怀牛膝总皂苷抗大鼠急性心肌缺血作用的实验研究

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试验十一抗心肌缺血药物作用研究

注意事项
• 动物个体较小，固定大鼠时尤其两前肢不宜过紧，以免影响呼吸；
• 心电图机的针型电极应向心插入皮下，不可插入肌肉内，以免肌电干扰，另外动物周围不要放置金属制品，以免干扰。
附：大鼠急性心肌缺血模型
（1）将动物注射20%乌拉坦（0.5～0.6ml/100g）麻醉后固定在手术台上
（2）用笔型静脉置留针进行气管插管(或切开气管插管)，
（一）试验材料试验药品： • 乌拉坦（Urethane），生理盐水配制成20%溶液；
0.5%异丙肾上腺素（Isoprenaline）；生理盐水， 5%葡萄糖注射液。 • 阳性药：0.2%维拉帕米。 • 受试物：丹参酮ⅡA磺酸钠，配制成1%、0.2%溶液；
丹参注射液，50%葡萄糖配制成含生药 1.5g/ml、0.3g%溶液。试验仪器： • 生物机能试验系统、紫外、动物秤、大鼠手术台、眼科镊、1ml、5ml注射器、4#、6#针头。
（二）试验方法
• 取大鼠，称体重； • 腹腔注射乌拉坦1～2g/kg（20%乌拉坦，5～
6ml/kg）麻醉； • 仰卧位固定于手术台上,针型电极插入大鼠皮下，
打开生物机能试验系统，待心电图稳定后开始试验，先记录一段正常的大鼠心电图； • 分组及给药方案如下：
上、下半班：
• 第1组、第5组：静脉注射生理盐水1ml/kg； • 第2组、第6组：静脉注射0.2%维拉帕米1ml/kg； • 第3组：静脉注射0.2%丹参酮ⅡA磺酸钠； • 第7组：静脉注射0.3g/ml丹参注射液1ml/kg， • 第4组：静脉注射1%丹参酮ⅡA磺酸钠； • 第8组：静脉注射1.5g/ml丹参注射液1ml/kg，
（1）心电图指标观察：皮下放置心电图肢体导联电极，测标准Ⅱ导心电图观察药物对S-T段、T波幅度的影响。

怀牛膝多糖抗凝血作用实验研究

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表 * 怀牛膝多糖对小鼠凝血时间 ) 的影响 4 5 组别生理盐水法华令怀牛膝多糖怀牛膝多糖
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验 . 探索牛膝的 5 活血 6 机制 0 ! 材料与方法由中科院上海有机化学研究所提供 . 批号 ! " ! 药物 ! . 12 3 法华令片剂上海黄河制药有限公司生产批号 + 9 # & * : ) : $ " ’ . . + 9 # % # * 0 2 动物 ! 昆明种小鼠 . ! " # * 9 7" "Z . 8 9 兼用 0 均由上海中医药大学实验动物中心提供 . 合格证号 # " $ " , $ , 0 * "i明暗交替 ! " $ 实验仪器及试剂 ! $ 4 d ^ _ % g c 5 5 血常规测定仪 . = ( + d c 血凝测定仪液液液由 : # ’ 6 6 > X + c X Y % X )g c4 ? 3 5 5 5 73 5 5 3 ( h X * X h 公司提供 0 大鼠 3 )d ’ % ( ’ X ’ 5. 5 5. 73 5 5. 8 3 5 等各项指标由上 ]g 海中医药大学附属曙光医院检验部协作测定 0 组间 u 检验 0 ! " % 统计方法 ! @ ? @ @软件处理计数资料 . # 方法与结果测定 ! 小鼠 , 随机分成 ,组 . 按 " # " ! 小鼠凝血时间 ) 9只 . : 4 5收稿日期 ! " # # # $ # % $ " & ’ 修订日期 ! " # # # $ # ( $ " " 作者简介 ! 毛平 ) 女 ) 汉族江苏镇江人 . 现任上海中医 * + , ( $ . . 药大学中药学院副研究员 . 硕士学位 . 主要从事方剂教学及实验研究 / 饲养条件 ! 室温 " : 7" 9 : 照度 < " # # = a[ 相对湿度 ! : : ;7 ( : ;

