黄芪多糖提取方法的研究-2012
黄芪多糖的提取工艺研究_徐青梅

误差 0. 19
2
由表 2 可知,3 个因素对提取率的影响顺序为 B > A > C。方差分析结果表明,提取的温度与提取时 间对提取率有一定的影响,提取次数的影响不显著。 综合考虑,生产周期及操作费用等因素,选取的最佳 工艺条件为 A3 B2 C3 ,即提取温度 100 ℃ ,提取时间 1 h,提取次数为 3 次。
Table 1 Factors and levels
水平
A 温度 /℃
B 时间 /h
C 提取次数 /次
1
80
0. 5
1
2
90
1. 0
2
3
100
1. 5
3
表 2 正交实验结果 Table 2 Orthogonal test results
实验号
A
B
C
提取率 /%
1
1
1
1
2. 34
2
1
2
2
3. 68
3
1
XU Qing-mei
( Institute of Bio-engineering,Shaanxi Institute of Education,Xi’an 710061,China)
Abstract: The astragalus polysaccharides was extracted by water. The effect of extraction temperature, time,times on astragalus polysaccharides extraction yields were studied. The optimum extraction technical parameters were as follows: 100 ℃ ,1 h,3 times. Key words: astragalus polysaccharides; extraction yield; extraction technology
黄芪多糖提取工艺

[1] 石春华. 茶树病虫害防治彩色图说[M]. 北京: 中国农业出版社出版, 2006.
[2]Anderson A J. Isolation from three speoies of Colletotrichum of gluoan-oontaining polysaooharidcs that elioit browning and phytoalexin produotion in bean[J]. Phytopathology,1978,68( 2) : 189 - 194.
基金项目 南阳师范学院青年科研资助项目( QN2012042) 。 作者简介 高宛莉( 1978 - ) ,女,河南南阳人,实验师。 收稿日期 2012-07-03
1. 2. 2 料液比。分别称取 4 份各 30 g 黄芪粉碎物置于圆底 烧瓶中,按照黄芪质量( g) ∶ 蒸馏水的体积( v) 分别为 1 ∶ 2、 1∶4、1∶6、1∶8、1∶10、1∶12,分别加入 60 ml、120 ml、180 ml、240 ml、300 ml、360 ml 蒸馏水,摇匀后,100℃ 水浴加热 60 min。 4 000 r / min 离心 10 min,取上清液测定多糖含量。 1. 2. 3 提取温度。分别称取 4 份各 30 g 黄芪粉碎物置于圆 底烧瓶中,各加入 180 ml 蒸馏水,摇匀后水浴加热,处理温度 分别为 30℃ 、50℃ 、70℃ 、90℃ ,110℃ 、130℃ ,60 min 后取出, 4 000 r / min 离心 10 min,取上清液测定多糖含量。 1. 3 多糖含量测定方法 多糖含量测定采用苯酚一硫酸 法[9]。标准曲线的绘制: 精确称取 D( + ) - 葡萄糖 20 mg, 用重蒸水定容至 100 ml 作为标准液。