种子生活力快速测定
种子活力测定方法
种子活力测定方法种子活力测定方法是种子品质评价的重要手段之一，其目的是评估种子的发芽力和萌发势。
种子活力与种子内蕴水分、呼吸能力、抗逆性等因素密切相关，是衡量种子质量的重要指标之一。
下面将介绍几种常用的种子活力测定方法。
1. 发芽力测定法发芽力是衡量种子活力的重要指标之一，一般指种子萌发成苗的能力。
发芽力测定是判断种子品质的主要方法之一。
其步骤如下：首先，准备一定数量的种子样品，待测种子数量应根据需要而定，但一般不少于100粒；然后，将种子样品放入适合发芽的培养介质中，如培养皿、培养箱等；接下来，将培养介质放置在适宜的温度条件下，通常在25 - 30之间；观察并记录下种子的发芽情况，一般记录发芽数、发芽率等参数；最后，根据发芽数和发芽率来判断种子的活力水平。
2. 胚乳酸测定法胚乳酸测定法是测定种子活力的一种间接方法。
其原理是在种子老化过程中，胚乳中的淀粉被分解产生酸，通过测定胚乳酸含量来评估种子的活力。
具体步骤如下：首先，准备一定数量的种子样品，通常取100粒；然后，将种子样品粉碎，并用适量的水浸泡片刻，使胚乳酸完全溶解；接下来，取一定体积的溶液，加入胚乳酸试剂；然后，用菲仪或pH计测定胚乳酸的浓度；最后，根据胚乳酸浓度来评估种子的活力水平，通常胚乳酸浓度愈高，表示种子活力愈低。
3. 电导率测定法电导率测定法是一种评估种子活力的简单、快速的方法。
其原理是测定种子浸泡液中的电导率，通过判断电导率的高低来评估种子的活力。
具体步骤如下：首先，取适量的种子样品，用一定体积的水浸泡一段时间，通常为4小时；然后，用电导计测定浸泡液中的电导率；最后，根据电导率高低来判断种子的活力水平，电导率愈高，表示种子活力愈低。
4. 呼吸强度测定法呼吸强度测定法是一种评估种子活力的方法，其原理是通过测定种子的呼吸强度来评估种子的活力。
具体步骤如下：首先，取一定数量的种子样品，并进行表面消毒处理；然后，将种子样品放入呼吸仪中，并测定呼吸强度；最后，根据呼吸强度来评估种子的活力水平，呼吸强度愈高，表示种子活力愈强。
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定实验人员：候勇 2012年度国培班果蔬花卉专业试验目的：种子生活力是指种子的发芽潜力，即发芽力，是判断种子质量的重要指标；要了解种子生活力的大小，最可靠的方法是测定种子的发芽率。
种子的发芽率是指在适宜条件下种子发芽的百分数，它是鉴定种子质量的主要依据，在确定播种量以及种子生理研究中具有重要意义。
本实验的目的就是快速测定种子生活力的方法。
实验仪器及材料：1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶、红墨水5%3、材料：玉米、小麦吸胀种子方法一：红墨水染色法实验原理：红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
操作步骤：1、浸种：取不同种子一部分用沸水煮5-10min，作为死种子；一部分用凉水浸泡一昼夜，吸涨备用。
2、染色：取已吸涨种子100粒，玉米种子可在中间阔面将胚纵切为两半将其中一半放入培养皿中，用5%红墨水染色。
3、结果观察：经过5-8min，倒出红墨水，多次用清水清洗后观察胚的颜色，凡是胚部不着色的为生活良好的种子，有略带红色的说明生活力较弱，都染红的说明无生活力。
结果：活种子%=胚不着色的种子数/供试种子*100 50%=5/10*100方法二：BTB变色法实验原理：活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。
CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。
BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。
