食品微生物检测常用仪器
食品检测实验室仪器设备的配置
检测设备的配置近年来及品质问题越来越受到人们的关注.这里说的食品是广泛意义上的食品,包括初级农产品,如：粮谷、油料籽、蔬菜、水产品、畜禽产品、水果等,也包括加工后的食品,如：罐头、火腿肠、食用油、方便面、酱菜、调味品等.开展食品检测的实验室也越来越多.在这些实验室中由于性质不同,检测的项目不同,而对实验室筹建和发展过程中对仪器的购置和选型有着不同的要求.根据这些年工作经验和对各种实验室检查的体会,对食品检测实验室仪器设备的配置提出个人的一点粗浅建议,供有关人员参考.一、食品企业及商业第三方实验室1. 企业实验室企业实验室可根据生产的产品品种、检测项目的多少和生产规模的大小设置,实验室仪器设备的配置也可繁、可简.对于这样的实验室,仪器设备的配置能满足企业产品品质检测就行了.可分为两大项,一是检测产品的；二是检测产品的,这一类项目的检测相对难度大、投资高.1品质项目包括：水分、含盐量、含糖量、含量、脂肪含量、纤维含量、维生素含量、酸度等.对于这些项目的检测,如果经费有限,都可以采用化学法分析,只需配置最简单的烘箱、水浴、电炉、搅拌器、粉碎机、pH计等设备即可.如果经费充足或检验批次较多,对应的检测项目都有对应的专用仪器可供选购.此外,也有一些通用的仪器可供选购,如：紫外/可见分光光度计、近红外分析仪、自动滴定仪等.检测维生素A、E等有时还需配置荧光光度计.检测营养元素,如钙、锌、铁等,可购置原子吸收仪-火焰检测器.2卫生项目包括：微生物、添加剂、有害元素、农药残留、兽药残留、毒素等.对于一般食品企业,微生物检测实验室应该建.a微生物建微生物实验室要按照生物实验室规范要求进行布局.必要的设备有洁净台、培养箱、高压灭菌锅、电炉等,其它设备则根据具体检测项目配置.经费少可以买国产的,经费多可以考虑买进口的,两者的价钱相差很多.b添加剂和有害元素有一部分项目可以用化学法,如亚硝酸盐、二氧化硫、重金属含量、总砷等.但要想满足现在国标的食品卫生要求,应该购置气相色谱-氢火焰检测器、液相色谱-紫外/可见光检测器,这样一般的防腐剂苯甲酸、山梨酸等、甜味剂甜蜜素、糖精钠等、色素柠檬黄、胭脂红等都可以检测了.购置原子吸收仪-石墨炉检测器,可以分别检测铅、铬、镉、铜、镍等有害元素,还需要一台原子荧光仪,用来检测砷和汞等.c残留农药检测残留农药是不能少的.检测有机氯农药,需配电子俘获ECD检测器；检测有机磷农药,需配火焰光度FPD检测器或氮磷NPD检测器.现在检测的项目越来越多,为提高通用性,建议配置毛细管柱分流/不分流进样口,安装毛细管色谱柱.与传统填充柱色谱柱相比,毛细管柱分析项目多,分离度好,可以减少频繁的更换色谱柱,提高分析效率.食品加工企业生产的产品在出口时需检测的农残项目越来越多,为了把好生产原料和产品质量关,可以配置气相色谱-质谱仪.一般只需配置电子轰击EI源,如果有必要可再配一个负化学NCI源.是选择四极还是质谱,个人认为都可以,两种仪器各有优缺点.还是要看具体工作.d残留兽药若进行残留兽药的检测,项目不多且批次多,可以考虑配置酶联免疫仪,该仪器一次投入不大,操作简便,检测灵敏度高.采用ELISA也有一些缺点,一是试剂盒为长期的消耗品,若检测的批次少成本会较高,二是特异性不好,可能会有假阳性,三是如果在相对长的一段时间内检测项目较多,成本甚至比仪器分析还高.对于有一定规模的出口食品企业,为适应当前、、等发达国家检测限量要求,最好配置一台液相色谱-串联质谱仪.第一台仪器建议配置三重四极质谱仪,灵敏度高、重现性好.仪器不一定要追求高配置,够用就行,但灵敏度、稳定性、抗等性能要好.最好买用户较多的型号,有一个与自己检测项目相近的用户群,首先说明该型号仪器检测拟检的项目没有问题,其次也便于今后技术交流.2. 商业实验室商业实验室与企业实验室相比检测的商品和检测的项目都要比企业多,所以仪器设备的配置从门类和数量上都应比企业实验室更完善.仪器设备的配置不仅能满足当前检测的需要,还应适当超前,否则等客户找上门来被你推走了,再将客户找回来就困难了.1检测品质项目通常要考虑使用的标准或根据客户要求,配置相应的检测仪器和设备参照1. 企业实验室品质项目一段.由于不同商品和不同客户可对同一项目可能提出不同的检测标准或方法,对于这些项目的检测,若方法规定采用化学法分析,只需配置最简单的设备即可参照1. 企业实验室品质项目一段.如果经费充足或检验批次较多,对应的检测方法又有仪器法的,可配置相应的专用仪器,如：水分测定仪、凯氏定氮仪、快速脂肪测定仪、糖度计、粘度计、脂肪酸分析仪等.