将标准液分别稀释成 浓度为 30 μg / ml、60 μg / ml、90 μg / ml、150 μg / ml、180 μg / ml 的溶液,各取 0. 3 ml 置于 10 ml 试管中,加入 50 g / L 重蒸苯 酚溶液 0. 6 ml 混合后,迅速加入 3 ml 98% 浓硫酸,混匀,室 温静置 30 min。用直径 10 mm 石英比色皿测定 489 nm 处吸 光度,用重蒸水进行空白对照实验。在与标准曲线绘制相同 条件下测定多糖样品含量。 2 结果与分析 2. 1 提取时间对黄芪多糖浓度的影响 从表 1 看出,提取 时间在 20 ~ 60 min,多糖浓度随着提取时间的增加而增大; 提取时间在 60 ~ 120 min 内,多糖浓度随着提取时间的增加 而减小。提取时间为 60 min 时多糖浓度最大,达 7. 2 μg / ml。 2. 2 提取温度对黄芪多糖浓度的影响 从表 1 看出,提取 温度在 30 ~ 90℃ ,多糖浓度随着提取温度的增大而增大; 提 取时间在 90 ~ 130℃ ,多糖浓度随着提取温度的增加而减小。 提取温度为 90℃ 时多糖浓度最大,达 8. 5 μg / ml。 2. 3 料液比对黄芪多糖浓度的影响 从表 1 看出,多糖含 量随水用量的增加而增大,但水用量超过一定值后,再增加 水的用量,多 糖 浓 度 随 水 用 量 增 加 而 增 加 的 幅 度 不 大。同 时,水用量过大给多糖溶液浓缩带来工作量加大,因此用水 量不宜过大。最佳料液比应为料液比的 1∶8。
黄芪多糖的研究及应用

黄芪多糖的研究及应用黄芪多糖是一种从黄芪中提取的植物多糖,具有多种生物活性和药理作用。
它具有抗氧化、抗炎、免疫调节、抗肿瘤等多种功效,因此在医药领域有着广泛的应用。
下面将从黄芪多糖的研究进展和应用方面来详细介绍。
黄芪多糖的研究工作主要集中在黄芪多糖的提取与分离、结构解析以及药理学研究等方面。
近年来,许多研究者通过不同的方法提取黄芪多糖,如高温水提取法、酶解法、超声波辅助法等,从而得到不同纯度和分子量的黄芪多糖。
研究表明,黄芪多糖的分子量和纯度与其药理活性密切相关。
此外,利用色谱、质谱、核磁等技术手段可以对黄芪多糖的结构进行分析和解析,揭示其分子结构和构象特征。
研究结果显示,黄芪多糖主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖等单糖单元组成,具有多糖特有的多级分支结构。
黄芪多糖的药理学研究表明,它具有多种生物活性和药理作用。
首先,黄芪多糖具有抗氧化活性,能够清除体内自由基,防止脂质过氧化等氧化损伤。
其次,黄芪多糖具有抗炎活性,能够抑制炎性因子的释放和炎症反应的发生,从而起到抗炎作用。
此外,黄芪多糖还具有免疫调节活性,能够增强机体的免疫功能并调节免疫应答,从而提高机体的抵抗力和免疫力。
此外,黄芪多糖还具有抗肿瘤活性,能够抑制肿瘤细胞的增殖和转移,诱导肿瘤细胞的凋亡,从而抑制肿瘤的发生和发展。
基于黄芪多糖的多种生物活性和药理作用,它在医药领域有着广泛的应用。
首先,黄芪多糖可以作为一种天然的抗氧化剂和抗炎剂,被广泛应用于药物、保健品和化妆品等方面。
其次,黄芪多糖可以作为一种免疫调节剂,用于增强免疫力、预防疾病和提高康复能力。
此外,黄芪多糖还可以用作抗肿瘤药物的辅助治疗剂,能够增加肿瘤患者对化疗和放疗的耐受性,减轻其毒副作用,并提高疗效。
总之,黄芪多糖作为黄芪的主要活性成分之一,具有多种生物活性和药理作用。
它在医药领域有着广泛的应用前景,能够用于治疗氧化应激、炎症、免疫缺陷和肿瘤等多种疾病。
随着对黄芪多糖的深入研究,相信它的应用领域会进一步扩大和深化,为人类的健康事业做出更大的贡献。
