组织切片染色技术分析

合集下载

病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果分析

病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果分析

病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果分析
病理技术HE染色是病理学中最常用的染色方法之一,主要用于组织切片的染色,帮助病理医师观察和诊断疾病。

HE染色的步骤相对简单,不仅能更加清晰地显示细胞核和胞质的细胞形态学特征,还能同时显示组织结构、细胞排列和组织成分。

所以,它广泛应用于病理学的初步识别和诊
断中,为后续的专门染色方法和分子生物学检测提供基础。

HE染色主要通过染色剂溶液中的染料与细胞组织中的亲核染料结合,以不同颜色反映出细胞核和胞质的结构和分布,从而帮助医生准确判断和诊断疾病。

在HE染色过程中,可以观察到细胞核的形状、大小和染色性质,以及胞质的颜色和形态。

通过这些特征,医生
可以区分正常细胞和病理细胞,进而判断组织的状态和疾病的类型。

在临床病理实践中,HE染色在不同疾病的诊断中发挥了重要的作用。

在肿瘤病理学中,HE染色能够区分不同类型的肿瘤组织,并确定肿瘤的来源和恶性程度。

在炎症病理学中,HE染色可以显示炎症细胞的浸润和病变组织的病理改变。

在肾脏病理学中,HE染色能够展示肾小球和肾小管的形态学变化,帮助鉴别各种肾脏疾病。

HE染色还可用于鉴别和诊断其他疾病,如肝病、心脏病、神经系统疾病等。

通过观察和分析细胞和组织的形态学特征,医生可以准确判断疾病类型、病变程度和预后。

HE染色具有操作简便、成本低廉、显示效果稳定和观察时间短等优点,因此在病理实验室中被广泛应用。

它也存在一些局限性,例如对细胞器的显示不够清晰、无法区分细胞
类型和组织成分的细微差别等。

病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果分析

病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果分析

病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果分析病理技术HE染色是病理学中常用的一种组织学染色方法,通过染色使组织切片中的细胞和组织结构显色,以便诊断和治疗疾病。

在病理诊断中,HE染色应用广泛,从组织学诊断到肿瘤学诊断,都离不开HE染色的应用。

首先,HE染色可以用于诊断组织学病变。

组织学变化是各种疾病的基础,通过HE染色可以清楚地显示各种组织学病变如细胞的变性、液化坏死、坏死样变等,并可以清晰地显示细胞核的变化,如核的多形性,无菌纺锤形、核分裂等。