BTB 变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。
色泽差异显著，易于观察。
操作步骤：1%BTB染色将吸胀的小麦种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，胚向下，间距约1cm。
培养皿置于30C培养箱中培养0.5h，在光亮处下观察，种子附近呈现深黄色晕圈的是活种子，用沸水中杀死的种子分别进行对照。
实验六_植物种子生命力的快速测定
种子活力检测评估方法：
(1) 还原力（TTC法） ：呼吸→NADH → 还原TTC，胚呈红色。
(2) 原生质着色（红墨水法）：活种子不易着色，原生质膜具有选
择透性。 (3) 呼吸释放CO2，pH下降，酸碱指示剂显色。 （BTB法） (4) 细胞中的荧光物质：紫外照射发蓝、蓝紫色荧光。 (5) 外观目测法：用肉眼观察玉米种胚形状和色泽。凡种胚凸出或
5. 结果与分析
不同方法测定种子生活力记录表
方法
TTC 红墨水 BTB
供试粒数
30 30 30
有生活力种 子粒数
无生活力 种子粒数
有生活力种子 占供试粒数的%
分析TTC法和红墨水法测定的种子生活力结果，比较三种 方法快速检测种子活力的优缺点。
6. 注意事项
TTC法：
1）TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中， 放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
2）取30粒完好的小麦种子，种胚向下略斜插入胶（不软 不硬）。
3）将培养皿置于35 ℃下培养 1 h，对光观察，如果种胚 附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是死种子。
实验步骤
TTC/红墨水法：
1）将种子用温水（约30℃）浸泡2~6h，使种子充分吸胀。 2）随机取小麦种子30粒，沿种胚中央准确切开，每切1粒确认各半种子皆 含胚后，分别放置两只培养皿中。 3）在上述一只培养皿中加入 TTC溶液（至其中种子全部浸入为止），恒 温箱（30~35℃）中保温至少30 min。另一培养皿中加入约5 ml红墨水， 室温下浸5 min；
皱缩、显黑暗无光泽的，则种子新鲜，生活力强，可作生产用
种。
（6）浸种催芽法
先将100粒种子用水浸约两小时吸胀，放于湿润草纸上，盖 以湿润草纸，置于氧气充足，室温 10-20 ℃环境中，让种子 充分发芽；再以发芽的种子粒数除以100，乘以100%，求得 发芽率。
实验七种子生活力的快速测定(精)
种子冲洗l~2次，观察种胚被 染色的情况。凡种胚全部或 大部分被染成红色的即为具 有生活力的种子，种胚不被 染色的为死种子。如果种胚
（30℃~35℃）中保温
中非关键性部位（如子叶的
0.5~1h。另取100粒吸涨种 一部分）被染色，而胚根或
子，于沸水中煮5min后，
胚芽的尖端不染色，都属于
再加入0.5%TTC溶液染色。 不能正常发芽的种子。根据
2
实验原理
有生活力的种子能够进行呼吸代谢，在呼吸代谢途 径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的2，3， 5 - 三苯基氯化四唑（2，3，5 - triphenyl tetrazolium chloride 简称为TTC）还原为红色、不溶 性的甲月替，而且种子的生活力越强，代谢活动越
旺盛，被染成红色的程度越深。死亡的种子由于没 有呼吸作用，因而不会将TTC还原为红色。种胚生 活力衰退或部分丧失生活力，则染色较浅或局部被
染色。因此，可以根据种胚染色的部位以及染色的 深浅程度来判定种子的生活力。
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实验材料和器材
• 实验材料
水稻种子
• 器材：恒温箱、小白瓷碗、
镊子、刀片、小烧杯
• 试剂： 0.5% TTC溶液：