实验四黄芪多糖的提取

实验黄芪多糖提取
黄芪为豆科植物的干燥根,主要药理成分是黄芪多糖和黄芪甙。
黄芪多糖在医学和兽医临床上研究应用较为广泛,可作为免疫促进剂或调节剂,同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗应激、抗氧化等作用。
能提高未成年禽兽的抗病力,对幼、仔猪、幼畜经常添加可减少疾病,是促进增重,提高生活率,增加整齐度。
一、材料与方法
(一)材料与试剂
黄芪根、氧化钙、95%乙醇均为分析纯。
天平,水浴锅,粉碎机等。
(二)方法
黄芪多糖的提取:
CaO溶液提取法采用pH 9~10的CaO溶液煮沸提取,浓缩时调至pH6.5左右。
1.称取黄芪根1千克,去掉杂质和泥土,粉碎成粉末。
2.黄芪根粉末中加6-7倍的CaO溶液,煮沸1小时,用8层纱布过滤。
3.合并滤液,调pH至6.5左右。
4.将浓缩液中加入2倍量95%乙醇沉淀。
5.倾去上清液,沉淀物中再加入95%的乙醇至浓度为80%,静置,倾出上清,滤渣即为黄芪多糖。
二、结果与分析
1.黄芪多糖的物理性状
提取的黄芪多糖为灰白色粉末,易溶解于水,溶液呈乳白色,无杂质。
三、小结
黄芪多糖作为黄芪纤维质的组成部分,纤维在水中的溶胀作用和溶解性差,因此水提取法收率低。
在碱性溶液中的溶胀作用和溶解性显著增加,纤维之间的酯键易断裂而发生剥皮反应,使更多的多糖得以游离而被提取出来,从而提高多糖收率,因此黄芪多糖尽量避免在酸性条件下提取。
黄芪汤中多糖的提取以及含量测定研究

黄芪汤中多糖的提取以及含量测定研究黄芪汤作为一种常用中药方剂,有着提升免疫力、调节免疫系统和具有抗疲劳、抗氧化等功效。
其中黄芪作为其主要成分,被认为是黄芪汤中最重要和最具有活性的成分。
然而,黄芪中的多糖在其药效中也起着很重要的作用。
因此,本文将探讨黄芪汤中多糖的提取方法以及含量测定研究。
一、黄芪中多糖的提取方法多糖是由许多简单糖分子(单糖)通过糖苷键连接而成的高聚物,不溶于有机溶剂。
因此,提取黄芪中多糖的方法需使用水或醇等极性溶剂。
常用的提取方法有:1.水提法将黄芪粉末加入水中,用热水或蒸汽加热,较高温度下多糖易被水溶解。
但受限于多糖在水溶性上的差异,因此不同来源或不同处理方法的黄芪所得多糖的品质和产率也会有差异。
即使是同样来源和处理方法的化学成分分别也会对多糖的产量和品质有影响。
2.醇提法常用的醇有乙醇、丙酮等。
多糖在醇中溶解度更高,且较容易水解开,因此产量和品质都会高于水提法。
但醇对物质的溶解能力比较大,可能会带走较多的杂质。
同时,操作过程会有火源,需要注意安全。
以上两种方法常被连用来提高多糖的提取产量和品质。
二、黄芪中多糖的含量测定方法黄芪中多糖含量的测定有很多种方法。
如: 1.硫酸蒽醌法该法以硫酸为催化剂,蒽醌为变色剂。
多糖与蒽醌反应,生成颜色,颜色深浅与多糖含量成正比。
该法操作简单、灵敏度高,但易因蒽醌的选择性不够和污染物的存在而出现误差。
2.酚硫酸法该法以硫酸为催化剂,酚用来变色。
采用热酸解、酚硫酸混合试剂共同水解产生浓烈的酸性体系,在加入糖溶液,糖经过反应后能够与酚产生复杂络合物,出现特征性吸收峰。
该法通用性强,且对糖类物质反应稳定、选择性好。
3.紫外分光光度法该法原理相对简单,但需要有被检测物质有固定的吸收峰,故仅能测定部分多糖的含量。
该法可测定部分醛基含量,依法的测定要求光谱仪有一定的波长选择能力。
综上,提取黄芪中多糖的方法主要包括水提法和醇提法。
其中醇提法多糖的产量和品质较高。
黄芪多糖提取方法的研究概况

黄芪多糖提取⽅法的研究概况众所周知,黄芪具有补⽓固表、利尿排毒、排脓、敛疮⽣肌的功效,主产于⽢肃、内蒙、陕西、河北及东北、西藏等地。
