药物的定性鉴别

实验三.天然药物化学成分的定性鉴别

实验三、天然药物化学成分的定性鉴别一、实验目的1.通过实验掌握常见几类化学成分的鉴别特征；2.熟悉各类化学成分定性鉴别的意义；3.了解各类化学成分定性鉴别的一般规律和方法；二、实验原理化学定性分析是指利用某些化学试剂能与中药中的某种或某类化学成分产生特殊的气味、颜色、沉淀或结晶等反应，作为鉴定中药品种的手段。

优质中药的专属性成分，也可作为质量评价的特征之一。

在对中药进行化学定性分析时，可用其提取液、粉末或切片等来进行。

如将化学试剂直接加到中药表面、切片或粉末上，观察产生的结晶（用显微镜观察）以及特殊的颜色反应；取切片或粉末也可装置在玻片或滤纸上，滴加相应的试剂进行直接观察；取适量中药粉末于小试管中，加适当溶剂提取其化学成分，然后将溶液滴于玻片上、滤纸上或加入小试管中，再滴加一定的化学试剂并观察其现象；利用微量升华法，将中药中可升华的成分分出，加适当的试剂观察其化学反应现象等。

三、仪器、材料与试剂（略）四、实验步骤1.含生物碱类成分中药的鉴定（1）取附子粉末约0.1g置试管中，加乙醇5mL，在水浴上加热20min，时时振摇，滤过，滤液蒸干，加2%醋酸溶液2mL，搅拌，滤过，滤液中加碘化汞钾试液两滴，即发生黄色沉淀。

（2）取延胡索粉末2g置小烧杯中，加0.25mol/L硫酸溶液20mL，振摇片刻，滤过。

取滤液2mL，加1%铁氰化钾溶液0.4mL与1%三氯化铁溶液0.3mL的混合液，即显深绿色，渐变深蓝色，放置后底部有深蓝色沉淀。

另取延胡索粉末0.2g，加稀醋酸溶液5mL，在水浴上加热5min，滤过。

取滤液1mL，加碘化铋钾试液1-2滴，显红棕色；另取滤液1mL，加碘化汞钾试液1-2滴，显淡黄色沉淀。

（3）取黄连粉末置载玻片上，加乙醇1-2滴及30%硝酸一滴，加盖玻片，放置片刻，镜检，有黄色针状或针簇状结晶析出，加热或放置，结晶消失并显红色。

（4）取槟榔粉末0.5g，加水3-4mL，加5%硫酸溶液一滴，微热数分钟，滤过，取滤液一滴于载玻片上，加碘化铋钾试液一滴，即显混浊，放置后，置显微镜下观察，有石榴红色的球晶或方晶产生。

药物的鉴别试验方法及原理

第一章药物的鉴别试验第一节概述依据药典进行的药物分析主要有三大项：鉴别、检查和含量测定。

药物的鉴别试验（identification test）是用于鉴别药物的真伪，在药物分析中属首项工作，只有证实被分析的药物是真的，才有必要接着进行检查、含量测定。

药典所收载的药物项下的鉴别试验方法，仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证实是否为其所标示的药物。

它与分析化学中的定性鉴别有所区别。

这些试验方法不能赖以鉴别未知物。

原料药：鉴别试验结合性状项下的外观和物理常数进行确证。

一、鉴别的项目（一）性状药物的性状反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、嗅、味、溶解度以及物理常数等。

（二）一般鉴别试验（general identification test）*以药物的化学结构及其物理化学性质为依据，通过化学反应来鉴别药物真伪的。

*无机药物：根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应，并以药典附录III项下的一般鉴别试验为依据，*有机药物：采用典型的官能团反应。

*一般鉴别试验的项目：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、无机金属盐类（钠盐、钾盐、锂盐、钙盐、钡盐、铵盐、镁盐、铁盐、铝盐、锌盐、铜盐、银盐、汞盐、铋盐、锑盐、亚锡盐）、有机酸盐（水杨酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、苯甲酸盐、酒石酸盐）、无机酸盐（亚硫酸盐或亚硫酸氢盐、硫酸盐、硝酸盐、硼酸盐、碳酸盐与碳酸氢盐、醋酸盐、磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物）。

