生物技术专业毕业论文范文
生物科学领域毕业论文范文

生物科学领域毕业论文范文在生物科学领域的毕业论文范文中,需要遵循科学论文的基本结构和格式,包括主题引言、材料与方法、结果与讨论以及结论等部分。
以下是一个例子供参考:生物科学领域毕业论文范文一、引言生物科学是研究生物体结构、功能和进化等方面的科学领域。
在这个领域的研究中,我们经常需要运用实验方法和理论分析来解决各种生物学问题。
本论文旨在探讨植物光合作用对光强变化的响应机制,以期增加对光合作用的理解,并为农业生产和环境保护提供参考。
二、材料与方法2.1 实验对象本研究使用了普通大豆(Glycine max)作为实验对象。
实验采用相同的营养底物和生长条件,以确保实验结果的可比性。
2.2 实验设计将普通大豆分为三组,分别置于不同光强的环境中,分别为高光强组、中光强组和低光强组。
每组重复三次,以减小可能的随机误差。
2.3 数据采集与分析利用光合速率测定仪对不同光强下的光合作用速率进行测定。
通过采集数据并运用统计学方法,对不同光强下的光合作用速率进行比较和分析。
三、结果与讨论3.1 光合作用速率的变化结果显示,在较低光强下,植物的光合作用速率较低;而在较高光强下,光合作用速率较高。
这表明光合作用速率与光强呈正相关关系。
此外,光合作用速率在中等光强下也呈现适当的水平。
3.2 光合作用对光强变化的响应机制通过分析实验结果,推测光合作用对光强变化的响应机制包括光系统II的光化学反应和光系统I的电子传递。
较低光强下,光系统II的光化学反应相对较弱,限制了光合作用速率的提高。
而在较高光强下,光系统I的电子传递速率加快,进一步促进了光合作用速率的提升。
四、结论本研究结果表明光合作用速率与光强呈正相关关系,并揭示了光合作用对光强变化的响应机制。
这对于农业生产和环境保护具有重要意义,可以为优化光合作用的利用以提高农作物产量和调控生态系统提供科学依据。
参考文献:[1] Smith A, Johnson B. The effects of light intensity on photosynthesisin soybean plants. J Agric Sci. 2000;138(4):457-463.[2] Brown C, Williams G. Responses of photosynthesis and stomatal conductance of soybean plants grown under different light intensities. Photosynthetica. 2005;43(2):285-289.请注意以上范文仅供参考,并不代表真实研究结果。
生物类(生物科学等)专业毕业论文5篇范文

生物类(生物科学等)专业毕业论文5篇范文第一篇:生物类(生物科学等)专业毕业论文RLK基因遗传转化植株的筛选与鉴定生物技术专业指导教师摘要:番茄青枯病是严重影响番茄生产的病害之一,有“植物中的癌症”之称。
植物体中类受体蛋白激酶(Receptor Likekinase RLK)有提高抗逆性的功能,本研究利用分子克隆技术将辣椒中的。
基因转入番茄中,以期获得对青枯病具有抗性的番茄植株。
除了利用传统的形态学比较的方法外,本文主要利用PCR和RT-PCR技术对三个番茄品种的转基因植株的T1代进行转基因后的分子鉴定。
结果显示,三种转基因番茄经特异引物PCR后均能产生特异性条带,而且D-RLK-6号经RT-PCR后能够产生特异的条带,这表明目的基因都已经成功转入三种转基因番茄基因组内,并且能够顺利遗传给后代,另外D-RLK-6号的CaRLK基因能够顺利表达。
此研究将为番茄青枯病的防治提供重要的理论支撑。
关键词:番茄;CaRLK;分子鉴定;PCR ;RT-PCRThe Selection and Identification of CaRLK Transgenic Tomatoes PlantsTomato bacterial wilt is a serious disease affecting tomato production and it is called “the Cancer Abstract:of Plant”.The Receptor Likekinase(RLK)in plants can increase their resistance function.In this study, we used molecular cloning technology to transfer the CaRLK from pepper to tomato, hoping to obtain bacterial wilt-resistant tomato plants.In addition to using traditional methods, such as morphological comparison, we mainly used PCR and RT-PCR to identify the three varieties of transgenic tomato plants of T1 generation of D-RLK-2, D-RLK-6 and D-RLK-10.ResuLts showed that three transgenic plants afterthe process of PCR by specific primers were able to produce specific bands, and that the D-RLK-6 produced specific band after the process of RT-PCR by specific primers, suggesting that the CaRLK gene had been successfully transferred into transgenic tomato genome.This study will provide important theoretical support for the prevention and control of tomato bacterial wilt.Key words :Lycopersicon escuLentumMill;CaRLK;Molecular identification;PCR;RT-PCR引言番茄(Lycopersicon escuLentumMill)别名西红柿,古名六月柿、喜报三元。
