离子结合型果胶含量试剂盒说明书(分光光度法
苏州格锐思生物科技有限公司多聚半乳糖醛酸酶(PG)试剂盒说明书
多聚半乳糖醛酸酶（ploygalacturonase，PG）试剂盒说明书（货号：G0701F分光法48样）一、产品简介：果胶酶是指分解果胶的多种酶，主要包括多聚半乳糖醛酸酶(PG)，果胶裂解酶(PL)，果胶甲酯酶(PME)和原果胶酶，贮藏过程中起作用的主要是PG。
所以该酶在食品贮藏保鲜和植物抗病性等领域具有较高的研究价值。
果胶在多聚半乳糖醛酸酶(PG)作用下，能水解产生带有具有还原性醛基的半乳糖醛酸。
与DNS试剂反应生成红棕色物质，在540nm有特征吸收峰，测定540nm处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。
二、试剂盒组成和配制：试剂名称规格保存要求备注提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体20mL×1瓶4℃保存试剂二液体20mL×1瓶4℃保存试剂三液体46mL×1瓶4℃保存标准品粉剂mg×1支4℃保存若重新做标曲，则用到该试剂三、所需仪器和用品：可见分光度计、1mL玻璃比色皿（光径1cm）、台式离心机、天平、可调式移液器、水浴锅、研钵、冰。
四、多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性检测：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、样本制备：①组织样本：称取约0.2g组织（水分充足的样本可取1g），加入1mL经预冷的95%乙醇冰浴匀浆，4℃放置10min；12000rpm，4℃离心5min；弃上清，留沉淀，向沉淀中加入经预冷的80%乙醇混匀，4℃放置10min；12000rpm，4℃离心5min；弃上清，留沉淀。
再向沉淀中加入1mL经预冷提取液，涡旋混匀，4℃放置10min；12000rpm，4℃离心10min；留上清，弃沉淀。
上清液置冰上待测。
②液体样本：直接检测。
若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测：①分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
②在EP管中依次加入：试剂名称（μL）测定管对照管样本6060试剂一390试剂二39040℃水浴30min试剂三450450沸水浴（95-100℃）5min，冰浴或淋浴冷却后，全部转移于1mL玻璃比色皿中，540nm处测定吸光值A，△A=A测定管-A对照管（每个测定管设一个对照管）。
果胶的提取与果胶含量的测定
资料范本本资料为word版本，可以直接编辑和打印，感谢您的下载果胶的提取与果胶含量的测定地点：__________________时间：__________________说明：本资料适用于约定双方经过谈判，协商而共同承认，共同遵守的责任与义务，仅供参考，文档可直接下载或修改，不需要的部分可直接删除，使用时请详细阅读内容果胶的提取与果胶含量的测定一、引言果胶广泛存在于水果和蔬菜中，如苹果中含量为0.7—1.5%（以湿品计），在蔬菜中以南瓜含量最多（达7%-17%）。
果胶的基本结构是以α-1，4苷键连接的聚半乳糖醛酸，其中部分羧基被甲酯化，其余的羧基与钾、钠、铵离子结合成盐。
在果蔬中，尤其是未成熟的水果和皮中，果胶多数以原果胶存在，原果胶通过金属离子桥（比如Ca2+）与多聚半乳糖醛酸中的游离羧基相结合。
原果胶不溶于水，故用酸水解，生成可溶性的果胶，再进行提取、脱色、沉淀、干燥，即为商品果胶。
从柑橘皮中提取的果胶是高酯化度的果胶（酯化度在70%以上）。
在食品工业中常利用果胶制作果酱、果冻和糖果，在汁液类食品中作增稠剂、乳化剂。
二、实验材料、试剂与仪器材料：桔皮，苹果等；试剂：0.25% HCL，95%乙醇（AR），精制乙醇，乙醚，0.05mol/L HCl，0.15%咔唑乙醇溶液，半乳糖醛酸标准液，浓硫酸（优级纯）仪器：分光光度计，50mL比色管，分析天平，水浴锅，回流冷凝器，烘箱等三、实验步骤（一）果胶的提取1、原料预处理：称取新鲜柑橘皮20g（或干样8g），用清水洗净后，放入250mL容量瓶中，加水120mL，加热至90℃保持5-10min，使酶失活。
用水冲洗后切成3～5mm的颗粒，用50℃左右的热水漂洗，直至水为无色、果皮无异味为止（每次漂洗必须把果皮用尼龙布挤干，在进行下一次的漂洗）。
2、酸水解提取：将预处理过的果皮粒放入烧杯中，加约60mL 0.25% HCL 溶液，以浸没果皮为宜，调pH至2.0～2.5，加热至90℃煮45min，趁热用100目尼龙布或四层纱布过滤。
NYT2016-2011水果及其制品中果胶含量的测定分光光度法
NY/T 2016—2011 水果及其制品中果胶含量的测定 分光光度法1 范围本标准规定了用分光光度法测定水果及其制品中果胶含量的方法。
本标准适用于水果及其制品中果胶含量的测定。
本标准方法线性范围为1 mg／L～l00 mg／L，检出限为0.02 g／kg。
2 规范性引用文件下列文件对本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB／T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理用无水乙醇沉淀试样中的果胶，果胶经水解后生成半乳糖醛酸，在硫酸中与咔唑试剂发生缩合反应,生成紫红色化合物，该化合物在525 nm处有最大吸收，其吸收值与果胶含量成正比，以半乳糖醛酸为标准物质，标准曲线法定量。
4 试剂除非另有说明，所用水应达到GB／T 6682规定的三级水要求，所用试剂均为分析纯试剂。
