细胞试剂盒的选择
细胞组织高质纯化溶酶体(lysosome)分离试剂盒产品说明
细胞/组织高质纯化溶酶体（lysosome）分离试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细胞/组织高质纯化溶酶体（lysosome）分离试剂是一种旨在从动物细胞或组织中分离出活性完整而高度纯化的溶酶体细胞器的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
适合于动物软组织（肝或脑组织）和培养细胞的溶酶体的制备。
产品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能稳定，分离产量和纯度俱佳。
技术背景溶酶体（lysosome）是一种普遍存在于真核细胞中的细胞器，含有酸性水解酶，例如酯酶、淀粉酶、蛋白酶、核酶等，分解各种细胞残渣和废弃物质，包括过多的或破损的其它细胞器、食物颗粒、吞噬的细菌和病毒等。
其大小为0.5至1.5微米，球圆形，溶酶体内pH为5.0左右。
溶酶体功能异常会引起溶酶体贮积症（1ysosomal storage disorders；LSDs），例如家族性白痴病（Tay-sachs disease）和庞贝氏症（Pompe’s disease）。
溶酶体细胞器的分离是现代细胞生物学研究的最常用的手段之一。
从任何组织或细胞分离溶酶体的技术方法基本上采用：第一，通过机械或化学方法破裂细胞；第二，通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器；第三，通过高速差速离心获得溶酶体；甚至，第四，可以通过等密度离心获得纯度更高的溶酶体。
产品内容清理液（Reagent A）毫升裂解液（Reagent B）毫升净化液（Reagent C）毫升强化液（Reagent D）毫升分离液（Reagent E）毫升高纯液A（Reagent F）毫升高纯液B（Reagent G）毫升高纯液C（Reagent H）毫升高纯液D（Reagent I）毫升高纯液E（Reagent J）毫升保存液（Reagent K）毫升产品说明书1份保存方式保存净化液（Reagent C）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备HANK平衡盐缓冲溶液（HL12028）或PBS缓冲溶液（HL12033）：用于清理细胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（HL12024）：用于细胞脱离完全细胞培养液（HL12052）：用于细胞处理所需的培养基15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器1.5毫升离心管：用于样品操作的容器6毫升超速离心管：用于超高速离心的容器4℃台式离心机：用于沉淀细胞4℃超速离心机：用于分离细胞器成分DOUNCE匀浆器：用于裂解组织细胞实验步骤一、动物软组织溶酶体分离（组织匀浆法）实验开始前，将－20℃冰箱里的净化液（Reagent C）取出冻融，然后移取xx毫升净化液（Reagent C）和xx毫升的裂解液（Reagent B）到15毫升锥形离心管里，混匀后，标记为裂解工作液，放进冰槽里备用。
细胞线粒体分离试剂盒经验
细胞线粒体分离试剂盒经验细胞线粒体是细胞内的一个重要器官，负责细胞内能量的生产和调控。
由于其结构特殊且与细胞核分离，为了研究线粒体的功能和机制，科学家们开发了一种称为细胞线粒体分离试剂盒的工具。
本文将介绍细胞线粒体分离试剂盒的使用经验，为科研工作者提供参考。
细胞线粒体分离试剂盒的选择非常重要。
市面上有多种品牌的试剂盒可供选择，但不同试剂盒的分离效果和操作方法可能有所不同。
因此，在选择试剂盒时，需要根据具体实验需求和文献研究，选择适合的试剂盒。
准备工作要做好。
在使用细胞线粒体分离试剂盒前，需要准备好所需的实验材料和设备。
常用的实验材料包括培养细胞、培养基、缓冲液等，而设备则包括离心机、显微镜、离心管等。
确保实验材料和设备的质量和干净程度对于细胞线粒体的分离至关重要。
然后，按照试剂盒说明书进行操作。
不同的试剂盒可能有不同的操作步骤，因此在使用前，务必仔细阅读试剂盒的说明书，并按照说明书的要求进行操作。
一般来说，分离线粒体的步骤包括细胞收集、细胞破碎、离心分离等。
在操作过程中，要注意操作的细节，严格控制温度和时间，以获得较好的分离效果。
要注意细胞线粒体的保存和处理。
细胞线粒体是一种易于受到氧化损伤的器官，因此在分离后，应尽快进行后续实验或储存。
常用的线粒体保存方法包括冷冻保存和低温保存。
在保存过程中，需要保持样品的完整性和纯度，避免细胞线粒体的损伤和污染。
对实验结果进行分析和解读。
细胞线粒体分离试剂盒的最终目的是获得纯净的线粒体样品，以进行后续的功能研究。
因此，在分离后，需要对线粒体样品进行质量检测和功能分析，如线粒体呼吸链活性、ATP产量等。
通过对实验结果的分析和解读，可以进一步揭示细胞线粒体的功能和机制。
细胞线粒体分离试剂盒是一种用于研究细胞线粒体的重要工具。
在使用试剂盒时，科研工作者需要选择适合的试剂盒，做好实验准备工作，按照说明书进行操作，并注意样品的保存和处理。
最后，对实验结果进行分析和解读，可以进一步深入了解细胞线粒体的功能和机制。
淋巴细胞亚群检测试剂盒
02
产品用途与原理
检测目的与适用范围
检测淋巴细胞亚群
试剂盒可用于检测人体内淋巴细胞亚群的分布和比例，适用于免疫学、血液学等领域的研 究和应用。
评估免疫状态
通过对淋巴细胞亚群的检测，可以了解机体的免疫状态、免疫功能缺陷或免疫应答异常等 情况，为疾病诊断、预后评估等提供参考。
监测免疫治疗
在免疫治疗过程中，定期监测淋巴细胞亚群的变化有助于评估治疗效果、调整治疗方案以 及预测不良反应等。
生物医药研究领域应用
淋巴细胞亚群功能和分子机制研究 药物免疫学研究和评价
免疫应答和免疫调节研究 疫苗免疫效果评估和优化
其他应用场景与案例分享
健康体检和筛查 生物安全评估和检测
流行病学调查和监测 法医鉴定和亲子鉴定等司法鉴定领域
06
产品常见问题与解决方案
试剂配制问题与解决方案
01
02
总结词：试剂配制问题 通常涉及试剂配制过程 中出现的误差，如试剂 浓度不准确、试剂污染 、试剂失效等。
03
产品性能指标
灵敏度与特异性
灵敏度
试剂盒应能够检测到最低限度的淋巴细胞亚群，确保对微小变化做出准确反 应。
特异性
