放线菌形态及结构的观察
放线菌形态及结构的观察
放线菌形态及结构的观察姓名：贾晓霖学号：201000140032班级：生科10.1同组人员：李江湲程子修洪钧烨摘要：配制高氏I号培养基用来培养青色链霉菌和弗式链霉菌，本实验运用插片法观察放线菌的形态，初步地了解放线菌的基本结构和形态。
更直观的了解，基内菌丝、气生菌丝以及气生菌丝分化而成的孢子丝以及孢子。
关键词：青色链霉菌（Streptomyces glaucus）、弗氏链霉菌（Streptomyces microflavus）、高氏I号培养基、插片法前言：放线菌（actinomycetes）是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
广泛存在于自然界中，土壤中最多，主要以孢子繁殖，至今发现的共有五六十属，它与人类的关系极为密切，根据1978年的统计，在当时已发现的5128种抗生素中，有3165种为各种放线菌所产生，链霉菌属又占放线菌中的首位（占放线菌产生的抗生素中的87.5％）；有的放线菌还可用于生产维生素、酶制剂等；少数会引起人类、动物、植物的疾病。
链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其孢子丝的形态多样，而且性状较稳定，是对它们进行分类、鉴定的重要指示。
因此学习如何培养和观察它们不仅对科学研究有很大的意义，对实际生活应用也有很大的帮助。
本实验采用合成培养基进行培养，采用插片法取菌观察，不仅可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的放线菌形态，除此之外还可以采用玻璃纸法、印片法进行观察。
链霉菌属（Streptomyces）共约1，000多种，它们具有发育良好的菌丝体，也是实验中选取它们观察的重要原因。
一、实验目的1.1学会正确的配置高氏I号培养基1.2运用插片法观察放线菌的形态，初步地了解放线菌的基本结构和形态二、实验材料1、菌种：青色链霉菌(Streptomyces glaucus)，弗氏链霉菌(S. glaucus).2、试剂：高式I号培养基200ml、二甲苯、香柏油3、仪器和其他用具：三角烧瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，分析天平，牛角匙，高压蒸气灭菌锅，pH 试纸，棉塞，牛皮纸，记号笔，载玻片，盖玻片（3包 10个/包），培养皿（1包 10个/包），移液管，接种环，镊子2把三、实验方法一、高氏I号培养基的制备1、称量和溶解。
放线菌的形态观察
实验四放线菌的形态观察一、目的要求1. 学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。
2. 了解放线菌的形态特征和繁殖方式。
二、基本原理放线菌是由纤细的有分枝的菌丝构成，菌丝体为单细胞原核微生物。
大多数放线菌的菌丝分化为营养菌丝和气生菌丝两部分。
营养菌丝深入培养基中生长，气生菌丝则生长在培养基的表面，并向空中伸展。
因此用普通方法制片，往往很难观察到放线菌的整体形态。
必须采用适当的培养方法，以便将自然生长的放线菌直接置于显微镜下观察。
通常采用的方法有玻璃纸培养法、插片法和印片法。
三、材料及器材1. 菌种：细黄链霉菌(5406放线菌)2. 溶液和试剂：吕氏美蓝染液3. 仪器及其他用具：盖玻片，载玻片，擦镜纸，接种环，显微镜，剪刀，镊子，吸管，玻璃涂布棒，玻璃纸等。
四、方法与步骤（一）插片法1. 取一淀粉琼脂培养基平板，用接种环将菌种在琼脂平板上划线接种，然后用无菌镊子将灭菌的盖玻片以大约45°角插人琼脂内(插在接种线上，插片数量可根据需要而定。
2. 倒置培养，28℃，3～5天。
3. 用镊子小心取出盖玻片，擦去背面培养物，然后将有菌的一面朝上放在载玻片上，直接镜检。
（二）玻璃纸法1. 以无菌操作用镊子将已灭菌的小块玻璃纸片铺在琼脂淀粉培养基表面，用无菌涂布棒将玻璃纸压平，使其紧贴在琼脂表面，不留气泡，每个平板可铺5～10块玻璃纸。
