艾滋病初筛实验室标准操作规程
HIV初筛实验室SOP
枞阳县人民医院HIV抗体初筛实验室SOP文件适用部门：检验科目录第一部分工作制度....................................................................................... 错误！未定义书签。
实验室工作制度..................................................................................... 错误！未定义书签。
HIV标本采集与接收登记制度............................................................. 错误！未定义书签。
艾滋病实验室保密制度......................................................................... 错误！未定义书签。
艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度......................................... 错误！未定义书签。
差错事故处理制度................................................................................. 错误！未定义书签。
报告单签发审核制度............................................................................. 错误！未定义书签。
设备管理制度......................................................................................... 错误！未定义书签。
试剂管理制度......................................................................................... 错误！未定义书签。
艾滋病初筛实验室
艾滋病初筛实验室The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020附件1：艾滋病初筛实验室标准一、必备条件（一）人员条件有3名以上的医技人员，其中中级卫生技术职称人员1名以上（采供血机构的HIV抗体检测人员须具有技师以上卫生技术职称），从事病毒血清学检测技术工作2年以上，接受过国家或省级HIV抗体确认中心举办的HIV抗体检测学习班培训，并获得合格证书。
（二）设备条件有独立的实验室用房（或至少有专用的检测台），污染区和清洁区要分开。
从我国HIV抗体检测工作发展要求，要以酶联免疫法测定考虑所需的检测器材，包括酶标读数仪和洗板机、精确的移液器、专用的普通冰箱、低温冰箱、离心机以及各种消毒与污物处理设施、安全防护用品和恒温设施。
二、HIV抗体检测程序（一）检测试剂初筛用的HIV抗体检测试剂，必须是HIV-1/2混合型，经卫生部批准或注册，经过批检检定合格，并在有效期内。
常用的检测方法有固相酶联免疫吸附试验（Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay，ELISA）等。
（二）HIV抗体检测程序及其流程图1、血液标本验收合格后，用初筛试剂进行检测，如呈阴性反应，则作HIV抗体阴性报告；2、初筛检测结果呈阳性反应的标本，须进行重复检测。
复检时用两种不同的初筛检测试剂复测；3、如两种试剂复检结果均呈阴性反应，则作HIV抗体阴性报告；如均呈阳性反应，或有一份阳性，该标本需送上级实验室加以进一步证实。
送检时应将重新采集的该受检者血液标本和原有血液标本一并送检。
4、初筛检测的流程图三、检测结果的判定和处理对HIV抗体阳性者应做好咨询、保密和报告工作。
对HIV抗体阴性者，如近期有高危行为如性乱史、吸毒史、受血史，或有急性流感样症状等情况，为排除窗口期的可能，建议每3个月复查一次，连续2次。
对HIV抗体可疑的对象要做好咨询和随访工作。
HIV初筛检测实验标准操作程序(SOP文件)
艾滋病初筛检测实验标准操作程序〔SOP文件〕一、目的保证艾滋病病毒抗体ELISA实验的准确性。
二、适用范围艾滋病病毒抗体ELISA实验。
三、具体要求3.1样品采集样品采集安试剂盒要求采集。
采血时注意平安，用一次性注射器谨慎操作，防止发生刺伤和造成外界污染。
血样如即时用可存于普通冰箱，如要长期保存，别离血清置于-20 及以下。
同时做好记录。
3.2样品运送样品转送，除特殊需要外，必须是血清或血浆，置于带有盖帽的试管内，或将塑料试管用酒精灯封死，防止样品流出。
试管上标明姓名、时间、编号，将试管放入专门带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理，在所放试管周围||上下垫有软性物质，以免碰碎，容器外标有HIV检测专用字样和生物危害标志。
路途较远或气候炎热时，容器应置于4 以下运送。
这样同时附送检单。
3.3样品登记和处理收到样品后，及时填写标本登记记录表，送样人、收样人签字，如已进行过初检，登记初检结果和实验方法及所用试剂情况。
对从其他实验室送来的样品，检查并注明送检单与标本记录的符合、样品管破损、溢漏等情况。
如有溢漏应立即将尚存的血样移出，并对管壁和盛器消毒。