4.1无水乙醇(C2H6O)。
4.2 硫酸（H2SO4，优级纯）。
4.3 咔唑(C12 H9N)。
4.4 67%乙醇溶液：无水乙醇＋水= 2+1。
4.5 pH0.5的硫酸溶液：用硫酸调节水的pH至0.5。
4.6 40 g／L氢氧化钠溶液：称取4.0g氢氧化钠，用水溶解并定容至100 mL。
4.7 1 g／L咔唑乙醇溶液：称取0.100 0 g咔唑，用无水乙醇溶解并定容至100 mL。
作空白实验检测，即1 mL水、0.25 mL咔唑乙醇溶液和5 mL硫酸混合后应清澈、透明、无色。
4.8 半乳糖醛酸标准储备液：准确称取无水半乳糖醛酸0.100 0 g，用少量水溶解，加入0.5 mL氢氧化钠溶液(4.6)，定容至100 mL，混匀。
此溶液中半乳糖醛酸质量浓度为1 000 mg／L。
4.9半乳糖醛酸标准使用液：分别吸取0.0 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL半乳糖醛酸标准储备液(4.8)于50 mL容量瓶中,定容，溶液质量浓度分别为0.0 mg／L、20.0 mg／L、40.0 mg／L、60.0 mg／L、80.0 mg／L、100.0 mg／L。
多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC2660规格:50T/24S产品简介：多聚半乳糖醛酸酶（Ploygalacturonase,PG）属果胶酶的一种，广泛存在于植物、细菌及真菌中。
其催化多聚半乳糖醛酸分解，在果实软化、花粉授粉、种子发育成熟及器官脱落等方面具有重要作用，并且病原菌在侵染宿主植物时，可分泌多聚半乳糖醛酸酶来降解宿主细胞壁，进而导致病程发展。
PG水解多聚半乳糖醛酸生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸与DNS试剂反应生成在540nm有特征吸收峰的棕红色物质，测定540nm处吸光值变化可计算得果胶酶活性。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、低温台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
产品内容：提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体8mL×1瓶，4℃保存。
若溶液中有晶体析出，37℃水浴溶解。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加入8mL蒸馏水，60℃水浴助溶。
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1支，10mg半乳糖醛酸，4℃保存。
临用前加入0.943mL蒸馏水，配成50μmol/mL 的标准液。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照质量（g）:蒸馏水体积(mL)为1:5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，16000g，离心10min，取上清置于冰上待测。
细菌：先收集细菌到离心管内，离心后弃上清；按照细菌数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000︰1的比例（建议500万个细菌加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细菌（功率20%或200W，超声3s，间隔7s，总时间5min）；然后4℃，16000g，离心10min取上清置于冰上待测。
液体：直接检测或用提取液稀释后检测。
果胶甲酯化程度试剂盒说明书
果胶甲酯化程度试剂盒说明书 微量法100T/96S注 意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分，除了起结构支撑、物质运输等作用外，还具有抵抗逆境的作用。
果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。
测定原理：果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇，甲醇与2,4-戊二酮反应显色，在412nm 下测定吸光值；同时半乳糖醛酸在70℃下与浓硫酸反应生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸，5-甲酰基-2-呋喃甲酸与3,5-二甲基苯酚反应产生有色物质，在450nm 下有最大吸光值。
以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。
自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。
试剂组成和配制：提取液：液体100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体3mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体3mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体3mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体 2.5mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂五：粉剂×1 瓶，4℃避光保存；临用前加入22mL 试剂六充分溶解待用，用不完的试剂4℃避光保存。
