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鲑鱼生长激素cDNA5’端和3’端的修饰与在原核细胞中表达的初步研究
1998年 第6期中山大学学报论丛SUPPL EME NT TO T HE JOURN AL OF SUN Y A TSEN U NIVERSIT Y No .6 1998 鲑鱼生长激素cDNA 5端和3端的修饰与在原核细胞中表达的初步研究白俊杰 马 进 简 清 李新辉 罗建仁 张红军 林文辉(中国水产科学研究院珠江水产研究所,热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,广州510380)摘 要 为了研究鱼生长激素基因在大肠杆菌中的表达,采用聚合酶链反应(PCR)技术对鲑鱼生长激素cD NA 的5︐端和3︐端进行定向修饰.将修饰后的三种基因分别克隆到大肠杆菌表达质粒pBV 220,构建成重组鲑鱼生长激素表达质粒pBV GH11,pB VG H18和pB VG H24,转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达.结果表明:核糖核蛋白体结合位点(SD )与起始密码子AT G之间的距离对生长激素的表达水平影响极大.鲑鱼生长激素基因的终止密码子T AG 不能有效终止该基因在大肠杆菌中翻译的进行,造成部分通读.加入大肠杆菌强终止子T AA 可避免通读和产生超长蛋白,提高表达产量.关键词 鲑鱼生长激素,基因修饰,表达水平,原核细胞分类号 Q 751鱼生长激素(f GH)是由鱼脑垂体前叶细胞分泌的一种多肽激素,具有促进鱼体生长和多方面的代谢调节作用[1].为了研究f G H 在水产养殖业的应用,需要获得大量的鱼生长激素,然而天然鱼体中的f GH 含量极低、提取也很复杂,不可能应用于生产.采用D N A 重组技术,将鱼生长激素基因克隆到大肠杆菌中,可望得到大量廉价的重组f GH .为了让大肠杆菌表达f G H ,必须对f G H cD N A 进行改造和修饰.如去除f GH cD N A 5︐端和3︐端的非编码区,调节SD 序列与起始密码子AT G 之间的距离,采用合适的终止码避免翻译时的通读等.本实验着重研究了SD 序列与起始密码子之间碱基数的改变对表达水平的影响及终止子的效率与超长蛋白的产生.1 材料与方法1.1 质粒和菌种鲑鱼生长激素cD N A 质粒p OPsG H 由中国科学院发育生物学研究所薛国雄研究员惠赠.大肠杆菌表达载体pB V220由中国预防医学科学院病毒所馈赠,它是一个含P R P L 启动子的原核高效表达载体[]质粒U 和大肠杆菌D 5α购自华美生物工程公司收稿日期5 2.p C 19H .:1998-10-11.2 工具酶和试剂限制性内切酶、T 4D N A 连接酶、Klen o w 片段、d NT P 及其它试剂为美国Pro mega 公司和华美生物工程公司产品.PCR 扩增试剂盒B 购自华美生物工程公司.1.3 质粒D N A 制备、粘性末端补平、D N A 连接、低熔点琼脂糖回收D N A 、SD S —PA GE 等方法 参照Sambr oo k 等的方法[6].1.4 PCR 扩增和扩增产物的克隆PCR 引物设计参照文献[3]方法.扩增引物委托上海San go n 生物工程公司合成,合成产物经PA GE 纯化.PCR 反应在Perkin Ectus2400型D N A 扩增仪上进行,模板浓度10n g ,引物浓度25p mol.解链反应94℃,60s ;退火反应55℃,60s ;延伸反应72℃,90s ;反应总体积50μL ,25个循环.PCR 扩增产物经酶切处理后与经酶消化过的pU C19混合,T 4D N A 连接酶14℃反应过夜.转化大肠杆菌D H5α,电泳结合酶切法筛选重组子.1.5 重组鲑鱼GH cD NA 大肠杆菌表达质粒的构建酶切p UC GH5、p UC GH8和p UC GH16,低熔点琼脂糖法回收改造后的鲑鱼G H cD NA ,用T 4D N A 连接酶将回收片段插入pB V220,构建大肠杆菌表达质粒,转化大肠杆菌D H5α,电泳酶切法筛选重组子.1.6 重组鱼GH 的表达及SD S —PA GE 检测含重组f GH cD N A 质粒的菌株于A mp L B 培养基中30℃培养过夜,次日按1∶50扩大培养至A 600nm 为0.3～0.4,立即转到热诱导温度42℃继续培养3h ,离心收集菌体,SD