通过这些组织学变化,可以对各种疾病进行诊断和鉴别诊断。

其次,HE染色在肿瘤学中的应用占据很大的比重。

肿瘤学是临床病理学中的分支,它主要研究肿瘤的形态学和组织学特征,HE染色是肿瘤学中最主要的诊断手段之一。

通过HE染色,可以直观地显示肿瘤细胞的形态学特征,如形态、核形态、核分裂等等。

还可以对肿瘤的浸润性进行评估,并进一步指导临床治疗。

第三,HE染色对于一些炎症病变的诊断也具有一定的重要意义。

例如,在炎症性肠病的诊断中,通过HE染色可以显示肠壁的组织学结构变化,如肠上皮细胞的增生、异型和破坏,黏液腺和炎性细胞浸润以及淋巴滤泡的反应等。

通过这样的病理变化可以确定是否存在炎症并评估程度。

最后,HE染色在诊断疾病的同时也为研究提供了很多帮助。

通过对HE染色的观察,可以发现某些细胞结构的及时变化,这对于疾病早期诊断和预后判断非常有帮助。

同时,基于对HE染色原理的理解,可以建立不同病理学染色方法,如目前常用的免疫组织化学、原位杂交等等,这进一步促进了疾病的诊断和治疗的发展。

总之,HE染色在病理诊断中具有重要作用,它可以显示组织的细胞和组织学变化,成为病理学诊断的基础。

同时,它也可以提供疾病早期诊断和预后判断等方面的帮助。

随着医学的发展,HE染色在病理学诊断中的应用必将愈发广泛。

组织切片染色方法

组织切片染色方法

组织切片染色方法
《组织切片染色方法》
组织切片染色是一种常用的生物学实验方法,用于观察和研究组织结构和细胞形态。

这种方法可以帮助研究人员了解组织内部的微观结构,进而揭示细胞的功能和特性。

组织切片染色的一般步骤包括固定、切片、染色和观察。

首先,需要将要研究的组织进行固定处理,以保持其形态和结构的完整性。

接下来,将固定好的组织切割成薄片,通常使用微型切片机或切片刀进行切片。

然后,将切片染色,这是为了凸显细胞或组织中的特定结构,通常使用荧光染色剂或荧光蛋白进行染色。

最后,通过显微镜观察染色后的组织切片,以获取想要的信息。

组织切片染色方法有许多种,常见的染色方法包括荧光染色、HE染色等。

荧光染色适用于观察细胞内的荧光标记物,通过激光共聚焦显微镜等高倍显微镜观察细胞内的标记物分布情况。

HE染色是一种常见的组织染色方法,可以将组织中的细胞核染成蓝色,胞质染成粉红色,有助于观察组织结构和细胞形态。

组织切片染色方法在生物学研究中有着广泛的应用,可以用于观察病理组织、细胞分裂、细胞器结构等。

通过这种方法,研究人员可以深入了解生物组织的结构和功能,为科学研究提供重要的数据支持。

总之,《组织切片染色方法》是一种重要的生物学实验方法,通过这种方法可以对组织和细胞进行详细的观察和分析,为生物学研究提供重要的数据和信息。

病理切片 实验报告

病理切片 实验报告

病理切片实验报告引言病理切片是病理学中的一项重要实验技术,通过对组织或细胞进行取样、固定、染色和切片等处理,然后使用显微镜观察和分析来研究疾病的病理变化。

病理切片实验在临床诊断、疾病研究以及药物治疗等方面具有重要的应用价值。

本实验报告旨在通过对病理切片实验的详细描述,介绍其原理、步骤和应用。

方法1. 组织取样首先,从患者身上取得需要研究的组织样本,可以是活体组织或死者遗体组织。

取样时需要注意选择代表性的病变组织,尽量避免破坏组织结构。

取样后立即将组织放入含有生理盐水或缓冲液的容器中,并迅速送至病理实验室。

2. 组织固定取得组织样本后,需要将其进行固定处理,以保持组织结构和形态的原始状态。

常用的固定方法包括福尔马林固定和乙酰化固定等。

实验中选择福尔马林固定,将组织样本完全浸泡在10%福尔马林溶液中,时间通常为24小时。