通用仪器也可参照企业实验室品质项目一段.如果有需要,像氨基酸分析仪这样的专用分析仪也可以配置. 2卫生项目检测的实验室配置参见“1. 企业实验室”相关段落.个人认为对于一个现代商业实验室液相色谱-串联质谱、气相色谱-质谱是不可少的,这是现在对禁用农兽药残出具阳性报告时指令和标准要求的条件.如果有规模、检测项目多,每类仪器还应配置多台套.这时要考虑仪器性能的互补,如：液相色谱-串联质谱一台配电喷雾电离源,一台配大气压化学电离源；气相色谱-质谱一台配电子轰击源,一台配负化学电离源.元素多、样品杂,还可以考虑配置等离子发射光谱-质谱仪、气相色谱-串联质谱仪等.如果要做形态分析,等离子发射光谱-质谱仪还应能与或气相色谱联用.二、行业实验室的行业实验室指政府法规实验室都隶属于不同行业行政领导机构,因此,多少都带有一点行政功效.近年政府非常重视食品安全工作,加大了投入,所以,实验室的硬件得到了较大的改善.现在一个较完善的行业实验室省市一级以上的,除了分析测试设备的门类和数量应等同或优于一般商业实验室外,为提高分析效率还可以在前处理设备配置方面更完善一些,如：微波消解包括微波萃取、自动固相萃取仪、凝胶色谱净化仪、溶剂加速萃取仪、高速冷冻离心机、高速均质机、氮吹仪等.这些前处理设备效率更高、自动化程度更高可利用晚上时间自动处理样品,并且会提高结果的重现性.随着我国的行政监管体系正在与国际发达国家接轨,我们的行业实验室越来越多的参加国际上一些权威机构的能力比对活动,检测方法和结果都按照国际通行做法执行.此外,为了适应食品安全检测发展,许多实验室开始开发新的分析方法.因此,行业实验室今后会配置更高端的分析仪器,如高分辨质谱仪等,使最终的检测结果更准确.。
微生物实验室要求
微生物检验实验室操作技术要求第一节实验室管理制度一、实验室管理制度1．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。
2．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。
3．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。
4．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。
5．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。
6．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告，造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。
二、仪器配备、管理使用制度1．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位pH计、高速离心机。
2．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。
3．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。
4．各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，待仔细检查后，方可离去。
5．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行登记。
第三讲食品检验实验室仪器设备管理
六、实验室管理评价
不符合检测和校正工作的控制
实验室应通过实施质量方针和目标，应用审核结果、数据分析、
纠正措施和预防措施组成的循环式管理评审模式来持续改进实
验室管理体系的有效性。
数据分析
五大基本 内容
调查原因 纠正措施的选择和实施
执行监控和附加审核
改进---预防措施
回顾
第一部分：实验室管理
1
实验室人员管理
2
实验室文件管理
3
实验室样品管理
第二部分：仪器管理
1
仪器管理概述
2
仪器管理流程
3 仪器仪表标识管理
4
实验室药品管理
5
实验室安全管理
6
实验室管理评价
4
仪器的日常管理
5
仪器校正与巡检
6 仪器检测能力分析与统计控制应用
一、仪器管理概述
仪器管理是为确保公司内检验、测量与测试仪器能被有效管理、 定期校正，防止因计量器具之失准而产生不合格品，并通过 对计量器具的正确使用和保养延长其寿命。