三七总皂苷对大鼠缺血心肌血管新生及相关生长因子的影响

ｄｅｎｓｉｔｙ（ＭＶＤ），ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉｌａｇｒｏｔｈｗｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ），ｎｄａｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｒａｇｙｖｌａｕｅｏｆｂａｓｉｃｉｆｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ（ｂＦ —
陈社带，邹燕，赵伟国，刘锐锋，李运景
（中山市人民医院药学部，广东中山５２８４０３；２．广东药学院附属第二医院检验科，广东广州５１０３００）
摘要：目的
观察三七总皂苷促对大鼠缺血心肌血管新生及相关生长因子表达的影响。方法结扎左冠状动脉制备急模型组和三七总
ＣＨＥＮＳｈｅｄａｉ，ＺＯＵＹａｈ，ＺＨＡＯＷｅｉｇｕｏ，ＬＩＵＲｕｉｆｅｎｇ，ＬＩＹｕｎｊｉｎｇ
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｐｅｏｐｌｅ ’ ＳＨｏｓｐｉｔａｌｉｎＺｈｏｎｇｓｈａｎ，Ｚｈｏｎｇｓｈａｎ５２８４０３Ｃｈｉｎａ；２．ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｉｆｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔｌａｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０３００Ｃｈｉｎａ）

三七总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护研究

１３０Ｃｉ；３００，ｈｎ２ａ
ｎｍｏｎｃｓｃａｄｔｒｅｒｉｆｔｒ（Ｎ）ｗｒａｕｅ．ＲｓｌＳｒｍｌｅｆＡａｄＴＦｉｏｅｒｕｓｅｉｅｔａａｉｆｌｕｏｓａｏＴＦｅｅｍｅｒｄｅｕｔｅｕｖｌｏＮｔｒｏｐｒｈｈｒｈｎｔｔｎａｅｓｓｅｓＭＤｎｎｈｇｗｅｇｈｓ
ｈｇｅａｈｔｏｃｅａｒｐｒｓｏｏｐＣｏｃｕｉｎＳｎｈｏａａｏｉｓＣｅｉｖａｇｆｍｙａｄａｓｈｍｉｅｅｆｓｏｉｈｒｔｎｔａｆｉｈｍｉｅｆｉｎｇｕ．ｈｓｅｕｒｎｌｓｏａｃｔｔｓｐｎｎａｒｌｅｄｍａｅｏｏｒｉｉｃｅａｒｐｒｉｎｉｌｎｅｃｌｕｉｉａ，ａｄｗｔｈｃａｉｍｓｏｅｕｉｇｏｉｉａｉｎｄａｅａｄｌｗｒｇｒｌａｅｏｆｍａｏｙｆｃｏｓｎｂｇｒｔｎｉｔｅｍｅｈｎｓｆｒｄｃｎｘｄｚｔａｇｏｅｉｅｅｓｆｉｌｈｏｍｎｎｎａｍｔｒａｔｒ．
Ｍｅｈｄ０ＷｉｔｒｂｇｒｔｗｒｉｉｅｎｏｆｓＵｇｃｐｒｔｎｇｏｐ，ｍｙａｄａｓｈｍｉｒｕｔｏ４ｓｉａｓｅｅｄｖｄｄｉｔａｅＳｒｉａｏｅａｉｒｕｅｌｌｏｃｏｒｉｉｃｅａｇｏｐ，ｉｃｅａｒｐｆｕｉｎｇｏｐａｄｌｓｈｍｉｅｅｓｏｒｕｎ