试剂盒应能够准确区分不同的淋巴细胞亚群，避免混淆和误判。
重复性与稳定性
重复性
使用相同样本和试剂盒多次检测时，应得到一致的检测结果。
稳定性
试剂盒在长时间储存和使用过程中应保持稳定，确保检测结果的可靠性。
可以对细胞进行定量和定性分析。03数据分析通过对检测数据的分析，可以获得淋巴细胞亚群的分布和比例等信息
，进而对机体的免疫状态进行评估。
样本要求与处理
样本类型
通常采用外周血或骨髓液等作为样本，要求采集新鲜、无污 染的样本。
吉林常用的cck8试剂盒原理(二)
吉林常用的cck8试剂盒原理(二)吉林常用的CCK8试剂盒原理1. CCK8试剂盒简介•CCK8试剂盒是一种常用的细胞增殖和生存率检测试剂盒。
•它可以测定细胞的代谢活性和细胞数量，常用于细胞毒性、细胞增殖和药效等研究领域。
2. CCK8试剂盒的原理•CCK8试剂盒的原理是基于细胞线粒体酶（活力）的变化反应。
•试剂的主要成分是CCK8（Cell Counting Kit-8），它是一种液体试剂，含有啶基（doj）和可溶性噻唑盐（WST-8）。
•在细胞代谢活跃的情况下，CCK8会被那些具有线粒体酶的细胞还原，产生可溶性的形成物。
3. CCK8试剂盒的反应过程CCK8试剂盒的反应过程主要包括以下几个步骤：细胞染色预处理•首先，将需要检测的细胞接种在培养皿中，使其附着在培养皿底部。
•然后，根据实验要求，给细胞添加特定的处理，如药物处理、基因过表达等。
加入CCK8试剂•将CCK8试剂以一定比例（通常为细胞培养液的10%）滴加到含有细胞的培养皿中。
•保持培养皿在恒定环境下培养一段时间，使CCK8与细胞进行充分的反应。
反应产物的形成•经过一段时间的反应，CCK8会被具有线粒体酶的细胞还原，形成可溶性的黄色产物。
•黄色产物的浓度正相关于细胞的代谢活性和数量。
•这个过程是通过电子传递链来发生的，反应产物在吸光度450nm 处可检测到。
光学密度的测量•使用酶标仪、多功能微板分析仪或其他光学密度测量设备，测量样品溶液的吸光度。
•一般来说，吸光度的数值越高，说明细胞的代谢活性和数量越高。
4. CCK8试剂盒的优点•CCK8试剂盒具有快速、简便的特点，可以在较短的时间内评价细胞的增殖和存活情况。
•与传统的MTT（3-（4，5-二甲基咪唑基）-2，5-二苯基-2H-四唑）法相比，CCK8试剂盒无需溶解晶体，节省了试验时间。
5. 小结•CCK8试剂盒利用细胞的代谢活性和数量来评价细胞的生存和增殖情况。
•其原理是基于线粒体酶反应，通过用CCK8试剂检测反应产物的浓度来间接评价细胞状态。
MTT简介及试剂盒说明
产品简介：1. MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的实验方法。
由于细胞活力与细胞数呈正相关，因此常常用来检测细胞的增殖情况。
MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan。
在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解。
然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。
细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。
2. 本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方，无需去除原有的培养液，可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。
从而避免了由于去除培养液时formazan被部分去除而引起的误差。
3. 本试剂盒背景低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便提高了可靠性。
4. 本产品为500 次（5个96孔细胞培养板）操作。
产品内容：MTT染色液5mlFormazan溶解液55ml说明书1份保存条件：MTT染色液需-20℃避光保存；Formazan溶解液可以室温保存。
注意事项：1. 由于使用96孔板进行检测，如果你的细胞要养48 h或更长，建议不要吝啬96-孔板的四周边孔，这32个边孔不能使用，建议加入灭菌PBS以饱和中间64个孔的水分。
因为细胞培养过程中，边孔的水分蒸发很快，培养液及里面的药物会出现浓缩现象，细胞的状况就复杂了2. MTT溶剂在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. MTT一般最好4ºC避光保存两周内有效，保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解，尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。
4. Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。
5. 孵育时，须避光6. MTT有致癌性，用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感。
细胞膜染色PKH67
产品简介：
贝博® BBcellProbe® 荧光染料 PKH67 是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可 以标记活体细胞，通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞。
PKH67 对细胞毒性较小，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，有着强而稳 定的绿色荧光。经 PKH67 标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞 染色的功能。
产品说明书
细胞膜染色试剂盒
（PKH67）
货号：BB-441112
V 8.9
试剂盒储存条件：
-20℃ 避光保存。
【注】： 开盖后组份按要求条件保存。 拆封后请尽快使用完！
试剂盒组成：
产品组成
BB-441112-1
BB-441112-2
组份编号
规格
500 T
1000 T
试剂 A：PKH67 染色试剂
耗材：
离心管 吸头 96孔培养板
使用方法：