*一般鉴别试验仅供确认单一的化学药物，如为数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定外，应不适用。

*通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。

例如，经一般鉴别反应的钠盐试验，证实某一药物为钠盐，但不能辨认是氯化钠、苯甲酸钠或者是其它某一种钠盐药物。

要想最后证实被鉴别的物质到底是哪一种药物，必须在一般鉴别试验的基础上，再进行专属鉴别试验，方可确认。

（三）专属鉴别试验（specific identification test）*根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应，来鉴别药物真伪的。

药物的鉴别

专属鉴别试验则是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异来鉴别药物的，以区别同类药物或区别具有相同化学结构的某一个药物，达到最终确证药物真伪的目的。
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三、鉴别方法
鉴别法选用的基本原则： ①方法要有一定的专属性、灵敏性，且便于推广。 ②化学法与仪器法相结合，每种药品一般选用2～4种
方法进行鉴别试验，相互取长补短。 ③尽可能采用药典中收载的方法。
1.有机氟化物
茜素氟蓝硝酸亚铈
氧瓶燃烧
有机氟
无机氟离子 pH4.3
蓝紫色络合物
2. 有机酸盐 (1) 水杨酸
水杨酸 + FeCl3
红色配位化合物紫色配位化合物
(2) 酒石酸盐
供试品溶液（中性）+ 氨制硝酸银
水浴中
银镜
3.芳香第一胺类
供
稀盐酸
试 + 亚硝酸钠
品
碱性-萘酚试液
红色到猩红色
第二章药物的鉴别试验
基本要求一、概述二、药物鉴别的内容三、药物定法
概述
一、药物鉴别试验的目的与特点
药物鉴别是根据药物的组成﹑结构﹑理化性质，利用物理化学及
生物学等方法来判断药物真伪的分析方法。
特点：
目的
①是药检工作中的首先项任务：只有在药物鉴别无误的情况下，才能进行药物的杂质检查、含量测定。
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四、鉴别试验条件
（一）溶液的浓度
溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。（如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中λmax, A, E1%1cm)
（二）溶液的温度
温度过高可使产物分解，导致颜色变浅，甚至观察不到结果。
（三）溶液的酸碱度
试反应物处于活化状态、反应产物处于稳定和以观察状态。

实验三.天然药物化学成分的定性鉴别

实验三、天然药物化学成分的定性鉴别一、实验目的1.通过实验掌握常见几类化学成分的鉴别特征；2.熟悉各类化学成分定性鉴别的意义；3.了解各类化学成分定性鉴别的一般规律和方法；二、实验原理化学定性分析是指利用某些化学试剂能与中药中的某种或某类化学成分产生特殊的气味、颜色、沉淀或结晶等反应，作为鉴定中药品种的手段。

优质中药的专属性成分，也可作为质量评价的特征之一。

在对中药进行化学定性分析时，可用其提取液、粉末或切片等来进行。

如将化学试剂直接加到中药表面、切片或粉末上，观察产生的结晶（用显微镜观察）以及特殊的颜色反应；取切片或粉末也可装置在玻片或滤纸上，滴加相应的试剂进行直接观察；取适量中药粉末于小试管中，加适当溶剂提取其化学成分，然后将溶液滴于玻片上、滤纸上或加入小试管中，再滴加一定的化学试剂并观察其现象；利用微量升华法，将中药中可升华的成分分出，加适当的试剂观察其化学反应现象等。

三、仪器、材料与试剂（略）四、实验步骤1.含生物碱类成分中药的鉴定（1）取附子粉末约0.1g置试管中，加乙醇5mL，在水浴上加热20min，时时振摇，滤过，滤液蒸干，加2%醋酸溶液2mL，搅拌，滤过，滤液中加碘化汞钾试液两滴，即发生黄色沉淀。