2. 用接种环挑取菌种斜面培养物在玻璃纸上划线接种。
3. 平板倒置，28℃，培养3～5天。
4. 镜检在载玻片上加一小滴水，用镊子小心取下玻璃纸片，菌面朝上放在玻片的水滴上，使玻璃纸平贴在玻片上，中间不要有气泡，直接镜检。
（三）印片法用一洁净盖玻片，平放在培养皿中放线菌的培养物上，轻轻按压一下，取出盖玻片，将印有放线菌的一面朝下，放置在加有一滴美蓝染液的载玻片上，观察孢子丝和孢子。
五、实验作业及实验报告（一）结果绘图说明你所观察到的放线菌的主要形态特征。
（二）思考题1. 试比较3种培养和观察放线菌方法的优缺点。
实验四放线菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别
实验四放线菌的形态观察和酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别一、实验目的：1.了解放线菌和酵母菌的形态特征。
2.学习区分细胞的死活状态。
二、实验原理：1.放线菌的形态特征：放线菌属于细菌的一种，具有很大的细胞大小差异，通常为革兰氏阳性菌。
放线菌的形态特征包括菌落形态、细胞形态、颜色、菌丝特征等。
放线菌的菌落形态多呈现出有规则的褶皱或丝状结构。
2.酵母菌的形态特征：酵母菌属于真菌的一种，单细胞有丝分裂生殖的真菌。
酵母菌的形态特征包括细胞形态、菌落形态、颜色等。
酵母菌的细胞呈球形或卵圆形，常以单细胞或成链形式存在。
3.死活细胞鉴别：通过酵母菌培养基中的亚甲基蓝染色来判断细胞的存活状态，活细胞吸收染料颜色比较浅，死细胞吸收染料颜色比较深。
三、实验材料与方法：1.材料：-放线菌菌种：已提前分离培养好的放线菌-放线菌培养基：含有葡萄糖、酵母提取物、氨基酸、无机盐等-培养皿、显微镜、镰刀、牛津杯、显微镜载玻片-无菌移液器、无菌吸管、火焰灭菌器-酵母菌培养基：含有葡萄糖、酵母提取物、氨基酸、无机盐等-亚甲基蓝染液：浓度为1%2.方法：a.取一小块放线菌菌落，用镰刀切下悬浮于牛津杯中的放线菌菌落。
b.用无菌吸管将放线菌菌液吸入无菌移液器中，将移液器染上菌液的一侧略吹气，使菌液沾附在显微镜载玻片上。
c.让菌液干燥后，用显微镜在高倍镜下观察放线菌的细胞形态和菌落特征。
d.取一小块酵母菌菌落，用镰刀切下悬浮于牛津杯中的酵母菌菌落。
e.用无菌吸管将酵母菌菌液吸入无菌移液器中，将移液器染上菌液的一侧略吹气，使菌液沾附在显微镜载玻片上。
f.将带有酵母菌菌液的显微镜载玻片倾斜，滴入一滴亚甲基蓝染液，静置5分钟。
g.用显微镜在高倍镜下观察染色后的酵母菌细胞，根据染色程度判断细胞的存活状态。
四、实验结果与分析：通过观察放线菌的细胞形态和菌落特征，可以发现放线菌的形态特征是不规则的菌落结构，内部有菌丝状结构。
放线菌的细胞形态多样，有圆形或椭圆形细胞。
放线菌的形态特征
放线菌的形态特征
放线菌（Actinobacteria）是一类革兰氏阳性微生物，其形态特征可以包括以下几点：
1. 细胞形状：放线菌细胞呈现为直线状、分枝状、丝状或弯曲状。
2. 色素：放线菌通常会产生一种或多种颜色的色素。
不同种类的放线菌可以产生不同颜色的色素，如黄色、红色、绿色等。
3. 枝节：放线菌细胞可以分枝成长，有些菌株的分枝呈单一直线形态，形成类似于放射状的分枝结构。
4. 孢子：放线菌通常会产生芽孢或分生孢子。
芽孢通常位于多枝分枝末端，形成棒状结构，而分生孢子则是通过细胞分裂产生的。
5. 表面特征：放线菌的细胞表面通常呈现粗糙不平的纹理，这是由于细胞壁上的复杂多糖和其它结构物质导致的。
需要注意的是，放线菌的形态特征在不同的物种之间会有
所差异，具体的形态特征可以根据不同菌株进行观察和描述。
放线菌酵母和霉菌形态的观察
放线菌酵母和霉菌形态的观察由于给出的题目是"放线菌、酵母和霉菌形态的观察"，我们将分别观察这三类微生物的形态特征。
在观察时，我们将使用显微镜和培养基。
首先，我们来观察放线菌的形态特征。
放线菌是一类细菌，属于革兰氏阳性菌。
它们可以在土壤、水域和空气中找到。