使用注意事项： 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。 染色浓度根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。 配制的 PKH67 母液极易水解，建议分装保存，分装后用封口膜密封管口，再用锡箔纸包裹，最
有效期：
一年。
【注】： 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。 试剂拆封后请尽快使用完！
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咨询邮箱：bestbio@
电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
E 系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、 微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染 色试剂盒产品。
细胞内MDA测定
【求助】关于测定细胞MDA的方法做细胞的MDA，不知用什么方法好。
用比色方法一个样本需要多少细胞？细胞太少是不是测不出？有人说要达到一定数量才行。
具体步骤可否详告？细胞内的检测需要经过适当的处理，即制成约10%的匀浆液，放置-20℃冰箱内，反复冰融3次，然后用显微镜观察细胞是否完全破碎，如不完全则继续冻融2次，再以4000转/分，离心15分钟，匀浆上清液作SOD、MDA测定。
而细胞上清则无须这些步骤，直接检测即可。
细胞测MDA有以下建议，希望有帮助1.细胞的量要大，用75 cm2的大瓶比较好。
细胞量少了最后比色时值可能和空白一样。
2.-20度反复冻融三次和超声效果差不多，但用超声速度快一点。
每次冻融时用漩涡振荡仪把它混匀；超声时要注意时间，不要过热。
3.尽量不要用南京建成的试剂盒，效果不理想。
TBA法很成熟，我们都是自己配的，效果很好。
4.一定要做空白对照，最好做阳性对照。
5.煮沸时，在离心管上用针戳个洞，以免液体喷出。
谢谢高人指教！只是我做的不是培养的细胞，而是从人体中采出的新鲜细胞标本，我想等全部标本收集完之后（大概3个月）之后再一起做，所以很想知道能否将标本处理后保存一段时间再检测，标本怎么处理？怎么保存？我也查了很多资料，大都是做培养细胞内MDA，这方面的资料没查到，真的希望得到高人指教！不胜感激！75 cm2的大瓶大概有多少细胞？106？没做过细胞培养——是10的6次方个细胞，可以先初步的进行细胞计数，可以用血细胞计数板，方法很简单的，然后根据需要调整细胞数量就可以了细胞计数：1、将血球计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板上。
2、将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。
3、静置3分钟。
4、镜下观察，计算计数板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按下式计算：细胞数/ml＝4大格细胞总数/ 4×10000注意：镜下偶见由两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团占10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。
CCK8 protocols
它情况以此类推。可以用加了相应量细胞培养液和 CCK-8 溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。如
果担心所使用的药物会干扰检测，需设置加了相应量细胞培养液、药物和 CCK-8 溶液但没有加入细胞 的孔作为空白对照。 4. 在细胞培养箱内继续孵育 0.5-4 小时，对于大多数情况孵育 1 小时就可以了。时间的长短根据细胞的类 型和细胞的密度等实验情况而定，初次实验时可以在 0.5、1、2 和 4 小时后分别用酶标仪检测，然后 选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。 5. 在 450nm 测定吸光度。如无 450nm 滤光片，可以使用 420-480nm 的滤光片。可以使用大于 600nm 的 波长，例如 650nm，作为参考波长进行双波长测定。胞培养在 96 孔培养
产品内容：
CCK-8 溶液
5ml
说明书
1份
保存条件：
4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存两年有效。
注意事项：
1. 由于使用 96 孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于 96 孔板
周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加 PBS，水或培养液；另一方面，可以把 96
孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
2. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，如果待检测体系中存在较多的还原剂，例如一些抗氧化剂
会干扰检测，需设法去除。
3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
4. 使用时最好带那种透明的簿膜手套。
使用说明：
1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入 100ul,铺板使待测细胞调密度至 1000-10000 孔，（边
制等操作。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块 96 孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细 胞，也不必采用额外的步骤去溶解 formazan。可以用于大批量样品的检测。 7. 酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。 8. WST-8 对细胞无明显毒性。加入 WST-8 显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加 灵活，便于找到最佳测定时间。 9. 关于不同细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择。 10. 本试剂盒可以测定 500 个样品。
