实验六 细菌大小的测量和放线菌的形态观察
华南理工大学数字通信原理实验思考题参考答案
华南理工大学数字通信原理实验思考题参考答案第一篇：华南理工大学数字通信原理实验思考题参考答案AMI、HDB3码实验1、说明AMI码和HDB3码的特点，及其变换原则。
回答：AMI码的特点：1、无直流成分，低频成分也少，高频成分少，信码能量集中在fB/2处；2、码型有了一定的检错能力，检出单个误码；3、当连0数不多时可通过全波整流法提取时钟信息，但是连0数过多时就无法正常地提出时钟信息。
变换规则：二进码序列中“0”仍编为“0”；而二进码序列中的“1”码则交替地变为“+1”码及“-1”码。
HDB3码的特点：1、无直流成分，低频成分也少，高频成分少，信码能量集中在fB/2处；2、码型有了一定的检错能力，检出单个误码；3、可通过全波整流法提取时钟信息。
变换规则：(1)二进制信号序列中的“0”码在HDB3码中仍编为“0”码，二进制信号中“1”码，在HDB3码中应交替地成+1和-1码，但序列中出现四个连“0”码时应按特殊规律编码；(2)二进制序列中四个连“0”按以下规则编码：信码中出现四个连“0”码时，要将这四个连“0”码用000V或B00V取代节来代替(B和V也是“1”码，可正、可负)。
这两个取代节选取原则是，使任意两个相邻v脉冲间的传号数为奇数时选用000V取代节，偶数时则选用B00V取代节。
2、示波器看到的HDB3变换规则与书本上和老师讲的有什么不同，为什么有这个差别。
回答:示波器上看到的HDB3编码器的输出P22点的波形比书本上的理论上的输出波形要延时5个码位。
原因是实验电路中采用了由4个移位寄存器和与非门组成的四连零测试模块去检测二进制码流中是否有四连零，因此输出的HDB3码有5个码位的延时。
3、用滤波法在信码中提取定时信息，对于HDB3码要作哪些变换，电路中如何实现这些变换。
回答:首先，对HDB3码进行全波整流，把双极性的HDB3码变成单极性的归零码，这个在电路上是通过整流二极管实现的；然后，把归零码经晶体管调谐电路进行选频，提取时钟分量；最后，对提取的时钟分量进行整形来产生定时脉冲。
实验六+放线菌、霉菌形态的显微观察(张理珉)
子座：由菌丝集结 而成的、在其内部或 外部形成繁殖细胞的 褥座
典型例子：冬虫夏草
冬虫夏草
冬虫夏草，是麦角菌科真菌冬虫夏草感染寄 生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫，以其体内的有机物 质作为营养能量来源进行寄生生活，经过不 断生长发育和分化后，最终菌丝体扭结并形 成子座伸出寄主外壳，从而形成的一种特殊 的虫菌共生的生物体
①沸腾前勤搅拌，以免煮糊；
②沸腾后不要过分搅拌，以免搅碎马铃薯， 造成过滤困难，滤液不清；
③煮沸后注意把漂浮的泡沫去除。
察氏（Czapek）培养基配方：
此培养基主要用于霉菌培养，为合成培养基，是霉 菌形态学特征观察必须做的培养基之一。
NaNO3
2g
蔗糖
30g
K2HPO4
1g
琼脂
20g
KCl
0.5g
实验内容一
培养基和实验物品的准备
各组需要准备的培养基和实验物品
高氏1号固体平板培养基——1皿/组，全班共 计16皿，全班统一准备；
PDA固体平板培养基（3皿/组，20ml/皿）— —200ml，全班共计8组（一半准备）
察氏固体平板培养基（3皿/组，20ml/皿）— —200ml，全班共计8组（另一半准备）
3、可以非破坏连续观察相应结构的形成过 程（发育过程）。
目的要求
掌握观察放线菌形态的制片技术（扦 片法），并观察其基本形态特征
了解观察霉菌形态的制片技术（小培 养技术和三点点植技术），并用直接 制片观察其基本形态特征
实验内容
放线菌形态的观察（个体形态）—— 扦（插）片法 显微观察放线菌的三种菌丝形态特征
玻璃纸法：——透明的半透膜（醋酸纤维素）， 用于透析培养；
印片法：—— 盖玻片（需要加热）、透明胶带 （条），粘附作用。
放线菌的形态观察实验报告
放线菌的形态观察实验报告放线菌的形态观察实验报告放线菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，具有丰富的多样性和重要的生物学功能。
本次实验旨在通过对放线菌的形态进行观察，了解其基本特征和生长习性。
以下是实验过程和观察结果的详细描述。
实验材料和方法：1. 实验材料：放线菌培养基、无菌培养皿、无菌匙、显微镜、石英片。
2. 实验方法：a. 取一块无菌培养皿，将放线菌培养基倒入培养皿中，待其凝固。
b. 使用无菌匙，将待观察的放线菌菌落划入培养基表面，尽量避免交叉污染。
c. 将培养皿盖好，放置在恒温箱中，温度设定为28摄氏度。
d. 每隔一段时间，取出培养皿进行观察，使用显微镜观察放线菌的形态特征，并用石英片进行取样。