称取0.5 g TTC放入小烧杯 中，先加少许乙醇溶解后， 再用蒸馏水稀释定容至100 mL。TTC溶液最好随用随 配，不宜久藏。溶液应遮光
实验七：种子生活力的快速测定
（一）实验目的及意义 （二）实验原理 （三）实验步骤 （四）实验报告
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实验目的和意义
种子生活力（seed viability测定种子
生活力常采用萌发实验，即在适宜的条件下，
实验五、种子活力的快速测定
实验五、种子活力的快速测定一、实验目的熟悉种子活力快速测定的方法⏹TTC（氯化三苯基四氮唑）法⏹BTB（溴麝香草酚蓝）法⏹红墨水法⏹纸上荧光法二、实验原理⏹TTC（氯化三苯基四氮唑）法二、实验原理⏹红墨水法⏹活细胞的原生质膜具有选择透性，死亡的种胚细胞原生质膜无选择透性；⏹红墨水中的染色成分大红G不能通过选择透性膜，但能通过非选择透性膜。
三、实验材料、器材及试剂⏹材料：小麦种子⏹仪器及器皿：恒温箱，恒温水浴锅，镊子，刀片，培养皿，小烧杯⏹试剂：⏹0.5% TTC溶液（随配随用，若已变为红色则不能继续使用。
）⏹5%红墨水四、实验步骤⏹1、材料准备：将待测小麦种子用30-35℃温水浸种6~8h。
⏹2、切种子：随机取种子30粒以上,用刀片沿种子胚中心线切成两半。
⏹3、染色处理：取一半的种子放在培养皿中，加入染色溶液（刚好浸没种子），30-35℃恒温箱中保温0.5-1h。
⏹4、对照处理：另一半于沸水中煮死，染色同3。
⏹5、结果观察：倒出染色溶液，TTC处理种子用清水将种子冲洗1-2次，红墨水处理种子则用水冲洗至冲洗液无色为止。
观察种胚着色状况。
⏹6、结果验证：随机取种子30粒以上，25℃保温保湿培养，48h检测发芽率。
五、结果与讨论⏹1、计算两种测定法得到的种子发芽率。
统计分析两种测定方法的结果是否有差异。
⏹讨论两种方法有什么不同？你认为哪一种方法测定的结果较好，为什么？⏹2、统计分析种子活力快速测定结果与实际种子萌发结果的差异性。
⏹讨论可能原因。
比较分析种子活力快速测定与种子直接发芽率测定的优缺点。
注意事项⏹TTC处理染色结束后要立即进行鉴定。
凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。
如果种胚中非关键性部位（如子叶的一部分）被染色，而胚根或胚芽的尖端不能染色都属于不能正常发芽的种子。
⏹红墨水处理后要冲洗充分后观察。
凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。
测种子生活力的方法
测种子生活力的方法种子生活力是指种子在适宜的环境条件下能够发芽和生长的能力。
测定种子生活力的方法有多种，下面将介绍几种常用的方法。
1. 观察种子外观种子外观可以直观地反映种子的生活力。
健康的种子应该具有充实的种皮，颜色鲜亮，表面光滑。
如果种子外观变得干燥、褐色或者有裂纹，那么可能是种子生活力下降的表现。
2. 浸泡法将一定数量的种子放入水中浸泡，观察浸泡后的变化。
健康的种子通常会吸水膨胀，并迅速沉入水底。
如果种子浸泡后浮在水面上，可能是种子生活力较低的表现。
3. 发芽率测定法这是一种常用的测定种子生活力的方法。
将一定数量的种子放入适宜的培养基中，提供适宜的温度、湿度和光照条件，观察一段时间内种子的发芽情况。
通过统计发芽的种子数量，可以计算出种子的发芽率，从而判断种子的生活力。
4. 离体培养法将种子表皮剥离，将胚乳或胚轴放入培养基中进行培养，观察胚乳或胚轴的发育情况。
这种方法可以排除种皮对发芽的影响，更准确地评估种子的生活力。
5. 高温处理法将种子置于高温环境中，观察种子的耐热性。
一些种子具有较强的耐热性，可以在高温环境下正常发芽和生长，而一些种子则对高温敏感，会导致种子生活力下降。
6. 高盐处理法将种子置于含有一定浓度盐溶液中，观察种子的耐盐性。
一些种子具有较强的耐盐性，可以在高盐环境中正常发芽和生长，而一些种子则对高盐敏感，会导致种子生活力下降。