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关于不同细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择（碧云天）C0009 C0036 C0038产品名称MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒Cell Counting Kit-8检测样品数500 500 500 价格228.00元458.00元568.00元主要用途细胞增殖及细胞毒性检测细胞增殖及细胞毒性检测细胞增殖及细胞毒性检测形成的formazan的水溶性差好好检测灵敏度高很高最高检测时间较长较短较短检测波长560-600nm 420-480nm 420-480nm细胞毒性高，细胞形态完全消失很低，细胞形态不变很低，细胞形态不变试剂稳定性一般较好很好大批量样品检测可以非常适合非常适合便捷程度一般比较便捷非常便捷如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求不是很高，从经济角度可以选择C0009，即MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒。
C0009可以满足常规的细胞增殖或细胞毒性的检测，主要缺点是形成的formazan水溶性很差，需要额外的步骤溶解formazan。
如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求灵敏度非常高，并且希望非常便捷，在研究经费许可的条件下，建议选择使用C0038，即Cell Counting Kit-8。
如果既希望检测灵敏度很高并且检测比较便捷，但又希望价格不是太贵，可以选择C0036，即WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒。
MTT的替代产品—XTT，WST-1，CCK-8（WST-8）（生物吧）1、MTT法MTT：化学名： 3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。
检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。
二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臜，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。
在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。
该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。
它的特点是灵敏度高、经济。
缺点：由于MTT经还原所产生的甲臜产物不溶于水，需被溶解后才能检测。
这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲臜的有机溶剂对实验者也有损害。
2、XTT法XTT：化学名：2,3- bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide，作为线粒体脱氢酶的作用底物，被活细胞还原成水溶性的橙黄色甲臜产物。
当XTT与电子偶合剂（例如PMS）联合应用时，其所产生的水溶性的甲臜产物的吸光度与活细胞的数量成正比。
优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT。
缺点：XTT水溶液不稳定，需要低温保存或现配现用。
3. WST-1WST-1是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan(参考图1)。
细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。
WST-1是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。
首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-1和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。
其次，WST-1产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。
再次，WST-1比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。
另外，WST-1和MTT、XTT等相比，线性范围更宽，灵敏度更高4、CCK-8法或称WST-8法CCK-8试剂中含有WST–8：化学名：2-（2-甲氧基-4-硝基苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯）-2H-四唑单钠盐，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物（Formazan）。
生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。
用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。
该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；2、检测快速；3、灵敏度高，甚至可以测定较低细胞密度；4、重复性优于MTT；5、对细胞毒性小；6、为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。
缺点：1、与MTT相比，CCK-8和XTT的价格比较贵。
2、CCK-8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。
WST-1产品简介：WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-1是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan (参考图1)。