放线菌的形态较为特殊，通常呈现为长而细长的细丝状。
在观察时，我们可以直接在透明的玻璃片上加一两滴放线菌的培养基，并用显微镜观察。
放线菌的细丝状形状通常呈现为分支，并且长达数毫米。
这些细丝状的细胞聚集在一起，形成放线菌的菌落。
接下来，我们来观察酵母菌的形态特征。
酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于天然环境中，如土壤、水体和植物表面。
酵母菌的形态特征较为简单。
在观察酵母菌时，我们可以将一小滴酵母菌液滴在玻璃片上，并用显微镜观察。
酵母菌呈球状或卵圆状，直径通常在5-10微米之间。
酵母菌的表面有光滑的外观，并且通常排列成链，形成了菌落。
最后，我们观察霉菌的形态特征。
霉菌是一类多细胞真菌，包括许多不同种类的真菌。
观察霉菌时，可以将一小段霉菌菌丝插入玻璃片上并加一滴水，使其在显微镜下观察。
霉菌的菌丝通常是多细胞结构，由许多细胞组成。
霉菌的菌丝通常呈现为分支和交叉的形态，并且具有特定的菌丝色素，例如黑色霉菌的孢子呈现黑色。
霉菌的菌丝可以形成大型的菌丝网络，形成一个菌丝块。
总结起来，放线菌通常呈现为长而细长的细丝状，酵母菌呈球状或卵圆状，霉菌的菌丝通常呈分支和交叉的形态。
这些形态特征可以通过显微镜观察得到。
这些微生物的观察有助于我们更好地了解它们的生物学特性和生态角色，在微生物的研究和应用中起着重要的作用。
实验5-放线菌形态观察
实验六放线菌的形态观察；霉菌子实体、分生孢子及菌落形态观察Ⅰ放线菌的形态观察一、目的要求1、学习并掌握观察放线菌的操作方法。
2、巩固掌握放线菌的形态特征。
二、实验原理放线菌是单细胞原核微生物。
菌丝无隔、分枝、纤细，分为生长于培养基内或匍匐于培养基表面的、从培养基吸取营养物质的基内菌丝，以及伸出培养基表面的气生菌丝。
气生菌丝的上部分化出孢子丝，呈螺旋状、波纹状，或分枝状等，孢子丝的着生方式因种而。
放线菌多可产生色素，菌丝呈各种颜色，有的放线菌能产生水溶性色素分泌至培养基中使培养基变色。
孢子丝长出各种形态的孢子，孢子有不同的颜色。
放线菌的菌落在培养基上着生牢固，与基质结合紧密，难以用接种针挑起。
而且由于有大量孢子存在，因而表面呈干粉状，使得易于与其他类型的微生物相区别。
放线菌的形态特征是其菌种鉴定与分类的重要依据。
三、实验器材1、菌种未鉴定放线菌菌株；2、仪器显微镜；3、材料玻璃纸、载玻片、盖玻片，镊子、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯。
4、染料石炭酸复红染色液。
四、操作步骤1、观察自然生长状态的放线菌用镊子小心取出用插片法培养的放线菌培养皿中的一张盖玻片，将其背面附着的菌丝体擦净。
然后将长有菌的一面向上放在洁净的载玻片上，用低倍镜、高倍镜观察。
找出3类菌丝及其分生孢子，并绘图。
注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。
2、水封片观察取石炭酸复红染色液一滴滴于载玻片中央，从培养皿中取出插片法培养放线菌的盖玻片，将无菌或菌较少的一面以擦镜纸擦净，并将有菌面朝下，放在载玻片上，浸在染色液中，制成水封片，用高倍镜观察其单个分生孢子及其基内菌丝，并绘图。
五、注意事项1、培养放线菌中要注意，放线菌的生长速度较慢，培养期较长，在操作中应特别注意无菌操作，严防杂菌污染。
并控制培养时间。
2、在镜检观察时，要仔细观察放线菌的营养菌丝、气生菌丝和孢子丝等。
六、实验报告1、绘图绘出观察的放线菌基内菌丝、气生菌丝和孢子丝的形态。
放线菌的形态和结构特点
放线菌的形态和结构特点
从外部形态看与霉菌近似，但细胞内的微细结构明显具有原核生物的特征，从细胞壁成分看也和细菌相同。
广义的放线菌类是包含放线菌目（Actinomycetales）的全部细菌；狭义的是把具有不能形成明显菌丝的，而可用抗酸染色法染色的分枝杆菌（结核菌、麻风杆菌）除外。