不同辛温通阳药对急性心肌缺血大鼠心电图的影响

不同辛温通阳药对急性心肌缺血大鼠心电图的影响目的观察不同辛温通阳药（葱白提取物、薤白提取物、洋葱提取物、大蒜提取物）抗急性心肌缺血的作用。

方法取SD大鼠70只随机分为正常对照组，模型组、葱白提取物组、薤白提取物组、洋葱提取物组、大蒜提取物组，硝酸甘油组。

采取在体结扎冠状动脉前降支，复制急性心肌缺血模型，观察4种不同辛温通阳代表药对急性心肌缺血模型大鼠心电图的影响。

结果各用药组与模型组比较，ST段上移幅度差异有显著性意义（P＜0.05或P＜0.01）；不同辛温通阳中药组间比较，差异均有显著性意义（P＜0.05或P＜0.01）。

标签：心肌缺血/中药疗法；葱白提取物/药理学；薤白提取物/药理学；洋葱提取物/药理学；大蒜提取物/药理学；心电图，动物；大鼠1 资料与方法1.1一般资料1.1.1实验动物健康纯种SD雄性大白鼠，体重为200～230g，3～4个月龄180只，动物合格证编号：HNASLKJ20100977；饲养在带不锈钢盖底的塑料笼内，每笼5只，自由饮水，室内温度为25℃，湿度为60%，饮水为去离子水，饲料经过辐照特殊处理，水和饲料均可由大鼠自行随意摄取。

1.1.2实验试剂均由武汉宇阳锋锐生物科技有限公司提供。

1.1.3实验主要仪器HX200动物人工呼吸机（成都泰盟科技有限公司），ECG-6951D型心电图机（上海光电子仪器有限公司）。

1.1.4实验药物葱白提取物配置成浓度为6%的混悬液备用（批号：20090325），由武汉市中西医结合医院制剂中心提供；薤白提取物配置成浓度为2.6%的混悬液备用（批号：091101）；洋葱提取物配置成浓度为3.8%的混悬液备用（批号：091101）；大蒜提取物配置成浓度为1.6%的混悬液备用（批号：091101）；以上提取物均由什邡市巨邦植物原料有限公司生产；硝酸甘油配成0.8%的混悬液备用，（生产批号：905028KL），由齐鲁制药有限公司生产。

1.2方法1.2.1实验动物及分组预选标准Ⅱ导联心电图正常的健康雄性SD大鼠70只，体重为（200±20）g，随机分为正常对照组、空白模型组、葱白提取物组、薤白提取物组、洋葱提取物组、大蒜提取物组、硝酸甘油组共7组，每组10只。

怀牛膝总皂苷对ox

怀牛膝总皂苷对ox LDL诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖与迁移的影响[ 10-08-17 11:08:00 ] 编辑：studa20作者：邹小明周大兴丁志山蒋福升施宏余佳文【摘要】［目的］探讨怀牛膝总皂苷（ABS）大鼠血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响，阐明其抗动脉粥样硬化的机制。

［方法］采用ox LDL诱导大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的方法，采用MTT法测定VSMC增殖，采用伤口愈合法测定VSMC迁移能力，观察ABS对ox LDL诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响。

［结果］ox LDL浓度为30mg/L促进VSMC增殖最强；ABS（50、100、150mg/L）显著抑制ox LDL诱导的VSMC增殖，作用呈浓度依赖性；ABS（20mg/L）显著抑制ox LDL诱导的VSMC迁移。