3. 组织处理在固定后,需要对组织样本进行处理,以便后续的切片工作。

处理包括去水化、透明化和浸渍等步骤。

首先,将固定好的组织样本置于水中进行去水化,去除其中的福尔马林。

接着,使用透明剂(例如醋酸酯类)使组织透明化,以便后续的染色和观察。

最后,使用浸渍剂(例如石蜡)对组织进行浸泡,使其变得坚硬并易于切片。

4. 组织切片在组织处理完成后,需要将组织样本切成薄片,通常为5-10微米厚度。

切片可以使用手工切片刀或者自动化切片机进行。

切片时需要将组织样本固定在切片刀上,并通过微调装置控制切片的厚度和精确度。

5. 组织染色切片完成后,需要对切片进行染色。

染色是为了增强组织结构的对比度,使得细胞和组织的特征更加清晰可见。

常用的染色方法包括血液学染色、组织学染色和免疫组化染色等。

在本实验中,选择常用的血液学染色方法—苏木精-伊红染色。

6. 组织观察染色完成后,可以使用显微镜对切片进行观察和分析。

显微镜可以放大切片中的细胞和组织结构,以便对其进行病理学评估和研究。

结果与讨论通过对病理切片实验的详细操作,我们成功获得了含有病变组织的切片,并进行了染色和观察。

植物细胞学分析之组织切片技术

植物细胞学分析之组织切片技术

植物细胞学分析之组织切片技术一、试剂(1)卡诺氏固定液:无水乙醇与冰醋酸按体积比为3:1混合配制。

(2)1mol/L盐酸溶液:取浓盐酸(比重1.19)82.5ml,加入蒸馏水917.5ml。

(3)醋酸洋红染液:4-5g洋红,冰醋酸45ml,蒸馏水55ml,先将冰醋酸加入蒸馏水中煮沸,然后将火移去,立刻加入洋红,用玻璃棒搅匀溶化,冷却后过滤即成。

(4)70%酒精;95%酒精。

二、细胞分析方法1.有丝分裂全过程的染色体制片方法步骤:取材-预处理-固定-根尖解离1mol/L HCL-醋酸洋红染色-压片(1)发根挑选每份黑麦种子材料25粒,经流水冲洗,放于培养皿内温水浸泡24h。

置于25℃恒温箱中发根。

待根长到1~2cm时,于适宜时间用蒸馏水洗净,将水吸干,剪取根尖0.5~1cm进行预处理。

为获得尽可能多的分裂相,根尖以上午9~10时剪取为宜。

(2)预处理为了有利于有丝分裂中,染色体的观察和计数,通常要对材料进行不同的预处理。

预处理主要通过抑制和破坏纺锤丝的形成,来获得更多的中期分裂相,同时还可以改变细胞质的粘度,促使染色体缩短和分散,便于压片和观察。

将根尖浸于蒸馏水内,1-4℃低温处理24h。

(3)固定材料经预处理后,用流水冲洗2次,然后投入卡诺液(3份甲醇∶1份冰乙酸)中固定26h,用95%的乙醇洗两次,转入70%乙醇中保存备用(4℃)。

固定的目的是:①迅速防止细胞死亡后的变化,如自溶、腐败等,尽量保持生长状态结构。

②使细胞中的蛋白质、脂肪等成分转变为不溶性物质,以保持生前的形态。

③使组织内各种物质成分产生不同的折光率,便于观察和鉴定。

④使不同组织成分对染料有不同的亲和力,便于染色。

⑤防止细胞过度收缩或膨胀,失去原有的形态结构。

(4)解离常用酸解法:从70%乙醇中取出固定好的根尖,用蒸馏水冲洗后,吸水纸吸干,放入盛有1 mol/L的HCl的1.5ml离心管中,60℃水浴,恒温条件下解离10min。

植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用,分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体,因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离,这一操作称为解离。