生物技术专业综述性毕业论文范文

编号:本科毕业论文题目:大米蛋白的研究进展学院:生命科学学院专业:生物技术年级:姓名:指导教师:完成日期:目录中文摘要及关键词 (1)英文摘要及关键词 (2)引言 (3)1 大米蛋白的组成与结构 (3)1.1 大米蛋白的组成 (3)1.2 大米蛋白的结构 (3)2 大米蛋白的营养价值与保健作用 (4)2.1 大米蛋白的营养价值 (4)2.2 大米蛋白的保健作用 (4)3 大米蛋白的功能性 (5)3.1 溶解性 (5)3.2 乳化性 (5)3.3 持水性与持油性 (6)3.4 起泡性与起泡稳定性 (6)4 大米蛋白的提取方法 (7)4.1 碱法提取大米蛋白 (7)4.2 物理分离法提取大米蛋白 (7)4.3溶剂提取法 (8)4.4 酶法提取大米蛋白 (8)4.5 复合提取法 (10)5 大米蛋白的开发利用 (10)5.1食品添加剂 (10)5.2蛋白质营养补充剂 (11)6 大米蛋白的市场前景与展望 (12)结束语 (13)参考文献 (14)致谢 (17)摘要大米蛋白是一种氨基酸组成合理,生物效价高,过敏性低的蛋白质。
能够满足2-5岁儿童的氨基酸需求,非常适合开发婴幼儿食品。
此外大米蛋白可加工成酱油、高蛋白粉、蛋白饮料、蛋白胨和蛋白发泡粉等,若将其降解成短肽或氨基酸,则可制成营养价值极高的氨基酸营养液,从而用于保健饮料、调味品、食品添加剂等。
本文对大米白的结构与组成、功能特性、营养价值、分离技术、提取技术、开发利用等现状做了简要概述。
关键词:大米蛋白;营养价值;功能特性;开发利用AbstractAmino acid composition of rice protein is a reasonable biological titer, low-protein allergy. 2 to 5 years to meet amino acid requirements of children, making it very suitable for development of baby food. In addition, processed into soy sauce, rice protein, protein powder, protein drinks, peptone and protein foam powder, if its degradation into short peptides or amino acids, nutritional value can be made of high amino acid nutrient solution, which for health beverages, condiments, food additives. In this paper, the structure and composition of white rice, functional properties, nutritional value, separation, extraction, development and utilization of a brief overview of current situation.Keywords:rice protein; nutritional value; functional properties; development and utilization引言大米蛋白系由大米中提取获得。
生物科学专业毕业论文范文(通用)

生物科学专业毕业论文范文(通用)摘要:关键词:栀子;阿朴类胡萝卜素;藏花素;八氢番茄红素合成酶;基因表达1、材料和方法1.1材料和试剂栀子(Gardenia jasminoides)植株培养于广东药学院。
采集栀子成熟叶片和花后 16 周的栀子果实,果肉为橙色。
所有材料贮存于–80℃。
CreatorTMARTTMcDNA 文库构建试剂盒购自 Clontech公司。
Primescript one step RT-PCR 试剂盒购自TaKaRa 大连公司。
藏花素-1 (Crocin-1)的对照品购于 Sigma-Aldrich 公司。
乙腈、甲醇为色谱纯,其它生化试剂等为分析纯。
1.2藏花素-1含量的测定以改良的 HPLC测定栀子叶片和果实中藏花素-1 (Crocin-1)的含量。
叶片和果实在液氮中研磨后以 50% (V/V)的甲醇-水溶液提取,在超声处理 30 min 后以 10000 g离心 10 min,取上清液在–20℃下贮存。
HPLC 分析时,上清液以0.45 μm滤膜过滤,以 DiamonsilTMC18 (2) 柱(250 mm 4.6 mm, 5 μm)(Dikma 公司,中国)分析,梯度洗脱。
仪器为 Waters 2995 HPLC 仪(Waters 公司 , 美国),配备 2996 光电二极管阵列检测器检测。
数据分析 1 Crocin 的生物合成途径。