检查并记录样品的质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多以及黄疸等情况。
对实验室自采的样品，最好将血液先放置1-2个小时，再用3000 离心15分钟，吸出上清液备用，如在几天内检测可放在2-8 冰箱中，如要贮存，置于-20冰箱。
3.4实验准备将试剂从冰箱中取出，按试剂盒要求时间恢复室温。
检查并记录冰箱、温箱温度。
按照试剂盒要求准备实验原始记录表，标明空白、阴性对照、阳性对照、外部质控血清以及检测样本的位置：登记日期和实验起止时间，记录环境条件及试剂盒厂家、批号、效期：整个实验过程中每一步操作都要在原始记录表上详细登记。
按照试剂盒的要求配置洗液及其他所需要的试剂。
3.5加样和稀释根据样品数量将适宜数量的酶标板条固定在板架上，为了不损坏洗扳机，每道上的酶标板条必须保持完整{缺乏局部可用废弃的微孔添充}，检查加样器加样刻度是否与||试剂盒要求的加样量相符，按照原始记录表说明的位置参加各种质控品和检测样品，注意：空白只加标本稀释液。
HIV初筛实验室标准操作规程
HIV初筛实验室标准操作规程人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体酶联免疫原理和方法（上海科华生物）原理：用HIV-1+2型抗原包被酶联板。
待检血清或血浆中的抗-HIV抗体与包被抗原反应，再与酶标HIV-1+2型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。
加底物（TMB）显色，在酶标仪上测定后根据OD值判定有无HIV抗体的存在。
操作步骤：1、取出HIV抗原包被板。
每次试验设空白对照1孔，阴性对照各1孔，阳性对照各3孔（其中阳性对照1两孔，阳性对照2一孔），质控一孔。
分别加入HIV阴、阳性对照质控血清各100微升，其余孔加入待检样本各100微升。
贴上封口胶，置37℃温育60分钟。
2、将浓缩洗液用纯化水25倍稀释后洗涤用。
3、弃去各孔中样品、拍干。
每孔加满洗液，静置数秒后弃去，如此重复洗5次，拍干。
4、每孔加入酶标抗原工作液100微升，贴上封口胶。
37℃温育30分钟。
5、弃去各孔中酶液，用洗液反复洗涤5次（操作同步骤3）。
6、每孔加入底物液A50微升，再加入底物液B50微升，轻拍混匀，置37℃避光显色30分钟。
7、显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，置酶标仪450nm波长处测定OD值（参考波长为630nm）。
结果判定：阴、阳性对照和被检样本的OD值减去空白对照OD值即为计算值。
2、若阴性对照OD均值小于0.02按0.02计算。
3、临界值（cut off 值）的设定：cutoff值= PC x×10%（若PC x>=2.5按2.5算）4、被检样本的OD值≥临界值应判为HIV抗体阳性反应，<临界值为阴性反应。
检测样本的OD值≥临界值判为HIV抗体阳性，应重新取样双孔复试，复试阳性者应按照“全国HIV检测管理规范”送“HIV确认实验室”进行确认实验。
注意事项：1、本试剂的使用单位必须是当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。
2、整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测工作规范》严格防止交叉感染。
艾滋病初筛实验室标准操作规程之欧阳科创编
HIV抗体初筛实验室SOP文件适用部门：检验科目录第一部分工作制度- 1 -实验室工作制度- 1 -HIV标本采集与接收登记制度- 1 -艾滋病实验室保密制度- 2 -艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度- 2 -差错事故处理制度- 3 -报告单签发审核制度- 3 -设备管理制度- 4 -试剂管理制度- 4 -艾滋病筛查实验室安全防护制度- 5 -艾滋病病毒职业暴露预防处理方案- 5 -第二部分标准操作规程- 8 -第二章样品采集与处理- 8 -第二章标准操作程序- 8 -一、北京金豪- 8 -二、上海科华生物- 9 -三、英科新创- 10 -第三部分设备SOP文件- 13 -一、多功能自动酶标仪RT-2100C- 13 -二、KHB ST－36W洗板机- 16 -三、电热恒温水箱- 18 -第四部分流程图- 20 -一、HIV抗体筛查流程图- 20 -二、暴露级别的评估- 21 -附件：血清加样表- 22 -第一部分工作制度实验室工作制度1.室内应经常保持整洁，各种仪器设备要安装适当，器皿试剂摆放整齐，标志清晰，有良好的通风设备。
2.实验室工作人员工作时一律穿制服，保持衣帽整洁，试验过程中应专心致志、认真负责，坚守工作岗位，不得随意串岗、闲谈，保持实验室安静，下班离开实验室前要检查并关好水、电、门、窗等，注意实验室安全。
3.认真开展实验室质量控制工作，仪器设备应定期保养，有温度记录，检测标本的保存要求符合规范要求。
4.实验室不得放置与测试无关的物品，水、温、湿度、光照、防震、防尘、防噪声等，环境必须符合实验室的工作要求。
5.实验和楼道内必须配置足够的安全防火措施，并定期检查保养。
6.对不同属性、品种和含量水平的试样，应有足够的试验区域，予以分离检验，尤其是已知具有生物危害的试样必须分离检验。
防止损害工作人员健康和污染环境。
7.与检验无关人员不得进入实验室，外单位人员联系工作，一律在办公室接待。
HIV初筛实验室标准操作规程