细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。
WST-1是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS 等相比有明显的优点。
首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan 不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-1和XTT、MTS产生的ormazan 都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。
其次，WST-1产生的formazan比XTT 和MTS产生的formazan更易溶解。
再次，WST-1比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。
另外，WST-1和MTT、XTT等相比，线性范围更宽，灵敏度更高(参考图2)。
本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测等。
本试剂盒检测非常便捷。
无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。
不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外步骤去溶解formazan。
可以用于大批量样品的检测。
酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
WST-1对细胞无明显毒性。
加入WST-1显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到最佳测定时间。
如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求不是很高，从经济角度可以选择BC0009，即MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒。
BC0009可以满足常规的细胞增殖或细胞毒性的检测，主要缺点是形成的formazan水溶性很差，需要额外的步骤溶解formazan。
如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求灵敏度非常高，并且希望非常便捷，在研究经费许可的条件下，建议选择使用BC0038，即Cell Counting Kit-8。
如果既希望检测灵敏度很高并且检测比较便捷，但又希望价格不是太贵，可以选择BC0036，即WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒。
本试剂盒可以测定500个样品。
包装清单：保存条件：-20℃避光保存，一年有效。
WST-1粉末溶解后，4℃避光可以保存一周，-20℃避光可以保存半年(宜适当分装，尽量避免反复冻融)。
注意事项：由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。
一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1. WST-1溶液的配制：把5毫升电子耦合试剂加入到WST-1粉末中，完全溶解即成WST-1溶液。
WST-1溶液4℃避光可保存一周，而不影响使用效果。
短期内不使用的WST-1溶液，分装后可以-20℃避光保存半年(尽量避免反复冻融)。
冻存的WST-1溶液溶解后可能会观察到一些沉淀物，这是正常现象，37℃水浴孵育2-10分钟，通常可以完全溶解。
2. 通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素决定)。
按照实验需要，进行培养并给予0-10微升特定的药物刺激。
3. 每孔加入10微升WST-1溶液。
如果起始的培养体积为200微升，则需加入20微升WST-1溶液，其它情况以此类推。
可以用加了相应量细胞培养液和WST-1溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。
4. 在细胞培养箱内继续孵育0.5-4小时，对于大多数情况，孵育1-2小时就可以了。
时间长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，初次实验时可以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。
图3为HT-1080细胞在不同时间测定的细胞数量曲线。
5. 把96孔板置于摇床上摇动一分钟，以充分混匀待检测体系。
6. 在450nm测定吸光度。
如无450nm滤光片，可以使用420-480nm的滤光片。
可以使用大于600nm的波长作为参考波长进行双波长测定。
Cell Counting Kit-8试剂盒产品简介：Cell Counting Kit-8（CCK-8试剂盒）是检测细胞增殖、细胞存活和细胞毒性的试剂盒，是一种基于WST-8的广泛应用快速高灵敏度检测试剂盒，为MTT法的替代方法，试剂盒中采用水溶性四唑盐-WST-8，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan(参考图1)。
细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。
对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
图1. WST-8化学结构和反应原理图(EC=electron coupling reagent，即电子耦合试剂)WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。
首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。
其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。
再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。