黄芪多糖⾃1981年被提取分离以来,研究与应⽤报道逐渐增多,许多学者在研究黄芪多糖组成、结构和⽣物活性的同时,对其提取分离⼯艺进⾏了研究,探索发现出了⼀些新的提取分离⽅法。
⼀、蒸馏⽔提取法由于黄芪多糖是溶解于⽔⽽不溶解于醇的⼤分⼦化合物,所以⽬前黄芪多糖的提取主要采⽤蒸馏⽔提取⼯艺,即将黄芪根粉碎后加于蒸馏⽔中煮沸,使黄芪多糖溶解于⽔,合并滤液浓缩后调pH为中性,⽤⼄醇将多糖从提取液中沉淀分离,丙酮洗涤,经过冷冻和真空⼲燥后得到粗多糖。
这种提取⽅法⼯艺简单,操作简便易⾏,但是对提取物的选择性不好,可把黄芪中的黄酮、皂甙等同时提取出来,⽽在后续⼯艺中⼜不容易将它们分离出来。
蒸馏⽔提取法⽔煮温度⾼达100℃,提取成本⾼,并且多糖粗品收率低,约为2.5%左右,严重制约了黄芪多糖的研究与开发。
通过对黄芪多糖⽔煎提取⼯艺优化试验研究表明,多糖含量随因素变化差别较⼩,⽽收率差异明显。
加12倍量⽔,提取3次,每次1.5⼩时为最佳⼯艺,其中多糖的得率为2.0%,总多糖含量为37.5%;丁利君等研究得出提取黄芪中多糖的最佳⽅法为⽤80%⼄醇溶液,固液质量⽐为1:60,于90℃⽔浴提取,多糖粉得率.94%,其中⽔溶性多糖的含量为58.6%;陈芳艳等研究⽔煎法提取黄芪多糖表明,最佳提取时间为60分钟,提取温度为100℃,溶⽐1:6,提取两次黄芪多糖的最⾼含量达6.75微克/毫升;孙瑞敏等改进了传统100℃⽔煮醇沉法从黄芪中提取多糖的⽅法,在适当的温度(62~68℃)进⾏提取,避免将多种物质同时提出,使提取物的组成单⼀,第⼀次提取物的纯度能达到96%以上,且外观为⽩⾊,再经⼀次提纯后纯度可达到99%以上,黄芪多糖提取率为8.2%;周冬梅等研究发现,黄芪多糖较佳的提取⼯艺为加12倍量⽔,提取3次,每次1⼩时,经过验证试验表明,此⼯艺稳定、合理、可⾏;张亚环等通过正交试验得到黄芪多糖最佳提取⼯艺为,先⽤10倍量⽔浸泡0.5⼩时,煎煮1.5⼩时;第2次加8倍量⽔,煎煮1.0⼩时;第3、4次各加6倍量⽔,煎煮时间为1.0⼩时;王淑萍等采⽤温浸法优化了试验,最佳提取黄芪多糖⼯艺为料液⽐1:6,提取时间90分钟,提取温度100℃时提取3次;采⽤⼄醇沉淀法,分离的最佳⼯艺是⼄醇浓度为90%,加⼊量为5倍体积,沉淀时间为4⼩时;确定最佳纯化⼯艺为AB28⼤孔吸附树脂吸附,30%⼄醇洗脱。
超声波法提取黄芪多糖的工艺研究

超声波法提取黄芪多糖的工艺研究1.引言黄芪是一种常见的中草药,具有抗氧化、抗炎、免疫调节等多种药理作用。
其中的黄芪多糖具有一定的药用价值,因此对黄芪多糖的提取工艺进行研究具有一定的意义。
2.超声波法提取黄芪多糖的原理超声波是一种机械波,其频率高于20kHz。
超声波在液体中传播时,会产生声波振动和微小气泡的形成与破裂,从而产生均匀细小的超声波空化效应。
这种效应可以破坏细胞壁和细胞膜,有利于植物中活性成分的释放和提取。
3.超声波法提取黄芪多糖的工艺研究3.1 实验材料准备选取新鲜的黄芪作为实验材料,清洗干净并晒干备用。
3.2 超声波提取条件确定在实验室条件下,通过单因素实验确定超声波提取的最佳条件,包括超声功率、提取温度、提取时间等参数。
3.3 超声波提取工艺优化在确定最佳提取条件的基础上,进行响应曲面法和Box-Behnken法优化超声波提取工艺,得到最佳的提取工艺参数组合。
3.4 提取物质分析对提取得到的黄芪多糖进行理化性质和结构分析,确定其提取效果。
4.超声波法提取黄芪多糖的优势4.1 提取效率高超声波在提取过程中可以破坏细胞壁和细胞膜,有利于黄芪多糖的释放,因此提取效率较高。
4.2 提取时间短由于超声波的作用,提取时间相对较短,节约了实验时间。
4.3 提取温度低超声波的作用可以使提取温度相对较低,有利于保护黄芪多糖的性质和活性。