实验观察结果：1. 放线菌的形态特征：a. 放线菌呈现为长而细的菌丝状，类似于细长的线状结构。
b. 放线菌的菌丝通常呈现分枝状，形成复杂的网络结构。
c. 放线菌的菌丝颜色多样，包括白色、黄色、红色等，具有一定的色彩变异性。
d. 放线菌的菌丝表面常常有颗粒状物质附着，形成颗粒状结构。
2. 放线菌的生长习性：a. 放线菌生长缓慢，通常需要较长时间才能形成可见的菌落。
b. 放线菌的菌落呈现不规则形状，边缘模糊不清，有时会形成分支状的菌落。
c. 放线菌的菌落表面通常光滑而湿润，有时会有微小的颗粒状结构。
d. 放线菌在培养基上生长的过程中，会逐渐扩散并形成新的菌落。
3. 放线菌的细胞结构：a. 放线菌的菌丝由一系列细胞组成，细胞间通过连接点相互连接。
b. 放线菌的细胞内含有细胞质和细胞核，细胞核通常位于细胞中央。
c. 放线菌的细胞质内含有丰富的有机物质和细胞器，包括线粒体、内质网等。
实验讨论和结论：通过对放线菌的形态进行观察，我们可以发现放线菌具有独特的细胞结构和生长习性。
放线菌的菌丝状结构和分枝状特征使其能够在土壤中广泛分布，并与其他微生物相互作用。
放线菌的色彩变异性可能与其生长环境和代谢产物有关，这也为进一步研究放线菌的生态功能提供了线索。
环境微生物实验问题与答案
环境微生物实验问题与答案一、光学显微镜的操作及细菌单染色1、为什么油镜的放大倍数比普通物镜大？答：油镜能减少光的折射，进而提高视野的亮度；通过提高显微镜的数值口径增加显微镜的分辨力。
2、数值口径的表达公式？答案：N.A=n ×sin α，n为介质折射率；α为光线最大入射角的半数。
3、显微镜数值口径与分辨力的关系？答案：分辨力是指显微镜能辨别两点之间最小距离的能力，它与光的波长成反比，与数值口径成正比。
4、油镜的使用与普通物镜有何不同？答案：油镜必须借助于光折射率等于或接近于玻璃的试剂，如香柏油等才能使用，而普通物镜则不需要；油镜是由100×物镜与香柏油构成，而普通物镜则限于10×物镜、40×物镜等。
5、使用油镜时应特别注意什么？答案：上下调节镜头时应使用微螺旋，否则容易损坏镜头；应使油镜始终浸泡在香柏油中，否则就不是油镜；使用完毕后，必须用搽镜纸沾取二甲苯等有机溶剂搽去残留的油迹，否则会玷污油镜。
6、单染色的原理是什么？答案：主要基于微生物细胞能与各种染料进行不同程度地结合。
7、单染色过程中，为什么干燥固定？答案：因为通过干燥可以使菌体蛋白变性，细胞质凝固，进而可以使菌体紧密地附着于载玻片表面。
8、单染色过程中，为什么水洗时水流要缓慢地从载玻片上端流下？答案：因为如果水流直接冲洗有菌部位，容易使菌体被冲洗掉。
9、为什么载玻片要完全干燥后，才能使用油镜？答案：因为香柏油与水不相溶，容易造成光线发生折射或散射，一方面无法构成油镜，另一方面也会降低视野的亮度。
二、放线菌形态观察与细菌革兰氏染色1、革兰氏染色的原理是什么？答案：对于G+细菌来说，当用乙醇脱色时，由于肽聚糖含量高，网孔小，再加上脂量低，所以乙醇脱色后，进一步地缩小了网孔，结晶紫-碘复合物无法脱出，第二次用番红染色时无法着色，进而呈紫色；对于G-细菌来说，当用乙醇脱色时，由于肽聚糖含量低，网孔大，再加上脂量高，所以乙醇脱色后，进一步地扩大了网孔，结晶紫-碘复合物被脱出，第二次用番红染色时着色，进而呈红色。
微生实验报告 2012.10.24 实验三 放线菌的形态观察
微生实验报告姓名：王晶晖专业年级：2011级生物技术学号：040312011032实验六放线菌的形态观察一、实验目的（1）用玻璃纸琼脂透析培养法及斜插片培养法观察放线菌的自然生长形态；（2）用染色法观察放线菌菌丝体二、实验原理放线菌是一类主要呈丝状生长和以孢子形式进行繁殖的革兰式阳性细菌，放线菌大多数能形成菌丝体，紧贴培养基表面或渗入培养基生长的叫基内菌丝，基内菌丝生长到一定阶段还向空气中生长出气生菌丝，气生菌丝可进一步分化产生孢子丝和孢子。
孢子丝依种类的不同，有直形、波曲、螺旋形。
放线菌的孢子有球形、椭球形、杆状或柱状等。
放线菌自然生长的个体形态观察多用玻璃纸琼脂透析培养法。
玻璃纸具有半透膜特性，其透光性与载玻片基本相同，采用玻璃纸琼脂平板透析培养法，能使放线菌生长在玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取小片，贴放在载玻片上，用显微镜镜检可观察到自然生长的放线菌个体形态。
采用斜插片培养法也能观察放线菌的个体形态。
将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。
观察时，轻轻取出盖玻片，置于玻片上直接镜检，可以观察到放线菌自然生长状态下的形态特征。