7. 高湿处理法将种子置于高湿环境中，观察种子的抗霉性。
一些种子具有较强的抗霉性，可以在高湿环境中正常发芽和生长，而一些种子则对高湿敏感，容易受到霉菌的侵害，会导致种子生活力下降。
测种子生活力的方法有很多种，可以通过观察种子外观、浸泡法、发芽率测定法、离体培养法、高温处理法、高盐处理法和高湿处理法等方法来评估种子的生活力。
选择合适的方法进行测定，可以帮助我们了解种子的质量，为种子的储存、选育和利用提供科学依据。
实验六 种子生活力的快速测定
实验六种子生活力的快速测定一、实验目的1.加深对种子作用的理解；2.掌握种子生活力的测定方法。
二、实验原理在播种、交换和调运种子之前，都要及时了解种子的发芽率，以确定是否作为播种材料或引种种源。
因此，快速而又准确地测定种子生活力，对于及时调种和播种后确保全苗、壮苗具有极其重要的意义。
种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产生的氢（H）有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产种子生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深；死亡种子没有呼吸作用，不会将TTC还原成红色；种胚生活力衰退或部分丧失生活力，染成较浅或局部被染色；三、实验材料及用品材料：绿豆种子实验器皿：恒温箱、小烧杯、镊子、刀片实验试剂：0.5%TTC溶液（避光保存）四、实验步骤1. 浸种：将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种，以增强种胚的呼吸作用。
2. 显色：a、种子处理：随即选取吸胀的种子 40 粒，小心剥去种皮，勿伤及种胚。
b、实验组处理：将处理好的20粒种子置于小烧杯中，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保1h。
c、对照组处理：另取20粒种子，于沸水浴中煮5min后，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保温1h。
3. 统计：染色结束，马上鉴定；倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗1-2次，观察种胚乳染色情况。
有生活力种子：种胚全部或大部分被染成红色；无生活力种子：不被染色。
生活力的种子数计算种子生活力的比率= ————————X 100%实验组测定种子数五、实验现象与结果保温1h后种子染色情况：被染色的数目未被染色的数目未煮沸的种子14 6煮沸的种子 0 20表一种子染色情况记录表图1 未煮沸的种子染色情况图2 煮沸的种子染色情况生活力的种子数未煮沸的种子生活力的比率= ————————X 100% = 14/20 X 100% = 70%实验组测定种子数生活力的种子数煮沸的种子生活力的比率= ———————X 100% =0/20 X 100% = 0实验组测定种子数六、分析和讨论1.在实验中，去种皮时要小心防止伤及种胚，因为胚是种子中的活细胞，若损失可能使实验无法进行反应，造成实验的误差。
实验三十九种子生活力的快速测定
实验三十九种子生活力的快速测定种子发芽率是鉴定种子品质的重要标志，在确定播种量以及种子生理研究方面具有重要的作用，常需加以测定。
但一般测定发芽率的方法所需时间长，尤其是对处在深休眠状态的种子，根本无法应用，所以有必要根据活种子的生理特性建立起一套快速鉴定种子生活力的方法，以克服常规方法的缺点。
本实验介绍剥胚法，染色法和荧光法三类方法，可根据具体情况选用。
Ⅰ、剥胚法一、目的掌握用剥胚法测定种子生活力的原理和方法。
二．原理此法适于测定休眠状态的种子的生活力。