废弃药品：所有过期和废弃的药品需集
中放置，盘点数量后交专业回收站回收处理， 禁止随意丢弃。
药品定期整理盘存
药品管理要建立台账，记录每次使用时间、用量、使用人 和用途，并定期盘存。
实验室应每月进行一次安全检查。检查药品包装是否完好， 标签是否完整，并及时清理变质、过期药品。
分类整理放置
自配试验标签
第二节 实验管理 实验检测是企业内部产品质量监控的关键环节和 手段，包括过程控制和最终产品质量检测。
实验室是企业对外形象的展示窗口，提高企业的 信誉，增强市场对企业的信心。
先进的检测设备及技术、良好的整体环境、高素 质的检测人员，是缩短检验周期，提高企业效率， 保证产品质量的基础。
微生物制片显微观察及检测技术
革兰氏染色图解
革兰氏染色试剂
步骤1：用蒸馏水滴瓶滴一小滴蒸馏水于洁净的载玻片上
步骤2：用无菌操作法取少许培养物于蒸馏水滴上
步骤3：用接种环将培养物涂布成一薄层
步骤4：风干
步骤5：在酒精灯火焰外层尽快的来回通过3-4次固定
步骤6：结晶紫染色1分钟
步骤7：用蒸馏轻轻冲洗玻片
步骤8：革兰氏碘液染色1分钟，再用蒸馏水轻轻冲洗
低倍镜操作方法
1.两眼从侧面注视 低倍物镜对准通光孔，使用粗调焦螺旋将镜筒 自上而下的调节，避免物镜镜头接触到玻片而损坏镜头和压破 玻片。当物镜镜头与载物台的玻片相距2～3mm时停止； 2.左眼注视 （注意右眼应该同时睁着），并转动粗调焦螺旋，使 镜筒徐徐上升，直到看清物象为止； 3. 再用微调焦螺旋调至清晰。 注意：粗调调焦螺旋只用于上调载物台，如观察显微镜时 ，用粗调节器调节，有压碎载玻片、损坏物镜的危险。因此， 用细调焦螺旋调节视野使其更清晰
微生物检测技术介绍
检测技术的重要性
一、微生物检验技术介绍
微生物检测
传统筛选系统 免疫凝集/免疫沉淀实验 Mini VIDAS筛选系统 实时荧光定量PCR 革兰氏染色镜鉴 按照标准进行 传统的生化反应鉴定 API试剂条 菌鉴定国际金标准
微生物鉴定
半自动细菌鉴定仪 （ATB Expression）
(二)细菌的革兰氏染色步骤
涂片→干燥→固定→初染→水洗→媒染→水洗→脱色→水洗→复染→水洗 →干燥→观察
1 ．取培养物分别做涂片、干燥、固定，方法均与简单 染色的相同。 2．用草酸铵结晶紫染色1min后水洗。 3．加碘液媒染1min后水洗。 4 ．斜置载玻片，滴加 95 ％乙醇脱色，至流出的乙醇不 现紫色 为止，大约需时20~30s，随即水洗。 5．用蕃红染液复染1min，水洗。 6．用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下，用 低倍镜观察，发现目的物后用油镜观察，注意细菌细 胞的颜色。
食品检测仪器汇总
食品检测仪器汇总食品检测仪器是指用于分析、测试和监测食品中的营养成分、化学污染物、病原微生物和其他有害物质的仪器设备。
随着食品安全问题的日益突出，食品检测仪器的研发和应用也变得越来越重要。
本文将对常见的食品检测仪器进行汇总介绍。
1. 红外光谱仪（Infrared Spectroscopy）红外光谱仪是一种常用的食品检测仪器，它可以通过测量样品在红外光谱范围内的吸收光谱来判断样品的化学组成。
红外光谱仪主要用于分析食品中的营养成分如蛋白质、脂肪和碳水化合物的含量。
2. 气相色谱仪（Gas Chromatography）气相色谱仪是一种用来分析和测定食品中有机化合物的仪器。
气相色谱仪通过将样品中的化合物分离为不同的组分，然后采用不同的检测器来进行定性和定量分析。
气相色谱仪主要用于检测食品中的农药残留、有害化学物质和香料成分等。
3. 液相色谱仪（Liquid Chromatography）液相色谱仪是一种利用液相作为流动相的色谱仪器，通过不同的分离模式来分离和测定食品样品中的化学成分。
液相色谱仪可以用于检测食品中的有机化合物、营养成分和添加剂等。
4. 质谱仪（Mass Spectrometry）质谱仪是一种通过将样品中的分子分解为离子，然后通过测量离子质荷比来确定其化学结构和分子量的仪器。
质谱仪可以用于分析食品中的有机化合物、农药残留和添加剂等。
5. 核磁共振仪（Nuclear Magnetic Resonance）核磁共振仪是一种通过检测样品中的核磁共振信号来研究和分析样品的内部结构和组成的仪器。
核磁共振仪可以用于食品中的成分分析、食品鉴定和品质评价等。
