不易判断，影响后续对患者进行输血治疗。
随着医疗技术的发展与进步，卡式微柱凝胶试验是临床输血检验中一种新型的方法，在常规检验基础上对血型进行鉴定，具有易于操作标准化和自动化，判读客观和可靠等优点。
有关研究显示，在血液检查中使用卡式微柱凝胶试验还更有利于快速、精准实施血液配备，并且使用的样品剂量小[1]。
本次研究对卡式微柱凝胶在输血检验中的临床效果进行了分析，期望可以为临床更好的进行输血检验提供依据，特别是在基层医院更有推广价值。
1资料与方法1.1一般资料选取2020年1月-2020年12月我院收治的输血患者90例，分为两组，对照组常规方法检验，研究组卡式微柱凝胶检验。
研究组45例，男24例，女21例，平均年龄（45.7±2.3）岁。
ABO＼RhD血型3种鉴定方法的比较
ABO＼RhD血型3种鉴定方法的比较目的:探讨进行ABO、RhD正反定型手工微柱法在血型鉴定中的应用。
方法:对门诊送检血样同时采用手工微柱凝胶法及手工盐水试管和玻片法进行ABO、RhD正反对比定型鉴定。
结果:一次性正确率,手工微柱凝胶法正定型为100%、反定型为99.92%;试管法分别达到99.92%、99.83%;玻片法正定型率正确率为98.91%。
结论:手工微柱凝胶法操作简单、快速,易于观察。
其灵敏度高于试管法与玻片法。
血型标本便于保存,利于事后复查,值得在二甲以上医院推广。
标签：微柱凝胶法;试管法;玻片法在做ABO血型鉴定时,临床广泛应用的玻片法虽操作简单、方便快捷,但在临床实际工作中却时有发生血型鉴定错误现象,而且往往是在患者需要输血治疗申请配血时被发现错定血型,导致临床科室对检验科产生不良印象,认为检验质量差,检验结果不准确、不可靠。
对检验科工作会产生很大的负面影响。
试管法是传统经典的ABO、RhD血型鉴定方法,其结果准确可靠,但与微柱凝胶法相比,敏感性较差,操作难以规范化、自动化、检测结果不易保存,而微柱凝胶法用于ABO、RhD血型鉴定易于自动化、标准化、结果准确可靠,特异性强等优点被许多大医院所采用。
笔者在湘雅三院输血科进修学习期间,对于门诊每天送检血型鉴定标本同时采用手工微柱凝胶法鉴定ABO、RhD血型结果与试管和玻片法进行ABO、RhD血型鉴定结果进行比较。
1材料与方法1.1材料湖南省湘雅三院输血科2009年1月~2009年6月门诊血型鉴定1 193例,抽取静脉血1 ml用EDTA-K2抗凝,年龄1 d～90岁。
1.2试剂ABO、RhD血型定型微柱凝胶试剂卡(单克隆抗体)(长春博迅生物技术有限责任公司提供)反定型用的A型标准试剂细胞、B型标准试剂细胞由本实验室自制2%~5%试剂红细胞,按第一版《临床输血手册》[1]操作。
1.3设备TD-3A型血型血清学专用离心机(长春博研科学仪器有限责任公司生产)1.4 方法对门诊送检血样同时采用手工微柱凝胶法及手工盐水试管法进行ABO、RhD正反定型鉴定。
卡式微柱凝胶技术在ABO、RH(D)血型鉴定中的应用
卡式微柱凝胶技术在ABO、RH（D）血型鉴定中的应用作者：李金辉黄秋燕胡志愿何秀琴苏丹李豪柏来源：《医学信息》2017年第07期摘要：目的探讨卡式微柱凝胶技术在ABO、RH（D）血型鉴定中的主要应用。
方法对英德市人民医院检验科采集的45558例病人血液标本同时采用卡式微柱凝胶法与传统手工操作法进行血型鉴定检测。
结果卡式微柱凝胶法正确率为100%，手工法正确率为99%。
两种方法比较差异无统计学意义（P>0.05）。
结论卡式微柱凝胶法操作标准化，结果判定清晰准确，具有很大的临床应用价值，值得推广和应用。
关键词：血型鉴定；手工操作法；卡式微柱凝胶法；Application of Card Microsphere Gel in ABO， RH （D） Blood Type IdentificationLI Jin-hui，HUANG Qiu-yan，HU Zhi-yuan，HE Xiu-qin，SU Dan，LI Hao-bai（Yingde City People's Hospital Laboratory of Guangdong Province，Yingde 513000，Guangzhou，China）Abstract：Objective To investigate the main application of card microcolumn gel technique in ABO and RH（D）blood group identification.Methods