试剂六：液体25mL×1 瓶，4℃保存。
试剂七：液体3mL×1 瓶，4℃保存。
试剂八：液体 2.5mL×1 瓶，4℃避光保存。
酶液提取：称取约0.1g 组织，加入1mL 蒸馏水，进行冰浴匀浆。
10000g 4℃离心10min，弃上清，留沉淀。
沉淀中加入1mL 提取液，混匀后90℃水浴2h，冷却至室温，10000g4℃离心10min，取上清待测。
测定操作表：1．甲醇生成量测定：试剂名称（μL）空白管测定管样本50提取液50试剂一25 25混匀，室温静置30min试剂二25 25试剂三20 20混匀，冰浴至紫色褪去，约需要15-30min试剂四20 20水60 60试剂五200 200混匀，60℃反应15min。
原果胶检测试剂盒(咔唑比色法)
原果胶(PP)检测试剂盒(咔唑比色法)简介：天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，是细胞壁的一种组成成分，它们伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，使植物组织细胞紧紧黏结在一起。
原果胶是不溶于水的物质，但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下，加水分解转变成水溶性果胶。
果胶(Pectin)又称多聚半乳糖醛酸，是由D-半乳糖醛酸以α-1,4糖苷键连接形成的直链状聚合物，本质上是一种线形的多糖聚合物，含有数百个脱水半乳糖醛酸残基。
原果胶是一种非水溶性的物质，在未成熟的果实或植物组织中果胶物质大多与纤维素结合以原果胶的形式存在，原果胶能使果实或其他植物组织坚硬、变脆。
Leagene 原果胶(PP)检测试剂盒(咔唑比色法)检测原理是果胶物质水解生成半乳糖醛酸，后者在硫酸溶液中咔唑进行缩合反应形成紫红色的化合物，该化合物呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比，该化合物颜色在反应内呈色最深，当反应液颜色最深时在波长处测定吸光度，通过与标准曲线比较，计算出样品中原果胶或可溶性果胶含量。
该试剂盒主要用于定量检测植物组织或果实中原果胶含量，亦可用于定量检测植物组织或果实中可溶性果胶含量，进而计算出总果胶含量(为原果胶含量与可溶性果胶含量之和)。
该25T试剂盒可以检测25-30左右个样本。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：编号名称TC212325TStorage试剂(A): 果胶标准(1mg/ml) 1ml 4℃避光试剂(B): SP Lysis buffer 2×500ml RT试剂(C): PP Lysis buffer 100ml RT使用说明书1份1、蒸馏水2、浓硫酸3、实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织4、研钵或匀浆器5、试管6、离心机7、水浴锅8、比色杯9、分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、可溶性及原果胶提取：①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品，置于研钵或匀浆器。
果胶酯酶(pectinesterase ,PE )试剂盒说明书
货号: QS2628 规格：20样果胶酯酶（pectinesterase，PE）试剂盒说明书电位滴定法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：果胶酯酶属果胶酶系，催化水解果胶中甲氧基生成果胶酸，从而增加果胶在水中的溶解度，广泛存在于高等植物和可以降解细胞壁的细菌和真菌中，起内源调控植物细胞壁上及细胞之间果胶含量的作用，在食品工业中具有及其重要的作用和开发前景。
测定原理：果胶酯酶催化水解果胶分子释放H+，是反应体系的的pH下降，用碱液保持体系的pH始终保持在7，通过碱消耗的量反映果胶酯酶的活性。
需自备的仪器和用品：天平、研钵、常温离心机、自动电位滴定仪。
试剂的组成和配制：提取液：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前每瓶加双蒸水100mL充分溶解。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加少量蒸馏水于50℃加热溶解，冷却后转入1L容量瓶，用蒸馏水定容。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加少量蒸馏水溶解，转入1L容量瓶，用蒸馏水定容。
样品处理：将组织样品捣碎，按照样品质量(g)和提取液体积(mL)为1: 10的比列（建议取约0.5g样品，加入5mL提取液）冰浴研磨，再于8000g、4℃离心15min，取上清液待测。
测定操作：1.试剂一于50℃保温10min，同时打开电位滴定仪，用蒸馏水清洗仪器。
2.用试剂二补液，补液结束后用取50mL试剂一，用试剂二滴定到pH为7。
3.加入待测样品5mL，将滴定延迟时间设为180s，用试剂二滴定至pH为7。
4.滴定结束后记录消耗的试剂二体积V（mL）和滴定至终点所需时间T（S）。
计算公式：酶活定义：每g组织每秒钟消耗NaOH的量定义为一个酶活单位。
PE活性（U/g 鲜重）= V/(T-180)×F/WV：滴定所消耗的NaOH的量，mL；T-180：反应时间，S；F：样品稀释倍数；W：样品质量，g注意事项：1.补液结束后检查输液管中是否有气泡，有气泡要补液清除气泡后再进行样品滴定。
果胶酯酶（PE）活性检测试剂盒说明书
