紫外分光光度法测定胆南星中总胆酸的含量_万军

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第 16 卷第 14 期 2010 年 10 月
中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 14 Oct. ，2010
胆 南 星，由 成 都 中 药 饮 片 有 限 公 司 提 供，批 号 090802，091001，091002，091101，091102，091103； 鹅 去氧胆酸对照 品 购 自 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所，供 含量 测 定 用，批 号 110806-200704； 其 余 试 剂 均 为 分 析纯。 2 方法与结果 2. 1 对照品溶液的制备 精密称取鹅去氧胆酸对 照品 10. 0 mg，置 10 mL 量瓶 中，加 冰 醋 酸 制 成 1 g· L － 1 鹅去氧胆酸溶液，即得对照品溶液。 2. 2 供试 品 溶 液 的 制 备［2-3］ 取 胆 南 星 样 品 粉 末 1. 0 g，精密称定，置锥形瓶中，加乙酸乙酯 80 mL，水 浴回流 2. 5 h，于提取结束时加入 0. 6 g 活性炭，继续 回流 0. 5 h，滤 过，滤 液 水 浴 蒸 干，用 60% 的 冰 醋 酸 溶解，并转移至 25 mL 量瓶中，定容，摇匀（ 依情况进 行过滤） ，精密吸取此溶液 1. 0 mL，置 20 mL 带刻度 试管中，加入 50% 硫酸溶液 14 mL，混匀，置 75 ℃ 水 浴中保温 10 min，迅速移至冰浴中放置 2 min，即得。 2. 3 检测波长的确定 按供试品溶液的制备方法， 以 60% 冰醋酸溶液 作 为 空 白。将 对 照 品 溶 液、供 试 品溶液在 200 ～ 400 nm 波长进行光谱扫描。结果供 试液和对 照 溶 液 在 377 nm 处 有 最 大 吸 收，故 选 择 377 nm 波长作为测定波长。见图 1。
［关键词］ 胆南星；鹅去氧胆酸；总胆酸；含量测定；紫外分光光度法 ［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903（2010）14-0071-03
Determination on Contents of Total Bile Acid in Bile Arisaema by Ultraviolet Gpectrophometry
第 16 卷第 14 期 2010 年 10 月
中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 14 Oct. ，2010
紫外分光光度法测定胆南星中总胆酸的含量
万 军 ，翟 羽 佳 ，闫 翠 起 ，贾 程 程
［Key words］ Bile Arisaema； chenodeoxycholic acid； total bile acid； determination； ultraviolet spectrophometry
胆 南 星 系 由 天 南 星 科 植 物 天 南 星 Arisaema erubescens（ wall. ） Schott. ，异 叶 天 南 星 A. heterophyllum Bl. 或 东 北 天 南 星 A. amurense Maxim. 的 干 燥 块 根细粉与 牛、羊 或 猪 胆 汁 炮 制 加 工 而 成，胆 汁 制 南 星，既可减 低 生 南 星 毒 副 作 用，又 使 其 药 性 由 温 转 凉，变温化寒痰 药 为 清 化 热 痰、息 风 定 惊 之 品，用 于
图 1 鹅去氧胆碱、胆南星样品 UV 光谱图 A. 对照品；B. 样品
2. 4 标 准 曲 线 的 制 备 分 别 精 密 吸 取 0. 0，1. 0， 1. 5，2. 0，2. 5，3. 0，3. 5 mL 的 鹅 去 氧 胆 酸 对 照 品 溶 液（ C = 0. 123 2 g·L － 1 ） 置 20 mL 带刻度的试管中， 以 60% 冰 醋 酸 溶 液 作 为 空 白，依 法 测 定 吸 光 度，以
（ 西南交通大目的：建立中药胆南星中总胆酸含量测定的方法。方法：以鹅去氧胆 酸 为 对 照 品，直 接 采 用 加 入 50% 硫 酸 溶 液， 75 ℃ 水浴加热反应显色，于紫外分光光度计（377 ± 2） nm 波 长 处 测 定。 结 果 鹅 去 氧 胆 酸 在0. 000 0 ～ 0. 431 2 g·L － 1 呈 良 好 线性关系（ r = 0. 999 1） ，平均回收率为 98. 79% （ n = 5） ，RSD 为 3. 02% 。结论 本 方 法 准 确，简 便，重 复 性 好，可 用 于 中 药 胆 南 星中总胆酸含量测定。
TU-1901 双光束紫 外-可 见 分 光 光 度 计 （ 北 京 普 析通用仪器有限责任公司） ；Sartorius BS 224 S（ 德国 赛多利 斯 公 司 ） 精 密 电 子 天 平； SK8200LH 超 声 仪 （ 上海科导 超 声 仪 器 有 限 公 司 ） ； DK-98-1 型 电 热 恒 温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）。