三、实验器材1．菌种：培养5~7d的5406放线菌（细黄链霉菌）（Streptomyces microflavus）的斜面菌种与平板培养物，小单孢菌（Micromonos）斜面菌种。
2．培养基：高氏一号琼脂培养基。
3．试剂及器材：无菌平皿，玻璃纸，9mL无菌水若干只，酒精灯，火柴，接种铲，接种环，镊子，玻璃涂布棒，1mL无菌吸管，剪刀，载玻片，石炭酸复红染色液，双层瓶，显微镜。
四、实验方法（一）玻璃纸培养法1．将玻璃纸剪成培养皿大小，用旧报纸隔层叠好后灭菌。
2．将放线菌斜面菌种制成103/mL的孢子悬液。
3．将高氏一号琼脂培养基融化后在火焰旁倒入无菌培养皿内，每皿倒入15mL左右，待培养基凝固后，在无菌操作下用镊子将无菌玻璃纸覆盖在琼脂平板上即制成玻璃纸琼脂平板培养基。
实验5-放线菌形态观察
实验六放线菌的形态观察；霉菌子实体、分生孢子及菌落形态观察Ⅰ放线菌的形态观察一、目的要求1、学习并掌握观察放线菌的操作方法。
2、巩固掌握放线菌的形态特征。
二、实验原理放线菌是单细胞原核微生物。
菌丝无隔、分枝、纤细，分为生长于培养基内或匍匐于培养基表面的、从培养基吸取营养物质的基内菌丝，以及伸出培养基表面的气生菌丝。
气生菌丝的上部分化出孢子丝，呈螺旋状、波纹状，或分枝状等，孢子丝的着生方式因种而。
放线菌多可产生色素，菌丝呈各种颜色，有的放线菌能产生水溶性色素分泌至培养基中使培养基变色。
孢子丝长出各种形态的孢子，孢子有不同的颜色。
放线菌的菌落在培养基上着生牢固，与基质结合紧密，难以用接种针挑起。
而且由于有大量孢子存在，因而表面呈干粉状，使得易于与其他类型的微生物相区别。
放线菌的形态特征是其菌种鉴定与分类的重要依据。
三、实验器材1、菌种未鉴定放线菌菌株；2、仪器显微镜；3、材料玻璃纸、载玻片、盖玻片，镊子、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯。
4、染料石炭酸复红染色液。
四、操作步骤1、观察自然生长状态的放线菌用镊子小心取出用插片法培养的放线菌培养皿中的一张盖玻片，将其背面附着的菌丝体擦净。
然后将长有菌的一面向上放在洁净的载玻片上，用低倍镜、高倍镜观察。
找出3类菌丝及其分生孢子，并绘图。
注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。
2、水封片观察取石炭酸复红染色液一滴滴于载玻片中央，从培养皿中取出插片法培养放线菌的盖玻片，将无菌或菌较少的一面以擦镜纸擦净，并将有菌面朝下，放在载玻片上，浸在染色液中，制成水封片，用高倍镜观察其单个分生孢子及其基内菌丝，并绘图。
五、注意事项1、培养放线菌中要注意，放线菌的生长速度较慢，培养期较长，在操作中应特别注意无菌操作，严防杂菌污染。
并控制培养时间。
2、在镜检观察时，要仔细观察放线菌的营养菌丝、气生菌丝和孢子丝等。
六、实验报告1、绘图绘出观察的放线菌基内菌丝、气生菌丝和孢子丝的形态。
实验六 放线菌、霉菌形态观察
实验六放线菌、霉菌形态观察一、实验目的•学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的基本方法。
•初步了解放线菌和四类常见霉菌的基本形态特征。
二、基本原理放线菌（原核微生物）：由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。
菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基以上的气生菌丝。
有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等。
孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。
气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。
培养和观察方法扦片法：在放线菌平板上扦上盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。
观察时直接取出盖玻片置于载玻片上镜检。
镜检：用镊子拔出盖玻片，擦去背面培养物，将有菌的一面朝上置于载玻片上，直接镜检。
宜用略暗光线观察，低倍镜—高倍镜；染色后观察效果更好。
玻璃纸法：将玻璃纸覆盖在平板表面，接种放线菌、培养，放线菌在玻璃纸上形成菌苔。
观察时取下玻璃纸固定在载玻片上镜检。
镜检：先在载玻片上滴一小滴水，取下玻璃纸，使菌面朝上，使玻璃纸平贴于载玻片上。
优点：可观察到放线菌自然生长状态下的特征，和不同生长期的形态。
注意:整过程勿触动菌面培养物。
印片法：将要观察的放线菌的菌落或菌苔直接印在载玻片上，经染色后观察。