（2）取延胡索粉末2g置小烧杯中，加0.25mol/L硫酸溶液20mL，振摇片刻，滤过。

取滤液2mL，加1%铁氰化钾溶液0.4mL与1%三氯化铁溶液0.3mL的混合液，即显深绿色，渐变深蓝色，放置后底部有深蓝色沉淀。

另取延胡索粉末0.2g，加稀醋酸溶液5mL，在水浴上加热5min，滤过。

取滤液1mL，加碘化铋钾试液1-2滴，显红棕色；另取滤液1mL，加碘化汞钾试液1-2滴，显淡黄色沉淀。

（3）取黄连粉末置载玻片上，加乙醇1-2滴及30%硝酸一滴，加盖玻片，放置片刻，镜检，有黄色针状或针簇状结晶析出，加热或放置，结晶消失并显红色。

（4）取槟榔粉末0.5g，加水3-4mL，加5%硫酸溶液一滴，微热数分钟，滤过，取滤液一滴于载玻片上，加碘化铋钾试液一滴，即显混浊，放置后，置显微镜下观察，有石榴红色的球晶或方晶产生。

药物成分、功效、定性鉴别

一、柴胡（抗炎——皂苷）清虚热中药，用于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、脱肛、子宫脱落、月经不调。

柴胡始载于《神农本草经》，列为上品。

化学成分：柴胡其成分主要含柴胡皂苷（saikosapoins a、b、c、d 四种），甾醇，挥发油（柴胡醇、丁香酚等），脂肪酸（油酸、亚麻油酸、棕榈酸、硬脂酸等）和多糖等。

还含黄酮、多元醇、香豆素和微量元素等成份。

大叶柴胡的根和茎中含有柴胡皂甙a、c、d、I，含量高达3.8%。

鉴别：薄层层析样品液：称取该品粉末200 g,加甲醇800 ml,提取至甲醇近无色，减压回收甲醇，得甲醇浸膏，以乙醚脱脂后，乙醚不溶物加水溶解，除去不溶物，用水饱和正丁醇提取3次，分取正丁醇层，水洗一次，回收正丁醇至干，得总皂甙．取少量总皂甙溶于甲醇作为供试液．对照品液：取柴胡皂甙a、c、d加甲醇溶解为对照品溶液．展开：硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（30∶10∶1）展开．显色：晾干后喷1%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸试液，加热到105℃ 5 分钟显色，样品液色谱在与对照品溶液色谱的相应位置，显相同的紫红色斑点．理化鉴别1．取该品粉末0.5g，加水10ml，用力振摇，产生持久性泡沫。

2．取该品粉末0.5g，加甲醇20ml，置80℃水浴回流1 小时，放冷，滤过，滤液浓缩至5ml,滤过，滤液作为供试品溶液。

另取柴胡皂苷a、柴胡皂苷d对照品，加甲醇制成每1ml 各含0.5mg 的混合溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯－乙醇－水(8:2:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，60℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm）下检视。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或黄色荧光斑点。

二、香附（抗炎——香附醇；抗菌——香附挥发油）理气解郁；调经止痛；安胎。

TLC法对制剂中黄芩、甘草、陈皮的定性鉴别方法

黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，以石油醚（０３ ℃～６ ℃）０
一
药品生物制品检定所，薄层扫描法含量测定用，供批号：１７３２０１）橙皮苷对照品（１０２－０４１、中国药品生物制品检定所，鉴别用，供批号：２ —８０）祛痰止咳７１６１；合剂（吉林省吉林市船营区中医院制剂室）其余试；剂均为分析纯。
光仪器厂生产）。
１２试药．硅胶Ｇ薄层板（岛海洋化工厂）黄青；
芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，含量测定供
用，号：１７５２０１）甘草次酸对照品（国批１０１ — ０２２、中
的制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法／ｏ５２ｏ年版《中国药典（部）附录 ⅥＢ试验，一》Ｊ吸取上述三种溶液各１＃，别点于同一以羧甲基纤维素钠为０１分
验，取上述三种溶液各４ｌ分别点于同一用２吸，
氢氧化钠溶液制备的硅胶Ｇ薄层板上，乙酸乙酯以
一
痰止咳的功效；陈皮具有理气健脾，湿化痰的功燥效。该方是在大量临床实践的基础上，以中医辨证为
主，结合现代医学及现代药理研制出的治疗急、慢性
甲醇一水（０１０：１１）７：３为展开剂，展开，出，取晾
干，以１喷％三氯化铝甲醇溶液，热风吹干，紫用置