5.超声波法提取黄芪多糖的应用前景通过超声波法提取黄芪多糖的工艺研究,可以为其在药品、保健品等领域的应用提供技术支持。
超声波法提取的黄芪多糖具有较高的提取效率和较好的理化性质,有望成为黄芪多糖产品的重要来源之一。
6.结论超声波法提取黄芪多糖是一种高效、快捷、低温的提取方法,具有良好的应用前景。
在实际生产中,可以根据不同的需要对提取工艺进行优化,以获得更好的提取效果和经济效益。
7.参考文献[1] 张三, 李四. 超声波在中药提取中的应用研究[J]. 中草药, 2010, 38(2): 123-126.[2] 王五, 赵六. 超声波提取技术在中药多糖制备中的应用[J]. 中草药, 2015, 43(4): 345-349.黄芪作为一种重要的中草药,含有丰富的黄芪多糖,具有多种药理作用,因此对其进行高效提取具有重要的研究意义。
黄芪多糖提取条件研究

黄芪中多糖提取条件的研究黄芪(RadixAstragalu s)是豆科植物,黄茂的干燥根中含多糖、皂苷、黄酮、氨基酸及多种微量元素等有效成分,其中黄芪多糖(Astragalu spolysa eeha ride s,APs)是含量最多的一种.其主要生物活性表现为增强免疫功能、脾脏增大、抗流感、抗肿瘤、防衰老及抗辐射,对心急梗塞有改善心肌收缩性能、缩小梗塞面积、减轻心肌损伤等作用.由于黄茂多糖的多种生物活性及良好的临床效果,多年来在国内外已成为中药提取及中草药现代化研究的焦点之一。
近二十年来,报道了多种提取多糖的方法,主要包括水煮醇沉法、超声波提取法、超虑法等。
一般采取水煮醇沉法,因该法工艺简单、操作方便.但一般的水煮醇沉法水煮温度都在100℃进行.这样的工艺至少存在两大缺点一是水煮温度高,对提取物的选择性不好.可把黄蔑中的黄酮、皂贰等同时提取出来;黄酮及其类似物的化学式中含有酚经基,在空气中易被氧化而变色,这样对产品的纯度及颜色都有很大的影响.二是水煮温度高,浪费能源和资源,经济效益低.由于提取温度高,使黄酮、皂贰类等也被提取出来,在后续工艺中又不能把它们分离出来,造成产品不纯和资源浪费。
1.1 实验主要仪器紫外分光光度计、旋转蒸发仪、水浴锅、1.2 试剂及材料黄芪干燥根、酒精、苯酚、浓硫酸、葡萄糖、α—萘酚、2 黄芪多糖的提取将黄芪根短杆(或黄芪根粉末)加人到5~8倍量蒸馏水中,在适当温度下浸取1~3 h.过滤得提取液,滤渣可进行二次提取并留作进一步提取黄酮、皂贰等其它成分.将提取液冷致室温或更低温度后,以适当的速度在搅拌下倾人2倍体积的95 %酒精中,黄茂多糖沉淀出来.离心分离,得黄茂多搪,用95 %酒精洗涤,然后干燥.这样得到的黄蔑多糖称为NGF(粗多糖),称重,与药材用量相比,得收率[1]。
3黄芪多糖的分析3.1 特征反应将约0.2 g沉淀提纯物溶解在约20m L 水中,得无色溶液,浓度约为1%.在试管中加人约1 mL 此溶液,再加人约0.5m L15 %a一奈酚的酒精溶液,混合后,沿试管壁加人约1m L 浓硫酸,此时在二者交界处即出现紫色环.混匀后,混合液呈蓝色.此反应为糖类包括单糖、寡糖和多糖的共同反应,称为Molisch 反应.其反应机理可能是由于糖先转为糠醛或其衍生物,再与酚缩合并经氧化而产生有色物质[1].3.2 标准曲线的绘制用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为对照品,在490nm处测定吸光度,以吸光度Y为纵坐标,浓度X(ug/ml)为横坐标,绘制标准曲线准确吸取葡萄糖标准溶液0.1~0.6ml共6份,分别置于25ml容量瓶中,加蒸馏水补充至2ml,再加入5%苯酚溶液1ml,摇匀,迅速滴加浓硫酸5ml ,摇匀,放置5min ,置80℃水浴中加热15min ,取出,迅速冷却至室温,另以2ml蒸馏水同上平衡操作作为空白对照,在490nm波长处测定吸光度,并求出回归方程[3]Y=...X+....3.3 温度对提取率的影响精确称取5份黄芪粉,每份5g,置于圆底烧瓶中,加入等量的去离子水,水浴加热,不断搅拌,加热温度分别为20,40,60,80,100℃,提取1h后取出,抽滤。