HE染色方法与步骤吐血整理

HE染色方法与步骤吐血整理

HE染色方法与步骤吐血整理染色是一种常见的实验技术,用于观察和分析生物样品中的细胞或组织结构。

HE染色是一种常用的组织和细胞染色方法,它能够同时染色细胞核和细胞质,因此得名HE(hematoxylin and eosin)染色。

下面是HE染色的步骤:1.染色前的准备工作:-选择合适的组织样品,通常是已固定和包埋的组织切片。

-准备好需要使用的试剂和设备,包括显微镜玻片、切片刀、染色盘、醇和蜡解剂、染色液和显微镜。

-将切片从包埋蜡中去蜡,并通过浸泡在蜡解剂中来溶解蜡质。

2.组织切片的处理:-将组织切片通过水洗涤,去除蜡解剂和剩余的蜡质。

-将切片通过不同浓度的醇溶液进行脱水处理,使得切片逐渐转移到无水状态。

-将脱水处理后的切片通过透明质量更好的试剂(如亚硫酸氢钠或甘油)进行透明处理,以利于细胞的观察。

3.组织切片的染色:-首先进行碱性染色,即将切片浸泡在染色盘中的伊洛酮溶液中,伊洛酮是一种天然的染色物质,能够与细胞核结构中的DNA结合,使细胞核染色为暗蓝色。

-然后进行酸性染色,即将切片浸泡在染色盘中的苏木精溶液中,苏木精是一种带正电荷的染色物质,能够与细胞质结构中的负电荷部分结合,使细胞质染色为粉红色。

4.组织切片的脱水和封片:-将染色后的切片通过不同浓度的醇溶液进行脱水处理,使得切片从水状态逐渐转移到无水状态。

-将切片在醇溶液中固定一段时间,然后转移到透明的试剂(如苏木精和二甲苯混合溶液)中进行浸泡。

- 最后将切片取出,放在显微镜玻片上,滴入固定剂(如Canada Balsam)并加盖玻片,使切片固定在玻片上。

5.显微镜观察和分析:-使用显微镜观察染色后的组织切片,并通过不同增大倍数的镜头进行详细观察。

-根据观察到的细胞和组织结构,进行分析和研究,并将观察结果记录下来。

需要注意的是,HE染色是一种简单、快速且广泛应用的染色方法,但在不同类型的组织和细胞中可能会有不同的染色效果。

因此,在进行HE染色时,需要根据具体实验要求和样品的特点,进行相应的优化和调整。

观察切片实验报告

观察切片实验报告

一、实验目的1. 熟悉切片的制作方法,掌握显微镜的使用技巧。

2. 观察不同组织的切片,了解其结构和功能。

3. 提高实验操作能力和观察分析能力。

二、实验原理切片实验是生物学研究的重要手段之一,通过切片技术将生物组织制成薄片,便于在显微镜下观察其结构和功能。

本实验主要观察动物和植物的组织切片,了解其基本结构和功能。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:兔肝脏、鸭肺、洋葱鳞片叶、植物叶片等。

2. 仪器:显微镜、切片机、载玻片、盖玻片、染色液、酒精、蒸馏水等。

四、实验步骤1. 切片制作(1)取实验材料,用手术刀或解剖刀切成薄片。

(2)将切片放入切片机中,调整切片厚度至1-2微米。

(3)将切片取出,用酒精固定。

(4)将固定后的切片放入染色液中染色,染色时间根据染色液种类和浓度而定。

(5)将染色后的切片取出,用蒸馏水清洗。

(6)将清洗后的切片放入载玻片中,滴加适量的封片剂,盖上盖玻片。

2. 显微镜观察(1)将切片置于显微镜载物台上,调整显微镜光圈和焦距,使图像清晰。

(2)观察不同组织的切片,注意其细胞结构、组织层次和功能。

(3)记录观察到的结构和功能特点。

五、实验结果与分析1. 兔肝脏切片观察(1)细胞结构:兔肝脏细胞呈多边形,细胞核较大,染色质丰富。

(2)组织层次:肝脏组织分为肝小叶和肝索,肝小叶由肝细胞、胆管和血管组成。

(3)功能特点:肝脏具有分泌胆汁、代谢物质、解毒等功能。

2. 鸭肺切片观察(1)细胞结构:鸭肺细胞呈多边形,细胞核较大,染色质丰富。

(2)组织层次:肺组织分为肺泡和肺泡壁,肺泡壁由肺泡上皮细胞和毛细血管组成。

(3)功能特点:肺具有气体交换、呼吸等功能。

3. 洋葱鳞片叶切片观察(1)细胞结构:洋葱鳞片叶细胞呈长方形,细胞核较小,染色质较少。

(2)组织层次:洋葱鳞片叶组织分为表皮、叶肉和叶脉。

(3)功能特点:洋葱鳞片叶具有保护植物体、运输物质等功能。

4. 植物叶片切片观察(1)细胞结构:植物叶片细胞呈长方形,细胞核较小,染色质较少。

Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用

Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用

Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用1. 引言1.1 Masson染色的原理Masson染色是一种常用的组织切片染色技术,广泛应用于肝纤维化的辅助诊断中。