Blood samples were collected from 45558 patients collected by Yingde City People 's Hospital，and the blood type was detected by the method of card micro-column gel method and traditional manual method.Results The correct rate of card microcolumn gel was 100%，and the correct rate was 99%. There was no significant difference between the two methods（P>0.05）.Conclusion Cartridge microcolumn gel method is standardized，and the result is clear and accurate.It has great clinical value and worthy of popularization and application.Key words：Blood type identification；Manual method；Card microcolumn gel method血型鉴定在急诊抢救、手术治疗、贫血治疗、献血和输血前检查等过程中是不可缺少的试验，血型鉴定是否正确无误，与临床输血是否安全有效息息相关。
卡式微柱凝胶技术在血型鉴定及输血前红细胞不规则抗体检验中的作用分析
验 ；（%）表示计数资料，c2 检验，P<0.05 为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血型鉴定情况 卡 式 微 柱 凝 胶 法 对 受 测 者 ABO 血 型 鉴 定 准 确 率 为
9 9 . 1 9 % （ 1 1 0 3 / 1 1 1 2 ），相 比 聚 凝 胺 法 检 测 准 确 率 9 7 . 2 1 % （1081/1112）明显更高（c2=12.322，P=0.000）；卡式微
表 1 对比不轨则抗体检出情况 [n(%)]
组别 卡式微柱
凝胶 聚凝胺法
χ2
P
例数 抗 -c 抗 -C 抗 -e 抗 -E 抗 -D 共计
1112 4（0.36）3（0.27）3（0.27）5（0.45）3（0.27）18（1.62）
1112 2（0.18）1（0.09）1（0.09）2（0.18）1（0.09）7（0.63） 4.895 0.027
0 引言
不规则抗体为 ABO 血型系统（抗 -A、抗 -B）外其他抗体，其 中 Rh 血型抗体较为常见。在输血过程中若出现不规则抗体，则 极易引发严重输血不良反应，也是导致血型鉴定困难、溶血疾病的 常见原因之一 [1]，特别对于存在输血、妊娠患者而言，加强血型鉴 定及不规则抗体检验也是保证输血安全、防治新生儿溶血病等主 要手段。目前，在传统输血检验中多包括聚凝胺法、抗人球蛋白法 等多种形式 [2]，在实际配血检验中需多次洗涤红细胞，操作相对繁 琐，且灵敏度较低，易因检测误差影响患者安全，为寻找更加准确、 高效的检测方式，保证患者健康，我院特行此研究。
抽取输血受测者空腹静脉血 2 mL，加入乙二胺四乙酸二钾真 空 管 中 待 检 。 ① 卡 式 微 柱 凝 胶 技 术 ：制 备 悬 液 ：取 患 者 血 液 标 本 中压积红细胞 10 μL，置于红细胞稀释液（1.2 mL）中，观察悬液 颜色呈均匀浅红色，且外形呈无絮状物。取生物技术研究所有限 责任公司微柱凝胶卡，向其微柱孔中加入 50 μL 浓度为 1.0% 混 合筛选细胞及受测者悬液 25 μL，随后将其置于 37 ℃孵育器中孵 育 15 min，并借助全自动离心机以 1500 r/min 速率离心 3 min；卡 式微柱凝胶法血型鉴定需严格按照试剂盒及使用说明书要求操 作。②聚凝胺法：借助北京奥维亚生物技术有限公司提供聚凝胺 试剂盒，取 3 支同类试管，标记为对照管、注册管及次测管；其中主 测管中呈装受血者血浆，加入 1 滴献血者 5% 红细胞；次测管：呈 装献血者血浆，加入 1 滴受血者 5% 红细胞；对照管：呈装阳性对 照组血浆，加入 1 滴受血者红细胞；对所有检测试管中加入 2 滴凝 聚胺溶液及低离子溶液，混合均匀后，在室温条件下孵育 1 min，并 以 3000 r/min 速率离心 10 s，取 0.1 mL 上层清液，观察红细胞有 无凝聚反应，并向其中 2 滴加复悬液，混合后倒于载玻片上，借助 显微镜观察凝集情况，血型鉴定需按聚凝胺试剂盒说明书操作。 1.3 观察指标