H I V初筛实验室标准操作规程(总2页)本页仅作为文档封面，使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.MarchHIV初筛实验室标准操作规程人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体酶联免疫原理和方法（上海科华生物）原理：用HIV-1+2型抗原包被酶联板。
待检血清或血浆中的抗-HIV抗体与包被抗原反应，再与酶标HIV-1+2型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。
加底物（TMB）显色，在酶标仪上测定后根据OD值判定有无HIV抗体的存在。
操作步骤：1、取出HIV抗原包被板。
每次试验设空白对照1孔，阴性对照各1孔，阳性对照各3孔（其中阳性对照1两孔，阳性对照2一孔），质控一孔。
分别加入HIV阴、阳性对照质控血清各100微升，其余孔加入待检样本各100微升。
贴上封口胶，置37℃温育60分钟。
2、将浓缩洗液用纯化水25倍稀释后洗涤用。
3、弃去各孔中样品、拍干。
每孔加满洗液，静置数秒后弃去，如此重复洗5次，拍干。
4、每孔加入酶标抗原工作液100微升，贴上封口胶。
37℃温育30分钟。
5、弃去各孔中酶液，用洗液反复洗涤5次（操作同步骤3）。
6、每孔加入底物液A50微升，再加入底物液B50微升，轻拍混匀，置37℃避光显色30分钟。
7、显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，置酶标仪450nm波长处测定OD值（参考波长为630nm）。
结果判定：阴、阳性对照和被检样本的OD值减去空白对照OD值即为计算值。
2、若阴性对照OD均值小于按计算。
3、临界值（cut off 值）的设定：cutoff值= PCx×10%（若PCx>=按算）4、被检样本的OD值≥临界值应判为HIV抗体阳性反应，<临界值为阴性反应。
检测样本的OD值≥临界值判为HIV抗体阳性，应重新取样双孔复试，复试阳性者应按照“全国HIV检测管理规范”送“HIV确认实验室”进行确认实验。
(完整)艾滋病初筛实验室SOP文件
HIV抗体初筛实验室SOP文件适用部门：检验科目录第一部分工作制度.................................................................................................................... - 2 - 实验室工作制度.................................................................................................................. - 2 -HIV标本采集与接收登记制度.......................................................................................... - 2 - 艾滋病实验室保密制度...................................................................................................... - 3 - 艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度...................................................................... - 3 - 差错事故处理制度.............................................................................................................. - 4 - 报告单签发审核制度.......................................................................................................... - 4 - 设备管理制度...................................................................................................................... - 5 - 试剂管理制度...................................................................................................................... - 6 - 艾滋病筛查实验室安全防护制度...................................................................................... - 6 - 艾滋病病毒职业暴露预防处理方案.................................................................................. - 7 -第二部分标准操作规程............................................................................................................ - 9 -第二章样品采集与处理.................................................................................................... - 9 - 第二章标准操作程序...................................................................................................... - 10 -一、北京金豪............................................................................................................ - 10 -二、上海科华生物.................................................................................................... - 11 -三、英科新创............................................................................................................ - 12 -第三章结果报告与注意事项.......................................................................................... - 14 -第三部分设备SOP文件 ........................................................................................................ - 15 -一、多功能自动酶标仪RT-2100C .................................................................................. - 15 -二、KHB ST－36W洗板机............................................................................................. - 18 -三、电热恒温水箱............................................................................................................ - 20 -第四部分流程图...................................................................................................................... - 22 -一、HIV抗体筛查流程图................................................................................................ - 22 -二、暴露级别的评估........................................................................................................ - 23 -附件：血清加样表.................................................................................................................... - 24 -第一部分工作制度实验室工作制度1.室内应经常保持整洁，各种仪器设备要安装适当，器皿试剂摆放整齐，标志清晰，有良好的通风设备。
艾滋病初筛实验室标准操作规程之欧阳歌谷创编
HIV抗体初筛实验室SOP文件欧阳歌谷（2021.02.01）适用部门：检验科目录第一部分工作制度- 1 -实验室工作制度- 1 -HIV标本采集与接收登记制度- 1 -艾滋病实验室保密制度- 2 -艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度- 2 -差错事故处理制度- 3 -报告单签发审核制度- 3 -设备管理制度- 4 -试剂管理制度- 4 -艾滋病筛查实验室安全防护制度- 5 -艾滋病病毒职业暴露预防处理方案- 5 -第二部分标准操作规程- 8 -第二章样品采集与处理- 8 -第二章标准操作程序- 8 -一、北京金豪- 8 -二、上海科华生物- 9 -三、英科新创- 10 -第三章结果报告与注意事项- 12 -第三部分设备SOP文件- 13 -一、多功能自动酶标仪RT-2100C- 13 -二、KHB ST－36W洗板机- 16 -三、电热恒温水箱- 18 -第四部分流程图- 20 -一、HIV抗体筛查流程图- 20 -二、暴露级别的评估- 21 -附件：血清加样表- 22 -第一部分工作制度实验室工作制度1.室内应经常保持整洁，各种仪器设备要安装适当，器皿试剂摆放整齐，标志清晰，有良好的通风设备。
2.实验室工作人员工作时一律穿制服，保持衣帽整洁，试验过程中应专心致志、认真负责，坚守工作岗位，不得随意串岗、闲谈，保持实验室安静，下班离开实验室前要检查并关好水、电、门、窗等，注意实验室安全。
3.认真开展实验室质量控制工作，仪器设备应定期保养，有温度记录，检测标本的保存要求符合规范要求。