S —PAGE 分析.2 结果和讨论2.1 鲑鱼GH cD NA 的改造和克隆为了对鲑鱼G H c D NA 的5︐端和3︐端进行不同目的修饰,我们设计了4种PCR 扩增引物:P15︐—C GCG GA TCC AT GA T AG AA A ACCA AC GG CTCT —3︐P25︐—C GG AA TT CAT G GA A AA CCA ACG GCT CT —3︐P35︐—C GCG GA TCCCC GT CCT ACA G AG T GCA GT T G —3︐P45︐—C GCG GA ACCT T ACT AC AG A GT GC AGT T G —3︐P1和P2是5︐端引物,除了与编码成熟肽前6个氨基酸碱基的正链序列一致的碱基外还加入一个翻译的起始密码子A T G .P1加入了一个BamH I 的识别位点;P2加入了一个EcoR Ⅰ的识别位点.P3和P4是终止引物,含一个终止码T A G 和一个BamH Ⅰ识别位点.P4比P3在原有的终止码T AG 后面多加了一个大肠杆菌强终止码T A A .分别用P1和P3,P2和P3,P2和P4做引物,鲑鱼c DN A 质粒p OPsG H 为模板,经PCR 扩增均得到约590bp 的扩增片段,P1和P3为引物的PCR 扩增片段经BamH Ⅰ酶切回收,与BamH Ⅰ酶切的U 连接,经电泳法筛选得到重组子U G 5经B Ⅰ酶切鉴定有一约5的插入片段用引物和3、和扩增的片段分别克隆到U 中得到重组子U G 6和U G 71第6期 白俊杰等:鲑鱼生长激素cD N A 5︐端和3︐端的修饰与在原核细胞中表达的初步研究p C 19p C H .amH 90bp .P2P P2P4p C19p C H1p C H8.2.2 鲑鱼GH 大肠杆菌表达质粒的构建及鉴定pU CGH5经BamH Ⅰ酶切,电泳回收590bp 片段,与Ec oR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切的质粒pB V220连接,经Kleno w 大片段补齐后连接,转化D H5α筛选重组子,用Sa l Ⅰ酶切,寻找到正向插入的重组子pB VG H11.pU CG H8、p UC GH16经Ec oR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切,电泳回收590bp 片段,分别定向插入pB V220多克隆位点Ec oR Ⅰ和BamH Ⅰ之间,筛选的重组子经Ec oR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切证实有插入片段.将有外加终止子T A A 的表达质粒命名为p BV GH18,将没有外加终止子的质粒命名为pB V GH24.2.3 重组f GH cD N A 的表达与SDS —P AGE 分析SD S —PA GE 结果表明,经42℃诱导后pB V GH18菌株在分子质量约22000处有一条特异蛋白带,与天然鲑鱼生长激素的相对分子质量相符.pBV GH24菌株在相对分子质量约25000和22000处有两条特异蛋白带.这可能是鲑鱼GH cD NA 原有终止码的终止效率不高,导至翻译时部分通读而多克隆位点后面有一强终止信号[2],避免了继续通读下去,所以产生了相对分子质量比22000多几百的另一条特异蛋白带.而pBV G H11菌株经诱导后在22000和25000处都没有发现特异蛋白带,也可能是由于表达量很低无法测到.分析原因估计是质粒pBV G H11中SD 序列与AT G 之间碱基数不合适所导至的,pB VG H11SD 序列与AT G 之间的碱基数为9,而p BV GH18和pB VG H24的SD 序列与AT G 之间的碱基数只有5.影响表达的其它原因有待于进一步研究.外源基因在大肠杆菌中表达水平受多种因素影响[3],如启动子强度、载体性质、表达类型、RN A 二级结构、密码子偏性、终止密码等因素.从我们的实验再次证明SD 序列和起始密码子AT G 之间的距离对基因的表达水平影响很大,有人做过在同一启动子带动下SD 顺序与AT G 距离仅改变一个碱基数,表达水平可相差500倍以上[3].为了提高外源基因的表达水平,选用合适的终止密码子也是很有必要,它能避免通读,保证翻译及时终止,不致产生超长蛋白,以提高表达效率.