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华达专栏囝小肽善冢技或论坛黄芪多糖提取方法的研究董文阳周岩民南京农业大学动物医学院摘要黄芪多糖(APS)为黄芪主要活性成分之一,具有促生长、抗氧化、抗应激和提高免疫力等多种功效。
介绍对APS的6种提取方法,包括水提取法、碱醇提取法、超声波提取法、微波提取法、超高压提取法扣超滤法,及每种方法的提取效果,并就APS提取方丢的研究进展做一综述。
关键词黄芪黄芪多糖提取中图分类号:S816.7文献标志码:B文章编号:1002—2813(2012)07—0032—03黄芪是历代常用的补益中药,为豆科植物膜荚黄芪或蒙古黄芪的干燥根,具有补中益气、拔毒排脓、敛疮生肌和利水退肿之功效。
黄芪多糖(APS)是黄芪中最重要的天然有效成分,包括葡聚糖和杂多糖:葡聚糖有水溶性的1/,一(1—4)(1_+6)葡聚糖和水不溶性的if,一(1_4)葡聚糖;杂多糖多为水溶性酸J睦杂多糖,主要由葡聚糖、鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖组成,少量含有葡醛酸,有些杂多糖仅由葡萄糖和阿拉伯糖组成。
药理研究表明:APS具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射及调节血糖等作用;还能促进免疫器官功能和抗体生成,增加机体的非特异性抵抗能力。
因其抗菌和抗病毒效果良好,临床常用作免疫增强荆。
自20世纪80年代以来,为了进一步开发利用APS,许多学者对APS的提取工艺进行了大量研究,以期找出一种更合理和更可行的提取方法。
在此就目前已有的多种提取方法进行综述。
1一般工艺流程APS是溶于水,不溶于醇的大分子化合物,现行的工艺都是用水煮后将APS提取出来,再用乙收稿日期:2012—02—08通信作者:周岩民32饲料研究FEEDRESEARCHNO.07.2012醇将多糖从提取液中沉淀、分离并精制出来。
一般工艺条件是用8~12倍量水,煎煮2-3次,每次1-2h。
其工艺流程图如下:2前处理工艺提取APS前一般需对原料黄芪进行物理处理,如:切成黄芪饮片或黄芪粉末。
许多学者对其前处理工艺进行研究后发现,通过对原料黄芪进行化学处理或生物学处理可显著提高APS的收率。
2.1醇处理法该方法又称醇除水提取法,在提取APS时,先以乙醇为溶剂对黄芪原料进行回流。
张昀等先将药材加人5倍量的95%乙醇回流,除去黄芪中黄芪总皂苷;提取APS时,以10倍量蒸馏水100oC回流3h,过滤,处理,获得APS(收率6.21%)。
吴永平等先用6倍量的90%乙醇水浴回流提取3次,每次1h;待乙醇挥干后,加5倍量的水,隔水加热提取3次,每次2h;合并水提液,处理获得APS(收率28.54%)o以上2种研究方法相似,但收率相差较大,可能与所用乙醇的质量浓度、量、加水量、提取时间和次数有关,具体原因尚待研究。
万方数据2.2酶处理法酶技术近年来广泛用于天然植物有效成分提取,其优势在于酶可以比较温和地分解植物组织,提高有效成分的释放速度,从而提高其提取率。
郑立颖等研究表明:加入不同质量浓度的纤维素酶能显著提高APS的收率,将黄芪用0.3%、0.4%和0.5%纤维素酶预处理后,用传统水提法,APS的收率较对照组分别增加了314.8%、392.6%和342.6%。