人ABO、RHD血型抗原检定试剂使用说明书
人ABO、RHD血型抗原检定试剂使用说明书（微柱凝胶免疫检测法）[试剂名称]通用名：人ABO、RHD血型抗原检定试剂卡（微柱凝胶免疫检测法）英文名：HUMAN ABO、RHD BLOOD GROUPING `S CARDS （MIAOODUMN GEI IMMUNOASSAY）汉语拼：REN ABO、RHD XUEXING KANGYUAN JIANDING SHIJI KA（WEIZHUNINGJIAO MIANYI JIANCE FA）[原理、用途、特点]：本品将分子排阻层析原理应用于血型血清学检测，专供鉴定人ABO血型、RHD血型抗原，操作简单、快速，所需样本量少，使得临床检测规范化、标准化。
[本品成分]：本品系由聚丙烯塑料透明卡片，卡片上并排六支微柱型管中充填凝胶，从左向右顺序第1支至第3支和第4支至第6支微管凝胶中均分别充以抗A、抗B、抗D单克隆抗体试剂，称之为特异性胶，检测人红细胞ABO、RHD抗原。
[性状]：胶质均匀，胶面整齐，无气泡；液体透明，无杂质。
[适应症]：本品专供鉴定人ABO、RHD血型抗原的微柱凝胶免疫检测。
[用法用量]：标本采集：采集被检对象静脉血，将该血液制备成红细胞标本。
红细胞标本的制备：配制0.5%红细胞生理盐水悬液.[实验步骤]:(1)、将微柱凝胶试剂卡的6个凝胶管标号；（2）、将待检者0.5%红细胞悬液分别加入第1至第3管或第4至第6管中,每管50UL;(3)、即刻使用专用离心机离心，900r/min，2分钟、1500r/min，3分钟取出肉眼判定结果。
结果判定：阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。
反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面为强阳性反应；复合物在胶中为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。
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卡式微柱凝胶技术在ABO、RH（D）血型鉴定中的应用
目的探讨卡式微柱凝胶技术在ABO、RH（D）血型鉴定中的主要应用。
方法对英德市人民医院检验科采集的45558例病人血液标本同时采用卡式微柱凝胶法与传统手工操作法进行血型鉴定检测。
结果卡式微柱凝胶法正确率为100%，手工法正确率为99%。
两种方法比较差异无统计学意义（P>0.05）。
结论卡式微柱凝胶法操作标准化，结果判定清晰准确，具有很大的临床应用价值，值得推广和应用。
Abstract：Objective To investigate the main application of card microcolumn gel technique in ABO and RH（D）blood group identification.Methods Blood samples were collected from 45558 patients collected by Yingde City People ‘s Hospital，and the blood type was detected by the method of card micro-column gel method and traditional manual method.Results The correct rate of card microcolumn gel was 100%，and the correct rate was 99%. There was no significant difference between the two methods（P>0.05）.Conclusion Cartridge microcolumn gel method is standardized，and the result is clear and accurate.It has great clinical value and worthy of popularization and application.