6. 快速液相色谱仪（Fast Liquid Chromatography）快速液相色谱仪是一种高效的色谱分离技术，它采用高速流动相和高效分离柱，可以在短时间内分离和测定食品中的成分。
快速液相色谱仪可以用于检测食品中的食品添加剂、色素和有机污染物等。
7. 微生物检测仪器（Microbiological Testing）微生物检测仪器主要用于检测食品样品中的微生物污染情况，包括细菌、真菌和病毒等。
食品微生物检验试题
试题(一)一、根据培养基中的菌落判断是那些种类的微生物（20分，时间5分钟）准备平板培养的细菌、真菌菌落5个，现场说出属名，每答对一个得4分。
二、指出给定仪器的名称、用途（20分，时间5分钟）准备食品检验常用的仪器5个（如分光光度计、恒温培养箱、干燥箱、滴定管、显微镜等），每答对一个得4分。
三、操作酸碱滴定（20分，时间5分钟）分别操作酸碱滴定过程，不规范者酌情减分。
四、显微镜的使用技巧（20分，时间5分钟）观察一种微生物切片，能在限定时间内找到切片内容者得分，没找到者视显微镜的使用熟练程度酌情给分。
五、配制一种化学试剂（20分，时间5分钟）给定原药、配制浓度，在限定时间内配成并规范操作者得分。
需要检查的技能包括天平的使用、容量瓶的使用，浓度的换算等。
试题（二）一、判断题（每小题2分，共20分）1. 实验室的工作区域应与办公室区域明显分开。
（）2. 二级采样方案中有n、c和m值，n代表同一批次产品应采集的样品件数；c（）代表最大可允许超出m值的样品数；m代表微生物指标可接受水平的限量值。
3. 病原微生物分离鉴定工作可以在普通微生物检测实验室中进行。
（）4.在进行梯度稀释时，所吸取的1ml液体需沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中，并用同一支无菌吸管反复吹打使其混合均匀。
（）5.大肠菌群是指一群在36℃条件下培养48h 能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。
（）6.大肠菌群经LST肉汤初发酵试验后，等培养基变兰，且小倒管中有气泡，则需进行确证试验。
（）7.进行大肠菌群PetrifilmTM 测试片试验时，选取菌落数在30-300 之间。
（）8.菌落计数以菌落形成单位（CFU ）表示。
（）9.实验室布局应采用单方向工作流程，避免交叉污染。
（）10.MPN是指可能产气的数量。
（）二、选择题（每题3分，共30分）1.大肠菌群在结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA )上的典型菌落形态是（）。
食品检验工考试内容
食品检验工考试内容题目：食品检验中，用于测定食品中重金属含量的常用仪器是（）。
A. 高效液相色谱仪B. 原子吸收分光光度计C. 气相色谱仪D. 紫外可见分光光度计题目：在食品微生物检测中，下列哪项不是常见的致病菌？（）A. 大肠杆菌B. 乳酸菌C. 沙门氏菌D. 金黄色葡萄球菌题目：食品检验员在进行食品理化检验时，必须遵循的原则是（）。
A. 随意改变检验方法以提高效率B. 使用未经校准的仪器设备C. 确保试剂的纯度和稳定性D. 不记录实验数据，仅凭经验判断结果题目：关于食品中亚硝酸盐的检测，以下哪种方法不是常用的？（）A. 比色法B. 气相色谱法C. 原子吸收光谱法D. 离子色谱法题目：在食品检验中，用于测定食品中脂肪含量的常用方法是（）。
A. 凯氏定氮法B. 索氏提取法C. 高效液相色谱法D. 原子荧光光谱法题目：食品检验员在进行食品微生物检测时，以下哪项操作是正确的？（）A. 直接用手接触食品样品B. 使用未经消毒的仪器进行检测C. 穿戴一次性手套进行样品取样D. 在检验过程中吸烟或进食题目：关于食品中农药残留的检测，以下哪种说法是错误的？（）A. 农药残留检测是保障食品安全的重要环节B. 液相色谱-质谱联用技术是常用的检测方法之一C. 所有农药都可以通过一种通用的检测方法进行测定D. 检测前需对样品进行适当的前处理题目：在食品检验中，关于仪器的使用和维护，以下哪项描述是正确的？（）A. 仪器设备可以随意拆卸和改装B. 仪器设备应定期进行校准和维护C. 损坏的仪器设备可以继续使用，只要不影响检测结果D. 仪器设备的使用说明书不需要仔细阅读，可以凭经验操作。
食品微生物检验常用的仪器.
2、高压灭菌锅
• 用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样 器、纱布、衣物的灭菌。 • 种类：手提式、立式、卧式杀菌锅