精密称取 胆 南 星 样 品 粉 末，5 份，测 定，平 均 值 为 78. 49 mg · g － 1 ，RSD 0. 67% ，结 果 表 明 该 方 法 重 复性良好。
取同一份样品，依法操作，在 0. 0，0. 5，1. 0，1. 5， 3. 5，6. 0 h 时 间 在 377 nm 处 测 定 吸 收 度，RSD 2. 89% ，表明供试品溶液在 6h 内测定基本稳定。 2. 6 加 样 回 收 率 试 验 取 胆 南 星 样 品 粉 末，5 份， 精 密 称 定 ，分 别 加 入 鹅 取 氧 胆 酸 对 照 品 适 量 ，依 法 操 作，在 377 nm 处 测 定 其 吸 收 度，结 果 平 均 值 为 98. 79% ，RSD 3. 02% 。 2. 7 样品测定 按照 以上方法 测 定 6 批胆 南 星样 品 （ 090802， 091001， 091002， 091101， 091102， 091103） ，结 果 总 胆 酸 含 量 以 鹅 去 氧 胆 酸 计 分 别 为 78. 5，104. 6，91. 7，85. 2，88. 3，90. 0 mg·g － 1 ，平均值 为 89. 7 g·g － 1 （ n = 6） 。 3 讨论 3. 1 指标成分的选择 目前，对胆南星中的胆酸质 量控制研究较 少，主 要 集 中 在 薄 层 色 谱 鉴 别 及 胆 汁 化学成分的分析［4-6］，尚未见胆南星中 总 胆 酸 含 量 的 仪 器 分 析 报 道 。 根 据 张 能 荣 研 究 的 牛 、羊 、猪 胆 汁 的 15 种成分的结果，只 有 鹅 去 氧 胆 酸 是 3 种 胆 汁 共 有 成分［7］，因此，采用 鹅 去 氧 胆 酸 作 为 指 标 成 分，对 胆 南星中总胆酸的含量进行测定。 3. 2 供试品溶液制备方法的考察 3. 2. 1 提取溶剂考 察［8］ 以 60% 冰 醋 酸 溶 液 为 空 白，用 UV 法 在 200 ～ 400 nm 波 长 间 扫 描 各 样 品 的 最大吸收波长，并 在 （377 ± 2 ） nm 处 进 行 含 量 测 定， 结果氯仿 + 乙 醇 （ 2 ∶ 1 ） 作 为 提 取 溶 剂，胆 酸 的 浓 度 最高 （ 0. 548 g · L － 1 ） ，但 UV 扫 描 得 到 其 最 大 吸 收 波长为 292 nm，与对照品的最大吸收波长 （377 ± 2 ） nm 不符，乙 酸 乙 酯 与 对 照 品 的 最 大 吸 收 波 长 亦 不 符，故不予采用；氯仿作为提取溶剂，提取液进行 UV 扫描得到其最大吸收波长为 377 nm，但由于其稳定
治 疗 痰 热 咳 嗽 、咯 痰 黄 稠 、中 风 痰 迷 ，癫 狂 惊 痫 等 症 。 《中国药典》2005 年 版 一 部 主 要 针 对 原 药 材 进 行 显 微和理化鉴别［1］，而 未 对 成 品 中 的 胆 汁 质 量 进 行 控 制。笔者采用鹅去氧胆酸作为胆南星中总胆酸含量 的 评 价 指 标 ，建 立 专 属 性 较 强 的 含 量 测 定 方 法 ，拟 有 效 控 制 胆 南 星 的 内 在 质 量 ，使 标 准 更 加 完 善 。 1 仪器与试药
WAN Jun，ZHAI Yu-jia，YAN Cui-qi，JIA Cheng-cheng （ Life Science ＆ Engineering College of South-west Jiao-tong University，Chengdu 610031，China）
［Abstract］ Objective：To establish the methods of determination on the contents of total bile acid in Bile Arisaema by ultraviolet spectrophometry. Method：To add 50% sulfuric acid to the sample and react in water bath at 75 ℃ . The contents of total bile acid were determined by ultraviolet spectrophometry on （ 377 ± 2 ） nm，using chenodeoxycholic acid （ CDCA ） as the chemical reference substance. Result： The linear response range was 0. 000 0 ～ 0. 431 2 g·L － 1 ，r = 0. 999 1. The average recovery was 98. 79% （ n = 5 ） ，RSD 3. 02% . Conclusion： The method was accurate，simple and reproducible which could be used for the determination of total bile acid in Bile Arisaema.