IPP:异戊烯焦磷酸 ; DMAPP:二甲基丙烯焦磷酸;GPP:香叶基焦磷酸;GGPP:香叶基香叶基焦磷酸。
Fig. 1 Biosynthesis pathway of crocin. IPP: Isopentenyl diphosphate; DMAPP: Dimethylallyl diphosphate; GPP: Geranyl diphosphate; GGPP:Geranylgeranyl pyrophosphate.第5期 441以 Empower 2 软件完成。
生物技术结课论文1900字_生物技术结课毕业论文范文模板

生物技术结课论文1900字_生物技术结课毕业论文范文模板生物技术结课论文1900字(一):转型发展背景下食品生物技术应用技术型人才培养模式探析论文摘要:近年来,我国各地高校办学数量和规模不断扩大,但是,教学质量并不容乐观,主要体现在各院校培养的人才专业应用技能不足,难以满足社会和相关行业的需求,为此,我国国务院明确指出,各地高校需向技术应用型院校转型发展,以为社会培养更多应用技术型人才,在这样的转型发展背景下,就需要各院校积极探索应用技术型人才培养模式。
本文主要以食品生物技术专业为例,总结了几点转型发展背景下食品生物技术应用技术型人才培养模式。
关键词:转型发展;食品生物技术;应用技术型人才;培养模式随着我国生物技术的快速发展和在食品原料生产、加工和制造中的广泛应用,人们逐渐认识到生物技术在改良食品原料和提高食品加工品质中的重要性,为此,不少院校均开设了食品生物技术这一学科,目的在于给社会培养更多食品生物技术应用人才,但是,从我国当前的食品生物技术专业人才培养现状来看,并不乐观,主要原因在于不少院校仍采用传统理论灌注为主的模式进行教学,不仅会导致学生感知食品生物技术专业枯燥、乏味,从而难以激发其学习兴趣,同时也不利于其真正掌握食品生物技术相关的知识和技能,从而导致其难以有效的将该项技术应用于实践,基于此,就需要各院校转变自身教学观念,积极探索食品生物技术应用技术型人才培养模式,才能为社会培养大批食品生物技术应用技术型人才。
一、转变专业教学定位食品生物技术指的是利用现代生物技术(如蛋白质工程、酶工程、酶分子进化工程等)刘食品原料的加工品质基因进行改良,或制造食品添加剂等,来改善食品原料农产品的品质和提高产量,从这个概念可以看出,食品生物技术专业是一门应用型专业,不仅要求学生了解和掌握食品生物化学、食品微生物学相关的知识,同时还需掌握食品加工用原辅料的质量要求、食品加工过程中的操作规程、工艺条件等,也即要具备良好的技术应用能力,为此,就需要各院校转变食品生物技术专业教学定位,将其定位为技术应用型专业,并围绕这个定位,不断优化专亚结构和教学模式,才能为应用技术型人才培养奠定良好的基础。
生物技术论文-最新范文

生物技术论文篇一:生物技术毕业论文目录生物技术制药现状及其发展前景 ........................................................ .. (3)中文摘要及其关键词 ........................................................ (3)英文摘要及其关键词 ........................................................ (3)引言 ........................................................ ........................................................... (3)一、生物技术制药行业现状 ........................................................ . (4)1.我国生物技术制药行业现状 ........................................................ .. (4)2.国外生物技术制药行业现状 ........................................................ .. (5)二、生物技术制药在医药行业中的应用 ........................................................ .. (6)1.生物技术制药在治疗肿瘤中的应用 ........................................................ .. (6)2. 生物技术制药在自身免疫性疾病中的应用 ........................................................ . (6)3. 生物技术制药在神经退化疾病中的应用 ........................................................ . (6)4. 生物技术制药在其他疾病中的应用 ........................................................ . (6)三、未来生物技术制药的发展方向 ........................................................ . (7)1. 大力开发新型治疗疫 (7)2. 开发活性蛋白与多肽药物 ........................................................ .. (7)3.发展氨基酸工业 ........................................................ . (7)4. 单克隆抗体的研发 ........................................................ .. (7)5. 血液替代品的研发 ........................................................ .. (8)6. 人体基因组的研究 ........................................................ .. (8)四、我国生物制药业发展的策略 ........................................................ .. (8)1、加快医药企业的重组,优化产业结构根据企业自身的特点,选择合适的重组策略:........................................................... .. (8)2、引进风险资金,加快生物制药产业化的发展步伐 (9)3、完善生物制药过程中的知识产权策略 ........................................................ .. (9)五、生物技术制药依赖相关领域的发展 ........................................................ .. (9)六、研究生物技术制药的意义 ........................................................ . (10)七、总结 ........................................................ ........................................................... .. (10)八、参考文献 ........................................................ ........................................................... (11)生物技术制药现状及其发展前景中文摘要及其关键词中文摘要:生物技术制药是以基因工程为基础、运用细胞工程技术、微生物工程技术、酶工程技术、蛋白质工程技术、分子生物学技术等技术]2[以及基因重组,基因突变,细胞组织培养等手段研究基因片段,研发药物用来基因诊断、治疗和预防疾病的发生]2[ 。
生物技术专业毕业实习论文

毕业实习论文姓名:学号:学院:班级:实习单位:实习时间:摘要:本文将讲述在实习期间,自己对所在实习岗位基本情况的了解,和实习单位概况、企业文化、产品简介和操作流程等的基本情况。
还将反映所学专业知识在实践中的运用情况,并且针对在这期间遇到的相关问题,通过思考和查询资料及请教有经验的前辈后发表自己的一些见解,最后将针对实习过程中的领悟体会做一个总结。
关键词:实习单位、产品介绍岗位介绍工作内容心得体会一、单位、产品介绍我所实习的单位是“玉溪沃森生物技术有限公司”该公司是属于云南沃森生物技术有限公司的一个分公司,主要是从事于人用疫苗研发、生产、销售的高新技术企业,公司于2005年3月在云南省玉溪市高新开发区注册成立,于2010年11月在中国深圳证券交易所创业板上市,现有员工800余人。
该公司在玉溪高新区建有一个国内领先的现代化生产基地,占地面积128亩,一期建成四个现代化细菌性疫苗生产线,技术工艺国内领先,生产规模达年产5000万支。
投资1.5亿元的玉溪疫苗生产基地二期工程也已2009年7月至今完成并投入生产。
建成后公司将成为国内乃至亚洲最重要的人用疫苗研发生产基地之一。
该公司聚集了众多疫苗行业的技术人才,拥有80余人的专业研发团队。
是国家高新技术企业、国家认定企业技术中心和疫苗产业化示范基地。
并先后独立承担国家科技部“863”重大攻关课题3项、国家发改委高新技术产业化项目2项,国家卫生部传染病防治重大项目1项,国家科技部支撑计划和国际合作项目各1项,云南省、昆明市科技攻关项目10余项。
目前本公司系国内唯一一家同时拥有两个细菌结合疫苗上市销售的疫苗企业。
该公司也构建了一支训练有素的营销队伍,营销网络覆盖全国31个省、2000多个县区。
公司在疫苗研发领域居于行业领先地位,迄今已开发成功了13个市场前景广阔的疫苗产品,立项在研产品近20项。
其中,两个产品即b型流感嗜血杆菌结合疫苗与冻干A、C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗已上市销售,并取得良好业绩。
医学生物技术论文3000字_医学生物技术毕业论文范文模板

医学生物技术论文3000字_医学生物技术毕业论文范文模板医学生物技术论文3000字(一):生物技术在医学领域中的应用和展望论文摘要:我国的科技水平在不断提高,很大程度上也促进了生物技术的发展。
在现代,生物技术的发展也在迅速加快,尤其是医学领域的发展速度非常快,取得了显著的成果,发展形势良好。
现代的生物技术给人类社会带来了巨大的影响,生物技术在医学领域中也得到了广泛的应用,一定程度上促进了现代医学的进一步发展。
关键词:生物技术;医学;应用;展望现代的生物技术发展及应用已渗透到多个领域之中,比如医学、农业、环境等,当然最重要的应用还是在医学领域中。
可以说生物技术的迅速发展促进了医学领域中的一些重要方面的改革。
在医疗领域中生物技术的应用是最早、也是最重要的应用之一,也使该技术发展得更加迅速,其效果更加明显。
在医疗领域,生物技术是不可替代的。
基于这一点,加强现代医学应用生物技术的研究分析就显得更加重要了。
随着现代社会和科学技术的不断发展和发步,现代生物技术也不断应用,并在生产与生活相关的各个领域得到广泛应用。
一、生物技术概念简析生物技术,指的是在现代生命科学基础上,利用生物组织和细胞的特性,进行生产和加工。