•用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基一起切下，菌面朝上。
另取一载玻片，微热后，轻轻按压菌苔，固定，染色后镜检。
•主要用于观察孢子丝的形态，孢子的排列及其形状等，但形态特征可能有所改变。
霉菌（真核微生物）：霉菌是一类可产生复什分枝的菌丝体的真核微生物的统称。
分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比放线菌粗的多。
培养和观察方法载玻片法：将培养基薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在其间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
观察时直接将载玻片镜检。
玻璃纸法：与放线菌相似。
直接制片观察法：用解剖针挑取少量培养物置于预先滴加乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。
微生物形态观察实验报告
一、实验目的1. 掌握显微镜的使用方法，学会油镜的使用技巧。
2. 了解并掌握微生物的基本形态特征，包括细菌、放线菌、酵母菌和霉菌。
3. 培养无菌操作技能，提高实验操作的规范性和准确性。
二、实验原理微生物是构成生命的基本单位，其形态和结构是微生物学研究的重要内容。
通过显微镜观察微生物的形态，可以了解其生物学特性，为微生物的分类、鉴定和实验研究提供依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的纯培养物。
2. 仪器：光学显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、无菌水、无菌棉签、培养皿、试管等。
四、实验步骤1. 涂片（1）将接种环在酒精灯上灼烧，待其冷却后，蘸取适量纯培养物。
（2）将接种环在载玻片上轻轻涂成薄层。
（3）在涂片上滴加适量无菌水，用无菌棉签轻轻涂抹，使菌体均匀分布。
2. 干燥将涂片放在室温下自然干燥。
3. 染色（1）将干燥后的涂片放入乳酸石炭酸棉蓝染色液中，染色5-10分钟。
（2）用蒸馏水冲洗涂片，去除多余的染色液。
4. 观察（1）将涂片放在显微镜载物台上，先用低倍镜观察，找到菌体后，用高倍镜观察。
（2）观察细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态、大小、颜色等特征。
5. 记录将观察到的微生物形态特征记录在实验报告中。
五、实验结果与分析1. 细菌细菌是单细胞生物，基本形态有球形、杆形和螺旋形。
在显微镜下，观察到细菌的形态和大小，为杆状，大小约为0.5-1.0μm。
2. 放线菌放线菌是丝状真菌，由菌丝构成。
在显微镜下，观察到放线菌的菌丝呈细长状，直径约为2-5μm，菌丝间有横隔。
3. 酵母菌酵母菌是单细胞真菌，个体形态多为卵圆形、圆柱形。
在显微镜下，观察到酵母菌的个体大小约为5-10μm，细胞壁较薄，细胞质透明。
4. 霉菌霉菌是丝状真菌，由菌丝构成。
在显微镜下，观察到霉菌的菌丝呈粗细不一的丝状，直径约为5-20μm，菌丝间有横隔。
六、实验结论通过本次实验，我们掌握了显微镜的使用方法，观察了细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态特征，了解了微生物的基本生物学特性。
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Rhizopus sporangiophores rhizoids are opposite sporangiophores aseptate hyphae
曲霉(Aspergillus)
◆形态特征：菌丝有隔
，具足细胞、分生孢子 梗及膨大顶囊。
◆繁殖：分生孢子
◆应用：酿造酒、酱、
有机酸、酶制剂。
大小表示：宽μm×长μm
2 思考 P48 1、2
二）霉菌的形态观察
根据菌丝的分布和功能分
繁殖器官 气生菌丝 营养菌丝
霉菌的代表属
根霉（Rhizopus)
◆形态特征：菌丝发达。具
假根和匍匐菌丝。
◆繁殖：孢囊孢子、厚垣孢
子、接合孢子。
◆应用：糖化菌（淀粉酶）
、饲料发酵、生产有机酸
根霉假根（Rhizopus sp.）
Aspergillus variecolor
Aspergillus flavus
曲霉
各种曲霉的菌落
青霉
◆形态特征：菌丝有隔
，具分子孢子梗及扫帚 状分生孢子头。
◆繁殖：分生孢子
◆应用：抗生素、酶制
剂、有机酸等。
青霉
毛霉（Mucor)
◆形态特征：菌丝发达
，白色无隔多核。
◆繁殖：孢囊孢子、厚