果胶酯酶（PE ）活性检测试剂盒说明书NaOH 滴定法货号：BC2700规格：50T/48S 、100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称50T 规格100T 规格保存条件提取液粉剂×1瓶粉剂×2瓶室温保存试剂一粉剂×1瓶粉剂×1瓶室温保存试剂二液体1.5mL×1支液体3mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体10mL×1瓶液体20mL×1瓶2-8℃保存50T 溶液的配制：1、提取液：临用前加入100mL 蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂4℃避光可保存3个月；2、试剂一：临用前加入100mL 蒸馏水，磁力搅拌50℃加热溶解3小时左右至完全溶解，转移至250mL 容量瓶，蒸馏水定容至250mL ；用不完的试剂4℃可保存8周；（因试剂一较难配制，建议客户提前制备）3、试剂三工作液：临用前根据样本量取出部分试剂三，用蒸馏水稀释16倍得到试剂三工作液备用，现配现用，用不完的试剂4℃可保存1周；100T 溶液的配制：1、提取液：临用前取1瓶加入100 mL 蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂4℃避光可保存3个月；2、试剂一：临用前加入100mL 蒸馏水，磁力搅拌50℃加热溶解3小时左右至完全溶解，转移至500mL 容量瓶，蒸馏水定容至500mL；用不完的试剂4℃可保存8周；（因试剂一较难配制，建议客户提前制备）3、试剂三工作液：临用前根据样本量取出部分试剂三，用蒸馏水稀释16倍得到试剂三工作液备用，现配现用，用不完的试剂4℃可保存1周；产品说明：果胶酯酶（Pectinesterase ，PE ），又称果胶甲基酯酶、果胶氧化酶，广泛存在于植物及微生物中。
果胶是构成植物细胞壁的主要成分之一，而果胶酯酶催化果胶的甲氧酯水解产生果胶酸和甲醇，在植物果实成熟的细胞壁代谢过程中发挥着重要作用，在食品工业中具有极其重要的作用和开发前景。
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离子结合型果胶(ISP)含量试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
正式测定前取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分，主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸组成。
果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，是许多高等植物细胞壁中含量最丰富的多糖成分，其独特的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。
果胶间以Ca2+桥及其他离子键、氢键、糖苷键、酯键和苯环偶联的方式交联，通过不同的抽提方法可以提取各种形式的果胶，如水溶性果胶（WSP）、离子结合型果胶（ISP）和共价结合果胶（CSP）。
测定原理：
利用带有螯合剂的酸溶液提取离子结合型果胶（ISP），采用咔唑比色法测定果胶含量。
果胶水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应，生成物质在530 nm处有最大吸收峰。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、80％乙醇、丙酮、浓硫酸（不允许快递）、研钵和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体50mL× 1瓶，4℃保存。
试剂二：液体50mL× 1瓶，4℃保存。
试剂三：标准液1mL× 1支，4℃保存。
试剂四：液体5 mL× 1瓶，4℃保存；
样品的前处理：
1、细胞壁的提取：取约0.3g样本，加入1mL 80％乙醇，室温快速匀浆，95℃水浴20min，
冷却至室温，4000g 25℃离心10min，弃上清。
沉淀加入1.5mL80％乙醇和丙酮各洗一遍（涡旋振荡2min左右，4000g 25℃离心10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入1mL试剂一（去除淀粉）浸泡15小时，4000g 25℃离心10min，弃上清，将沉淀干燥，称重得细胞壁物质（CWM）。
2、ISP的提取：称取烘干的CWM 3mg，加入1mL试剂二，充分匀浆。
8000g 4℃离心10min，
取上清液待测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至530nm处，蒸馏水调零；试剂三和试剂四37℃预热10min以上；
别记为A1、A2、A3和A4。
若A大于2，需将待测样本用蒸馏水稀释（可稀释10倍或20
倍）。
空白管和标准管只要做一管，每个测定管需设一个对照管。
ISP含量计算：
ISP含量(mg /g 干重)= (C标准×V1) ×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2) ×稀释倍数
=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀释倍数
C标准：标准管浓度，0.05mg/mL；V1：加入样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，1mL；W：样本干重，g。
注意：最低检测限为50μg /g 干重。