种子深休眠的原因很多，有些是因为果皮或种皮的束缚（如不透水、不透气）造成的；也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂，这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。
当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后，胚就很快萌发。
三、材料与设备1. 材料：苹果、柑桔的成熟种子或玉米乳熟期籽粒。
2. 设备：培养皿；滤纸；刀片；镊子。
3. 试剂：0.1﹪升汞。
四、实验步骤1. 种子处理取刚从成熟果实中剥出的新鲜柑桔种子300粒，已晒干的柑桔种子100粒，乳熟期新鲜玉米种子200粒，经晒干的乳熟期玉米种子或贮存三年以上的玉米陈种子各100粒，用0.1％升汞消毒后再用水充分洗净，进行以下处理：1.1柑桔新鲜种子，不加处理，作为对照；1.2 柑桔新鲜种子，用镊子小心剥去种皮，留下完整的胚；1.3柑桔新鲜种子，用刀片把种子横切为二，留下带胚根的一半，注意切除部分应不少于种子全长的一半。
1.4晒干的柑桔种子*，处理同1.2；*柑桔种子经晒干后即失去发芽能力。
1.5新鲜乳熟期玉米粒，不加处理作为对照（新鲜乳熟玉米种子粒因胚乳中存在着萌发抑制剂，不能萌发）。
1.6新鲜乳熟期玉米子粒，用镊子小心地将胚剥出。
1.7 晒干的乳熟期玉米子粒，不加处理。
1.8 贮存三年以上的玉米陈子粒，不加处理。
2. 观察测定以上处理完毕，随即将种子或胚整齐地摆在铺有适当大小滤纸的培养皿里，用蒸馏水湿润滤纸，加盖后置30℃左右的温箱中培养，并注意随时补充水分（但不可加水过多，否则易因缺氧而霉烂），从第二天起每天统计发芽种子数，记入下表，连续观察二星期。
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种子生活力快速测定
一、实验原理
通过本实验，掌握种子生活力快速测定的原理和方法。
二、实验原理
（1）活细胞染色：脱氢辅酶（NADH或NAFPH)存在于活的细胞内，当TTC渗透进入细胞内作为受体被脱氢辅酶上的氢还原，便由无色的TTC变为红色的三苯基甲（TTE)。
当细胞死亡后，NADH会迅速被降解，不会发生相应的颜色反应，故TTC染色法可显示细胞是否存活。
（2）死细胞染色：有生命力的细胞膜是一个半透性膜，因此对内渗透的物质有选择性；而无生命力的细胞，其细胞膜已经消失，因此有的有色物质（如品红）不能进入活的细胞内，但可以进入已经死亡的细胞，从而使细胞内出现该有色成分特有的颜色，故可以据此鉴别细胞是否死亡。
三、实验材料、药品和器具
1、实验材料：花生、黄豆
2、实验药品和器具：品红、TTC、培养皿、吸水纸、镊子、解剖针、刀片等
四、试验方法
1、分别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入TTC培养1h左右，观察胚染色的情况。
胚被染色的为有活力种子，未被染色的为无活力的种子。
2、别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入品红培养10-20min，倒掉品红溶液，冲洗数次，观察胚染色的情况。
胚被染色的为无活力种子，未被染色的为有活力的种子。
五、实验结果
品种测定方法测定种子总数有生活力种子粒数无生活力种子粒数种子生活率花生TTC 30 28 2 93% 品红30 28 2 93%
黄豆TTC 30 30 0 100% 品红30 29 1 97% 实验结果可以得出选用TTC染色和品红染色得出的结果存在差异，用TTC染色得出的结果高于品红染色法。
结果分析：可能的原因是在清洗品红时没有清洗干净，品红粘在胚上，影响实验的观察，导致结果差异。
六、注意事项
1、选取种子的时候，要尽量选取未发芽的种子，避免影响测定。
2、添加染色液时，要是然也尽量没过种胚，使种胚和染液充分接触。
3、染色时间要尽量控制在规定时间内，染色过长过短都会影响结果测定。
4、清洗品红染液时，要冲洗干净，冲洗数次，直至冲洗液无色为止，冲洗不干净直接影响实验结果的测定。