小鼠冠状动脉平滑肌细胞使用说明
小鼠主动脉内皮细胞使用说明
小鼠主动脉内皮细胞小鼠主动脉内皮细胞产品说明：为使能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠主动脉内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠主动脉内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
小鼠主动脉内皮细胞产品简介：1、产品名称：C57小鼠主动脉内皮细胞（Mouse Aortic Endothelial Cells）2、组织来源：C57小鼠心肌主动脉3、产品规格：5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠主动脉内皮细胞简介：心肌主动脉是供给心脏血液的动脉。
主动脉内皮细胞分离自正常C57小鼠心肌主动脉，呈单层扁平分布。
内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成。
它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。
内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至最少的微血管。
本公司生产的C57小鼠主动脉内皮细胞采用混合酶消化而来，细胞总量约为5×105cells/瓶，CK-18免疫荧光鉴定细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
小鼠血管平滑肌细胞原代培养及体外钙化模型的制备
小鼠血管平滑肌细胞原代培养及体外钙化模型的制备徐丽华;严金川;伍超;逯朝阳;王中群;袁伟【摘要】目的:建立一种简单、高效的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)原代培养方法及体外钙化模型.方法:采用改良的组织贴块法培养小鼠VSMCs,经免疫荧光染色法鉴定后,将细胞随机分为对照组和钙化组.采用yon kossa染色及比色法检测两组细胞内钙含量.结果:培养3～5d时,可见细胞从组织块边缘爬出,7～10d后细胞融合成片;免疫荧光染色显示胞质表达特异性α-肌动蛋白;VSMCs培养至第2代细胞纯度达95％;与对照组相比,钙化组细胞的钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性明显增加(P均＜0.05).结论:改良的组织贴块法可获得高纯度的小鼠VSMCs;β-甘油磷酸钠在体外可有效诱导其钙化.%Objective:To establish a simple and efficient method for primary culture of mouse aortic vascular smooth muscle cells (VSMCs) and calcification model in vitro.Methods:The primary VSMCs were harvested by modified tissue-piece inoculation and identified by immunocytochemistry.The established VSMCs were randomly divided into control group and calcification group.Calcification of cells was assayed by von kossa staining and colorimetry method.Results:VSMCs migrated from explants of mouse aorta tissue after 3-5 days of culture.After 7-10 days,VSMCs grew to form a fusing monolayer.Immunofluorescence staining with specific mAb against mouse α-actin demonstrated VSMCs were positive.The cell purity of the 2nd generation of VSMCs was over 95％.Compared with the control group,the calcium content and ALP activity in the calcification group were increased significantly (both P ＜0.05).Conclusion:The method of modified explant-culture successfully established a effective model for primary culture of VSMCs,of which calcification in vitro could be induced by β-glycerophosphate.