其原理是利用酸性品红染料染色胶原蛋白和肌纤维蛋白,这两种成分在组织切片中呈现出蓝绿色,而细胞核则呈现出红色。

这种染色方法能够清晰地显示出胶原纤维的分布和形态,从而帮助医生判断纤维化程度和类型。

Masson染色通过特定的着色方式可以将不同组织结构和成分区分开来,使得观察者能够更准确地识别有关组织的特征。

在肝纤维化的诊断中,Masson染色通常用于显示胶原纤维在肝脏组织中的沉积情况,帮助医生评估病变程度。

通过观察Masson染色的结果,医生可以判断出肝脏组织中胶原纤维的增多和分布情况,从而判断出肝纤维化的严重程度。

Masson染色的原理是利用不同成分在酸性品红染料染色下呈现出的不同颜色来区分组织结构,从而帮助医生辅助诊断肝纤维化等疾病。

这种染色方法具有简单易行、结果清晰等优点,是肝纤维化辅助诊断中常用的技术之一。

1.2 肝纤维化的概述肝纤维化是指肝脏在长期受损或慢性炎症作用下,纤维组织不断增生,最终导致肝脏结构的改变和功能异常。

其病理特点主要表现为肝小叶结构紊乱,肝细胞损伤和坏死,以及纤维组织增生。

肝纤维化是许多慢性肝病的共同表现,如慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、酒精性肝病等。

在肝纤维化的发展过程中,纤维组织的沉积逐渐增多,形成纤维化带,最终会影响肝脏的正常功能。

临床上,肝纤维化的程度往往反映了肝脏受损的程度和肝功能的恶化程度。

准确评估肝纤维化的程度对于肝病的诊断和治疗具有重要意义。

2. 正文2.1 Masson染色在肝纤维化中的应用Masson染色是一种常用的组织学染色方法,可用于观察胶原蛋白和其他纤维蛋白的沉积情况。

在肝纤维化的辅助诊断中,Masson染色可以帮助医生快速准确地识别肝脏组织中的纤维化程度,并指导后续的治疗方案。

通过Masson染色,医生可以明显看到不同颜色的纤维组织,从而对肝脏的纤维化程度进行评估。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

种微细结构能显现不同颜色,这样在显微
镜下就可显示出组织细胞的各种成分。

染色是制片过程中的一个重要环节
二、染色的目的


将染料配制成溶液
将组织切片浸入染色剂内 经一定的时间,组织或细胞及其他异常的
成分被染上不同深浅的颜色

对光产生不同的折射率 便于在光镜下观察。
三、染色原理
染色的物理作用
2.饱和碳酸锂液: 配制:碳酸锂 1g
蒸馏水(冷) 78ml
3.流水冲洗还原。
二、苏木素-伊红染色液的配制

(四)伊红染液
配方:伊红Y(水溶) 蒸馏水 0.5g∽lg
99ml
若取用伊红Y(醇溶性)应溶于99ml 75%或95%的 乙醇中。
若在伊红液中加入0.5毫升冰醋酸,可加速其染色过
程,并使胞质的色泽更为艳丽。
第二节
常规染色
一、常规染色的概念

在组织制片技术中,常规制片最广泛应用 的是苏木精和伊红染色,称为常规染色 (HE染色),又称普通染色。
二、苏木素-伊红染色液的配制


(一)苏木素染液的配制方法常用的有:
1.哈瑞氏(harris)苏木素染液 最常应用染色时间为5min∽10min 配制
① 蒸馏水
(1)毛细管作用及渗透作用
染色剂与组织细胞没有牢固的结合
(2)吸收作用:又称溶解学说。
组织吸收染色剂,牢固的结合。
组织的着色与溶液的颜色相同。
三、染色原理
(3)吸附作用
是固体物质的特性,即较大的物体能从周围溶液(染
液)中吸附一些小颗粒(化合物或离子)到自身的特性。
细胞中各种蛋白质或胶体有不同的吸附面,因此能选
乙 醇 ( 次
二 甲 苯 ( 次
80%
90%
100%
封 片
3 ×5min
30s
1-3min
30s
5min
2 ×10min
5-15min 脱蜡) , 水 洗Fra bibliotek) , 水 洗
染色的时间,应根据室温,及组织的具体情况来确定, 做之前做预实验。
30s