［结论］ABS能抑制oxLDL诱导的VSMC增殖与迁移，说明其具有抑制血管内膜增厚和斑块形成的作用。

【关键词】怀牛膝总皂苷；ox LDL；血管平滑肌细胞；增殖；迁移Abstract：［Objective］To investigate the influence of Achyranthes bidentata saponins（ABS）on the proliferation and migration of rats aorta vascular smooth muscle cells，and to elucidate its mechanism of anti atherosclerosis.［Methods］The oxidized low density lipoprotein （ox LDL） was used to induce the proliferation of rats aorta vascular smooth muscle cells（VSMC） and Methyl thiazolyl tetrazolium（MTT） assay was used to determine the growth of them，wound healing assay was used to determine the influence of ABS on the ability to migrate of VSMC.All methods were used to observe the effect of ABS on the proliferation and migration of VSMC induced by ox LDL.［Result］The proliferation of VSMC was at the highest level when the concentration of ox LDL was 30mg/L，and this effect of ox LDL could be significantly inhibited by ABS （50,100,150mg/L） in a concentration dependent manner;ABS could also inhibit the migration of VSMC induced by ox LDL at 30mg/L.［Conclusion］ABS could inhibit the proliferation and migration of VSMC induced by ox LDL.From these results，it appears that ABS can reduce the thickness of vascular intima and inhibit the development of vascular plaque.Key words：Achyranthes bidentata saponins; ox LDL;vascular smooth muscle cells; proliferation; migration动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）的发病机理有许多学说，但以氧化损伤学说研究最多［1］。

不同剂量怀牛膝对重度颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响的开题报告

不同剂量怀牛膝对重度颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡
的影响的开题报告
一、研究背景
重度颅脑损伤（severe traumatic brain injury, TBI）是一种常见的脑损伤，其严重程度较高，可能引起脑细胞的凋亡和神经损伤，导致严重的神经功能损害和认知障碍等。

因此，研究如何有效的减少神经细胞的凋亡是非常必要并及其重要的。

目前，怀牛膝（Radix Dipsaci）在临床上应用广泛，并被证明具有多种生物活性，例如抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降血糖等功效。

同时怀牛膝还可缓解神经系统疾病的症状，并促进神经细胞的再生。

因此，本研究将研究不同剂量的怀牛膝在重度颅脑损伤的大鼠模型中对神经细胞凋亡的影响。

二、研究目的
本研究的主要目的是探究不同剂量的怀牛膝在重度颅脑损伤大鼠模型中对神经细胞凋亡的影响，为临床治疗提供参考。

三、研究方法
1.建立重度颅脑损伤大鼠模型。

2.药物干预：将大鼠分为5组，分别给予生理盐水（对照组）、怀牛膝低剂量组、怀牛膝中剂量组、怀牛膝高剂量组、常规治疗组。

3.采集大鼠脑组织，病理学检测脑组织的形态学变化。

4.进行神经细胞凋亡的检测，如使用细胞凋亡检测试剂盒检测神经细胞凋亡的水平。

5.统计所有数据并分析结果。

四、研究意义
本研究将探究怀牛膝对重度颅脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响，为临床治疗提供参考，可能对于探究怀牛膝在治疗神经系统疾病方面的应用提供基础实验数据。