参考文献1 Donaldson E M ,et al.Ho rmonal enhancement of gro wth.In Fish Physiolog y ,Academic Press,N ew Y ork ,1979,8:455～5972 张智清,姚立红,侯云德.含PRPL 启动子的原核高效表达载体的组建及其应用.病毒学报,1990,6(2):111～1163 白俊杰,简清,马进,等.鲑鱼生长激素D N A 在大肠杆菌中的表达及表达产物对罗非鱼促生长作用.农业生物技术学报,1998,6(4):343～3464 卢圣栋.现代分子生物学实验技术.北京:高等教育出版社,1993.5 Ganong W F.T he pituitary gland.In Review o f Medical Physiolog y.L ange Medical Publisher ,L os Altos,1983.323～3356 Sambroo k J.Molecular Cloning:A L aboratory Mannual ,2nd ed ,Cold Sprin g Harbor L aboratory Press.19897 Laemmli U K.Cleuvage o f Structural proteins durin g the assembly o f the head o f bacteriophage T 4Nature ,,6～6572中山大学学报论丛 1998年1970227:808Modification of Salmon GH cDNA and Expression Study in E .coli Bai Jun jie M a Jin Jian Qin g L i Xinhui Lu o Jianren Zhan g H ong ju n L in W enhu i A bstract In order to study fish G H cD NA expressio n in E .c oli ,we use PCR metho d to mo dif y salmo n G H cD NA 5︐and 3︐ends.Three modified genes wer e clon ed to E .c oli expression v ector pBV220,co nstructed salmo n G H cD NA expressio n v ectors pB V GH11,pB V GH18and pB V GH24.Af -ter transfor mation an d expressio n ,the results o f ex periment sh o w that the distance b etw een SD se -quence and initial co do n AT G is v er y impo rtant to fish GH ex pression lev el and salmon GH cD N A ︐s sto p co do n T A G can n ot sto p E .c oli translation eff ectively.Additio n o f E .c oli stro ng sto p c odo n T AA can av o id ex pressio n of super lo ng pro tein.Key wo rds salmo n g ro wth ho rmo ne ,gene mo dif icatio n ,expression lev el ,E .c oli73第6期 白俊杰等:鲑鱼生长激素cD N A 5︐端和3︐端的修饰与在原核细胞中表达的初步研究R F y R I ,y f F y S K y L f T S F B ,G z 53,Pear iver is her esearch nstitute Chinese Academ o isher ciences.e ab o ropical and ubtropi -cal ish reeding and Cultivation uang hou 1080China。
鲑鱼精粉结构式_解释说明
鲑鱼精粉结构式解释说明1. 引言1.1 概述本篇长文将详细介绍关于鲑鱼精粉结构式的相关知识。
鲑鱼精粉是一种具有广泛应用领域和丰富营养价值的食品原料。
通过本文，我们将深入探讨其结构示意图、化学成分和制备方法，并解析其在不同领域中的应用及其独特的营养价值。