脱水
透明
封片
在染色后,重新进入酒精和二甲苯,最后用 中性树胶封片,以便长期保存。 * 切片: 固定→梯度酒精上行→二甲苯→石蜡。 * 染色: 石蜡→二甲苯→梯度酒精下行→水。 * 保存: 水→梯度酒精→二甲苯→中性树胶。
② 苏木素 ③ 碘酸钠
1000ml
3g∽5g 1g
④ 钾明矾
⑤ 水醋酸
50g∽80g
20ml
其优点是:配后即可应用染色力较强。 其缺点是:极易产生金属膜沉淀。
二、苏木素-伊红染色液的配制

2.埃利希(Ehrlich),苏木素染液
配制
①无水乙醇 ②甘油 ③苏木精 ④钾明矾 100ml 100ml 2g 2g∽3g
避光保存

流水冲洗
六、染色前后处理

2.除去汞盐沉淀物

对于用升汞固定或含有升汞混合固定液的切片,切片 脱腊后需脱汞(浸入5%碘酒精10min),脱碘(5%硫代 硫酸钠)→流水洗→染色。
六、染色前后处理

3.脱甲醛色素

(1)浓氨水1ml,75%乙醇200ml。切片脱蜡后置溶液 中30min或较久→流水洗→染色。
换新液

3.染色时间的长短需依据染色剂对组织 的染色作用、室温条件、切片厚薄、固定
液类别和染液的新旧而进行相应调节。

4.分化十分重要。 5.还原液不宜过浓 6.伊红宜淡染,复染过深胞核会不清晰, 影响镜检。

7.脱水、透明宜彻底

8.要将组织四周的污染物去掉
9.封固剂要适量

10.染好的切片标签贴牢,编号清楚,
⑤醋酸
5ml∽10ml
置于阳光下自然氧化3个月左右成熟。 其优点是: 染色结果甚佳,贮存愈久染色愈强,而且不 需分色。
二、苏木素-伊红染色液的配制

(二)分化液
1%盐酸酒精,是最常用的分化液。
配方:70%酒精
浓盐酸
99ml
1ml
二、苏木素-伊红染色液的配制

(三)还原液
1.氢氧化氨液:
配方:浓氨水 蒸馏水 1ml 99ml
此种方法无需“分化”,例如,卡红染色。

退行性染色:是先把组织浓染过度,超过所需的
程度,然后再用某些溶液脱去多余的染色剂,以
达到适当的深度,并使不应着色的组织细胞脱色。

这个步骤称为“分化”。
三、染色原理

直接染色,间接染色和媒染剂

直接染色:染色无需第三种物质参加,染色剂和组织 即可直接结合着色。 间接染色:单独染料本身的水溶液或酒精溶液,几乎 不能与组织细胞结合或结合的能力很弱,必须有第三 种成分——媒染剂参与,才能使染色剂与组织细胞有 效地结合起来。 媒染剂:通常是双价或三价金属如铝、铁的硫酸盐或 氧化物。媒染剂在染色中起着架桥作用,既能与染料 结合又能与组织相结合,达到了促进染色的效果。
* 苏木素是碱性染料,蓝紫色,可以使细胞核等着色。被苏木 素着色的结构本身为酸性,具有嗜碱性。
* 伊红是酸性染料,粉红色。可以将大多数细胞的细胞质染成 红色。被伊红着色的结构本身为碱性,具有嗜酸性。 * 不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性。
石蜡切片&HE染色
四、染色注意事项