放射菌类的菌丝可断裂，运动或不运动；有的产生球状或杆状细胞，形成分生孢子，有的常在菌丝顶部形成气生菌丝，并在该处形成许多分生孢子；还有的菌丝顶端膨大而形成孢子囊。
在其中形成孢子（包括运动的或不运动的），因此形态是多种多样的。
放线菌的构造和形态观察：形态构造、繁殖、菌落特征
一、放线菌的形态构造
１ 放线菌的概述
➢ 放线菌的应用： a.能产生大量的、种类繁多的抗生素，到目前为止，已分离得到的放线菌产生
的抗生素达4000种以上； b.生产维生素和酶； c.进行甾体转化、烃类发酵和污水处理；
一、放线菌的形态构造
一、放线菌的形态构造
2 形态构造
➢ 菌丝（根据形态和功能不同分为）：基内菌丝（营养菌丝）：产色素，吸收营养 气生菌丝：可分化出繁殖结构，即孢子丝 孢子丝：繁殖，直、波曲、螺旋，丛生、轮生
一、放线菌的形态构造
2 形态构造
➢ 放线菌孢子丝类型：直、波曲、螺旋，丛生、轮生
单轮生
螺旋状
项目二 放线菌的构造和形态观察
小单孢菌属（Micromonospora）：可产生多种 抗生素，如庆大霉素、利福霉素等
放线菌属（Actinomyces) ： 多为致病菌
一、放线菌的形态构造
2 形态构造 ➢ 大部分放线菌由分枝状的菌丝组成，菌丝大多无隔膜，属单细胞，G+。菌丝的 粗细与细菌中的杆菌宽度相近（1μm左右）。细胞壁含胞壁酸、二氨基庚二酸， 不含几丁质、纤维素。
微生物学基础
原核微生物的构造和形态观察
项目二 放线菌的构造和形态观察
一、放线菌的形态构造
１ 放线菌的概述 ➢ 介于细菌和真菌之间的单细胞G+原核生物，细胞构造和细胞壁的化学组成与细 菌相似；由分枝状的菌丝组成，以外生孢子的形式繁殖,这些特征又与霉菌相似； 放线菌菌落中的菌丝常从一个中心向四周辐射状生长,因此叫放线菌。
4 横隔孢子
➢ 基内菌丝或气生菌丝横隔分裂形成，孢子常为球杆状，体积大小相似，又称节孢 子或粉孢子。
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放线菌形态及结构的观察
姓名：贾晓霖
学号：201000140032
班级：生科10.1
同组人员：李江湲程子修洪钧烨
摘要：配制高氏I号培养基用来培养青色链霉菌和弗式链霉菌，本实验运用插片法观察放线菌的形态，初步地了解放线菌的基本结构和形态。
更直观的了解，基内菌丝、气生菌丝以及气生菌丝分化而成的孢子丝以及孢子。
关键词：青色链霉菌（Streptomyces glaucus）、弗氏链霉菌（Streptomyces microflavus）、高氏I号培养基、插片法
前言：放线菌（actinomycetes）是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
广泛存在于自然界中，土壤中最多，主要以孢子繁殖，至今发现的共有五六十属，它与人类的关系极为密切，根据1978年的统计，在当时已发现的5128种抗生素中，有3165种为各种放线菌所产生，链霉菌属又占放线菌中的首位（占放线菌产生的抗生素中的87.5％）；有的放线菌还可用于生产维生素、酶制剂等；少数会引起人类、动物、植物的疾病。
链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其孢子丝的形态多样，而且性状较稳定，是对它们进行分类、鉴定的重要指示。
因此学习如何培养和观察它们不仅对科学研究有很大的意义，对实际生活应用也有很大的帮助。
本实验采用合成培养基进行培养，采用插片法取菌观察，不仅可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的放线菌形态，除此之外还可以采用玻璃纸法、印片法进行观察。
链霉菌属（Streptomyces）共约1，000多种，它们具有发育良好的菌丝体，也是实验中选取它们观察的重要原因。
一、实验目的
1.1学会正确的配置高氏I号培养基
1.2运用插片法观察放线菌的形态，初步地了解放线菌的基本结构和形态
二、实验材料
1、菌种：青色链霉菌(Streptomyces glaucus)，弗氏链霉菌(S. glaucus).