1.2 文章结构文章共分为四个主要部分：引言、鲑鱼精粉结构式、解释说明和结论。
引言部分将从概述、文章结构和目的三个方面来介绍整篇长文的内容，为读者提供一个整体了解。
1.3 目的本文旨在提供关于鲑鱼精粉结构式的全面解释说明。
通过详细介绍其制备方法和应用领域，读者将能够更好地理解该食品原料在各个领域中发挥作用的机制。
此外，我们还将对鲑鱼精粉的营养价值进行分析解析，以期进一步增进人们对该食品原料健康益处的认识。
以上是对文章“1. 引言”部分内容的详细说明，希望能够满足您的需求。
2. 鲑鱼精粉结构式2.1 定义和背景:鲑鱼精粉是一种由鲑鱼提取物制成的营养补充剂。
它是通过将新鲜的鲑鱼进行加工和提取得到的粉状物质。
具体而言，首先对新鲜的鲑鱼进行去皮、去骨等处理，随后将其进行研磨、干燥并最终粉碎成细小颗粒。
经过这些步骤，我们可以得到纯净且浓缩的鲑鱼精粉。
2.2 结构示意图:以下是表示鲑鱼精粉结构式的简化示意图：```H H/ \ /H –N –C –C –C –C –R| | |H OH OH其中，H：氢原子N：氮原子C：碳原子R：代表有机链或侧基（比如甘油）注意：这仅为一个简化的示意图，具体的分子结构会更加复杂，并含有其他功能性基团以及其它元素。
2.3 化学成分说明:通过对生产过程中所用原料进行化学分析发现，鲑鱼精粉主要由蛋白质、脂肪、维生素和矿物质等组成。
其中，蛋白质是鲑鱼精粉的主要成分，它含有各种必需氨基酸，如赖氨酸、亮氨酸和色氨酸等。
此外，脂肪是其次重要的成分之一，富含Omega-3脂肪酸，如二十二碳六烯酸（DHA）和二十碳五烯酸（EPA），这些脂肪酸对于人体的健康非常重要。
M5 鲑鱼精 DNA 10mg ml 说明书
北京聚合美生物科技有限公司 Mei5 Biotechnology, Co., Ltd
北京市昌平区回龙观龙域北街10号院1号楼四层422-1室（创集合大楼） 热线电话：（86）************
M5 鲑鱼精DNA 10mg/ml 使用说明书
产品名称 单位 货号 M5 鲑鱼精DNA 10mg/ml 1 ml MF475-01 M5 鲑鱼精DNA 10mg/ml 5x1 ml MF475-05
【储存条件】
-20℃保存，有效期2年。
【产品简介】
鲑鱼精DNA 溶液（10mg/ml ）是经过酚氯仿抽提，超声和热变性处理的短片段的单链DNA 溶液，可直接用于Southern 、Northern 等核酸杂交中。
【操作步骤】
本产品鲑鱼精DNA 的浓度为10mg/ml ，使用时按实验具体要求操作，稀释至所需工作浓度即可。
【注意事项】
1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，避免反复冻融。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴手套操作。
【备注】
本产品仅供科研使用。
在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。
鲑精DNA配制
鲑精DNA配置溶解DNA pH要调到8左右。
要用DNase free的水。
室温就可以。
不要过度震荡和抽吸。
以防DNA链断裂。
最后加入终浓度为1 mM EDTA。
1 把鲑鱼精子DNA（Sigma,Ⅲ,盐钠）溶解于水配制成10mg/ml的浓度，必要时于室温磁力搅拌2～4h助溶。
把溶液中NaCl的浓度调至0.1mol/L，并用酚和酚/氯仿各抽提一次，回收水相。
合DNA溶液快速通17号皮下注射针头12次，以剪切DNA。
加入2倍体积用冰预冷的乙醇沉淀DNA。
离心回收DNA并重溶于水，配制成10mg/ml的浓度，测定溶液的OD260值并计算出精确的DNA 浓度，然后煮沸10min，分装成小份保存于-20℃。
使用前置沸水浴中加热5min，然后迅速在冰浴中骤冷。
预杂交液中应含有100μg/ml经变性并被打断的鲑鱼精子DNA2（1）在50ml灭菌聚乙烯管中加入1g鲑精DNA，加入15ml DEPC水使其浸泡5min至2h；（2）加入2.5ml 2mol/L HCl，室温放置，DNA形成白色沉淀，充分振摇至沉淀物相互缠绕在一起，用吸头尖端使之形成一球团状（2～3min）；（3）加入5.0ml 2mol/L的NaOH。
摇动小管使DNA悬浮、溶解，将小管置50℃15min助溶；（4）用DEPC水将混合物稀释至175ml（总体积），充分混合，注意确保管内已无颗粒状；（5）加入20ml/l 1mol/L的Tris-HCl缓冲液（pH7.4）；（6）用2mol/L的HCl滴定至DNA溶解pH为7.0～7.5；（7）用无菌微孔滤膜过滤液体，去除颗粒。