【期刊名称】《江苏大学学报（医学版）》【年(卷),期】2014(024)002【总页数】4页(P110-113)【关键词】血管平滑肌细胞;原代培养;钙化【作者】徐丽华;严金川;伍超;逯朝阳;王中群;袁伟【作者单位】江苏大学附属医院心内科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院心内科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院心内科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院心内科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院心内科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院心内科,江苏镇江212001【正文语种】中文【中图分类】R543血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）是血管壁的重要组成部分，通过协调血管收缩和舒张，控制血管压力和流速。
小鼠主动脉平滑肌细胞取材步骤
小鼠主动脉平滑肌细胞取材步骤嘿，朋友们！今天咱就来讲讲小鼠主动脉平滑肌细胞取材那些事儿。
你想想看，这小鼠主动脉平滑肌细胞就像是藏在小鼠身体里的小宝贝，咱得小心翼翼地把它们给找出来。
首先呢，你得准备好各种工具，这就好比战士上战场得有趁手的兵器呀！什么手术剪啦、镊子啦，都得准备齐全咯。
然后就是抓小鼠啦，这小鼠可机灵着呢，可得费点功夫抓住它。
抓住后把它固定好，可别让它乱跑乱动，不然咱这工作可没法开展呀。
接下来，就该动真格的啦！用手术剪剪开小鼠的胸腔，哎呀，这一步可得小心再小心，别伤着那些咱们要找的宝贝细胞呀。
就好像拆礼物一样，得轻轻地、慢慢地打开。
找到主动脉后，仔细地把周围的组织清理干净，这就像是给宝贝打扫房间一样，得弄得干干净净的。
然后呢，用镊子小心地把主动脉取出来，这时候你的手可得稳如泰山呀，千万别抖。
取出来后，把主动脉放在合适的溶液里，让它舒舒服服的。
这就好比给小宝贝找了个温暖的小窝。
再之后呢，就是要把平滑肌细胞从主动脉上分离出来啦。
这可是个精细活儿，就跟雕刻大师在雕琢一件艺术品似的，得全神贯注。
你说这是不是挺有意思的？就像一场小小的冒险，在小鼠的身体里寻
找那些神奇的细胞。
咱做这个可不能马虎，每一步都得认真对待。
要是不小心弄错了一步，那可能就前功尽弃啦！就像建房子，一块砖没放好可能整个房子就不稳咯。
总之呢，小鼠主动脉平滑肌细胞取材虽然有点麻烦，但只要咱认真、细心，就一定能把这些小宝贝给成功找出来！这可是为了咱们的实验、咱们的研究呀，可不能马虎！加油吧，朋友们！。
平滑肌细胞培养方法
平滑肌细胞培养方法
1.平滑肌细胞培养基本介绍
平滑肌细胞是一种广泛存在于人体的微小细胞，它们在舌头、咽喉、唾液腺、支气管、胃肠道等部位有分布。
主要作用是运输氧气，调节呼吸、控制血管压力，调节胃肠道收缩等。
平滑肌细胞在心血管病、恶性肿瘤、胃肠道疾病及甲状腺功能紊乱方面有诸多应用，因此，平滑肌细胞的培养方法十分重要。
2.平滑肌细胞培养步骤
（1）切取肌组织，从人体和动物肠道中切取肌肉组织，如舌苔腺或食管。
（2）洗涤组织：将取出的肌肉组织放置于容器中，加入能够破坏真菌等细菌的生物消毒液，用弱酸
洗涤细胞。
（3）离心：将洗涤过的肌组织穿过45μm滤网，净化血清及消毒液，用1000-3000×g的离心力、37℃的低温离心过滤和洗涤，保证细胞的活性。
（4）脱管：将离心过滤和洗涤过的细胞放入培养管中，用0.125%葡萄糖胰酶液将细胞脱管，然后20%牛血清 or 小鼠血清分散离细胞，取离心的物质收集细胞悬液。
3.平滑肌细胞培养培养基的配制
（1）细胞培养基的选择：具有细胞活力的DMEM、RPMI-1640等哺乳动物细胞培养基可以
分别作为基础培养基。
（2）培养基中添加抗生素：如卡那霉素、链霉素、林可霉素等，防止杂菌污染。
（3）添加特定生长因子：如胰岛素、EGF、HCF 等，以促进细胞生长。
小鼠冠状动脉内皮细胞使用说明
小鼠冠状动脉内皮细胞小鼠冠状动脉内皮细胞产品说明：为使客户能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠冠状动脉内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠冠状动脉内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
小鼠冠状动脉内皮细胞产品简介：产品名称：小鼠冠状动脉内皮细胞（Mouse Coronary Artery Endothelial Cells）组织来源：小鼠冠状动脉产品规格：5×105cells/25cm2培养瓶小鼠冠状动脉内皮细胞简介：冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。
冠状动脉内皮细胞分离自正常小鼠冠状动脉组织，呈单层扁平分布。
内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成。
它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。
内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至最少的微血管。
小鼠阴茎血管平滑肌细胞介导ED的研究
小鼠阴茎血管平滑肌细胞介导ED的研究近年来，随着人们生活水平的提高，男性勃起功能障碍的发病率也越来越高。
勃起功能障碍，也即勃起功能障碍症，或称为阳痿，是指男性在性兴奋和心理刺激下，无法使阴茎勃起硬度足以完成性交，或勃起持续时间不足以完成性交，造成男性性生活满意度下降。