不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器（电热）
全自动高压灭菌器
大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法
1. 2. 放干消毒锅内的剩余水，加入纯净水至最高水位； 放入物品，关上消毒锅门；冷凝阀开1圈；消毒钮顺时 针拨至“关”； 选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后；开启 电源； 当温度达到100℃左右时就可将消毒钮顺时针拨至 “消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止； 当消毒室温度达到所需温度时开始计时，到时间后关 闸。
2、含菌试管的清洗
• 高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干 或晾干备用。
3、含菌平皿的灭菌
（1）、底盖分开放，放入桶中，高压 灭菌； （2）、趁热倒去污物； （3）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干 备用。
4、含菌吸管的清洗
（1）、把含菌吸管投入3%的来苏尔液 内浸泡30min以上杀菌； （2）、用肥皂水洗涤一次； （3）、最后用清水冲洗干净即可。
角 式 和 外 摆 式转 角式、外摆式转子等 子
仪 器 结 构 性 能 速 率 不 能 严 格控 有消除空气和转子间摩 备有消除转子与空气摩擦热 和特点 制 ， 多 数 室 温下 擦热的制冷装置，速率 的真空和冷却系统，有更为 操作 和温度控制较准确、严 精确的温度和速度控制、监 格。 测系统、有保证转子正常运 转的传动和制动装置等。
3.
4. 5.
使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项
A：为避免烫伤，只有当温度降低到70℃以下时放 可小心的打开消毒锅门。 B：为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不 开消毒锅门，所以当消毒室温度低于70℃时就可 慢慢把门打开。 C：根据消毒物品选择排气方式： （1）.如有液体（营养液等）请选择慢排。 （2）.如只有废品等可选择快排。
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擦净。 (5)不得当烘箱使用。
4、水浴锅
（1）37 ℃和42 ℃水浴锅24小时工作； （2）其余水涡锅用后关掉电源； （3）水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水，
隔水式培养箱
❖ 隔水式培养箱数字 控温，不锈钢内胆， 俗称水夹套培养箱。 温度均匀，断电后仍 能保持较长时间恒温。
电热恒温培养箱
2、生化培养箱
3、二氧化碳培养箱
培养箱的配置和使用
配置：22（℃）、30（℃）、37（℃）培养箱各一个 使用注意事项： (1)箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速进
制，多数室温下 擦热的制冷装置，速率 的真空和冷却系统，有更为
操作
和温度控制较准确、严 精确的温度和速度控制、监
格。
测系统、有保证用
收 集 易沉 降 的大 收集微生物、细胞碎片、主要分离细胞器、病毒、核 颗 粒 （ 如 RBC、 大细胞器、硫酸铵沉淀 酸、蛋白质、多糖等甚至能 酵母细胞等） 物和免疫沉淀物等。但 分开分子大小相近的同位素
空气微生物检测仪
细胞/颗粒分析计数仪
细胞的总数、细胞的直径、平 均直径、细胞浓度等。仪器全 自动操作，避免人工操作的误 差，数据精确，省时省力。是 您作细胞研究的好助手，是研 究细胞的更高层次的选择
微粒子落塵计数器
适合CGMP药厂, 食品加工 厂, 医院手术防, 无尘无菌室 室Class100~100000 之等 级
高速离心机 25000
89000
超速离心机 可达75000以上
可达510000以上
分离形式
固液沉淀
固液沉淀分离
密度梯度区带分离或差速沉 降分离
转子
角 式 和外 摆 式转 角式、外摆式转子等 角式、外摆式、区带转子等 子