260nm测定溶液的OD值，方法是：取20μl DNA液混合于980μl水中，混匀后测定，吸收值乘以50即为DNA浓度（μg/ml）；（8）制备好的DNA液储于-20℃备用，用前取出冻融后煮沸。
DNA检测樱花钩吻鲑为台湾特有
DNA检测樱花钩吻鲑为台湾特有
台湾雪霸公园发表保育研究计划成果，其中台湾鲑，也就是樱花钩吻鲑研究有重大突破，以DNA序列定位分析，首度确认为台湾地区特有原生种的樱花钩吻鲑，并非是由日本引进的陆封型樱鲑或养殖场外逃的虹鳟演化而成，而是确确实实的台湾特有品种。
据台湾东森新闻报道，台湾鲑鱼旧名樱花钩吻鲑，又名台湾鳟、梨山鳟、次高山鳟，是位于亚热带的台湾地区唯一一种温带性鱼类，也是只产在台湾地区的特有亚种鱼类。
由于“樱花钩吻鲑”之名系沿用日本人的通称，早年水产前辈邓火土就主张以“台湾鲑鱼”称呼此台湾特有种，近年终于正式正名为台湾鲑鱼。
不过，台湾鲑与日本樱鲑陆封型的外观非常类似，仅细部特征有所不同，同属太平洋鲑属中的樱鲑四大亚种，所以，过去学术界对于台湾鲑鱼的来源有出现不同看法。
为了确定台湾鲑的身份，雪霸公园委托“中华医事学院生物科技所”进行研究，研究台湾鲑鱼已10多年的助理教授周以正以粒线体DNA序列定位分析，在“台湾鲑与太平洋鲑属鱼种间之粒线体DNA生长荷尔蒙基因的分子演化研究”中，将台湾鲑的1万多个基因序列定序，首度以科学实证确认为台湾特有原生物种。
台湾鲑被称为“冰河孑遗生物”，从冰河时期就存在，早期分布整个大甲溪流域，目前主要分布在武陵农场七家湾
溪地段，由于学者历年采集野生台湾鲑鱼进行每年例行人工复育工作时，经常发现采集到的种鱼中有已达成熟最小体型的雄鱼，却呈现精巢萎缩等不孕的现象，加上大自然灾害等等，数量大约2000至3000只，有时更降为不足千只。
关雪霸公园管理处为使台湾鲑能在历史生存溪流再次出现及生存，近年实行多种复育方式，并且成立复育中心，今年10月也于大甲溪发电厂上游的司界兰溪及南湖溪各放流250尾12-15公分大之鲑鱼，希望能扩大栖息地。
转基因鲑鱼
全球首个转基因动物食用申请引发争议发布时间：2011-5-25 12:39:00 〖加入我的书签〗〖关闭窗口〗环境与生活转基因鲑鱼人类科技的“杰作”——转基因猪◎刘佳音鲑鱼又称三文鱼，是一种既美味又营养的水产品。
但由于近年来栖息地减少和过度捕捞，野生鲑鱼的数量骤减。
据美国媒体报道，美国食品与药品管理局很可能会批准美国一家叫水邦提的公司注册的“AquAdvantage®转基因鲑鱼”上市销售。
如果一旦获得认可，它便会成为全球第一个被批准的、供人类食用的转基因动物。
有人预言，这可能将促使一系列转基因动物成为人类的食物。
人为基因变异让鲑鱼生长提速据美国名为水邦提的公司介绍，“AquAdvantage®转基因鲑鱼”生长速度很快，仅用一年半时间，就能达到普通3岁大成年鲑鱼的体形。
鲑鱼的加速生长是通过基因变异获得的。
普通鲑鱼是间断性地分泌生长激素，而新加入的基因能够使鲑鱼持续不断地分泌生长激素，达到加速成长的目的。
具体做法是，将切努克鲑中提取一段负责分泌生长激素的基因，添加到大西洋鲑的基因内。
但如果直接加入这个基因，它在大西洋鲑体内并不起作用，所以还需要从美洲大绵鳚中提取一段DNA，用其改变从切努克鲑提取的基因，作为“开关”将这个基因激活，才能让这个变种鲑鱼常年分泌生长激素。
关于这种转基因鱼的问世，此间新闻报道褒贬不一，至今仍在激烈辩论当中。
在众多观点中，一些环保人士认为，水邦提公司为了通过美国食品与药品管理局的认证，并获得广大消费者的认同，公布了很多误导人的信息和声明。
这让不少消费者对这种转基因鲑鱼的上市翘首以待，认为这个新品种成长周期短，可以提供更多水产品，并解决野生鲑鱼濒临灭绝的困境。
也许该公司的这些声明能暂时骗过对转基因技术一知半解的百姓，但却经不住严格推敲。
稍作考察之后，人们不难发现，错综复杂的转基因技术并没有成熟，把转基因动物食品贸然推向市场的潜在危害很大，且不可完全预料。
就像是潘多拉盒子，里面藏了什么人们并不知道，当把盒子打开，人们了解了潘多拉盒子里转基因鲑鱼的秘密之后，可能为时已晚。
鲑鱼精子—抗癌新药
鲑鱼精子—抗癌新药
张倜元
【期刊名称】《海洋渔业》
【年(卷),期】1984(6)1
【摘要】美国哈佛医学院的朱达·福克马发现了一种新的抗癌药物，这就是鲑鱼精子。