1.组织切片的脱蜡应彻底 2.苏木素染液使用一段时间后应及时更

(二)染色后的处理

1.脱水
95%乙醇Ⅰ、Ⅱ各5min→100%乙醇Ⅰ、Ⅱ各5min。

2.透明
二甲苯Ⅰ、Ⅱ各5min透明。

3.封固
通常用中性树胶或加拿大树胶加盖玻片封固。
七、染色的注意事项

1.切片脱蜡应彻底。 2.常规染色、特殊染色等,组织要进行固定处理,做酶 反应的组织固定更应严格。凡用含升汞固定液固定的组织,
组织切片染色技术
学习目标
掌握:染色、常规染色的概念;HE 染色的基本步骤。 熟悉:染色的目的、原理;常用染色 术语;染色前后的处理;苏木素-伊 红染色液的配制。 了解:染色的注意事项。
第一节
染色概述
一、染色的概念

就是利用染料在组织切片上给予颜色,使 其与组织或细胞内的某种成分发生作用, 经过透明后通过光谱吸收和折射,使其各


三、染色原理

促染剂

用以加强染料和组织细胞结合能力的物质称为促染剂
促染剂如化学反应中的催化剂,少量存在就有明显的
促染作用。它们的作用机制也许是降低表面张力或是
改变了染液的pH值。
三、染色原理

分化剂

在退行性染色中,附在组织细胞上多余的染色剂需用 某些特定的溶液把目的物以外的部分脱去,从而使目
切片脱蜡后,应经脱汞处理,同时要慎防切片脱落。

3.各种染料试剂一般选用化学纯。各种染料启用新品时 应先试染。配成的染液、试液应盛于有色试剂瓶内,瓶签
应写明名称、含量、配制年月日,顺序保存于避光橱中,
必要者放冰箱内。凡须临用时配制者,配量应适当。

4.染色各步骤所需的时间,常受温度、切片厚度等影响, 可根据镜下观察所见酌情予以调整。


四、染色剂

1.按来源分

(1)天然染色剂:
苏木素、胭脂红、地衣红和番红花。

(2)合成染色剂:
从煤焦油中提取的苯衍生物。 无机化合物,如硝酸银、氯化金、磺、锇酸和高锰酸钾等。
四、染色剂

2.按主要用途分

(1)胞核染色剂:
苏木素、胭脂红、甲苯胺蓝、美蓝和孔雀绿等。

(2)胞质染色剂:
伊红、淡绿、橘黄G、酸性品红和苦味酸等。

2.特殊染色


3.单一染色

4.复染色


5.多种染色

选用两种以上的染料的染色,如Mosson三色染色法。
六、染色前后处理


(一)染色前处理 1.脱蜡至水

二甲苯Ⅰ10min,37℃ 二甲苯Ⅱ10min,37℃ 无水乙醇 2min 无水乙醇 2min 95%乙醇 2min 85%乙醇 2min 75%乙醇 2min
例如,细胞核(尤其是核内的染色质) 主要由核酸组成,是酸性的组成成分,故 和碱性染色剂(苏木精)的亲和力很强,易于 着色。细胞质含碱性物质,故和酸性染色 剂(伊红)的亲和力很大,易于着色。
三、染色原理


进行性染色和退行性染色
进行性染色:组织成分着色由浅至深,当达到所 需要的强度时,终止染色。

等酸性成份。
五、常用染色术语

1.普通染色

在组织制片技术中,常规制片最广泛应用的是苏木精和伊红染色, 又称为常规染色(HE染色)。 特殊染色就是为了显示特定的组织结构或其他的特殊成分,是常 规染色的必要补充,也是染色技术中不可缺少的部分。它在病理 诊断中起到辅助作用。 选用一种染料进行的染色,如用铁苏木素染睾丸生精细胞等。 用两种不同性质的染料进行染色的方法,如用苏木素和伊红分别 使细胞核及胞质染成两种颜色。

(2)1%氢氧化钾1ml,80%乙醇100ml。切片脱蜡后置
溶液中10min→流水洗5min→80%乙醇5min→蒸馏水洗
→染色。
六、染色前后处理

4.除铬沉着物

组织用含铬的Zenker氏液等固定的,有铬沉淀物。除铬 沉着物可应用盐酸乙醇溶液,或用5%碘酒和5%硫代硫 酸钠水溶液处理。
六、染色前后处理
相关文档
最新文档