而在现代,生物技术发展成为以现代生命科学为基础,再利用生物细胞和组织性能进行加工和生产的技术。
在医疗领域,起到了更好的作用,主要包括细胞,基因,蛋白质,发酵等方面的工程。
二、生物技术在医学领域中的应用(一)预防医学中的应用生物技术在预防医学中的检测环境和环境净化起着重要作用,在这个过程中,生物技术在这个过程中扮演着至关重要的角色。
比如,通过生物肥料的研发,可以在很大程度上减少对环境的污染,从而降低环境的污染。
不仅如此,生物技术对预防医学的应用也表现为传统疫苗改造的成果。
在过去的一段时期里,传统疫苗主要的作用是减少或消除一些致病物质的毒性,从现代医学的角度来看,疫苗在应用上逐渐出现了一定的限制和局限性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
生物技术专业毕业论文范文题目 :西伯利亚蝗基因组DNA不同提取方法的研究专业 : 生物技术目录中文摘要................................................................................................ 3 英文摘要 (4)引言…………………………………………………………………………………………5 1 材料与方法.......................................................................................... 6 1.1 实验材料 (6)1.2主要试剂………………………………………………………………………………6 1.3主要仪器……………………………………………………………………………… 6 1.4研究方法 (7)1.4.1 SDS-蛋白酶K消化法………………………………………………………………7 1.4.2饱和NaCl 法………………………………………………………………………… 8 1.4.3 CTAB 法……………………………………………………………………………… 9 1.5电泳及结果记录……………………………………………………………………… 10 2结果与分析……………………………………………………………………………… 10 2.1总DNA的提取结果.............................................................................. 10 2.2结果与分析....................................................................................... 12 3 讨论 (13)3.1三种不同DNA提取方法的比较………………………………………………………13 3.2实验结果不理想的原因分析.................................................................. 14 参考文献 (15)西伯利亚蝗基因组DNA不同提取方法的研究摘要:本实验以新疆草原蝗虫的主要危害种类——西伯利亚蝗为研究对象,分别对干制和乙醇浸泡的标本用SDS法、饱和NaCl 法和CTAB法进行了基因组DNA 的提取比较。
实验结果表明,SDS法提取的总DNA 带型整齐,饱和NaCl法和CTAB法提取的标本总DNA获得率较低,在琼脂糖凝胶电泳检测中大部分有明显降解。
另外,乙醇浸制的标本总DNA的获得率及质量均高于干标本。
研究结果可为今后进一步开展蝗科亲缘关系分析、基因组比较和遗传多态性等分子生物学研究提供基础资料。
关键词:基因组DNA , 不同方法, 西伯利亚蝗Studies on different extraction methods of Gomphocerussibiricus genomic DNA(College of Life and environment sciences ,Xinjiang Normal university, urumqi 830054)Abstract: The experiments in Xinjiang grassland locusts main types of hazards Gomphocerussibiricus for research, genome DNA of grasshoppers which were kept as dry sample or preserved in 100% ethanol was extracted using SDS method,Saturated NaCl law and the law CTABextraction of DNA genome comparison.Experimental results showed ,SDS method brought from the total DNA, saturated Nacl law and the law CTAB extraction of total DNA in specimens of the lower rate in most Agarose gel electrophoresis testing marked degradation. In addition, ethanol college system overall DNA specimens obtained were higher than the rate and quality of the dry specimens. The results will further their relatives for Acrididae future analysis, genome comparison and genetic polymorphism, and other molecular biology research based information. Key words: genomic DNA extraction, different extraction methods , Gomphocerus sibiricus第2页共41页引言蝗虫是农、牧、林业的主要害虫之一,有些种类甚至可造成毁灭[1]性的灾害。