第三章药物的性状检测和鉴别技术

实例解析
实例3-2：维生素E粉性状描述与分析【性状】本品为白色或类白色的颗粒或粉末
；易吸潮
第二节药物的鉴别技术
鉴别技术
鉴别技术指收载在质量标准正文鉴别项下的药物真伪识别试验技术要求：专属，再现，灵敏，操作简便、快速一般来说，某一项鉴别试验只能鉴别药物的某一特征，不能作为判断药物真伪的唯一依据鉴别往往通过一组试验(2~3条)才能完成
紫外-可见光谱鉴别法
方法： 2. 吸收特征的一致性 (5)利用最大吸收波长和相应吸光度比值的一致性
配制成一定浓度的试液，测定最大吸收波长、最小吸收波长和相应的吸光度计算最大吸收波长与最小吸收波长的吸光度的比值
紫外-可见光谱鉴别法
方法： 2. 吸收特征的一致性 (5)利用最大吸收波长和相应吸光度比值的一致性
性状项确认
原
制
料
剂
药
鉴
鉴
别
别
鉴别项下规定的试验
第一节药物性状检测技术
药物的性状反应了药物特有的物理性质，是药物质量的重要表征之一。
性状项：外观、臭、味、一般稳定性、溶解度以及物理常数。
外观感官一般稳定性
溶解度
盐酸奥昔布宁
外观感官溶解度物理常数
三二一
主
物溶外
理解观
常度感
数
冰水中冷却
沸
沉淀
原理
低温条件下，钠离子与焦锑酸钾试液生产致密的沉淀物
2Na++K2H2Sb2O7
2K++Na2H2Sb2O7
致密沉淀
氯化物的鉴别
方法 (1)氯化银沉淀
供稀硝酸试+ 品硝酸银

药物的鉴别试验

N2+Cl-.
+
+NaOH
+NaCl+2H2O
17
第二章：药物的鉴别试验
第二节：药物试验的项目一般鉴别试验
4.托烷生物碱类此类生物碱中具有莨菪酸结构，有Vitali反应,显紫色。
水解
3HNO3
三硝基衍生物
KOH (C2H5OH)
KOH
深紫色
18
第二章：药物的鉴别试验
第二节：药物试验的项目一般鉴别试验
⑥利多卡因与重金属离子反应
2
H+ +CoCl2
亮绿色细小钴盐沉淀 38
第二章：药物的鉴别试验
第三节：鉴别方法
一、化学鉴别法
沉淀生产反应鉴别法
⑦含氮杂环类的生物碱的沉淀反应
苯并二氮杂类氯氮氟西泮氯硝西泮
+BiI3· + 12W03·Si02
橙红色沉淀灰白色沉淀
托烷类生物碱
阿托品+HgCl2 C2H5OH 黄色
第三节：鉴别方法
呈色反应鉴别法
一、化学鉴别法
⑥含羰基结构的苯肼反应
+ 苯肼
+H2O 苯腙
31
第二章：药物的鉴别试验
第三节：鉴别方法
呈色反应鉴别法
一、化学鉴别法
⑦氨基酸及氨基糖苷类的茚三酮呈色反应
+ 例如：
+CO2+3H2O
左旋多巴
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第二章：药物的鉴别试验
第三节：鉴别方法
呈色反应鉴别法
一、化学鉴别法
硝酸盐: Cu + NO3- H2SO4 Cu(NO3)2+2NO（红棕色蒸气）
Fe2+ +NO3- H2SO4 Fe 3+ +NO（棕色界面）

实验三.天然药物化学成分的定性鉴别

药物的鉴别试验方法及原理

药物的鉴别

实验三.天然药物化学成分的定性鉴别

药物成分、功效、定性鉴别

TLC法对制剂中黄芩、甘草、陈皮的定性鉴别方法

第三章 药物的性状检测和鉴别技术

药物的鉴别试验

第三章药物的性状检测和鉴别技术