陈学伟等通过试验得到酶解的最佳条件:酶解时间120min,酶用量0.8%,酶解温度为75℃。
所获提取液中多糖含量为9.78%,比传统水溶醇沉法收率提高了3倍。
成玲等研究认为:纤维素酶对细胞壁有很高的穿透性,它可以进入细胞壁内部并将其溶解膨胀,并且这种作用具有高度选择性,它可以在不破坏多糖成分的条件下将其充分释放出来。
纤维素酶在中药材的前处理中发挥了很大的作用,发展前景十分广阔,在生产应用上具有现实意义。
3萃取工艺3.1水提取法水提取法一般是用水煎煮过滤得提取液,合并滤液,经浓缩和醇沉等处理得APS。
该方法的优势在于操作简便,但多糖收率和含量都较低,加之提取过程要耗费大量的有机溶剂,增加了提取成本,制约了APS的进一步开发利用。
3.1.1水溶醇沉法水溶醇沉法又称水煎煮法,目前Alas的提取多采用水溶醇沉法。
葛朝亮等研究得出的最佳工艺为加水量12:1,提取时间0.5h,提取次数2次,提取液浓缩后加无水乙醇沉淀,得APS(收率2.7%)。
倪艳等进行优化试验,确定了最佳工艺:以12倍量水,提取3次,每次1.5h。
罗毅等研究得出的最佳工艺为水煎3次,每次1h,每次加8倍量水。
水溶醇沉法简便易行,但其收率和多糖纯度均较低。
3.1.2温水提取法孙瑞敏等改进了传统的水溶醇沉提取APS的方法:称取黄芪根短杆或黄芪粉末,加入到5。
8倍量蒸馏水中,在62~68℃下浸取l~3h;过滤后95%乙醇沉淀,分离提纯,得APS(收率8。
2%)。
该研究还提出乙醇与提取液最好的体积比应为2:1,减少了能源消耗,节约了资源,降低了成本也提高华达专栏了质量。
温水提取法简便、环保、成本低且适合生产。
3.1.3水回流提取法聂小华等采用水回流提取法提取APS:先称取黄芪粉末,加入10倍量水,回流lh,离心;药渣再用8倍量水回流40min,离心;合并提取液,浓缩,醇沉并除杂质得APS。
赵强强等采用田口试验设计法对水回流提取法进行了优化,考察了加水量、提取时间和提取次数对提取的影响,得出最佳条件:加6倍量的水,提取1.5h,提取3次,得APS(平均收率为3.49%)。
3.1.4碱水提取法刘永录等采用Na0H溶液提取法:取黄芪药材400g,分别加12和10倍量pH为12的Na0H水溶液煎煮2次,抽滤;调pH为中性,合并提取液,浓缩,醇沉并除杂质得APS。
Na0H溶液提醇沉法的多糖收率为7。
73%,略高于以Ca(OH)z溶液同法提取的多糖收率(7.12%),显著高于以蒸馏水同法提取的多糖收率(3.64%)。
李红民等采用pH为9—10的Ca(oH)2溶液煮沸提取Alas,提取液浓缩时调pH约为6.5,浓缩得到APS粗提物,其提取率为11.7%,是以蒸馏水同法提取所获收率(3.6%)的3.25倍,是以Na2C03水溶液同法提取所获收率(5.7%)的2.05倍,可推得碱性条件对提取APS更为有利。
3.2碱醇提取法田洛等首先提出碱醇提取APs的方法:准确称取黄芪饮片,用5%乙醇与黄芪药材按10:1的量,在pill2的Na2C03溶液中90℃下提取2次,每次1.5h,过滤,合并滤液,浓缩沉糖,得APS(收率19.15%);利用红外光谱对3种方法提取的残渣进行分析证明,碱醇法残渣中多糖成分的残留量最低,提取效果较好。
刘富岗等采用Na0H醇提取APS:取黄芪药材饮片50g,分次加Na0H调pH至12的5%醇液500和600mL,加热回流2次,分别为3和2.5h,处理后得AlaS;该提取法收率为13.04%,高予以Ca(OH)2同法提取的收率(7.96%),显著高于以蒸馏水同法提取的收率(3.67%)。
碱醇提醇沉的提取率要明显高于直接水提法的原因目前尚无定论。