仪器结构性能 速率不能严格控 有消除空气和转子间摩 备有消除转子与空气摩擦热
和特点
数字显微镜
（二）、培养箱
1. 智能隔水恒温培养箱 2. 隔水培养箱 3. 电热培养箱 4. 生化培养箱
1、普通恒电热温恒温培培养箱养箱
卧式恒温振荡培养箱
智能培养箱
❖ 微电脑智能化双目控温 系统具有控温保护、准 确、可靠。工作温度任 意调节并具有偏差报警 功能，镜面不锈钢内胆， 外门内层用一层门，观 察箱内情况时不影响箱 内温度。9000系列隔水 式加热方式，具有温度 均匀且断电后仍能保持 较长时间恒温。
C：根据消毒物品选择排气方式： （1）.如有液体（营养液等）请选择慢排。 （2）.如只有废品等可选择快排。
手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法
（1）、关好排水阀门放入清水至标度为止。 （2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅
中，关上器盖。 （3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内的
空气，再关闭活门。 （4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度下
二、常用玻璃仪器及用具
（一）量器类
1、移液管
1ml，2ml，5ml，10ml，25ml
2、容量瓶
50ml，100ml，250ml，500ml，1000ml
3、量筒
容量（ml）10、25、50、10、25、500、 1000、2000
4、微量取样器
数字型可调移液器P型
固定体积移液器
（二）、其他常用玻璃器皿
❖ 种类：手提式、立式、卧式杀菌锅
不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器（电热）
全自动高压灭菌器
大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法
1. 放干消毒锅内的剩余水，加入纯净水至最高水位； 2. 放入物品，关上消毒锅门；冷凝阀开1圈；消毒钮顺时针
拨至“关”； 3. 选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后；开启电
（七）、普通冰箱冰柜
1、 取用冰箱冰柜内物品尽可能快，取 完后及时将有用物品放回原处；
2、 关冰柜门时应轻轻合上，同时将门 轻轻往外拉一下检查是否关好;
3、冰柜内的不要样品应及时清理。
自动细菌菌落测定分析仪
菌落计数器
1、可直接测读菌体本身在 快速自动菌数导电测定仪
培养液中造成的导电度变化， 或利用菌体在代谢过程中的 产物所造成的导电度变化， 快速测定样品中细菌含量数 目。 2、适用于各种食品，制药， 石化工厂的微生物品质管理， 取代传统方法将侦测时间由 3-5天减到几个小时。亦可 用于做样品的抗菌性试验。
一、常用仪器及其使用
❖ 显微镜 ❖ 冰箱 ❖ 超净工作台、杀菌锅 ❖ 离心机 ❖ 水浴锅、培养箱 ❖ 烘箱或干燥箱 ❖ 匀质器 ❖ 各种玻璃器材
（一）显微镜
普通显微镜的保养
1、观察完后，移去观察的载玻片标本。 2、用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，
再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭2—3次，最后再用擦 镜纸将二擦镜液苯擦去。 3、转动物镜转换器，放在低倍镜的位置。 4、将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动 器的位置，罩上防尘套。
保持所需的时间。
（5）、稍微打开一点排气活门，使锅内 蒸气缓慢排除。
（6）、当压力表指针降到零、锅内蒸气 完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。
（7）、最后将高压灭菌器内的剩余水排 出。
3、滤菌器
Nalgene 可反复用抽滤装置
MF75快速抽滤器
方便过滤1000ml容量的培养液、 缓冲液等，可直接保存和分装。 可高温灭菌。
干热灭菌:160 ~165℃烘箱中烤2h 湿热灭菌:121 ℃ 20min
思考题
1、在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注 意哪些问题?