4.实验室不得放置与测试无关的物品，水、温、湿度、光照、防震、防尘、防噪声等，环境必须符合实验室的工作要求。
5.实验和楼道内必须配置足够的安全防火措施，并定期检查保养。
6.对不同属性、品种和含量水平的试样，应有足够的试验区域，予以分离检验，尤其是已知具有生物危害的试样必须分离检验。
防止损害工作人员健康和污染环境。
7.与检验无关人员不得进入实验室，外单位人员联系工作，一律在办公室接待。
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HＩV抗体初筛实验室SOP文件适用部门：检验科目录第一部分工作制度.............................................................................................................. - 1—实验室工作制度 (1)HIＶ标本采集与接收登记制度１－ﻩ—艾滋病实验室保密制度................................................................................................ — 2 －艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度２—ﻩ—差错事故处理制度........................................................................................................ － 3 —报告单签发审核制度................................................................................................... － 3 －设备管理制度................................................................................................................ - 4－试剂管理制度................................................................................................................ — 4- 艾滋病筛查实验室安全防护制度5-ﻩ—艾滋病病毒职业暴露预防处理方案5 －ﻩ—第二部分标准操作规程...................................................................................................... — 8 －第二章样品采集与处理........................................................................................... —８－第二章标准操作程序8 —ﻩ－一、北京金豪...................................................................................................... —8 —二、上海科华生物................................................................................................. — 9 —三、英科新创...................................................................................................... — 10-第三章结果报告与注意事项.................................................................................... - 1２—第三部分设备ＳOP文件1３—ﻩ－一、多功能自动酶标仪RＴ—２100C................................................................... －1３-二、KHB ST－36W洗板机1６-ﻩ—三、电热恒温水箱18 —ﻩ-第四部分流程图........................................................................................................... －２0-一、HIV抗体筛查流程图２０－ﻩ-二、暴露级别得评估.................................................................................................. — 21 －附件：血清加样表２2－ﻩ-第一部分工作制度实验室工作制度1.室内应经常保持整洁，各种仪器设备要安装适当，器皿试剂摆放整齐,标志清晰，有良好得通风设备。
2.实验室工作人员工作时一律穿制服,保持衣帽整洁，试验过程中应专心致志、认真负责，坚守工作岗位,不得随意串岗、闲谈，保持实验室安静，下班离开实验室前要检查并关好水、电、门、窗等，注意实验室安全.3.认真开展实验室质量控制工作，仪器设备应定期保养，有温度记录，检测标本得保存要求符合规范要求.4.实验室不得放置与测试无关得物品，水、温、湿度、光照、防震、防尘、防噪声等，环境必须符合实验室得工作要求。