怀牛膝总皂苷对大鼠急性心肌缺血心肌肌钙蛋白T与血管内皮功能的影响

怀牛膝总皂苷对大鼠急性心肌缺血心肌肌钙蛋白T与血管内皮功能的影响周燕;余佳文;黄晓明;周大兴【期刊名称】《江西中医学院学报》【年(卷),期】2010(022)005【摘要】目的:研究怀牛膝总皂苷(ABS)对垂体后叶素诱发(Pit)的大鼠急性心肌缺血心肌肌钙蛋白T(cTnT)与血管内皮功能的影响.方法:72只大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、复方丹参滴丸组以及ABS高、中、低剂量组,采用尾静脉注射Pit建立大鼠急性心肌缺血模型,比色法检测血清中一氧化氮(NO)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测cTnT、内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、6-酮前列腺素(6-Keto-PGF1α)的含量.结果:ABS能够明显降低血清cTnT含量,显著升高NO、6-Keto-PGF1α水平,降低ET、TXB2含量.结论:ABS能调节血管内皮物质的释放,保护血管内皮功能.【总页数】3页(P67-69)【作者】周燕;余佳文;黄晓明;周大兴【作者单位】浙江中医药大学,杭州,310053;浙江中医药大学,杭州,310053;浙江中医药大学,杭州,310053;浙江中医药大学,杭州,310053【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.蒺藜总皂苷对急性心肌缺血大鼠血管内皮功能影响的研究 [J], 郭艳;殷惠军;王显刚;周大勇;史大卓2.蒺藜总皂苷对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响 [J], 王显刚;殷惠军;史大卓3.三七总皂苷对糖尿病大鼠血管内皮功能的影响 [J], 曾满红;黄清松;陈凌枫4.怀牛膝总皂苷对ox-LDL诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖与迁移的影响 [J], 邹小明;周大兴;丁志山;蒋福升;施宏;余佳文5.怀牛膝总皂苷抗大鼠急性心肌缺血作用的实验研究 [J], 余佳文;周大兴因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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怀牛膝总皂苷抗大鼠急性心肌缺血作用
的实验研究
（作者：__________ 单位： ___________ 邮编： ___________ ）
【摘要】研究怀牛膝总皂苷（ABS ）对垂体后叶素诱发的大鼠急性心肌缺血的影响。

［方法］72只大鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、复方丹参滴丸组以及ABS高、中、低剂量组，采用尾静脉注射垂体后叶素（Pit）建立大鼠急性心肌缺血模型，观察各给药组注射Pit后心电图的变化，并检测血清中超氧化物歧化酶
（SOD）活力，丙二醛（MDA ）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH ）含量。

［结果］ABS能够明显影响急性心肌缺血的心电图变化，抑制CK、LDH、MDA的升高及SOD活力的降低。

［结论］ABS 能够显著对抗急性心肌缺血，其作用机制可能与抗脂质过氧化有关。

【关键词】怀牛膝总皂苷；急性心肌缺血；实验研究
怀牛膝为中医临床治疗心血管疾病的重要药物。

前期研究中发现，
怀牛膝总皂苷（ABS ）有直接舒张血管平滑肌的作用并对去甲肾上腺素引起的大鼠血管平滑肌收缩有显著的抑制作用［1］。

本研究采用
Pit静脉注射致大鼠急性心肌缺血模型，观察大鼠心电图以及血清心
肌酶谱和抗氧化指标的检测，探讨ABS对急性心肌缺血的作用及作用机制，结果报告如下。

1材料
1.1药品与试剂
中药怀牛膝：浙江省宁波中药饮片厂提供，批号20060414。

复方丹参滴丸：天津天士力制药股份有限公司，批号：20080424 ；垂体后叶素：南京新百药业有限公司批号：080301 ;戊巴比妥钠：
德国分装，批号：WS20080810 ;肌酸激酶试剂盒：南京建成生物工程研究所批号：20090622 ;乳酸脱氢酶试剂盒：南京建成生物工程研究所，批号：20090622 ;超氧化物歧化酶试剂盒：南京建成生物工程研究所，批号：20090622丙二醛试剂盒：南京建成生物工程研究所，批号：20090622.
1.2实验仪器
RM6240B型多道生理信号采集处理系统（成都仪器厂）；UNIVERSAL320R 型高速冷冻离心机（德国Hettich）；BIO[RAD MODEL 680 型酶标仪（BIO-RAD）。

1.3实验动物
健康雄性SD大鼠，体重（300 ±20）g，由浙江中医药大学实验
动物中心提供，实验动物合格证号：SYXK （沪）2008-0058，分
笼饲养，自由饮水进食。

2方法
将雄性SD大鼠适应性饲养2周，2周后各鼠均以3%戊巴比妥钠
1ml/kg麻醉后四肢连接H导联心电图，分别尾静脉注射0.5U/kg （1U/4ml）Pit，5s内注射完毕，记录心电图，剔除对Pit不敏感大鼠，主要表现为心率、J点抬高或降低（结果以J点变化的绝对值表
示）均无显著变化者，取敏感大鼠72只，饲养1周。