因此,对蝗虫开展各方面研究都有很重要的意义。
为有效防治蝗虫灾害,必须正确识别蝗虫种类。
有关蝗虫的分类研究已有[2]很多报道,前人已采集了大量的标本,命名了大量的模式种,这些模式种构成了蝗虫系统分类的基础和框架,用分子生物学技术研究蝗虫分类和系统演化时,若能用到这些标本和模式种,可以极大地扩展蝗虫分类和系统演化的分子生物学研究范围,有助于建立正确和完善的分类[3~5]体系,构建系统的发育树, 而提取高质量和高产量的基因组DNA是进行各种PCR、Southern 杂交、构建cDNA 文库及其它一些分子[6]生物学研究的基础和前提。
在实际工作中, 由于很难直接用活标本进行实验,常常使用的是干制标本或浸泡标本。
而若标本保存不当,细胞内DNA 发生降解,则难以获得高质量的DNA模板,导致PCR 扩增结果不稳定甚至无扩增[7]产物出现,给实验工作者带来诸多不便。
因此,为开展蝗虫分子系统学研究,需要通过试验寻找一种快速、简便、高质量抽提蝗总DNA的方法。
基因组DNA的应用十分广泛,提取方法在国内外亦有不少报道[8~11],概括起来可分为两大类:(1)盐析提取法;(2)有机溶剂提取[12]法。
本文分别用SDS-蛋白酶K消化法、饱和NaCl法、CTAB法三种不同的提取方法,综合其他各种昆虫基因组DNA提取方法的优点,对第3页共41页新疆草原的主要危害种类——西伯利亚蝗(Gomphocerus sibiricus)干制标本和无水乙醇保存的标本进行了基因组DNA的提取方法的比较,为进一步开展蝗虫分类学研究提供基础资料。
1 材料与方法1.1实验材料本实验所用蝗虫标本见表1。
表1 研究样本来源及保存方式Table 1 Research sources and the preservation of samples种名采集地点采集时间保存方式西伯利亚蝗新疆哈密 2005年6月干标本西伯利亚蝗新疆哈密 2005年6月无水乙醇固定 1.2主要试剂:(1) 提取试剂:Tris(三羟甲基氨基甲烷)、EDTA(乙二氨四乙酸)、SDS(十二烷基硫酸钠)、蛋白酶K、酚、氯仿、异戊醇、无水乙醇、异丙醇、RNA酶、β-巯基乙醇、CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)等。
(2) 电泳试剂:琼脂糖、TBE、溴酚兰、蔗糖等。
1. 3主要仪器:台式冷冻高速离心机 D-37520 德国电子天平 AL-204 梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司座式自动蒸汽灭菌锅ZDX-35SBI 上海申安医疗器械厂热空气消毒箱 GRX-9203A 上海一恒科技有限公司电热恒温水浴锅 DZKW-S-8 北京光明医疗器械厂超净工作台 SW-CJ-IF 苏州安泰空气技术有限公司第4页共41页冰箱 BCD-208K/ACJN 青岛海尔股份有限公司电泳仪 DYY-2C 北京六一仪器厂紫外分析仪 WD-9403B 北京六一仪器厂凝胶成像仪、移液枪等。
1.4研究方法:[12~14] 1.4.1 SDS-蛋白酶K消化法(1)试剂及溶液A液:Tris 0.05 mol/L、NaCl 0.1 mol/L、EDTA 0.1 mol/LpH 7.0,8.0。
B液:5%的SDSC液:2 mg/mL的蛋白酶K(2)操作方法:1)取样:将蝗虫干标本和无水乙醇浸制标本用无菌三蒸水冲洗2,3 次;用无菌三蒸水浸泡48 h 以上,弃水;弃去浸泡液,取蝗虫后足股节肌肉,剪碎材料于装有0.8 mL匀浆液(A液)的1.5 mL Eppendorf管中。
2)研磨: 与离心管相匹配的玻璃棒将样品研磨至匀浆状。
3)加入0.1 mL的5,SDS和0.1 mL的2 mg/mL蛋白酶K。
4)水浴:37?水浴1,3 h,直至混合液消化得很清亮为止。
5)酚抽提:在混合液中加入等体积的平衡酚,上下缓慢颠倒十次,切勿剧烈振荡,在台式高速离心机上6 000 r/min离心10 min,取上清液。
第5页共41页6)重复步骤5:直至水相与酚相的界面处看不到白色的蛋白质层为止,取上清液。
7)氯仿?异戊醇(24?1)抽提:上清液中加入等体积的氯仿?异戊醇,上下缓慢颠倒十次,在台式高速离心机上8 000 r/min离心10 min,取上清液;再次重复此步骤。
8)沉淀DNA:在上清液中加入2×体积的冷无水乙醇(预先置-20?冰箱内)沉淀DNA(冰箱内放置10 min,12 000 r/min离心 10 min,弃上清液。
9)洗涤DNA:在留有沉淀的离心管中加入1 mL70%的冷乙醇洗涤DNA,在台式高速离心机上10 000 r/min离心5 min,倾去上清液。
10)保存:自然干燥,加适量TE或无菌三蒸水溶解,于- 20?保存备用。
[9 ,15 ] 1.4.2饱和NaCl法(1)试剂及溶液浸泡液(TE):10mmol/Ltris-HCl、200mmol/LEDTA、50mmol/L NaClpH8.0。
消化液:STE(0.1mol/L Nacl、10 mol/L Tris-HCl、1mmol/LEDTApH 8.0、1 % SDS、200μg/ml Proteinase K。