5.实验与楼道内必须配置足够得安全防火措施,并定期检查保养。
6.对不同属性、品种与含量水平得试样,应有足够得试验区域，予以分离检验，尤其就是已知具有生物危害得试样必须分离检验。
防止损害工作人员健康与污染环境。
7.与检验无关人员不得进入实验室,外单位人员联系工作,一律在办公室接待。
8.实验结束后,应及时清理实验现场与用品，对染菌带毒得器具废弃物应严格进行消毒无菌处理。
9.实验室内禁止吸烟、用餐与进食。
HＩV标本采集与接收登记制度1、采样前与接收标本时应核对病人身份，严格执行查对制度。
2、采血时应戴好手套、帽子、口罩。
3、HIV标本采集应建立详细得记录本,记录内容包括:送检单位、病人姓名、门诊号、数量、种类(血清)、送样者、接收者或采集者。
4、采集后,应将ＨＩV样本单独分装，勿与其它项目共用。
艾滋病实验室保密制度为确保艾滋病实验室所有资料严格保密,应遵守以下制度1、与ＨIＶ/AIDS相关检测项目得所有资料均应严格保密,包括采样记录与检测记录得保管,报告单得发放与送确认实验室检测等。
2、工作人员不得向无关人员提供检验结果，要妥善保存各种实验记录。
3、对初筛疑似阳性感染者不能告诉受检者本人，更不能到处乱讲。
4、实验室得有关检验资料,档案、结果记录其她人不得翻录查阅，修改与销毁.5、实验室工作人员,不能在非正式场合对外提供任何结果、数据。
艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度１、检测可疑样品时，充分准备好废弃物消毒具及消毒药、液。
如:次氯酸钠含有效氯20０0—５000mg/L,75％乙醇与２％戊二醛。
2、实验室用得吸头及时打入消毒器皿中。
3、一次性手套,隔离服更换后,应丢弃在一次性垃圾袋内。
4、常用消毒方法4、1、物理消毒方法4。
1.１、高压蒸汽消毒，1２1°Ｃ,保持１5—20 mｉｎ；4、2、化学消毒方法4。
2．1、废弃物缸:5０00 ｍｇ/L次氯酸钠4．2．2、工作台面及仪器表面：75%乙醇4.2.3、溢出物：5000 ｍg/L次氯酸钠4．２．４、污染得台面与器具:20０0mg／L次氯酸钠5、实验室中发生可疑样品溢出时，应及时用７5％乙醇喷洒,然后用消毒剂浸泡得吸水物质覆盖10-15分钟，最后再用消毒剂清洗该地方,擦干。
６、全部实验工作结束后,应对实验台、仪器、设备（接触部位）地面进行彻底消毒处理.7、废弃物处理从ＨIV实验室出来得所有废弃物，包括不再需要得样品、包装盒与其她物品,均应视为感染性废弃物。
差错事故处理制度1.艾滋病检测工作人员必须要有高度得责任心与严肃得法制观念,严防差错事故得发生.2.由于责任心不强、不认真执行规章制度，不遵守操作规程或技术因素而引发检验错误,对病人未造成严重后果得，称为差错。
差错按程度不同，分为一般差错与严重差错。
一级差错记差错一次,二级差错扣款５０元，三级差错扣除当月效益工资.一级差错:ﻫ(1）违反操作规程，导致标本损坏，需重新采集标本或由于接收标本未认真查对，违反查对制度,影响检验者。
（２)工作环境不能做到5Ｓ管理、违反生物安全者。
(３)未按时记录结果、绘制质控图、当发现失控时隐瞒不报者。
二级差错:（1）未按时间先后顺序使用试剂，导致试剂过期或由于存放不当造成试剂变质者.(2)项目漏查、做错项目，且标本已处理，需再次采取标本检验者。
（3）因操作不当，导致设备故障,影响较大者。
三级差错:(１) 漏做、错做一般标本得检验目得,编错试管号码,标错标本联号、采错病人标本，写错检验结果并已发出报告者。
（2）粗心大意写错报告难以挽回者。
(3) 因责任心不强、管理不善导致阳性标本丢失者.报告单签发审核制度一、各岗位得工作由本岗位人员进行操作检验,然后填写检验报告单。
工作完成后,再对本岗位所有得检验报告进行核查一次,在您认为可以发出时,盖上检验者印章，填写好报告日期。
交给本实验室负责人或有资质得高年资检验人员核查签名;但在危急情况下或单独一人值班时（如夜班）除外.二、没有上岗证人员不得单独签发检验结果报告单。
三、专业责任主管技师对本专业得所有报告单进行审核，审核得基本内容有：1、临床医师所申请得检验项目就是否已全部检验，有无漏项;2、检验结果得填写就是否清楚、正确；3、检验报告单上所有内容就是否全部填写完整;4、有无非常异常得、难以解释得结果;5、有无书写错误；6、就是否有需要复查得结果当发现检验结果有凝议时可指令本岗位人员对检验项目进行复查。
确认报告无问题时盖章后，方可发出报告。
设备管理制度1．由科主任或科室主管负责监督与检查仪器设备得使用状况，定期校准仪器得准确度。
2．各科应对本科室仪器设备建立台账明细。
3．每月应向总库递交仪器设备使用状况表，并存档.4．贵重仪器应由专人负责管理。
5．仪器操作前必须培训、考核,仔细阅读仪器操作说明书，熟练掌握该仪器得使用方法及维护办法，考核合格后方可操作。
6．当班者在使用中应严格遵守操作规程，遇到问题应作及时处理，并详细记录。
问题严重者,应及时上报科主任或主管加以解决。
7．每次使用完毕,应检查仪器得电源、废液倾倒情况,并详细记录该次使用情况. 8．对有温度要求得仪器设备，如冰箱冷藏室、冷冻室及恒温培养箱、水浴箱等,均应建立登记本,每天监测温度。
试剂管理制度1.为了更好地管理检验科试剂,由主管对检验科试剂申购、品牌、质量、价格、使用及管理情况进行督查。
2.每周上报周计划,各组人员根据各岗情况,认真、详细填写计划表，务必注明详细得名称、规格、数量及品牌。