2、试剂：高式I号培养基200ml、二甲苯、香柏油
3、仪器和其他用具：三角烧瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，分析天平，牛角匙，高压蒸气灭菌锅，pH 试纸，棉塞，牛皮纸，记号笔，载玻片，盖玻片（3包 10个/包），培养皿（1包 10个/包），移液管，接种环，镊子2把
三、实验方法
一、高氏I号培养基的制备
1、称量和溶解。
2、按配方先称取可溶性溶粉、放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉尽量溶解，再加入沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶解。
3、称取其他各成分依次溶解。
由于条件限制，对于微量成分FeSO4·7H2O，直接用分析天平称量，加入即可。
4、待所有药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积，进行pH 调节到7.2～7.4。
5、制平板培养基。
6、材料灭菌。
将所配溶液装在三角烧瓶中并加棉塞，棉塞外包一层牛皮纸，并用麻绳捆好，用记号笔标记组号。
取十个培养基，用牛皮纸包好，用记号笔标记大小面。
同理盖玻片也用牛皮纸包好，再在盖玻片上加盖一层牛皮纸纸，用牛皮纸包好后，用记号笔标记，镊子也包好一起灭菌。
将上述物品放入密封的加压灭菌锅中进行高压蒸汽灭菌121℃、20分钟。
7、在无菌操作箱中的酒精灯旁，将三角烧杯中高氏I号培养基液分装到6个培养皿中，平放凝固。
二、插片法进行链霉菌的观察
1、接种无菌操作分别由青色链霉菌和弗氏链霉菌试管培养集中挑去菌种在高氏I号培养基平板上密集划线接种，并贴上标签。
2、插片无菌操作用镊子将灭菌的盖玻片以约45°角插入平板琼脂并与接种线垂直，每个培养基在不同的位置插入三个盖玻片。
3、培养将平板倒置，于28℃培养。
（如果担心玻片插得不够牢靠，也可以正面培养）
4、镜检用镊子小心取出盖玻片，用纸擦干净一面，有菌面朝上放在载玻片上，通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜镜检观察，并记录观察现象。
3.结果分析
一、结果
1、显微镜下链霉菌的形态特征图
弗式链霉菌（10×40倍）
青色链霉菌（10×40倍）
手绘区域
弗氏链霉菌青色链霉菌
2、放线菌的菌落特征
1、青色链霉菌：孢子丝螺旋状，孢子卵圆形、长圆形，表面光滑。
2、弗氏链霉菌：孢子丝直，孢子卵圆形、长圆形、柱形，表面光滑。
二、实验结果分析
1、由图-1和图-2，放线菌呈分枝丝状，分支较多交错在一起，由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三部分组成，基内菌丝为透明，有较多的分枝；气生菌丝较暗。
两种菌丝在不同的焦平面上，可以调节细准焦螺旋分别进行观察。
2、由菌落特征，放线菌的细胞有基内菌丝和气生菌丝的分化，气生菌丝到成熟时又会分化成孢子丝并产生成串的干粉状孢子，这些气生菌丝或孢子丝伸展在空气中，菌丝间一般都不存在毛细管水。
这就使放线菌获得其特有的与细菌不同的菌落特征：干燥、不透明，表面呈紧密的丝绒状，菌落和培养基的连接紧密，难以挑取菌落。
3、从恒温箱拿出培养的链霉菌时，有一个平板上几乎什么也没有长，分析原因可能是接种时，接种环还未冷却的时候，就去取种，导致接种的菌因为温度过高而死亡，所以才导致没有菌落。
四、实验总结
1、接种时划线要密，插片时要有一定的角度且与划线相垂直，这样较容易是菌丝长在盖玻片上；实验
操作过程中，尤其是镜检时不要碰到载玻片上的菌丝，否则会污染镜头并且破坏了放线菌的自然生长状态。
2、镜检时，宜用略暗光线；先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观察。
3、镜检时，菌面应该朝上，不然，菌体会被压扁，不好观察。
4、实验过程尽量不要完全打开培养皿，防止吸入链霉菌的孢子。
5、链霉菌的孢子特征：孢子的形状多样，有球状、椭圆状、杆状、圆柱状、瓜子状、梭状和半月状等。
孢子的颜色十分丰富，且与其表面的纹饰有关。
孢子表面的纹饰在电子显微镜下清晰可见，除表面光滑者外，还有褶皱状、疣状、刺状、发状和鳞片状。
刺又有粗细、大小、长短和疏密之分。
目前发现，凡直或波曲的孢子丝，都产生表面光滑的孢子（尚未发现带刺或毛发状的），若孢子丝为螺旋状的，则其孢子表面会因种而异，有光滑、刺状或毛发状的。
五、思考题
1、镜检时如何区分放线菌基内菌丝、气生菌丝及孢子丝？
答：基内菌丝比较亮，气生菌丝比较黑，孢子丝为气生菌丝成熟后形成的产生孢子的结构。
2、青色链霉菌和弗式链霉菌的孢子丝有何区别？
答：青色链霉菌的孢子丝是螺旋形，弗式链霉菌是直的。
6.参考文献
【1】沈萍、陈向东《微生物学实验》高等教育出版社第四版P18～20 P70～73 P241【2】沈萍、陈向东《微生物学》高等教育出版社第二版 P372～374。