目镜测微尺每格长度=（镜台测微尺格数/目镜测 微尺格数）xl0um 例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺5小格重 叠，已知镜台测微尺每小格为l0μm，则目镜测微 尺上每小格长度为=5×10μm/5＝10μm 用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺 每小格所代表的长度。
由于不同显微镜及附件的放大倍数不同，因此校正目镜测 微尺必须针对特定的显微镜和附件（特定的物镜、目镜、 镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用，当 更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须重新校正目镜测 微尺每一格所代表的长度。
实验六 细菌大小测量和放 线菌形态观察
Hale Waihona Puke 一 实验目的1 观察放线菌的形态特征； 2 学习接目测微计的校正方法； 3 学习使用显微镜测微尺测定微生物细 胞大小 。
二 实验原理
放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝 可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有 孢子丝三种。放线菌生长到一定阶段，大 部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分 列的方式产生成串的分生孢子。孢子丝形 态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮 生等多种形态。孢子也有球形、椭圆形、 杆状和瓜子状等等。它们的形态构造都是 放线菌分类鉴定的重要依据。
三 实验器材
• • • • 放线菌涂片 显微镜 目镜测微尺 镜台测微尺
四 实验步骤
一）放线菌的形态观察
1．营养菌丝的观察
2．气生菌丝与营养菌丝的比较观察 3．孢子丝及孢子的观察
二）微生物菌体大小的测定
1 目镜测微尺的校正 把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目 镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。先用 低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后， 转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推 动器，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后， 仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间 目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。因为镜台测微尺的 刻度每格长l0μm，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格 所代表的长度。
绘制在显微镜下观察到的放线菌的形态特 征； 通过测量将实验结果填入下列表格
物镜 目尺格数 10× 40× 100×
台尺格数
目尺校正值（μm）
ΔΔ菌大小测定记录（格）
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
平均值
长 宽
结果计算 长μm＝平均格数×校正值 宽μm＝平均格数×校正值
2 菌体大小的测定 将标本先在低倍镜下找到目的物，然后在 高倍镜下用目镜测微尺测定每个菌体长度 和宽度所占的刻度，即可换算成菌体的长 和宽。 求平均值 一般测量微生物细胞的大小，用同一放大 倍数在同一标本上任意测定l0一20个菌体 后，求出其平均值即可代表该菌的大小。
五 实验报告及作业
1 绘图或填表
显微测微计由镜台测微计和目镜测微计两部分组 成。后者可直接用于测量细胞大小。由于目镜测 微计所测量的是微生物细胞经过显微镜放大之后 所成像的大小，刻度实际代表的长度随使用的目 镜和物镜放大倍数及镜筒的长度而改变，所以， 使用前须先用镜台测微计进行标定，求出某一放 大率下，目镜测微计每一小格所代表的长度，然 后用目镜测微计直接测被测对象的大小。镜台测 微计是一块中央有精确刻玻片，刻度的总长为 lmm，等分为100小格，每小格长10um，专用于 对目镜测微计进行标定的。
垣孢子、接合孢子。
◆应用：腐乳：蛋白酶
sporangiophores
no rhizoids
aseptate hyphae