2、在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注 意哪些问题?
3、如何正确使用超净台? 4、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭
菌? 5、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法 6、如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌?
联系，尽早排除故障。 7、学期开始做无菌试验一次，以保证净化台正常使
用。平时可根据情况，定期做无菌试验，以测定 净化台是否符合无菌要求。
（五）、离心机
❖离心机的类型： ❖普通离心机 ❖高速离心机 ❖超速离心机
类型
普通离心机
最 大 转 速 6000 (r/min)
最 大 RCF （ g ）6000
使用时请注意水位。
配置： 37 ℃、42 ℃、56 ℃各一个
（三）匀质器
匀浆机
无菌均质器
高速匀浆机
无菌均质器
该均质器广泛用于动物组织、生物样品、 食品、化妆品的均质处理，特别适合于 微生物检测样本的制备，具有均质柔和、 样品无污染、无损伤、不升温、不需灭 菌处理、不需洗刷器皿的特点，样本装 在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪 器接触，预防交叉污染。
1、培养皿
3.5cm,7cm，9cm，15cm
2、试管
各种试管的使用
❖13mmX100mm ：生化反应及凝集 反应
❖15mmX150mm ：斜面培养 ❖18mmX180mm：检样稀释
3、三角瓶
型 号
150ml，200ml， 250ml，500ml，1L，2L，3L
烧杯
容量（ml）： 30、50、100、150、250、400、 600、1000、2000、3000
不能有效沉淀病毒、小 标记物15N-DNA和未标记的 细胞器（如核糖体）、 DNA。 蛋白质等大分子。
台式高速冷冻离心机
差速沉降（沉淀）法：
密度梯度离心法：
转子
许多离心机可以配用不同大小的离心管，只需要改变转子或使用一个与不 同的吊桶/适配器相配的转子。
❖ 1．水平转子：盛样品的离心管放在吊桶内，以转子的加速度运转。水 平转子用于低速离心机，其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时，减速 过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。
（四）、超净工作台
三大类 型： 侧流式、直流式和外流式
垂直流超净工作台
水平单向流洁净工作台
超净台的使用和注意事项
1、使用前先打开紫外灯照射，紫外线照射时间40~60 分钟；
2、使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球 擦拭，请用含水棉布檫拭；
3、请保持超净台整洁，不要堆积杂物； 4、使用完毕，勿忘关闭煤气开关或酒精灯； 5、请做好使用记录。 6、如遇故障，除记录在册外，还应及时与有关人员
（3）、最后用清水冲洗干净即可。
5、载玻片及盖玻片的清洗
（1）将载玻片及盖玻片分别浸入5 %的来
苏尔液内浸泡过夜，取出水洗干净；
（2）盖片用软布擦干即可； （3）染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸
10min，再用肥皂水刷洗干净，最后用 95%的酒精浸泡片刻，晾干备用。
（三）、玻璃器材的灭菌
（1）清洗后烘干； （2）加塞包扎； （3）灭菌:
三、玻璃器皿的清洗和灭菌
(一)、新购的玻璃器皿 1、先用热肥皂水刷洗，流水冲净。 2、再浸泡于１～２％的盐酸中数小时，
最后用流水冲净。
(二)、用过的玻璃器皿
1、含油脂器材的清洗
（1）、单独高压灭菌； （2）、趁热倒去污物； （3）、倒放在铺有吸水纸的篮子上，置
100 ℃烘箱中烤0.5h; （4）、再用5%的碳酸氢钠水煮两次，再
❖干热灭菌器 ❖湿热灭菌器
1、电烘箱（干燥箱）
用途： 用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。
玻璃器皿等物的灭菌，温度160~165℃， 灭菌 2小时。
玻璃器材的干热灭菌方法
(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸 包好，或装入特制的铁筒中。
(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留 有一定的空隙以便流通空气。
用肥皂水刷洗干净。
2、含菌试管的清洗
❖ 高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干 或晾干备用。
3、含菌平皿的灭菌