Key words：Blood type identification；Manual method；Card microcolumn gel method
血型鑒定在急诊抢救、手术治疗、贫血治疗、献血和输血前检查等过程中是不可缺少的试验，血型鉴定是否正确无误，与临床输血是否安全有效息息相关。
它的正确与否关系到病人生命安危。
目前在国内中小型医院大多数采用手工操作法鉴定血型，由于手工操作法鉴定不易标准化，且干扰因素较多，观察结果主观性强，造成血型错检时有发生。
近年来卡式微柱凝胶ABO、RH（D）血型抗原试验在血型鉴定方面由于操作简单、易于标准化和判定结果清晰准确在各级医院推广应用普及。
我院检验科于2012年6月开始采用微柱凝胶法和传统手工操作法进行血型鉴定，现将实验结果报道如下：
1资料与方法
1.1一般资料全部病例血液标本来自我院2015年1月～2016年5月住院及门诊患者45558例，采集待检者静脉血液2ml，用常规EDTA-K2抗凝，分别进行手工操作法和卡式微柱凝胶ABO、RH（D）血型抗原检测法血型鉴定。
1.2仪器离心机：采用中山市生科试剂仪器有限公司提供专用离心机。
1.3试剂
1.3.1卡式微柱凝胶ABO、RH（D）血型抗原鉴定试剂中山市生科试剂仪器有限公司生产。
1.3.2手工鉴定操作法试剂ABO 正定型抗-A、抗-B血清为上海血液生物医药有限责任公司生产提供，RH（D）试剂为长春博德生物技术有限公司生产。
1.4鉴定方法
1.4.1卡式微柱凝胶ABO、RH（D）血型抗原检测法按中山市生科试剂仪器有限公司提供的说明书进行标准操作和判读结果。
1.4.1.1制备1%待检红细胞生理盐水。
1.4.1.2撕开检测卡的封膜，于A、B、D、Control微柱管反应腔中加入1%待检RBC生理盐水悬浮液各50 ul。
1.4.1.3检测卡置专用离心机，1800 r/min，2 min，2500 r/min，1 min。
1.4.1.4取出判定结果结果判定标准如下；凝集的红细胞被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判定为阳性结果，表示待检红细胞含有相应血型抗原；RBC全部沉积于凝胶孔腔底部，判定为阴性结果，表示待测待检红细胞不含有相应血型抗原。
1.4.2手工操作按《全国临床检验操作规程》[1]规定进行。
1.5 统计学处理采用SPSS13.0统计学软件包进行数据处理，计数资料结果用率表示，统计方法采用？字2檢验，检验水准α=0.05。
2结果
将上述两种方法的鉴定结果进行比较，如果所检测血型结果不符合者，将标本血液红细胞用生理盐水离心洗涤3次，再用两种方法重复测定检查，统计出正确百分率。
3讨论
微柱凝胶技术是1994年获得美国FDA批准的一项免疫学检测技术，其特异性、灵敏度试验、重复性、稳定性试验结果符合其性能指标要求。
目前已在欧美等发达国家作为常规性检测技术广泛应用于临床[2-3]。
卡式微柱凝胶法是抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合的产物。
通过调节葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许单个红细胞通过，从而达到分离凝集红细胞和游离红细胞的目的。
即将红细胞和血清加在凝胶的上部反应离心以后，凝集红细胞将受到凝胶的阻碍而停留在凝胶的上部或凝胶中，则证明发生凝集反应为阳性，反之，所有红细胞都停留在凝胶腔底部，证明未发生凝集反应，则可判为凝集反应阴性。
卡式微柱凝胶ABO、RH（D）血型抗原检测法采用标准化定量操作，最大限度减少了实验室操作人员的主观性，随意性，重复性好，由于采用了凝胶分子筛技术，免疫学检测技术，大大提高了血型鉴定技术的灵敏度，安全性。
将凝集红细胞与游离红细胞分离开，使试验结果一目了然，避免了镜下的主观影响和人为因素失误。
所需检测标本量少，大约为手工法用血量的1/2～1/4，尤其适用于新生儿、大面积烧伤等患者标本不易抽取采集血液的待检测者。
卡式微柱凝胶法操作简便，省去繁琐的洗涤红细胞过程，不再担心抗人球蛋白抗体被中和而产生假阴性影响导致血型鉴定错误发生。
便于保存，一般置室温可保存数月至1年，还可进行拍照摄像取证提供永久记录，以备发生血型鉴定差错和发生医疗纠纷时查找原始资料方便核查。
综上所述，鉴于卡式微柱凝胶法具有以上的优点，虽然成本相对较高，但具有很大的临床应用价值，值得推广和应用。
参考文献：
[1]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京：东南大学出版社，2006：135.
[2]Titlestad K，Georgsen J，Andersen H，et al.Detection of irregular red cell antibodies：more than 3 years of experience with a gel technique and pooled screening cells[J].V ox Sanguinis，1997，73（4）：246.
[3]Langston M M，Lynn P J，Cipolone K M，et al.Evaluation of the gel system for ABO grouping and D typing[J].Transfusion，1999，39（3）：300-305.编辑/雷华。