实训17羊的胚胎移植技术课件.

2.发情鉴定和配种 用试情公羊（带试情布或结扎输精管）进行试情，试情
公羊和母羊的比例1：40~50。被公羊追逐的母羊不躲闪、能 站定接受爬跨者定为发情。 FSH注射完毕后，每间隔6小时~8小时试情，试出的发情供体 立刻注射促黄体素100单位，或注射促排3号0.2微克后进行 本交配种，12h后复配。受体羊发情不配种，等待与其发情 同期的供体羊的胚胎。
6.手术后处理 供体要注射PG0.1~0.2mg,消除黄体，发情后可配种。 四、实训报告 1.总结手术法和胚胎移植的程序和主要技术环节。 2.填写附件表格内容。
实训十七、 羊的胚胎移植技术
实训十七、 羊的胚胎移植技术
一、实训目的 通过应用激素对羊进行超数排卵及同期发情处理，以及
手术法采胚、检胚、移植全过程的实习，师生可以共同准备 并完成羊胚胎移植全过程的操作，让学生练习超数排卵、同 期发情、人工授精和本交配种、手术采胚、移植、胚胎鉴定 和冲胚液配制等基本操作，基本掌握动物胚胎移植程序的主 要技术环节操作要领。
三、方法步骤 1.同期发情与超数排卵处理 （1）绵羊超排方案 （2）山羊超排方案FSH+CIDR+PG法 在供体羊发情周期的任何一天（0天），在母羊阴道内
子宫颈口外放置CIDR或海绵栓，第9天更换新栓，第13-15 天开始减量注射FSH 4天，第6次注射FSH时注射PG 1 支， 第7次注射时撤栓。
二、材料与器械 1.选择健康、营养良好、无繁殖疾病、生殖功能正常的
母羊，做供体羊和受体羊。 2.药品：PMSG、FSH、LH、PGF2α、静松灵注射液、普鲁
卡因注射液、PBS冲卵液、胚胎保存液、抗菌素等。 3.器械：羊用冲卵管、注射器、输胚器、连续变倍体视
显微镜、腹腔镜、集卵杯、吸卵管、羊手术台（2个）、手术 刀柄（片）止血钳、持针钳、肠钳、帕巾钳、剪、镊子、创 布、缝合针等两套。
套管针从子宫角中段向宫管结合部方向扎进子宫腔，边退套 管针的内芯针边进套管，避免扎穿子宫壁。用小血管夹将宫 管结合部夹住，避免冲卵液流向输卵管。用吸有50毫升冲卵 液的注射器接套管，匀速推入冲卵液30毫升～50毫升冲洗子 宫角，胚胎随冲卵液经过采胚管回收到集卵杯中。推完冲卵 液后再打入10毫升空气，然后放掉气囊空气，撤出采胚管、 小血管夹、套管针。同法操作另一侧子宫角。
Biblioteka Baidu
3.手术法子宫角冲胚 由于羊无法进行直肠检查，手术前应用腹腔镜技术检
查供体和受体的卵巢和子宫，将超排反应好的供体羊进行 冲胚手术。将供体羊麻醉后，在腹中线或腹侧作一切口， 牵出子宫角，用直头止血钳在一侧子宫角体部扎一小孔插 入采胚管，使采胚管前端伸向子宫角前段1/2处～1/3处。 拔出采胚管内芯，向采胚管的气囊注入4毫升～6毫升空气 ，将采胚管固定在子宫腔内。
4．检胚及胚胎鉴定 将集卵杯置于显微镜下，放大10倍～20倍，沿集卵杯底部
的方格检胚。胚胎一般沉于底部，是外层有透明带的球形体， 它在冲卵液中的折光性较其它不规则组织碎片强，色调灰色， 直径140微米～185微米。发现胚胎后，用吸胚管将胚胎移到无 菌培养皿内的保存液中进行质量鉴定。
5.移植 将经过鉴定的胚胎移植到卵巢上有正常黄体的受体羊子宫角内。