刘永录等认为这是因为碱对植物细胞壁起到破壁作用,且在碱性条件下纤维间的饲料研究FEEDRESEARCHNO07.201233万方数据华达专栏酯键易断裂而发生剥皮反应,使更多的多糖得以游离而被提取出来;刘富岗等认为可能是水提法溶出了大量亲水性黏液质,降低了多糖含量,黏液质附着在黄芪饮片表面,使多糖较难溶出。
3.3超声波提取法超声波提取法是一种有效的新型提取方法,其空化作用可破坏植物细胞壁和细胞膜结构,有助于细胞内容物的渗出,从而提高多糖提取率。
吕帮玉等通过正交试验优化了提取APS的工艺条件,考察了提取时间、提取次数、料液比、温度和pH对提取的影响,得出超声波法提取APS的最佳条件为20mird次,提取次数2次,料液比1:12,pH9,温度80℃,以滤液中多糖含量测算,APS的收率达96.6%,是水煎煮法多糖提取率(38.7%)的2.5倍。
宋清焕等采用了超声波辅助法提取,确定了最佳工艺条件为30倍量水,超声提取lh,提取率可达到92.1%。
徐艳等采用超声细胞粉碎仪提取APS。
用80%乙醇回流提取3h作为药材的前处理,然后加8倍量蒸馏水,连接超声细胞粉碎仪,超声处理1h,过滤,滤渣再用6倍量蒸馏水超声处理40min,过滤,合并滤液并浓缩。
该试验取等质量的样品分别用碱提法、水煎煮法和超声细胞破碎法获得的APS总量分别为1.204、1.011和0.639g,测定APS含量分别为4.70%、5.90%和7.60%。
碱提法虽然获得的多糖总量最多但含量最低;超声细胞粉碎法多糖含量最高最纯。
超声波法具有省溶剂、省时、节能及高提取率等优点,有利于降低提取材料的成本。
3.4微波提取法王莉等首次采用微波技术提取APS。
将黄芪放入MCL一3型连续微波反应器中,调整功率为560、500、400和350W,依次以2.5倍量的石油醚(60.90℃)、乙醚和80%乙醇回流提取。
反应20min;待药渣挥干溶剂后,调整反应器功率为630、600、560和450W,以水回流提取20min,所得APS收率为6.55%。
张佳兰等通过正交试验设计的方法得到了微波提取APS的最佳工艺参数:微波功率为400W,提取时间8rain,固液比l:40(g:mL),提取液pH为8.5。
微波加热是将微波电磁波转化成分子的动能而发热,具有安全高效的特34饲料研究FEEDRESEARCHNO07.2012点,能提高多糖提取率。
3.5超高压提取法王再幸等采用高压脉冲电场快速提取APS,确定最佳条件:电场强度为20kV/em,脉冲数为6,料液比为1:14,得到APS(收率24.36%)。
刘春娟等运用超高压技术提取APS,在压力350MPa,料液比1:60,浸泡时间5h,保压时间2min的条件下得到最大收率为24.28%。
超高压提取法与其他方法相比较,具有提取液杂质少、收率高、易分离纯化、提取时间短和耗能低等特点。
4后处理工艺各提取法均使用乙醇处理萃取液,提取或除去其他成分,沉淀APS。
这有利于APS提取液的分离和提纯等后处理,亦可获得较高的多糖收率。
有研究者将超滤膜技术应用于萃取液的后处理环节,进一步优化了APS的提取工艺。
超滤法较水溶醇沉法提取的多糖粗提物收率低,但多糖含量高。
李树珍等用超滤法提取APS,黄芪粉水煮后的上清液用中空纤维超滤,选用相对分子质量为6000的超滤膜,截留下相对分子质量超过6000的大分子,经2次醇沉后即得多糖的粗提物。
相对多糖含量超过70%。
焦光联等用超滤法提取APS,以截留相对分子一质量为200和10的超滤膜对APS进行超滤分离,考察了压力、温度、流速和初始料液质量浓度等对超滤提取的影响,确定最佳超滤提取条件为初始料液质量浓度20g/L、压力0.35MPa、温度30℃和进料流速0.467L/s。
此条件下滤液中多糖含量由36.0%提高到86.8%。
有效实现了APS提取液中活性多糖与大分子蛋白多酚等物质的分离。