SD大鼠随机分为6组，每组12只，分别为正常对照组、模型组、复方丹参滴丸组
（270mg/kg），ABS 高、中、低（1.25g/kg、1.0g/kg、0.75g/kg）剂量组，正常对照组与模型组灌胃生理盐水10ml/kg，其余各组分别按体重剂量灌服相应药液。

除正常对照组外，各组大鼠在灌胃后2h，按上述方法麻醉连接心电图，各组大鼠尾静脉注射0.5U/kg Pit溶液, 复制大鼠急性心肌缺血模型，正常对照组尾静脉注射相同体积的生理盐水，注射完毕后观察心电图，造模20min后取下心电导联线，记
录各时间点心电图变化。

造模后1h，打开大鼠腹腔，下腔静脉采血
5ml，于高速冷冻离心机3000r/min，离心15min后，取血清，保存于-20 C冰箱内待测。

统计学处理：结果以x is表示，应用SPSS13.0 软件包进行统计，采用单因素方差分析。

3实验结果
3.1 ABS对大鼠急性心肌缺血心电图的影响
表1。

表1 ABS对大鼠急性心肌缺血心电图的影响（略）与正常对照组比较，*P V 0.05，**P v 0.01，***P v 0.001 ;与模型组比较，#P v 0.05，##P v 0.01，###P v 0.001
结果显示，缺血模型组与正常对照组比较，缺血后各时间点J 点较正常组均有显著性差异（P v0.001，P v0.01 ），提示模型组造模成功。

表1可见ABS高、中剂量组对心肌缺血后心电图J点的变化有显著的改善作用，低剂量组对其改善作用较弱，提示ABS对心肌缺血具有一定的保护作用。

3.2 ABS对大鼠急性心肌缺血心率的影响
表2.表2 ABS对大鼠急性心肌缺血心率的影响（略）与正常对照组比较，*P V 0.05 , **P v 0.01，与模型组比较，***P V 0.001 ; #P v 0.05结果提示，ABS各剂量组能够显著改善心肌缺血后大鼠心率的降低。

3.3 ABS对大鼠急性心肌缺血CK、LDH含量的影响
表3.表3怀牛膝总皂苷对急性心肌缺血大鼠血清CK、LDH活性的影响（略）与正常对照组比较，*P V 0.001 ;与模型组比较#P V
0.05，# #P v 0.01，###P v 0.001
结果显示：ABS高、中剂量组能够显著降低缺血后血清CK、LDH的活力，对心肌缺血有一定的保护作用。

3.4 ABS对大鼠血清SOD、MDA的影响
由表4结果显示，ABS高、中剂量组血清MDA水平显著低于模型组，SOD活力显著高于模型组。

表4怀牛膝总皂苷对急性心肌缺血大鼠血清SOD活性及MDA含量的影响（略）
与正常对照组比较，*P V 0.01 ;与模型组比较#P V 0.05，##P v 0.01，###P v 0.001
4讨论
近年来大量研究发现氧自由基生成及脂质过氧化反应增强是心肌
缺血损伤的主要机制之一。

心肌缺血时，心肌组织自由基生成增多，氧自由基损伤心肌细胞膜结构中的磷脂和不饱和脂肪酸，使其发生脂质过氧化，造成氧化损伤。

实验结果可见，ABS能够显著改善急性
心肌缺血引起的心电图变化，降低CK、LDH的活性，对急性心肌缺血具有良好的保护作用，其作用机制可能是降低MDA含量，升高SOD活力，降低心肌缺血时的脂质过氧化反应。

【参考文献】
1]郑洁珍，周大兴，顾静，等.怀牛膝有效成分对血管平滑肌收缩作用的影响]J].安徽中医学院学报，2008，27 (4): 38]40.。