据说在鲑鱼精子中含有一种鱼精朊的蛋白，它能抑制肿瘤周围血管的生长。
【总页数】1页(P41)
【作者】张倜元
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】S963
【相关文献】
1.合肥永生制药首创抗癌新药——尿多酸肽注射液获国家一类新药批件 [J],
2.抗癌新药FH8901对膀胱癌及其他瘤株的抗癌作用和毒性的实验研究 [J], 武文森
3.拥有知识产权的抗癌新药槐定碱获国家一类新药证书 [J], 无
4.抗癌新药“槐定碱”获SFDA颁发新药证书 [J],
5.抗癌新药依维莫司的合成工艺优化和抗癌活性研究 [J], 王新利;兰燕芹;王尧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鱼类种质检验 第14部分：DNA含量的测定-最新国标
鱼类种质检验第14部分：DNA含量的测定1 2范围本文件规定了鱼类DNA含量测定的通用方法。
本文件描述了鱼类红细胞DNA含量测定的试剂与材料、仪器和设备、抽样方法和分析步骤。
本文件适用于鱼类种质鉴定与检测。
规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 18654.2 鱼类种质检验第2部分：抽样方法3 4术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。
试剂与材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。
4.1 磷酸氢二钠（Na2HPO4）。
4.2 二个结晶水的磷酸二氢钠（NaH2PO4•2H2O）。
4.3 生理盐水：0.75% 氯化钠（NaCl）溶液。
4.4 固定液：3份甲醇加入1份冰醋酸，现配现用。
4.5 肝素溶液：浓度为500 IU/mL。
4.6 胰酶：浓度为5 mg/mL。
4.7 核糖核酸酶（RNase）：1 mg/mL。
4.8 碘化丙啶(PI)：浓度为50 g/mL。
4.9 0.1 mol/L磷酸缓冲液(PBS)：Na2HPO412.35 g，NaH2PO4•2H2O 20.3 g，蒸馏水定容至 1 L。
5仪器和设备5.1离心机：转速为5000 r/min，常温。
5.2流式细胞仪。
5.310 mL离心管及试管架。
5.4 5 mL试管及试管架。
5.5 吸管。
5.6 2 mL注射器。
5.7 5号针头。
5.8锦纶筛网（或涤纶筛网）：规格为80孔/cm。
5.9封口膜。
6抽样6.1试验鱼抽样按GB/T 18654.2的规定执行。
6.2样品数量达10尾以上。
6.3用酒精棉球将鱼体尾部待采血部位擦试消毒，用装有少量肝素溶液的注射器在尾动(静)脉处取0.2 mL～1.0 mL血液为试样。
另用注射器在小公鸡（Gallus sp.）翅静脉处取2 mL血液作对照用。
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当前位置生化试剂其它鲑鱼精DNA
外观：白色线状
特性：Linkage：Formerly listed as Tye III
溶解性：溶于水参考浓度2mg/ml
From Sigma D1626
Salmon DNA 的配制：
组份浓度10 mg/ml Salmon DNA ;配制量约100 ml
配制方法:
1. 称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中加入约200 ml的TE Buffer。
2. 用磁力搅拌器室温搅拌2～4小时溶解后加入4 ml的5 M NaCl使其终浓度为0.1 M。
3. 用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次。
4. 回收水相溶液后使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次以切断DNA。
5. 加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。
6. 离心回收DNA后溶解于100 ml的去离子水中测定溶液的OD260值。
7. 计算溶液的DNA浓度后稀释DNA溶液至10 mg/ml。
8. 煮沸10分钟后分装成小份(1 ml/份)。
-20℃保存。
9. 使用前在沸水浴中加热5分钟后迅速冰浴冷却。