根据研究发现，勃起功能障碍并非是单一的疾病，它可能由许多因素导致，其中包括糖尿病、高血压、精神疾病和代谢疾病等等。
然而，最近的研究表明，小鼠阴茎血管平滑肌细胞可能是导致勃起功能障碍的一个重要因素。
下面我将就此进行深入介绍。
一、小鼠阴茎血管平滑肌细胞的作用小鼠阴茎血管平滑肌细胞是组成阴茎海绵体的主要 cell 类型。
阴茎海绵体是阴茎内的一个柔性组织，其内有很多的血管，平滑肌细胞位于海绵体内部的血管壁上。
经实验表明，小鼠阴茎血管平滑肌细胞的收缩和松弛状态是影响勃起功能的一个重要因素。
二、小鼠阴茎血管平滑肌细胞与勃起功能障碍的关系勃起功能是阴茎在性刺激下的生理反应，其主要是由阴茎海绵体平滑肌细胞的松弛所引起的。
近年来，许多研究表明，小鼠阴茎血管平滑肌细胞的功能异常可能导致勃起功能障碍的发生。
具体表现为：在小鼠阴茎血管平滑肌细胞中，缺少了一种名为 ROS 的分子，这个分子可以促进平滑肌细胞的松弛。
缺失 ROS 分子，就会使得海绵体中的平滑肌细胞不能完全舒张，继而影响勃起功能。
此外，多项研究发现，小鼠阴茎血管平滑肌细胞的变性也可能导致勃起功能障碍的发生。
三、研究小鼠阴茎血管平滑肌细胞的机制由于小鼠阴茎血管平滑肌细胞的功能与勃起功能紧密相关，因此研究其机制非常重要。
从细胞的角度来看，小鼠阴茎血管平滑肌细胞的功能主要受到几种分子的调控。
比如，一些 vasoactive 的分子，比如硝酸酯类化合物和孕胎素等，可以作为平滑肌细胞舒张剂，从而增强勃起功能。
而另外一些物质，比如 G-蛋白和磷脂酰肌醇三磷酸等，都可以调节小鼠阴茎血管平滑肌细胞的兴奋和缩放。
平滑肌细胞培养实验步骤解读
平滑肌细胞培养实验步骤解读原代平滑肌细胞培养Protocol实验准备：器材：注射器（10mL），玻璃吸管，胶头（用于细脚吸管，吹匀组织块用），枪头（蓝色、黄色），移液器（1000μL，100μL），电动移液器，玻璃培养皿（2-3个），小烧杯（10 mL或5 mL），青霉素瓶（配鼠尾胶原），剪刀（大，小，弯）多把，镊子（大，小，弯）多把，纱布，六孔板（真空包装），托盘（放老鼠），酒精棉球，乳胶手套试剂：平滑肌细胞专用培养基，生理盐水，D-hank’s 液，鼠尾胶原，戊巴比妥钠（麻醉用），75%酒精步骤：1. 高压灭菌实验所需器材，超净台紫外照射30mins，吹风；2. 配制鼠尾胶原应用液，一般1:15-1:19稀释，六孔板中每孔加入1mL稀释液待用（可省去）；3. 大鼠（200g左右，一百五六十克较好）腹腔注射一定体积戊巴比妥钠（0.5mL/100g）麻醉，麻醉好后将大鼠全身（尤其是胸腹部）用酒精棉球擦拭干净，放入托盘置于超净台中紫外照射15mins左右，开始试验；4. 用已消毒的剪刀将大鼠腹部表皮剪开，充分暴露出整个胸部，再换用干净的剪刀打开胸腔。
将肝脏及肺脏等组织拨开（小心操作以避免伤到血管）。
用小弯镊及小直镊分离胸主动脉外壁贴附的结缔组织及外膜等。
分离干净后，用眼科剪小心剪断血管，去除血管中的血，置于干净玻璃培养皿中；5. 用生理盐水多次冲洗分离出来的血管。
冲洗干净后，将血管剪开，小心刮除血管内膜，去掉内皮细胞；6. 将处理好的血管放入平滑肌细胞专用培养基（约200μL）中，用眼科剪将组织尽量剪碎成1mm3大小的小块，用细脚吸管吹匀后，均匀种入加了鼠尾胶原的六孔板中；7. 用黄枪头小心吸弃多余的液体（避免将组织块吸起来），然后将六孔板盖好颠倒放在培养箱中约2h（待组织块粘牢培养板底）后，再加入培养基；8. 过3-4d后拿出细胞在显微镜下观察，看其是否已长出。
改良组织块贴壁法培养小鼠主动脉血管平滑肌细胞及生物学鉴定
分 离小 鼠胸 、 腹主动脉 ， 采 用 改 良组 织 块 贴壁 法 获得 主 动脉 ＶＳ ＭＣ， 胰 蛋 白酶 消化 传 代 ， 差 速 贴 壁
科 学研 究 提 供 实验 材 料 。 方 法
法进行细胞纯化 ， 倒 置 相 差 显 微 镜 观 察 细 胞 形 态及 生 长 情 况 ， 并 用 苏木 素一 伊 红（ ＨＥ ） 染 色法 和 免 疫 荧光 法进 行 鉴 定 。 结 果 该 方 法 成 功 分 离 出小 鼠 主 动 脉 Ｖ Ｓ ＭＣ， 细胞 生 长 旺盛 ， 活 性 良好 ， 呈放 射 状 、 典型“ 峰一 谷” 样 生长 ， ＨＥ 染 色细 胞 呈 梭 形 ， 细胞 质 丰 富 ， 核 大而圆形或椭圆形， 细 胞 免 疫 荧光 显 示 特 异 性 的 细 胞 质 内 平 滑肌 肌 动蛋 白 阳性 表 达 。 结论 本方法简单、 经济 、 可靠， 可 在 体 外
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小鼠冠状动脉平滑肌细胞
小鼠冠状动脉平滑肌细胞产品说明：
为使客户能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠冠状动脉平滑肌细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠冠状动脉平滑肌细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
小鼠冠状动脉平滑肌细胞注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
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